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NI hl DO ET ERINARIO Adición de antibiótico en el tratamiento de sincronización de celo Residuos en leche de oveja Manchega M. I. Berruga l , R. Gallego 2 , A. Rodriguez2 , R. Rubio l y A. Molinal 1 Departamento de Ciencia y Tecnología Agroforestal y Genética. IDR-ETSIA. Universidad de Castilla-La Mancha. Albacete. 2Asociación Nacional de Criadores de Ganado Ovino Selecto de Raza Manchega (Agrama). Albacete. Para comprobar el grado de eliminación en leche de un antibiótico añadido en polvo a esponjas intravaginales para la sincronización de celo de un grupo de ovejas, se ha analizado la leche procedente de varios ordeños consecutivos y posteriores a la puesta de las esponjas. Para ello se ha utilizado un método microbiológico y un método rápido de detección de residuos de antibióticos. L a raza Manchega cuenta en la actualidad con un censo de 850.000 ovejas que se distribuyen en casi 2.000 rebaños cuya leche se desti- na principalmente a la elaboración del Queso Manchego, que cuenta con una de las Denominaciones de Origen Pro- tegida de mayor reconocimiento inter- nacional. En este tipo de productos de reconocido prestigio, es de suma importancia asegurar la calidad. La Asociación Nacional de Criado- res de Ganado Ovino Selecto de Raza Manchega (Agrama) trabaja desde 1988 en la selección de la raza Man- chega, desarrollando un programa reproductivo (Montoro y col., 1996), que requiere de la sincronización del celo con esponjas intravaginales impregnadas con progestágeno, segui- do de una inyección de gonadotropina coriónica equina (eCG) en el momen- to de la retirada de las esponjas (Sie- rra, 1974; Barillet y col., 2001; Ugarte y col., 2002; Kridli y col., 2006). Como recomendación se sugiere que antes de la inserción de las espon- jas intravaginales se utilice algún anti- biótico espolvoreado directamente sobre las esponjas con el fin de preve- nir la aparición de posibles procesos infecciosos vaginales (Kridli y col, 2006; Suárez y col, 2006). Varias mar- cas comerciales incluyen en sus ins- trucciones, periodos de supresión tras la inserción de progestágenos en forma de esponjas, y otras marcas indican que no es necesario aplicar un periodo de supresión; pero la aplica- ción extra de antibiótico a las esponjas como protocolo preventivo no viene contemplada en lo que a periodos de seguridad se refiere. El uso de este tra- tamiento podría suponer la elimina- ción de residuos de antibióticos a tra- vés de la leche. Al tratarse de una práctica no regulada, su uso debe con- siderarse excepcional, y exige el segui- miento exhaustivo por parte del facul- tativo que aplica el tratamiento. Según el artículo 11 de la Directiva 2004/28/CE, bajo esta circunstancia se debe respetar al menos un periodo de supresión de siete días. Sin embar- go, éste es un tiempo muy elevado que retendría un volumen importante de leche u obligaría a la modificación de los calendarios de sincronización. La presencia de sustancias antimi- crobianas en la leche es indeseable por numerosas razones. En primer lugar, pueden tener efectos adversos en los seres humanos desde el punto de vista toxicológico, provocando alergias y/o creando posibles resistencias de los microorganismos a determinadas sus- tancias (Moretain, 1999; Schwarz y Chaslus-Dancla, 2001). También, la industria láctea, se ve afectada desde un punto de vista tecnológico, por la implicación en procesos fermentativos (elaboración de quesos, yogur, etc.). La susceptibilidad de los fermentos lácteos frente a los antibióticos es muy elevada y la presencia de sus residuos en la leche podría retrasar, alterar o detener estos procesos, provocando grandes pérdidas económicas (Cogan, 1972; Mourot y Loussouarn, 1981). Por todo ello, y para controlar el nivel de residuos en leche las autorida- des europea y nacional han regulado una serie de normas que permitan Mundo Ganadero Octubre'08

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NI hl DO ET ERINARIOAdición de antibiótico en eltratamiento de sincronización de celoResiduos en leche de oveja Manchega

M. I. Berruga l , R. Gallego 2, A. Rodriguez2, R. Rubiol y A. Molinal1 Departamento de Ciencia y Tecnología Agroforestal y Genética. IDR-ETSIA. Universidad de Castilla-La Mancha. Albacete.2Asociación Nacional de Criadores de Ganado Ovino Selecto de Raza Manchega (Agrama). Albacete.

Para comprobar el grado de eliminación en leche de un antibiótico añadido en polvo a esponjasintravaginales para la sincronización de celo de un grupo de ovejas, se ha analizado la lecheprocedente de varios ordeños consecutivos y posteriores a la puesta de las esponjas. Para ello seha utilizado un método microbiológico y un método rápido de detección de residuos deantibióticos.

L

a raza Manchega cuenta enla actualidad con un censode 850.000 ovejas que sedistribuyen en casi 2.000rebaños cuya leche se desti-

na principalmente a la elaboración delQueso Manchego, que cuenta con unade las Denominaciones de Origen Pro-tegida de mayor reconocimiento inter-nacional. En este tipo de productos dereconocido prestigio, es de sumaimportancia asegurar la calidad.

La Asociación Nacional de Criado-res de Ganado Ovino Selecto de RazaManchega (Agrama) trabaja desde1988 en la selección de la raza Man-chega, desarrollando un programareproductivo (Montoro y col., 1996),que requiere de la sincronización delcelo con esponjas intravaginalesimpregnadas con progestágeno, segui-do de una inyección de gonadotropinacoriónica equina (eCG) en el momen-to de la retirada de las esponjas (Sie-rra, 1974; Barillet y col., 2001; Ugartey col., 2002; Kridli y col., 2006).

Como recomendación se sugiereque antes de la inserción de las espon-

jas intravaginales se utilice algún anti-biótico espolvoreado directamentesobre las esponjas con el fin de preve-nir la aparición de posibles procesosinfecciosos vaginales (Kridli y col,2006; Suárez y col, 2006). Varias mar-cas comerciales incluyen en sus ins-trucciones, periodos de supresión trasla inserción de progestágenos enforma de esponjas, y otras marcasindican que no es necesario aplicar unperiodo de supresión; pero la aplica-ción extra de antibiótico a las esponjascomo protocolo preventivo no vienecontemplada en lo que a periodos deseguridad se refiere. El uso de este tra-tamiento podría suponer la elimina-ción de residuos de antibióticos a tra-vés de la leche. Al tratarse de unapráctica no regulada, su uso debe con-siderarse excepcional, y exige el segui-miento exhaustivo por parte del facul-tativo que aplica el tratamiento. Segúnel artículo 11 de la Directiva2004/28/CE, bajo esta circunstanciase debe respetar al menos un periodode supresión de siete días. Sin embar-go, éste es un tiempo muy elevado que

retendría un volumen importante deleche u obligaría a la modificación delos calendarios de sincronización.

La presencia de sustancias antimi-crobianas en la leche es indeseable pornumerosas razones. En primer lugar,pueden tener efectos adversos en losseres humanos desde el punto de vistatoxicológico, provocando alergias y/ocreando posibles resistencias de losmicroorganismos a determinadas sus-tancias (Moretain, 1999; Schwarz yChaslus-Dancla, 2001). También, laindustria láctea, se ve afectada desdeun punto de vista tecnológico, por laimplicación en procesos fermentativos(elaboración de quesos, yogur, etc.).La susceptibilidad de los fermentoslácteos frente a los antibióticos es muyelevada y la presencia de sus residuosen la leche podría retrasar, alterar odetener estos procesos, provocandograndes pérdidas económicas (Cogan,1972; Mourot y Loussouarn, 1981).

Por todo ello, y para controlar elnivel de residuos en leche las autorida-des europea y nacional han reguladouna serie de normas que permitan

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garantizar la seguridad alimentaria.Una de las medidas adoptadas ha sidoel establecimiento de los LímitesMáximos de Residuos (LMR), que sonlos niveles máximos de una determina-da sustancia admitidos en un determi-nado producto animal (ReglamentoCEE n°2377/1990).

Más recientemente, el Ministerio deAgricultura, Pesca y Alimentación haestablecido como herramienta de con-trol, el Sistema Letra O (Real Decreto217/2004 y RD 1728/2007) que regu-la el muestreo obligatorio de la lechepara la detección de al menos residuosde antibióticos betalactámicos y tetra-ciclinas, asegurando la trazabilidad dela leche, estandarizando la gestión delcontrol de la calidad de la leche encumplimiento de la normativa europearelativa a la trazabilidad (ReglamentoCE n° 178/2002) y al paquete dehigiene (Reglamentos CE n°852/2004, 853/2004 y 854/2004).Esta norma sólo establece la obligato-riedad de los controles en leche crudade vaca, aunque previsiblemente, sepretenda aplicar en un futuro no muylejano a la leche de oveja y cabra.

A raíz de este nuevo panoramalegislativo es evidente que la gestióncorrecta del uso de antibióticos en elganado lechero es de vital importan-cia. Así, se deben respetar los perio-dos de seguridad, utilizar medicamen-tos registrados, recetados por el vete-rinario responsable de la explotación,etc.

Como técnicas de control tanto loslaboratorios interprofesionales lácteoscomo las industrias emplean métodosmicrobiológicos de cribado, entre losque destacan BRT, Copan, Delvotest,Eclipse; o métodos mucho más especí-ficos y rápidos, basados en receptoresproteicos, como SNAP, ROSA Charm,Tiwnsensor, Beta Star, Penzym, entreotros. Estos métodos tienen muy bue-nas sensibilidades para la detección delos antibióticos señalados en Letra C2,de manera que su presencia en lecheserá detectada con facilidad.

El presente estudio se ha realizadocon el objetivo de determinar si existeel riesgo de que la leche de oveja pre-sente residuos de antibióticos comoconsecuencia del uso de antibióticosen esponjas intravaginales como pre-ventivos frente a infecciones vagina-les. Para ello se han empleado dosmétodos de uso común por la indus-tria láctea y los laboratorios interpro-

No están contemplados periodosde seguridad en la aplicación deantibiótico a las esponjas comoprotocolo preventivo

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Aplicación del antibiótico sobre las esponjas.

Aplicación de la esponja intravaginal.

MUNDO VETERINARIO: OVINO

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3 4 5 6 7 89

Número de ordeño

Delvotest El Positivos O Dudosos • Negativos4111/100% Y

90% -

80% -

70% -

60% -

50% -

40% -

30% -

20% -

10% -0%

SNAP Beta-Lactam

100%-'--- 90% -

80% -

CD 70% -z

60% -z2 50%-al 40% -

30%-(1920%-

CLD.-U- 1 0 % -

O%

II Positivos O Dudosos IIII Negativos

4 5 6Número de ordeño

.5

o

Figura 1. Frecuencia de resultados positivos, dudosos y negativos a Delvotest MCS en lecheprocedente de ovejas individuales (n=8) tras la inserción de esponjas intravaginales espolvoreadascon el antibiótico.

Figura 2. Frecuencia de resultados positivos, dudosos y negativos a New SNAP Beta-Lactams enleche procedente de ovejas individuales (n=8) tras la inserción de esponjas intravaginalesespolvoreadas con el antibiótico.

No están contemplados periodosde seguridad en la aplicación deantibiótico a las esponjas comoprotocolo preventivo

MUNDO VETERINARIO: OVINO

fesionales en el control rutinario de lacalidad de la leche.

Materiales y MétodosLa experiencia se ha realizado con untotal de 12 ovejas en lactación delRebaño Nacional de la Raza Manchega(Cersyra- Valdepeñas) que fueronsometidas a un tratamiento con espon-jas intravaginales (20 mg acetato defluorogestona, Chronogest, Intervet).Los animales se distribuyeron en dosgrupos atendiendo a la incorporación(grupo A; n = 8) o no (grupo B; n = 4)de antibiótico a las esponjas. Tras elordeño de la mañana se procedió a lapuesta de las esponjas. Previamente sehabía analizado individualmente laleche de cada animal con dos métodosde detección de antibióticos para ase-gurar que la leche se encontraba librede residuos antibióticos. La incorpora-ción del antibiótico a las esponjas serealizó de acuerdo a las prácticas vete-rinarias habituales, para lo que se aña-dió y mezcló en una bolsa de 25esponjas un vial en polvo de 1.000.000UI de bencilpenicilina procaína y 1 gde DH-estreptomicina (Veterin-Mici-pen, Intervet).

Después, los animales de ambosgrupos se ordeñaron dos veces al día,cada doce horas, durante nueve orde-ños sucesivos, recogiéndose de maneraindividual la leche de cada oveja y ana-lizándose su composición, recuento decélulas somáticas y la presencia deresiduos de antibióticos.

La composición de la leche (grasa,proteína total, lactosa y sólidos tota-les) y el recuento de células somáticas(RCS) se determinó en el laboratoriode Lactología del Centro de Seleccióny Reproducción Animal (Cersyra-Val-deperias, Combifoss 500, Foss Elec-tric).

Todas las muestras individuales seanalizaron simultáneamente con dosmétodos de detección de antibióticos,el método microbiológico DelvotestMSC y el método basado en receptoresproteicos New SNAP Beta-lactams.Las respuestas de ambos métodos seevaluaron de forma visual como resul-tados negativos, dudosos y positivos,expresándose los resultados como por-centajes de frecuencias absolutas.

Resultados y DiscusiónEn el Cuadro I se muestran los resul-tados medios de composición yrecuento de células somáticas de las

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RIFEN 100 mami solución Inyectable poni 0~10IN, bovinos y porcinos Antiinflamatorio no esteroideo, en enlacian Inyectable • COMPOSICIÓN Ketcprolere 100 mgrri Excgantes . Alcohol Banano 10 mgrri PROPIEDADES FARMACOLÓGICAS 8 ketopokno es uril famecoatore adonideo. Ademes del dedo anlinkmatono, traben *Ir. or rEoS, .Pgeoico y a peeitco. f3 rre.risrno de aojen farmacológico del ketoprokno está basaid en la id goLiári de la cidocodgeriasa y la feooegsnasa. 8 ketopofern ter rioeri peinare S (carecen de bracfpri-

is y estadiza les manteses callaras de las iscsomas, b cual nhba E lberacen da es elairss isceorneles cps provoca, la dasbuccen Usuta, INDICACIONES Equinos: EnIamodades que aledan al sisterna oPecerliculer y esq.P.od-rausialar asociadas con dolor agudo e tillar piSii, porejemplo. cojera de origen traumatizo, atlas do,osperavän. lendreis, busilis ~Acuite Lames. mides. Katopoleno tarreen está Picado pera aaien post-gin:0m templa adorne/ea de pdo. y fiebre. Bovinos Enfermedades asociadas con hlarrosen. dolor o fet per

enfermedad. respiratorias, masstis trastornos osteserliculares y oquektiod-rruecularo tales corno ojera arbitis y charlad da Ipenterniento post-perto, heridas. Puchos. Eniernorkreet. asociadas con Pl. odio Color o fiebre. por eiempb. tratamiento asociado con el Si ..oreo deMaleta Wats Audexe IrA100. Infpxipre del tracto respiratorio tratamiento sirlorreaco de la robe. CONTRAINDICACIONES No Leer en caso de hipersensibidad al principio actimd, o a cuáquera de Nos excntes. No Leer en ~des pe pa:laxan lesiones gastrontestisies. dote. tenor-rajen, funcen hepática o rala Elevada No usa en potros en sus paneros meso de vida y yergo. gotantes. MA DE ADMINISTRACIÓN Epince Ve n'Ira/aro. Posees, xis Pirexia-ose o Pramussular Porcinos: via Prarnuscular POSOLOGiA Equinos: 22 mg de ketoprofend / kg peso vixo /da poi vie repenso, de 305 do consecutivos o dad, 1 mi p. 4509 de peso PO. Pana tratar odixo, non-Mil-1.k une nyeoción o suficiente. Cada adrreistracen de ~profano de nes requiere una revaisracen del estaob dhico da paciente. Bovinos: 3 mg de 00/idginden5 kg peso xleede

via nimio-roa 0 ntierneolier hasta 3 das corescuties. o clec. 3 rril por 1C0 kg de peso vivo. Porcino. 3 mg de ketcprckno /1<g peeo vivo /da corro leis ilyeccen Pranusoular in., o dad' 3 rd por 1C0 kg de paso iAo. TIEMPO DE ESPERA Carne 4 das. Lecha Ce10 das MODODE CONSERVACIÓN Coroaver el vial de vidis en el arañarse adiada para protegerlo de la km. Despeo de E peinera apertra del envase 1/on.10 no conservar 011010/10010/0 sp)eiror 025 C. PRESENTACIÓN Frasco 1C0 mi y 100 103 ml Rag ni': 1854-ESP

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Test de detección de residuos.

'Cuadrolas ie.ión media y recuento de células somáticas

mue de leche dveja analiza.

Componente Media Desviación estándar

Grasa (%)

Proteína (%) 5,43 0,42

Lactosa (%) 5,16 0,23

Extracto seco (%) 18,57 1,49

RCS (células/m1)

59.200 33.900

7,14

1,49

NIUNDO VETERINARIO: OVINO

La presencia de antibióticos en laleche puede tener efectos adversossobre la salud de los consumidoresy sobre su rendimiento tecnológico

muestras de leche analizadas. Losresultados de composición se ajustan alos valores medios normales de la razaManchega (Molina y Gallego, 1994),mientras que el nivel de células somá-ticas indica un buen estado sanitariode los animales.

Respecto a la presencia de residuosantibióticos en la leche, en las Figuras1 y 2 puede verse cómo tras el trata-miento de las esponjas vaginales con elpreparado antibiótico, se eliminanresiduos de antibióticos. En el ordeñoinmediatamente posterior a la inser-ción de esponjas la mitad de los ani-males eliminaron residuos de antibió-ticos en leche en cantidades superioresa los limites de detección de los meto-

dos Delvotest y SNAP. En las siguien-tes 24 y 36 horas post-aplicación(esponjas), es decir en los siguientesdos ordeños, algunos animales conti-nuaron eliminando residuos. Por elcontrario, todas las muestras de lecheprocedentes de los animales del grupoB (esponjas no tratadas con antibióti-cos) dieron resultados negativos frentea los dos métodos en todos los orde-ños.

De acuerdo con estos resultados, laleche procedente de los animales sin-cronizados en los que las esponjasintravaginales han sido tratadas conantibiótico puede contener residuos deantibióticos a niveles detectables porlos métodos que habitualmente se uti-

lizan en la detección de antibióticos enleche tanto por los laboratorios inter-profesionales, como por las industriaslácteas. Y por lo tanto la leche de estosanimales no debe ser destinada al con-sumo. En este estudio se ha observadoque al menos son necesarios 2-3 orde-ños (24-36 horas) desde la aplicaciónde las esponjas intravaginales, paraque la leche de estos animales no déun resultado positivo a cualquiera deestos métodos.

Como ya se ha señalado anterior-mente, la adición de antibióticos a lasesponjas intravaginales es una prácticaveterinaria común en pequeñosrumiantes, en la que no existen proto-colos específicos establecidos por loslaboratorios farmacéuticos que regu-len su correcta utilización. Por estemotivo, se debe ser extremadamentecauteloso, ya que residuos de los anti-bióticos utilizados podrían llegar a laleche con relativa facilidad. Además,al tratarse de un uso no registrado,habría que cumplir la premisa del artí-culo 11 de la Directiva 2004/28/CE enla que se establece que ante una pres-cripción excepcional el veterinariovelará porque se respete un periodo deseguridad en leche de al menos sietedías.

Por ello, sería necesario realizarestudios para establecer el modocorrecto de aplicación del antibiótico alas esponjas, y conocer exactamente sufarmacocinetica. De esta forma, se eli-minaría el riesgo de encontrar residuosde antibióticos, y evitaría los largosperiodos de supresión que como con-secuencia de la aplicación excepcionaldel antibiótico habría que respetar.

En cualquier caso, y hasta que loslaboratorios farmacéuticos establez-can protocolos correctos de utiliza-ción, se recomienda como garantía dela seguridad alimentaria que la lechede los animales sincronizados conesponjas tratadas con antibióticos sesometan a un control de la presenciade residuos, y se respete el periodomínimo de seguridad.

AgradecimientosLos autores quieren agradecer al Cer-syra-Valdepeñas su colaboración en elpresente estudio, y a las empresasDSM Food Specialties y Tecasa susaportaciones.•

Bibliografía a disposición de los lectores([email protected] )

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