Pada percobaan kali ini yaitu mengenai pemeriksaan enzim, pemeriksaan ini menggunakan pemeriksaan pada enzim SGOT,SGPT dan GGT. Pemeriksaan ini bertujuan untuk memeriksaan fungsi hati melalui enzim dan menginterpretasikan hasil serta menghubungkannya dengan patologi klinik. Pengujian pertama yaitu pemeriksaan SGOT dengan sampel serum Herianto (laki-laki) , Tahap pertama dalam melakukan pemeriksaan SGOT adalah memipet sampel serum sebanyak 100 µl dan reagen SGOT sebanyak 1000 µl ke dalam kuvet menggunakan mikropipet dengan skala yang sudah diatur sebelumnya. Pemipetan menggunakan mikropipet bertujuan supaya diperoleh volume yang lebih akurat karena akurasi mikropipet ini sangat tinggi. Tip yang digunakan pun harus diperhatikan kebersihannya unuk meminimalisir kontaminasi yang mempengaruhi absorbansi sampel. Keduanya zat dicampur dan diinkubasi selama 1 menit dalam suhu ruang. Inkubasi ini dilakukan agar serum dan reagen bereaksi. Ada 2 reagen yang sebelumnya dicampurkan dalam pembuatan reagen . Reagen I yang digunakan berisi Tris pH 7,65 110 mmol/liter, L-Aspartat 320 mmol/liter, MDH (Malat Dehidrogenase) 800 U/liter, LDH (Laktat Dehidrogenase) 1200 U/liter. Tris pH 7,65 dalam reagen I berfungsi sebagai dapar yang menjaga pH serum selama reaksi pemeriksaan ini supaya menjaga kestabilan aktivitas GPT karena enzim sangat sensitif terhadap perubahan pH. L-Aspartat berfungsi sebagai asam amino yang akan diubah menjadi L-glutamat dengan dikatalisis oleh enzim Glutamat Oxaloacetat Transaminase (GOT). MDH (Malat Dehidrogenase) dan LDH (Laktat Dehidrogenase) juga merupakan enzim yang akan mengkatalisis reaksi selanjutnya dari produk yang dihasilkan dari reaksi dengan katalisator GPT tadi. Reagen II yang digunakan ini berisi 2-oxoglutarat 65 mmol/liter dan NADH 1 mmol/liter. 2-oxoglutarat akan bereaksi dengan L-Aspartat membentuk L-glutamat dan oxaloasetat dengan dikatalisis oleh enzim GOT. Enzim GOT ini akan mengkatalisis pemindahan gugus amino pada L-aspartat ke gugus keto dari alfa-ketoglutarat membentuk glutamat dan oksalat. Selanjutnya oksaloasetat direduksi menjadi malat. Asam-L-aspartat + asam--ketoglutarat → asam oxaloasetat + L-glutamat Asam oxaloasetat + NADH + H + → L-asam malat + NAD - + H 2 O Reaksi tersebut dikatalisis olehMalat Dehidrogenase (MDH) yang membutuhkan NADH dan H + . NADH akan mengalami oksidasi menjadi NAD + . Banyaknya NADH yang dioksidasi
