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Metodos de fijación en microbiologia
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UNIDAD 1. PARASITOLOGA.1.7. Mtodos de conservacin, fijacin y tincin tiles en parasitologa.
RECOLECCIN DE MUESTRAS Muestra de heces Esputo Materiales perianales Tracto urogenital Biopsias Material sigmoideo Extensiones sanguneas Aspirados
Los pasos a seguir son:Obtencin. Conservacin.Fijacin.*Deshidratacin.*Aclaramiento.Tincin.*Hidratacin.Montaje .Observacin.Identificacin.
Tipos de Conservadores
La mayora de los fijadores son venenos citoplasmticos y actan mas rpido en caliente.Un buen fijador es aquel que entra rpidamente a la estructura parasitaria, detiene su metabolismo y le provoca poco o nulos cambios morfolgicos.
FijadorComponentesFuncinUtilidadBouincido pcrico
Formaldehido
Acido actico glacialdemuestra la presencia de glucgeno. Coagula protenaspuentes de metileno en protenas.fija las nucleoprotenas por precipitacin.Helmintos PAF (fenol-alchol-formaldehido)Fenol
Solucin salinaEtanol
Formaldehido Desnaturaliza y precipita las protenas.puentes de metileno en protenas.Quistes, trofozoitos, huevos y larvas
FijadorComponentesFuncinUtilidadAFAEtanol
Formaldehdo
Agua destilada
cido actico glacialDesnaturaliza y precipitaForma puentes de metileno
Fija las nucleoprotenas por precipitacin.CestodosTrematodos
Paso previo al montaje.Blsamo no se mezcla con el agua.Alcoholes graduales (30%, 50%, 70%, 96% y absoluto).
Miscible con etanol y blsamo.Sirve de indicador de una buena deshidratacin (oscurecimiento).Aceites esenciales con transparencia (terpineol).
Resinas (balsamo de Canada).Transparencia.ndice de refraccin cercano a vidrio de cubre y porta.Durabilidad.
Preparaciones permanentes Nematodos
Gelatina------------------------8.0mlAgua destilada----------------52.0mlGlicerina------------------------50.0mlFenol (cristales)---------------0.1ml
Lugol.Ziehl-Neelsen.Tincin de Hematoxilina y eosina. Hematoxilina frrica Heidenhain.Tincin tricrmica de Gomori. Tincin de Noble.Coloracin de Giemsa.Tincin de Wright.
Tinciones parsitos.
FundamentoIdentificacin de estructuras por reaccin del iodo con el glucgeno contenido en las estructuras
UtilidadPara quistes y huevos
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UTILIDAD Para identificar parsitos (protozoarios de la sangre y los tejidos), espiroquetas, levaduras y hongos (Chlamydia).
FUNDAMENTOAfinidad que demuestran las clulas y sus componentes a los distintos colorantes incluidos en el colorante de Giemsa.
Tincin de Ziehl-Neelsen
(Modificada para observacin de coccidias: Cryptosporidium y otros).FUNDAMENTO:Las paredes celulares de los parsitos contienen cidos grasos que les confieren la propiedad de resistir la decoloracin con alcohol-cido
Estudio de Entamoeba, Giardia, Balantidium, Cyclospora y otros protozoarios.
Permite colorear las estructuras internas de los protozoos para su caracterizacin. FUNDAMENTOUTILIDAD
UTILIDAD
Colorea protozoarios, principalmente amebas y flagelados.
FUNDAMENTO
La Hematoxilina se asocia con mordientes para actuar como un colorante bsico, por lo cual se asocia y colorea estructuras aninicas
Tincin de Carmn clorhdrico
FundamentoCaracteriza el ADN, aunque el carmn tiene carga positiva, con la adicin del cido clorhdrico se hace de carga negativa; se deposita en los grupos fosfatos del ADN
UtilidadColoracin de ncleos de especmenesadultos o segmentospara el estudio de cestodos y trematodos
FundamentoLa hematoxilina, que por ser catinica o bsica tie los nucleos celularesLa eosina tie componentes bsico como el citoplasma
Utilidadutilizado en histologa y medicina diagnostica para diferenciar estructuras en parsitos
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