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Environmental Physiology & Toxicology Ecophysiology – Ecotoxicology (PK) Systems Ecotoxicology (FS) P. Kestemont F. Silvestre http://webapps.fundp.ac.be/system-ecotox

Mémoires écophysiotox 2013

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mémoires écophysiotox

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Page 1: Mémoires écophysiotox 2013

Environmental Physiology & Toxicology

Ecophysiology – Ecotoxicology (PK) Systems Ecotoxicology (FS)

P. Kestemont

F. Silvestre

http://webapps.fundp.ac.be/system-ecotox

Page 2: Mémoires écophysiotox 2013

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Effet des chocs thermiques sur l’état de smoltification d’une souche de saumon Atlantique au cours de la migration de dévalaison

•  Prélèvement de smolts dans des rivières salmonicoles

•  Analyses physiologiques de marqueurs de smoltification

Promoteurs: Prof. P. Kestemont Encadrants: B. Bernard, Dr R. Mandiki

•  Marquage de poissons

•  Opérations de repeuplement

•  Prélèvement de sang et d’organes

•  Activités enzymatiques (spectrophotométrie)

•  Dosages hormonaux (RIA, ELISA)

•  Dosage des HSPs (Western-blot)

Page 3: Mémoires écophysiotox 2013

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Etude des perturbations neurologiques chez l’anguille exposée au méthylmercure

•  Contamination in vivo d’anguilles avec du MeHg à doses environnementales

•  Analyses physiologique et comportementale

Analyses protéomiques et biochimiques

•  gels d’électrophorèse 2D (FUNDP-URBE)

•  enzymes antioxydantes (UCL-BNTE)

•  dosage de marqueurs neurologiques (dopamine, sérotonine) (URBE)

•  analyses comportementales (ULG)

Promoteurs: Prof. P. Kestemont et J-F. Rees Encadrants: Dr D. Scaion, MC, Forget, A. Evrard

Déclin des populations de Anguilla anguilla

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Impact des perturbateurs endocriniens sur le système immunitaire de la truite arc-en-ciel

Promoteur: Prof. P. Kestemont Encadrant: Sophie Massart

Perturbateurs  endocriniens  

Système  reproducteur     Système  immunitaire  

Expérience  in  vivo  Exposi'on  des  poissons  et  prélèvements  des  organes  

Analyses  de  paramètres  immunitaires  

Complément,  lysozyme,  immunoglobulines,  distribu'on  

leucocytaire  

Étude  transcriptomique  Etude  de  l’expression  de  gènes  

spécifiques  par  qPCR  

Les  perturbateurs  endocriniens  modulent-­‐ils  les  différents  mécanismes  de  l’immunité  ?  

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Nutrition lipidique et réponse immunitaire chez la perche commune Perca fluviatilis

Aliment riche en AGLPI

Aliment carencé en AGLPI

J0 J60 J67

ANALYSES: § Foie + rate: mesure du niveau d’expression de gènes clés de la réponse immunitaire § Sang: mesures de marqueurs immunitaires (lysozyme, complément C3, leucogramme)

Echantillonnages: Foie, rate, sang

OBJECTIF: étudier l’impact d’un régime carencé en AGLPI sur le système immunitaire de la perche, en présence d’un agent pathogène (Aeromonas)

Bactérie Aeromonas

Aliment riche en AGLPI

Aliment carencé en AGLPI Témoin

Conditionnement alimentaire Challenge bactérien

Promoteur : Prof. P. Kestemont Encadrants : Dr F. Geay, A. Evrard

http://www.fishlipids.be/index.html

Page 6: Mémoires écophysiotox 2013

• Stress • Nutrition sub-optimale • Présence de pathogènes opportunistes

6

Influence de la nutrition sur la résistance aux maladies infectieuses des poissons en élevage

Sensibilité accrue aux infections Pics de mortalité en élevage

Promoteurs: Prof. P. Kestemont Encadrants: Dr J.Douxfils, Dr R. Mandiki, A. Evrard

• Objectif: Etudier les effets et mécanismes d’action de composés immunostimulants (β-glucans) via l’alimentation sur le statut immunitaire et la résistance aux maladies infectieuses chez la truite AEC

Immunostimulation orale préventive (>< antibiotiques) !!!

• Analyses: - Nourrissage suivi d’infection expérimentale (challenge bactérien) - Prélèvements d’organes impliqués dans l’immunité et de sang

- Marqueurs immunitaires humoraux, cellulaires, moléculaires (Q-PCR)

Projet PAI AQUASTRESS

Page 7: Mémoires écophysiotox 2013

F1

F2

Pollutant/stress

Se, triclosan

New theories of evolution

1° Quels rôles pour l’analyse épigénétique en écologie et en écotoxicologie ?

Acclima'on/adapta'on  

Phenotypic  plas'city  

Evolu'on  of  the  environmental  stress  response  

F. Silvestre E. Falisse

Project FNRS with the Dpt of Chemistry and the Laboratory

of Oceanology (ULg)

Delayed effects

Transgenerational effects

Epigenetics

Larvae & juveniles

Zebra fish / Cyprinodon

•  Whole methylation level

•  Specific methylation level of CpG islands of genes of interest (according to OMICS) (pyrosequencing)

•  Shotgun genomic bisulfite sequencing (BS-Seq)

•  Histones PTMs

Page 8: Mémoires écophysiotox 2013

F1

F2

2° Impacts du réchauffement climatique sur la toxicité des polluants chez les organismes aquatiques. Approches transgénérationnelles.

F. Silvestre P. Kestemont

J. Douxfils E. Falisse

Transgenerational effects

Larvae & juveniles

Zebra fish

F0

28 days +2 or +4°C

Acute metal exposure

F1, F2, F3,…

Epigenetics OMICS

Projet PAI AQUASTRESS

Page 9: Mémoires écophysiotox 2013

Techniques biochimiques utilisées

Cultures cellulaires, chromatographie, SDS-PAGE, méthodes spectroscopiques

P. fluviatilis

Contexte général: Compréhension des interactions polluants-protéines impliquées dans les mécanismes toxicologiques chez Danio rerio

Objectifs du mémoire:

1. Production et purification de l’enzyme PDI (Protein Disulfide Isomerase) chez Danio rerio

2. Caractérisation de son activité enzymatique et de son inhibition par des polluants type PCB ou

triclosan

?  

Effets écotoxicologiques

3° Isolation et caractérisation de l’enzyme PDI, potentiellement impliquée dans le mode d’action de polluants aquatiques

F. Silvestre C. Michaux

E. Tinti

Projet FNRS avec le Dpt de Chimie et le Laboratoire d’Océanologie (Ulg)

Page 10: Mémoires écophysiotox 2013

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