Upload
odell
View
59
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Ototoxicita indukovaná cisplatinou. Michal Jurajda 6. 9. 2013. NZ-10101-4. Genetické aspekty ototoxicity indukované cisplatinou - prospektivní asociační studie. ÚVOD. Cisplatina. cis-diamin- dichlorplatnatý komplex (cis-DDP ) Cytostatikum - chemoterapeutikum - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
OTOTOXICITA INDUKOVANÁ CISPLATINOU
Michal Jurajda6. 9. 2013
NZ-10101-4
Genetické aspekty ototoxicity indukované cisplatinou - prospektivní asociační studie
ÚVOD
Cisplatina
• cis-diamin-dichlorplatnatý komplex (cis-DDP)
• Cytostatikum - chemoterapeutikum• Vedlejší nežádoucí efekty léčby cisplatinou• Ototoxicita, nefrotoxicita
Indikace cisplatiny
• metastazující testikulární nádory • metastazující karcinom vaječníku• karcinom děložního čípku• pokročilý karcinom močového měchýře• spinocelulární karcinomy hlavy a krku • karcinom plic
Ototoxicita cisplatiny
• Za podklad ototoxicity CDDP na biochemické úrovni je považován oxidativní stres způsobený dysbalancí mezi produkcí a odstraňováním reaktivních metabolitů kyslíku (ROS).
Ototoxicita cisplatiny• Při určité koncentraci ROS, kdy antioxidativní systém již nestačí
neutralizovat jejich škodlivý vliv, dochází v buňkách hlemýždě k indukci buněčné apoptózy.
• Od 4. až 6. dne po podání CDDP jsou takto selektivně postiženy vnější vláskové buňky (OHC) a podle některých autorů současně i myelinové pochvy neuronů ganglion spirale a podpůrné buňky Cortiho orgánu.
• Toto morfologické poškození je vždy zpočátku patrné v bazálním závitu hlemýždě a se stoupající kumulativní dávkou CDDP pak v jeho střední a nejpozději v apikální části.
• Bazální závit – vysoké frekvence
Cisplatina
peroxynitrit
Nitrotyrosin Aktivace caspas, calpainu a p53
metabolity
Aktivace apoptozy
vláskové buňky vnitřní i zevníNeurony spirálního ganglia
Percepční (sensorineurální) nedoslýchavost
zvýšení spontánní aktivity
ncl. kochlearis dorsalis
tinnitus
Obrana proti ROS
• Za fyziologických podmínek jsou nežádoucí účinky ROS blokovány systémem antioxidativních enzymů.
• Mezi antioxidativní enzymy patří zejména glutationperoxidáza (GPx), glutationreduktáza (GR), superoxiddismutáza (SOD), glutation-S-transferáza (GST), γ-glutamylcystein-syntetáza (γ-GCS) a kataláza (CAT).
Klinické projevy ototoxicity
• Většinou symetrická percepční vada• Reverzibilní v závislosti na individuální
citlivosti a celkové dávce CDDP• Někdy doprovázená tinitem
Klinické projevy
• Pokles prahu sluchu (HL), jak reverzibilní, tak i trvalý, se objevuje nejdříve od 3. dne po zahájení aplikace CDDP.
• Je zpočátku vždy vysokofrekvenční (nad 12 kHz) a s narůstající celkovou kumulativní dávkou postupně zasahuje nižší frekvence a zvyšuje svou intenzitu
• Vysoká interindividuální variabilita citlivosti vůči ototoxicitě indukované cisplatinou
METODIKA
Vstupní kritéria• Věk 18 – 55 let
• Negativní otologická anamnéza ve smyslu ušních operací, otitid, tinnitu.
• Negativní profesionální hluková anamnéza a vyloučení působení hluku během sledování.
• Normální otoskopické vyšetření.
• Normacuse nebo jen lehká percepční nedoslýchavost před podáním CDDP.
ORL vyšetření• Před prvním podáním CDDP• 4. až 6. den po ukončení podávání každé série• 1 měsíc a 3 měsíce po terapii– Při každém ORL vyšetření:
• Otoskopické vyšetření• Otoakustické emise (DPOAE) • Vysokofrekvenční tónová audiometrie• Sledování tinnitu a pocitu zhoršení sluchu
Genetické vyšetření
• Odběr periferní krve pro izolaci DNA před zahájením terapie
Kandidátní geny• CNV
– GSTM– GSTT
• SNP– TPMT rs12201199, ARVCF– COMT-rs9332377– NOS2-rs2297518– BCL2-rs2279115– BCL2;KDSR-rs1944423– IL6;LOC541472-rs1800796– IL1A-rs1800587– SOD2-rs4880– GSTP1-rs1695– LTB;LTA;TNF-rs361525– LTB;TNF;LTA-rs1800629
Genotypizace
• ABI 7000• TaqMan Genotyping Assays• TaqMan Copy Number Variations Assays
Copy Caller
VÝSLEDKY
Struktura souboru pacientů (N=55)
95%
5%
Muži (N=52)
Ženy (N=3)
71%
29%
0%20%40%60%80%
100%
<40 >40Věk pacientů (v letech)
≥40
C21 (N=1)
C300 (N=1)
C320 (N=1)
C435 (N=4)
C621 (N=48)
87%
7%2% 2% 2%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
po prvním cyklu
před druhým cyklem
po druhém cyklu
před třetím cyklem
po třetím cyklu
před čtvrtým cyklem
po čtvrtém cyklu
před pátým cyklem
po pátém cyklu
před šestým cyklem
po šestém cyklu
125Hz 250Hz 500Hz 1kHz 2kHz 3kHz4kHz 6kHz 8kHz 10kHz 12kHz
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
45%
50%
Po prvním cyklu
Před druhým cyklem
Po druhém cyklu
Před třetím
cyklem
Po třetím cyklu
Před čtvrtým cyklem
Po čtvrtém cyklu
Před pátým
cyklem
Po pátém cyklu
Před šestým cyklem
Po šestém cyklu
Tónový audiogram Subjektivní hodnocení
94.5%
67.3%
5.5%
32.7%
0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
Tónový audiogram
DPOAE
Bez zlepšení mezi cykly Zlepšení mezi cykly
Pacienti se zhoršenímPacienti bez zhoršení0%
20%
40%
60%
80%
100%
0 1 2
71.4%
28.6%
0.0%
57.5%
37.5%
5.0%
Fisherův exaktní test*: p = 0.745
GSTM: genotypové četnosti
Pacienti se zhoršenímPacienti bez zhoršení0%
20%
40%
60%
80%
100%
0 1 2 3
7.1%21.4%
71.4%
0.0%
22.5%
47.5%
27.5%
2.5%
Fisherův exaktní test*: p = 0.028
GSTT: genotypové četnosti
Pacienti se zhoršením
Pacienti bez zhoršení0%
20%
40%
60%
80%
100%
AG
71.4%
28.6%
71.3%
28.8%
Fisherův exaktní test: p = 1.000
GSTP1-rs1695: alelové četnosti
Pacienti se zhoršenímPacienti bez zhoršení0%
20%
40%
60%
80%
100%
AA AG GG
50.0%42.9%
7.1%
57.5%
27.5%15.0%
Fisherův exaktní test*: p = 0.611
GSTP1-rs1695: genotypové četnosti
* exaktní významnost založena na odhadech metody Monte Carlo (100 000 vzorků)
Pacienti se zhoršením
Pacienti bez zhoršení0%
20%
40%
60%
80%
100%
CT
53.6%
46.4%
86.3%
13.8%
Fisherův exaktní test: p = 0.001
ARVCF,COMT-rs9332377: genotypové četnosti
Pacienti se zhoršenímPacienti bez zhoršení0%
20%
40%
60%
80%
100%
CC CT TT
21.4%
64.3%
14.3%
72.5%
27.5%
0.0%
Fisherův exaktní test*: p = 0.001
ARVCF,COMT-rs9332377: alelové četnosti
ZÁVĚR
Audiologická část
• Potvrzení stávajících poznatků– Poškození sluchu cisplatinou se projevuje na tónovém
audiogramu ve vyšších frekvencích (nad pásmem řeči)– Tónový audiogram nekoreluje s otoakustickými emisemi -
přináší jinou informaci o poškození vnitřního ucha cisplatinou.
Genetická část
• Detekovali jsme asociaci brzkého nástupu poškození sluchu s homozygotností funkční alely pro GSTT1
• Detekovali jsme asociaci brzkého nástupu poškození sluchu s T alelou COMT (rs9332377) – méně aktivní alela
• Brzkým nástupem míníme období od měření před 2. cyklem až po měření po 3. cyklu