Upload
dani-conde
View
45
Download
1
Embed Size (px)
Citation preview
Laboratorio Nº 1
PIPETEO
1. OBJETIVOS
1.1. Objetivo General
Realizar la técnica de pipeteo apropiadamente utilizando las diferentes
capacidades volumétricas de las pipetas, puesto que esto nos ayudará en la
realización de futuros trabajos de laboratorio.
1.2. Objetivos Específicos
Aplicar el pipeteo con diferentes líquidos, tal como el agua
destilada, leche y alcohol.
Diferenciar las sumas de gotas de acuerdo al líquido empleado.
Observar la frecuencia de rapidez al utilizar una mayor o menor
presión en la pipeta.
2. MARCO TEÓRICO
2.1 Pipeta
La pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio que permite medir la
alícuota de líquido con bastante precisión. Suelen ser de vidrio. Está
formada por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de
forma cónica, y tiene una graduación (una serie de marcas grabadas) con la
que se indican distintos volúmenes.
Algunas son graduadas o de simple aforo, es decir, se enrasa una vez en los
cero mililitros, y luego se deja vaciar hasta el volumen que se necesite; en
otras, las denominadas de doble enrase o de doble aforo, se enrasa en la
marca o aforo superior y se deja escurrir el líquido con precaución hasta
enrasar en el aforo inferior. Si bien poseen la desventaja de medir un
volumen fijo de líquido, las pipetas de doble aforo superan en gran medida a
las graduadas en que su precisión es mucho mayor, ya que no se modifica el
volumen medido si se les rompe o si se deforma la punta cónica.
Para realizar las succiones de líquido con mayor precisión, se utiliza, más que
nada en las pipetas de doble aforo, el dispositivo conocido como propipeta.
Según su volumen, las pipetas tienen un límite de error.
Límites de error en pipetas (ml)
Capacidad (hasta) Límite de error
2 0,006
5 0,01
10 0,02
30 0,03
50 0,05
100 0,08
200 0,10
2.2. Metodología de uso
Se introduce la pipeta (con la punta cónica para abajo) en el recipiente
del cual se desea extraer un volumen determinado de muestra.
Se coloca la propipeta o una perita en la punta libre y se hace ascender
el líquido por encima del aforo superior.
Rápidamente se gradúa con la pro pipeta o se saca la perita colocando
el dedo índice obturando la punta, para evitar que descienda.
Se disminuye leve y lentamente la presión ejercida por el dedo, hasta
que el líquido comience a descender. Se vuelve a presionar cuando el
menisco del líquido llegó a 0. Si el líquido descendió demasiado, se
comienza nuevamente.
Se traslada la pipeta al recipiente destino.
Se disminuye nuevamente la presión del dedo hasta llegar a la cantidad
de mililitros necesarios.
En el caso de las pipetas graduadas, para vaciarla completamente se
saca el dedo completamente y se deja caer; pero no se debe forzar la
caída de las últimas gotas, sino que éstas deben quedar en la punta
cónica de la pipeta.
En la pipeta graduada se pueden medir distintos volúmenes de líquido,
ya que lleva una escala graduada.
La pipeta aforada posee un único enrase superior, por lo que sólo puede
medir un determinado volumen.
2.3. Técnica del pipeteo
La técnica del pipeteo abarca diferentes herramientas y medios que se
requieren para pipetear. El empleo de la técnica del pipeteo permite dosificar
líquidos de forma rápida y precisa. Las herramientas utilizadas para ello se
denominan pipetas. Debido a la elevada importancia de la técnica del pipeteo
en laboratorios de cualquier tipo, desde la medicina hasta la química, a lo largo
de los años se han desarrollado diferentes pipetas de múltiples tamaños y
versiones. La versión más conocida es la pipeta de medición, se compone de
un tubito de vidrio con una escala de volumen grabada, que se estrecha en la
punta y lleva el otro extremo o bien abierto, o bien cerrado con una pera de
succión. Con esta pipeta se pueden absorber cantidades variables de líquidos,
de modo que ofrece una alta flexibilidad y puede así aplicarse en múltiples
ámbitos. La desventaja de esta pipeta es sin embargo la imprecisión que
conlleva esta flexibilidad. Si hay que conseguir una precisión muy alta en la
dosificación, el empleo de una pipeta aforada es imprescindible. Una pipeta
aforada no tiene escala de volumen, sino una sola marca para un volumen
definido. Otros instrumentos de la técnica del pipeteo son por ejemplo la pipeta
Pasteur, la micropipeta, la pipeta multicanal y diversas versiones especiales
como la pipeta desechable de plástico. Éstas se emplean sobre todo en la
medicina. Se suelen utilizar para tareas de dosificación con exigencias bajas
de precisión, como por ejemplo la dosis de colirio.
3. PROCEDIMIENTO
El procedimiento se basó según los siguientes pasos:
1. Planificación de la práctica. El docente explico acerca de lo que se
hará en la materia durante el semestre, al mismo tiempo guiando a lo qe
será el desarrollo de la practica
2. Reconocimiento de materiales. El docente nos explico acerca de los
materiales, los usos y los cuidados que tenían cada uno de ellos, como
de: tubos de ensayo, matraz Erlenmeyer, pipetas graduadas y
volumétricas, vaso de precipitación y probeta
3. Reconocimiento de equipo. Se nos fue mostrado los equipos
esenciales y más usados en bioquímica, además de los usos y cuidados
que se debe tener en cada uno de ellos, como de el: Espectrofotómetro,
Centrifugadora, Baño María y Stat-Fax
4. Realización de práctica. Tras conocer ya los materiales, sus usos y
cuidados, nos adentramos más a realizar práctica de ellos, como de:
pipetas y vaso de precipitación, se nos fue entregado pipetas de
diferente volumen de 1ml, 2ml, 5ml y 10ml, para así mismo realizar lo
que es pipetear aprendiendo y practicando con diferentes líquidos como
de agua destilada, leche y etanol, contando las gotas de cada pipeta con
los diferentes volúmenes y líquidos, siendo una manera efectiva de
aprender el pipeteo, donde cada uno de los integrantes realizo el pipeteo
al ser cuatro integrantes, cada una tomo una pipeta y realizo el conteo
de gotas.
5. Resultados. Tras terminar la práctica y anotar y diferenciar los
resultados con cada líquido, se notó que existe una diferencia, al mismo
tiempo se notó también que existe una diferencia mínima del conteo de
gotas entre los grupos
6. FINALIZACIÓN. Concluyendo la clase, se pasó a lavar cada uno de los
instrumentos utilizados con prevención y se realizó el respectivo aseo de
manos
4. CONCLUSIONES
En el trabajo realizado con pipetas de diferentes volúmenes los cuales
están contabilizados en mililitros, de 1ml, 2ml, 5ml y 10ml; y con el
empleo de agua destilada, leche y etanol, se pudo evidenciar que existe
una diferencia en la cantidad de gotas según el líquido empleado ya que
cada sustancia posee una densidad diferente.
5. DISCUSIÓN – RESULTADOS
En la ejecución del trabajo práctico, se determinó que la densidad de un
determinado líquido, tiene una influencia determinante en la cantidad de gotas.
Asimismo se pudo evidenciar que la capacidad de cada pipeta en mililitros,
influyo en la cantidad de gotas efectuadas en los diferentes elementos líquidos
empleados.
RESULTADOS
Con agua destilada:
Capacidad de la pipeta Cantidad de gotas.
1ml. 20
2 ml. 38
5 ml. 81
10 ml. 182
Con leche:
Capacidad de la pipeta Cantidad de gotas.
1ml. 30
2 ml. 52
5 ml. 102
10 ml. 200
Con alcohol
Capacidad de la pipeta Cantidad de gotas.
1ml. 52
2 ml. 106
5 ml. 212
10 ml. 455
6. BIBLIOGRAFÍA
www.biquimicalibros.com www.answectsr.com
www.pce-iberica.es