PEWARNAAN GRAM DAN TAHAN ASAMI NYOMAN SURYA ARI WAHYUDI G0011111Pewarnaan bakteriTanpa pewarnaan, bakteri terlalu transparan sehingga sulit dilihat secara langsung pada mikroskop. Untuk membantu pengamatan morfologi dan sifat-sifat bakteri.Membantu identifikasi bakteri.Pewarnaan BakteriJenis-jenis pewarnaan bakteri yang dikenal adalah:. !ewarnaan sederhana"- #arbol fuchsin- $entian %iolet- Methylen blue &.!ewarnaan diferensial" - Pewarnaan Gram- Perwarnaan tahan asamPEWARNAAN GRAMCAT GRAM': #rystal (iolet )pewarna *+: ,odium, -alium ,odida ) Mordant*#: 'lkohol, 'seton ).ecolori/er*.: 0afranin )pewarna &* +akteri yang tahan terhadap peluntur akan mempertahankanpewarna pertama +erwarna ungu 1#(2 -3 $ram positif+akteri yang tidak tahan terhadap peluntur akanmenyerap pewarna kedua +erwarna merah 1safranin2-3 $ram negatif Prinsip Pewarnaan Gram4!ewarna !ertama:#rystal %iolet 4Mordant: -alium ,odida4!eluntur: 'lkohol 567 4!ewarna -edua:0afranin Dinding Sel Bakteri Gram (+ dan (!+akteri $ram positif: .inding selnya terdiri dari lapisan peptidoglikan 1disebut juga mucopeptide atau murein2 yang lebih tebal 186-5672+akteri $ram negatif: .inding selnya terdiri dari lapisan peptidoglikan yang tipis 1672 +akteri $ram 192 memiliki lipid : bakteri $ram 1-2Te"ri permeabilitas dinding sel$ram positif:.inding kompak, peptidoglikan tebal, permeabilitas dinding sel kurang dan kompleks #(-, tidak dapat keluar $ram negatif:;.inding tidak kompak, !eptidoglikan tipis, permeabilitas dinding sel lebih besar sehingga memungkinkan lepasnya kompleks #(-, #ontoh bakteri gram positif-+entuk coccus: Streptococcus, Staphylococcus,Pneumococcus, Peptococcus-+entuk batang: Corynobacterium, Bacillus, Clostridia#ontoh bakteri gram negatif+entuk coccus: Neisseria, Veilonella+entuk batang: E. coli, Shigella, Salmonella,Klebsiella, emophillus, Pasteurella,!usobacterium, Brucella+eberapa bakteri setelah dicat gram menunjukkan pola gram-variable dimana tampak campuran pink dan ungu. "ctinomyces, "rthrobacter, Corynebacterium, dan Propionibacterium dinding selnya mudah rusak saat pembelahan sehingga yang seharusnya gram positif tercat negatif Bacillus, Butyri#ibrio, dan Clostridium mengalami penurunan ketebalan peptidoglikan selama pertumbuhannya bertepatan dengan itu jumlah yang tercat negatif bertambah Usia kultur memiliki kaitan en!an hasil "en!e#atan "aa met$e !ram $$"cinetobacteradalah coccus gram negatif yang tahan terhadap decolori%ation pada pewarnaan gram. 0ehingga "cinetobacter spp. 0ering tampak sebagai gram positif saat pewarnaan gram#asil Pewarnaan GramStaphylococcus sp.N. gonorrhoeaePEWARNAAN TA#AN ASAM ( a$id!%ast staining#ontoh bakteri tahan asam:Mycobacterium tuberculosis&ycobacterium lepraeNocardia sp"ctinomyces spTerdapat tiga metode umum dalam pengecatan tahan asam, yakniZiehl-Neelsen 1hot2, -inyoun 1cold2, and 'uramine-uires higher concentrations of the dye solution and'or a heating periodDinding Sel Bakteri Ta&an Asam.inding sel bakteri tahan asam terdiri dari peptidoglikan, arabinogalaktan, dan lipid 1lapisan lilin2. 867 dari lapisan lipid ini adalah asam mikolat?apisan lilin tebal 1asam mikolat2 dari mycobacterium berperan sebagai barrier dan membuatnya sulit terwarna. Cat 'n': =uschin +asis )pewarna *+: @#l, 'lkohol )peluntur*#: Methlyen +lue )pewarna &* Pewarnaan Ta&an Asam-andungan lilin yang tinggi-3sukar diwarnai0upaya dapat mewarnai bakteri tahan asam perlu menghilangkan lapisan lilin pada dinding sel: "emanasan 1Aiehl Beelsen2Metode Aiehl Beelsen:Aat warna pertama 1carbol fuchsin2 9 pemanasan-3 peluntur 1H%l dan 'lcohol2-3 /at warna kedua 1methylen blue20etelah terwarnai +akteri tahan asam akan mempertahankan pewarna pertamaC fuschin basis1merah2 dengan sangat kuat dan tahan terhadap asam dan alkohol+akteri tidak tahanasam akan melepaskan pewarna pertama dan mengikat pewarna keduaC methylen blue1biru20ehingga bakteri terbagi menjadi:+akteri tahan asam-3Merah+akteri tidak tahan asam-3+iruPr"sed(r Pewarnaan Ta&an Asam)*E#+ N*E+SEN4!ewarna pertama: =uchsin basis 4Menghilangkan lipid : pemanasan4!eluntur: 'lcohol D @#l 4!ewarna kedua: Methylen+lue #asil Pewarnaan Bakteri Ta&an Asam Met"de )ie&l NeelsenS(mber. http:CCwww.microbelibrary.orgCcomponentCresourceClaboratory-testC&EF6-acid-fast-stain-protocols&. http:CCwww.csun.eduCGhcbio6&FCbiotechnologyClecHaCgram.htmlI. http:CCamrita.%lab.co.inCJsubKIDbrchKFIDsimK&6EDcntKH. http:CCwww.microbelibrary.orgCcomponentCresourceCgram-stainC&EEL-gram-stain-protocols8. $illespie, 0tephen and -athleen +amford. 't a glance medical microbiology and infection Ird Mdition. L. Maryani, 0uryawati +. &6. Buku Praktikum (ram dan B)". 0urakarta: ?aboratorium Mikrobiologi =- UB0 F. 0lide asistensi &6Terima kasi&