ORTHOMYXOVIRIDAEORTHOMYXOVIRIDAEVirusurile gripale Virusurile gripale

Obiective educationaleObiective educationale

Tipuri, subtipuri de virus gripalTipuri, subtipuri de virus gripal StructuraStructura

–– HemaglutininaHemaglutinina–– NeuraminidazaNeuraminidaza

Antigenic shift/driftAntigenic shift/drift Principii de diagnostic de laboratorPrincipii de diagnostic de laborator Principii de tratamentPrincipii de tratament

Minus Sense RNA Viruses

Minus-sense RNA virusesFamily Paramyxo Rhabdo Filo Orthomyxo Arena Bunya ReoGenome <-----------------ss(-) RNA------------------------> ss(-) RNA

segmentsss(+) or (+/-)segments

ss(+) or (+/-)segments

ds RNAsegments

Capsidsymmetry

<---------------------------------------------------Helical-------------------------------------------------------> Icosahedral

Envelope <----------------------------------------------------Yes-----------------------------------------------------------> No

e.g. MeaslesMumpsPara-influenza

Rabies virus Ebola virus Influenzavirus

Lassa virus Hanta virus Rotavirus

ORTHOMYXOVIRIDAE ORTHOMYXOVIRIDAE ARN monocatenare, simetrie helicoidală, înveliteARN monocatenare, simetrie helicoidală, învelite

“Myxo” = mucus, “Myxo” = mucus, 100 nm100 nm

ARN segmentat (8 segmente) ARN segmentat (8 segmente) => mare variabilitate antigenică=> mare variabilitate antigenică–– reasortării genelorreasortării genelor

3 tipuri : A, B, C3 tipuri : A, B, C

TipuriTipuri

•• A infectează omul şi animale, păsări A infectează omul şi animale, păsări •• variabilitate antigenică mare variabilitate antigenică mare •• reasortării tipurilor umane cu cele animale dacă reasortării tipurilor umane cu cele animale dacă

ajung să infecteze acelaşi organism => pandemii ajung să infecteze acelaşi organism => pandemii

•• B => variabilitate antigenică mică, sporadică B => variabilitate antigenică mică, sporadică •• mutaţiilormutaţiilor

•• C relativ stabil antigenicC relativ stabil antigenic

Virus gripal Virus gripal -- MEME

StructuraStructura

7 proteine structurale 7 proteine structurale clasificarea în tipuri: A, B, C:clasificarea în tipuri: A, B, C:

–– 3 proteine mari (PB,PA)3 proteine mari (PB,PA)–– 1 nucleoproteină (NP)1 nucleoproteină (NP)–– 1 proteină matrix (M)1 proteină matrix (M)

Clasificarea antigenica:Clasificarea antigenica:–– 2 glicoproteine de înveliş: 2 glicoproteine de înveliş: H (HemaglutininaH (Hemaglutinina N (neuraminidaza)N (neuraminidaza)

–– implantate în anvelopăimplantate în anvelopă

Hemaglutinina (H)Hemaglutinina (H)

leagă virusul de celulele susceptibileleagă virusul de celulele susceptibile bastonaşbastonaş Ag major care duce la sinteza AC Ag major care duce la sinteza AC

neutralizanţi protectorineutralizanţi protectori există 15 Hexistă 15 H

–– H1, H2, H3 H1, H2, H3 -- omom

Neuraminidaza (N)Neuraminidaza (N)

facilitează eliberarea particulelor virale din facilitează eliberarea particulelor virale din celulele infectate celulele infectate

înmugurireînmugurire

există 9 N există 9 N N1, N2 pot infecta omulN1, N2 pot infecta omul

Variatie antigenica majora (shift) ~ 10 aniVariatie antigenica majora (shift) ~ 10 ani 1947 1947 -- H1N1H1N1 1957 1957 -- H2N2H2N2 1968 1968 -- H3N2H3N2 H1N1 reapare 1977, 2009 (modificat)H1N1 reapare 1977, 2009 (modificat)

celulă coinfectată cu 2 tulpini diferite (acelaşi tipcelulă coinfectată cu 2 tulpini diferite (acelaşi tip-- A), amestec al segmentelor A), amestec al segmentelor parentale “reasortare genică” => virioni progeni cu Ag de suprafaţă modificate parentale “reasortare genică” => virioni progeni cu Ag de suprafaţă modificate

=>izbucnirile epidemice ale gripei=>izbucnirile epidemice ale gripei

Avian H3 Human H2

Human H3

Ag drift = variaţie antigenică minorăAg drift = variaţie antigenică minoră

acumulare de mutaţii punctiforme în acumulare de mutaţii punctiforme în genele care codifică H sau N, genele care codifică H sau N,

dacă 2 sau mai multe mutaţii pot fi dacă 2 sau mai multe mutaţii pot fi susţinute => tulpină nouă.susţinute => tulpină nouă.

Vaccinul actual conţine N1H1 + N2H3 + BVaccinul actual conţine N1H1 + N2H3 + B

EpidemiologieEpidemiologie

VIP VIP 1918 1918 -- 1919 (Gripa spaniola)1919 (Gripa spaniola)

–– 20 millioane 20 millioane †† Gripa aviara 2007Gripa aviara 2007 Gripa porcina 2009Gripa porcina 2009

ClinicClinic

Incubaţie: 1Incubaţie: 1--4 zile 4 zile –– doza infectantă, imunitatedoza infectantă, imunitate

Simptome: Simptome: –– febră, cefalee, mialgii/artralgi febră, cefalee, mialgii/artralgi –– ++-- suprainf. bacteriene suprainf. bacteriene pneumococ, H.influenzae, stafilococ, G (pneumococ, H.influenzae, stafilococ, G (--))

Risc: copii, bătrâniRisc: copii, bătrâni Complicaţii: encefalite, miocarditeComplicaţii: encefalite, miocardite

PatogenezăPatogeneză

N: lichefiază mucusul N: lichefiază mucusul –– ajunge la celula epiteliului respiratorajunge la celula epiteliului respirator

H: ataşează, penetrează H: ataşează, penetrează –– fuzionarea învelişului cu membrana fuzionarea învelişului cu membrana

citoplasmatică a celulei epitelialecitoplasmatică a celulei epiteliale

ImunitateaImunitatea

AC de tip Ig A secretorii AC de tip Ig A secretorii AC sericiAC serici

–– strict speciali de subtip şi variantăstrict speciali de subtip şi variantă

Imunitatea celulară Imunitatea celulară –– mai puţin specializat de subtip şi variantămai puţin specializat de subtip şi variantă

Dg. de laboratorDg. de laborator1.Dg.direct 1.Dg.direct pp.recoltat: pp.recoltat:

–– splătură nazosplătură nazo--faringiană, SF, SN, gargară, fragmente de faringiană, SF, SN, gargară, fragmente de necropsienecropsie

ex.microscopic direct: ex.microscopic direct: –– vizualizarea Ag gripale în celulele epiteliale vizualizarea Ag gripale în celulele epiteliale

AC fluorescenţi AC fluorescenţi –– MO UVMO UV determinarea ARN prin PCR determinarea ARN prin PCR Izolarea: Izolarea:

–– ou embrionat ou embrionat demonstrarea hemaglutinării pe hematii de cocoşdemonstrarea hemaglutinării pe hematii de cocoş

–– culturi de celule culturi de celule efect citopat minim (ecp) => dem.hemadrsorbţiei pe hematii efect citopat minim (ecp) => dem.hemadrsorbţiei pe hematii

de cobaide cobai

IdentificareaIdentificarea Hemaglutinoinhibare (HAI/HI) cu ser standardHemaglutinoinhibare (HAI/HI) cu ser standard

–– ser standard diluat + suspensie Ag de virus izolat (60 ser standard diluat + suspensie Ag de virus izolat (60 min) + Hematii de cocoş => min) + Hematii de cocoş =>

HI HI –– subtipul serului diluat corespunde cu Ag virusului de subtipul serului diluat corespunde cu Ag virusului de

identificatidentificat HA HA

–– subtipul serului diluat nu corespunde cu Ag virusului subtipul serului diluat nu corespunde cu Ag virusului de identificat de identificat

RFC determină numai tipul (A,B,C)RFC determină numai tipul (A,B,C)

2.Dg.indirect 2.Dg.indirect –– serologicserologic demonstrarea creşterii în dinamică a demonstrarea creşterii în dinamică a

titrului AC antigripali de cel puţin 4 X titrului AC antigripali de cel puţin 4 X tehnici tehnici

–– HI, HI, –– RFC, RFC, –– Hemoliză radială, Hemoliză radială, –– ELISAELISA

Tehnica HITehnica HI

diluţie ser bolnav + Ag standard A şi B din diluţie ser bolnav + Ag standard A şi B din variantele circulantevariantele circulante–– 60 min60 min

hematii de cocoş 0,5%hematii de cocoş 0,5%–– se citesc după o orăse citesc după o oră

HI prezentă (buton roşu la baza godeului) = AC HI prezentă (buton roşu la baza godeului) = AC pentru tipul Ag cu care spentru tipul Ag cu care s--a lucrat în acel rânda lucrat în acel rând

HA prezentă => HI absentă (reţea de hematii, HA prezentă => HI absentă (reţea de hematii, crenelată la baza godeului) = NU sunt prezenţi crenelată la baza godeului) = NU sunt prezenţi AC pentru tipul Ag cu care sAC pentru tipul Ag cu care s--a lucrat în acel rând a lucrat în acel rând de godeuride godeuri

TratamentTratament Amantadina/RimantadinaAmantadina/Rimantadina

–– inhibă ataşarea de celulele gazdă => trebuie inhibă ataşarea de celulele gazdă => trebuie luată foarte timpuriuluată foarte timpuriu

Zanamivir, Oseltamivir = TAMIFLU (pilula)Zanamivir, Oseltamivir = TAMIFLU (pilula)–– inhibitori de neuraminidază inhibitori de neuraminidază –– eficienţi mai târziu în infecţieeficienţi mai târziu în infecţie

90% efective profilactic 90% efective profilactic

Relenza Relenza -- aerosolaerosol

ProfilaxieProfilaxie

trivalenttrivalent–– AA HH33NN22 HH11NN11

–– BB OMSOMS-- anualanual..

NOAH’S ARCH and the FLUNOAH’S ARCH and the FLU