J.-C. BARON

NOTE COMPLEMENTAIRE SUR LE SANGDE QUELQUES POISSONS MARINS

DE COTE D'IVOIRE

TRAVAIL REALISE DANS LE CADRE DU PROJET DE DEVELOPPEMENT

DE LA PECHE PELAGIQUE COTIERE

PROJET PNUD/SF - 288/lVC

lJocum.ent scientitique provisoire

N° 037 - Août 1969

REPUBLIQUE DE COTE D'IVOIREfi&rERE DE LA PRODUCTION .ANIMALE

OFFICE DE LA RECHERCHESCIENTIFlopE &: TECHNIQUE OUT.RE-Urn

NOT1jl COMPLEMENTAIRE SUR LE SANGDE QtJELQtJl!5 POISOONS !-1ARINS DE COTE D' IVOIRE:

- Soomber japonicus - Enth;ynnus alleteratus- Corypbs.ena hippurus - Tetrapterus sp.- Acanthocybium solandri - Scomberomorus tritor

= :::1 = C = = t:::::F=-= =-=-c:: = = c

par

J.-C.BARON

REsuroiE

Des réactions d' agglutiDation entre lesglobules rouges de coryphène, bonite etSoomberomorus tritor et les sérums de cespoissons ainsi qu'avec des sérums humains ontété effectués. La recherche de pl:wtoaggluti­ninas dans diverses graines a donné un résul­tat positif avec S'tylosenthes gracilis(Papilionacées). L'étude des hémoglobines parélectrophorèse et analyse ilDllDmologi.que pré­cise le nombre de fractions les composantainsi que les spécifités ou communautés anti­géniques.

Les' sérums analysés par électrophorèseen gel d' amidon révèlent un nombre importantde fractions. L'une d'entre elle a été iden­tifiée par autoradiographie à une transfe~

ri.ne chez la coryphène.(4 tabl eaux; 7 planches; 2,photographieshors texte).

CENmE DE RECHERCHElS OCEANOORAPRIQUESB.P. V 18 - A B l D JAN

:::= = = :::a-::.:l E = ~

Agglutination reactions be~.roen erythro­

cytes from coryphene, bonite and Scombel'omol'UB

tritor and different serums, both fish and.

human, vere studied. The extract from Stylo­

sentbes gracilis gives a weak phytoagglutinL"',

A study of the haemoglob:.ns by electro.;

phorosis shoned the number of components and

the immunological. analysis gave their an::::ige­

nie specifit"J or comnn.mity.

The st~.rch gel eleetrophoresis of

szrums revealed an ï.mportant number of cOI!l.pQ­

nents. The coryphène' s transfer:rin bas been

identified b.;r autoradiographie localization.

Docume:tt Scientif'ique ProvisoireN~037 Ao11t 1969'rir.: 200 Exemplaires

1. DiTReDUClfION

2.~L-

3. TECHNlQUm

4. RESULTATS

SOMMAIRE.

2.1. Prélèvement du sang2.2. Prélèvement du sérum2.3. Prélèvement des globules2.4. Obtention de l'hémoglobine2.5. Obtention d'extraits végétaux

3.1. Recherche d'iso et d'hétérohémagglutininesnaturelles.

3.2. Analyses électrophorétiques3.3. Localisation des transferrines3.4. Analyses immunoélectrophorétiques3.5. lmalys es irmnunologiques3.6. Obtention des immunsérums

4.1. Maquereaux4.2. Coryphènes4.3. liCanthocybium solandri4 .4. :Bonit es4.5. Te~rapturus

4.6. Soomberomorus tritor

.t

,•

•

-1

1. INTRODUCTION

Oette 41sude oomplète la "Note sur le sang de quelques poissons

marins de CSte d'Ivoire (Doo. so. prov. n0023 Mai 1968) et oonoerne les

sérums de poissons pêchés en 1967 et 1968 ainsi que les sangs de poissons

p30hés an Avril 1969. La détermination des transferrines de ooryphènes

par autoradiographie a été effeotuée au Centre do Transfusion Sanguine1

de Paris - Six espèoes de poissons sont étudiées 1

- Soomber japonious (Houtt;yn) - maquereau

Coryphaena hippurus (Linné)- Coryphène.

Aoanthocybium solandri (Ouvier) -~.

- Euthynnus aJ.1eteratus (Bafinesque) - Bonite

- Tetrapturus (Lacépède) sp. - marlin.

- Soomberomorus tritor (Cuvier)

,.1 1 t t t

Poissons 1 Date 1 Heure 1Point 1Fonds 1 Nombre de milles1 1 1approximatif' 1 1 à la oôte, r r 1 t

Coryphène 161 r 1 !t 1 1l '1 5° 03' N 1 1115.4.69. 15h 1

1 5Qm 1 61 \:Bonites 7 à 10 1 1 13° 32' w t 1

1 1 9h 1411 1Coryphène 17 et 18 1 53 ' N 38 m 1 141 110 nO, W'1

1 1 1 ~"" 1 t1 1 1.5° 1 1Soomberomorus tritor 1 1 13h 02' N 32 m 11

1 à 3 ,16.40 691100 46' w 1 11 1 r

1 1 17h 15° 1 1Bonite Il t 35' N Il 38 ID

171 foo1 1 ID' W

:Bonite 12 à 191 1 10h 16° 10' N 1 11 1 120 1 54· m 1 8J ! t 03 ' E

1 11 1 16° 04' N 1 1:Bonite 20 à 23 118.4.691

110 1 5Qm 1 91 1

35' E1 11 .

Soomberomorus tritor 4 1 1 13h 1 1 11 1 1 1 1

:Bonite 24 à 351 1 1 1 1.

(Togo)119.4069, 9h ISortie du rPort de11

Lomé

.. 1 1 1 1 1 Tema (Ghana)Maquereaux 23 à 36 ,20.4069 12h Sortie du ·Port de .

:Bonite 36 à 421 1 8h 1 . 1 11 1 15° 04 N 1 40 ID 1 5123 .4.691 13° 24 w 1 1

Coryphène 19 à ~11 1 10h 15° 04 N 1 11 1 13° 38 w 1 51 m 1 6,5 m1 , ,

TABLEAU 1.ProvenBftOe des poissons pêchées en avril 1969 (oampagne Tiburoe)

- 3

2. MAT E li l E L

2.1. Prélèvement du _.ey • Les poissons d'avril 1969 ont été

p&hés entre Abidjan et Ootonou. Le sang.a é~é prélevé par ponction oaz­

diaque stérile sur le poisson vivant à. l'aide du système vaoutainer Becton

Dikinson. Le sang a. été conservé en glacière de l à. 8 jours avant d'être

oentr~.

2.2. Prélèvement du sérum. Les échantillons pris sans antiooa­

gulant sont restés de l à. 8 jours en glacière avant d'en extraire le sérum

soit direotement (sérum exudé) soit après oentr~gation. Le sérum est

oonservé oongelé 1_20° SallS antiseptique, jusqu'au moment d'être utilisé.

2.3. P.l'élèvement des globules 1 Le sang pris sur oitrate de soude

à..3, ~ est oentrifugé. Le oulot globulaire est lavé jusqu'à. obtention

d'un surnageant olair avec une solution d'eau physiologique à. 9,5 g. par

litre de Na OI.

2.4. Obtention de 1 'hémoglobine 1 Les globules sont lysés par de

l'eau distillée et congelée à. _20°. Après décongélation ct centrifugation

15 mn à environ 4000 t/mn (maximum de la machine) l'hémoglobine est préle­

vée et utilisée dans les huit jours. Ces échantillons ne sont malheureuse­

ment pas exempts de oomposés sériques.

2.5. Obtention d' extraits végétaux 1 Nous avons testé les ex­

traits t' l, t 2 et ~ 3 des 5 graines suivantes après extraction selon la

méthode déjà oitée (Doo. Sc. provisoire N°023) - Seul l'extrait ~l de

Stylosenthes a donné quelques résultats positifs. Tous les autres ont été

négatifs.

CENTROS:E:l\U. pubescens (C.p) lTEPHROSIJ.. ouneata (T.o) PapilionacéesSTYLOSENTHES gracilis (S.g.) fLEU01ŒN1l. buitenzorg (L.b.) , lI/Iimosaoées

"'. LEUCliENll. glanoa (L.g.)

•

.. '

.'

3. TEe H N l QUE S

3.1. Recherches d'iso et dlhétérohémagglutinines naturelles

La méthode a déjà été décrite (Doc. Sc. Provisoire n002?).

Le degré de l'agglutination constaté est évalué de la façon suivante.

- une croix (x) agglutination totale

les chiffres 4 et 3 indiqu~Jlt une agglutinationinconstestable en plusieurs agglutinats.

les chiffres 2 et 1 indiquent une agglutination trèsfaible ou douteuse.

- un tiret (-) auoune agglutination, réaction négative.

- un point (.) globules dénaturés, réaction illisible.

Nous avons arbitrairement oonsidéré oozmne négati.fs dans les interpréta,..

tions les agglutinations ('2.

Une case hachurée indique que le test nI a pas été ef'fectué.

Les sérums humains absorbés sont indiqués en abrégé dans les tableau:x: •

Il faut comprendre que le sé.rUm humain de sujet "0 absorbé" est ahsorbé

par des globules rouges de sujets des groupes A et B, celui de sujet

"A absorbé" est absorbé par des globules rouges de sujot du groupe B et

Gelui du sujet "B absorbé" est absorbé par do.a Globules rouges de sujet

du groupe A.

3.2. Analyses électrophorétiques

3 .2.1. En gel d 1 1l.garos e

Nous avons utilisé l'A.garose Behring à 1,5 %avec

/ ( 1llanalyse des hémoglobines un tampon VeronaJ-, de pHo=8,2 Veronal

~ 47,6 g, Hel N 1 69 ml, eau déminéralisée. 4,3 litres) ou le

de Hirschfcl.d (Doo. So. pre N°023)

pour

sodé

tampon

La méthode a été décrite en détail (Doo. So. pra n 0 023)

..

- 5

3.2.2. En gel d'.Amidon 1 Nous avons utlisé de l'amidon hydrolysé

Connaught oonoentré à 13 %et les tampons disoontinus do Pouliok (déorit dans

le Doo. So. pre N° 29) et de Ashton (oomposition oi-dossous)

Solution l - Hydroxyde de lithium.

Acide bori'lue

Eau distillée 'l,s,p.f.

1,2g

11,89g

l litre

Oette solution est utilisée dans les bacs à éleotrophorèse.

Solution II. - .Acide oitri'lue 1,6g

- Trisb;ydrox;yméth,y1e aminométhane ' 6;29g

- Eau distillée 'l.s.p.f. 1 litre

La Teobni'lue u tilis ée a été déorite par J.F. FINE dans "Les g:L'oupes

sanguins et los groupes séri'lues" 3ème édition (Ed. de la Tourelle, 5 Rue

Guynemer 94- Saint-Mandé)

,.

li'

Tampon pour le gel - 10 %de solution l

90 %de solution II

3.2.3. Sur papier 1 L'éleetrophorèse sur papier a été effeotuée au

C,mtre de Transfusion Sanguine de Parie suivant la méthode déorité par J ..M.

FDm.

3.3. Looalisation des transferrines • Elle a été offectuée pour 3 échantil­

lons de sérum de ooryphène. Du fer radioaDtif' sous forme de 59FeC13 est ajouté

à. l' éohantillon 'lui est ensui~e diaJ.ysé oontre de l' oau physiologi'lue après

une incubation de 3 heures. L' éleotropho~èse sur papior est effeotuée à. pa.rtir

d'un dép8t de 10 miorolitres de sérum. L'éleotrophorèse en gel d'amidon ost

effectuée aveo le tampon de Ashton, la révélation autoradiographi'lue est

réalisée avec du Kodire:x:. Ces techni'lues sont déorites dans le livre de J .M.

FINE et C. ROPARTZ l "Teohni'lues d'éleotrophorèse de zone".

,..

.'

..

- 63.4. Analyses 1mmUnoéleotrophorétiques

Elles sont effectuées ()ll gel dtAgarose I.B.F. à. l, ~ sur des lames de verre

pour miorosoopie. Pour les hémoglobines nous avons employé le matériel Gelmen

et effeotué les électrophorèses par plateau de 2 fois 3 lames recouvortes

d'une couche d' agarose continue. L'électrophorèse dure de lh30 à. 2h è. environ

5 V/om.

Après l'éleotrophorèse, la rigole centrale est remplie d1immunsérum et la

diffusion se poursuit durant 24h en chambre humide. Après lavage en eau phylO­

siologique pendant trois jours la réaction colorée à. la benzidine est effeo­

tué~ (Hémoglobine) puis les gels sont séchés aux r~ons infra rouge et colorés

à. l'amidosohwartz ou au rouge ponc eau.

3.5. Analysesimmunologiques J Effectuées solon la méthode d10uchterlol\Y' par

pr~cipitation d' immuncomple:x:es lors de la diffusion double en gel d' agarose

(o.f. Doc.So.prov.028). L'évolution des précipités à. été suivie pendant

96 heures avec des leotures à. 12h,28h,48h ct 96h pour avoir une idée oomplète

de la formation et de la disparition dos préoipités. Le sérum de :lapin témoin

nIa donné lieu à aucun précipité avec les divors antigàn~s~

3.6. Obtention des immunsérums 1 La réponse immunitaire varie d'un lapin è.

llautre et 2 immunsérums ne sont jamais identiquos. Nous avons donc essB\Yé

d'obtonir des mélanges d' immunsérums de plusi0llI's lapins.

3.6.1. Immunsérum anti sérum do ooryphène.

Nous avons obtenus à 1 'Institut Pastour do Paris par immunisation de 2 lapins

aveo des sérums de Ooryphaena hippurus, des résultats très satisfaisants aveo

los protocoles suivants. Oes méthodes pourront 8tre utilisées avec du sérum

de sardinolle:-dont le prinoipal inconvénient est d' 3tre obtenu en très peti­

tes quantités •

,-

t'

- 7

Première méthode Ipremier jotU" 0,4 ml de sérum de ooryphène + 0,6 ml d'Adjuvant

oomplot de Freund. en injeotion sous outanée (S.C.) au flanc droit.

septième jour 10,8 ml do sérum de o,oryphène + l ml d'Mjuvant en injection

S.C. au flanc gauohe. Dixième jour 1 1,6 ml de sérum de ooryphène + 1,8 ml

d'Adjuvant en injootion 8.C. à. l'épaule. Repos de li jours. Injection intra,­

veineuse de 0,8 ml de sérum de coryphène =-JIUt" le 21° jour - Saignée le

3,1° jour donnant l'immunsérum N°l.

Deuxième méthode 1 premier ,iour 0,25 ml de sérum de ooryphène + 0,5 ml ~t.Adju­

vant en injection intradermique, dans la paume de la patte. Repos jusqu'au

2lè . jou.r puis injection intraveineuse da 0,15 ml de sérum de ooryphène +0,75 ml

d t AdjuvantePr1:l(l;llJ d'essais las jours euivants et saignée donnant l'imrrmnsérum

N°2.

3.6.2. Immunsérum anti hémoglobine de oomhèn~

Nous avons immunisé 2 lapins (1 an ,et 18 mois) par injection d'una

solution d 'hémoglobine de la façon suivante 1

1° jotU" 1 ml So flanc gauohe

4° jour 1 ml So flanc droit.

7° jour 1 ml So épaule droite

12° jour 1 ml So épaule gauohe

15° jour 1 ml rv

15° au 2)° jour repos

23° jour 1 ml IV rappel

33° jour ••••••• ,oaignée

Les doux immunsérums ont été mélc.ngés puis titrés par irrammodi.ffusion double

on gel d' agarose.

Les arcs de préoipitation se rodissolvent au bout de 24h sauf' ceux aveo l'hémo-

globine diluée au 1-16. .

,

•

-83.6.3. Immunsérums anti hémoglobine de Bonite 1

Ils ont été obtenus sur deux lapins (1 an et 18 mois)

Les 1°,4°,7° et 12° jour 1 l injeotion sous outanée de l ml de solution

d'hémoglobine.

Les 15° ot 19° jour 1 injeotion intravoineuse de l ml

Repos du 58° au 67° jour. Saignée le 67° jour. Titre l2048

Le titre est obtenu par la toohnique de préoipitation interfaciale appelée

"Ring-tost". On dépose 0,2 ml d'immunsérum pur au fond d'un miorotube puis

0,2 ml de la solution d t anti~ne diluée en évitant le mélange.

Le titre es t donné par la plus grande dilution de l t antigène donnant lieu

à. un préoipité.

3.6.4. Innnunsérum anti hémoglobine de Soomberomoru.s tritor.

Obtenu sur un lapin de 15 mois par injeotions sous outanée de 1 ml de solu­

tion d'hémoglobine les 1° 3°, 8° ct 11° jours suivies d'injeotions intravei­

neusesde 1 ml les 23°,30° et 38° jours-

Repos du 38° au 47° jour et rappel le 48° jour 1 1,2 ml IV. Repos puis

saignée le 56° jour•

-. ~1• •-. tH:~:fJ 21 1

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R

e27

l25

JI: JlI

ELECTROPHOREGRAMME DE L!HEMOGLOBINE DE SCOMBER •Japoft.cus7.t Jt ._. Gel d'o9arese Behring 1,S"',Tompon véronal pH~ 8.16 _ 5h 50 à 150v, coloration GU noir am.do 12 SNm: G-e d.logor-ose 8ehrin91.5%,Tampon de Hirschfeld pH~8.5a.Oh à 5 v/cm.

-. .. " "~"-fII'.... "Les Fleches mdlquent les Frochons revelees a la benz,d.ne

PLANCHE l

.. •

4. RESULTATS 4.1. MAQUERE.AIJX

-9

Il

,"

Le sang de 14 maquereaux: de 25 om environ a été ponotionné le

20 avril 1969 à la sortie du port de Tema (GHANA). Trois prises ont été,

faites sur antiooagulant: les globules ne se sont pas oonservés et ont été

inutilisables.Douze ponotions individuelles sans antiooagulant (de 23 à 34)

ont été utilisées pour obtenir les aérums et l'hémoglobine.

Comme nous l'avions déjà constaté dans un travail précédent, le sang de

SQomber japonious, dans les oonditions où nous le prélevons,ne donne pas

lieu à la formation d'un oaillot aveo exudation nette de sérum.

4.1.1. Reoherohe d'iao et d'hétérohémagglutinines naturelles

Le manque de globules n'a pas permis oette étude.

4.1.2. Etude de l'hémoglobine (Planohe I):L'éleotrophorèse en gel d'agarose

Behring et tampon véronal à pH= 8,16 révèle 3 fractions, la première étant

la plus faible.

Aveo le tampon de Hirsohf'eld pH... 8,58 la benzidine déoèle une 4ème fraction

très faible entre les fractions 2 et 3.

Par diffusion double en gel d' agar (Planohe VII) oontre des immunsérums anti

hémoglobine de bonite ou de So. tritor des oommunautés ,antigéniques sont

mises en évidenoe entre 1 'hémoglobine de maquereaux et 1

l'hémoglobine de bonite : pr,éoipités la, lb et 5

llhémoglobine de So. tritor 1 préoipités 1,3, et 5

l' extrait do foi r de Th. albacaresi préoipi tés l, 3a, 3b,5 ot 6;"

On remarque par aillours que l'hémoglobine de maquereaux: donne lieu. à 4 préoi­

pités oontre l'immunsérum anti hémoglobine de So. tritor.

4.1.3. Etude du sérum: LI élootrophorèse en gel d' agarose Behring et tampon de

Hirsohfeld r~vèle Il fractions. La première très importante, a une mobilité

relative supérieure à l'albumine humaine. La fraction 2 est dense et migre

légèrement plus loin que l'albumine humainQ

•

-10

La fraction 4 est très dense. Les fractions 7 (au niveau des bêta. humaines)

et 8 sont importantes. Les fractions 3,5,6,9,10 ct 11 sont plus faibles.

La fraction 5 est située au niveau des alpha humaines et les fractions 9,10 et

11 de mobilités relatives positives se trouvent an niveau des gamma. humaines.

Remarque 1 La sérum 25 a été testé vis-à-vis des globules rouges humains des grOu­

pes 0, A et B. Aucune agglutination n'a été constatée•

, 1, 1

S:rmmas~:16 1116 19 20 21

1 0 13

BDMAINS 1 IX x x x x

1 A Itx X x x X x

DE 1 B 1 x 41 1x x z x

SUJETS1 AB 1 x x x x x x

:0 absorbé~ 1! x X X % .:x

lA absorbél f' 2 .x x :li: X

1 1 l 3 3 4 4B absorbé 1• -1

1 19 1 - - - - - -CORY:P.B:l]NE 1

2011 - - - - - -1

1 21 J - l 3 - 3 -1 1

SCOMBDROMORUS1 2 1 4 4 3 x 3 41 1

tritor1 4 1 - - - - - -

SCOMBBR ja.ponicu~ 251

21 - - - - -

PHYTOAGGIDTININE: S.g.1 1 4 3 3 3 2 31

TABLI!J.AU 2 '1 Réactions d'agglutina.tion desg1!Qbules rouges de COl'yphène hippurus

..

SERUMS~ : l 224 "1 0 1 x x 4

EDMAINS 1 11 A 1 x :x: 4

DE1 B 1 x Je1

JeJ

SUJETS1 AB 1 x x x1 0 abSOl'bé~ x x x11 A absorbét 4 4 3t 1

3 3. B absorbé - 41

191 Cl 2 2

J 1CORYPHENE 1 20 1 Cl Cl Cl

1 1 . .21 Cl Cl Cl

1 11

2J - - -SCOMBEROMORUS t 1

tritor 1 4 1 - - -1 25 1 '1SCOIi/IBER j a;ponious1 - -1

PHYTOAGGLUTINIlm ~ S.g.l 1 1 2 -1

TABLEAU 3 1 Réactions d' agglutination

des globules rouges de Soomberomorus tritor

,-

1r-i

~~ - 124.,2.CoryPhènes

Oette étudo porte sur le sang de 6 60ryphènes ,(016 à (21) p<lohées an

avril1969 dans la même aire (aucW1e prise entre 4°5)IN _1°08 W et Ootonou)

ainsi que sur les sérums do coryphènes pêohées en avril 1968 (09 à OlS)~

l.. Le saxe desooryphènes 016 à 021 a été relevé 1 m~es 18 et 20 et femelles, 16,

17, 19 et 21.

4.2.1.- Recherche d'iso et'dlhétérohémagglutinines naturelles (Tableaux 2 et 3)

Ija p~ésence d' au moins une isoagglutinine dans le sérum de cor;rnhène est

oonfirméelon la. "irouve dans le sérulll 21 qui agglutine los globulos 18 et 20. nserait intéressant de rechercher le nombre exact de oes isoagg1utinines et d'en

déduire un groupage sanguin simple (oomme le groupe A,B,O, humain)

Oontrairoment aux résultats obtonus avec los ooryphènos 08 à OJ.s les

globulos 16 à 21 sont tous agglutinés par les sérums humains et par des aggluti-,

nines·différontos de l'anti A et de l'anti B humaine.;.

" Le sérum de So. tritor ct l'extrait de Stylosenthès graoilis (phytoagglutinine)

agglutinent les 6 globules tastés sans pouvoir les différencier.

Nous avons enfin la confirmation de la présence dans le sérum do ooryphène d'hé­

térohômagglutinines naturolles oapables de déoe1er des différences antigéniques

sur los globules rougos de bonite (Tableau 4). Invorsement les globules 8,24 et

26 de Bonite différencient les sérums 19,20 at 21 de o~ryphène.

Vis-à-vis des globules rouges humains il est intêressant de noter que le sérum

C20 agglutine (force 3) les globules des groupes 0 et A mais non ceux du groupe B~

Le sérum C21 hémolyse ces 3 types de globules et le sêrum C19 ne les agglutine pas

et ne les hémolyse pas.

n:a::ED-1 1--+ c·.·;·;.:.:.:.'-+ 1:-;-:;$;::;;1

1 1...1 1, 1----.-1 1~~1

----. [=:J_ ..~-.~

1 1-+ C==:J-+ c:::::::::::J

SERUM HEMOLYSE

Hb.

-+~1 1

Hb

11

1 1

-+11-+ 2

-+ 2'

-. i..I3-.- '

CJ1 ,

c:=J 1 11 111 111 111 11

1 1 E::::::::::~c::=J 11 . 11 1 ,1 r 1 11 , r:=J ~':';';';'3 CJ'-'-:':':·:-1 .....

1 1 1 1 1

::;:.:::::: c:::J :.:.:.:.:: 01 1 1 1 J1 1 11 ,1 , 1 1 11 1 1 1 1 1 1 1• • • • .1

1 1 J 1 1 1

II 1 ,• • • .2 Hb1 1 1 1 1 1 1 1 , ,

• • • • .317 'lB 19 20 2116

•..1 J•

R

% ~

ELECTROPHOREGRAMME DE I!HEMOGLOBINE DE CORYPHAENA hippurus

1 Gel d'A9arose &ehri"9 1.5% Tampon véronal pH: '.1' . 5h.30 ci 150v coloration au noir Amido 12 8NJ[ G.I d'Amidon 1rl. 1 Tampon de Ashton pH: 8.0 , 9h à 150Y. Les flèches' indiquent les fractions révélées

à la beœidine

PLANCHE ][, '.

.'

,

,

4.2.2. Etude de l'h~oglobine (Planche II)

Nous avons rotrouvé par électrophor~se en gel d' agaros e Behring les

3 fractions bien marquées déjà mises an évidence préoédemment en gels d'agarose

Fluka et I.B.F.- L'électrophorèse en gel d'amidon et tampon de Ashton à pH Q

81~ rôvèle un dédoublement des fractions 2 et 3 colorées par la bonzidine.

L'analyse immunoélectrophorétique nous apporte de préoieux renseigne­

monts (photographie 1). Tout d'abord l'identité anti~nique des trois fractions

révelées en éleotrophorèse 1 les 3 ~de préoipitation révelés par la benzi­

dine, l'amidosohwartz ou le rouge ponceau peuvent âtre considérés oomme un seul

arc à. 3 oourbures traduisant la précipitation entre 1 antigè'1e et la famille

d'anticorps correspondante. Ainsi à des mobilités élcctrophorétiques différen­

tes (3 fractions) se suporpose une spécifioité immunoohimique unique -

Notons ioi que :"uno mêpo substance présentant diverses variétés moléoulaires

peut appara~tre sur les électrophorégrammes sous l' aspoct de plusio\It's frac­

tions dist~notes; o'est le cas des isoenzymes ou de pigments respiratoires,

tels que l'hémooyanine" (W. GHID.AL:U)

La solution antigénique d'hêmoglobino ayant servi à. l'immunisation

contenait au moins 2 antigènes sériques traduits par 2 aro A et B :non révélés

par la benzidine.

Des essais do ooncentration de l'immunsérum par re1argu.ge au suJ::ro.to d'ammonium,

à. diverses concentrations (25,33,50. %de satura.tion) suivi de diaJ.yse contre

de l' eau p~siologiqUe nous montrent Clue la famille d' émtioorps anti Rb de

coryphène se trouve dans les 3 fractions obtenues.

Enfin par diffusion double en gel d'agar nous retrouVOl~ trois précipités

distinots sans communauté antigénique avec les hémoglobines de bonite, de So.

tritor, de maquereaux: ou d' extrait de foie de Th. albaoares.

1 < __

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PHOTOGRAPHIE

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14 l:aWa15 ~:::::::::::~

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,

ELECTROPHOREGRAMME DU SERUM DE CORYPHAENAhippurus

(a) ~cl ,'"om'doft • 13-', Tampon de Poulick pH=8.55. 5h à 7 V.lCm ,

(.)GII .'omi'an i 13~ .Tampon de Ashton CLoc:alisation des Transf.ninu par aut.ordio_

,rophic )

PLANCHE m:

- 14

4.2.3. - Etude du sérum (Planohe III)

L1évaluation en protéines totales est de 65 g par litre par la méthode

du biuret. L'éleotrophor~se en gel d1agarose ayant révèlé su moins Il fractionsl

fraction l tr~s :i:Jnportante de mobilité relative supérieure à 11 albumine' humaine J

fractions 2 et 2' importantes et légèrement plus lentes que ltalbumine humaineJ

la fraction 3 et la fraction 4 (transferrine) sont tr~s importantes, 41 et 5

sont plus faibles. Les fractions 6 (dense) et 7 (très dense) mi~ont au niveau

des b~ta humaines. Les fractions 8 et 9 sont mal définies.

L'éleotrophorèse en gel d'amidon et tampon de Pouliok à pH=8,56 révèle 19 frac­

tions dont oertaines pourraiont donner lieu à un pol;ymorphisme (fraction 5,8 et

9).La looalisation des transferrines a été effectuée après électrophorèse en gel

d'amidon et tampon de Ashton. Ià sussi 19 fractions sont visibles et parmi elles•

la fraction 6 est une transferrine" Il semblerait qu'un po1;ymorphisme soit poe-

sible mais oeci devrait être vérifié sur un grand nombre d' éohantillons. En effet

le sérum 09 possède une fraction 6 ou TfA et une fraction 61 que nous appelerons

Tf B- Ltautoradiographie a.près éleotrophorèse sur papier ne révèle qu'une bande

de transferrine pour les 3 éohantillons (photogra.phie 2).

;

4 ~1: 15~

1 16 a::Ei:i:Eli:I

: 1............., :.:.:.:.:.:.

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1 12 _

1 11 1,'.i 1

t 11a_I 11 1J 11 1,-1 11 11 lbd

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1 1J 11 1~18.1.11

11 11 1~

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5 ~ 6 1 1

:;:i1 l, 1......;.;.:.:.:.;J 1 1 •,~ ..~t/~ U)~

10 lszzd 11 e·~··:·:·;·}J1 1 1 11 1 12 ~~~~~3

1 1

11 - 15 tz:::m1 1 1B~ 1

1 1 1 11 1 1 11 1 1 1

J

1 1• I·;·;.;-;·j·;····).............,~

1 •

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12 Ce:-:-:-;-:-'l ,

SI C-;-:-:-;-:-:11111

1 a:a::zo:I•Z,_:a, •!~

4~5_6~

11

111

1 1R ~

11

e l ][

ELECTROPHOREGRAMME DU SERUM DIACANTHOCYBIUM

solandri (1) ET DE TEiRAPTURUS sp (][)

Gel 'Îmiian '3%. Tampon ., Pou6ck pH.:8.56 Sh à7 Y/cm

PLANCHE J1l

.""

4.3 • .âoaJ:lthooybium solandri

Seule l'étude du sérum a pu 3tre poursuivie sur un éohantillon de Janvier

1968 et les éohantillons 12 et 13 dt avril 1968 (Planche V). La teneur en

protéines totales par la méthode du biuret nous a donné en Février 1968

48 gJlitre (61 gflitre par la méthode de ,Kjeldhal). Une mesure effeotuée en

Novembre 1968 nous a donné 55 g/litre. L'électrophorèse en gel d'agarose a.vait

révèlé 10 fractions. En gel dt amidon et tampon de Pouliok, 16 fractions, sont

différenoiées dont oertaines pourraient donner lieu à. un polymorphisme 1

fractions 2,3,8,9 Il.

On oonstate des mobilités êleotrophorêtiques oomparables entre les fractions

14 du sérum d' Aoanthooybium et les fractions 14-15 du sérum de ooryphèneo

1

SERUMS~GR 1 7 8 15 18 19': 24 !6 30, .,31 33 36,' 37 3S 39 40 421

BlIMAINS1 0 1 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 ~ x X If :x:x1 A

1 4 x 0 0 0 " 0 l'l Cl Il 0 ;J: 4 Je • xDE 1 B

t 0 0 0 0 0 0 0 0 0 :x: x Je 0 XX :x:1 1 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Je X .x 0 .4t AB 1 x

; l :i .. ' '. '.' fi .0 absorbé! x :x: 0 x • JI: X X X X 0 Je X x 4 x4 0 0 0 0 3 0 4 0 0 x X x 0 x

SUJETS 111 absorb~l xlB absorbé

tx x 0 0 0 0 0 0 x 0 Cl X X X 0 :x:

. r .',

1 19 J l III III III 2 III 1 ~ III III 4 3 3 III 3- -CORYPBENA hippmwu.8 1 20 1 0 III III 1111 3 3 III 3 III III 3 3 3 III 3-1 21 1 0 3 III III 1111 - 4 III 4 III III 4 2 4 III 3. .

SCOMBEROMORUS tritor : 2 J - l III III III 1 2 III 2 III III 2 III 3- -4 1 3 2 III III III - 2 III III III 4 4 4 III 3-1 1

SCOMBER j aponicus 1 25 1 - - III III III - - III - III III - - - III -1 J

PHYTOAGGLUTININE1 Sg.l 1 1 3 III III III - - III - III III 1 3 III --1 1,

TABLEAU 4 1 Réactions. d'agglutination des globules rouges

d'_~ a.1leteratu.s

.. ..

,

,-

.~ -17

!d=. :BONITES

E,tude portant sur les sangs des .36 bonites (7 à 43) dl avril 1969. Nous avons

vérifié une fois de plus que le sang pris sans antiooagulant ne donne pas lieu

à la formation de oaillot même après 8 jours à + 4°. Oette partioularité mérite

d'8tre retenue et il serait très intéressant de savoir quels sont les facteurs

qui déterminent oet état particulier du sang ainsi que ses reperoussions physio­

logiques (ohez les artb:ttopodes le sang ooagule sans proth:J:tombine ni fibJ;oinog9ne

STRee aux amibooytes, chez les batraciens oe sont les thrombocytes qui déma.x­

rent le prooessus de ooagulation).

Le prooessus de ooagulation du sang est une protection oontre les

hémorragies et les blessures 1 les bonites ne doivent pas 6ohappor à. lo.J règlo.

Peut-8tre existe-il un "facteur de oontact" qui permet la ooagulation au niveau

des tissuS lésés et qui est absent dans une prise de sang intracardiaque stérile•..

(~es essais de ooagulation seront faits par addition de ooton hydrophile).

,D'autre part les sangs pris s~ oitrate d.onnent des globules rouges apparemment

~tao1;e&près 7 à. 8 lavages à. l'e~ physiologique à. 9,)%. En fait aux tests

d'agglutination on oonstate que bon nombre de globules sont impropres à. la

leoture. Les globules rouges de bonite doivent donc 3tre oonsidérés oomme fra­

giles.

4.4.1. 1 Reoherche dliso et dlhétéroh~a,gglutinines (Tableau 4)

Les sérums humains agglutinent fortement les globules de bonite quand oeeux-oi

ne sont pas dénaturés et les hétéroagg1utinineu, de ooryphèno permettent une

différenciation des globules testés oomme oela avait déjà été oonstaté.Notons

aussi une faible action d ''Wle phytoagglutinine de la graine de Stylosenthes

graoilis.

4.4.2. Etude de l'hémoglobine (Planohe VI). Nous n'avons pas pu séparer ,oorrecte­

ment l,'hémoglobine des oomposés sériques et oeux-ci se retrouvent sur lléleotro­

phtutégramme. On retrouve les deux importantes fractions l et 2 de mobilité rela,..

tive positive et par immunodiffusion on obtient 2 préoipité (5 et 6) avec 11 izn.....

munsé:rum anti hémoglobine de Bonite (Planohe VII). La. réaotion à la benzidine

R

c:::::J1 11 11 11 1-1 ,

Il7

.~..:.:.:.: .:..':.:.:.. [=:J c=:J1 1 , 1 ,1 ,

1 1 1 1 11 1 , 1 1 , 1 ,.. - E:·:·:·:·:·a t:::=J1 1 1 1

, 11 1 1 1 1 1 11 1 r 1 1 1 1

c:=J ,.:.;.;....;] c:::::=J t:=::::J1 1 1 , 1 1 1 11 1 , 1 1 1 1 11 1 c:::::J 1 1 1 11 1 • r , 1 r1 1 1:0::;:;.::::1 1 1 1 1- - -}1 1 , , 1

• '2 HbIl Il8 9 '10 11

-. c:::::J1 1r 11 11 1

c:=:t, ,, 1

c:=Jl ,1 11 1

--+ c:=::=J

--+ c=J, ,1 11 1r 1

, ,c:::::l

I. II :m:

ELECTROPHOREGRAMME DE L! HEMOGLOBINE 0" EUTHYNNUS alleteratu5

l Gel d'Agoras. Behring 1.5%. Tampon véronal PH:: 8.16 • $h 30 à 150 v _coloration au nOir amido 12 BNIt Gel d'A9~rol. Behring 1.5" , Tampa'n de tjirschfeld pH: ..8.58 _ .6h. à Svlem -. , .. "" . .:DI Gel d'Amidon 1~% Tampon de Ashton 7h a 1&0'1. L.es fleches indiquent les 'radions revelees a la benzldtne

PLANCHE ::1Z:

-

l'évèle une troi&ième fraction éleotrophorétique plus rapid.e que les préoédentes

e~ 1'1mnnrDsérum anti hémoglobine de So. tritor donne lieu à. .3 préoipités avec

l'hémoglobine de Bonite.

LI analyse immunoéleotrophorétique enfin ne nous a donné qu'un seul a;['O très

dense au niveau de la fraction 2.

4.4.3. Etude du sérum 1 Le sérum est diffioile à. obtenir et n'est jamais exempt

d'hémoglobine qui oache les frao~ions sériques qui pourraient se trouver entre

le résorvoir et la fraction.7. L'électrophorèse en gel d'agarose Behring et

tampon de Hirsohfeld révèle au moins 7 fractions".

Par rapport à 1.' aJ.bumine humaine les fractions 2 et .3 trlJs importantes ont des

mobil~tés éleotrophorétiques relatives supérieure pour la fraction 2 et légère­

ment inférieure pour la fraction 3. La. fraction 6 très importante a une mobili­

té comprise entre les alpha et les b~\a. humaines. Les fractions 4,5 et 7 sont

plus faibles.

Les fraotions très importantes 2,3 et 6 sont oonstantes et présentent des analo­

gies aveo les fractions 1,2 et 4 de Sc. tritor et les fractions 2 et .3 de Sc.

japonious.

-19

4.5. - Tetra.pturus

Le sérum da oa poisson après un an da oongélat~on 1nuna valeur en protéines

{-- t~tales de 61 sil (méthode du biuret). LI analysa êlaotrophorétique en gel

d'amidon et tampon disoontinu de Pouliok à pH= 8,56 révèle 10 fractions

(Planoha V) •

•1

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lB1 1l ,1 !

1

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-+~3t i1 11 1G!!!lD!!lI

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1 1

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,,1 1•-

1 1-~ 1R _

1 2 3 4 Hb SERUM

JI: JI[

ELECTROPHOREGRAMME DE L!HEMOGLOBINE DE SCOMBEROMORUS tMtor

l Gel d'A9arose 8ehrtn9 1.5%.Tampon véronal pH: 8.16, 5hl0 à 150v. cGloratÎon a~ no.r ornido 12 eNn Gel d'A9arose Behrin, 1. 5~. Tampon Hirschfelll pH: 8.56 6h ès Sv/cm.

• .. 1

EGel d'AmIdon 1S%. Tampon de AsHTON pH: 8.0 _ 7h a 180v... .. ."",... .Les fleches ,ndlquent les fractions revetees a la benzldene

PLANCHE :m:

i - , -20

4.6. Soomberomorus tritor

Nous avons p&hé 4 de oes poissons appelés oommun~entBonito. Nous avons

remaJ:'qué une fois de plus une irrégularité de la ligne latérale gauohe sur

l'un d'entre eux (N°3, mâle) alors qu'elle est régu.1ière sur les deux autres

observés (N°l et 2, femelles).

4.6.1. Reoherohe d' iso et d 'hé'térohêmagglutinines naturelles (Tableau 3)

Les globules r~uges sont tous agglutinés par les sérums humains e.&loune di:f:'­

férenoiation n'a pu atre faite entre les 3 globules testés. Par oontre les

sérums 2 et 4 di.!fèrent par la nature de leurs agglutinines naturelles vis­

à-vis des globules de ooryphènes (agglutinés par le sérum 2 et non par le 4)

et de oertàins globules de bonite.

4.6.2. Etude de 1 'hémoglobine (Planohe Y~.~ous avo~ trouvé ~ois fractions

bien nettes aussi bien en gel d'agarose qu'en gel d'amidon. L'immunodif:f'u­

sion double révèle 3 préoipités importants et un quatrième qui pourrait ~tre

d4 à la rencontre d'un antigène sérique (la solution .injectée au lapin u,t, . _';'

n'était pas pure) et des antioorps oorrespondants. L'analyse immunoéleotro­

phorétique ne révèle qu'un seul ara très dense.

4.6.3. Etude du sérum 1 L'éleotrophorèse en gel d '8.b"BJ.'ose Behring et tampon

de Hirsohfeld révèle 9 fractions, les 4 premières é~ant les plus importantes ..

Les fractions 1,8, et 9 sont assez importantes et lus fractions 5 et 6 sont

faibles.

Remarg~ • Le sérum 4 agglutine totalement les globuleH rouges humains des grou­

pes 0, A et B et le sérum 3 agglutine totalement les g:.obules rouges humains

du groupe B. très peu ceux du groupe A (force 2) et paa du tout ceux du groupe O.

..

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@5 - C\Hb1 ~.Gsc.t.'J~ ~ \':::V~~""'9 EVe..o~

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PLANCHE JZJr.

.~:=:

~.__-7

IMMUNODIFFUSION DOUBLE EN GEL DIAGAR DES HEMOGLOBINESde E. olleteratus/ S. Japonic~s "Sc. tritor J C. hippurus "et d'extrait

d. fou~ de Th. albacor(2S.

~I

:

BIBLIOGRAPHIE------ -- -

:BARON (J.C.)- 1968- Note sur le sang de quelques poissons marins de Oôte d'Ivoi..

re - C.R.O. d'Abidjan - Doo. So. Pr. n0023.

FINE (J.M)- 1968 - Electrophorèse en gel d'amidon ial Techniques d1électropho­

rèse de zones. Ed. de la Tourelle, PARIS, pp. 45-17

GHIDALIA (W)- 1969- Etude éleotrophoréstlquQ et :tmmunoohimiq.ue du sérum d IUll

orustaoé déoa.pode Maoropipus puber (LINNE) Applioa.tion à. lli.mmunoohimie syst&'­

matique des crustacés l8. Cahiers de :Biologie marine Ed,! de la. Sta.tion biologie

de &sooff. Tome X oahier 2 pp 109-128.

UTTER (M), RIDGWAY, (G.J.),HODGINS (H.O.)- 1964-

Use of plant e:rtraots in serogioa.l etudies of fish. Spec. Soi.Rep.Fish.

(472)

wrncms (N.P.) - 1968- Multiple ha.emoglobins of the Atlantio salmon (Salmo

sa.lm-)

J. Fish. Res. M. Canada. 25 (12) pp 2651-2663.

roC1JNENTS DU CENTRE 'DE RECBERCHES OCEANOGRAPHIQUES

001 - ti!RCI-IAL l1 E..G. - Avril 1966

Fluctuations dé la p&he des sa.::r.tlinellesen C8te d~Ivoire.

002 - BEYSSAC, J. - AvriJ. 1966 -

Le pbFtoplanoton entre Abidjan et 1'Eqùateur, pendant la saison cha.ude.

003 - BEYSSAC, J. -- Avril 1966

Qùe1q1Jes dt>nnées sv.r la compasitian et 11 ~volUtion animelle .du phy't9­plancton au large d'Abidjan.

004 - .MARCHAL, E. G. .. Avril 1966

TeneuJ:' en matières grasses et teneur en eau chez deux olupéidés de c&ted'Ivoi,re,

005 _. }fARCH.AL, E.G. - Ob;;·obre 1966

OeJ1.1fs, larves et post-larves de l' anohois du Golfe de Guinée,(An?hoviella guinéensis).

006 - TROADl5C, J.P. - Octobre 1966

Observations sur la biologie et la dynamique des Pseudotolithus seneplensis .dans la ré~on de Pointe-No:i.re. . ..

007 - BERRIT, G.R. - Octdbre 1966

Catalogue des données disponibles sur le milieu physique - (Secteur marind l Abidjen) •.

008 BAUDnl-LA1JRENCm, F.G. - Octobre 1966

Sur une amélioration concer.na.nt la numérotation de's carrés statisqtiquesI~en. . .

. 009 BERRIT, G.R. - Octobre 1966

Les eaUl: dessalées du Golfe d, Guinée.. . .

010 .... BEYSSAC, J. - Déoembre 1966

.Diatomées 9t dinof'la.gellés des eaux. ivoir:te.mJea pend.liœt llanuée 1965 ­Variations qusntitat;i.ves•

•OU - TRADUCTION, Janvier 1967

Gnllend,' J.A.. , et Cadima E. I·iétbodes d'analyse des lM'Pula:t1ODs--œ poissons... ._Cbapè If MatMmatiques.. - (b'ad. J.F. TBDADEC). -

012 - REYSSAC, J. - Janvier 1967Note sur les variatio!1S nycthémérales des diatomées et dinoflagellésen deux points' du littoral ivoirien. .

013 - REYSSAC, J. - ~er 1967

Diatomées et dinoflagellés récoltés par· le navire "OMBANGOIf dans lesparages de l'ne Azmobon.

014 - MARCHAL, E. G. - Mai 1967

Clé p;rovisoiro de détermi.na.tion des oeufs et l8:I:"Ies des clupé1dés etengBNlidés ouest-at'ricains.

015 .... BAUDm-LAURENCIN, F. G. - Mai 1967

La p8che de l' albacore dans la région norct..-équator1ale du foUe de Guinée{entre Monrovia et le Cap Formose). '. .

01' - BERRIT. G. R. - R. GERARD & L. VERCESI - Juin }!J67Observations Océanographiques exécutdes en 1966 - l - Stat!ons HYdrologiques.

017 - BERRIT, G. R. -GERARD, R. & VERCESI, L... Janvier 1968

Observations O~ographiques exécutées en 1966II. - Stations Oeti~res - Observations de surface - et de foJ!1d.

018 - BERRIT, G. R. ~ GERARD, R. " VERCEEI, L. "':' Juin 1967

Observations Océanographiques ex~utées en 1966m~ - Bathythémogrammes.

OJ,9 - MARCHAL, E. G. - DlSoSmbre 1967 .

La pOChe des sardin1ers ivoiriens en 1966~

020 - TROADEC, J. P. - Février 1968

Note sur·le développement possible de l'exploitation des crevettes ~n

~ta d'Ivoire

\

, !1

rt

021

022

023

- ·BAUD:m-J.ADRENOIN, F. G. - AV1'il 1968

OJ.ooissance et Agè del·Albaco~.~~..'-"'-.~ .

• Lli)IASSON, L. &: REBERT, J. P. - Mai 1968

Observations de courants sur lé plateau con1:ix1ental iveirien mise enévidence d'un sous-oourant. .

~ BARON, J. C. - Mai 1968

Note ~ le sSJtg de quelques poieso!J,S marins.de œta d'Ivoire. (Scomber japonicus, eor,yphs,ana bi~_Aoant:boey.b1um solandzi,

Eutb;vmLus al1eteratus, Tetrapturus sp.)"

"

1,,

·'

024 - BAUDIN LAURDNOnr, F.G. & MARCHAL, E.G. - Juin 1968Contribution à l'étude biométrique de 1'Albacore (Thunnus Albacaros)du golfe dq Gu1néo.

025 - LE LOEUFF, P. & INTJ1JS, A. - Juillot 196a .La. faune benthique du platoau o.ontinental de Côte d'IvoireRéooltes au ol;l.alut '- Abondanoe - Réparti,tion -

026 - BERRIT, G.R. - GERARD., R.-· Li1'MASSON, L. - REBERT, J .-P. &- Vii'...JWESI,L.Août 1968.Obser~a.tions Océanographiquee exéoutées·en'1967I.- Stations hydrologiques - Observations do surface ot do fond.Stations oôtières

027 - BERRIT, G.R. - GERARD, D. - IùXA.SSON, L. - REBERT, J .-P. & VirrRCESI,L.Ootobro 1968

Observations Oo~anographiqueB exéoutées· en 1967.II.- Bathytharmogrammes.

028 - BARON, J .-C. - AofÏt 1968Etude pré1iminairo des protéines du Cristallin do doux espècos deSardinollos - (Sardinella aurita C.V.,Sardine11a eba C.V.).

029 - BARON, J.-C. - Ootobre 1968Etude préliminaire sur 10 sang do doux espèoGs do Sardinelles

0)0 - TRQ.ADDC, J .-P. - Novembre 1968Le regimo alimontaire de doux ospèoes 4,0 Sciaenidao oues t-afrioains

. (Pseudotolithus senegaIensis V. et Pseudoto1ithus typus Blkr.).

0~1 - BARRO, M. Novembre 1968Première estima.tion sur la oroissanoe dos Braohydenterus ~itus(Val. 1834) en Côte d' Ivoi!' e

032 - Oampagne guinée l du "Joan Charoot" -Rêsultats' d'observationsfasoicule I. Bathythermogrammesfasoioule II. Courants (à para!1Are)fasoicule III.Stations hyœrologiques (à parattre)fasoicule IV. Phytoplancton (à. paraître)fasoicule V. Atlas ( à. paraître)

033- .mGm,W, J. P.-- BARRO, M. - BOUILLON, P. -1~ J.SS9Pôche au chaJ.ut. sur· J.a radiale do Gralld.-ëss- Jam. _. ---~:.~-

034 - MARTIN, L. 'Mars 1969 -,Introduotion à l'étude géologiquo du plateau oontinental ivoirinn:--

Premiers résultats ':. _~ -

035 - REYSSAC, J. Mars 1969 ,Mesures de la produotion primaire par la méthod.e du 14C au large dela Côt~ d 'Ivoiro (- '. -- _.

036 - EOUILWN, P. -' TBOADEC, J.-P.- BARBO, M. Octobre 1969PAches au chalut sur les radiales de Jackvi1le, Grand-LallOu, Frescoet Sassandra. (C8te d'Ivoire)

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