Pratikum pembuatan preparatPratikum pembuatan preparat Tujuan: meletakan suspensi bakteri pada Tujuan: meletakan suspensi bakteri pada

objeck glass sehingga siap untuk objeck glass sehingga siap untuk diwarnai diwarnai

Alat dan bahan :Alat dan bahan : Suspensi kuman cair 1 tabung Suspensi kuman cair 1 tabung Ose 1 buahOse 1 buah Lampu sperfitus 1 buahLampu sperfitus 1 buah Objeck glass 2 buahObjeck glass 2 buah Kapas alkohol 1 botolKapas alkohol 1 botol

Pindahkan 1-2 ose suspensi kuman Pindahkan 1-2 ose suspensi kuman diatas objeck glass ratakandiatas objeck glass ratakan

Lalu lewatkan diatas nyala api sampai Lalu lewatkan diatas nyala api sampai suspensi kuman melekat pada objeck suspensi kuman melekat pada objeck glass glass

Preperat siap diwarnaiPreperat siap diwarnai

PENGECATAN SEDERHANAPENGECATAN SEDERHANA TUJUAN: UNTUK MEMPELAJARI CARA TUJUAN: UNTUK MEMPELAJARI CARA

PENGECATAN BAKTERI DENGAN PENGECATAN BAKTERI DENGAN SATU JENIS CAT DAN MENGAMATI SATU JENIS CAT DAN MENGAMATI BENTUK SELBENTUK SEL

Bahan dan alat Bahan dan alat 1.preparat1.preparat 2.larutan cat saparanin/metil bluje2.larutan cat saparanin/metil bluje 3.alkohol3.alkohol 4.Objeck gelas4.Objeck gelas 5.Ose5.Ose 6.Lampu speritus6.Lampu speritus 7.kertas tisu7.kertas tisu 8.Mikroskop8.Mikroskop 9. minyak imersi9. minyak imersi 10.Aguadest dalam botol semprot10.Aguadest dalam botol semprot

Cara kerjaCara kerja Bersihkan objek glas dengan alkohol kemudian Bersihkan objek glas dengan alkohol kemudian

keringkan dengan lampu sperituskeringkan dengan lampu speritus Ambil satu ose biakan bakteri dengan tehnik Ambil satu ose biakan bakteri dengan tehnik

steril dan letakan pada objec glass lalu steril dan letakan pada objec glass lalu diratakan dengan membentuk, keringkan, diratakan dengan membentuk, keringkan, kemudian fiksasi dengan cara objec glass kemudian fiksasi dengan cara objec glass tersebut dilewatkan pada lampu speritus tersebut dilewatkan pada lampu speritus kurang lebih 5-7 Xkurang lebih 5-7 X

Tetesi biakan bakteri dengan larutan cat Tetesi biakan bakteri dengan larutan cat secara berlebihan dan diamkan 2-5 menitsecara berlebihan dan diamkan 2-5 menit

Cuci preparat dengan air mengalir Cuci preparat dengan air mengalir mengunakan aguadest usahakan air mengunakan aguadest usahakan air dijatuhkan diisi lapisan(jangan dilokasi lapisan)dijatuhkan diisi lapisan(jangan dilokasi lapisan)

Keringkan dengan tisue, kemudian Keringkan dengan tisue, kemudian keringkan dan anginkankeringkan dan anginkan

Amati preparat tersebut dibawah Amati preparat tersebut dibawah mikroskop(mula-mila dengan mikroskop(mula-mila dengan pembesaran lemah 10 X 10 kemudian pembesaran lemah 10 X 10 kemudian pembesaran sedang 45 X 10 dan dengan pembesaran sedang 45 X 10 dan dengan pembesaran kuat 100 x 10)pembesaran kuat 100 x 10)

Gambarkan bakteri yang tampak(bentuk Gambarkan bakteri yang tampak(bentuk dan warna bakteri)dan warna bakteri)

Pengecatan gramPengecatan gram Tujuan untuk mempelajari cara Tujuan untuk mempelajari cara

pengecatan gram dan mengamati bentuk pengecatan gram dan mengamati bentuk sedrta sifat bakteri terhadap pengecatan sedrta sifat bakteri terhadap pengecatan gramgram

Bahan dan alatBahan dan alat Larutan gram: gram A.B.C.DLarutan gram: gram A.B.C.D Bakteri niseria genorheBakteri niseria genorhe Objec glasObjec glas Ose lampu speritusOse lampu speritus Kertas tisureKertas tisure Mikroskop. Mikroskop. AguadestAguadest

Cara kerja Cara kerja bersihkan objeck glass dengan alkohol bersihkan objeck glass dengan alkohol

kemudian keringkan diatas lampu sperituskemudian keringkan diatas lampu speritus Kemudian letakan preparat yang sudah kering Kemudian letakan preparat yang sudah kering

dan difiksasi kemudaian dituanggi cat gram A dan difiksasi kemudaian dituanggi cat gram A dan diamkan selam 3 menitdan diamkan selam 3 menit

Cuci preparat dengan air mengalir Cuci preparat dengan air mengalir mengunakan Aguadest usahakan air mengunakan Aguadest usahakan air dijatuhkan disisi lapisan dijatuhkan disisi lapisan

Dituangkan dengan larutan gram BDituangkan dengan larutan gram B Cuci preparat dengan air mengalirCuci preparat dengan air mengalir Dituangi dengan gram c selama 20-40 dtkDituangi dengan gram c selama 20-40 dtk Cuci preparat dengan air mengalirCuci preparat dengan air mengalir

Dituangi dengan gram c selama 20 -40 Dituangi dengan gram c selama 20 -40 detikdetik

Cuci preparat dengan air mengalirCuci preparat dengan air mengalir Dituangi dengan gram D selam 2 menit Dituangi dengan gram D selam 2 menit Dicuci dengan air mengalirDicuci dengan air mengalir Keringkan dengan anginKeringkan dengan angin Amati dibawah mikroskop sama seperti Amati dibawah mikroskop sama seperti

pengecatan sededrhanapengecatan sededrhana

Catatan bahan cat”Catatan bahan cat”Cat gram A: kristal violet + aguadest 1 Cat gram A: kristal violet + aguadest 1

botolbotolCat gram B: Kalium lodida + yodium + Cat gram B: Kalium lodida + yodium +

aguadest 1 botolaguadest 1 botolCat gram C : Alkohol 90% 1 botolCat gram C : Alkohol 90% 1 botolCat gram D : safranin + aguadest Cat gram D : safranin + aguadest

Pengecatan tahan asamPengecatan tahan asam Tujuan untuk mempelajari cara Tujuan untuk mempelajari cara

pengecatan tahan asam dan mengamati pengecatan tahan asam dan mengamati reaksi sel terhadap pengecatan tahan reaksi sel terhadap pengecatan tahan asamasam

Bahan dan alatBahan dan alat Larutan gram: gram A.B.CLarutan gram: gram A.B.C Bakteri micobakterium tubercolosisBakteri micobakterium tubercolosis Objec glasObjec glas Ose lampu speritusOse lampu speritus Kertas tisureKertas tisure Mikroskop. Mikroskop. Aguadest sterilAguadest steril Kertas tisuKertas tisu

Cara kerjaCara kerja Bersihkan objec glass dengan alkohol Bersihkan objec glass dengan alkohol

kemudian keringkan diatas api speritus +5-7 Xkemudian keringkan diatas api speritus +5-7 X Preparat yang sudah siap taruh diatas objeck Preparat yang sudah siap taruh diatas objeck

glassglass Tuangi bakteri dengan larutan cat Zn A secara Tuangi bakteri dengan larutan cat Zn A secara

berlebihan sehingga preparat tertutup oleh cat berlebihan sehingga preparat tertutup oleh cat Dipanaskan dengan lampu speritus hingga Dipanaskan dengan lampu speritus hingga

kelihatan selalu keluar uap selam 3-5 mnt kelihatan selalu keluar uap selam 3-5 mnt jangan sampai cat kering dan mendidihjangan sampai cat kering dan mendidih

Kemudian dinginkan, cuci dengan air Kemudian dinginkan, cuci dengan air mengalirmengalir

Dituangi Zn B selama 30 dtk cuci dengan Dituangi Zn B selama 30 dtk cuci dengan air mengalir,kemudian keringkan dan air mengalir,kemudian keringkan dan anginkananginkan

Dituangi dengan Zat C sambil digoyang Dituangi dengan Zat C sambil digoyang selama 30 dtk cuci dengan air mengalirselama 30 dtk cuci dengan air mengalir

Amati preparat seperti pengecatan gramAmati preparat seperti pengecatan gram

CatatanCatatan Zn A: cat utama karrbon fuksinZn A: cat utama karrbon fuksin Zn B: larutan peluntur alkohol asamZn B: larutan peluntur alkohol asam Zn C: larutan cat penutup methylen blueZn C: larutan cat penutup methylen blue

Gambar 1. preparat Bacillus subtilis

pembahasan

Bacillus subtilis merupakan bakteri gram positif yang sering ditemukan di tanah dan termasuk dalam genus Bacillus. Bakteri ini juga memiliki kemampuan untuk membentuk endospora yang melindunginya dari perubahan lingkungan dengan kondisi yang ekstrim. Bacillus subtilis diklasifikasikan sebagai organisme obligate

aerob, yang berarti butuh oksigen untuk hidup. Bacillus subtilis juga disebut bakteri Bacillus globigii.

Karena bakteri ini merupakan bakteri gram positif, maka jika dilakukan pengecatan, warna sel bakteri akan menjadi biru atau ungu tergantung tipe pengecatan. Pada pengecatan negatif, warna bakteri Bacillus subtilis adalah transparan dibandingkan latar belakangnya yang berwarna hitam. Bentuk bakteri ini pada pengecatan negatif seperti anyaman rantai. Warna transparan yang terbentuk dari sel bakteri terjadi karena tidak adanya fiksasi oleh sel bakteri tersebut. Pada pengecatan gram positif, warna bakteri adalah ungu. Ini menunjukkan bahwa bakteri B. Subtilis mampu menyerap zat warna utama seperti kristal violet. Morfologi sel bakteri Bacillus subtilis adalah berbentuk batang panjang.

Gambar 2. preparat gram negatif Escherichia coli yang diamati

pembahasan

Bakteri Escherichia coli dengan pengecatan acid fast menghasilkan warna biru, menunjukkan bahwa bakteri ini mampu menyerap zat warna penutup seperti metylene blue pada pengecatan acid fast. Selain itu E.coli merupakan bakteri gram negatif karena dengan pengecatan gram, bakteri ini akan berwarna merah. Hal ini terjadi karena sel bakteri tidak mampu menyerap zat warna utama pada pengecatan gram seperti kristal violet, sehingga sel bakteri tidak tertutup oleh cat penutup. Morfologi luar sel bakteri Escherichia coli berbentuk batang pendek, berbeda dengan Bakteri Bacillus subtilis yang berbentuk batang panjang.

Bakteri Bacillus nitroxus merupakan bakteri yang bersifat tahan asam karena bakteri ini berwarna merah jika dilakukan pengecatan acid fast. Menonjolnya warna merah ini terjadi karena adanya penyerapan warna karbolfukhsin yang larut dalam sel.

Untuk khamir, dilakukan pengamatan terhadap dua jenis yaitu Saccharomyces

KESIMPULAN dapat diambil kesimpulan bahwa bakteri

memiliki morfologi yang berbeda-beda. Morfologi Bacillus subtilis adalah seperti batang panjang, Escherichia coli berbentuk batang pendek

Pengecatan yang lain:Pengecatan yang lain: Tujuan untuk mempelajari cara membuat prepara Tujuan untuk mempelajari cara membuat prepara

bakteri dengan latar belakang gelap dan mengamati bakteri dengan latar belakang gelap dan mengamati bentukbentuk

Biakan murni bakteriBiakan murni bakteri Larutan cat nigrosin atau tinta cinaLarutan cat nigrosin atau tinta cina Larutan alkohol 70%Larutan alkohol 70% Objeck glasObjeck glas OseOse Lampu speritusLampu speritus MikroskopMikroskop Minyak imersiMinyak imersi Kertas tisuKertas tisu

Bersihkan objec glass dengan alkohol Bersihkan objec glass dengan alkohol kemudian keringkan diatas api speritus +5-7 Xkemudian keringkan diatas api speritus +5-7 X

Ambil 1 ose suspensi bakteri secara aseptik Ambil 1 ose suspensi bakteri secara aseptik Preparat yang sudah siap taruh diatas objeck Preparat yang sudah siap taruh diatas objeck

glassglass Ambil satu tetes larutan cat dan tetesi pada Ambil satu tetes larutan cat dan tetesi pada

bakteri diatas objeck glassbakteri diatas objeck glass Campurkan suspensi dan cat mengunakan Campurkan suspensi dan cat mengunakan

gelas benda yang lain kemudian ratakan gelas benda yang lain kemudian ratakan campuran sehingga membentuk lapisan yang campuran sehingga membentuk lapisan yang tipis sekalitipis sekali

Biarkan bakteri kering dengan sendirinyaBiarkan bakteri kering dengan sendirinya

Amati preparat tersebut dibawah Amati preparat tersebut dibawah mikroskop(mula-mila dengan mikroskop(mula-mila dengan pembesaran lemah 10 X 10 kemudian pembesaran lemah 10 X 10 kemudian pembesaran sedang 45 X 10 dan dengan pembesaran sedang 45 X 10 dan dengan pembesaran kuat 100 x 10)pembesaran kuat 100 x 10)

Gambarkan bakteri yang tampakGambarkan bakteri yang tampak

CatatanCatatan

Pengecatan ini seing dikenal dengan Pengecatan ini seing dikenal dengan pengecatan tidak langsung,karena yang pengecatan tidak langsung,karena yang latar be;lakang sel sedangkan sel bakteri latar be;lakang sel sedangkan sel bakteri tidak mengalami pengecatan dan tidak mengalami pengecatan dan pengecatan ini tidak dilakukanpengecatan ini tidak dilakukan