modul

Embed Size (px)

Citation preview

  • 5/26/2018 modul

    1/26

    P TOLOGI KLINIKA. SESI 1

    A.1. HEMOGLOBIN (metode Cyanmethemoglobin)

    Prinsip

    Seluruh darah akan ditambahkan ke Cyanmethemoglobin (HiCN) reagen. Kalium

    ferricyanide di reagen mengubah besi hemoglobin dari besi ferro (Fe++) ke besi ferri (Fe+++) untuk

    membentuk methemoglobin (Hi) yang kemudian menggabungkan dengan potasium sianida

    untuk membentuk pigmen yang stabil, Cyanmethemoglobin (HiCN). (Hi = hemoglobin =

    hemoglobin yang setrika sudah teroksidasi ke keadaan besi. HiCN = hemoglobin sianida = hi yang

    telah banded terhadap ion sianida). Kehadiran deterjen nonionik di reagen meningkatkan lisis

    dari sel-sel darah merah dan menurunkan jumlah kekeruhan yang dihasilkan dari protein

    abnormal, seperti lipoprotein. Intensitas warna campuran ini diukur dalam spektrofotometer

    pada panjang gelombang 540 nm. Kepadatan optik dari solusi sebanding dengan konsentrasi

    hemoglobin. Semua bentuk hemoglobin diukur dengan metode ini kecuali sulfhemoglobin.

    Spesimen

    Seluruh darah, menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler juga

    dapat digunakan.

    Reagen dan Equiment

    1. Cyanmethemoglobin (hemiglobincyanide) (HiCN) / reagen Drabkin berisi potasium sianida(50 mg), potasium ferricyanide (200 mg), potasium dihidrogen fosfat (KH2PO4) (140 mg),

    dan detergen nonionik (1 mL) dalam 1 L air suling.2. Tabung uji, 10 x 75 mm3. Pipet, 0,02 mL.4. Spektrofotometer (540 nm)

    Prosedur

    1. Tempatkan tepat 5.0 mL reagen HiCN ke dalam sebuah tabung tes dengan tepatberlabel. Tempat 5.0 mL reagen ke dalam tabung reaksi untuk digunakan sebagai blanko.

  • 5/26/2018 modul

    2/26

    2. Tambahkan 0,02 mL tercampur darah darah atau kontrol secara keseluruhan untuk tabungtepat berlabel. Bilas pipet 3 sampai 5 kali dengan reagen HiCN sampai semua darah akan

    dihapus dari pipet tersebut

    3. Campur larutan sebelumnya baik dan memungkinkan untuk didiamkan pada suhu kamarselama akhirnya 3 menit untuk memberikan waktu yang memadai untuk pembentukan

    HiCN

    4. Transfer campuran untuk kuvet dan dibaca dalam spektrofotometer pada panjanggelombang 540 nm dengan menggunakan reagen HiCN dalam tabung blanko untuk

    mengatur densitas optik (OD) pada 0,0. Catat pembacaan untuk sampel pasien dan kontrol

    dari OD skala dan melihat tabel siap untuk nilai sebenarnya dari hemoglobin dalam g/dL.

    A.2. PENGHITUNGAN SEL DARAH MERAH

    Jumlah sel darah merah (RBC) dinyatakan sebagai jumlah sel darah merah / liter (L) dari

    darah. RBC normal adalah 3,6-5,6 x 1012/L untuk wanita dan 4,2-6,0 x 1012/L untuk laki-laki. Bayi

    yang baru lahir menunjukkan RBC 5,0-6,5 x 1012/L saat lahir, yang secara bertahap menurun hingga

    3,5-5,1 x 1012/L pada usia 1 tahun.

    Prinsip

    Untuk memudahkan penghitungan dan mencegah lisis dari sel-sel darah merah, darahkeseluruhan diencerkan dengan cairan isotonik menipiskan.

    Reagen dan Peralatan

    1. Thoma merah hitungan pipet2. Solusi Hayem (count Merah menipiskan cairan)

    Sodium sulfat 2,5 g

    Sodium klorida 0,5 g

    Merkuri klorida 0,25 g

    Aquades 100 ml

    3. Mikroskop4. Kasa bersih atau kim tisu5. Hemositometer dan kaca penutup. Alun-alun tengah besar berisi 25 kotak kecil dengan

    ukuran yang sama digunakan untuk RBC.

    a. Lima kotak kecil berlabel 'R' adalah wilayah yang akan menghitung RBC (Gambar 1)

  • 5/26/2018 modul

    3/26

    b. Alun-alun pusat besar memiliki volume 0,1 uL. Oleh karena itu, volume masing-masingdari 25 kotak yang lebih kecil adalah 0,004 uL selama lima kotak kecil.

    Spesimen

    Seluruh darah, menggunakan EDTA atau heparin sebagai antikoagulan tersebut. Darah

    kapiler juga dapat digunakan.

    Prosedur

    1. Mengambil darah sampai persis tanda 0,5 dalam pipet hitungan merah dan encerkansampai tanda 101 dengan jumlah cairan merah menipiskan, sehingga membuat 1:200

    pengenceran darah.

    2. Campur jumlah sel darah merah yang diencerkan selama 3 menit3. Bersihkan ruang penghitungan4. Mengisi ruang menghitung (satu pengenceran hitungan merah mengisi setiap sisi

    hemositometer itu). Setelah menghitung ruang penuh, memungkinkan sekitar 3 menit

    untuk sel darah merah untuk menyelesaikan sebelum menghitung.

    5. Hitung sel darah merah.a. Hati-hati tempat ruang penghitungan diisi di panggung mikroskop.b. Menggunakan daya yang rendah (perbesaran 10 x). menempatkan alun-alun pusat

    besar di kemudian tengah lapangan penglihatan. Periksa persegi besar untuk seluruh

    pemerataan sel darah merah

    c. Hati-hati mengubah ke perbesaran tinggi (40x)d. Pindahkan ruang menghitung sehingga persegi sudut kecil bagian atas kiri adalah

    sepenuhnya dalam bidang visi. Persegi ini dibagi lagi menjadi 16 kotak yang lebih kecil

    untuk kemudahan menghitung.

    e. Menghitung semua sel darah merah di alun-alun ini, mengingat untuk menghitung selpada dua dari margin luar tetapi tidak termasuk yang tergeletak di dua sisi lain di luar.

    f. Beberapa sel darah merah dapat berbaring di sisi mereka dan, karenanya, tidak munculsebagai bulat. Sel-sel ini dimasukkan dalam hitungan.

    g. Jika ada sel-sel darah putih di daerah yang sedang dihitung, tidak termasuk sel-seldalam hitungan Anda. (Sel darah putih biasanya jauh lebih besar dari sel darah merah

    dan tidak memiliki sebagai menghaluskan penampilan)

    h. Hitung sel darah merah yang masing-masing lima kotak kecil

  • 5/26/2018 modul

    4/26

    i. Hitung sel darah merah di sisi berlawanan dari ruang penghitungan suara di lima kotakyang sesuai kecil.

    6. Hitung jumlah sel darah merah untuk masing-masing jumlah merah dilakukan dan rata-ratadua hasil untuk laporan akhir

    # Sel dalam lima kotak x Koreksi untuk Pengenceran x 106

    RBC / L = ---------------------------------------------------------------- ------------------------

    Koreksi untuk Volume

    # Sel dalam lima kotak x 200 x 106

    RBC / L = ----------- ---------------------------------------------

    5 x 0,2 x 0,2 x 0,1

    Sebagai contoh:

    # Sel dalam lima kotak kecil = 400

    Pengenceran = 1: 200

    Jumlah volume = lima kotak kecil

    Konversi ke liter = x 106

    400 x 1,0 x 200 x 106

    RBC / L = ------------------------------------0,2

    = 4.0 x 1012

    A.3. PENGUKURAN HEMATOKRIT (METODE MIKROHEMATOKRIT)

    Prinsip

    Seluruh darah disentrifugasi untuk kemasan sel darah merah maksimum. Ruang yang

    ditempati oleh sel-sel darah merah diukur dan dinyatakan sebagai persentase dari volume darah.

    Spesimen

    Seluruh darah, menggunakan dipotassium ethyIene diaminetetraacetic asam (EDTA)

    sebagai antikoagulan tersebut. (EDTA cair diduga menyebabkan penurunan 2 sampai 3% pada

    hematokrit karena penyusutan sedikit dari sel-sel darah merah)

  • 5/26/2018 modul

    5/26

    Reagen dan Peralatan

    1. Mikrohematokrit tabung, sekitar 75 mm dengan lubang bagian dalam sekitar 1,2 mm.Duajenis tabung mikrohematokrit bisa dibeli: (1) mereka yang berisi heparin (kode warna

    dengan pita merah) sebagai antikoagulan, untuk digunakan dengan non-antikoagulasi

    darah secara keseluruhan, dan (2) warna tabung biasa (dikodekan dengan pita biru ) untuk

    digunakan dengan seluruh darah antikoagulasi. Tabung mikrohematokrit memiliki sekitar

    0,05 mL darah.

    2. Seperti tanah liat darah penyegelan.3. Mikrohematokrit centrifuge mampu menghasilkan RCF dari 10000 menjadi 15.000 g.

    Centrifuge harus mampu mencapai kecepatan maksimum dalam waktu 30 detik.

    4. Microhernatocrit tabung pembaca.

    Prosedur

    1. Biarkan darah kapiler atau tercampur seluruh antikoagulasi untuk memasukkan dua tabungmikrohematokrit sampai mereka sekitar tvvo pertiga penuh dengan darah. (Gelembung

    udara menunjukkan teknik yang buruk tetapi tidak mempengaruhi hasil tes).

    2. Tanda salah satu ujung tabung mikrohematokrit dengan bahan tanah liat denganmenempatkan ujung kering tabung ke dalam tanah liat dalam posisi vertikal (tabung

    mikrohematokrit membentuk sudut 900 dengan baki tanah liat). Steker harus 4 sampai 6mm. Membuat darah tertentu tidak dipaksa keluar bagian atas tabung mikrohematokrit

    selama proses ini

    3. Tempatkan dua tabung mikrohematokrit dalam alur radial kepala centrifuge persisberhadapan, dengan ujung tertutup dari pusat dari sentrifus.

    4. Centrifuge selama 5 menit5. Lepaskan tabung hematokrit sesegera centrifuge telah berhenti berputar. Tentukan hasil

    bagi kedua microhematocrits, dengan menggunakan perangkat tabung membaca

    mikrohematokrit. Hasil duplikat harus setuju dalam 1 unit (%). Jika tidak, ulangi

    prosedur.Hematokrit dapat dinyatakan dalam salah satu dari dua cara: (1) sebagai

    persentase, misalnya, 42%, atau, (2) sebagai pecahan desimal, misalnya, 0,42.

    A.4. PERHITUNGAN RETIKULOSIT

    Pendahuluan

    Sel darah merah berjalan melalui enam tahap perkembangan: sel pronormoblast,

    normoblast basofilik, normoblast orthochromic, retikulosit, dan matang darah merah.Empat

  • 5/26/2018 modul

    6/26

    tahap pertama biasanya terbatas pada sumsum tulang. Retikulosit, bagaimanapun, ditemukan di

    kedua sumsum tulang dan darah perifer. Jumlah retikulosit merupakan alat diagnostik yang

    penting. Hal ini merupakan cerminan dari jumlah produksi sel darah merah yang efektif terjadi di

    sumsum tulang.

    Prinsip Metode

    Setelah normoblast orthochromic kehilangan intinya, sejumlah kecil RNA tetap dalam sel

    darah merah, dan sel ini dikenal sebagai sebuah retticulocyte. Untuk mendeteksi keberadaan

    RNA, sel-sel darah merah harus ternoda saat mereka masih hidup. Proses ini disebut pewarnaan

    supravital.

    Reagen dan Peralatan

    1. Pewarna retikulosit dapat dipilih salah satu dari berikut:a. Larutan pewarna Metilen biru yang baru:

    Metilen biru yang baru (Cl 52030) 1,0 g

    Sodium klorida 0,89 g

    Air suling 100 mL

    b. BriIliant cresyl biru:Brilliant cresyl biru 1,0 gNatrium klorida 0,85% 99 ml

    Campur selama minimal 15 menit, filter, dan tempatkan pada suhu kamar. Saring

    kembali pada hari penggunaan.

    2. Kaca slide3. Tabung mikrohematokrit4. Tabung uji yang kecil5. Mikroskop

    Spesimen

    Seluruh darah (1 mL), menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler

    juga dapat digunakan.

    Prosedur

    1. Tempat tiga tetes retikulosit disaring noda dalam tabung reaksi kecil2. Tambahkan tiga tetes tercampur seluruh darah ke tabung yang berisi noda

  • 5/26/2018 modul

    7/26

    3. Campur tabung dan biarkan berdiri pada suhu kamar, atau inkubasi pada 37C, selama 15menit. Hal ini memungkinkan retikulosit waktu yang cukup untuk mengambil noda

    4. Pada akhir 15 menit, campuran isi tabung dengan baik5. Siapkan irisan beberapa atau pap berputar dan biarkan mengering.6. Tempatkan slide pertama di panggung mikroskop dan, dengan menggunakan tujuan daya

    rendah (10x), menemukan suatu wilayah di bagian tipis dari BTA dimana sel darah merah

    yang merata dan tidak menyentuh satu sama lain. Hati-hati mengubah ke tujuan

    perendaman minyak (100x) dan selanjutnya mencari area di mana ada sekitar 100 sampai

    200 sel darah merah per lapangan minyak imersi.

    7. Segera setelah daerah yang tepat dipilih, retikulosit dapat dihitung. Sel-sel darah merahakan menjadi lampu hijau untuk media dalam warna. RNA hadir dalam retikulosit noda biru

    tua. Retikulum mungkin berlebihan atau jarang, tergantung pada tahap sel pembangunan;

    yang retikulosit termuda menunjukkan sejumlah besar RNA sedangkan retikulosit lebih

    dewasa menunjukkan hanya sejumlah kecil RNA. Menghitung semua sel darah merah

    dalam kemudian field pertama pada satu counter sel. Pada saat yang sama, penghitungan

    retikulosit di bidang yang sama dengan counter sel kedua. Untuk dipertimbangkan sebagai

    retikulosit sel merah harus berisi dua atau lebih biru pewarnaan partikel. Pindahkan

    kemudian geser seperti yang dijelaskan dalam prosedur your diferensial Count,

    menggunakan metode cross-sectional, sampai semua retikulosit dalam 1000 sel darahmerah telah dihitung.

    8. Rata-rata dua hasil dan menghitung jumlah retikulosit seperti yang ditunjukkan di bawahini.

    Jumlah retikulosit

    Retikulosit =% dalam 1000 sel darah merah

    ---------------------------------------------

    10

    A.5. INDEKS ERITROSIT

    Para sel darah merah (RBC) indeks yang digunakan untuk menentukan isi ukuran dan

    hemoglobin sel darah merah. Mereka terdiri dari volume sel hidup rata-rata (MCV), Mean

    corpuscular hemoglobin (MCH), dan Mean konsentrasi hemoglobin sel hidup (MCHC).Dengan

    meluasnya penggunaan counter sel otomatis yang secara rutin menentukan indeks RBC pada

  • 5/26/2018 modul

    8/26

    setiap sampel darah diuji, indeks yang biasa digunakan sebagai bantuan dalam diagnosisng dan

    membedakan anemia.

    Mean corpuscular volume (MCV)

    MCV dihitung dari jumlah RBC dan hematokrit dan menunjukkan volume rata-rata RBC di

    femtoliters (FL).

    Rumusnya:

    Hct x 103fL

    MCV = -----------------

    RBC/L

    Contoh:

    Hct = 45% (or 0,45 L)

    RBC = 5.0x10l2/L

    1 L = 1015/L

    0.45 x 1015/L

    MCV = ------------------

    5.0 x 1012/L

    = 0.09 x 103

    fL= 90 fL

    Normal range untuk MCV: 80 sampai 100 fL

    Mean corpuscular hemoglobin (MCH)

    MCH dihitung dari HB dan RBC count, menunjukkan berat rata-rata Hb di RBC, dan harus

    selalu berkorelasi dengan MCV dan MCHC.

    Rumusnya:

    Hb (g/L)

    MCH = -------------- pg

    RBC/L

    Example:

    Hb = 15.0 g/dL

  • 5/26/2018 modul

    9/26

    RBC = 5.0 x 1012/L

    1 g = 1012pg

    15 x 1013pg/L

    MCH = ---------------------

    1.0 x 1012/L15 x 10pg/L

    = -------------------

    5.0/L

    = 30 pg

    Normal range untuk MCH: 27 sampai 31 pg

    Konsentrasi mean corpuscular hemoglobin (MCHC)

    MCHC dihitung dari Hb dan Hct dan merupakan ekspresi dari konsentrasi rata-rata Hb di

    RBC.

    Rumusnya:

    Hb (g/dL) x 100%

    MCHC = -------------------------

    Hct

    atau,

    Hb g/dL

    MCHC = ---------------------------------------

    Hct (expressed as a fraction)

    Contoh:

    Hb = 15.0 g/dL

    Hct = 45% (or 0.45)

    1 g = 1012pg

    15.0 g/dL x 100%

    MCHC = --------------------------

    45 g /dL

  • 5/26/2018 modul

    10/26

    = 0.333 x 100%

    = 33.3%

    atau ,

    15.0 g/dL

    MCHC = ----------------

    0.45

    = 33.3 g /dL

    Normal range untuk MCHC: 31 sampai 36%, atau 31 sampai 36 g/dL

    A.6. PERIPHERAL FILM DARAH

    Pemeriksaan apus darah perifer (PBF) adalah bagian penting dari setiap pemeriksaan

    hematologis dan dapat memberikan banyak petunjuk untuk membantu diagnosis klinis.Film

    darah harus dipersiapkan dengan baik, juga ternoda dan diperiksa secara sistematis.

    PERSIAPAN: harap ingat bagaimana mendapatkan hapusan darah ideal (laboratorium skiII itu

    pedoman blok 8)

    PROSEDUR

    Film ini pertama harus diperiksa di bawah daya yang rendah untuk menilai kualitas dari

    persiapan, jumlah dan distribusi, dan pewarnaan sel, dan untuk mencari daerah di mana sel-

    sel merah yang merata dan tidak terdistorsi.

    Periksa hapusan darah menggunakan kekuatan objektif (10x) rendah.

    Sel-sel darah merah dan putih dan trombosit harus benar ternoda

    Periksa bahkan ada distribusi dari sel darah putih pada smear.

    Perkirakan jumlah sel darah putih (dengan mencatat jumlah sel putih / lapangan dan jumlah

    sel darah putih dalam kaitannya dengan jumlah sel darah merah). Ini harus setuju dengan

    hasil tes yang diperoleh. Jika tidak, jumlah putih harus diulang.

    Periksa tepi perifer tipis dari BTA (ekor) jika pap baji sedang digunakan). Jika ada

    peningkatan jumlah sel darah putih di daerah ini jumlah sel diferensial mungkin tidak

    akurat. Jika ada gumpalan trombosit, tubuh Pap kemudian dapat menunjukkan penurunan

    trombosit. Dalam situasi seperti itu, hapusan darah harus dibuang dan satu lagi dibuat.

  • 5/26/2018 modul

    11/26

    Ketika memindai hapusan darah, penting untuk dicatat sesuatu yang tidak biasa atau tidakteratur, seperti besar, sel-sel abnormal atau mencari rouleaux pembentukan sel darah

    merah.

    Pilih daerah hapusan darah di mana penghitungan diferensial adalah untuk memulai,

    menempatkan setetes minyak pada slide dan hati-hati mengubah ke tujuan minyak imersi

    (100 x)

    Setelah memilih area yang cocok, perbesaran 40 x dapat digunakan untuk penilaian yang

    lebih kritis. Akhirnya, tujuan daya tinggi (100 x) harus digunakan untuk melihat detail halus dalam

    sel-sel atau sesuatu yang mencurigakan. Sel-sel merah, dan platelet Ieucocytes semua harus

    sistematis diperiksa.

    Ketika mempelajari Pap bernoda, tidak maju terlalu jauh ke daerah tebal slide. Karakteristik

    morfologi dari sel-sel sulit untuk membedakan di daerah ini. Sebaliknya, tidak

    menggunakan porsi yang sangat tipis pap mana sel-sel darah merah tampak terisi penuh

    dengan hemoglobin, umumnya terdistorsi dan tidak menunjukkan gambaran morfologi

    benar.

    Morfologi abnormal tersebut dapat dinilai sebagai 1+ (ringan), 2+ (moderat) atau 3+

    (ditandai) untuk menunjukkan derajat keparahan.

    DAFTAR ISTILAH YANG DIGUNAKAN UNTUK DESCRIBE MORFOLOGI SEL MERAH

    Periksa morfologi sel darah merah adalah daerah tipis slide dimana daerah terbaik pada

    hapusan darah untuk sel merah yang hampir menyentuh tetapi tidak tumpang tindih hanya

    sedikit dari sel-sel darah merah yang sedikit tumpang tindih. Perhatikan setiap variasi dari normal

    dan mengklasifikasikan penyimpangan ini sebagai ringan, sedang, atau ditandai (atau 1 +, 2 +, 3 +).

    Sel darah merah biasanya ukuran seragam dan bentuk. Mereka memiliki bulat, garis halus

    dan noda dengan komponen zat warna eosin Romanowsky, terutama di pinggiran sel karena

    bentuk cekung ganda.

    Pada penyakit, kelainan pada gambar merah-sel berasal dari empat penyebab utama:

    1. Abnormal eritropoiesis2. Tidak memadai sintesis hemoglobin3. Kerusakan pada sel setelah meninggalkan sumsum tulang4. Upaya oleh sumsum tulang untuk mengkompensasi anemia dengan mempercepat

    eritropoiesis.

  • 5/26/2018 modul

    12/26

    SEL DARAH MERAH

    Periksa untuk:

    a) Ukuran dan bentukb)Relatif isi hemoglobinc) Polychromatophiliad) Inklusie) Pembentukan rouleaux atau aglutinasi

    DIBANDINGKAN DENGAN UKURAN

    Anisocytosis: variasi dalam ukuran. Ini adalah penemuan yang umum dan tidak spesifik

    Normositik: ukuran normal. Mean diameter sel (MDC) = 7,2 im

    Makrositik: lebih besar dari biasanya. Mungkin menunjukkan perubahan megaloblastik atau

    retikulositosis

    Mikrositik: lebih kecil dari biasanya. Anemia mikrositik termasuk defisiensi Fe dan talasemia

    DIBANDINGKAN DENGAN WARNA

    Normokromik: warna sel normal (pucat di tengah lebar 1/3 rd lebar). Defisiensi Fe adalah yang paling umum

    tetapi tidak satu-satunya penyebab

    Polychromasia: warna biru abu-abu. Mencerminkan adanya retikulosit yang mengandung

    RNA basofilik.

    RELATIF SHAPE

    Poikilocytosis: Variasi dalam bentuk. Panjang non spesifik. Mungkin mencerminkan

    dyserythropoiesis atau kerusakan pada sirkulasi sel.

    Ovalocytosis: berbentuk oval atau telur, misalnya keturunan ovalocytosis. Macrocytes oval

    fitur pada anemia megaloblastik

    Elliptocytosis: Sel adalah elips (berbentuk cerutu), misalnya keturunan elliptocytosis. "sel

    pensil " terlihat pada defisiensi Fe

  • 5/26/2018 modul

    13/26

    Sferositosis: keturunan bulat atau akibat dari kerusakan sel, misalnya luka bakar hemolisis,kekebalan atau sepsis

    Schistocytosis: fragmentasi (fragmen kurang dari setengah volume sel merah normal),

    misalnya kerusakan mekanis.

    Stomatocytes: sel memiliki celah-seperti daerah pucat pusat, misalnya keturunan jenis,

    penyakit hati dan sindrom Rhnull.

    Sasaran sel: patri daerah Pusat. Relatif kelebihan membran terhadap isi sel. Penyakit hati,

    Hb-pathies

    Sel tear drop: pear berbentuk memanjang dengan titik tunggal atau ekor. Fitur ekstra-

    medullar eritropoiesis

    Helm Sel / Sel Bite: satu permukaan yang tidak teratur dengan proyeksi penunjuk (tanduk)

    pada satu atau kedua ujungnya

    Sickle cell: sel merah berbentuk sabit, karakteristik penyakit sel sabit, misalnya HbSS, HbSC,

    HbSD

    Spiculated Sel Merah

    a) Echinocytes / Crenation: regulary berspekulasi (biasanya reversibel). 10-30 distribusi merataspikula

    b)Acanthocytes: tidak teratur berspekulasi (ireversibel). Spikula 5-10 dari berbagai panjang,tidak teratur didistribusikan. "ceil duri" istilah telah bingung dengan baik (a) dan (b) dan

    dengan demikian telah kehilangan dukungan

    INKLUSI SEL MERAH

    Erythroblastaemia: eritroblast (berinti sel darah merah) dapat ditemukan dalam setiap

    anemia berat, misalnya thalassemia mayor. Karakteristik penyakit hemolitik pada bayi

    baru lahir. Sejumlah kecil dapat ditemukan pada bayi normal saat lahir dan jumlah besar

    pada bayi prematur.

    Howell-Jolly Badan: Ini adalah sisa-sisa nuklir (DNA) dan ditemukan ketika limpa telah

    dihapus atau tidak berfungsi. Juga fitur anemia megaloblastik.

    Basofilik stippling: Hasil dari agregasi dari RNA

    a) Belang-belang (baik) Basophilia: terkait dengan polychromasiab)Kursus basofilik stippling: didefinisikan dengan baik, hitam inklusi, tersebar di sel

  • 5/26/2018 modul

    14/26

    Siderotic / Pappenheimer Badan: butiran yang mengandung besi. Indikasi anemiasidferoblastic

    PEMBAGIAN SEL

    Rouleaux Formasi: Non-spesifik fenomena ditingkatkan dengan protein plasma tinggi.Sel-

    sel merah agregat dan kebohongan tatap muka di sisi mereka seperti tumpukan koin.

    Autoagglutination: Sel agregat menjadi gumpalan besar. Biasanya karena jenis dingin

    autoantibody

    PEMERIKSAAN SEL DARAH PUTIH

    1. Periksa pemerataan dan memperkirakan jumlah ini (juga, mencari adanya kelainan kasarhadir pada smear)

    2. Lakukan hitungan diferensial leukosit3. Istilah meninggalkan shift dan shift kanan mengacu pada tingkat Iobulatio ditemukan di

    neutrophiIs. Jika jumlah yang berbeda menunjukkan adanya sel-sel granulocytic belummatang, ini dinamakan pergeseran ke kiri dan dapat ditemukan pada gangguan seperti

    Ieukemias dan infeksi bakteri. Pergeseran ke kanan mengacu pada peningkatan jumlah

    neutrofil hypersegmented

    4. Pemeriksaan untuk kelainan morfologi

    PERHITUNGAN JUMLAH LEUKOSIT

    Perbedaan manual jumlah sel darah putih dilakukan untuk menentukan jumlah relatif

    masing-masing jenis sel darah putih hadir dalam darah. Selalu ada beberapa distribusi yang tidak

    merata dari jenis sel dalam setiap film darah:

    Neutrofil dan monosit lebih memilih tepi dan ekor

    Limfosit cenderung tinggal di tengah film

    Distribusi tergantung pada perbedaan gravitasi lengket, ukuran dan specihc sel.

    Pada saat yang sama, sebuah studi sel darah merah, sel darah putih dan trombosit

  • 5/26/2018 modul

    15/26

    morfologi dilakukan. Diferensial dan review smear harus dilakukan setelah jumlah darah telah

    selesai. Dalam cara ini, pemeriksaan Pap juga dapat digunakan untuk memeriksa jumlah sel darah

    putih.

    Dalam keadaan penyakit jenis sel darah putih tertentu dapat menunjukkan peningkatan

    mutlak dalam jumlah dalam darah. Umum penyakit yang menunjukkan peningkatan jumlah jenis

    sel tertentu.

    Jika jumlah yang berbeda menunjukkan adanya sel-sel granulocytic belum matang, ini

    dinamakan pergeseran ke kiri dan dapat ditemukan pada gangguan seperti Ieukemias dan infeksi

    bakteri. Pergeseran ke kanan mengacu pada peningkatan jumlah neutrofil hypersegmented.

    Semua Ieucocytes ditemui harus diklasifikasikan. Hasil dari setiap jenis sel ini kemudian

    dinyatakan sebagai persentase atau, lebih tepat sebagai jumlah mutlak dari jumlah total sel putih.

    Neutrofil

    Berikut ini adalah fitur untuk mencari.

    Butiran: Berat, pewarnaan gelap, butiran beracun merupakan ciri khas dari infeksi

    bakteri. Sebuah polys granular berhubungan dengan Ieukaemias myeloid.

    Vakuola: Tidak biasanya jelas tetapi sering ditemukan pada infeksi bakteri. Vacuolation

    dapat berkembang pada darah normal didiamkan in vitro.

    Inti: Istilah meninggalkan shift dan shift kanan mengacu pada tingkat Iobulatio ditemukandi neutrofil. Pergeseran ke kiri, dengan band dan metamyelocytes, adalah umum pada

    sepsis berat. Pergeseran ke kanan dengan hypersegmentation (5 atau lebih lobus)

    menyimpulkan perubahan megaloblastik. Pelger-Huet anomali adalah karakteristik

    diwariskan jinak di mana netrophils tidak pernah memiliki lebih dari dua lobus. Bentuk

    Pelgeroid (pseudo-Pelger-Huet) ditemukan dalam hubungan dengan leukemia.

    Eosinofil dan basofil

    Hypersegmentation, agranularity dan inklusi tubuh fitur abnormal pada cosinophils dan

    basofil. Temuan tersebut paralel mungkin neutrofil morfologi dan mungkin juga mencerminkan

    kondisi klinis atau warisan yang mendasarinya.

    Monosit

    Mungkin berisi inklusi abnormal. Seperti dengan granulosit ini bisa menunjukkan salah

    satu dari berbagai kondisi diwariskan. Phagocytosed merah sel dapat dilihat pada anemia

    hemolitik autoimun.

  • 5/26/2018 modul

    16/26

    Limfosit

    Limfosit atipikal merupakan ciri khas dari infeksi virus, misalnya campak influenza, hepatitis

    atau demam berdarah. Sel-sel yang digambarkan sebagai "pIasmacytoid" jika sitoplasma

    mereka sangat biru, yaitu menyerupai sel plasma.

    "Limfosit reaktif" khas dari mononukleosis menular. Sel-sel ini cenderung besar dan

    menyerupai monosit dengan basophilicedges ke sitoplasma mereka.

    PEMERIKSAAN TROMBOSIT

    Trombosit:

    1. Perkiraan jumlah saat ini2. Periksa untuk kelainan morfologi

    Perkiraan jumlah ini atau perkiraan jumlah trombosit juga dibuat.

    Seperti yang disebutkan sebelumnya, estimasi platelet dilakukan underthe 100 x lensaminyak imersi objektif. Dalam suatu daerah pap mana sel-sel darah merah hampir tidak

    menyentuh, jumlah trombosit di 10 Bidang perendaman Minyak berbeda dihitung. Rata-rata

    jumlah trombosit per OIF X 20000 mendekati jumlah trombosit. Sebagai contoh, 12 - 16 trombosit

    per OIF akan sama dengan sekitar 280.000 platelets/mm3 (280x109/L) dan akan dianggap

    memadai. Normal (baji) preparat (jumlah sel darah merah yang normal dan jumlah trombosit

    normal) harus menunjukkan sekitar 8 sampai 20 trombosit per bidang di daerah ini.

    Sebuah menyatakan perkiraan kasar bahwa jika ada 7-25 trombosit per OIF, jumlah

    platelet adalah cukup, asalkan ada sekitar 200 sel darah merah per OIF. Dalam situasi di mana

    pasien anemia atau memiliki erythrocytosis, proporsi relatif dari trombosit pada sel-sel darah

    merah yang diubah. Dalam hal ini, formula yang lebih terlibat untuk perkiraan trombosit dapat

    digunakan:

    Rata-rata no. trombosit X Total jumlah sel darah merah

    -------------------------------------------------------------------------------

    200

  • 5/26/2018 modul

    17/26

    200 adalah rata-rata jumlah sel darah merah per OIF di apatient dengan jumlah sel darah merah

    yang normal.

    Periksa untuk kelainan morfologi

    Dalam keadaan patologis tertentu, trombosit mungkin muncul butiran atau

    diperbesar.Trombosit besar atau raksasa muncul dalam hubungan dengan omset trombosit

    meningkat (gangguan perdarahan) atau bisa menunjukkan cacat trombosit, misalnyaBernard

    Soulier sindrom. Trombosit biasanya rumpun jika film dibuat langsung membentuk jari-

    tusukan. Kegagalan untuk melakukannya dapat menunjukkan kelainan pada fungsi.

    Satellitosis trombosit adalah fenomena yang hanya terjadi dalam darah EDTA. Trombosit

    mematuhi neutrofil dan muncul seperti satelit di sekitar sel. Mungkin tidak ada signifikansi klinis

    untuk fenomena ini. Jumlah trombosit yang rendah secara salah sebagai "satelit" tidak

    termasuk. Darah harus teringat langsung ke dalam sistem menipiskan panduan trombosit

    (menghindari EDTA) untuk mendapatkan jumlah trombosit akurat.

    B. SESI 2

    B.1. WAKTU PERDARAHAN (METODE IVY)

    Prinsip

    Sebuah manset tekanan darah ditempatkan pada lengan pasien di atas siku, inflasi, dan

    dipertahankan pada tekanan konstan sepanjang prosedur. Satu (atau dua) sayatan standar yang

    dibuat pada permukaan volar lengan bawah. Lamanya waktu yang diperlukan untuk

    menghentikan perdarahan dicatat sebagai waktu perdarahan.

    Reagen dan Peralatan

    1. Manset tekanan darah2. Perangkat saat pendarahan3. Stopwatch4. Kertas filter circular5. Alkohol persiapan bantalan6. Perban kupu-kupu

  • 5/26/2018 modul

    18/26

    Prosedur

    1. Cari area untuk waktu perdarahan. Lengan pasien harus diperluas dengan permukaan volarmenghadap ke atas. Dimulai pada jari tengah bergerak ke atas lengan dalam garis lurus

    sampai 5 cm di bawah lipatan bawah. Daerah ini di bagian otot dari permukaan Volar

    lengan bawah, 5 cm di bawah lipatan dalam siku, adalah situs tes standar untuk

    menusuk. Daerah ini harus bebas dari vena permukaan, memar, bekas luka, dan

    pembengkakan. (Mencukur daerah tersebut jika rambut berlebihan hadir)

    2. Bersihkan situs dengan spons alkohol dan biarkan kering3. Tempatkan manset tekanan darah pada lengan pasien di atas siku. Meningkatkan tekanan

    sampai 40 mm Hg dan tahan tekanan ini tepat untuk seluruh prosedur. Sayatan harus

    dibuat dan waktu perdarahan dimulai dalam waktu 30 sampai 60 detik setelah manset

    tekanan darah telah meningkat.

    4. Siapkan perangkat waktu perdarahan. Posisi itu dalam arah yang benar dan daerah yangsesuai pada lengan, dengan hanya menggunakan bahwa jumlah tekanan ke bawah

    sehingga kedua ujung yang menyentuh kulit dan perangkat tidak menyebabkan

    lekukan.(Terlalu banyak tekanan Jika diterapkan dan perangkat menekan kulit, sayatan

    akan terlalu dalam)

    5. Aktifkan memicu dan memulai stopwatch. Hapus perangkat sekitar 1 detik setelahmembuat sayatan.

    6. Menghapuskan darah dari situs tusukan pada bagian yang bersih dari kertas saringmelingkar setiap 30 detik. Kertas saring tidak boleh menyentuh luka setiap saat.

    7. Bila perdarahan berhenti, stop watch dan melepaskan manset tekanan darah. Catathasilnya. Ulangi pemeriksaan dua kali, melaporkan hasil rata-rata.

    8. Tempatkan pembalut kupu-kupu di atas lokasi tusuk, dan menyarankan pasien untukmenjaga perban di tempat selama 24 jam.

    B.2. JUMLAH TROMBOSIT (METODE LANGSUNG; REES-ECKER)

    Pendahuluan

    Jumlah trombosit adalah penting dalam membantu untuk mendiagnosis gangguan

    perdarahan. Trombosit berfungsi terutama dalam hemostasis (penghentian perdarahan) dan

    dalam menjaga integritas kapiler. Trombosit adalah sulit untuk menghitung. Mereka kecil, hancur

    dengan mudah, dan sulit dibedakan dari kotoran.

    Prinsip Metode

  • 5/26/2018 modul

    19/26

    Darah diencerkan dengan larutan yang mengandung Biru cresyl Brilliant sehingga

    trombosit tampak biru cerah. Trombosit kemudian dihitung menggunakan hemositometer. Hasil

    digandakan diperiksa dengan pemeriksaan trombosit pada Pap Wright / Giemza ternoda.

    Spesimen

    Seluruh darah (1 mL), menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler

    juga dapat digunakan.

    Reagen dan Peralatan

    1. Rees-Ecker (untuk mencairkan trombosit):Sodium sitrat 3,8 g

    Brilliant cresyl biru 0,1 g

    Formaldehid 40% 0,2 ml

    Air suling 100 mL

    Campur dan saring sebelum digunakan.

    2. Pipa eritrosit3. Hemositometer4. Obyek kaca, Wright / Giemsa stain5. Mikroskop6. Cawan petri7. Kertas saring

    Prosedur

    1. Mengambil darah sampai persis tanda 0,5 dalam pipet hitungan merah dan encerkansampai tanda 101 dengan jumlah cairan merah menipiskan, sehingga membuat 1:200

    pengenceran darah.

    2. Campur pengenceran selama 3-5 menit. Bersihkan ruang penghitungan3. Siapkan ruang lembab sebagai berikut: mendapatkan cawan petri dan selembar kertas

    filter kira-kira diameter yang sama dengan cawan petri. (Entah atas atau cawan petri

    bawah dapat digunakan). Seksama membasahi kertas saring dan tempat di bagian atas

    cawan petri sehingga mematuhi piring.

    4. Ketika sampel darah diencerkan secara memadai dicampur, mengisi satu sisi dari ruangpenghitungan dengan dilusi tersebut.

  • 5/26/2018 modul

    20/26

    5. Tempatkan ruang lembab lebih hemositometer dan memungkinkan persiapan untuk dudukselama 15 sampai 20 menit.

    6. Hitung trombosit:a. Hati-hati tempat hemositometer pada tahap mikroskop.b. Menggunakan daya yang rendah (10 x objektif) menempatkan alun-alun pusat besar di

    tengah bidang penglihatan. Hati-hati mengubah ke tujuan kering tinggi

    (40x). Trombosit muncul sebagai kecil, bulat, oval, atau memanjang partikel yang

    sangat ditarik dan noda warna kebiruan cahaya.

    c. Hitung trombosit dalam 2 kotak besar di alun-alun sudut. Kotak disarankan untukmenggunakan adalah mereka diberi label dengan W (Gambar 2)

    7. Hitung jumlah trombosit / L seperti berikut:

    # Sel dihitung Koreksi x untuk Pengenceran x 106

    PLTS / L = ---------------------------------------------------- -----------------

    Koreksi untuk Volume

    # Sel terhitung x 200 x 106

    PLTS / L = ---------------------------------------

    2 x 1 x 1 x 0,1

    Sebagai contoh:

    # Sel dalam dua kotak besar = 400

    Pengenceran = 1: 200

    Volume dihitung = 2 kotak besar

    Konversi ke liter = x 106

    400 x 1,0 x 200 x 106

    PLTS / L = ----------------------------------

    0.2

    = 4,0 x 1011

    8. Scan smear dengan pewarnaan Wright atau Giemza dan memperkirakan jumlah trombosituntuk cross check dengan hasil atas. Estimasi jumlah lubang / mmc dengan metode tidak

    langsung (hapusan darah) = jumlah lubang pada 20 pandangan perendaman x 1000

  • 5/26/2018 modul

    21/26

    B.3. PT (PROTHROMBIN TIME)

    Prinsip

    Kalsium dalam darah keseluruhan terikat dengan natrium sitrat, sehingga mencegah

    koagulasi. Jaringan tromboplastin, yang telah ditambahkan kalsium, adalah dicampur dengan

    plasma, dan waktu pembekuan dicatat. (Faktor VII bereaksi dengan faktor jaringan

    [tromboplastin] dengan adanya ion kalsium untuk mengaktifkan faktor X. Mekanisme koagulasi

    berlanjut dari sana.)

    Reagen dan Peralatan

    1. Tabung air, 37C2. Reagen tromboplastin-kalsium klorida3. Normal plasma kontrol4. Uji tabung, 13 x 100 mm5. Stopwatch

    Spesimen

    Citrated plasma: 1 bagian natrium sitrat 0,11 M sampai 9 bagian seluruh darah (0,5 ml

    sitrat + 4,5 ml darah utuh). Pengujian harus dilakukan dalam waktu 2 jam setelah spesimen

    diambil ketika plasma dipertahankan pada suhu kamar dan dalam waktu 2 sampai 5 hari ketikaplasma disimpan pada -20 C.

    Oksalat Plasma: 1 bagian natrium oksalat dan 9 bagian darah.

    Prosedur

    1. Centrifuge spesimen segera mungkin setelah pengumpulan darah untuk memperolehplasma miskin trombosit (10 menit, 3000 rpm)

    2. Pengujian harus dilanjutkan segera, atau tutup tabung disentrifugasi atau plasma danmenyelesaikan prosedur dalam 2 jam.

    3. Pipet 0,2 mL reagen tromboplastin-kalsium dalam jumlah yang sesuai dari 13 100 mm xtabung reaksi. Hangatkan tabung reaksi dalam penangas air selama minimal 1 menit,

    sampai mereka telah mencapai 370C. Masa inkubasi campuran ini tidak kritis setelah

    mencapai 37C

    4. Menetaskan plasma untuk 2 sampai 3 menit, hingga mencapai 37C, plasma harusdiinkubasi selama tidak lebih dari 5 menit setelah mencapai 37C

  • 5/26/2018 modul

    22/26

    5. Paksa Pipet 0,1 mL plasma pasien ke dalam tabung reaksi berisi 0,2 ml tromboplastin-kalsium campuran dan sekaligus memulai stopwatch.

    6. Campur isi tabung, keluarkan tabung dari air mandi, dan lap kering. Dengan lembutmemiringkan tabung bolak-balik sampai bentuk gumpalan, di mana titik waktu

    dihentikan.Catat waktu koagulasi.

    7. Setiap plasma uji dan kontrol harus dilakukan dalam rangkap ketika metode manual yangdigunakan.

    8. Rata-rata dua kali pembekuan dan melaporkan hasil pasien bersama dengan kisaran normaluntuk tes seperti yang dilakukan di laboratorium Anda.

    B.4. APTT (AKTIF PARSIAL WAKTU TROMBOPLASTIN)

    APTT adalah prosedur yang paling berguna untuk skrining rutin gangguan koagulasi

    dalam sistem intrinsik, untuk mendeteksi adanya sirkulasi antikoagulan (inhibitor), dan untuk

    pemantauan terapi heparin. lt mengukur faktor-faktor tersebut hadir dalam mekanisme koagulasi

    intrinsik kecuali untuk trombosit dan faktor XIII (VLL faktor tidak diukur karena dalam sistem

    ekstrinsik).

    Prinsip

    Kalsium dalam darah keseluruhan terikat oleh antikoagulan natrium sitrat untukmencegah koagulasi. Plasma, setelah sentrifugasi, berisi semua faktor intrinsik kecuali kalsium

    dan platelet. Kalsium, sebagai pengganti untuk fosfolipid trombosit (tromboplastin parsial), dan

    penggerak (untuk memastikan aktivasi maksimal), ditambahkan dengan plasma. Waktu yang

    diperlukan untuk plasma untuk membeku adalah waktu tromboplastin parsial teraktivasi.

    Reagen dan Peralatan

    1. Tabung air, 37C2. Kalsium klorida, 0,025 M:

    Kalsium klorida-anhidrida 1,38 g

    Aquades 500 ml

    3. Partial tromboplastin mengandung penggerak.4. Normal kontrol plasma5. Uji tabung, 13 x 100 mm6. Stopwatch7. Tabung es

  • 5/26/2018 modul

    23/26

    8. Mikropipet 0,1 ml

    Spesimen

    Citrated plasma: 1 bagian natrium sitrat 0,11 M sampai 9 bagian darah.

    Prosedur

    1. Centrifuge spesimen sesegera mungkin setelah pengumpulan untuk memperoleh plasmamiskin trombosit. Centrifuge pada 3000 rpm dalam 10 menit, kemudian menempatkan

    plasma di tabung es.

    2. lncubate jumlah yang cukup kalsium klorida 0,025 M pada 37C.3. Pipet 0,1 ml kontrol plasma (atau plasma pasien) ke dalam tabung reaksi 13x100 mm, taruh

    dalam penangas air selama 1 menit.

    4. Pipet 0,1 ml parsial tromboplastin (berisi aktivator) ke dalam tabung reaksi yang berisikontrol (atau pasien) plasma.

    5. Campur isi tabung dengan cepat dan tempatkan dalam bak air 370 C selama 2-3 menit.6. Setelah tepat 3 menit, paksa pipet 0,1 ml pra-hangat klorida kalsium ke dalam tabung, dan

    sekaligus memulai stopwatch.

    7. Campur tabung tes segera setelah menambahkan kalsium klorida. Biarkan tabung reaksiuntuk tetap air mandi sementara lembut memiringkan tabung setiap 5 detik. Pada akhirtabung 20 detik, menghapus, tabung uji dari air mandi. Cepat menyeka bagian luar tabung

    reaksi dengan kain kasa bersih sehingga isi tabung terlihat jelas.

    8. Dengan lembut miringkan tabung reaksi bolak-balik sampai bentuk gumpalan, di mana titikwaktu dihentikan.

    9. Ketika pengujian manual dilakukan, kontrol dan pasien spesimen plasma harus dijalankandalam rangkap dua, dan hasilnya dirata-ratakan untuk memperoleh laporan akhir.

    B.5. PENGELOMPOKAN DARAH

    Prinsip

    Prosedur tes ini didasarkan pada prinsip aglutinasi. Sel darah merah pengolahan antigen

    akan mengaglutinasi saat diuji dengan antibodi yang sesuai.

    Koleksi spesimen

    Gambarlah sebuah spesimen darah dengan atau tanpa antikoagulan, dengan

    menggunakan teknik proses mengeluarkan darah dapat diterima. Pengujian harus dilakukan

  • 5/26/2018 modul

    24/26

    sesegera mungkin untuk meminimalkan kemungkinan reaksi negatif palsu positif atau palsu yang

    terjadi karena kontaminasi atau penyimpanan yang tidak tepat dari spesimen.

    Reagen dan Peralatan

    Monoklonal reagen ABO dibuat dari supernatans budaya invitro dari hibridisasi

    imunoglobulin yang mensekresi garis mouse sel. Antibodi Setiap diencerkan dalam buffer fosfat

    yang mengandung natrium klorida, EDTA dan sapi albumin untuk memberikan reagen yang

    dioptimalkan untuk digunakan dalam tes tabung, slide dan lempeng. Anti-A dengan asam

    berwarna biru (paten biru) pewarna, Anti-B adalah berwarna dengan asam (tatrazine) pewarna

    kuning, dan Anti-A, B tidak berwarna. Reagen ini mengandung natrium azida 0,1% sebagai

    pengawet dan harus digunakan sebagai disediakan.

    Prosedur (tehnik-slide Test)

    1. Siapkan suspensi eritrosit 10%:Isi tabung gelas dengan 3 tetes darah dan garam, tutup dengan parafin atau plastik

    dan campuran lembut. Centrifuge 1000 rpm dalam waktu 1 menit dan limbah

    supernatan. Ulangi 3 kali, lalu encerkan dengan 27 tetes garam sehingga mendapatkansuspensi eritrosit 10%.

    2. Taruh di atas slide kaca pada suhu kamar (18-25C):1 volume reagen pengelompokan ABO

    1 volume sel 10% tersuspensi dalam plasma sendiri atau kelompok mereka kompatibel

    atau serum

    3. Menggunakan aplikator bersih, mencampur reagen dan sel di area seluas sekitar 20x40 nm.4. Perlahan-lahan miringkan slide maju mundur dan mengamati untuk aglutinasi untuk jangka

    waktu tidak lebih dari dua menit.

    Catat hasilnya:

    Recipient (pasien) ditambah sel merah

    ABO group (Reagent) Anti-A (Reagent) Anti-B (Reagent) Anti-A,B

    A

    B

    AB

    ++++

    -

    ++++

    -

    ++++

    ++++

    ++++

    ++++

    ++++

  • 5/26/2018 modul

    25/26

    O - - -

    B.6. UJI SILANG = LINTAS PENCOCOKAN

    Definisi:

    Ujian besar adalah pemeriksaan serum pasien dan eritrosit donor.

    Tes kecil adalah pemeriksaan serum plasma donor / dan eritrosit pasien.

    Tujuan:

    Untuk mendeteksi antibodi lengkap atau tidak lengkap yang terkandung dalam serum

    pasien atau donor untuk menghindari transfusi hemolitik.

    Prosedur:

    1. Tahap I atau ruang fase suhu, dilakukan dalam medium garam. Antibodi dingin (antibodilengkap dari kelas M lg) dapat terdeteksi dalam contoh fase:

    a) golongan darah yang tidak kompatibel sistem ABO.b)Dingin Ab: anti M, anti N, anti A1, anti Lewis, anti l dan anti IH.

    Uji mayor:

    Pipet dua tetes serum pasien ke dalam tabung reaksi kecil dan tambahkan dengan satu

    tetes suspensi sel 5% donor.

    Uji minor:

    Pipet dua tetes plasma donor ke dalam tabung reaksi kecil dan tambahkan dengan satu

    tetes suspensi sel 5% donor.

    Kocok dan disentrifus masing-masing tabung pada 1000 ppm selama 1 menit atau 3400

    ppm selama 15 detik. Watch dasar tabung. Jika ada aglutinasi atau hemolisis, hasilnyapositif, tetapi jika tidak ada aglutinasi atau hemolisis, hasilnya adalah negatif. Setelah itu,

    lanjutkan ke tahap kedua.

    Fase IFase I Fase I

    Tab I Tab 2

    Serum pasien 2 tetes - Tambahkan 2

    tetes 22%

    bovine albumin

    Bersihkan

    eritrosit

    kemudian

    5% donor eritrosit

    susp

    1 tetes -

  • 5/26/2018 modul

    26/26

    Donor

    serum/plasma- 2 tetes

    untuk semua

    tabung

    tambahkan

    dengan 2 tetes

    Coombsserum5% pasien

    eritrosit susp.

    - 1 tetes

    2. Tahap Il atau 37 C inkubasi fase, dilakukan di 22% dari media albumin sapi. Antibodi yangdapat direaksikan dalam fase ini adalah Rhesus antibodi sistem (anti D, anti E, anti C) dan

    anti Lewis. Pada fase ini antibodi yang tidak lengkap dapat eritrosit dilapisi sehingga dalam

    fase III, hasilnya akan positif setelah penambahan serum Coomb itu.

    Pipet 2 tetes sapi 22% albumin untuk setiap tabung, goyang dan menetaskan pada 37 C

    selama 15 menit, dari sentrifus pada 1000 ppm selama 1 menit atau 3400 ppm selama 15

    menit.

    Perhatikan dasar tabung, cuaca hasilnya positif atau negatif.

    Jika hasilnya negatif, lanjutkan ke tahap III.

    3. Tahap III atau tahap uji antiglobulin (Coombs test)Pada fase ini, Ab lengkap: D anti, anti E, anti C, anti Duffy, anti K, dll anti S yang memiliki

    eritrosit dilapisi akan memiliki aglutinasi setelah penambahan Coombs serum (globulin anti

    manusia). Cuci eritrosit di dalam tabung dengan garam tiga kali, setelah yang menambah

    sedimen dengan 2 tetes serum Coomb, kocok dan disentrifus pada 1000 ppm selama 1

    menit atau 3400 ppm selama 15 detik. Watch dasar cuaca tabung ada aglutinasi atau

    hemolisis. Jika hasilnya negatif dengan menambahkan satu tetes sel kontrol Coombs

    kemudian disentrifus. Hasilnya harus positif.