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Mutaciones Raras de EGFR: ¿qué son y qué significan?
Fernando López-Ríos
Laboratorio de Dianas Terapéuticas Centro Integral Oncológico Clara Campal Hospital Universitario Sanchinarro Madrid www.laboratoriodedianasterapeuticas.com
INDICE
• Introducción: métodología analítica
• Guías americanas y europeas
• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?
• ¿Qué significan?
• Conclusiones
Técnicas
Sensibilidad
(%DNA
mutado)
Mutaciones
identificadas
Detección precisa de
deleciones e
inserciones
Secuenciación directa Método de Sanger 25 Conocidas y nuevas Sí
Pirosecuenciación 5-10 Conocidas y nuevas Sí
PCR cuantitativa en tiempo real 5 Sólo conocidas No
Técnicas de enriquecimiento del alelo mutado
PNA-LNA PCR clamp 1 Sólo conocidas No
Digestión con enzimas de restricción 0.2 Sólo conocidas No
Smart 0.1 Sólo conocidas No
COLD-PCR 1 Conocidas y nuevas Sí
PCR-RFLP (análisis de polimorfismos de fragmentos de
restricción) 5 Sólo conocidas Sí
dHPLC 1 Conocidas y nuevas Sí
Inmunohistoquímica (IHQ) * Sólo conocidas Sí
* Sensibilidad biológica pendiente de establecer
Tabla modificada de Clin Cancer Res 2007; 13: 4954-5
INTRODUCCIÓN
EGFR
Estudio mutacional de EGFR: fase analítica
Angulo et al. PLoS ONE 2012
EGFR
Estudio mutacional de EGFR: fase analítica
Angulo et al. PLoS ONE 2012
Sensibilidad Límite de detección (LOD)
Nuevas tecnologías
Kerr et al. Ann Oncol 2014
10
Next generation sequencing
• EGFR, PIK3CA, KRAS, HRAS, NRAS, BRAF, CKIT, TP53
11
INDICE
• Introducción: métodología analítica
• Guías americanas y europeas
• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?
• ¿Qué significan?
• Conclusiones
MUTACIONES DE EGFR: Fase pre-analítica
http://www.cap.org/apps/docs/membership/transformation/new/lung_public_comment_supporting_materials.pdf
INDICE
• Introducción: métodología analítica
• Guías americanas y europeas
• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?
• ¿Qué significan?
• Conclusiones
Yashuda et al.
Lancet Oncol 2011
Arcila et al. Mol Cancer Ther 2013
INDICE
• Introducción: métodología analítica
• Guías americanas y europeas
• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?
• ¿Qué significan?
• Conclusiones
Resistencia
Esquema modificado de Yasuda et al, (Lancet Oncol 2011)
según la revisión de Arcila et al. (Mol Cancer Ther 2013)
Mejor
Peor
INDICE
• Introducción: métodología analítica
• Guías americanas y europeas
• ¿Cuáles son las mutaciones raras de EGFR?
• ¿Qué significan?
• Conclusiones
Kerr et al. Ann Oncol 2014
Conclusiones
Buscarlas más (en los pan-negativos)
Atención al método, nomenclatura e informe
Inserciones del exón 19 (1%): respuesta
Inserciones del exón 20 (10%): respuesta?
Datos de respuesta a afatinib
Nuevos diseños de ensayos
www.laboratoriodedianasterapeuticas.com