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ACTUALIDADES EN EL MANEJO DE LOS LIQUIDOS CORPORALES M en C Carmen Melchor Díaz TOLUCA MEXICO NOVIEMBRE 2016

Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

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Page 1: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

ACTUALIDADES EN EL MANEJO DE LOS LIQUIDOS CORPORALES

M en C Carmen Melchor Díaz

TOLUCA MEXICO NOVIEMBRE 2016

Page 2: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

GENERALIDADES

• Todos estamos familiarizados con el uso de sangre y orina como muestras clínicas que permiten hacer diagnóstico de enfermedades.

• Los líquidos corporales nos pueden decir mucho mas acerca de un paciente, sobre la presencia o ausencia de enfermedad, su severidad o su pronóstico.

• Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI. C49-A . April 2007

Page 3: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

GENERALIDADES

• Todos ellos son ultrafiltrados del plasma y que se distribuyen a través del cuerpo por transporte activo.

• Estos líquidos pueden contener biomarcadores que no se encuentran en sangre o que se encuentran en diferentes concentraciones.

• Estos líquidos se presentan en la población sana y se elevan en estado de enfermedad.

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI. C49-A . April 2007

Page 4: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

ESTUDIO INTEGRAL DE LOS LIQUIDOS

CORPORALES

• FISIOLOGIA DE LOS LIQUIDOS

• ASPECTOS FISICOS

• ASPECTOS MICROBIOLOGICOS

• ASPECTOS BIOQUIMICOS

• ASPECTOS CITOLOGICOS

• HALLAZGOS EN LOS LIQUIDOS

• VERIFICACION Y REPORTE DE RESULTADOS

Page 5: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MUESTRA ESTERIL

MICROBIOLOGIA CARACTERISTICAS FISICAS HEMATOLOGIA

INACTIVACION CUENTA CELULAR

COAGLUTINACION (L.C.R.)

SIEMBRA DIRECTA

CENTRIFUGACION CENTRIFUGACION

SEDIMENTO SOBRENADANTE SOBRENADANTE SEDIMENTO

SIEMBRA PRUEBAS QUIMICAS PRUEBAS INMUNOLOGICAS CUENTA DIFERENCIAL

•GELOSA SANGRE

•GELOSA CHOCOLATE

•E.M.B.

•Mc CONKEY

•CALDO TIOGLICOLATO

•TINTA CHINA

•GRAM

•BAAR

OBSERVAR CRITERIOS DE MALIGNIDAD

BUSQUEDA DE BLASTOS

BUSQUEDA DE AMIBAS

ESTUDIO INTEGRAL DE UN LIQUIDO CORPORAL

Page 6: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

OBJETIVOS DEL LABORATORIO

• Conocer el origen de los líquidos • Volumen (Espacio virtual, cantidad) • Aspecto • Componentes bioquímicos y celulares

• Conocer las condicionantes de sus patologías • Relaciones anatómicas • Comunicación vascular con otras estructuras • Biología celular • Definir los criterios de oportunidad y adecuación de la

muestra • Sitios y tiempos de obtención • Volúmenes posibles de obtención • Viabilidad de la muestra.

Deisenhammer F, Bartos A, Egg R, Gilhus NE, Giovannoni G, Rauer S, Sellebjerg F, EFNS Task Force. Guidelines on routine cerebrospinal fluid analysis. Report from an EFNS task force. Eur J Neurol 2006 Sep;13(9):913-22.

Page 7: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

El agua corporal se mantiene constante

La variación intersexual e interindividual es función inversa de la cantidad de tejido graso

LÍQUIDO EXTRACELULAR

Page 8: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

COMPARTIMIENTOS DE LOS LÍQUIDOS CORPORALES

LÍQUIDO INTRACELULAR

REPRESENTA DEL 30

AL 40% DEL PESO

CORPORAL

Con una gran variedad en la

composición y volumen entre

las diferentes células. Algunas

moléculas pueden servir de

marcadores

Page 9: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

COMPARTIMIENTOS DE LOS LÍQUIDOS CORPORALES

LÍQUIDO EXTRACELULAR

INTERSTICIAL

TRANSCELULAR

PLASMA: 4.5% DEL PESO

CORPORAL

LINFA: 2% DEL PESO CORPORAL

INTERSTICIAL: 16% DEL PESO

CORPORAL

Page 10: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

LÍQUIDO TRANSCELULAR

• En este compartimento la separación con el plasma se da por el endotelio y un tejido epitelial (mesotelio)

Ma

triz

su

nen

do

telia

l-su

bm

eso

telia

l (I

nte

rsti

cio

)

mesotelio

endotelio

Page 11: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MEMBRANAS

• Consisten de un epitelio de cobertura con tejido conectivo laxo que une a tejidos subyacentes

• Por ejemplo: membrana cutánea, membranas mucosas, MEMBRANA SINOVIAL y MEMBRANAS SEROSAS

Membrana basal

Superficie apical

Cemento intercelular

Filamentos intermedios

TEJIDO CONECTIVO

MEMBRANA

EPITELIO

Page 12: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MEMBRANAS SEROSAS

• Recubren las cavidades ventrales del cuerpo.

• Una capa VISCERAL envuelve a los órganos dentro de la cavidad.

• La capa parietal tapiza las paredes de la cavidad

• Secretan en pequeña cantidad un líquido seroso lubricante

Page 13: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MESOTELIO

• La capa única de células planas o cuboideas que forma la membrana serosa se conoce como MESOTELIO

• Estas células tienen un núcleo oval o redondo de cromatina homogéneamente dispersa

Page 14: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Objetivo de un análisis de laboratorio Clínico

para el Estudio de los líquidos

o Evaluar el estado fisiopatológico de un paciente a fin de

contribuir con el diagnóstico o controlar el tratamiento.

o Para que un análisis tenga valor en la toma de decisiones clínicas

el resultado debe tener un error total lo suficientemente pequeño

para poder reflejar el estado clínico que se evalúa.

W.G. Miller, capitulo 10, Henry’s Diagnosis and Manegement of Laboratory Methods, 22ª Edición

Page 15: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Pasos del proceso de análisis

Preanalítico: (Selección del análisis correcto,, identificación correcta

del paciente, recolección de las muestras apropiadas, rotulación,

transporte, manipulación de las muestras, procesamiento)

Analítico (Preparación de muestras, Instrumento y método de análisis y

consentimientos teóricos y prácticos especialización del personal, solución

de problemas, resultados de los análisis e informes)

Post-analítico (Formato de presentación de informes, respuestas a

resultados y medidas tomadas, resultados que incluyen al usuario final

indicado, estadísticas, valores críticos)

Page 16: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

El médico evalúa al

paciente y solicita la

prueba de

laboratorio Médico emite un

diagnóstico

El lab recibe

la orden

Toma de

muestra

Transporte de la

muestra

Procesa la

muestra

Se analiza la

muestra

Reporta el

resultado

Médico

interpreta el

resultado

Los resultados de calidad, requieren de una serie de «correcciones» a través

del ciclo entero de trabajo, y empieza con la solicitud de la prueba

Page 17: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

PROCESO MEDICO

IDENTIFICACION VALORACION * PUNCION OBTENCION DE MUESTRA *TRANSPORTE DE MUESTRA ENTREGA DE MUESTRA AL LABORATORIO

M e

n C

Carm

en

Me

lcho

r D

íaz

PACIENTE

Page 18: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA CALIDAD

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA

MANEJO

TRANSPORTE

RECEPCIÓN DE LA MUESTRA

PROCESAMIENTO

DE

LA MUESTRA

RESULTADOS

REPORTES

INTERPRETACIÓN

MÉDICO

PACIENTE

SOLICITUDES

PREPARACIÓN DEL PACIENTE

FACTORES PRE-ANALITICOS

FACTORES ANALITICOS

FACTORES POST-ANALITICOS

(Errores 45-71%)

(Errores 13-18%)

(Errores 11– 45%)

Mario Plebani. Errors in clinical laboratories or errors in

laboratory medicine? Clin Chem Lab Med 2006;44(6):750–759

Page 19: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

VARIABLES PREANALITICAS (pre examen)

Ordenes de examen equivocadas.

Recolección de la muestra.

Falta de ordenes de laboratorio especificas para líquidos corporales.

Muestras para estudios microbiológicos contaminadas.

Muestra hemolizadas y coaguladas.

Recipientes adecuados

Tubos o jeringas de plástico causan adherencia celular

Tubos de propileno son los recomendables

Page 20: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL

SUBDIRECCION GENERAL MÉDICA

FECHA DE ESTA SOLICITUD

FECHA DE PROXIMA CONSULTA

PACIENTE EXTERNO

CAMA N°

HACER EXAMENES EL DIA

PRESENTARSE EN EL LABORATORIO A LAS HRS

MEDICO TRATANTE

DIAGNOSTICO DE PRESUNCION O DATOS CLINICOS

ESTUDIO INTEGRAL DE

LIQUIDO________________________________________________________

COLOR ___________________________ ASPECTO _________________________ COAGULABILIDAD__________________ SEDIMENTO_______________________ SOBRENADANTE____________________ Ph_______________________________ GLUCOSA _________________________ PROTEINAS______________________ LDH___________________________ AMILASA_________________________ COLESTEROL _____________________ ACIDO URICO______________________ CRISTALES________________________ SUERO:___________________________ GLUCOSA________________________ PROTEINAS________________________ LDH______________________________ COLESTEROL_______________________

REL. PROT LIQ/PROT SUERO GRAM

TINTA CHINA

REL PROT LDH/PROT SUERO COAGLUTINACION

BAAR

CELULAS _____________mm3

CULTIVO:

BACTERIAS

ERITROCITOS__________ mm3 CRENOCITOS__________%

HONGOS

MICOBACTERIAS

CUENTA DIFERENCIAL OTRAS:

ANORMALIDADES CELULARES

SECCION DE URGENCIAS “LIQUIDOS CORPORALES “ QUIMICO RESPONSABLE _____________

NOBRE DEL PACIENTE

NSS

NOMBRE Y FIRMA DEL MEDICO

FORMATOS O SOLICITUDES

Page 21: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

DATOS QUE DEBE LLEVAR LA REQUISICIÓN Y ETIQUETA DEL ESPÉCIMEN

• Nombre del paciente • Edad y sexo del paciente • Número de afiliación que tiene en el hospital,

lugar donde localizarlo o dirección • Nombre del médico solicitante • Lugar de donde fue tomada la muestra • Fecha y hora de recolección de la muestra • y procedimiento requerido

Page 22: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Un resultado de «calidad» requiere de:

• Solicitud correcta

• Paciente correcto

• Tiempo Correcto para la toma de la muestra

• Muestreo correcto y procesamiento correcto

• Resultado correcto Analítico

• Resultado correctamente reportado

• Correcta interpretación clínica Post-analítico

• Permite una correcta respuesta al paciente

• Cuando «lo incorrecto» reemplaza «lo correcto»

• La Calidad esta comprometida

Pre-Analítico

Page 23: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

ARTROCENTESIS PUNCION LUMBAR

AMNIOCENTESIS TORACOCENTESIS

PARACENTESIS

PERICARDIOCENTESIS

TOMA DE MUESTRAS

Page 24: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

RECOLECCION DE MUESTRAS DE LOS LIQUIDOS

CORPORALES

Los procedimientos para la toma de muestras de los

Líquidos Corporales puede afectar al reporte de

Resultados .

Es por esto que se recomienda que los procedimientos

Se estandaricen para que los errores se disminuyan o se

eliminen durante la recolección

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI.

C49-A . April 2007

Page 25: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

CONTENEDORES ADECUADOS

El tipo de contenedores tubos

o frascos que se utilizan para

recolectar los líquidos pueden

afectar de manera directa los

resultados.

El material de plástico puede

causar adherencia celular dando

como resultado: cuentas celulares

así como diferenciales erróneas.

Por lo que es recomendable utilizar

tubos de poliestiereno polipropileno.

En el caso de la muestras donde

Se soliciten estudios microbiológicos

Los recipientes deberán ser estériles.

Page 26: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

VARIABLES PREANALITICAS

Tipo de anticoagulante:

Usar anticoagulante (que no se requiere para el LCR) puede

afectar la cuenta tanto de células blancas como de eritrocitos

Usar Anticoagulante (líquidos serosos) no adecuado, como en

el líquido sinovial puede llegar a introduce artefactos y

confundir con elementos celulares.

EDTA puede utilizarse para llevar a cabo la cuenta celular

HEPARINA: para determinación de proteínas, LDH, glucosa.

SPS: (polianetol-Sulfanato de Sodio) o cualquier otro

anticoagulante que no tenga efecto bactericida o

bacteriostático) Para estudios bacteriológicos.

Page 27: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

VARIABLES PREANALITICAS

Transporte y manejo de la muestra:

Los líquidos corporales deben ser transportados al laboratorio a

temperatura ambiente inmediatamente después de recolectados.

Para estudios microbiológicos NO DEBE REFRIGERARSE. La

mayoría de los microorganismos son sensibles a los cambios de

temperatura.

Temperatura y tiempo de transporte que mantenga la integridad de

la muestra.(la degeneración celular empieza en la primera hora

después de tomadas las muestras).

la degradación significativa de neutrófilos ocurre en las dos

primeras horas (25 %)

Page 28: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio
Page 29: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

LOCALIZACION ANATOMICA DE LOS SITIOS DE DONDE

SON TOMADAS LAS MUESTRAS DE LOS LIQUIDOS CORPORALES

CAVIDAD PERICARDICA

CAVIDAD

PLEURAL

CAVIDAD PERITONEAL

CAVIDAD VENTRICULAR

CAVIDAD ARTICULAR

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI.

C49-A . April 2007

Page 30: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Objetivos del Control de Calidad

El producto del laboratorio clínico es un resultado numérico

Los médicos utilizan este resultado para diagnosticar, evaluar y/o

Monitorear el estado del paciente

El objetivo del laboratorio es generar un resultado confiable de alta

Precisión y exactitud

Objetivos del Control de Calidad

Requisito de las Normas Oficiales (Guías

Internacionales)

Generar RESULTADOS CONFIABLES

Exactos y precisos

Detectar y corregir errores/problemas

Evitar informes de resultados erróneos

Page 31: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

GUÍA PARA EL ANÁLISIS RUTINARIO DEL LCR

PRINCIPALES RECOMENDACIONES:

Debe ser analizado en la primera hora después de su

recolección

Un volumen de 12 mL debe ser alicuotado en tres o cuatro

tubos estériles, antes de que se sedimente la muestra.

En ciertos casos, como la búsqueda de M. tuberculosis,

hongos y parásitos se requieren 10 a 15 mL de muestra

Permite almacenamiento breve a 4-8°C o en otro caso a -

20°C

La muestra almacenada sólo se usará para examen de

componentes proteicos o de RNA

Deisenhammer F, Bartos A, Egg R, Gilhus NE, Giovannoni G, Rauer S, Sellebjerg F, EFNS

Task Force. Guidelines on routine cerebrospinal fluid analysis. Report from an EFNS task

force. Eur J Neurol 2006 Sep;13(9):913-22.

Page 32: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

GUÍA PARA EL ANÁLISIS RUTINARIO DEL LCR

PRINCIPALES RECOMENDACIONES:

•Para la Esclerosis múltiple lo recomendable es

detectar bandas oligoclonales de IgG

•En otras enfermedades con componente

inflamatorio se determinará la síntesis de IgA e IgM

con fórmulas no lineares

Deisenhammer F, Bartos A, Egg R, Gilhus NE, Giovannoni G, Rauer S, Sellebjerg F,

EFNS Task Force. Guidelines on routine cerebrospinal fluid analysis. Report from

an EFNS task force. Eur J Neurol 2006 Sep;13(9):913-22.

Page 33: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

GUÍAS PARA EL ANÁLISIS BIOQUÍMICO DE LÍQUIDOS CORPORALES

• Valores de referencia y uso razones (radios o cocientes)

• Matriz para el ensayo

• Control de calidad

• Validación

• Metodologías para medir masa absoluta

Deisenhammer F, Bartos A, Egg R, Gilhus NE, Giovannoni G, Rauer S, Sellebjerg F, EFNS Task Force. Guidelines on routine cerebrospinal fluid analysis. Report from an EFNS task force. Eur J Neurol 2006 Sep;13(9):913-22.

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI. C49-A . April 2007

Page 34: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

ENSAYOS BIOQUÍMICOS EN LCR

• PROTEÍNA • GLUCOSA • ESPECIALES:

• Índice de IgG • Lactato • Análisis de Xantocromía • Bandas oligoclonales • Proteína básica de mielina • Péptido amiloide b 42 y Proteína Tau • Otros neurotransmisores

• ACBI Biochemistry of the body fluids Alan Balfe,Stan Barry 2009

Page 35: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

1. Alteraciones de Presión hidrostática (falla

cardiovascular) Trasudado

2. Alteraciones de Presión coloidosmótica

Trasudado

3. Alteraciones por daño de membrana

endotelial

Exudado

CAUSAS DE LOS DERRAMES EN

COMPARTIMENTOS

Page 36: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

EXUDADO

Exceso de líquido (> 0,2-0,3 mL/Kg) formado

por la difusión de plasma a través de endotelio y

mesotelio dañados (inflamación)

CARACTERÍSTICAS:

Proteína pleural/proteína sérica > 0,5

DHL pleural/DHL sérica >0,6

DHL > 2/3 (60%) del límite superior de DHL sérica

Proteína líquido pleural >2.9 g/dL

Colesterol pleural > 45 mg/dL

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI.

C49-A . April 2007 .

Page 37: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

CRITERIOS DE LIGHT

Exudado

Cociente de proteína >

0.5

Cociente de DHL > 0.6

DHL del líquido > en

2/3 que el límite

superior de referencia

En casos de

Insuficiencia cardiaca,

puede ser necesario

medir colesterol para

definir un exudado (1.6

mmol/L)

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline. CLSI.

C49-A . April 2007 .

Page 38: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS

Examen químico

Validar método ( MR, TRAZABILIDAD DE

PATRONES)

Identificar especificaciones de calidad para

cada examen

Evaluar estadísticamente el desempeño de

cada examen en el laboratorio

Especificaciones de calidad (incertidumbre en

la magnitud medida)

Utilidad clínica específica

Utilidad clínica general

Utilidad por consenso

Analysis of body fluids in Clinical Chemistry : Approved Guideline.

CLSI. C49-A . April 2007 .

Page 39: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio
Page 40: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

VALORACION CUANTITATIVA

Contar por microscopia de luz usando el

colorante

Azul de Unna . (colorante supra vital que

mejora el

Reconocimiento de las células).

Para realizar la cuenta celular se utilizan:

Cámara de Neubauer

Cámara de Fush Rosenthal

CLSI. Body Fluid Analysis for Cellular

Composition; Proposed Guideline. H56-P. August 2005

Page 41: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

CUENTA CELULAR

Cámara de Neubauer Cámara de Fush-Rosenthal

CLSI. Body Fluid Analysis for Cellular

Composition; Proposed Guideline. H56-P. August 2005

Page 42: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Usando el objetivo de baja resolución

(10X)

ajustar para ver distribución celular.

Ajustar a objetivo de 40X y llevar a cabo

La cuenta celular..

Si hay un estimado de 200 células

presentes en los 9 cuadros, contar todos

los cuadros.

Si hay mas de 200 células en los 9

cuadros contar los 4 cuadros de las

esquinas.

Si hay mas de 200 células en uno de los

cuadros contar los 5 cuadros del centro.

Cuenta celular

CLSI. Body Fluid Analysis for Cellular

Composition; Proposed Guideline. H56-P. August 2005

Page 43: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

CUENTA CELULAR

REPORTE DE CUENTA CELULAR

Numero de células x mm3

Numero de eritrocitos x mm3

% de crenocitos

Nº de células/mm3 = Nº cel contadas X inverso de la dilución

Nº cuadros contados X vol. del cuadro

Page 44: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

CUENTA CELULAR

LIMITES DE CUENTA

Liquido cefalorraquídeo > 10 células

Líquidos serosos > 100 células

Liquido de diálisis > 100 células

Liquido sinovial > 200 células

Si se superan los limites de cuenta

Se realiza Cuenta diferencial

CLSI. Body Fluid Analysis for Cellular

Composition; Proposed Guideline. H56-P. August 2005

Page 45: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

INFECCION POR

BACTERIAS

HONGOS

VIRUS

MICOBACTERIAS

PARASITOS

TOXOPLASMA

AVL

RECHAZO A

DERIVACIONES

INFILTRACION DE

LEUCEMIAS

Page 46: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

CELULAS RA

(AR)

CELULAS LUPUS

ERITEMATOSO

IRRITACION PLEURAS

IRRITACION DE

VELLOSIDADES

ARACNOIDEAS

CANCER LOCALIZADO

METASTASIS

Page 47: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS

EXAMEN CITOLÓGICO Control de tinciones

Revisión por un experto de las laminillas

informadas

Discusión intralaboratorio de las laminillas examinadas

Capacitación. Pruebas de aptitud

Análisis de imagen

Page 48: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio
Page 49: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MANEJO BACTERIOLOGICO DE

FLUIDOS CORPORALES

La identificación del agente causal

de la infección.

Lograr un tratamiento rápido y

preciso que lleve al manejo

adecuado del paciente

Page 50: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

TINCION DE GRAM

Informe inmediato

LIQUIDO

CEFALORRAQUIDEO

Frasco o tubo estéril

Centrifugar muestra

(2.500 rev x 10 min)

36°C

Reincubar

Agar C. Negativo

Positivo 18 – 24 h

Negativo**

Positivo

36°C

48 h

Pruebas bioquímicas

Antibiograma

Pruebas bioquímicas

Antibiograma

Sedimento

CULTIVO AEROBICO

Presencia de

bacterias

Agar chocolate*

Agar sangre

Caldo de Tioglicolato

Inactivaciòn Prueba de

coaglutinaciòn

Clinical Microbiology proceddures handbook, ASM, Washington D.C. 2010

Page 51: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

PROCESAMIENTO DE LOS LIQUIDOS CORPORALES ESTERILES

Recolección de la muestra

Concentración

Hacer Frotis para Tinción Sembrar en medios de cultivo

De Gram primarios (Sol. y Líq.)

Condiciones Aerobias Incubación Condiciones Anaerobias

35 ◦C, CO2 35 ◦C, 48 hrs

60-80% humedad

Examinar placas Examinar placas

Crecimiento No crecimiento

No Crecimiento Crecimiento

Checar aerobiosis Reincubar

Anaerobicamente

35C, 24 hrs

Reincubar Aerobios Anaerobios Crec. No Crec

Tinción Gram

Beta Lactamasas Reporte

Final

Reexaminación de Placas Identificación y

Diariamente durante 4 días PSA Identificación

Re-examinar Caldos durante

4 días

REPORTE FINAL

Clinical Microbiology proceddures handbook, ASM,

Washington D.C. 2010

Page 52: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

M e

n C

Carm

en

Me

lcho

r D

íaz

ETAPA PRE-EXAMEN

Quién recolecta la muestra:

El médico.

Volumen de la muestra:

1-5 mL es adecuado (un mayor volumen puede

dar mejores resultados)

Tiempo de procesamiento:

Los líquidos deben ser tratados como las muestras

de LCR “deben procesarse inmediatamente después

de su llegada al laboratorio.

Almacenamiento:

Mantener la muestra a Temperatura ambiente

(NO REFRIGERAR)

Page 53: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

M e

n C

Carm

en

Me

lcho

r D

íaz

ETAPA DE EXAMEN

El liquido debe ser concentrado por centrifugación, y

el sedimento se debe sembrar en medios enriquecidos

como son: Agar sangre, Agar chocolate, Agar de Maconkey

y caldo de tioglicolato.

Todos los líquidos se deben procesar para hacer una examinación

microscópica directa (Tinción de Gram). En general si un microorganismo

es capaz de observarse en objetivo de inmersión. Esto quiere decir

que al menos hay 10 5 organismos por mL.

Si se sospecha de la presencia de hongos todas la muestras deben observarse

preparando

una observación directa en fresco con KOH al 10%.

Para la búsqueda de M. tuberculosis una tinción de Alcohol Acido.

Page 54: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

M e

n C

Carm

en

Me

lcho

r D

íaz

ETAPA POST EXAMEN

Factores que interfieren en los resultados:

- Pacientes con terapia antimicrobiana

- Recepción inapropiada de las muestras

Reporte de resultado:

- Resultados urgentes:

- Tinción de Gram, observación con KOH y Tinción BAAR.

- Resultados Finales:

- Reporte del patógeno aislado con sus pruebas de susceptibilidad

- Antimicrobiana.

Tiempos de Respuesta:

- Tinción de Gram y observación en fresco deben estar disponibles

- 1 hora después de llegada la muestra al laboratorio.

- El aislamiento del posible patógeno de 2-4 días.

- Cultivos negativos deben reportarse 2-3 días después de recibida

- La muestra

Page 55: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS

EXAMEN BACTERIOLÓGICO

◦ Control de tinción Gram y otras

◦ Cultivo y análisis bioquímicos de cepas bacterianas tipo ATCC

◦ Experimentos de control de esterilidad para materiales y

reactivos

Page 56: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio
Page 57: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD EN

EL EXAMEN DE LÍQUIDOS

Formato de informe • Identificación de paciente, muestra y

médico o servicio

• Descripción de muestra procesada • Informes preliminares

• Lenguaje científico sin ambigüedades

• Exámenes efectuados

• Rangos de referencia

• Metodologías

• Profesional ejecutante y responsable

• Notas de referencia educativa o

comentarios

Page 58: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio
Page 59: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Este programa surge de la necesidad de mejora constante y

ascendente de la ejecución analítica en el laboratorio clínico.

PEEC PARA LIQUIDOS CORPORALES

Desde hace aproximadamente 20 años el grupo de expertos dio inicio

con una serie de cursos sobre el manejo de líquidos corporales en el

laboratorio clínico. Durante este tiempo se identificaron, gracias a la

participación de los alumnos, aquellos enfoques necesarios para

examinar líquidos corporales en la práctica clínica

De esta manera es cómo surge la inquietud, de iniciar un pequeño

programa de comparación inter laboratorios, donde se invitó a

participar a 5 laboratorios, dentro de los cuales se incluyen desde

grandes Centros Médicos hasta Unidades de 2° Nivel.

Page 60: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

HOJA DE ENVIO DE MUESTRAS DEL PROGRAMA COMPARACION

INTERLABORATORIOS PARA LIQUIDOS CORPORALES

A continuación estamos enviando a Ud.(s) el formato de registro para la captura de datos del

PROGAMA DE COMPARACION INTERLABORATORIOS DE LA CUENTA CELULAR DE LOS

LIQUIDOS CORPORALES. Así como el algoritmo de trabajo y la formula general para el conteo de

células. (SI NO CUENTA CON COLORANTE AZUL DE UNNA, UTILIZAR EL QUE SE ANEXA

JUNTO CON LA MUESTRA, MEZCLAR MUY BIEN ANTES DE UTILIZARLO)

Estamos incluyendo junto con el primer envió la calendarización de envió de las muestras, así

como la fecha límite de reportes y la entrega de resultados que se podrán enviar vía correo

electrónico a la siguiente dirección: [email protected]

ALGORITMO DE TRABAJO PARA LLEVAR A CABO LA CUENTA CELULAR

Se envía una suspensión de células y se deben realizar entre 30 y 40 inversiones del frasco para

resuspender adecuadamente

Colocar 10µl de colorante Azul de UNNA en un tubo,

de 12X75 más 100µl de la suspensión de células (dilución 10:11)

llenar adecuadamente la cámara de Neu Bauer (ó Fush Rosenthal)

de la muestra con el colorante de UNNA, (dejar reposar 1 minuto aprox.) Leer a 40X

Calcular el número de células/ mmᴈ, aplicando la formula general:

No .cel

𝑚𝑚 3 =𝑛o.cel contadas X inverso de la dilucion

𝑛𝑜 .𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑜𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑋 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑜 * ver ejemplo

Reportar Células/𝑚𝑚3

*ejemplo: No .cel

𝑚𝑚 3 =15 X

11

10

9 𝑋 0.1 𝑚𝑚 3 = (15 )(1.1) = 18 cel./𝑚𝑚3

0.9

Page 61: Manejo de los líquidos Corporales por el Laboratorio

Lab Central

# de envío 2 CLAVE DE LABORATORIO EAHDK7 Fecha de envío 26/02/2015

Programa LÍQUIDOS CORPORALES

Tipo de

suscripción

RESULTADO RESULTADOS ESTADÍSTICOS DEL GRUPO PAR Criterio de evaluación: COMPARACIÓN

CON GRUPO EXPERTO

218 n Mediana Desv std IDE Prom

Ponderado

de expertos

Error

absoluto

Error

relativo

6 263.5 14.8 -3.1 -46 82.6

264

Coef de Variación %: 5.6

GRUPO DE EXPERTOS:

QFB ISAIAS SANCHEZ GONZALEZ

QBP MIGUEL ANGEL GONZALEZ OLVERA

DR RAFAEL E. PAREDES GARCIA

M en C CARMEN MELCHOR DÍAZ

Cuauhtémoc 40, Col Sn Javier, Centro Histórico de Tlalnepantla de Baz, México. Código postal 54030.Teléfono 5378-5196

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