ESCUELA AGRICOLA PANAMERICANA“EL ZAMORANO”

CENTRO DE CONTROL BIOLOGICO PARA

CENTROAMERICA

Manual para la producción de:

Spodoptera frugiperda, Telenomus remus

Virus de la Polihedrosis Nuclear (VPN)

TRICHOZAM, BAZAM y VERZAM

Honduras, 2005

1. CONTROL BIOLOGICO

El control de plagas con productos químicos es cada vez más complicado. La exigencia por los consumidores en la reducción de la aplicación de estos productos es cada vez más notable. Los productos agroquímicos no siempre dan buenos resultados, por lo que, se presta hoy día, mucha importancia al control biologico.

El empleo de los productos químicos, trae consigo muchos incovenientes, existen varios tipos todos ellos muy utilizados en agricultura, tanto para combatir plagas, enfermedades, malas hierbas, etc. Los insecticidas, acaricidas, funguicidas, herbicidas y otros

La contaminación del medio ambiente es un problema por la utilización de estos productos químicos que dejan unas substancias químicas residuales que suelen ser tóxicas.Tras el uso prolongado de los productos químicos se producen resistencias en las plagas las cuales es difícil de eliminarlas con un producto químico o con otros que tengan la misma materia activa.

El control biológico se define como una actividad en la que se manipulan una serie de enemigos naturales, también llamados depredadores, con el objetivo de reducir o incluso llegar a combatir por completo a parásitos que afecten a una plantación determinada.

Se pretende controlar las plagas a través de enemigos naturales, es decir, otros insectos que son depredadores de la plaga y son inofensivos a la plantación. El método de control biológico puede ser muy eficaz. Hay que considerar algunos puntos en la utilización de enemigos naturales en la plantación:

1. Se debe identificar bien el parásito que afecta al cultivo.2. Identificación del enemigo natural.3. Estimación de la población del parásito.4. Estimación de la población del enemigo natural.5. Comprar correctamente a los enemigos naturales.6. Supervisar correctamente la eficacia de estos enemigos.

Para la identificación del parásito puede realizarse un pequeño muestreo de estas especies y mandarlo a un laboratorio entomológico, si no se tiene perfectamente identificado por métodos directos.

Si la población de parásito es demasiado alta, los enemigos naturales no actúan con tanta rapidez que si fuese una población baja.

Una vez producida una plaga en la cosecha, se introduce el enemigo natural para que impida el desarrollo de la población del parásito y no produzca elevados daños.

   

1.1. VENTAJAS E INCONVENIENTES DEL CONTROL BIOLÓGICO.

1.1.2. VENTAJAS DEL CONTROL BIOLÓGICO.

La incorporación del control biológico, es un medio de lucha integrada respetando el medio ambiente, debido a que no se emplean insecticidas, lo que da más seguridad, evitar estos productos tóxicos para la salud humana.

El método de control biológico impide las poblaciones de parásitos en las plantaciones agrícolas y por consiguiente la pérdida de altos niveles de producción

El uso de productos biológicos ya vienen ajustados al tipo de parásito y llegan a matar una amplia gama de insectos y no producen daño a los insectos benignos.

 

1.1.3. INCONVENIENTES DEL CONTROL BIOLÓGICO

El control biológico requiere mucha paciencia y entretenimiento y un mayor estudio biológico.

Muchos enemigos naturales son susceptibles a pesticidas por lo que su manejo debe de ser cuidadoso.

Los resultados del control biológico a veces no es tan rápido como se espera, ya que los enemigos naturales atacan a unos tipos específicos de insecto, contrario a los insecticidas que matan una amplia gama de insectos.

Fuente: Lampkin N. Agricultura Ecológica, 1998

2. Spodoptera frugiperda

2.1. Generalidades

Nombre común: Cogollero o gusano cogolleroLepidoptera, Noctuidae

Esta plaga puede atacar alrededor de 60 cultivos y malezas gramíneas, pero los cultivos mas atacados son: maíz, algodón, sorgo, arroz, no obstante se ha detectado en los cultivos de frijol, tomate, maní, soya, cebolla, alfalfa, col, eucalipto, gladiolo, pepino, tabaco, espinaca, nabo y algodón (Luginbill, 1928; Bruner y Deschapelles, 1965; Metcalf y Flint, 1965).

La explotación masiva en grandes extensiones crea condiciones propicias para que la plaga se reproduzca y disemine con mayor facilidad.

2.2 Ciclo de vida

2.2.1 Huevo

Los huevos son depositados en masas que van desde 30 hasta 400, pero pueden llegar a poner en promedio 1500 y un máximo de 2000 huevos en toda su vida, la masa de huevos está cubierta por una tela fina formada por las escamas de la hembra adulta y segregaciones del aparato bucal. Los huevos, inicialmente son de color verde-claro, pero poco antes de la eclosión se vuelven grisáceos. Las larvas nacen a los tres días o menos, cuando la temperatura es mayor a 25 C).

2.2.2 Larva

Las larvas al nacer se alimentan del coreon, más tarde se trasladan a diferentes partes de la planta o a las vecinas, evitando así la competencia por el alimento y el canibalismo.

Larva Daño

Su color varía según el alimento pero en general son oscuras con tres rayas pálidas estrechas y longitudinales; en el dorso se distingue una banda negruzca más ancha hacia el costado y otra parecida pero amarillenta más abajo, en la frente de la cabeza se distingue una "Y" blanca invertida.

Las larvas pasan por 6 estadíos, siendo de mayor importancia para tomar las medidas de lucha los dos primeros; en el primero estas miden hasta 2-3 mm y la cabeza es negra completamente, el segundo mide de 4-10m; las larvas pueden alcanzar hasta 35 mm en su último estadío.

A partir del tercer estadío se introducen en el cogollo, haciendo perforaciones que son apreciados cuando la hoja se desvaina.

2.2.3.Pupas

Las pupas son de color caoba y miden 26 mm; esta fase se desarrolla en el suelo y el insecto está en reposo hasta 8-10 días que emerge el adulto.

2.2.4 Adulto

El adulto mide de 30 a 40 mm con las alas extendidas y generalmente son de color gris. Las hembras tienen alas traseras de color blancuzco, mientras que los machos tienen puntos negros llamativos en las alas delanteras, y las traseras son blancas.

Las hembras depositan los huevos durante las primeras horas de la noche, en el haz y en el envés de las hojas. Una hembra puede poner como promedio 1000 huevecillos en grupos de 30 a 400 por postura.

2.3. Metodología de cría

Las pupas son colocadas en jaulas de reproducción en una proporción de 1:1, y por lo general 50 pupas hembras y 50 machos. La oviposición de las masas de huevos comienzan de 2 a 4 días después de la eclosión de los adultos.

Cada jaula contiene un recipiente con algodón y una solución mielosa (miel de abeja diluida).

En las jaulas se coloca tiras de papel (bond o reciclaje), sostenidas por la tapadera. Las tiras van desde la tapadera hasta el piso de la jaula. Las masas de huevos son depositadas en las tiras de papel y se cosechan diariamente.

Después de cosechar las tiras con las masas de huevos, recortarlas, y colocarlas en un recipiente con dieta especial para que puedan eclosionar. Las larvas eclosionarán de 3 a 4 días después de la oviposición, a una temperatura de 27°C.

Las larvas deben ser trasladadas a otro recipiente con dieta, una larva en cada recipiente, donde permanecerán por el resto de los estadíos larvales (6 estadíos, aproximadamente 18 a 21 días en total). Las pupas son cosechadas de la dieta para luego ser sexadas y vueltas a colocar en un plato petri para reiniciar el ciclo

2.3.1. Dieta especial para Spodoptera frugiperda

Con el objetivo de poder incrementar la producción y cría de ciertos insectos, actualmente se preparan dietas que llenan los requerimientos nutricionales de éstos.

La dieta tiene varios componentes, los cuales están descritos a continuación.

Ingredientes para dieta de S. frugiperda

Ingrediente Funcion CantidadAgarFrijolesGermen de trigo o arrozProteína de soya al 90%Caseína o leche en polvo LevaduraAcido ascórbicoAcido sórbicoVitaminas*TetraciclinaFormalina al 40%Metil-parabenceno

EstructuraFuente de proteina

Fuente de carbohidratosFuente de proteinaFuente de proteinaSegrega enzimas

VitaminaPreservanteVitaminasAntibioticoPreservantePreservante

80g250g200g200g140g200g18g9g30g

150ml10ml15g

*Son un complejo específico de vitaminas, bajo el nombre comercial VITAMIN MIX, VANDERZANT.

Mezclar con agua hasta completar 8 litros, luego se hierven durante 15 minutos.Esperar que la temperatura baje a 65°C y agregar los siguientes preservantes y vitaminas y mezclalos por 3 minutos.

Licuar y colocar las raciones en los depósitos individuales antes que se endurezca (mas o menos 15 minutos)

Nota: El volumen utilizado en la dieta alcanza para 25 a 30 bandejas de 30 raciones en promedio (que es lo mismo que alimentar 750 a 900 larvas.

3. Telenomus remus

El Telenomus remus (Hymenóptera: Scenidae) es una avispita de color negro, de origen asiático, ubicada dentro del grupo de insectos entomófagos, es decir, capaces de parasitar a otros insectos. Este insecto benéfico es muy importante en programas de control biológico e integrado de plagas, debido a que destruyen el huevo huésped antes de la eclosión de la larva, evitando daño temprano a las plantas; además presentan ciclo corto aumentando el numero de poblaciones benéficas con relación a las del gusano cogollero.

Biología: la hembra, ataca el huevo del hospedero examinando con las antenas la masa de huevos antes de ovipositar. El reconocimiento de huevos hospederos apropiados se da por la presencia de una kairomona proveniente del sistema reproductivo de la Spodoptera hembra, solamente una larva del parasitoide se desarrolla en el huevo del hospedero; al empupar el parasitoide, el huevo hospedero se torna negro; los adultos se alimentan de néctar y posiblemente mielecillas.

El adulto de T. remus mide unos 0.5 a 0.6 mm de longitud. El cuerpo es negro brillante, los fémures y las tibias son oscuras en la hembra, pero pálidas en los machos. La hembra deposita un solo huevo en el interior del embrión en desarrollo el huevo hospedero. Solamente huevos de menos de 72 horas de edad son parasitados. Un huevo en el cual el embrión ha terminado su desarrollo es raramente susceptible a ser parasitado por la avispa. La duración de la etapa de huevo es de 10 a 12 horas según la temperatura.

Macho de T. remus Hembra de T. remus

La larva de T. remus pasa por 2 estadíos. Durante el primer estadío, no tiene segmentos, tiene un par de mandíbulas que se mueven verticalmente más dos espolones caudales. En el segundo estadío es claramente segmentada y no tiene los espolones caudales, las mandíbulas son cortas y rectas. La duración de la etapa larval inclusive la de pupa es de 6 a 8 días.

El tiempo total de desarrollo de T. remus, desde oviposición hasta emergencia del adulto, es de 9 a 15 días a temperatura de 22 a 30°C. En general los machos emergen 24 horas antes que las hembras. Cuando las hembras emergen, los machos copulan con ellas inmediatamente.

Las hembras de 2 a 3 días de edad tienen el máximo número de huevos en sus ovarios y producen mas de 76% de su prole durante los primeros 5 días de vida como adultos

3.1. Métodos de aplicaciónSe realizan liberaciones semanales de 7,000 parasitoides por hectárea, durante los primeros 20 a 40 días del cultivo de maíz. Liberar los parasitoides cuando la mayoría de los adultos hayan emergido de los huevos.

3.2. Crianza masiva de Telenomus remusNo existe una dieta artificial para la cría de T. remus por lo cual la reproducción se realiza en huevos de S. frugiperda. Los huevos se obtienen de la cría principal de S. frugiperda. Una vez cosechadas las masas de huevos, se colocan en las tiras de papel y se llevan a las cajas entomológicas, en las cuales se pegan del vidrio las tiras de papel conteniendo las masas de huevos. Éstas quedan expuestas a los parasitoides que se encuentran dentro de la caja por tres días. En cada caja existen entre 30,000 a 40,000 adultos de T. remus. Después de los tres días, las masas de huevos son sacadas de las cajas y colocadas en bolsas plástica. La cantidad de masas de huevos depende de las necesidades del agricultor. Para una hectárea se colocan 29 masas parasitadas/bolsa. Cada masa tiene un promedio de 350 huevos para hacer un total de 10,000 huevos parasitados por bolsa. Dentro de la misma bolsa se coloca una hoja de papel toalla para incrementar el área superficial. Aproximadamente 9 días después emergen las avispas. Un día antes de la emergencia de

los adultos se inyecta con una jeringa una solución de miel y agua como alimento para los adultos.

4. VPN, Virus de la polihiedrosis nuclear

4.1 Generalidades

Los virus entomopatógenos son considerados entidades infecciosas cuyo genoma está constituido por ácido nucleico, ya sea por ADN o ARN, y que se reproducen en el tejido del hospedero.

Los virus por lo general, son una molécula de ADN circular superembobinada por una capa llamada cápsido. Uno o más núcleos cápsidos están envueltos por una membrana que generalmente está constituida por material celular del hospedero. El conjunto compuesto por la envoltura y el núcleo cápsido se conoce como virión, los cuales son unidades infecciosas del virus. Los viriones tiene forma baciliforme y son envueltos en una matriz proteica; a todo este conjunto se le conoce como cuerpo de inclusión.

4.2 Modo de acción

El VPN contamina las larvas vía oral. Las larvas al alimentarse, ingieren el virus. Los poliedros que contienen los viriones se disuelven en el estómago debido a las condiciones alcalinas (pH> 7.5) del intestino medio (mesenterón) y liberan los viriones. Éstos entran en contacto con las microvellosidades del intestino y liberan los cápsidos a las células epiteliales del intestino donde el virus normalmente realiza su primera vuelta de replicación. Posteriormente el virus afecta otros tejidos susceptibles del hospedero, donde continua reproduciéndose y multiplicándose. Otros tejidos atacados son principalmente: tejido graso, epidermis del intestino, hemocelos, tráquea y glándulas.

4.3 Síntomas de infección

Las larvas infectadas se vuelven letárgicas, dejan de alimentarse 24 horas después de ingerido y se paralizan. Las larvas comienzan con vómitos y diarreas. Inicialmente las larvas se tornan color café pálido. Normalmente quedan sujetas a la planta por las propatas y con la cabeza hacia abajo. El cuerpo de la larva se vuelve blando y de color negro o pardo, los tejidos internos se licúan quedando la larva como una bolsa líquida (Figura 1).

4.4. Diseminación

El insecto muerto representa la fuente de inóculo más importante en el campo para mantener la epizootias al romperse el cadáver. Gotas del líquido del cuerpo caen sobre otras partes de la planta o son diseminadas por salpicaduras de lluvia. Además, los insectos enfermos liberan a través de sus heces y vómito grandes cantidades de poliedros que representan otra fuente de inóculo para otros insectos que viven en el mismo hábitat.Los depredadores pueden servir también como diseminadores.

Ventajas del uso de VPN para controlar plagas

Poca o ninguna patogenidad para invertebrados benéficos debido a su susceptibilidad. No son peligrosos para mamíferos, incluso el hombre, y otros vertebrados. Poca resistencia para los hospederos.

Desventajas del uso de VPN para el control de plagas: La velocidad para producir un efecto sobre la plaga es generalmente lenta. La efectividad del patógeno depende mucho de las condiciones ambientales. La especificidad restringe el uso.

4.5. Metodología de producción

Los procedimientos para la producción de VPN son básicamente los mismos que para mantener una colonia sana de S. frugiperda. Para dicha cría se utilizan larvas que se encuentran en tercer estadío larval, provenientes de la cría principal de S. frugiperda dichas larvas, después de estar alimentadas de dieta normal, son colocadas en una nueva dieta la cual es inoculada con el virus (Figura 2). A cada recipiente se le agrega 13,5 ul de una solución que contiene aproximadamente 7´109 cuerpos de inclusión. Las larvas se contaminan al alimentarse de la dieta. Se dejan en la dieta por 7 días hasta que mueran. Luego se procede a la cosecha de dichas larvas inmediatamente después de haber muerto para así evitar que se contaminen por hongos y bacterias.Las larvas son sacadas de la dieta y colocadas en frascos plásticos para luego ser licuadas. Se licuan con agua destilada, y pueden ser en diferentes proporciones: (1 agua:1 larva), es decir, si las larvas a licuar son 1000 entonces se debe agregar 1000 ml de agua, (0.5 agua:1 larva) ó (0.25 agua:1 larva). Una vez licuadas las larvas son cernidas a través de una tela fina en la cual retendremos las impurezas como patas, cápsulas encefálicas, etc.Una vez obtenida la solución madre puede proceder a formular el virus con el objeto de obtener una solución a una concentración equivalente a 6´109 cuerpos de inclusión. Esto es igual a una larva equivalente (LE). Se recomienda que en el campo se apliquen 500 LE por hectárea. En el laboratorio se prepara la solución con 500 ml y por cada ml hay una LE.

4.6. Concentración

Para el conteo de los LE es necesario un hemocitómetro conocido como cámara de Neubauer y un microscopio.

La solución madre hay que diluirla debido a que la cantidad de cuerpos de inclusión de la solución será tanto que será casi imposible contarlos. Se recomienda que se haga una dilución al 0.1%. Dicha solución se hace con agua destilada más un detergente llamado TWEEN el cual evita la acumulación de los cuerpo de inclusión y así favorecer el conteo. De la solución al 0.1% se toma 100 ul y se colocan en el hemocitómetro para hacer el conteo. De la cuadrícula de 16 cuadritos se toma 5 al azar para hacer el conteo. Los cuerpos

de inclusión son fáciles de identificar ya que tienen forma circular y poseen un anillo a su alrededor, además presentan un brillo bastante intenso. Del conteo de los 5 cuadros se saca un promedio y luego hay que repetir el conteo por lo menos tres veces para mayor seguridad. Una vez sacado el promedio de los tres cuadros hacemos un promedio general y la cantidad dada será el promedio de cuerpos de inclusión por cuadro.El hemocitómetro tiene un volumen de 0.0125 mm3/cuadro.

Ejemplo: si el promedio de cuerpos de inclusión por cuadrito es de 47.4, necesitamos sacar la cantidad por ml, y para lo cual se aplica la siguiente fórmula.[47.4/0.0125]´[ 1000ml ´ 1000 (dilución)] = 0.38´109 PIB o cuerpos de inclusión. Esto es menos de una LE/ml. Lo cual me indica que debo agregar mas larvas a mi solución para obtener 6´109 PIB.

Pero si por ejemplo hubiesen salido 135 PIB/cuadro, me indica que tengo mas de los PIB que necesito ya que esto resulta en 10.8´109 y se debe hacer una dilución. Hacer una dilución es más fácil ya que lo que se agrega es agua y no larvas. Y se hace a través de regla de tres simple. Por ejemplo: 10.8´109 es lo que tengo o lo que salió del conteo, y 6x109 lo que necesito; entonces 6´109/10.8´109=56%¸es decir que se pondrá 56% de la solución madre y 44% de agua para obtener la concentración que necesito.

5. Hongos – Control biológico

Figura 1:Larva infectada con VPN

Los hongos constituyen un grupo muy heterogéneo de organismos eucariotas, heterótrofos no fotosintéticos, con pared celular. Su cuerpo está constituido por una estructura llamada

micelio, que es un conjunto de estructuras filamentosas llamadas hifas. En Control Biológico, constituyen una excelente alternativa por su acción antagonista y entomopatógena.

Se demostró que tanto Trichoderma como Gliocladium, son una buena alternativa para tratar de controlar efectivamente los efectos devastadores que puede causar Pythium sp, y así evitar el uso continuo de agroquímicos para el control de enfermedades.

Por otro lado, existen hongos que obtienen su nutrición a partir de insectos, son conocidos como entomopatógenos, ya que causan enfermedades en los insectos plagas hasta causar su muerte, por ejemplo: Beauveria bassiana, es usado para el control de la broca del café, picudos y metamasius hemipterus en caña de azúcar.

5.1.Hongos entomopatógenos (Metarrhizium, Beauveria y Verticillium)

Los hongos entomopatógenos constituyen el grupo de mayor importancia en el control biológico de insectos plagas. Se conocen muchas especies de hongos entomopatógenos, correspondientes a alrededor de 100 géneros. Entre los géneros más importantes podemos mencionar: Metarrhizium, Beauveria, Aschersonia, Entomophthora, Zoophthora, Erynia, Eryniopsis, Fusarium, Hirsutella, Hymenostilbe, Paecelomyces y Verticillium.

5.1.1. Modo de acción de los hongos entomopatógenos sobre los insectos

Se observan tres fases:

1. Germinación de la espora en la cutícula del hospedante 2. Penetración del integumento del insecto por medio del tubo germinativo 3. Desarrollo del hongo dentro del cuerpo del insecto y su multiplicación

1. Germinación de la espora en la cutícula del hospedante

La epicutícula o capa más externa del tegumento del hospedante es el sitio inicial de la interacción patógeno-hospedante. En el tegumento el proceso de penetración se lleva a cabo. Entre sus componentes se encuentran lípidos, lipoproteínas, polifenoles y proteínas. Cuando la penetración se da por la cutícula intervienen lipasas, quitinasas y proteasas. El tubo germinativo de la conidia invade directamente, produciendo apresorios que penetran la epicutícula, dando lugar a cuerpos hifales.

La patogenicidad del hongo sobre los insectos depende de una compleja relación entre la habilidad del hongo para penetrar la cutícula y la fortaleza del sistema inmunológico del insecto para prevenir el desarrollo del hongo.

2. Penetración del integumento del insecto por medio del tubo germinativo

Después de la germinación se producen una serie de transformaciones físicas y químicas, tanto en el insecto como en el hongo, que permiten al patógeno penetrar la cutícula de su hospedante. Un conidio puede germinar, sin embargo si no se dan las condiciones físicas y químicas y los estímulos correspondientes no logra penetrar. Enzimas principalmente lipasas, proteasas y quitinasas, son producidas por la hifa y ocasionan una alteración de la cutícula, que facilita la entrada de la hifa de penetración.

La segunda fase es la invasión de los tejidos por parte del micelio del hongo hasta causar la muerte del insecto, dura de 2 a 3 días. Durante el proceso de invasión del hongo se producen una gran variedad de metabolitos tóxicos o toxinas. Las toxinas son sustancias de baja toxicidad para mamíferos pero muy tóxicas para artrópodos, por lo que pueden causar la muerte del insecto debido a sus propiedades insecticidas; además actúan como inhibidoras de las reacciones de defensa del insecto.

Las toxinas producidas pueden ser de dos tipos: a) Macromoléculas proteícas b) Sustancias de bajo peso molecular

3. Desarrollo del hongo dentro del cuerpo del insecto y su multiplicación

Después que el hongo colonice totalmente el homocele del insecto, éste muere. Esto se debe en gran parte a la acción de las toxinas. Con la muerte del insecto finaliza la fase parasítica y se inicia la saprofítica. Cuando el insecto muere no se observa evidencia del hongo causante de la muerte, sino posteriormente. La duración de la muerte depende de la cepa del hongo, del hospedante y de las condiciones ambientales.

Finalmente sigue la tercera fase, la esporulación y el inicio de un nuevo ciclo. El micelio del hongo se observa primero en las articulaciones y partes blandas de los insectos y en días posteriores se incrementa a todo el cuerpo hasta finalmente cubrirlo. Tras la muerte del insecto y bajo unas condiciones de humedad relativa alta las conidiosporas pueden extenderse a través del cuerpo cubriéndolo con material fungoso característico.

5.1.2. Ventajas de uso de los hongos entomopatógenos

No es nocivo para el operario ni para el medio ambiente. No deteriora la fauna benéfica. Permite establecer programas de manejo integrado. Se puede usar para agricultura orgánica. No tiene efectos tóxicos por acumulación en aplicaciones sucesivas. No tiene límite máximo de residuos.

5.1.3. Recomendaciones para su uso

Para el uso de estos productos no se recomienda utilizarlos en forma única.Es necesario mantener una mayor supervisión del cultivo y hacer aplicaciones oportunas.Se debe almacenar en refrigeración para no perder la viabilidad de las esporas.

5.2. Hongos antagonistas (Trichoderma)

5.2.1. Mecanismos de acción

El hongo al ser aplicado a las raíces, forma una capa protectora, haciendo una simbiosis, el hongo se alimenta de los exudados de las raíces y las raíces son protegidas por el hongo y al mismo tiempo reduce o elimina las fuentes de alimento del patógeno. Actúa como una barrera para prevenir la entrada de patógenos a las raíces. Tienen una acción de hiperparasitismo, que es la acción del microorganismo que parasita a otro organismo de su misma naturaleza, es decir, lo utiliza como alimento y los destruye. Compite por espacio y nutrimentos con los hongos patógenos.

5.2.2. Ventajas

Le brinda protección a la planta. Las plantas producen sistemas radiculares más grandes. No es nocivo para el operario ni para el medio ambiente. No deteriora la fauna benéfica. Permite establecer programas de manejo integrado. No tiene efectos tóxicos por acumulación en aplicaciones sucesivas. No tiene límite máximo de residuos.

6. TRICHOZAM

6.1. Generalidades

TRICHOZAM es un fungicida biológico preventivo para el control de patógenos y enfermedades del suelo que atacan las raíces. El ingrediente activo es Trichoderma harzianum.

Trichoderma spp. es un hongo cosmopolita que se encuentra en forma natural en todos los suelos. De este hongo se aislaron varias cepas, siendo la más común Trichoderma harzianum.

Trichoderma harzianum es un hongo micoparasítico, cuya clasificación taxonómica es la siguiente:

Reino Fungi

Filo DeuteromycotinaClase Hyphomycetes

Género Trichoderma

Especie harzianum 6.2. Características

Este hongo crece y se ramifica en típicas hifas que pueden oscilar entre 3 a 12 m de diámetro, según las condiciones del sitio en donde se esté reproduciendo. La esporulación asexual ocurre en conidios unicelulares de color verde generalmente tienen 3 a6 m de diámetro.

6.3. Recomendaciones para su uso

DÍA 1 DÍA 2

DÍA 3

Para el uso de estos productos no se recomienda utilizarlos en forma única. Es necesario mantener una mayor supervisión del cultivo y hacer aplicaciones oportunas. Se debe almacenar en refrigeración para no perder la viabilidad de las esporas. Trichoderma crece mejor en medios con pH de 4-8 y temperaturas que van de 48-95ºF.

6.4. Compatibilidad

Los productos compatibles pueden ser aplicados antes o después de la aplicación de TRICHOZAM. Los productos incompatibles pueden ser aplicados 10 días antes o después de aplicaciones con TRICHOZAM.

Ingredientes activos Nombres comercialesFunguicidas compatiblesAzoxystrobin Abound, Heritage, Quadris, Amistar, BankitCaptan Captan, MerpanCarboxin Vitavax 34, Vitavax 200Chloroneb Chloroneb, Demosan, Terraneb, TerramecChlorothalonil Bravo, Daconil, Clorotalonil, Knight, RidonateSulfato de cobre Phyton 27dicloran BotranEtridiazole/hiophanate-methyl BonrotEtridiazole Terrazole, TrubanFenarimol RubiganFludioxonil Maxim, MedallionFosetyl Al AlietteFlutolanil MoncutIprodione RovralMancozeb Dithane, Manzate, Ridodur, VondozebManeb Maneb, ManexMefenoxam Ridomil goldMetalaxyl Ridomil GoldMyclobutanil Eagle, RallyPropamocarb Banol, PrevicurPropanil Prostar, StamQuintozene Terraclor, PCNBThiophanate methyl Topsin, FungoThiram Vitavax 200Triadimefon BayletonTriadimenol BaytanVincozolin Ronilan, CuralanFungicidas incompatiblesBenomyl Benlate, Imazalil Fungaflor, Imazilaq, LotosPropiconazole Banner, Tilt, Bumper, PropilaqTebuconazole Folicur, OriusTriflumizole TerraguardHerbicidas compatiblesPendimenthalin ProwlGlyphosate Roundup

Insecticidas compatiblesTodosAcaricidas compatiblesDicofol KelthaneOtrosHalogenated heterocylie AgribonHydrogen dioxide/peroxyacetic acid

Zero Tolerance

Fungicidas que pueden ser mezclados con TRICHOZAM en la solución

Ingrediente Activo Formulación Dosis Concentración del fungicida en agua

Captan 85 WP 2.11 kg/Ha 0.8 g/L

Chlorothalonil 82.5 WDG 1 kg/Ha 4.2 g/L

Iprodione 23.3 FL 1 kg/Ha 4.4 g/L

Iprodione 50 SG 0.85 kg/Ha 0.3 g/L

Methyl Thiophanato 50 WP 2 kg/Ha 8.9 g/L

Metalaxyl 21.3 L 1 Lt/Ha 0.4 ml/L

Usos

Hongos del suelo responsables del mal del talluelo.

PhythiumFusarium

RhizoctoniaSclerotinia

Phythophtora

Hongos del follaje

BotrytisErysiphe

Peronosporaentre otros

6.5. Formas de aplicación

En viveroRecomendamos tres maneras aunque hay varias y son las siguientes.

Aplicar al medio o substrato que se usa para producir las plántulas. El medio se inocula antes de sembrarse de la siguiente manera. En la cantidad de medio que se utiliza para producir las plántulas para una hectárea se mezcla con ½ kilo de TRICHOZAM. Para que el producto quede homogéneamente distribuido se recomienda diluir el TRICHOZAM con el agua que se utilizará para humedecer el medio. Si va a agregar fertilizante, este es el momento para hacerlo en el recipiente donde diluyó el TRICHOZAM. Aplicar la solución al medio y mezclar bien para que quede uniformemente distribuido.

La segunda manera que se puede aplicar TRICHOZAM es a las bandejas donde se han colocado la semilla que germinará o a las plántulas recién germinadas. Dicha aplicación deberá hacerse por lo menos 3 días antes del transplante, se aplica en un riego pesado. Igual se calcula el agua a usar para regar el equivalente de plántulas para una hectárea,

utilizando siempre ½ kilo de TRICHOZAM. El riego pesado es hasta que las celdas de las bandejas goteen agua al ir haciendo el riego.

La tercera forma es aplicar el TRICHOZAM en casulla y mezclarlo en forma homogénea con el medio de sustrato para llenar las bandejas de plántulas equivalentes a una hectárea de campo definitivo. El medio deberá tener un poco de humedad para que las esporas se puedan desprender.

Al transplante

En el transplante se puede aplicar inmediatamente después del transplante en forma de chorro al pie de la planta.

Hay que calcular el agua a utilizar para la hectárea transplantada, considerando que utiliza por ejemplo: 200 ml a 250 ml de solución por planta. Es necesario calcular la cantidad de solución que gastará por plántula en el campo. Una vez hecho esto podemos determinar el total de volumen de agua que necesitamos por hectárea. Si por ejemplo: si utilizaran 600 L de agua/ha, diluimos los 500 g en los 600 L para luego realizar la aplicación. Se recomienda que el TRICHOZAM se diluya en una premezcla primero.

En cultivos establecidos

Se hace la aplicación por chorro al pie de la planta o en el sistema de riego por goteo.Si es por el sistema de riego, se aplica como si se aplicara un fertilizante o fungicida al suelo. Se aplica en 30 minutos. Si va a regar por dos o más horas, dejar la aplicación del TRICHOZAM para la última hora de riego, dejando los 15 a 20 minutos después de la inyección, para que se limpie el sistema de riego y asegurarse que toda la solución de TRICHOZAM llegue a las plantas.De esta manera limpia el sistema riego y asegura que toda la solución de TRICHOZAM llegue a las plantas.

Si se riego 60 minutos o menos. Dividir el tiempo total en tres partes, e inyectar el TRICHOZAM en el segundo tercio del tiempo.

Aplicaciones foliaresEl TRICHOZAM se puede aplicar de manera foliar para el control o supresión de varios hongos mencionados anteriormente. En el cultivo de chile se obtuvieron buenos resultados para el control de mildeu polvoso en el tiempo de verano.

La dosis a usar es de 250 g de TRICHOZAM por barril de 200 L de agua. Se debe usar adherente para obtener una mejor aplicación. Tener una buena cobertura foliar sin que haya escurrimiento del producto en las hojas.

No mezclar el TRICHOZAM con ningún desinfectantes como yodo, cloro o amonio cuaternario. Si puede mezclarse con fertilizantes foliares, hormonas e insecticidas.

7. Beauveria bassiana

El primer hongo descubierto fue Beauveria bassiana en 1835 por Agostino Bassi.

Clasificación taxonómica de Beauveria:

Reino FungiFilo DeuteromycotinaClase HyphomycetesGénero

Beauveria

Especie bassiana

Es un hongo imperfecto. Sus conidióforos están agrupados en forma apiñada formando synemas. Sus conidias son lisas e hialinas. Es de color blanco cremoso.

Conidias de Beauveria bassiana

7.1. Usos

Beauveria bassiana

Nombre común Nombre científicoBroca del café Hypothenemus

hampeiPicudo del plátano Cosmopolites

sordidusPulgones Myzus sp.Mosca blanca Bemisia tabaciTrips Thrips spp.Larvas lepidópteras Spodoptera,

Diaphania, PlutellaAcaros Tetranychus

7.2. Compatibilidad

Compatibilidad de B. bassiana Ingredientes activos

Funguicidas

Mezcla en tanque Ampelomyces quisqualisFosetil de alumunioSulfato de cobreHidroxido de cobreLineolate de cobre

Dos días antes y después de la aplicación

PropiconazoleTriadimefonMyclobutanilVinclozolinIprodioneThiramAzufre líquido

Tres días antes y después de la aplicación

ClorotalonilMetalaxyl y clorotalonil

Cuatro días antes y después de la aplicación

BenomylManebFludioxonilAzoxystrobinTriflumizoleThiophanate/mancozebCaptan

Insecticidas Todos

8. Verticillium lecanii

Tiene estructuras llamadas fiálidas, verticiliadas que tienen apariencia de ramas, con células conidiógenas. Los conidios son hialinos y aseptados.

Clasificación taxonómica de Verticillium:Reino FungiFilo DeuteromycotinaClase HyphomycetesGénero

Verticillium

Especie lecanii

8.1. Usos

Verticillium lecanii

Nombre común Nombre científicoPulgones Myzus sp.Mosca blanca Bemisia tabaciTrips Thrips spp.

8.2. Formas de aplicación

La dosis recomendada es 500 gramos por hectárea.Diluir el BAZAM o VERZAM en agua y agitar hasta que se liberen las esporas del arroz. Pasarlo por un colador o una malla. Mezclar esta solución madre para el volumen de agua a utilizar en una hectárea.Es importante añadir adherente en la mezcla (1ml / L de agua) para una mejor aplicación.Tener una buena cobertura foliar sin que haya escurrimiento del producto en las hojasAplicar al atardecer o en días nublados.

9. CONTROL DE CALIDAD TRICHOZAM, BAZAM Y VERZAM

El control de calidad de los hongos entomopatógenos considera tres pruebas fundamentales:

1. Concentración de conidios2. Viabilidad de los conidios 3. Estabilidad de los conidios

1. Concentración de conidios.

La concentración de conidios por gramo de producto comercial de BAZAM, VERZAM y TRICHOZAM debe ser por lo menos 5 x 108. La dosis por hectárea de los tres productos tienen una concentración de 5 x 1011. La concentración de conidios por gramo de sustrato colonizado está determinada fundamentalmente por la relación humedad/oxígeno y la temperatura. El control de éstos parámetros durante la incubación en el sustrato es muy importante.

CálculoDe nuestro lote comercial se pesa 1 g de producto y se diluye con 9 ml de agua esterilizada y una gota de aceite. Se bate fuertemente y se extrae 1 ml para diluirlo con 99 ml de agua estéril. De ésta solución se extrae aproximadamente 200 microlitros para colocar en una cámara de Neubauer (hemocitrómetro). Se cuentan el número de conidios en 16 cuadros secundarios en forma sistemática y se saca la media aritmética (Lecuona 1996).

N x 104 x 10z = número de conidios por ml

Donde:

N : media aritmética de los propágulos contados en 16 cuadros.104 : constante equivalente al campo donde se contó.z : número de diluciones seriadas que se hicieron (en este caso z=3)

2. Viabilidad de los conidios

La viabilidad de los conidios secos después de separados del sustrato debe ser 90%. Está determinada fundamentalmente por el porciento de humedad que se alcance en el proceso de secado. Debe lograrse un proceso lento con temperaturas entre los 30 y 32 grados centígrados y una humedad relativa baja. Lo óptimo es lograr conidios con un porcentaje de humedad inferior al 5%.

CálculoLa viabilidad se lee a partir de la dilución madre para leer la concentración se hace una siembra así:

En un plato petri con PDA más antibiótico se siembra una gota con una pipeta Pasteur y con un asa Drigalshy se homogeniza la gota sobre la superficie del medio y se incuba a 25ºC 3ºC por:

12 horas para Trichoderma 17-20 horas para Beauveria y Verticillium

Luego de este tiempo, leer en microscopio 200 esporas con el contómetro en mano para marcar las viables y no viables. Realizar tres lecturas y sacar el promedio aritmético. Sacar con una simple regla de tres el porcentaje de viabilidad.

3. Estabilidad de los conidios

Debe ser superior a los tres meses. Está determinada por la humedad de los conidios. A menor humedad mayor estabilidad.

Es importante monitorear la viabilidad de los conidios y su estabilidad, así como estandarizando las condiciones de secado.