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- 1 -
보고
사 업 감염 폐 평가
2007. 4.
울 과
책 : 승
- 2 -
경 귀
보고 “감염 폐 평가” 역 보고 니다.
2007 4월
역 : 울 과
울 보건 원
주 과
연 진 : 책 연 원 승
연 원 고
연 원 근
- 3 -
1. : 감염 폐 평가 연 역
2. :
료 폐 폐 직 , 병리계, 상 폐 그리고
료 폐 에 도과 개 에 시 보 도, 간에 폐
보 시 리 균 러 동 그리고 생 차 가 지에
체계 연 고 .
3. 연 내
가. 연 내
(1) 5개 병 원 감염 폐 에 균 러 리 동
(2) 균 생 연
(3) 러 생 연
(4) 미생 평가
나. 연
(1) 5개 병 원 감염 폐 에 균 러 리 동
(가) 5개 병 원( 울 병원, 울시립병원, 주 병원, 당 울 병원, 산
과 원)에 감염 폐 거.
(나) 거 감염 폐 보 도, 간 도 개 에 보
.
(다) 도 개 건에 보 폐 각 시 에 맞 어
균 탁.
( ) 탁 0.45μm 지( 균 지 고 지에 남 )
.
(마) 링 지 10ml 균 탁 후 100μl 균
지(BHIA, , 그리고 지)에 도말.
( ) 도말 지 BHIA 37°C , 지 그리고 지 37°C
CO2 에 24시간 동 .
(사) 후 식 균 집 DNA 균 16S 폭.
( ) 폭 16S 산 동염 열 염 열 .
- 4 -
( ) 염 열 NCBI BLAST program 균 동 .
(차) 도말 후 남 직 균 DNA (사), ( ), ( ) 균
동 다. ( )에 결 균 리 동 에 사 rpoB
가 여 시 .
( ) 링 여과 Viral extraction kit 여 러 산
.
(타) 러 산 폭 동 염 열 .
(2) 균 생 연
(가) 체 감염 균, 균, 내 균, 도 나 그
리고 균 탈지 에 후 0, 10, 15 , 30 동
6°C, 30°C에 각각 보 .
(나) (가)에 열거 균에 곡 (die-off curve) 결 .
(3) 러 생 연
(가) 각 다 도에 보 병원 폐 생 .
거 , 귀에 105-109 PFU MS2, 러 , RSV 러 공
첨가, plaque assay , 곡 (die-off curve)결 .
(나) MS2 bacteriophage 실험 건 립 후, 러 (murine
norovirus type 1) 질 RSV(Respiratory Syncytial virus) 거
, 귀에 첨 , 0, 10, 20, 30, 40 동 -20°C, 4°C,
18°C, 30°C에 각각 보 후 RAW 264.7 또 Hep-2 포주 plaque
assay .
(4) 미생 평가
(가) 병원 미생 염 도 그리고 다 경 건 에 각각 미생
경에 등 고 여 체 도 병원
체 평가 립.
(나) 병원 미생 염 도, 경매체 건 , 그리고
미생 평가 여 비 평가.
- 5 -
4. 연 결과
본 연 2006 8월 23 2007 4월 22 동 “감염 폐
평가” 5개 병 원에 거 료 폐 직 , 병리계,
상 폐 과 료 폐 에 도 개 에 시 보 도,
간 보 시 리 균 러 동 그리고 생 차 에
체계 연 다 과 같 결과 얻었다.
가. 5개 병 원 감염 폐 에 균과 러 리 동 , 균
리 동 결과 5개 병원 원 울 병원 보 료폐 에
병원내 주 감염균 도 나 질내상재균(Lactobacillus) 동
고, 주 병원 감염 폐 에 상재균(Staphylococcus spp.) 동
었다.
나. 5개 병 원 감염 폐 에 직 16S rpoB
각각 폭 , 폭결과 5개 폐 에
폭산 다. 2개 폭산 에 직 염
열 , 결과 체 상재균(Staphylococcus epidermidis)
었다. 나 지 3개 폭산 폭 TA클 닝
폭산 염 열 , 결과 연계에 재
균 , 체 균 균(Propionibacterium acnes),
Streptococcus spp.그리고 Microbacterium oxydans 었다.
다. 결과 5개 병 원 감염 폐 에 균, 러 검
상 것 나타났 , 러 결과 샘
링 시료 원 것 사료 다.
. 체 감염 균, 균, 내 균, 도 나 그리
고 균에 보 간, 도에 생 연 결과,
균 다 균들 보 도에 상 없 보 간 10 경과 시 생
10% 어 다.
마. 감염 폐 에 러 리 동 여 러
러 , 러 influenza virus 그리고 염
B 간염 러 에 폭 (polymerzation chain reaction)
사 다. 5개 병 원에 집 료 폐 , 료 폐 등
- 6 -
20여개 시료 80여 상 결과 러 Hepatitis B
virus가 폭 각각 1 검 었다. 또 러 검
민감도 여 chloroform extraction과 PEG 등 사
나, 러 검 동 다.
. 러 각 다 경 건에 생 여 MS2
murine norovirus(MNV1), respiratory synctial virus(RSV) 등
거 등에 공 spike 여 생 찰 결과,
러 경우 30 상 지 생 가 보 도가
러 생 낮 것 나타났다.
사. 러 (RSV) 연 결과 냉동 고 러 가 검 지
빠 게 가 것 보 생 다.
러 주 naked virus 경매체에 크 , 변
등에 재 도가 매우 다. 러 같 러
경우 30 경과 후에 99.9%가 것 나타났다. 그러
나 러 등과 같 러 변, 등
포 료폐 경우에 도가 매우 (107-109 VP/gram)
료폐 에 체 시 없 것 보 다.
- 2 -
차
1. 과업개
가. 진 경
나. 과
2. 과업 진 결과
가. 상
나. 5개 병원 원 감염 폐 에 균 리, 동 러 검
결과
1. 5개 병원 원 감염 폐 에 균 리 동
1.1 연
1.2 과업 결과
1.2.1 울 병원 균 리 동
1.2.2 울시립병원(보 매병원) 균 리 동
1.2.3 주 병원 균 리 동
1.2.4 당 울 병원 균 리 동
1.2.5 산 과 원 균 리 동
1.2.6 폐 직 균 16S , rpoB 폭
1.2.7 생리 사
2. 5개 병원 원 감염 폐 에 러 검 동
2.1 연
2.2 연 결과
울 병원 러 검 동
울시립병원(보 매병원) 러 검 동
주 병원 러 검 동
당 울 병원 러 검 동
산 과 원 러 검 동
2.3 감염 에 러 생 특징
- 3 -
다. 균 러 생 연
1. 균 생 연 결과
1.1 연
1.2 연 결과
1.2.1 감염 균(포도 균) 생 연 결과
1.2.2 균( 리 리움 리 ) 생 연 결과
1.2.3 내 균( 균) 생 연 결과
1.2.4 도 나 생 연 결과
1.2.5 균(peptococcus) 생 연 결과
2. 러 생 연 결과
2.1 연
2.2.1 러
2.1.2 MS2 생 실험
2.1.3 MNV1 생 실험
2.1.4 RSV 생 실험
2.2 연 결과
2.2.1 러 연
2.2.2 MS2 생 실험
2.2.3 MNV1 생 실험
. 미생 평가
1. 감염 폐 에 병원 미생 평가(Hazard Identification)
2. 병원 평가(exposure assessment) dose-response 계
3. 미생 평가(Hazard Characterization)
4. 고찰
가. 5개 병원 원 감염 폐 에 균 리 결과 고찰
나. 5개 병원 원 감염 폐 에 러 검 결과 고찰
5. 본, 미 , EU 등 주 진 도
6. 참고 헌
- 4 -
1. 과업개
가. 진 경
감염 폐 료 , 동 병원, 시험 ․ 검사 ․ 연 등 경
에 체나 동 에 진찰, 료, 시험, 검사, 등 료
또 시험 ․ 검사 ․ 연 등에 생 질 체에 우 가
어 경 ․ 보건 상 특별 리가 다고 어 통 폐
말 다. 체계 폐 도에 보다
상에 어 고, 리 도 차등 어 지 나, 본
감염 폐 도 개 에 에 고, 리 도 차
등 다.
¨ 료폐 체계( )
¡ 격리 료폐 : 체에 주 것 어 등 엄격 게
지 여 폐
- 격리병동 등 특 에 생 체 폐 상 리
- 감염 폐 리 보다 엄격 게 리
¡ 료폐 : 체에 우 가 어 특별 리가 폐
- 감염 폐 리 에 리 지
¡ 료폐 : 체에 우 낮 나 별도 독립 체계에
리 가 폐
- 감염 폐 리 보다
- 낮 므 경감
¨ 료폐 보
¡ 보 규 15 , 그 10 규 고 등
규 에 차등 고 나, 개 에 같
- 폐 생량 보다 보 간에 가 므 , 별
같 보 간 고, 규 보 간
- 5 -
¡ 보 에 ․ 변질 우 가 경우 냉동보 (0℃ ) 도
고 나, 개 에 냉 보 (6℃ )
- 경우 냉동보 시 가 어나 상 우
가 , 냉 보 도 ․ 변질 지 것 단
- 리 에 채 6℃ 에 보 도 고
- ․ 변질 우 가 격리 료폐 , 직 , 생 ․ 독 폐
냉 보
¡ 상 폐 료폐 ․ 변질 우 가 낮 므 보
간 10~15 에 30 연
< 1> 보 개
폐 보 보 간 보 상태
격리 료폐 지 15 냉 (6℃ ) 보
료
폐
직 폐 지 15 냉 (6℃ ) 보
병리계폐 골 지 15 상 가
상 폐 지 30 상 가
생 ․ 독 폐 지 15 냉 (6℃ ) 보
염폐 골 지 15 상 가
료폐 골 지 30 상 가
* 격리 료폐 에 여 특 사 검
나. , 과
감염 폐 도 개 에 에 폐
체에 우 가 어 특별 리가 폐 료 폐 ( 직
, 병리계폐 , 상 폐 , 생 폐 , 그리고 염폐 ) 고 ,
체에 우 낮 나 별도 독립 체계에 리 가 폐
개 에 보다 리 폐 료폐 고 다.
연 사 보 특별 리가 료 폐 에 병원균
러 가 검 리 료 폐 특별 리가 것 다
- 6 -
격리 료폐
염병 2 1 에 염병 타 보
여 격리 사 또 가 염병 2 2
에 가 염병에 료 에 생 체 폐
격리병동
료
폐
직
폐
체 또 동 직 ․ ․ ․ 신체 , 동 사체, ,고
생 ( 청, , 등)실
병리계
폐
시험 ․ 검사 등에 사 , , 보 균주, 폐시험 , 슬
드, 커 , 폐 지, 폐 갑 등상
병리실
상
폐
주사 , , 날, , 과 , 리재질
시험 등
진료실원실
실
생 ․
독 폐폐 신, 폐 , 폐 료 , 식 폐 독 등 원실
실
염
폐
폐 , 시 사 폐 , 타 에 염 어 특
별 리가 폐진료실
원실
료폐
․ 체 ․ 비 ․ 등 도 어 지
탈지 , , 거 , 귀, 생리 , 주사 ,
트 등
진료실원실
(The application of Molecular Techniques to the Study of Hospital Infection,
Molecular Techniques in Hospital Infection, Vol 130, 662 - 668, 2006. 5,
Quantitative detection of enteroviruses in activated sludge by cell culture
and real-time PCR using paramagnetic capturing, J Water Health. 3(3):
313-24 2005. 9). 러 감염 폐 도 개 에 료
폐 폐 보다 리 료폐 에 1)어
병원균, 러 가 리․ 동 지 그리고 개 감염 폐 에
3)15 , 30 4)냉 보 (6도 , 냉동보 님), 상 보 어
병원균, 러 가 얼마나 생 지에 체계 연
었다. 또 러 체계 연 통 여 개 에 감염
폐 보 지에 연 료 공
것 사료 다.
2. 과업 진 결과
가. 상
료 료 폐 개 에 다.
< 2> 개 체계
- 염 질병 염병 2 1 에 규 고 질병 등 미
- 7 -
Group 1 Group 2
Cholera
Diphtheria
Paratyphoid fever
Shigellosis
Typhoid fever
Enterohemorrhagic
Escherichia coli infection
Group 3
Anthrax
Brucellosis
Legionellosis
Tularemia
Epidemic typhus
Leptospirosis
Relapsing fever
Botulism
Lyme disease
Psittacosis
Q fever
Scrup typhus (Tsutsugamushi disease)
본 연 에 료, 료폐 ( 상 , 병리계, 직 폐 )에
균 러 리 동 실시 다.
감염 폐 에 병원균 리 동 시 에 열거 어 병원균 염
열에 맞 어 16S rDNA 결 균 동 에 사 rpoB 염 열
고 다( 본 the infectious law참 ).
(1) 본 Prevention on Infectious Diseases and Health Care for Patients
of Infectious Diseases(the Infectius Disease Law)에 감염 질
에 group 1-3에 당 균 감염 질 < 3참 >.
(2) 결 ․ 결 료 검사에 사 든 재료도 감염 폐 에 포 .
(3) 본 the Infectious Law에 group 4-5에 당 균 감염 질
< 3, 4, 5참 >.
< 3> Group 1, Group 2 감염 질
< 4> Group 3 감염 질
- 8 -
Group 4
Meningococcal meningitis
Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus infection
Methicillin-resistant Stapylococcus aureus infection
Severe invasive streptococcal infections
(Streptococcal toxic shock-like syndrome)
Tetanus
Group A streptococcal pharyngitis
Infectious gastroenteritis
Pertussis
Condyloma acuminatum
Gonorrhea
Chlamydial peumonia (excluding psittacosis)
Multi-resistant Pseudomonas aerusinosa infection
Syphilis
Vancomycin-resistant Enterococcus infection
Genital chlamydial infection
Mycoplasmal pneumonia
Penicillin-resistant Streptococcal pneumoniae infection
보 도 건 샘 링시
냉동, 6℃, 30℃ 0, 15, 30, 40 경과 후
< 5> Group 4 감염 질
감염 폐 집 처리
가) 울 병원, 당 울 병원, 주 병원, 울시립 병원(보 매병
원), 산 과 원 5개 원에 간 건에 맞 어
료 폐 (탈지 , , 거 , 귀, 생리 등), 상 ( 주사
, 트 등), 직 (포 말린에 고 어 ), 그리고 병리계 폐
4가지 별 집 다.
- 9 -
폐 (㎖)
상 폐 20
직 10
료폐 100
병리계폐 30
폐 보 도 보 간
직 냉동, 6℃ 0 , 15 , 30
병리계폐 냉동, 6℃ 0 , 15 , 30
료폐 6℃, 30℃ 0 , 15 , 30 , 40
상 료폐 6℃, 30℃ 0 , 15 , 30 , 40
나) 집 료폐 균 여 다. 폐 별 사
다 과 같다.
료폐 0.45㎛ 지 여 링 고 여과 4℃
보 다.
1. 감염 폐 에 균 리, , 동
1.1 연
가) 감염 폐 통과 지 가 여 게 다. 게
여과지 10㎖ 균 에 담근다. 원 다
지, 지, BHI 지에 원 , 10 , 100 , 1000
당 지 에 상 도말 다 (0.45㎛ 지 통과 러
리, 동 에 다).
나) 균 리 시 사 지 평 지에
도말 다. 경우 CO2 37℃ 에 24시간 다.
- 10 -
다) 감염 내 균 리 에 사 BHI평 지에 도
말 다. 경우 37℃에 24시간 다.
) 24시간 후 각 평 지에 균 집 생겼 지 균
집 경우 각 당 지에 리 여 균 다.
마) 균 균 연 (사) 균 DNA
DNA 폭(PCR; Polymerase Chain Reaction)
16S rDNA 폭 다. 폭 산 동염 열
16S rDNA 염 열 결 다.
) 지 거나 걸리 병원균 경우( ; 매독, 결 균
비 결 균) 균 시킨 에 DNA
다. DNA 폭(PCR) 16S rDNA 폭
다. 폭 산 TA 클 닝 여 클 닝 다. 클
닝 후 16S rDNA가 들어 Colony 고 후 리 후 16S
rDNA가 들어 미드 리 다. 리 미드 주
여 동염 열 여 16S rDNA 염 열 결
다. 또 결 균 비 결 균 동 결 균 비 결 균
rpoB 만 폭 rpoB PCR primer 여 PCR
다. 폭 산 경우 16S rDNA 염 열
과 동 동 염 열 rpoB 염 열 결 여 균
동 다.
사) 병원균DNA : Bead beater 사 거나 SDS proteinase
K 사 다. 균주 상 SDS (0.5 %) proteinase K
여 여, phenol chlorform isoamyl alcohol 처리 후
12,000rpm 상 에 5 간 원심 리 여 상청 다.
isopropyl alcohol 고, 실 에 5 간 후에, 15,000 rpm 15
간 원심 리 여 70% alcohol 척 고 실 에 10 간 말린 후,
- 11 -
16S rDNA Forward 5'-TGC CAA CTG GAT CCT TCG CGG GAC GTC CTT-3'
Reverse 5'-GTT CAC GGT CTT CAT CTG CCG T-3'
rpoB Forward 5'-GCG ACA CTC CAC CAT AGA T-3'
Reverse 5'-GCT CAT GGT GCA CGG TCT A-3'
TE buffer (pH 8.0) 40μl DNA 다.
) 폭(PCR) 동 염 열 : 균 16S rDNA
특 (rpoB)염 열 결 PCR-direct sequencing
다. 각 리 균주 16S rDNA 폭시키 에
균 16S rDNA염 열 여 든 균 16S rDNA
폭시킬 primer 고 다. 각 Primer 20 pmol과 DW,
template DNA 어 final volume 20 ul PCR-premix에 어 PCR
것 다. 폭 PCR 산 1.2% agarose gel에 동 후,
Quiaex 여 리 다. 동 염 열 template DNA
60ng, primer 3.2 pmol, DW 여 12 μl 만든 후에 dye
terminator mixture 8 μl 어 cycling sequencing 다.
Perkin Elmer Cetus 9600 사 끝난 sample Quiaex
spin column 여 후에 6.75% acrylamide gel에 1X TBE
buffer에 40 watt 12시간 동 것 다.
< 6> 균 리 동 에 사 16S rDNA , rpoB
) 병원균 16S rDNA rpoB 염 열 결 : 동염 열
보 염 열 BLAST program (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)
여 다.
차) 어 운 결 균 비 결 균 rpoB 염 열 결 : rpoB
균 경우 고보 고, 균 에 고
균에 특 균 규 식 ,
다 거나 든 균 탐지, 동 여 다 (그림1).
- 12 -
<그림1> Mycobacterium rpoB 염 열에 Mycobacterium 동
계통 (phylogenetic analysis).
- 13 -
<그림2> 감염 폐 에 병원균 리, , 동 도.
1.2 과업 결과
1.2.1 울 병원 균 리 동 결과
1) 감염 폐 거 : 2006 11월 2
2) 거폐 :
감염 폐 거
료 폐 탈지 , 거 , 귀, 생리 , 지 과병동
상 폐 주사 과병동
병리계 폐 청 리 진단검사 실
직 폐 포 말린에 담 직 병리 실
- 14 -
폐 BHIAChocolate
Agar Blood Agar
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ *2/‐
보
울병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
료폐 *31/38 *48/31 *34/36
상 폐 ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
냉동 병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐*1/1 ‐
*1/‐
40
6℃료폐
*1/‐ ‐ *1/‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 *1/‐ ‐ *1/‐
3) 연 결과
*균집 균 집 에 균 DNA 후 16S DNA 폭, 염
열 통 여 균 동 다.
- 15 -
<그림3> 울 병원에 16S 염 열 chromatogram(a)
염 열 결과 (b)
(a) 폭 균 16S 염 열 chromatogram
(b) 폭 균 16S 염 열
CGACTTCCCCCAGTCATGAATCACTCCGTGGTAACCGTCCTCCCGAGGGTTAGACTA
NCTACTTCTGGAGCAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGG
AACGTATTCACCGTGACGTTCTGATTCACGATTACTAGCGATTCCGACTTCACGCANTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGGACTACGATCGGTTTTATGGGATTAGCTCCACCTCGCGGCTTGGCAACCCTTTGTACCGACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCTGGCCGTAAG
GGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCCTTAGAGTGCCCACCATAACGTGCTGGTAACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTACGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTGTCTGA
GTTCCCGAAGGCACCAATCCATCTCTGGAAAGTTCTCAGCATGTCAAGGCCAGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGTCAACTTAATGCGT
TAGCTGCGCCACTAAGATCTCAAGGATCCCAACGGCTAGTTGACATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCACCTCAGTGTCAGTGTCAGTCCAGGTAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTTCCAATATCTACGCATTTCAC
CGCTACACTGGAAATTCCACTACCCTCTACCGCACTCTAGCCAGACAGTTTTGGATGCAGTTCCCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCCAACTTATCAGCCACCTACGCGCGCTTTACGCCCAGTAA
<그림 4> 폭 균 16S 염 열 NCBI BLAST program 사
염 열 비 결과
- 16 -
NO Blast 결과 도 보고
1 Pseudomonas sp. M13 16S ribosomal RNA gene 99% 보 료
2Microbacterium saperdae partial rpoB gene for RNA, polymerase subunit B
99% 보 료
3 Pseudomonas sp. C36 16S rRNA gene 99% 보 료
4 Pseudomonas oryzihabitans partial 16S rRNA gene 99% 보 료
5 Pseudomonas sp. C36 16S rRNA gene, strain C36 99% 보 료
6 Pseudomonas oryzihabitans partial 16S rRNA gene, type strain 99% 보 료
7 Pseudomonas sp. C36 16S rRNA gene, strain C36 99% 보 료
8 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
9 Pseudomonas sp. OK-5 16S ribosomal RNA gene 99% 보 료
10 Pseudomonas sp. OK-5 16S ribosomal RNA gene 99% 보 료
11 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
12 Pseudomonas oryzihabitans partial 16S rRNA gene 98% 보 료
13 Pseudomonas sp. C36 16S rRNA gene 99% 보 료
14 Pseudomonas sp. K3 16S ribosomal RNA gene 99% 보 료
15 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
16 Pseudomonas oryzihabitans partial 16S rRNA gene 99% 보 료
17 Pseudomonas oryzihabitans partial 16S rRNA gene 99% 보 료
18 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
19 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
20 Pseudomonas oryzihabitans partial 16S rRNA gene 99% 보 료
21 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
22 Pseudomonas sp. CYN01B gene for 16S rRNA 99% 보 료
23 Microbacterium oxydans partial rpoB gene 99% 보 료
24 Microbacterium saperdae partial rpoB gene 99% 보 료
25 Microbacterium saperdae partial rpoB gene 99% 보 료
26 Lactobacillus sakei gene for 16S rRNA 99% 보 료
27 Lactobacillus graminis partial 16S rRNA gene 99% 보 료
< 7> 울 병원 감염 에 16S 폭 염 열 결 후 균 리 동 결과
울 병원 감염 폐 에 균 동 결과 병원 내에 감염에 원
균 도 나 (Pseudomonas sp.) 질내상재균 Lactobacillus spp.가 동 었다.
- 17 -
폐 BHIA Chocolate Agar
Blood Agar
보간
보도 채취
직 ‐ ‐ ‐
보
울시립병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐*1/‐
*1/‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
40
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
1.2.2 울시립병원(보 매 병원) 균 리 동 결과
1) 감염 폐 거 : 2006 11월 17
2) 거폐 :
폐 거
료폐 70% , 지 주사실
상 폐 주사 주사실
병리계 폐 청 리 진단검사 실
직 폐 포 말린에 담 직 병리 실
3) 연 결과
*균집
- 18 -
폐 BHIAChocolate
Agar Blood Agar
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐
보
주병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 *1/‐ ‐ ‐
료폐 ‐ *2/1 ‐/1*
상 폐 *2/‐ *1/‐ *1/2
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐
냉동 병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐*1/‐ ‐ ‐
직 ‐*1/‐ ‐
상 폐 ‐*3/‐ ‐
30 ℃ 료폐 ‐ ‐
*1/1
병리계폐*2/‐ ‐ ‐
냉동 직 ‐ ‐
*3/‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
1.2.3 주 병원 균 리 동 결과
1) 감염 폐 거 : 2006 12월 8
2) 거폐 :
폐 거
료 폐 , 지 실
상 폐 주사 실
병리계 폐 청 리 진단검사 실
직 폐 포 말린에 담 직 병리 실
3) 연 결과
*균집
- 19 -
NO Blast 결과 도 보고
1 Brevibacillus borstelensis strain LMG 15536 16S ribosomal RNA
gene 99% 료 30 30℃
2 Staphylococcus epidermidis strain S09 16S ribosomal RNA gene 99% 료 40 30℃
3 Acinetobacter sp. ANT9054 16S ribosomal RNA gene 99% 료 40 30℃
4 Acinetobacter sp. ANT9054 16S ribosomal RNA gene 99% 료 40 30℃
5 Staphylococcus pasteuri strain LF-2 16S ribosomal RNA gene 99% 상 30 6℃
6 Staphylococcus sp. Ap-9 16S ribosomal RNA gene 99% 상 30 6℃
7 Staphylococcus epidermidis strain S09 16S ribosomal RNA gene 99% 상 15 30℃
8 Staphylococcus pasteuri strain LF-2 16S ribosomal RNA gene 99% 상 30 6℃
9 Staphylococcus epidermidis strain S09 16S ribosomal RNA gene 99% 상 40 30℃
10 Staphylococcus pasteuri strain LF-2 16S ribosomal RNA gene 99% 상 40 30℃
11 Micrococcus sp. DUT_AHX 16S ribosomal RNA gene 99% 상 40 30℃
12 Staphylococcus pasteuri strain LF-2 16S ribosomal RNA gene 98% 병리계 30 6℃
13 Staphylococcus epidermidis strain KL-004 16S ribosomal RNA gene 99% 병리계 30 -20℃
14 Staphylococcus epidermidis strain SR1 clone step.1051c07 genomic 99% 직 30 -20℃
15 Kocuria sp. CV36 16S rRNA gene 99% 직 30 6℃
< 8> 주 병원 감염 에 16S 폭 염 열 결 후
균 리 동 결과
주 병원 감염 폐 에 균 동 시 상재균(Staphylococcus
spp.) 동 었다.
* 간 보고 후 원들과 결과 남 당 울 병원과 원에
감염 폐 료 폐 균 가 많 나 과 병동
산 과 원에 폐 거 결 .
1.2.4 당 울 병원 균 리 동 결과
1) 감염 폐 거 : 2006 12월 8
2) 거폐 :
폐 거
료 폐 , 거 ,귀, 생리 , 지 과 병동
상 폐 주사 과 병동
병리계 폐 청 리 진단검사 실
직 폐 포 말린에 담 직 병리 실
- 20 -
폐 BHIAChocolate
Agar Blood Agar
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐
보
당 울병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐
3) 연 결과
당 울 병원 감염 폐 에 균 없다.
- 21 -
폐 BHIA Chocolate Agar
Blood Agar
보간
보도 채취
직 ‐ ‐ ‐
보
산 과원
병리계폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐
40
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐
30℃ 상 폐 ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐
1.2.5 산 과 원( 울 재)
1) 감염 폐 거 : 2007 2월 27
2) 거폐 :
폐 거
료 폐 70% , 거 , 귀, 생리 , 지 과 병동
상 폐 주사 과 병동
병리계 폐 청 리 진단검사 실
직 폐 포 말린에 담 직 병리 실
3) 연 결과 : 산 과 원 감염 폐 에 균 없었다.
- 22 -
1.2.6. 4개 병원과 산 과 원에 나 탁 에 직 균 16S
, rpoB 폭
<그림5> 당 울 병원 병리계 폐 -20℃, 15 보 16S 폭
Lane2: 병리계 폐 -20℃, 15 보 16S 폭 (1500 bp).
16S 염 열 후 균 동 결과: Staphylococcus epidermidis partial 16S rRNA
gene( 체 상재균)
<그림6> 산 과 원 보 병리계 폐 16S 폭.
Lane2: 병리계 폐 -20℃, 15 보 16S 폭 (1500 bp).
16S 염 열 후 균동 결과: Staphylococcus epidermidis partial 16S rRNA gene
( 체 상재균)
<그림7> 울 병원 료폐 6℃, 30 보 16S 폭. (Lane 7, 13)
폭 어 TA vector에 클 닝 후 염 열 실시 다.
- 23 -
NO Blast 결과 도 보고
1Staphylococcus epidermidis strain SAFR-016 16S
ribosomal RNA gene, partial sequence ( 상재균)97% 병리계15 -20℃
<그림8> 울 병원 료폐 30℃, 15 보 rpoB 폭. (Lane5)
폭 어 TA vector에 클 닝 후 염 열 다.
5개 병 원(산 과) 에 직 DNA 여 균 16S
rpoB (결 균만 특 폭시킬 )
여 균16S , rpoB 폭 다. 폭결과 (1) 당 울 병원 병리계
폐 -20℃, 15 보 , (2) 산 과 원 보 병리계 샘 에 16S 가
강 게 폭 었 , 강 게 폭 16S 산 직 염 열 여
균 동 (그림5, 그림6), (3) 16S 가 게 폭 샘 ( 울 병
원 료폐 6℃, 30 보 )과 (4) rpoB 가 게 폭 샘 ( 울
병원 료폐 30℃, 15 보 )에 릴 TA 클
닝 실시 , 클 닝 후 염 열 다(그림7, 그림8).
< 9> 당 울 병원 감염 에 16S 폭 염 열 결 후
균 리 동 결과
16S 염 열 후 BLAST 균 동 당 울 병원 병
리계 폐 -20℃, 15 보 폐 에 나 균과 동 Staphylococcus
epidermidis partial 16S rRNA gene 동 었다.
- 24 -
<그림9> 울 병원 료폐 6℃, 30 보 폐 에 16S 폭
M Lane1 Lane2 Lane3 Lane 4 M Lane1 Lane 2 Lane3
M: Marker(100bp ladder), Lane 4, Lane 3: 16S 가 게 폭 ( 산 크 1500 bp) -> 폭 어 TA클 닝 후 염 열 다.
<그림10> 울 병원 료폐 30℃, 15 보 폐 에 rpoB 폭
M Lane1 Lane2 Lane3
M: Marker(100bp ladder),Lane3: rpoB 폭 (342 bp) -> 폭 어
TA클 닝 후 염 열 다.
16S rpoB 가 게 폭 울 병원 료폐 6℃, 30 보
폐 (그림9)과 울 병원 료폐 30℃, 15 보 폐 (그림10)에
TA 클 닝 -> 폭 어 TA vector에 클 닝 후 폭 가 들어
지 EcoR I 단, 후 염 열 다.
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Lane 1, 2 -> rpoB 염 열 (rpoB 산 크 342bp)
- 25 -
염 열 결과:
TCCGCGCGGTCGGCGAGCTGATCCAGAACCAGGTCCGCACGGGTCTGTCCCGC
ATGGAGCGCGTCGTCCGCGAGCGCATGACCACGCAGGACATCGAGGCCATCAC
GCCGCAGACCCTGATCAACGTGCGCCCCGTCGTCGCCGCGATCAAGGAGTTCT
TCGGAACGTCGCAGCTGTCGCAGTTCATGGACCAGAACAACCCGCTCGCGGGT
CTGACGAACAAGCGTCGTCTCTCCGCGCTCGGCCCCGGTGGTCTCTCGCGTGA
CCGTGCCGGCGTCGAGGTCCGTGACGTCCACCCCTCGCACT
균 동 결과 Microbacterium oxydans partial rpoB gene for RNA polymerase
subunit B, 건강 에 나 균 었다.
- 26 -
NO Blast 결과 도 보고
1 Propionibacterium acnes isolate W1392 16S ribosomal RNA gene 100% 료 6°C 40
3 Aquatic bacterium R1-B13 gene for 16S ribosomal RNA 99% 료 6°C 40
4 Beta proteobacterium BP-5 16S ribosomal RNA gene 98% 료 6°C 40
5 Methylophilus sp. C2 16S ribosomal RNA gene 98% 료 6°C 40
9 Aquatic bacterium R1-B13 gene for 16S ribosomal RNA, partial sequence 98% 료 6°C 40
10 Beta proteobacterium BP-5 16S ribosomal RNA gene, partial sequence 97% 료 6°C 40
11 Methylophilus sp. C2 16S ribosomal RNA gene, partial sequence 99% 료 6°C 40
13 Streptococcus mitis 16S ribosomal RNA gene, partial sequence 99% 료 6°C 40
14 Streptococcus sp. 3097C 16S ribosomal RNA gene, partial sequence 99% 료 6°C 40
17 Aquatic bacterium R1-B13 gene for 16S ribosomal RNA 98% 료 6°C 40
18 Methylophilus leisingeri gene for 16S rRNA 98% 료 6°C 40
22 Streptococcus infantis strain ATCC 700779 16S small subunit ribosomal RNA gene 99% 료 6°C 40
23 Streptococcus mitis 16S ribosomal RNA gene 99% 료 6°C 40
24 Streptococcus oralis 16S ribosomal RNA gene 99% 료 6°C 40
27 Solanum tuberosum cultivar Desiree chloropla, 99% 료 6°C 40
28 Lycopersicon esculentum complete chloroplast genome, cultivar IPA-6) 99% 료 6°C 40
29 Citrus sinensis chloroplast, complete genome 99% 료 6°C 40
30 Atropa belladonna complete chloroplast genome, strain Ab5p(kan) 99% 료 6°C 40
31 Nicotiana sylvestris chloroplast DNA 99% 료 6°C 40
34 Aquabacterium sp. MG68 partial 16S rRNA gene, isolate MG68 97% 료 6°C 40
35 Elbe River snow isolate Iso21 16S ribosomal RNA gene, partial sequence 96% 료 6°C 40
36 Beta proteobacterium MH2-3 16S ribosomal RNA gene, partial sequence 96% 료 6°C 40
37 Denitrifying bacterium W125 gene for 16S rRNA 98% 료 6°C 40
38 Panaciterramonas fulva gene for 16S rRNA, partial sequence, strain:Gsoil 328 97% 료 6°C 40
39 Rhizobacter dauci gene for 16S ribosomal RNA 97% 료 6°C 40
43 Aquabacterium sp. MG67 partial 16S rRNA gene, isolate MG67 97% 료 6°C 40
44 Denitrifying bacterium W125 gene for 16S rRNA 100% 료 6°C 40
46 Panaciterramonas fulva gene for 16S rRNA, partial strain:Gsoil 322 100% 료 6°C 40
47 Pseudomonas saccharophila 16S ribosomal RNA gene 100% 료 6°C 40
48 Rhizobacter dauci gene for 16S ribosomal RNA 100% 료 6°C 40
51 Agricultural soil bacterium isolate SI-5, 16S rRNA gene (partial) 97% 료 6°C 40
53 Beta proteobacterium HJ12 16S ribosomal RNA gene 96% 료 6°C 40
Lane 3 - 16 -> 16S 염 열 (16S 산 크 1500bp)
- 27 -
동 균들 연계에 재 균들 고 체 균
균(Propionibacterium acnes)과 Streptococcus sp. 동 었다.
1.2.7 생리 사
생리 가 포 어 과병동 산 과 원 료 폐 에 균
많 검 지 주 실험 상 었 생리 에 어
들어 지 헌 사 통 여 보 다.
헌 사 통 여 생리 본 처리과
에 실 지 못 지만 (2002 생리 질검 비
여 민우 여 경 , 매연 등 시민단체에 생리
사에 등 비 보 공개 청 나 사 에 공개거 ), 시
에 매 생리 에 1) 균 상시키 여 가 처리 어
(참 : 여 생리 (특허 20-0119857-0000), 지주식 사), 2)커 가 균
가공 어 ( 균 질첨가, 참 : 여 생리 UFT 원사직 시험연
원에 시험 결과 균 식 억 ) 그리고 3) 균 가 ( 드내 균
착, 참 : 탈취 생리 청 2 (특허 20-0196072-0000, (주)동
산 지) 첨가 어 헌 사 통 여 다.
생리 에 첨가 어 러 균 여 과병동, 산 과
원 료폐 에 균 식 억 다고 생각 다.
2. 감염 폐 에 러 리 동 .
2.1 연
본 연 과 에 5개 병원 산 과 원에 채취 료폐 샘
에 러 리 동 outline 다 그림11과 같다.
- 28 -
<그림11> 료폐 에 러 리 동 outline.
감염 집 처리 후 여과 에 Viral extraction
Viral extraction kit(QiaAmp Viral Mini Kit, QIAGEN Inc) 여 러
산 다. 러 폭 지 ‐70℃에
보 다.
1) 폭 동 염 열
5개 병. 원 얻어진 4가지 러 ABI2320
- 29 -
러 Primer sequences Position
Norovirus GI
Forward 5’‐ CTG CCC GAA TTY GTA AAT GA ‐3’ 5342‐5361
Reverse 5’‐ CCA ACC CAR CCA TTR TAC A ‐3’ 5653‐5671
Norovirus GII
Forward 5’‐ CNT GGG AGG GCG ATC GCA A ‐3’ 5046‐5064
Reverse 5’‐CCR CCN GCA TRH CCR TTR TAC AT ‐3’ 5367‐5389
thermocycler 여 폭 다.
가. Reverse transcription (RT) ‐ PCR Norovirus 검
료폐 에 러 RT‐PCR 건 여 norovirus
genogroup I, genogroup II 폭 실시 다. 실험 과 에
RT‐PCR 여 QIAGEN One Step RT‐PCR kit (USA, cat.
210212) 사 다. 22.5㎕ RT‐PCR reaction mix에 2.5㎕
template가 첨가 었고 primer (50 pmol) forward, reverse 각각 0.25㎕가
첨가 었다. 에 사 primer sequence 10과 같다.
< 10> Norovirus 검 에 사 primers
Viral RNA reverse transcription 42℃에 60 고, 다 Taq
activation 95℃에 15 다. PCR reaction thermo‐
cycling condition 40cycle , 94℃에 30 , 50℃에 30 , 72℃에
30 어 고, final extension 72℃에 10 다. 폭 product
1% ethidium bromide stained agarose gel 100V 20-30 동 여
DNA image analyzer 다. RT‐PCR 통 폭 루어지
product band 크 각각 norovirus GI 330bp, GII 344bp 나타나게 고
통 각 샘 에 norovirus GI, GII 단 게 다.
가) RT‐ PCR Influenza 러 검
료폐 에 러 RT-PCR 건 여 influenza
러 폭 실시 다. 실험 과 에 RT‐PCR
QIAGEN One Step RT‐PCR kit (cat. 210212) 사 다. 22.5㎕
RT‐PCR reaction mix에 2.5㎕ template가 첨가 었고 primer (50 pmol)
- 30 -
러 Primer sequences
Influenzavirus
Forward 5’‐ GGAATGATHGAYGGNTGGTATGG ‐3’
Reverse 5’‐ATATCGTCTCGTATTAGTAGAAACAAGGGTGTTTT‐ 3’
러 Primer sequences
Hepatitis B virus(HBV)
FirstForward 5’‐ CTC TGC CAA GTG TTT GCT GA ‐3’
Reverse 5’‐ CAA GGC ACA GCT TGG AGG CT‐3’
NestedForward 5’‐ TTG CTC GCA GCC GGT CTG GA – 3’
Reverse 5’‐ TGA ACA GTA GGA CAT CAA CA – 3’
forward, reverse 각각 0.25㎕가 첨가 었다. 에 사 primer sequence
11과 같다.
< 11> Influenza 러 검 에 사 primers
Viral RNA reverse transcription 42℃에 60 고, 다 Taq
activation 95℃에 15 다. PCR thermo‐
cycling condition 40cycle , 94℃에 30 , 55℃에 30 , 72℃에
30 어 고, final extension 72℃에 10 다. 폭 product
1% ethidium bromide stained agarose gel 100V 20-30 동 여
DNA image analyzer 다 . RT‐PCR 통 폭 루어지
product band 크 640bp 나타나게 고 통 각 샘 에 influenza
러 단 게 다.
나) Multiplex ‐ PCR Hepatitis B Virus (HBV) 검
료폐 에 러 multiplex ‐ PCR 건 여 HBV
폭 실시 다. 실험 과 에 PCR Bioneer Taq DNA
polymerase (Korea, cat. E‐2011‐2 ) 사 다. 22.5㎕ PCR reaction
mix에 2.5㎕ template가 첨가 었고 primer (50 pmol) forward, reverse 각각
0.25㎕가 첨가 었다. 에 사 primer sequence 다 과 같다.
< 12> Hepatitis B virus에 사 primers
- 31 -
a. First round PCR
First round PCR amplification cycling reaction 다 과 같 cycling
condition 진 었다. Initial denaturation 94℃에 2 고 다
denaturation 94℃에 30 , annealing 58℃에 30 , extension
72℃에 30 간 40cycles 루어 , additional extension step
72℃에 5 간 다. 폭 product 4도에 보 다.
b. Nested PCR
First round PCR 에 얻어진 폭 product template 여 nested
PCR 다. Nested PCR amplification cycling reaction 다 과 같
cycling condition 진 었다. Initial denaturation 94℃에 2 고
다 denaturation 94℃에 30 , annealing 56℃에 30 ,
extension 72℃에 30 간 40cycles 루어 , additional
extension step 72℃에 5 간 었다. 폭 product 1% ethidium
bromide stained agarose gel 100V 20-30 동 여 DNA image
analyzer 다. RT‐PCR 통 폭 루어지 Hepatitis B
Virus (HBV) product band 크 571bp 나타나게 고 통 각
샘 에 Hepatitis B Virus (HBV) 단 게 다.
2.2 연 결과
에 언 통 여 5곳 병 원에 얻어진 결과 다
과 같다. 각각 처리 과 신뢰 결과 클 포
polyglycol ethylene (PEG) 다. 그러나 본 연 결과에
PEG 과 후 차 가 없게 나타났다. 폭과 검 에
각각 positive control과 negative control 갖게 여 consistence 보
다.
- 32 -
가) Norovirus GI 검
Norovirus GI 샘 내에 재 positive control과 같 330bp
크 폭 다.
<그림12> 보 매 병원에 채취 샘 norovirus
보 건 보 고 Lane1: 료폐 , Lane2: 병리계폐 ,
Lane3: 직 , Lane 4 상 폐 나타낸다. 샘 에 norovirus
GI에 나타냈다.
(a) PEG
(b) PEG 후
- 33 -
나) Norovirus GII 검
Norovirus GII가 샘 내에 재 344bp band가 나타나게 다.
<그림13> 당 울 병원 보 매 병원 보 샘 norovirus genogroup II검
Lane1: 직 Lane2: 병리계폐 , Lane3: 상 폐 , Lane4: 료폐
. 건 lane1-4 15 간 6℃ 보 , lane5-6 30℃보 , lane 7-8 냉동보
. 본 실험에 든 샘 에 norovirus GII가 검 지 다.
(a) PEG
(b) PEG 후
다) Influenza 러 검
Influenza 러 가 샘 내에 재 band 640bp에 게 다. 든
샘 에 influenza 러 가 검 지 다.
- 34 -
<그림14> 주 병원 보 샘 influenza 러 검
40 간 보 샘 , Lane1 상 폐 과, Lane2 료 폐
6℃보 것 고, Lane3과 상 폐 과, Lane4 료폐 30℃에
보 것 다.
(a) PEG
(b) PEG 후
<그림15> 당 울 병원 influenza 러 검
Lane1 상 폐 , Lane2 료폐 , Lane 3 병리계 폐 ,
Lane4 직 다. Lane5-6 30℃에 보 고, Lane5 상 폐
고, Lane6 료폐 다. Lane7-8 냉동 보 고, Lane7 병리
계폐 , Lane8 직 나타낸다. 샘 에 influenza 러 검
지 다.
- 35 -
) HBV 검
HBV가 샘 내에 재 band 571bp에 게 다. 본 연 과 에
HBV 주 병원 1 었다.
<그림16> 산 과 원에 HBV 검
Lane1-4 지 6℃보 고, Lane1 상 폐 , Lane2 료폐
, Lane 3 병리계 폐 , Lane4 직 다. Lane5-6 30℃에 보
고, Lane5 상 폐 고, Lane6 료폐 다. Lane7-8 냉
동 보 고, Lane7 병리계폐 , Lane8 직 나타낸다. 샘 에
HBV 검 지 다.
(a)
b) 후
<그림17> 당 울 병원 40 보 샘
Lane1 상 폐 , Lane2 료폐 6℃보 것 고, Lane3 상
폐 , Lane4 료폐 30℃에 보 것 검 HBV가 없다.
- 36 -
폐Norovirus
G1Norovirus
G2HBV
Influenzavirus
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐ ‐
보
울병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
Norovirus, HBV, influenza 러 보 간 보 도 그리고 채취 에
러 검 결과 13과 같다.
< 13> 울 병원 샘 에 러 검 결과
24개 샘 4개 다 도 건에 40 동 보 후 러 검
결과 어 러 도 검 지 다.
- 37 -
폐Norovirus
G1Norovirus
G2HBV
influenzavirus
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐ ‐
보
보 매병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐ 30 ℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐ 30 ℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
< 14> 보 매병원에 러 검 결과
24개 샘 러 검 결과 negative 나타내었다.
- 38 -
폐Norovirus
G1Norovirus
G2HBV
influenzavirus
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐ ‐
보
당울
병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 + ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
< 15> 당 울 병원 샘 에 러 검 결과
24개 샘 23개 샘 negative 나타냈 냉동에 15 간 보
직 샘 norovirus GI에 positive 나타내었다.
- 39 -
폐Norovirus
G1Norovirus
G2HBV
influenzavirus
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐ ‐
보
주병원
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
15
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30
6℃ 료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ + ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30 ℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐냉동
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
< 16> 주 병원에 러 검 결과
24개 샘 23개 샘 negative 나타났 6℃에 30 간 보
직 샘 에 HBV에 positive 나타내었다.
- 40 -
폐Norovirus
G1Norovirus
G2HBV
influenzavirus
보간
보도
채취
직 ‐ ‐ ‐ ‐
보
산 과원
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
15
6℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30 ℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
냉동직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
30
6℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 ‐ ‐ ‐ ‐
30 ℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
병리계폐 ‐ ‐ ‐ ‐
냉동직 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐
40
6℃료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
상 폐 ‐ ‐ ‐ ‐30℃
료폐 ‐ ‐ ‐ ‐
< 17> 산 과 원에 러 검 결과
24개 샘 러 검 에 negative 나타내었다.
- 41 -
2. 3 료폐 에 러 생 특징
에 당 울 병원 15 동 냉동 보 직 샘 에 norovirus
GI에 positive가 나타났고, 주 병원에 30 동 6℃에 보
직 샘 에 HBV가 검 었다. 1% ethidium bromide stained agarose gel
100V 20-30 동 여 DNA image analyzer 사진 다 과 같다.
<그림18> 당 울 병원 15 보 샘 에 norovirus 검
Lane1~Lane4 6℃보 , Lane5 Lane6 30℃보 , Lane7과 Lane8 냉동 보
sample , Lane1: 상 폐 , Lane2: 료폐 , Lane3: 병리계폐 ,
Lane4: 직 , Lane5: 상 폐 , Lane6: 료폐 , Lane7: 병리계폐 ,
Lane8: 직 다. Lane8 norovirus GI에 positive control 나타낸다.
<그림19> 주 병원 30 보 샘 에 HBV 검
Lane1~Lane4 6℃보 , Lane5 Lane6 30℃보 , Lane7과 Lane8 냉동 보
sample , Lane1: 상 폐 , Lane2: 료폐 , Lane3: 병리계폐
, Lane4: 직 , Lane5: 상 폐 , Lane6: 료폐 , Lane7: 병리계
폐 , Lane8: 직 다. Lane4 HBV에 positive control 나타낸다.
- 42 -
당 울 병원에 검 norovirus Lagergene6 program 여
sequencing 결과 norovirus Hu/GI/water‐2B/2004/ south Korea capsid protein gen,
partial CDS 었다. 검 norovirus 염 열 National Center
for Biotechnolgy Information (NCBI) Genbank에 BLAST 결과 같다.
<그림20> Norovirus G1 검 당 울 병원에 염 열
chromatogram (a) 염 열 결과 (b)
(a) 검 norovirus 염 열 chromatogram
(b) 검 norovirus partial capsid sequence
GGCGCCAGTGGCGCTGGTCAGTTGGTACCGGAGGTTAATGCTTCTGACCCTCTTGCA
ATGGATCCTGTGGCGGGTTCTTCAACAGCAGTTGCAACTGCTGGGCAAGTTAACCCT
ATTGGCCCTTGGATAATCAATAACTTTGTGCAGGCTCCCCAAGGTGAATTTACTATT
TCTCCAAATAATACCCCCGGTGATGCTTTGTTTGATTTGAGTTTAGGCCCTCATCT
<그림21> 검 염 열 NCBI BLAST program 사 염 열 비 결과
- 43 -
주 병원에 detection HBV positive control과 비 여 sequencing
결과 다 HBV 나타났다. HBV가 30 간 6℃ 도에 보
에도 료폐 에 HBV가 재 다. HBV 러 가 검 샘
염 열 결과 다 과 같다.
<그림22> 검 Norovirus 계통 (Phylogenetic tree>
▶ 탤릭 체 SNUGI 검 Norovirus GI 나타낸다.
통 검 러 가 Norovirus GI-1계통 다.
- 44 -
<그림23> HBV가 검 주 병원 샘
(a) 검 HBV 염 열 chromatogram
(b) 검 HBV 염 열
AATACACCTCCTTCCCATGGCTGCTCGGGTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGAC
GTCCTTTGTCTACGTCCCGTCGGCGCTGAATCCCGCGGACGACCCGTCTCGGGGCCGT
TTGGGCCTCTACCGTCCCTTGCTTTCTCTGCCGTTCCAGCCGACCACGGGGCGCACCTC
TCTTTACGCGGTCTCCCCGTCTGTGCCTTCTCATCTGCCGGACCGTGTGCACTTCGCT
TCACCTCTGCACGTCGCATGGAGACCACCGTGAACGGCCACCAGGTCTTGCCCAAGCTC
TTACATAAGAGGACTCTTGGACTCTCAGCAATGTCAACAACCGACCTTGAGGCATACT
TCAAAGACTGTTTGTTTAAAGACTGGGAGGAGTTGGGGGAGGAGATTAGGTTAAAGGT
CTTTGTACTAGGAGGCTGTAGGCATAAATTGGTCTGTTCACCAGCACCATGCAACTTT
<그림24> HBV 염 열 NCBI Blast program 사 염 열 결과
5개 병 원 상 연 결과, 본 실험 건에 Norovirus, HBV,
Influenza 러 가 게 견 지 다 것 다.
- 45 -
<그림25> 검 HBV 계통 (Phylogenetic tree>
▶ 탤릭체 snuHBV 검 HBV 나타낸다. 통 검
러 가 HBV/C2/Ce계통 다.
- 46 -
균 균 폐 도 건 보 간
포도 균 감염 균 거
6℃, 30℃ 10, 15, 30 경과 후
리 리움 리 균 거
균 내 균 귀
도 나 병원감염원 균 거
다. 균 러 생 연
1. 균 생 연 (Spike experiment)
1.1 연
1) 감염 균(포도 균), 균( 리 리움 리
), 내 균( 균), 도 나 그리고 균(peptococcus)
주 미생 실에 보 ATCC균주 다.
2) 18에 보 같 실험실에 다 도(6도, 30도), 간(10 , 15
, 30 ) 만들어 감염 균(포도 균), 균( 리
리움 리 ), 내 균( 균), 도 나 그리고 균
(peptococcus) 탈지 에 후 균 생 다.
3) 탈지 에 105-109 CFU 균 첨가( 도계(spectrophotometer) 사
균 맞 다) 여 6도 30도 도에 10 , 15 30 경과
후에 곡 (die-off curve) 결 다.
< 18> 균 spike 실험계
- 47 -
1.2 연 결과
1.2.1 감염 균(포도 균) 생 연 결과
0.2
100
0.6
3.5
1.51.0
0
0.01
0.1
1
10
100
1000
0 10 15 30보 기 간
생 존
(
%)
6'C
30'C
탈지 에 감염 균(포도 균) 후 보 도(6도, 30도), 보 간
(10 , 15 , 30 )에 보 후 감염 균 생 다. 감염
균 생 보 도에 상 없 보 간 10 경과시 생 5% 어
다.
1.2.2 균( 리 리움 리 ) 생 연 결과
2.3
0.1
0.9
0.27 0.340.36
0
0
1
10
100
1000
0 10 15 30보 기 간
생 존
(
%)
6'C
30'C
- 48 -
탈지 에 균( 리 리움 리 ) 후 보 도(6도,
30도), 보 간(10 , 15 , 30 )에 보 후 균 생
다. 균 생 보 도에 상 없 보 간 10 경과시 생
1% 어 다.
1.2.3 내 균( 균) 생 연 결과
100
1.08
0.07 0.09
3.55
1.60
0.55
0.01
0.1
1
10
100
1000
0 10 15 30
보 기 간
생 존
(
%)
6'C
30'C
탈지 에 내 균( 균) 후 보 도(6도, 30도), 보 간(10 ,
15 , 30 )에 보 후 내 균 생 다. 내 균 생
보 도에 상 없 보 간 10 경과시 생 5% 어 다.
- 49 -
1.2.4 도 나 생 연 결과
6.84.0
7.8
1.4
4.8
3.3
0
0
1
10
100
1000
0 10 15 30보 기 간
생 존
(%
)
6'C
30'C
탈지 에 병원 감염 균 도 나 후 보 도(6도, 30도),
보 간(10 , 15 , 30 )에 보 후 도 나 생 다.
도 나 생 30도 6도 도 건에 생 10% 어 지만
6도에 균 생 (7.8%) 30도에 생 (1.4%)에 비 다.
1.2.5 균(peptococcus) 생 연 결과
균 지 다. 균 산 시 생 지 거나 사
것 다. 각 다 보 도(6도, 30도) 다 보 간(10
, 15 , 30 ) 에 감염 균(포도 균), 균( 리 리움
리 ), 내 균( 균) 그리고 도 나 생 보 체 6도, 30
도 도 건에 10 지나 생 10% 어짐 다.
- 50 -
보 간 ( )
균 보 도(℃) 10 15 30
포도 균 100
6
3.5 0.6 0.2
리 리움
리100 0.9 2.3 0.1
균 100 3.55 1.60 0.55
도 나 100 7.0 6.8 3.3
균 100 N N N
30
1.5 1.0 N
0.27 0.36 0.34
1.08 0.07 0.09
1.4 4.8 4.0
N N N
러 러 폐 도 건 샘 링 간
러
(MNV1)
거귀
-20℃, 4℃, 18℃, 30
0, 10, 20, 30, 40
경과 후RSV 거
귀
MS2 surrogate
거 귀
균생 연 결과
2. 러 생 연
2.1 연
< 19> 러 spike 실험계
- 51 -
본 연 과 에 러 생 실험 outline 다 그림26과 같다.
<그림26> 러 생 연 outline
2.1.1 러
본 연 과 에 가지 러 생 실험 에 평가
러 거 생리 등에 가 게 찾 량
다. 러 상 월
MS2 bacteriophage 여 러 리 과 탁
결 고 다.
- 52 -
가) MS2 plaque assay stock
MS2 bacteriophage(ATCC # 15597-B1) Single Agar Layer(SAL)
실 다. MS2 주 E.coli C3000(ATCC # 15597) stock trypic
soy broth(TSB) 25 ml에 tip 찍어 후 37℃에 150 RPM에
overnight 다. 다 날 TSB 25ml에 overnight E.coli C3000
300㎕ 고 37℃에 150RPM 4시간 여 식 주
비 후 실험 지 얼 에 보 다. TSB agar 0.8% 비 고 120℃
에 15 간 균 여 사 지 48℃ 에 어 고 지 도 다.
MS2 phosphate buffered solution(PBS) (pH=7.0) 연 고
50ml tube 에 주 E.coli C3000 300㎕ 고 MS2 100㎕ 후 가볍게
고 melting agar 30ml 어 어 후 150×20 mm Petri-dish
어 말린 후 37℃ 에 24시간 다. 그 다 날 MS2 too
number to count(TNTC) Petri-dish 택 여 PBS 10ml 고 척
후 펫 50ml tube에 었다. 여 에 같 클 포 고
2000g 10 동 4℃ 원심 리 여 supernatant 250㎕ 1.5 ml
microtube에 고 -70℃에 보 다. 같 비 viral stock 도
여 SAL 다. Viral stock 도 108
PFU/ml 었다.
나) 다 리 통 실험
거 귀 과 마 에 상업 매 것 후,
거 귀가 여 spike 실험에 사 크
결 다. 그 결과 100㎕ 어 보
크 귀 가 , 1cm 그리고 거 가 , 2cm 크
3겹 것 크 결 었다. 균 가 여 각각
2×2㎠ , 1×1㎠ Petri-dish 에 고 실험 직 5 동
사 여 다시 균 다. 실험에 사 거 귀 그림
27과 같다.
- 53 -
<그림27> 실험에 사 거 귀 사진
실험에 사 MS2 실험 106 PFU/100㎕ 가 재 도 PBS 여
후 얼 에 보 다. 거 귀 Petri-dish 에 고 MS2 100㎕
여 균 심 럽게 50ml tube에 고 PBS 5ml 었
다. 후 러 검 결 여 3가지
평가 다. 그 1) sonicator, 2) vortex, 3) sonicator vortex
다 사 각각 비 고 sonicator 30 동 동 고
vortex 5 동 동 다.
후에 2000g에 20 동 4℃ 원심 리 후 각 샘 500㎕
PBS 연 고 SAL MS2 다.
다) 실험
거 귀에 MS2 가 러 탈취
sonicator 등 리 뿐 니 에 사 실험 실
다. 같 거 귀 트 비 여 MS2
고 50ml tube에 어 각각 샘 에 PBS 0.3% beef-extract 5ml 었다.
후에 4℃에 sonication 30 , 2000g에 10 동 4℃ 원심 리 후에
PBS 연 여 SAL MS2 다.
- 54 -
2.1.2 MS2 생 실험
MS2 보 도 보 간동 생 보 여 spike 샘 4가
지 도(-20℃, 4℃, 18℃, 30℃)에 40 동 보 실험 다.
거 귀 각각 16개 비 여 Petri-dish 에 고 MS2 stock 나
bulk 만들어 106 PFU/100㎕ Petri-dish 감고
각각 도에 보 다. 보 후 10 마다 각각 도에 샘 들어
Peti-dish 꺼내 균 샘 50 ml tube에 고 0.3% beef-extract
5ml 었다. 것 4℃에 30 간 sonication 고 2000g에 10 동
4℃ 10 간 원심 리 었다. 각각 샘 에 500㎕ 고 PSB 연
여 SAL 통 다. 본 연 같 복
실험 다.
2.1.3 Murine Norovirus1 (MNV1) 생 실험
가) MNV1 비
a. 포 주
MNV1 에 RAW 264.7 포 주(KCLB40071) 포주 에
다. 포 에 사 지 Dulbecco's modified medium
(DMEM)(cat.11965 Gibco.) 열 시킨 FBS(cat.16000 Gibco)
10% 첨가 고 1% HEPEs, 1% non-essential amino acid, 1.5% sodium
bicarbonate, 50㎍/㎖ gentamycin 첨가 다. cell 90% 상 마
다 계 고 건강 상태 지 도 다.
b. MNV1 stock
MNV1 stock 만들 실험 에 RAW 264.7 포 주 75㎠ cell
culture flask 개에 계 3-4 도 여 90% 상 게
다. 감염시킬 MNV1 얼 에 PBS 여 1ml 비 고
에 비 RAW264.7 포 주 내 지 여 MNV1 심 럽게
었다. MNV1가 포에 지도 우 가볍게 들어 다 1시간
동 37℃ CO2 에 감염시 다. 1시간 후에 pre-warm 지 다시 채
워 에 비 다 나 포 주 control 과 비 3-4 동
다. Control 과 비 여 포병변 상 어나 90 상 어지 포
- 55 -
러 가 지 50ml tube에 겨 ultrafilter(Amicon ultra) 여
5000g에 10 동 4℃에 원심 리 여 시 다. MNV1 100
㎕ 주 여 -70℃에 보 고 plaque assay viral titer 다.
나) MNV1 plaque assay
RAW264.7 포 주 75㎠ cell culture flask 에 여 90% 상
6-well flask 에 5×106/well 도 seed 고 37℃ CO2 에 5-6시
간 도 여 90% 상 게 다. MNV1 얼 에 후 지
연 과 얼 에 루어 다. MNV1 비 후
cell 꺼내 지 고 MNV1 500㎕ well 벽 쪽에 심 럽
게 었다. 6개 well 5개 지 연 MNV1 고 마지막 well
control 끗 지 었다. MNV1 1시간 동 37℃ CO2 에
감염시 15 마다 들어 주어 러 가 포 만나도
다. 1시간동 감염 고 MNV1 2×MEM 1.5%
Seaplaque agarose 1 1 어 3ml 심 럽게 었다. 2×MEM
1.5% Seaplaque agarose 사 직 에 도 그 도가 포에
주지 도 37℃ 지 다. Agarose 가 도 15 도 말린 후
37℃ CO2 에 고 plaque가 보 지 3 도 도 다.
Plaque가 보 2×MEM과 1.5% Seaplaque agarose 1 1 고
plaque 보 0.05% neutral red solution 어
후 well 당 3ml 었다. Agarose가 도 15 도 말린 후
다시 37℃ CO2 에 고 6-7시간 지난 후 plaque 개 었
MNV1 stock titer 106 PFU/ml 었다.
다) MNV1 실험
MNV1 생 실험에 거 귀 후 얼마나 검 지 보
실험 다. 거 귀 에 MNV1 105
PFU/100㎕ 후 균 거 귀 각각 50ml tube에
고 0.3% beef-extract 5ml 었다. 샘 30 동 4℃에 sonication
고 2000g에 10 동 4℃ 원심 리 다. 샘 에 700㎕ 고 지
연 과 얼 에 루어 다. 샘 비 후
MV1 에 plaque assay 루어 다.
- 56 -
) MNV1 생 실험
MNV1 보 도 보 간동 생 보 여 spike 샘
4가지 도(-20℃, 4℃, 18℃, 30℃)에 40 동 보 실험
다. 거 귀 각각 16개 비 여 Petri-dish 에 고 MNV1 105
PFU/100㎕ 여 Petri-dish 감 각각 도에 보 다.
보 후10 마다 샘 꺼내 균 심 럽게 50ml tube에 었다.
여 에 0.3% beef-extract 5ml 고 4도에 30 sonication 후 2000g
10 동 4도에 원심 리 다. 샘 에 700㎕ 고 지 연
여 얼 에 었 plaque assay 루어 다. 본 연 에
같 3 다.
2.1.4 Respiratory Syncytial Virus(RSV) 생 실험
가) RSV 비
a. 포 주
RSV 러 여 Hep-2 포 고 DMEM에 10% FBS
1% HEPEs, 1% non-essential amino acid , 1.5% sodium bicarbonate, 50㎍/
㎖ gentamycin 첨가 지 사 다. 포 주 75㎠ cell culture flask
에 고 3-4 도 지나 포가 90% 상 계 다.
b. RSV stock
실험 Hep-2 포 주 75㎠ cell culture flask 개에 계 여 3-4 도
여 90% 상 게 다. 감염시킬 RSV 얼 에 PBS
여 1ml 비 고 에 비 Hep-2 포 주 내 지 여
RSV 심 럽게 었다. RSV가 포에 지도 우 가볍게 들
어 다 1시간 동 37℃ CO2 에 감염시 다. 1시간 후에 pre-warm
지 다시 채워 에 비 다 나 포 주 control 과 비
3-4 동 다. Control 과 비 여 포병변 상 어나 90 상 어
지 포 러 가 지 50ml tube에 겨 같 chloroform
고 2000g 10 동 4도에 원심 리 다. Supernatant 100㎕ 주
여 -70도에 보 고 viral titer plaque assay 다.
- 57 -
나) RSV plaque assay
Hep-2 포 주 75㎠ flask 에 여 90% 상 6-well flask 에
5×106/well 도 seed 고 37℃ CO2 에 5-6시간 도 여
90% 상 게 다. RSV stock 얼 에 후 지 연
과 얼 에 루어 다. RSV 비 후 cell 꺼내 지
고 RSV 500㎕ well 벽 쪽에 심 럽게 었다. 6개 well
5개 지 연 RSV 고 마지막 well control 끗 지
었다. RSV 1시간 동 37℃ CO2 에 감염시 15 마다
들어 주어 러 가 포 만나도 다. 1시간동 감염 고 RSV
2×MEM 1.5% Seaplaque agarose 1 1 어 3ml 심 럽
게 었다. 2×MEM 2% FBS 첨가 2×MEM 1.5% Seaplaque
agarose 사 직 에 어 그 도가 포에 주지 도 37℃
지 다. Agarose 가 도 15 도 말린 후 37℃ CO2 에 고
plaque가 보 지 3 도 다. Plaque가 보 2×MEM과
1.5% Seaplaque agarose 1 1 고 plaque 보
0.05% neutral red solution 어 후 well 당 3ml 었다.
Agarose가 도 15 도 말린 후 다시 37℃ CO2 에 고 6-7시
간 지난 후 plaque 개 었 stock titer 105 PFU/ml 었다.
다) RSV 실험
RSV 거 귀 후 plaque assay 다 러 달리 검
지 다. 거 귀에 지 고 PBS 100㎕
microtube에 고 100㎕ RSV 후 얼 에 고 지 연
에 plaque assay 루어 다.
) RSV 생 실험
RSV 실험에 거 귀에 지 고 100㎕ PBS
microtube에 후 100㎕ RSV 다. 샘 -20℃, 4℃, 18℃, 30℃
에 고 40 동 보 다. 보 후 10 마다 샘 꺼내 얼 에 고 지
연 후 에 plaque assay 다. 본 실험
같 3 다.
- 58 -
control sonicator vortex sonicator+vortex
거 (PFU/ml)
( %)
343
(100)
242
(70)
179
(52)
191
(56)
귀 (PFU/ml)
( %)
286
(82)
202
(59)
166
(50)
2.2 연 결과
2.2.1 러 연
가) MS2 plaque assay
MS2 phage plaque assay 결과 다 그림28 같다.
<그림28> MS2 plaque assay 결과
나) 리 통
MS2 거 귀 후 가지 리 통 결과 다
20과 같다.
< 20> 가지 리 통 MS2 거 귀내
러 사 가지 리 sonicator 에
거 70%, 귀 82% 가 게 나 다.
다) 통
MS2 거 귀 후 PBS 0.3% beef-extract
결과 다 21과 같다.
- 59 -
PBS 0.3% beef-extract
control (PFU/ml)43
(100)
65
(100)
거 (PFU/ml)
( %)
33
(77)
67
(100)
귀 (PFU/ml)
( %)
32
(74)
60
(92)
< 21> 다 MS 거 귀내
러 탁 0.3% beef-extract 사
PBS에 비 여 0.3% beef-extract에 거 100%, 귀 92%
략 100%에 가 운 얻 었다.
2.2.2 MS2 생 실험
MS2 거 귀 내 후 각 다 도에 40 동 생 실험 결
과 다 22, 23과 그림 29, 30과 같다.
- 60 -
거 보 간 ( )
control 보 도(℃) 10 20 30 40
실험.19300
(100b)
-20
실험.1260
a
(2.79)
47
(0.50)
6
(0.06)
6
(0.06)
실험.2418
(4.18)
35
(0.35)
6
(0.06)
6
(0.06)실험.210000
(100)실험.3
534
(5.24)
60
(0.59)
10
(0.10)
10
(0.10)
실험.310200
(100) 평균404
(4.07)
47
(0.48)
7
(0.07)
7
(0.07)
평균9767
(100)편차
138
(1.23)
13
(0.12)
2
(0.02)
2
(0.02)편차404
(0)
4
실험.1660
(7.10)
395
(4.25)
297
(3.19)
24
(0.26)
실험.2835
(8.35)
630
(6.30)
200
(2.00)
41
(0.41)
실험.31125
(11.03)
820
(8.04)
870
(8.53)
168
(1.64)
평균873
(8.83)
615
(6.20)
455
(4.57)
77
(0.77)
편차235
(2.01)
213
(1.90)
362
(3.48)
79
(0.76)
18
실험.1 Nc N N N
실험.21
(0.01)N N N
실험.33
(0.03)N N N
평균2
(0.02)
편차1
(0.01)
30
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
< 22> MS2 거 내 생
a 거 에 후 각 건에 MS2 PFU/ml, b 생 . 각각 도에 보
거 MS2 PFU/ml 100%, c no plaque
- 61 -
귀 보 간 ( )
control 보 도 10 20 30 40
실험.19700
(100b)
-20
실험.19059a
(93.39)
2500
(25.77)
1090
(11.24)
52
(0.53)
실험.210000
(100)실험.2
9742
(97.42)
4300
(43.00)
1910
(19.1)
1005
(10.05)
실험.310300
(100)실험.3
7288
(70.18)
4500
(43.69)
2580
(25.05)
2155
(20.92)
평균10000
(100)평균
8676
(86.99)
3767
(37.49)
1860
(18.46)
1071
(10.50)
편차300
(0)편차
1300
(14.70)
1102
(10.15)
746
(6.93)
1053
(10.20)
4
실험.11235
(12.73)
1200
(12.37)
1160
(11.96)
1045
(10.77)
실험.22245
(22.45)
2000
(20.00)
1250
(12.50)
1250
(12.50)
실험.32690
(26.12)
2680
(26.02)
2490
(24.17)
2275
(22.09)
평균2057
(20.43)
1960
(19.46)
1633
(16.21)
1523
(15.12)
편차746
(6.92)
741
(6.84)
743
(6.90)
659
(6.10)
18
실험.188
(0.91)
11
(0.11)
8.5
(0.09)
3
(0.03)
실험.2143
(1.43)
38
(0.38)
8
(0.08)
5
(0.05)
실험.3380
(3.69)
61
(0.59)
19
(0.19)
18
(0.17)
평균204
(2.01)
37
(0.36)
12
(0.12)
9
(0.09)
편차155
(1.48)
25
(0.24)
7
(0.06)
8
(0.08)
30
실험.1 Nc N N N
실험.2 N N N N
실험.31
(0.01)N N N
평균
편차
< 23> MS2 귀 내 생
a 귀에 후 각 건에 MS2 PFU/ml, b 생 . 각각 도에 보 귀 MS2 PFU/ml 100%, c no plaque
- 62 -
<그림29> 각 다 도 건 에 거 MS2 inactivation curve
<그림30> 각 다 도 건 에 귀에 MS2 inactivation curve
각 다 도 건 에 거 귀 내 MS2 생 보 체 거 에
보다 귀에 생 다. 거 에 MS2 -20도 4도에 40 지나도
생 었고 귀에 -20도, 4도, 18도에 40 지나도 생 었다.
- 63 -
control 거 귀
undiluted (PFU/ml) 88 64 102
10-1 (PFU/ml) 10 8 10
평균 (PFU/ml)
( %)
94
(100)
71
(77)
102
(100)
2.2.3 MNV1 생 실험
가) MNV1 plaque assay
MNV1 plaque assay 다 그림31 같다.
<그림31> MNV1 plaque assay 사진
나) MNV1 실험
MNV1 거 귀 내 실험결과 24 같다.
< 24> MNV1 거 귀 내
MNV1 거 귀에 었고 그 각각 77%, 100% 다.
다) MNV1 생 실험
MNV1 거 귀에 후 다 도에 40 동 생 실험결과
다 25 26과 그림 31, 32 같다.
- 64 -
거 보 간 ( )
control 보 도(℃) 10 20 30 40
실험.19700
(100b)
-20
실험.120300
a
(12.85)
19000
(12.03)
19000
(12.03)
3000
(1.90)
실험.210000
(100)실험.2 Md 12700
(8.04)
12400
(7.85)
1180
(0.75)
실험.310300
(100)실험.3
37000
(16.82)
17300
(7.86)
26000
(11.82)
3000
(1.36)
평균178667
(100)평균
37000
(14.84)
16333
(9.31)
19133
(10.56)
2393
(1.34)
편차35796
(0)편차
11809
(2.81)
3259
(2.35)
6801
(2.35)
1051
(0.58)
4
실험.170100
(44.37)
1580
(1.00)Nc N
실험.2 M1547
(0.98)
970
(0.61)N
실험.396000
(43.64)
1720
(0.78)
1800
(0.72)N
평균83050
(44.00)
1616
(0.92)
1385
(0.72)
편차18314
(0.52)
92
(0.12)
587
(0.14)
18
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
30
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
< 25> MNV1 거 내 생
a 거 에 후 각 건에 MNV1 PFU/mlb 생 .각각 도에 보 귀 MNV1 PFU/ml 100%c no plaqued missing data
- 65 -
귀 보 간 ( )
control 보 도(℃) 10 20 30 40
실험.19700
(100)
-20
실험.1161000a
(58.55b)
145000
(52.73)
41000
(14.91)
36000
(13.09)
실험.210000
(100)실험.2 Md 138000
(50.18)
29000
(10.55)
52000
(18.91)
실험.310300
(100)실험.3
217000
(63.82)
206000
(60.59)
260000
(76.47)
10000
(29.41)
평균296667
(100)평균
189000
(61.18)
163000
(54.50)
110000
(33.98)
62667
(20.47)
편차37528
(0)편차
39598
(3.73)
37403
(5.42)
130042
(36.87)
33307
(8.27)
4
실험.1240010
(87.28)
97000
(35.27)
28000
(10.18)
10000
(3.64)
실험.2 M97000
(35.27)
17000
(6.18)
2800
(1.02)
실험.3300000
(88.24)
210000
(61.76)
28000
(8.24)
10000
(2.94)
평균270005
(87.76)
134667
(44.10)
24333
(8.20)
7600
(2.53)
편차42419
(0.68)
65241
(15.30)
6351
(2.00)
4157
(1.36)
18
실험.1 Nc N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
30
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
< 26> MNV1 귀 내 생 실험
a 귀에 후 각 건에 얻 MNV1 PFU/mlb 생 . 각각 도에 보 귀 MNV1 PFU/ml 100%c no plaque, d missing data
- 66 -
<그림31> 각 다 도 건 에 거 에 MNV1 inactivation curve
<그림32> 각 다 도 건 에 귀에 MNV1 inactivation curve
MNV1 거 귀 내에 각 다 도 건 에 보 었 -20
도 4도에 생 었다. 거 에 보다 귀에 생
40 지나도 생 가 다.
- 67 -
2.2.4 RSV 생 실험
가) RSV plaque assay
RSV plaque assay 다 그림33과 같다.
<그림33> RSV plaque assay
나) RSV 생 실험
RSV 각 다 도 내에 40 동 생 실험 결과 다 27과 그림34 같다.
<그림34> 각 다 도 건 에 RSV inactivation curve
- 68 -
보 간 ( )
control 보 도(℃) 10 20 30 40
실험.1 75000(100)
-20
실험.1 37a
(0.05b)16
(0.02) Nc N
실험.2 70000(100) 실험.2 27d
(0.04)9
(0.01) N N
실험.3 70000(100) 실험.3 50
(0.07)13
(0.02) N N
평균 71667(100) 평균
38
(0.05)
13
(0.02)
편차2887
(0)편차
12
(0.02)
4
(0.00)
4
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
18
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
30
실험.1 N N N N
실험.2 N N N N
실험.3 N N N N
평균
편차
< 27> RSV 내에 생
a PBS에 후 각 건에 RSV PFU/mlb 생 . 각각 도에 보 RSV PFU/ml 100%c no plaque
- 69 -
. 미생 평가
본 연 과 감염 폐 에 견 주 병원 러 등 미생
고 미생 체 보 간, 도 등 건 에 평가 고 다.
미생 평가 각 단계과 평가 같다.
(1) 료폐 에 병원 미생 평가(Hazard Identification)
다 료폐 에 재 병원 미생 과 등 여
체 고 다. 러 경우에 식
드시 주가 므 료폐 과 같 경샘 에 러
식 가 다. 그러므 료폐 에 염 도 병원 러
생 여 체 평가 고 다.
본 연 과 결과에 러 , hepatis B virus, influenza virus 등
병원 러 각 료폐 에 재 결과 나타났다. 러 결
과 본 연 샘 링에 병원 러 도가 도 고, 샘
링과 민감도 계 도 다. 실 본 연 러 민
감도 여 polyethylene glycol 등 고 질 여 러
시료에 나 결과 비슷 다. 그러나 러 HBV
러 등 실 검 것 보 료폐 에 러 에 체
시 없 도 재 다고 볼 다.
(2) 병원 평가(exposure assessment) dose-response 계.
본 연 과 에 집 병원 미생 포 특 , 감염경 , 경 등
고 여 미생 지 사 다. 리고 러 여
체 도 dose-response 료 집 여 체
평가 고 다. 병원 러 에 사 dose- response
model exponential model 또 beta-Poisson model 등 재
beta-Poisson model 식과 실 maximum likelihood estimation (MLE) 결
과 다 같 리 다.
- 70 -
병원 미생Model parameters
α β
Echomvirus 12 0.374 186.69
Rotavirus 0.26 0.42
Poliovirus1 0.1097 1524
Poliovirus3 0.409 0.788
dose-response 량 체 평가 게에 료
가 므 , 체 평가 것 것 보
다. 들 연 결과에 간염 러 러 등 병원
러 재가 가 여 에 체 재가 가 나 량 시키
에 나 도가 실 다. 그러므 dose-response
model 통 직 량 미생 평가 보다 2가지 체
비 평가 risk comparison 것 보다 다고 본다.
(3) 미생 평가(Hazard Characterization).
본 연 병원 미생 염 도 그리고 다 경 건 에 각각 미생
경에 등 고 여 체 도 병원 체
평가 립 다. 병원 미생 염 도, 경매체 건
, 그리고 미생 평가 여 비 평가
다.
러 경우 료폐 에 식 가 므 , 료폐 에 병원
러 도 생 에 체 평가 것 다. RSV
같 러 생 본 연 결과에 보 다. 실
냉동 경우에 러 가 검 지 빠 게 가 것
보 다. 러 경우에 주 naked virus 경매체에
- 71 -
크 , 변 등에 재 도가 매우 다. 러 같 러
경우 30 경과 후에 99.9%가 것 나타났다. 그러나
러 등과 같 러 변, 등 포
료폐 경우에 도가 매우 (107-109 VP/gram) 료폐 에
체 시 없 것 보 다.
4. 고찰
감염 폐 도 개 에 에 폐 1)
체에 우 가 어 특별 리가 폐 료 폐 (
직 , 병리계폐 , 상 폐 , 생 폐 , 그리고 염폐 ) 고
2) 체에 우 낮 나 별도 독립 체계에 리 가 폐
개 에 보다 리 폐 료폐 고
다.
연 사 보 특별 리가 료 폐 에 병원균
러 가 검 리 료 폐 특별 리가 것 다.
본 과 에 러 감염 폐 도 개 에 료 폐
폐 보다 리 료폐 에 1) 어
병원균, 러 가 리․ 동 지 그리고 2) 개 보 어
병원균, 러 가 얼마나 생 지에 체계 연
다.
가. 4개 병원과 산 과 원에 감염 폐 에 균 리 결과
고찰
울 병원, 울시립병원(보 매병원), 주 병원, 당 울 병원,
울 재 산 과 원에 료폐 , 료폐 ( 상 폐 , 직
폐 , 병리계폐 ) 거 여 0 (보 ), 15 , 30 그리고 40 동 다
도(냉동, 6도, 30도)에 보 후 각각 폐 0.45um 여
다.
- 72 -
에 1) 균 식 BHIA, , 지 여
균 리 , 2) 고 남 직 균만 가
지고 (16S rpoB ) 여 폭 폭
에 염 열 후 BLAST 균 동 실시 다.
에 균 결과 울 병원 료폐 (보 과병동
에 거 폐 )에 3.6 X 103 c.f.u./mL 균 나 것 에 다 병 원
감염 폐 에 개 균집 었다. 폐 에 균과
폐 에 직 균 16S , 또 균 rpoB
여 폭 다. 폭 염 열 BLAST에 여
균 동 다. 동 균 상재 균(Staphylococcus spp.)과 병원에
감염시 도 나 , 질내 상재균(Lactobacillus) 었다.
균 연 결과 감염 폐 에 검 상 것
나타났 , 러 결과 생리 헌 사 결과에 듯
샘 링 시료 원 것 사료 다.
그리고 본 연 에 체에 감염 키 균( 감염 균,
감염 균, 내 균), 병원에 감염균 진 도 나 , 그리고
균에 도(6도, 30도), 간(10 , 15 , 30 )에 생 연
(Spike Experiment) 실시 다.
균 탈지 에 후 생 연 결과 감염 균, 감염
균, 내 균 그리고 도 나 보 도(6도, 30도)에 상 없 보 간 10
경과시 10%미만 낮 생 보 , 균 경우 산 시
생 지 거나 죽 에 생 0% 었다.
나. 4개 병원과 산 과 원에 감염 폐 에 러 검 결과 고
찰
러 연 결과 보 4개 병원 산 과 원에 나 료폐
에 러 검 2가지 경우에 견 었다. 당 울 병원 직
샘 에 러 가 검 었 , 주 직 에 HBV가 검 었
다. 그 샘 러 가 검 지 다. 러 결과 크게 2가지
가 다. 첫째, 직 러 검 빈도 상 낮다
고 다. 째, 샘 계 러 검 민감도에
- 73 -
다고 다. 미량 러 검 여 PEG 러
시도 여 PCR 등 폭 여 지만 러 가 검
지 다 시료에 러 검 샘 리거나 샘 가
변 지 시료에 검 것 사료 다.
그리고 본 연 에 MS2, 러 , RSV 각 다 도에 생
에 여 실험 다. 병원에 많 사 고, 본 연 과
나 료폐 경우 거 귀에 공
고 40 여 동 4가지 다 도에 여 생
찰 다. 균과 달리 러 식 여 드시 주가 재 므
러 러 식 가 없 어 도 경에 지
감염 지 지 고 지에 여 사 다. 에
러 감염 가 사 여 다.
MS2가 거 에 경우에 -20도 4도에 만 40 경과 후 1% 미만 생
보 18도에 10 경과 후 0.02% 만 생 30도에 생
러 가 찰 지 다. MS2가 귀에 경우 거 보다 생
다. 40 경과 후에 4도에 15%, -20도에 11%가 생
다. 그러나 18도 30도에 10 경과 후에 1% 미만 러 만 생
것 나타났다.
러 러 surrogate murine norovirus
생 사 보 , -20도에 40 경과후 1%만 생 고 4도에
20 경과 후에 1% 미만 생 다. 그리고 18도나 30도에 10
경과 후에 생 러 가 검 지 다. 귀에 MS2 마찬
가지 생 나 것 나타났다. -20도에 40 경과 후에도
14%가 생 고 4도에 8.5%가 생 다. 그러나 마찬가지 18도나 30도
경우에 생 러 가 재 지 다.
러 RSV 경우에 경에 매우 낮 -20에
만 10 경과 후 0.1% 미만 생 고 나 지 경우 생
러 가 검 지 다.
- 74 -
본 연 결과에 도가 가 에 러 생 감 상
보 료폐 에 러 생 상 욱 어지 것
다. 그리고 러 같 러 경우에도 40 지
나 18도나 30도 경우에 1%미만 많 생 것 다.
그러나 러 실험결과에 주 여 본 연 과 에 각 다 도
에 러 생 염 료폐 에 얼마 러 가
재 지에 가 없었다. 러 경우에 염
변에 107-109 VP/g 재 다고 다. 그러므 1%미만 많 40
경과 어 생 다고 가 보 도 러 도가 료폐
에 체 재 다고 생각 다. 그러므 료폐 에
( 들 감염 변)등 40 경과 어도 체 재
가 다.
감염 폐 개 심 사 과 본 연 과 균 병원 러
결과 리 다 같다.
- 75 -
< 28>개 심 사 과 본 연 과 결과 리
감염 폐 개 1. 균 연 결과
변질 우 가 감
염 폐 보 도 변
(냉동보 -> 냉 보 )
l 5개병 원 냉동보 감염 폐 ( )과 냉
보 감염 폐 (개 ) -> 보 도 변 에
상 없 식 균 동 .
료폐 보 간
변 (15 -> 30 )l 5개병 원 료 상 폐
보 간(15 )과 개 보 간(30 )보
-> 보 간에 상 없 식 균 동 .
2. 러 연 결과
변질 우 가
료폐 보 도 변
(냉동보 -> 냉 보 )
l 러 경우 료폐 에 식 가
므 식 우 없 .
l 냉 보 여도 감염 러 에 체
가 없 것 보 다.
l 실 러 RSV 병원 러
경우 생 감 것 보 다.
상 폐 료
폐 보 간 변
(15 -> 30 )
l 보 간 리 감염 러 경우에
식 가 여 감염 러 감
가 상 다.
l 든 러 경우에도 마찬가지 러
식 료폐 에 상 지 다.
- 76 -
4. 본, EU, 미 등 주 진 도
Ⅰ. 본
개
본 료폐 리 도 , 근 체계 처리비 과
가 주 고 고 우리 도가 본 도 만
들어 다 에 그 실태에 보다 사 연 가 다. 또
료폐 게 처리 여 독 과 사 게 특별 리 산업폐 리
책 고 다 도 참고 가 다.
1. 감염 폐
본 폐 체계상 폐 과 산업폐 나 각각에 생
폐 폐 상에 규 , , 상 감염 에 규 에
감염 폐 다. 감염 산업폐 과 감염 폐 별도 리
등 여 특별 리 폐 과 특별 리 산업폐 어 책
, 처리계 규 그리고 처리 ․ 리 등 별도 리 다.
< 본 료폐 리체계> - 후생 내 료. 1999
- 77 -
2. 감염 폐 단
폐 다 과 같다.
- 78 -
폐 생량
병 원 9.6 /월
진료 병상 곳 135kg/월
병상 없 곳 32kg/월
과 26kg/월
생검사 2.4 /월
처 상 황 (%)
허가업 에 탁처 시 내 처 치단체 탁처
병 원 68 25 31
반진료 38 19 55
치과진료 25 12 75
생검사 81 31 27
처 내
허가업 에탁처 시 내 처 치단체
탁처 기 타
병 원 48 38 17 10
반진료 32 28 37 14
치과진료 23 24 51 15
생검사 67 42 10 6
3. 료폐 생
후생 가 드 료 98 9월 2달간 병원, 진
료 과진료 생검사 상 사 실시, 그 개 공포
같다.
< 료폐 처리상 에 사결과>
가) 폐 생량
나) 폐 처리상
○ 료 에 생 폐 (복 답, 단 %)
주) 료 복 답도 , 재료상 등에 등 6~18%
○ 염 심 폐
주) 타에 재료상에 등 포
- 79 -
폐 량( / )
료폐량( / )
감염 폐량( / )
병 원 9,841 3,300 1,650 330
진료 79,134 170 70 7
과진료 48,300 60 30 3
생검사 816 70 60 14
계 138,091 3,600 1,810 354
<참고> 료 에 생 폐 량 주) 폐 량 98만 /
결과 보 1 당 량과 병원, 진료 , 과진료
량 곳 단체에 탁 처리 비 , 또 사시 에
주사 착 처리 매립처 경우가 많
「 료폐 처리 가 드 」에 감염 폐 처리 각시 등에
균처리 고 그 사 매립처 것 어 다.
2) 폐 처리
료폐 처리처 다 과 같고 크게 5가지 여 처리
고 다.
1) 본 사 동 원 에 처리
「 사 폐 」 「 사 동 원 등에 사 지에 」에
에 거 규 고 에 본 사 동 원 가 처리 맡고
다
- 80 -
2) 가처리
염병 취 병원에 감염 균 각 처리 각
고 나 그 지 경우에도 각 갖 어 각 처리 고 가
나 각 가 다고 드시 그 각 사 고 것 니 , 또
뇨 여 처리 고 다.
3) 산업폐 처리업 에 처리
병원에만 것 고 산업폐 생 료 폐 처리
업 에게 탁 여 처리 고 다. 폐 에 여도 지 단체가 집 지
경우 민간처리업 에게 탁 고 다.
4) 단체에 처리
병상 가 20~30 여 규 병원(진료 포 ) 처리 비
단체가 맡고 다. 산업폐 과 폐 께 산업폐 처리 고
단체도 러 경우 거 료 징 처리 고 다.
5) 도 ․ 매각
상, 상 들 폐 폐 말 지 나
미 폐 다. 식 리 후 남 것 돈업 가 사가거나 상
가 가 도 다. 처리 가운 어 처리 고 지 지
역에 료 에 다 다. 단체가 극 산업계폐
고 곳도 나 가 사업계 산업폐 책
에 가처리 도 경우도 어 산업폐 특
처리 고 다고 말 어 다.
3. 본 료폐 리
본에 감염 폐 폐 과 산업폐 집, 운 , 처리
것 고 다. 폐 처리 지 단체 책 , 산업폐
처리 책 다. 본 경우 료 등 료시 내에 생
감염 폐 게 처리 여, 특별 리산업폐 리책
도 고 다. 특별 리 산업폐 리 책 처리 계 리규
여 감염 폐 , 리, 운 , 간처리 등에 계 체 사
사, 간 사, 청 업원 등 계 에게 주지 여 다.
- 81 -
1) 료 에 폐 리 실태
료 에 폐 감염 폐 생량 연간 30-40만
고 다. 에 폐 시 료시 내에 각 처리 가 많
지만, 근에 후생 에 체 각 가 게 었다. 재
료 폐 처리 업 에게 탁 고 다.
2) 료폐 처리업계
1989 「 료폐 가 드 」 , 료폐 처리사업에
1000개 사가 뛰어들었 , 처리가격 1kg당 300-350엔 나 경쟁
20엔 에 낙찰 사 도 었다고 다. 러 처리비
가 끊 지 실 원 도 다. 러 실 여 산업폐
연 료폐 에 업계 「 료폐 처리 진
그 (ADPP)」 도 여, 재 70개사가 참여 고 다.
- 82 -
3) 료폐 처리비 과 처리책
본 산업폐 연 료폐 에 , 감염 폐
생량 연간 30만 볼 경우 략 900-1050억 엔 처리비 산
다. 러 료폐 처리책 과 비 담 가 큰 심사
고 다. 료폐 료 산 보 처리책 료 에 지
만, 료 원 료보험 도 에 운 고 고 료보험 도 가
사 보 도 에 가 책 역시 막 다고 다.
4) 처 개편과 료폐 리
료폐 료 동 산 료 내 에 감염 지
다고 에 보 , 료폐 다 폐 과 리 여 리 가
다. 폐 처리 본 「폐 처리 청 에 」 후생
었지만, 청 개편에 경 었다. 그러나 료폐 주
원 료 지도?감 독 후생동 맡고 어 리 원 에
가 생 고 다.
4. 근 본에 료폐 과 여 주 고 들
1) 료폐 체계
료폐 체계가 지 실 에
경우가 많다 사실 지 고 , WHO가 고 체계 도
등 새 운 색 것 지 고 다.
2) 감염 폐 처리업 택
료폐 처리 처리업체 직원에 , 타당 처리시
그 운 다. 지만 료 에 어 업체에
탁 처리가 지 지 어 운 실 므 , 료
, 폐 처리업 , 들 3 통 업체 택
만들어 다 주 도 다.
- 83 -
3) 처리책 과 비 담
처리비 담과 진료 가에 거나, 시 등 태
에게 담 거나, 료 업체에 담 등 다
들 고 다. 가 에 업체, 매 , 비 가 각각 책
담 여 비 담 도가 마 어 , 도 마킹 도
고 것 보 다.
Ⅱ. 미
개
미 에 감염 폐 처리 연 규가 매우 빈 에 각 주별
만들어 리 고 Wyoming주처럼, 감염 폐 특별 리
규 없 경우도 다. 감염 폐 리 규 규
료폐 (Medical Waste Tracking Act) 병원폐 각 탠
다드 가 드 (40 CFR Part 60, Standards of performance for new
stationary sources and emission guidelines for existing sources:
hospital/medical/infectious waste incinerators) 다.
다 에 미연 경 보 (EPA) 감염 폐 처리 지 심 여 미
감염 폐 근간 료폐 (1988~1991, 시 )등 살
펴본다.
1. 감염 폐 - 미연 경보 (EPA)
EPA 감염 폐 에 어 실질 다 과 같 폐
천 고 다. 또 EPA 여러 가지 염폐 (Miscellaneous contaminated
wastes) 생겨나 감염 폐 후보(Optional infectious waste) 시
, 들 폐 에 에 여 견 없 나, EPA에
들 폐 감염 취 여 에 결 각각 시 책 원
에 여 것 고 다.
그러나, EPA 병에 여 감염 다고 지 폐
감염 폐 취 여 것 것 고 고 다. ( 들 B
간염 지 폐 등)
- 84 -
각 염 폐
․ 검 폐 염 복, 지, , 브, 트, 탈지 ,
갑
연 폐 본 , 슬 드, 슬 드 , 갑, 가운, 마 등
공 폐 브, , 시트, 타 , 갑, 마, 가운
염 료 연 , 어 특 , 검사에 사
폐 실
CDC에 격리폐
(Isolation Waste)
미 역 타(Center for Diseaseontrol)가 드
(Guidelines for Isolation Precaution in Hospitals,
1983) 참
감염 병원체 생 지
(Cultures and Stocks)
,병리 연 실에 나 본 , 상,연 ,
산업연 에 나 감염 병원체 지, 병원
주 쓰고 린 지 식, , 에 사
, 생 재 생 에 나 폐 ,
없
(Humanblood, blood products)
, 청(serum), (plasma), 산 (blood
products) 폐
병리폐
(pathological Waste)
, 검사, 생체검사(biopsy)에 거 직,
, 체, , 체
염 상
(contaminated sharps) 염 주사( ), 도 , 리 편, 펫
염 동 사체, 짚 등
(Contaminated animal carcasses
body parts, and bedding)
도 병원균에 동 사체, 짚 등
- 85 -
2. 감염 폐 (EPA 고 다)
가. 생지 에 감염 폐
리, 처리 에 다 갖 감염 폐 별
감염 폐 시가 사
감염 폐 사 시 생 험 시 사
나. 감염 폐 포 (EPA 고 다)
폐 에 포 재료 택
다 고체나 고체 감염 폐 틱
등 내열
체 병, 탱크, 크 등
나 에 청결 지 사
, 내열 갈색 마크가 에 틱 사
처리나 에 도 거나 것에 개 폐
뚜껑 또 견고 게 고 병 나 크에 체폐 보
처리 감염 폐 , 또 감염 폐 지 것
다. 감염 폐 (EPA 고 다)
포 폐 상시키 계 탑재 역 비 사 지 것
시 내에 폐 에 사 트( ) 살균 빈도 것
시 에 에 견고 에 든 감염 폐 것
빗 등 들지 도 차량 감염 폐 것
3. 감염 폐 처리
본 에 EPA 처리(Treatment) 것 폐 생 특 , 변
시키고 도 , 과 것 , EPA 고 다.
감염 폐 처리에 사 각 과 리지 립 것
, 과 처리 보 든 처리과 니 링
니 링에 생 지 (Biological indicators) 사 것
( 과가 나타나 경우 다 지 사 도 다)
- 86 -
감염 폐
처리
균 각 열 살균 타
CDC 지 격리폐 (Isolation waste) X X
감염 병원체 생 지, 균주 (Culture and stocks)
X X X X
(Humanblood, products) X X X X(4)
병리폐 (Pathological waste) X(5) X X(6)
염 상 (Contaminated sharps) X X
염 동 사체 등동 사체
(Carcasset) X(5) X
짚(Bedding) X
6가지 감염 폐 에 여 다 처리 시 다.
계 염폐 처리 식 다 에 시 다( 들 감염 취 것 결 경우)
, 검폐 : 각, 균
여러 가지 연 폐 : 각, 균
공 폐 : 각, 균
염 : 각, 균 가 균
4. 처리 끝낸 감염 폐 처 (EPA 고 다)
가 처 여 주 , 지 것
(각 시 계 주, 지 에 가 다.)
처리 끝낸 체 게 쇄 고 폐 시 에 것
처리가 끝난 고 폐 각재 매립처 에 체 직 체 직 고 식 지 도 것
<감염 폐 처리 >
㈜ (1) 여 처리 가 고도 사 처리 과 리 것 다 처리 도 사 다.
(2) 감염 폐 에 여 2 참 것 (3) 살균 상폐 에 것 (4) 2차 처리 갖 도 시 에 (5) 미 상 지 규 에 균 후에 각 거나 쇄 후
것 다. (6) 사에 것 (매 , )
- 87 -
5. 주 도 - 미 료폐 (the medical wastes tracking Act)
1988 가 6개 주 워싱 시에 2 간 간 어 료폐
시 립시 그 경 1988 여 미 동 나
에 주사통 등 료폐 착 지가 등 동 났 사건
다.
manifest system( 리시 ) 지만 그 상 병원,
사, 과 사, 사, 보 , 등 가 고
상 것 감염과 지나 균주, 병리계 폐 , ,
리 (사 끝난 것, 미사 것 ), 염 실험동 폐 , 염병
격리 폐 다.
tracking system( 시 ) EPA가 규 4매가 식(tracking
form)에 거 폐 과 동시에 사업 , 집ㆍ운 , 처리업 에게 폐
건 각 업 담 에 여 사업 에게 복사 1
처리 것 시 다.
료폐 취 에 어 포 2 고
포 ( 들 ) , 집ㆍ운 등 없도
단단 재질 어 다. 내 포 폐 등 새어나 지 도 단단 게
가 , 재사 지 포 에 가 마크
고 사업 , 집ㆍ운 가 볼 도 게 어 다.
간 2개 동 시 지역 시 과, 사, 료폐
재 에 사 , 료폐 , 생량, 규
규 견 등 EPA에 보고 도 어 , 1988 여 시
1991 지 운 었다.
Ⅳ. 럽연 (EU)
개
미 에 비 럽 료폐 에 본격 책 어 지 것 보
나 1992 6월에 료 계(healthcare)폐 과 가 EU에 시 었다. 러
과 그룹(Project Group) 업 과 그 개 었 ,
상 에 보 공과 가 등 다. 과 그룹
결과 럽 체 료 계폐 (healthcare waste) 리 료폐 에
럽 체에 통 마 고, 럽폐 (European Waste
Catalogue) 다. 고 체계 여 다 과 같 다.
- 88 -
1. 감염 폐
a) 료 계(Healthcare )
간 또 동 에 (handicap alleviation) 또 질병 진단, 니 링,
료, 같 료 동과 그에 연 가 가 또 사 리
에 것
b) 료 계폐 (Healthcare Waste): healthcare 생 고체, 체폐
c) 료 계 험폐 (Healthcare Risk Waste):
- 생 폐 ( 별 폐 )
- 감염 폐
- 포 (cytotoxins) 포 , 독 폐 또 폐
- 상 폐 ( , 주사 , 과 , 날 게 진 질)
- 사 폐 (Radioactive Waste Directive에 것)
< 럽연 료폐 > - 폐 그룹 18
- 89 -
규 지 내 폐
√ 폐 처리 재생에 (1975)- √ 보건사 가 드 ① 감염 폐 과 폐 엄 별 ② 감염, 폐 병원 체에 처리 ③ 사 고 난 폐 집 사 ④ 주사 별도 집 ⑤ 생원 각처리 가 경우 살균처리 ⑥ 리감시체계
① 특 료폐 ② 주 등 폐 ③ 타 폐
√ 경 염 지 √ 보건 생 동 √ 경 , 보건사 에 특별 검 원
① 비감염 폐 (매립, 각) ② 감염 폐 ( 각) ③ 특 처리 폐
(산, 지 등)
독
√ 폐 처리 (1977) ① 특 폐 취 ② 병원에 폐 리 책 것 √ 연 내에 [ 료폐 처리처 검 원 ] ① 강 니지만 사실상 규 갖 것 ② 병원 직 내 집․운 규 ③ 폐 처 트
① 처 지 폐 ② 각 만 폐 ③ 특 처리가 폐 ( 량 주 , 폭 폐 )
마크
√ 폐 처리 182 (1932-병원 생, 청 에 규 ) √ 동 (1968) 경보 (1973) ① 료폐 , , 각에 규 ② 본 료폐 각 직
① 료 폐 ② 폐
드 √ 신폐 처리 (1977) ① 독 폐 처리 에 고, 원 규 ② 나 가 특별 가 드 , 지 보
① 료 폐 ② 실험동 사체 ③ 감염 폐 ④ 주 등 폐 ⑤ 연 , 폐
탈리 √ 지 료폐 처리에 여 규 ① 폐 ② 없 폐
럽공동체(EU)
√ 료폐 에 지 ① 병원, 과 등 료 동에 든 상 ② 체 단 , , 실험동 사체 등도 상 ③ 병상 100 상 경우 폐 처리책 ④ 공 사 창 보 ⑤ 폐 살균 각 것 ⑥ 료 폐 처리 내 직 비
① 폐 ② 없 폐
2. 료폐 생량
700,000 / , 태리 215,000 / , 308,000 / 나 독
과 드 각각 87,000 / 과 155,500 / 다. 특 것 경우
생량 감염 폐 생 다. 생량 에 비 지 고 큰
차 보 것 료폐 감염 폐 에 가 각 마다
상 다.
3. 주 가 규 개
- 90 -
Ⅴ. 미에 료폐 처리
개
본 료폐 연 가 1988.6. 1989.5월 2차 에 걸쳐 미 , 나다
료폐 처리상 지 사 사보고 보고 내 같다.
병원 등에 폐 리
본 사에 병상 가 300~600개 도 간 도 병원 심 8개
료 시찰 다. 각 료시 에 가나 각주 가 드 에 감염
폐 별 철 고 었 색별 , 시마크,
등 집 개 진 고 었 , 색 별 감염 것에 색 사
고 가 많 나 그 에 색 사 다든지 등 병원 독 시
고 곳도 었다.
납 상 폐 틱 가 여러 가지 , 등
다 게 루어지고 었 그 뚜껑 2 다시 열리
지 거나, 또 상당 것, 주사 등 어 도들 지
등 책 곳 지 것도 었다(사진 1,2).
경우, 께가 3 (3/1000 =0.076mm) 폴리에틸 것 , 삼
사 고 었 , 탁 경우에 상 (18kg 들 )에
어 거리 고 것 었다(사진 3,4).
- 91 -
시 마크 biohazard mark(생 재 시)가 거 나 「 험 」
가 어 어 병 어 었 것 어 지 못 사 들
료폐 집에 여 경우 고 것 었 우지간 들 집
량생산, 량 비(어 병원에 상 폐 틱 10만
개 고 었다) 지 매우 싼 가격 었다. 틱
(20cmX10cmX30cm)가 1개 90 트, 상 (45cmX56cm)가 1개 80 트
다. 또 감염 폐 가 생원에 납 에 도 어 었
병원단 보 에 도 고 었다(사진5).
폐 사 에 책 상당 철 취 지고
, 들 틱 경, 마 크, 갑, 직포 가운 착 고 업
- 92 -
도 어 (사진6) 병원에 험도 B 간염 주사
곳도 었다.
감염 폐 매 또 틀에 과 같 주 었 , 쓰 통
사 지 어 었 , 또 시보 집 개나 고 가 드나들지
들지 열쇠 곳 어 었고, 병원
에 냉동 집 갖 고 곳도 었다. 보 등
도 감염 우 가 것 색 시가 보 등
도 사 고 었다. 처럼 료 폐 리에 여 간 사 심
․ 경 어 었 , 또 동 병원도 시찰 나 여
에 도 감염 폐 별 나 리 엄격 게 루어지고 었다.
집 ․ 시
미에 료폐 집 ․ 체계 료폐 처리 업 가 독
시 개 료폐 폴리에틸 에 고
상 납 ․ 루어지고 었다. 폐 차
트 러 , 냉동차 사 고 었 (사진7) 트 러 컨 에
료폐 상 나 경우 빈틈 없 들어맞도
계 어 었다.
- 93 -
거리 여 계 지도 어 었 나 계 지에 폐 재
에 트 러 후 동 차 가운 지 에
재 도 어 었 , 욱 지 체 폐식 차단 상태에
루어 다. (사진8)
폐 운 차가 비었 에 컨 내 독 비가
어 었 크리트 닥에 어 도 다. 운
트 러 후 만 사고에 비 여 연 처 가 어 사고 견
시 3 도 연 가 고 었다(사진9).
- 94 -
보냉 도 4.4℃ 병원균 식 지 도 리 고 었 , 트 러
컨 내 폐 에 상 것 경우 고 차체 에
탱크가 어 것 었다. 같 트 러
20~30 료폐 처리 사가 여럿 었 , 게 업 고
것 재 미사 었다.
욱 운 것 리 었 BFI 사에 료폐 들어
상 마다 드 여 그 폐 어 것 지, 언 어
것 지가 컴퓨 리 상 에 지 고 었 , 또 다 어 사
에 갖고 들어 상 마다 사 검 체크 RI 폐
지 도 고 었다.
같 폐 고 여도 지극 상 게 리체계 지․ 리
말 manifest system( 리 시 ) 도 과 맞 어
매우 참고가 다.
각처리 ․ 균
각 병원에 어 각 (50~100kg/hr) 2차 연 실 마
고 진 사 식 다(그림 6-1, 사진 10,11).
1차 연 실 650~982℃, 2차 연 실 1090℃, 가 체 시간 2 운 고
었 나 가 처리가 루어지고 다고 말 어 고 또 각재
도 만 만 연 상태 고 지 낌 었다. 각 에 폐
업원 복 경, 마 크, 갑 지 책에 상당 신경 쓰
고 었다(사진12).
- 95 -
- 96 -
편, 료폐 처리 사 각 에 여 그 개 보 시간
당 800 운드(363kg) 처리 과 상 에 재연 실 가진 재연 실
도 980~1,038℃ 어 재연 실 가 체 시간 2 상 어
었다(사진 13, 14). 4시간 운 운 원 당 3 3 9
, 업원 신 , 니폼 등에 감염 고 여 특별 것 사 고
었 니폼 1주에 1 , 감염 착도 체크 고 나 탁 고
었 , 원 B 간염 고 었다. 각재 본체 냉각
후 어에 각재 집 에 보내 량 차에
매립 운 어 처 각재 달에 검사
다. 러 각 건 비 시간당 1,360kg 것 1 당 270만$
고 다.
또 참고사 미 에 료폐 각 에 가 규 주에
다 평균 가 HCl에 여 50ppm 90% 거 , SO2
50ppm, CO 100ppm(7%O2) 지만 매연 0.015~0.08gr(grane)/dscf (0.03
~0.18g/N㎥) 다.
감염 폐 처리 각처리가 주 지만 고 균에
균 처리 도 보 고 그 료 내 말단 원( 들 검사
실)에 규 고 균에 것 (사진 15) , 실 운 건 15Lb/㎠
60 고 다.
- 97 -
편, 규 고 균 (100Lb/day)에 감염 폐 처리 고 나
가 공 에 량 1/5 도 사 고 다. 또 고 균
변색 틱 사 여 균 후가 에 도 고 었다.
상 미 료폐 리상 , 집ㆍ운 체 , 처리ㆍ처 상
개략 나, 마지막 감염 폐 처리비 보 탁
경우 평균 30~40 트/1 운드 나 에 1달러/1 운드
곳도 다고 그 도 본에 비 가격 싼 미 경우 가
린 가격 싸고 또 집 도 량생산 비 것 같
다.
- 98 -
Ⅵ. 비
료폐 리에 검 역사 에 어 도 비 새 운 것
, 또 에 가 드 등 시 것 1970 후 다.
1. WHO( 계보건 ) 가 드
료폐 리에 WHO 가 드 보고 19개 료 가
등에 것 6―1 EPA(미, 경보 청) 감염 폐 보고
비 여 그 내 리 다.
보고 료 에 폐 취 , , 처리 에 근
과 각 료 계 , 등에 사 규 가 드 시
비 것 다 과 같 다.
가) 료폐 리에 system approach가
나) 료폐 리에 훈 , 연
다) 험폐 ―병원 , 염 ,― 별 후 사
) 생원에 폐 감량 , 재
마) 각
) 사 폐 감쇄 지 고 그 특 에 처 어 것
사) 폐 처리 계
) 료폐 에 원리원 에 것
) 보
료폐 8 병원 폐 직, , 체 , 간
태 동 사체, 량 어 다.
감염 폐 감염 폐 에 병에 걸리 도 병
원체 갖 고 것 에 염 병원균 것 나 균주, 염병
과 나 나 폐 , 격리실 감염 나 폐
, 감염 생 폐 ( 들 브, ,
타 , 가운, 마, 고 갑, ) 병원균 거나 염병에 걸린 동
과 생 폐 포 것 어 다.
들 처리 병리계, 염 , 상 폐 에 여 각 가
것 어 , 또 계 폐 비 각 폐 등 직
처리 에 여 고 다.
- 99 -
WHO EPA
가 드
개
√19개 료 가 등 34 에 working group 고 √ 질, 사 질도 포 료계 보고 √Systems approach 강
질 재 , 감량
√1982 공포 감염 폐 리에 draft manual 개 ,
√ 감염 폐 에 보고 (독 , 가연 , 사 등에 폐
에 언 없 )
료계폐
① 폐 ② 병리계 폐 ( 직, 등) ③ 감염 폐 ④ 상 폐 ⑤ 계 폐 ⑥ 폐 ⑦ 사 폐 ⑧ 폭 폐
① CDC(미 역 타)지 격리폐 ② 감염에 지나 균주 ③ ④ 병리계 폐 ⑤ 상 폐 ⑥실험동 계 폐
생원에처
( 병, 등)
√ 별, 격리가 폐 지 후에 과,내 격 사 √색 별 √ 시
√감염 폐 별 √ , biohazard 마크사 √포 재료 사 ( 상 폐 내열 , 고체 틱 ) √ 보 시간
집, 운
√운 컨 것 √폐 지 √컨 청 , 독 √Pipeline system 생, 에 주 가
√포 재료 개 폐 √ 사 지 √폐 지 √운 차 살균 √병원시 시 주 사 견고 재, 지 트럭 사
간처리
√상 ③감염 ④ 상 각 ②병리계 살 균 독도 가 √ 각 진단계 고 균 에
가 없
√ 균, 각, 열 , 살균 처리 고 √처리과 니 링 √생 indicator 사
각처리 지
√ 사 각 도 체 시 간 . 균 , 가 처리
√ 계 리상 변 ( , 열량) 폐 도, 변
에 각 도, 시간 가 처리
․ 보 등에
√병원 건 계 단계에 폐 책 결 √폐 취 책 √ 그 비 √각 병원 폐 처리 지 √지역 내 본 가 드 √ 료폐 리에 본 원 에 것
√처리과 리지 √ 처 에 여 과 √미 쇄 고체 등 균 후에 시
보냄 √ 체 직 등 체 직 식 지
도
2. EPA 가 드
EPA 감염 폐 가 드 보고 1976 원보 재생 (RCRA)에
폐 리시 립 감염 폐 리에 여 검 , 공
매 얼 개 것 다.
<WHO EPA 료폐 가 드 보고 비 >
- 100 -
같 감염 폐 에 만 생 취 고 것에 주
, 다 험 ( 독 , 가연 , 사 등) 에 여 고 것 다.
여 감염 폐 6 지만 별도 각 염 질
폐 , 연 계 폐 , 공 폐 , 염 에 도 시 고
특 , 상 시 어 것 독, 각, 열 , 가 /
독 살균 포 염폐 처리 , 또 각 폐 에
여도 직 처리 시 어 다. 재 미 에 연 에 감염
폐 에 규 후 The medical wastes tracking Act( 료폐
) 고 것 니지만 주 나 지 차원에 여러 가지
규 고 다.
결과 보 1 당 량과 병원, 진료 , 과진료
량 곳 단체에 탁 처리 비 , 또 사시 에
주사 착 처리 매립처 경우가 많
「 료폐 처리 가 드 」에 감염 폐 처리 각시 등에
균처리 고 그 사 매립처 것 어 다.
ⅥI. 진 ( 본, 미 , 독 , ) 귀, 생리 폐 리 도
귀 생리 감염 폐 탈지 에 폐
탈지 폐 에 진 ( 본, 미 , 독 , ) 귀, 생리
폐 리 도 보 다.
▶ 탈지 폐 : 체 또 동 , 고 , , 비 또 독
탈지 , , 거 . 귀, 생리
1. 본 귀, 생리 폐 리 도
본 폐 처리 청 에 과 료폐 Guide Line에 근거 여 리
고 , 염 폐 청, , 체 , 등에 병
리계 폐 ( , 직), 등 리 질, 시험, 검사 등에 시험
, , 타 착 폐 등 고 , 2차 감염 우 가
감염 폐 , 탈지 , 지, 동 사체등 감염 폐 과 , 주사
, 시험 , 폐 틱 등 감염 산업폐 여 리 도 고 다.
귀 생리 경우 감염 폐 에 다고 볼 다.
- 101 -
「병원폐 처리 가 드 」에 감염 폐 리 , 집, 운 시 색
상 리 특 포 , 차량 운 , 단 시간내에 각 균처리,
탁처리시 (Manifest system)실시 등 규 고 다. 감염 폐
료 에 균처리 우 도 고 나, 균처리가 곤
경우에 처리업 에게 탁 처리 도 고 다. 폐 탁업체가
집, 운 업체 처리 업체가 게 어 , 처리상
복 리 고 것 특징 다.
감염 폐 에 귀 생리 병원폐 처리 가
드 에 처리 것 생각 다.
감염 산업폐 과 감염 폐 ( 귀 생리 감염 료 폐
에 ) 감염 폐 별도 리 등 여 특별 리 폐
과 특별 리 산업폐 어 엄격 고 다. 책 ,
처리계 규 그리고 처리 리 등 철 리 고 다. 다
시 리 다 나타낼 다. 감염 폐 그 에 산
업폐 든 폐 든 별도 리 고 다.
- 102 -
각 염 폐
․ 검 폐 염 복, 지, , 브, 트, 탈지 , 갑
연 폐 본 , 슬 드, 슬 드 , 갑, 가운, 마 등
공 폐 브, , 시트, 타 , 갑, 마, 가운
염 료 연 , 어 특 , 검사에 사
2. 미 귀 생리 폐 리 도
미 에 귀 생리 에 어 폐 에 지에
시 없지만 통 탈지 에 생각 다
귀 생리 . 검 폐 에 다고 볼 다.
미 에 감염 폐 처리 각( 체 각) 60%, 에 처리
( 균)가 20%, 지역처리가 20% 루어지고 다. 귀 생리
경우도 에 처리 다고 생각 다.
3. EU 가(독 , ) 귀 생리 폐 리 도
3.1 독
료 계폐 리 처리 에 폐 들 사 /공
공 생업 시 ․상태․ ․ 에 A그룹, B 그룹( 귀 포 ), C
그룹, D 그룹, E 그룹 5가지 그룹 귀 경우 B 그룹에 ,
B그룹(다 그룹 생략) 다 과 같다.
B 그룹
. 료 계 내 에 리 동 감염 험 특별
처리가 폐
‧ , 체 , 염 폐
: , 고( ), 귀, , 주사 주사 ,
‧ 식 , 탁 ( 게 건 포 )
‧ 도 (가 , , )
‧ (병원에 사 납 (신 ) 그 , 사병)
- 103 -
규 지 내 폐
독
√ 폐 처리 (1977)
① 특 폐 취
② 병원에 폐 리 책 것
√ 연 내에 [ 료폐 처리처 검 원 ]
① 강 니지만 사실상 규 갖 것
② 병원 직 내 집․운 규
③ 폐 처 트
① 처 지 폐
② 각 만 폐
③ 특 처리가 폐
( 량 주 ,
폭 폐 )
규 지 내 폐
√ 경 염 지
√ 보건 생 동
√ 경 , 보건사 에 특별 검 원
① 비감염 폐 (매립, 각)
② 감염 폐 ( 각)
③ 특 처리 폐
(산, 지 등)
규 개
3.2
료 계 (Healthcare) 생 폐 5가지 그룹
귀 경우 E그룹에 , E그룹(다 그룹 생략) 다 과 같다.
E그룹
‧사 변 , 변 , 귀
규 개
- 104 -
5. 참고 헌
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