MIKROBIOLOGI

Materi : Sterilisasi,Desinfeksi,Antiseptik

Program Studi : D-III Kebidanan

Pertemuan ke : 5 dan 6

Bobot : 2 SKS

Dosen : Ayu Rahmawati S, M.Si

Definisi Sterilisasi suatu proses dg metode ttt yg bertujuan mematikan

semua organisme hidup (vegetatif & non-vegetatif) –spora bakteri yg resisten thd desinfektan maupun panas

• Macam-macam sterilisasi : – Sterilisasi fisik :panas kering, panas uap, radiasi

(ultraviolet, sinar pengion)– Sterilisasi kimia : bahan kimia dan gas kimia– Sterilisasi mekanik : filtrasi

Sterilisas Panas Kering Pembakaransterilisasi yang 100% efektif. Tetapi cara ini sangat

terbatas pada penggunaannya (hanya pada alat besi atau kaca bagian luar)

Sterilisasi udara panas

alat-alat ditempatkan dalam oven bersuhu 160-180oC selama 1-2 jam. Sterilisasi ini baik untuk alat-alat laboratorium; kaca petri, pipet, pinset, tabung, labu, dll..

Sterilisasi dengan Panas Uap

AutoklafTekanan 1,5 atm; suhu 121oC; waktu 10-20 menit.

Perebusansuhu 100oC; waktu rebus selama 15 menit.

Pasteurisasisuhu 65oC; selama 3 hari.

Gravity autoclave Udara dalam ruang autoklaf

dipindahkan hanya berdasarkan gravitasi.

Prinsipnya adalah memanfaatkan keringanan uap dibandingkan dengan udara, sehingga udara terletak di bawah uap.

Autoklaf ini dapat bekerja dengan cakupan suhu antara 121 - 134°C dengan waktu 10-30 menit.

Cara kerjanya dimulai dengan memasukan uap melalui bagian atas autoklaf sehingga udara tertekan ke bawah. Secara perlahan, uap mulai semakin banyak sehingga menekan udara semakin turun dan keluar melalui saluran di bagian bawah autoklaf, selanjutnya suhu meningkat dan terjadi sterilisasi.

Steam-Flush Pressure-Pulse Autoclave

Autoklaf ini menggunakan aliran uap dan dorongan tekanan di atas tekanan atmosfer dengan rangkaian berulang.

121°C, 2 atm selama 15 menit

Fungsi untuk sterilisasi alat gelas dan media mikroorganisme

Prevacuum (high vacuum) autoclave

Autoklaf ini dilengkapi pompa yang mengevakuasi hampir semua udara dari dalam autoklaf.

Cara kerjanya dimulai dengan pengeluaran udara. Proses ini berlangsung selama 8-10 menit. Ketika keadaan vakum tercipta, uap dimasukkan ke dalam autoklaf. Akibat kevakuman udara, uap segera berhubungan dengan seluruh permukaan benda, kemudian terjadi peningkatan suhu sehingga proses sterilisasi berlangsung.

Autoklaf ini bekerja dengan suhu 132 - 135°C dengan waktu 3-4 menit.

Sterilisasi dengan Ultraviolet : • Terdapat keterbatasan daya tembus maka

penggunaannya :1. Sterilisasi udara (air hygiene)2. Inaktivasi mikroorganisme pada permukaan

bahan atau tersuspensi dlm cairan 3. Untuk produk dlm komposisi yg tak stabil yg

sulit disterilisasi dg tata cara konvensional• Efek max radiasi λ 265 nm• Masih dipakai di rs u/ tujuan :

– Mengurangi kontaminasi– Manitenance keadaan standar– Sterilisasi/dekontaminasi supplay air

Contoh : ruangan operasi

Sterilisasi Dengan Sinar Pengion

• Sinar beta

• Sinar gamma

• Paling ideal namun proteksi worker thd radiasi lebih sulit dan lebih mahal

• Bahan ster. dlm btk wadah akhir

• Digunakan untuk :

– Alat-alat medis (syringe, benang bedah, bahan-bahan plastik dan karet)

– Obat-obatan

Sterilisasi dingin

Temperatur kamar

Sterilisasi dengan Gas Kimia • Contoh : gas etilen dioksid, formaldehide• Keuntungan :

– Temp rendah (bhn termolabil)– Kemampuan penetrasi dan absorpsi etilen

dioksid yg tinggi pd bbrp jenis pembungkus (kertas, polietilen)

– Digunakan untuk cateter, peralatan suntik plastik, sarung tangan

• Keuntungan gas formaldehide dibanding etilen dioksid :– Lebih murah– Kurang berbahaya u/ intoksiskasi– Tidak mudah meledak– Kurang meninggalkan residu pd bahan yg

disterilkan

Sterilisasi dengan Filtrasi

• Untuk mensterilkan udara at bahan dalam btk cairan

contoh : filter udara adalah penggunaan HEPA (High Efficacy Particulate Air) pada ruang operasi atau ruang isolasi tertentu untuk menghindari kontaminasi atau cross infection

• Filtrasi cairan pada produksi obat-obat steril atau pada sistem irigasi dalam ruang operasi

Sterilisasi dengan Bahan Kimia

• Glutaraldehyd 2% dalam suasana basa • Selama 20-30 menit• Potensi bertahan sampai 14 hari

Sterilisasi Mekanik

Dengan cara mengalirkan cairan atau gas melalui suatu bahan penyaring yang memiliki pori cukup kecil untuk menahan mikroorganisme.

Saringan tidak dapat menahan virus karena ukurannya yang sangat kecil.

Contoh: Saringan Seitz filter yang dilengkapi asbestos Saringan Berkefeld terbuat dari tanah diatome Saringan Chamberland terbuat dari porslen Fritted glass filter terbuat dari serbuk gelas

DEFINISI DESINFEKSI

• Upaya membunuh organisme-organisme patogen (kecuali spora kuman) dengan cara fisik atau kimia; dilakukan terhadap benda mati.

• Proses yang menggunakan suatu bahan (kimia)yg dpt membunuh mikroorganisme patogen kecuali spora bakteri, virus & beberapa strain bakteri resisten

• DESINFEKTAN → zat (biasanya kimia) yang dipakai untuk maksud disinfeksi.

Desinfektan dan Antiseptik

Digunakan untuk membersihkan :1. Tangan staf2. Kulit dan selaput lendir px3. Alat kesehatan4. Permukaan yg keras (meja, almari,

lantai, dinding)

Mencegah inos

Desinfektan

• Beberapa peralatan yang dilakukan proses desinfektan, contoh: – kamar operasi, unit isolasi, stetoskop– meja operasi

• Efektifitas desinfektan tergantung :– pH– type & jml mikroorganisme– ada/tidak bahan organik pd benda ybs– jangka waktu u/ membunuh mikroorganisme

Pengenceran tidak tepat Air pengencer tercemar Tempat tidak sesuai (penutup gabus) pH tidak sesuai Digunakan untuk bahan yg tdk

cocok

Beberapa penyebab inaktivasi desinfektan

Penggolongan Desinfektan :

1. Gol. alkohol – alkohol 70%

2. Gol. phenol – lysol kreolon

3. Gol. chloro xylenol

4. Gol. chlorin aktif – hypochlorite dan na-dichloro icocynaturat

5. Gol. senyawa amonium kwartener – DET

6. Gol. formaldehide konsentrasi 1 mg/l

Desinfektan yang Digunakan pada Fasilitas Kesehatan :

1. Alkoholethyl at isopropil alkohol (60-90%) u/ ampul, termometer dll

2. Gol. halogen– chlirin – sod hypochlorit– pd kons 125 ppm-10000 ppm– iodophor

• Glutaraldehyde 2%• Hydrogen peroxyde 3-6% u/ lantai• Formaldehyde

– u/desinfeksi ruangan pd kons 1 mg/l, at sterilisasi ruangan pd wadah tertutup

• Fenolic kons 0,3%-0,6%2. lysol – kreolon3. u/ desinfeksi linen, lantai ruangan4. tdk dianjurkan u/ alat karpet dan plastik krn absorpsi

2. Amonium quartenary– u/ dinding permukaan logam – sifat sebagai detergent

DEFINISI

• ANTISEPTIS → upaya mencegah pertumbuhan atau aktivitas mikroorganisme dengan cara menghambat atau membunuh menggunakan dipakai untuk zat-zat kimia terhadap jaringan tubuh.

• ANTISEPTIK → zat kimia yang dipakai untuk maksud antiseptis.

Antiseptik

Syarat antiseptik:1. Dapat menurunkan/mencegah penularan

penyakit2. Hipoalergenik menurun3. Nyaman dipakai4. Tidak berbahaya untuk dipakai5. Menghemat waktu6. Persistem7. Murah

ANTISEPTIK KIMIA

• Golongan Alkohol & Fenol• Golongan Halogen• Golongan Peroksida• Golongan Penurun tegangan

permukaan• Golongan zat warna• Logam-logam berat• Gas-gas lainnya

Golongan Alkohol & Fenol

• Alkohol adalah zat yang paling efektif dan dapat diandalkan untuk sterilisasi dan desinfeksi.

• Alkohol dapat mendenaturasi protein dengan jalan dehidrasi.

• Urutan kekuatan: isopropil-OH>EtOH>MetOH

• Konsentrasi 70% sangat baik, dibawah 50% atau diatas 90% tidak ada efeknya.

Golongan Alkohol & Fenol

• Alkohol adalah zat yang paling efektif dan dapat diandalkan untuk sterilisasi dan desinfeksi.

• Alkohol dapat mendenaturasi protein dengan jalan dehidrasi.

• Urutan kekuatan: isopropil-OH>EtOH>MetOH

• Konsentrasi 70% sangat baik, dibawah 50% atau diatas 90% tidak ada efeknya.

Golongan Halogen

• Larutan klorin (atau biasanya hipoklorit, ClO-) dipakai untuk desinfeksi dan menghilangkan bau.

• Halazol dan parasulfon dichloramidobenzoic acid pada konsentrasi 4-8 mg/L dapat mendisinfeksi air yang mengandung S. typhi dalam wakti 30 menit.

• Iodium bersifat sangat antiseptik, efektif juga untuk protozoa (amuba penyebab disentri)

• Aman untuk kulit, tetapi pada konsentrasi tinggi dapat menyebabkan alergi pada kulit.

Golongan peroksida

• Antiseptik efektif dan nontoksik

2 H2O2 2 H2O + O2

• Konsentrasi:– 0,3-6,0% : desinfeksi– 6,0-25,0% : sterilisasi– 0,1% dalam susu pada suhu 54oC dapat

mengurangi kuman sampai 99,99%– 10% : dapat membunuh virus dan spora– 3%: untuk mencuci luka pada kuman

aerob.

Detergen

• Merupakan senyawa penurun tegangan permukaan.

• Karena memiliki struktur bipolar.• Untuk deterjen ionik sangat desinfektan

daripana deterjen nonionik.

Zat Warna

• Beberapa macam zat warna terbukti dapat menghambat pertumbuhan kuman (bakteriostatik)

• Derivat akridin & rosanilin• Mekanisme kerjanya diduga menghambat

DNA sehingga ada kemungkinan juga bahaya terhadap manusia.

Logam Berat

• Dapat mempresipitasikan (menggumpalkan) enzim-enzim atau protein esensial lainnya.

• Biasanya: Hg, Ag, As, Zn, dan Cu.• Karena sgt berbahaya tidak digunakan

lagi

• HgCl2untuk luka-luka kecil

• AgNO3infeksi gonokokus

• As2O4sifilis, infeksi protozoa

• ZnOinfeksi kuman atau jamur