Percobaan II

5/26/2018 Percobaan II

1/12

PERCOBAAN II

PENETAPAN KADAR SENYAWA YANG TIDAK BERWARNA (TETAPI MEMILIKI

KROMOFOR) SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRA-VIOLET (UV)

A. TUJUANTujuan dari percobaan ini adalah menetapkan kadar senyawa yang tidak

berwarna (tetapi memiliki kromofor) secara spektrofotometri ultraviolet (UV).

B. LANDASAN TEORISpektroskopi merupakan cabang ilmu yang berhubungan dengan studi

interaksi antara radiasi elektromagnetik dan materi. Ini melibatkan pengukuranjumlah radiasi ultraviolet atau sinar tampak yang diserap oleh suatu zat dalam

larutan. Instrumen yang mengukur intensitas dua berkas cahaya di daerah UV-

Visible disebut spektrofotometer Ultraviolet-Visible (Behera et al., 2012).

Spektrofotometri adalah suatu metode analisis yang berdasarkan pada

pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada

panjang gelombang yang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma

atau kisi difraksi dan detector vacuum phototube atau tabung foton hampa

(Harjadi, 1990).

Kromofor merupakan semua gugus atau atom dalam senyawa organik yang

mampu menyerap sinar ultraviolet dan sinar tampak. Beberapa gugus kromofor

antara lain alken, alkin, karbonil, karboksil, amido, azo, nitro, nitroso, dan nitrat.

Gugus ini memiliki panjang gelombang maksimum yang berbeda-beda karena

perbedaan jenis transisi elektronnya. Data ini hanya berfungsi sebagai panduan

kasar untuk identifikasi guugus-gugus fungsional dalam suatu molekul, karena

panjang gelombang maksimal juga dipengaruhi oleh pelarut dan struktur

molekul kimia yang biasanya juga lebar karena adanya efek-efek vibrasional.

Pada molekul organik dikenal pula istilah auksokrom yang merupakan gugus

fungsional yang mempunyai electron bebas, seperti OH; -O; -NH2; dan OCH3

yang memberikan transisi n *. Terikatnya gugus auksokrom pada gugus

kromofor akan mengakibatkan pergeseran pita absorbs menuju ke panjang

gelombang yang lebih besar (pergeseran merah = pergeseran batokromik)

disertai dengan peningkatan intensitas (efek hiperkromik) (Gandjar dan Abdul,

2012 ;236).


2/12

Senyawa dapat dianalisis dengan metode spektrofotometri jika memiliki

kemampuan menyerap pada daerah UV atau daerah tampak. Senyawa yang dapat

menyerap intensitas pada daerah UV disebut dengan kromofor. Identifikasi

kualitatif dari suatu senyawa serapan kromofor adalah berupa spectra yang

ditunjukkan dari panjang gelombang () versus absorbansi. Setiap kromofor

akan memberikan suatu titik spesifik yang disebut dengan panjang gelombang

maksimum ( maks). Selanjutnya, untuk analisis sampel murni, identifikasi pada

panjang gelombang maksimum dapat digunakan untuk analisis kuantitatif,

karena absorbansi sampel akan berbanding lurus dengan konsentrasi sampel

(Fatimah, 2003).Prinsip yang paling penting dalam analisis penyerapan cahaya terkait

dengan hukum Lamber-Beer. Hukum ini menyatakan bahwa, ada hubungan

linear antara konsentrasi dan absorbansi dengan ketentuan bahwa panjang

gelombang yang digunakan dipertahankan konstan ; absorptivitas (e) adalah

konstan untuk setiap molekul untuk setiap panjang gelombang. Hukum Lambert-

Beer membuktikan hubungan linear antara konsentrasi sampel dan absorbansi.

Jika hubungan ini diuji secara eksperimental dengan mengukur sampel dan

hasilnya diplot, hubungan akan terlihat dimana meningkatknya serapan setara

dengan peningkatan konsentrasi (Upstone, 2000).

Hukum Beer menyatakan bahwa intensitas sinar paralel radiasi

monokromatik berkurang secara eksponensial dengan jumlah molekul yang

menyerap. Dengan kata lain, absorbansi sebanding dengan konsentrasi. Secara

matematis, Beer-Hukum Lambert dinyatakan sebagai (Behera et al., 2012):

A = a b c

Dimana,

A = absorbansi atau kepadatan optik

a = absorptivitas atau koefisien kepunahan

b = panjang lintasan dari radiasi melalui sampel (cm)

c = konsentrasi zat terlarut dalam larutan

Sulfadiazin diketahui memiliki aktivitas spektrum yang luas terhadap

sebagian mikroorganisme, khususnya gram negatif dan ternyata juga memiliki

toleransi yang baik oleh pasien dan memiliki toksisitas yang rendah dan juga

banyak digunakan dalam pengobatan. Dalam obat sulfadiazine, sulfadiazine tidak


3/12

bertindak sebagai agen antibakteri tetapi dapat menghasilkan sinergisme dalam

kombinasi dengan sub tingkat penghambatan sulfadiazine. (Ghodekar et al.,

2012).

Secara universal golongan sulfonamida seperti sulfadiazine dikenal sebagai

antibiotik. Mekanisme kerja umum dari sulfadiazine sebagai antibakteri adalah

protozoa dengan menbentuk kompleks Zn (II) sulfadiazine dimana sulfadiazin

terkoordinasi secara bidentat terhadap atom pusat Zn2+ melalui atom NH

sekunder dan N tersier (Tjay dan Kirana, 2002).

.


4/12

C.ALAT DAN BAHAN1. Alat

Alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah:

- Labu takar 100 ml, dan 25 ml- Mikro pipet 25 l- Sendok tanduk- Spektrofotometer UV-vis- Kuvet- Timbangan analitik- Filler- Pipet ukur- Pipet tetes- Gelas kimia- Batang pengaduk

2. BahanBahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah:

- Sampel sulfadiazine (Trisulfa)- Sulfadiazine murni- Alkohol


5/12

D.URAIAN BAHANa. Sulfadiazine (Dirjen POM, 1979)

Nama Resmi : SULFADIAZINUM

Nama Lain : Sulfadiazin

Rumus Molekul : C10H10N4O2S

Berat Molekul : 250, 27

Rumus Struktur :

Pemerian : Serbuk putih kekunigan atau putih agak merah jambu, hampir

tidak berbau, tidak berasa

Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, agak sukar larut dalam alkohol

(95%) P dan dalam aseton P, mudah larut dalam asam mineralencer dan dalam larutan alkali hidroksida

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat terlindung dari cahaya matahari

Kegunaan : Antibakteri

b. Alkohol (Dirjen POM, 1979)Nama Resmi : AETHANOLUM

Nama Lain : Alkohol, alkohol

RM/BM : C2H6O/46,07

Rumus Struktur :

Pemerian : Cairan tak berwarna, jernih, mudah menguap dan mudah

bergerak, bau khas, rasa panas, mudah terbakar dengan

memberikan nyala biru yang tidak berasap.

Kelarutan : Sangat mudah larut dalam air, dalam kloroform p dan dalam

eter p


6/12

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat terlindung dari cahaya

Kegunaan : Zat tambahan

E. PROSEDUR KERJA1. Pembuatan Larutan induk sulfadiazine murni

-Ditimbang sebanyak 100 mg-Dimasukkan ke dalam gelas kimia-Di tambahkan sedikit alkohol-Dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml-Diencerkan dengan menggunakan alkohol

hingga tanda tera

-Dikocok perlahan-lahan-Diulangi percobaan di atas untuk sampel

sulfadiazine

Larutan induk (Li) Sulfadiazine

2. Pembuatan kurva baku-Dipipet sebanyak 0,05 ml-Dimasukkan kedalam labu takar 25 ml-Diencerkan menggunakan dengan

menggunakan alkohol hingga tanda tera

-Dikocok perlahan-lahan-Diukur absorbansinya pada panjang

gelombang 269 nm

-Diulangi perlakuan di atas untuk Li sebanyak0,1 ml, 0,15 ml, 0,2 ml, 0,25 ml.

Hasil pengamatan..?

Sulfadiazine murni

Larutan induk


7/12

3. Pengukuran absorbansi sulfadiazine sampel

-Dipipet 0,01 ml-Dimasukkan ke dalam labu takar 25 ml-Diencerkan dengan alkohol hingga tanda

tera.

-digojok-Diukur absorbansinya pada panjang

gelombang 269 nmA= 1,4431

F. HASIL PENGAMATAN1. Data Pengamatan

No. Perlakuan Hasil

1 Pembuatan larutan induk sulfadiazine

Sulfadiazine murni, ditimbang 100 mg, di masukkan

kedalam labu takar 100 ml, di encerkan dengan

menggunakan alkohol hingga tanda tera, digojog.

Larutan Induk

2 Pengenceran Larutan Induk

a. Larutan induk 0,05 mg/25 mlLarutan induk dipipet 0,05 ml, di masukkan

kedalam labu takar 25 ml, diencerkan dengan

alkohol hingga tanda tera, digojog.

b. Larutan induk 0,10 mg/25 mlLarutan induk dipipet 0,10 ml, di masukkan



c. Larutan induk 0,15 mg/25 mlLarutan induk dipipet 0,15 ml, di masukkan



d. Larutan induk 0,20 mg/25 mlLarutan induk dipipet 0,20 ml, di masukkan

Li, kadar

0,05mg/25ml

Li, kadar

0,10mg/25ml

Li, kadar

0,15mg/25ml

Li, kadar

0,20mg/25ml

Li Sulfadiazine sampel


8/12



e. Larutan induk 0,25 mg/25 mlLarutan induk dipipet 0,25 ml, di masukkan



Li, kadar

0,25mg/25ml

2. Data PerhitunganPanjang

gelombang

Kadar

(mg/25 ml)

Absorban yang

dihasilkan

260nm

0,05 1,4721

0,1 1,3466

0,15 1,9100

0,20 2,2287

0.25 1,8436

Sampel 0,01 1,4431

Perhitungan kadar sulfadiazine dalam sampel trisulfa:

Y= 3,250x + 1,272

Absorbansi sampel:

Y = 1,4431

1,4431 = 3,250x + 1,272

1.47211.3466

1.912.2287

1.8436

y = 3.250x + 1.272R = 0.525

0

0.5

1

1.5

2

2.5

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3

absorbansi

konsentrasi (mg/25 ml)

Kurva Hubungan Konsentrasi Sulfadiazine terhadap

absorbansi

absorbansi

Linear

(absorbansi)


9/12

-3,250x = 1,272 1,4431

-3,250x = -0,1711

X = 3,0789

G. PEMBAHASANSalah satu analisis untuk menentukan kadar suatu senyawa pada suatu

sampel adalah dengan cara spektrofotometri. Spektrofotometri merupakan suatu

metode yang biasa digunakan dalam analisis suatu senyawa dalam cuplikan yang

didasarkan pada pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur

larutan berwarna pada panjang gelombang spesifik dengan menggunakanmonokromator prisma atau kisi difraksi dengan detector Fototube. Spektroskopi

adalah salah satu ilmu yang mempelajari tentang interaksi antara atom atau

molekul dengan radiasi elektromagnetik (REM). Instrumen yang digunakan

dalam analisis spektrofotometri disebut spektrofotometer. Spektrometer

menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan

fotometer adalah alat untuk mengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan

atau diabsorpsi. Jadi spektrofotometer digunakan untuk mengukur energi secara

relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai

fungsi dari panjang gelombang.

Cara kerja spektrofotometer dimulai dengan dihasilkannya cahaya

monokromatik dari sumber sinar. Cahaya tersebut kemudian menuju ke kuvet

(tempat sampel/sel). Banyaknya cahaya yang diteruskan maupun yang diserap

oleh larutan akan dibaca oleh detektor yang kemudian menyampaikan ke layar

pembaca. Sesuai hukum Lambert-Beer, dimana bila suatu cahaya monokromatik

dilewatkan dalam suatu media (larutan), maka sebagian cahaya tersebut diserap,

sebagian dipantulkan, dan sebagian lagi dipancarkan. Besarnya cahaya yang

diserap berbanding lurus dengan konsentrasi larutan. Besarnya cahaya yang

diserap ini akan terbaca sebagai nilai absorbansi. Sehingga, semakin besar nilai

absorbansinya, semakin besar pula konsentrasinya. Hal ini menunjukkan

banyaknya molekul yang berinteraksi dengan cahaya yang dilewatkan pada

sampel. Spektorofotometri ini mengukur dan membaca melalui gugus kromofor.

Spektrum absorpsi yang diperoleh dari hasil analisis dapat memberikan

informasi panjang gelombang dengan absorban maksimum dari senyawa atau


10/12

unsur. Panjang gelombang dan absorban yang dihasilkan selama proses analisis

digunakan untuk membuat kurva standar. Konsentrasi suatu senyawa atau unsur

dapat dihitung dari kurva standar yang diukur pada panjang gelombang dengan

absorban maksimum.

Percobaan ini dilakukan untuk menetapkan kadar sulfadiazine dalam sampel

obat Trisulfa secara spektrofotometri ultra violet (UV). Trisulfa merupakan

kombinasi dari tiga sulfonamide, biasanya sulfadiazine, sulfamerazin, dan

sulfametazin dalam perbandingan yang sama. Sulfadiazine merupakan derivate

pirimidin yang digunakan untuk kemoterapeutiks bakteriostatis. Resorpsi

sulfadiazine dari usus agak lambat sehingga sebagian obat bisa mencapai ususbesar. Oleh karena itu, sulfadiazine berkhasiat terhadap disentri basiler, bahkan

lebih efektif dibandingkan dengan kloramfenikol dan tetrasiklin.

Sulfadiazine merupakan suatu senyawa yang tidak berwarna, namun

sesungguhnya memiliki gugus kromofor dalam struktur senyawanya. Struktur

senyawa sulfadiazine dapat digambarkan:

Gugus kromofor merupakan suatu gugus fungsi, tidak terhubung dengan gugus

lain, yang menampakkan spektrum absorpsi karakteristik pada daerah sinar UV-

sinar tampak. Gugus kromofor dapat membentuk kompleks sehingga akan

menghasilkan warna tertentu pada larutan. Gugus kromofor pada sulfadiazine

merupakan gugus benzene yang merupakan kromofor tunggal. Tidak adanyawarna dari larutan sulfadiazin meskipun senyawa tersebut memiliki kromofor

dalam dua cincin benzennya disebabkan oleh cahaya yang diserap kromofornya

(cahaya kompartemen, diterima oleh mata) memiliki panjang gelombang dalam

rentang daerah sinar UV dalam spektrum gelombang. Daerah UV berada di luar

spektrum cahaya tampak dengan panjang gelombang lebih kecil (200-400 nm)

sehingga tidak dapat terdeteksi oleh mata manusia.

Sampel obat Trisulfa yang sudah dilarutkan dengan larutan alkohol

ditentukan kadarnya menggunakan instrumen spektrofotometer 20D.


11/12

Pembacaan nilai absorbansi dilakukan pada panjang gelombang maksimum.

Suatu radiasi elektromagnetik yang dikenakan pada sampel, sebagian dari energi

radiasi elektromagnetik tersebut diserap oleh molekul atau atom dalam sampel

sesuai dengan struktur molekul atau atom tersebut. Dalam sulfadiazin, struktur

molekul atau atom yang bertanggung jawab dalam penyerapan energi REM

adalah gugus kromofornya (gugus benzene) melalui interaksi yang

mengakibatkan pengaruh terhadap pita absorbsi yaitu terjadi pergeseran ke

panjang gelombang yang lebih panjang (efek batokromik). Radiasi cahaya ini

akan menyebabkan terjadinya energi elektronik, sebagai akibat transisi antara

dua tingkat energi dari keadaan dasar (groundstate) menjadi tereksitasi. Saattereksitasi, sampel menyerap dan mentransmisikan energi yang sesuai.

Intensitas cahaya yang ditransmisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang

akan terukur oleh fotometer.

Hasil pengukuran pada instrumen spektrofotometer merupakan nilai

absorbansi. Absorbansi yang diperoleh pada pengukuran sampel sulfadiazin

adalah 1,4431. Absorbansi yang diperoleh digunakan untuk menentukan

konsentrasi sulfadiazin, sebab sesuai dengan hukum Lambert-Beer, besarnya

nilai absorbansi sebanding dengan besarnya konsentrasi. Penentuan konsentrasi

dilakukan dengan menyubstitusikan absorbansi ke persamaan yang telah

diperoleh dari larutan baku standar. Konsentrasi sulfadiazine yang diperoleh

dalam sampel obat Trisulfa sebesar 3,0789.

H.KESIMPULANDari percobaan yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa kadar

senyawa sulfadiazine dalam sampel trisulfa sebesar 3,0789.


12/12

DAFTAR PUSTAKA

Behera, S., Subhajit G., Fahat A., Saayak S., dan Sritoma B., 2012, UV-Visible

Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay of

Paracetamol Tablet Formulation, Jurnal Analytical & Bioanalytical Techniques,

India.

Ditjen POM, 1979, Farmakope Indonesia Edisi III, Departemen Kesehatan Republik

Indonesia, Jakarta.

Fatimah, I., 2003, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan Spektrofotometri

Derivatif,Jurnal LogikaVol. 9 No. 10 ISSN: 1410-2315.

Gandjar, I.G., Abdul R., 2012, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta.

Ghodekar, S.V., Shilpa P.C., Mukesh P.R., 2012, Development And Characterization Of

Silver Sulfadiazine Emulgel For Topical Drug Delivery, International Journal of

Pharmacy and Pharmaceutical Sciences Vol. 4 No. 4, College of

Pharmacy,Thergaon.

Harjadi, W., 1990, Ilmu Kimia Analitik Dasar, Gramedia, Jakarta.

Tjay, T.H., Kirana R., 2002, Obat-Obat Penting Edisi ke-5, PT. Elex Media Komputindo,

Jakarta.

Upston, S.L., 2000, Ultraviolet/Visible Light Absorption Spectrophotometry in Clinical

Chemistry in Encyclopedia of Analytical Chemistry, John Wiley & Sons Ltd., UK.

Documents

Percobaan II