Upload
vonga
View
214
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
EFEK HEPATOPROTEKTIF PEMBERIAN JANGKA PENDEK
EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH Persea americana Mill. TERHADAP
AKTIVITAS ALT-AST PADA TIKUS TERINDUKSI KARBON
TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi
(S.Farm.) Program Studi Farmasi
Diajukan oleh :
MM. Risa Puspitasari
NIM : 118114044
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2015
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
1 Kor 15:58
Karena itu, saudara-saudaraku yang terkasih, berdirilah teguh, jangan
goyah, dan giatlah selalu dalam pekerjaan Tuhan! Sebab kamu tahu, bahwa
dalam persekutuan dengan Tuhan jerih payahmu tidak sia-sia.
Yesaya 41:10
Janganlah takut, sebab Aku menyertai engkau, janganlah bimbang, sebab
Aku ini Allahmu; Aku akan meneguhkan, bahkan akan menolong engkau;
Aku akan memegang engkau dengan tangan kanan-Ku yang membawa
kemenangan.
Kupersembahkan karya kecilku,
Untuk segala keajaiban indah dan rahmat Tuhanku
Untuk cinta, tanggung jawab, ispirasi kerja keras dan kegigihan, Bapakku
Untuk kasih sayang dan ketulusan, Ibuku
Untuk semangat dan harapan, kakakku dan sahabatku
Untuk kebanggaan, Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat
rahmat-Nya skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Pemberian Jangka
Pendek Ekstrak Etanol Kulit Buah Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas
ALT-AST Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida” dapat penulis selesaikan
tepat pada waktunya. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat
memperoleh gelar Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
Skripsi ini dapat penulis susun tidak terlepas dari bimbingan, semangat,
dan bantuan berbagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph,D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma.
2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.d., Apt., selaku Dosen Pembimbing skripsi
ini atas segala kesabaran untuk selalu membimbing, memberi motivasi,
dan memberi masukan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
3. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. dan Ibu Dr. Erna Tri Wulandari,
M.Si., Apt. selaku dosen penguji atas kritik dan saran yang telah
diberikan, serta kesediaannya dalam meluangkan waktu untuk menguji.
4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., atas bantuan dalam determinasi
buah Persea americana Mill.
5. Pak Parjiman selaku laboran Laboratorium Farmakologi-Toksikologi,
Pak Heru selaku laboran Laboratorium Biofarmasetika-Farmakokinetik,
Pak Kayatno selaku laboran Laboratorium Biokimia, Pak Suparlan
selaku laboran Laboratorium Kimia Organik, atas segala bantuan dan
kerjasama selama di laboratorium.
6. Keluarga yang selalu mengirim doa, menyalakan semangat,
memberikan dukungan dalam menyusun skripsi ini (Ayah penulis
Albertus Suyadi, Ibu penulis Margareta Sainah, Kakak penulis
Fransiska Eni Susilowati dan Novianti.
7. Teman-teman seperjuangan “Tim kulit buah Persea americana Mill.”
Ester, Berna, Ucy, Novel, Vivo, Jolina, Sita, Anggel, Siska, Evi, Puput,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .............................................................................................. i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii
HALAMAN PERSEMBAHAN .......................................................................... iv
PERYATAAN KEASLIAN KARYA .................................................................... v
LEMBAR PERSYARATAN PERSETUJUAN .................................................. vi
PRAKATA .......................................................................................................... vii
DAFTAR ISI ........................................................................................................ ix
DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xv
INTISARI ........................................................................................................... xvi
ABSTRACT ......................................................................................................... xvii
BAB I. PENGANTAR ........................................................................................... 1
A. Latar Belakang ............................................................................................ 1
1. Rumusan masalah ................................................................................. 4
2. Keaslian penelitian ............................................................................... 5
3. Manfaat penelitian ................................................................................ 6
B. Tujuan Penelitian ....................................................................................... 6
1. Tujuan umum ........................................................................................ 6
2. Tujuan khusus ....................................................................................... 6
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .................................................................... 7
A. Tanaman P. americana Mill. ..................................................................... 7
1. Nama lain ............................................................................................. 7
2. Sinonim ................................................................................................ 7
3. Taksonomi ............................................................................................ 7
4. Kandungan ........................................................................................... 8
5. Khasiat dan kegunaan .......................................................................... 8
B. Anatomi dan Fisiologi Hati ........................................................................ 8
C. Kerusakan Hati ......................................................................................... 10
1. Sirosis hati .......................................................................................... 10
2. Perlemakan hati .................................................................................. 10
3. Kolestasis ........................................................................................... 11
D. Karbon Tetraklorida ................................................................................. 11
E. Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST) . 13
F. Landasan Teori ......................................................................................... 14
G. Hipotesis ................................................................................................... 17
BAB III. METODE PENELITIAN .................................................................... 18
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................................... 18
B. Variabel dan Definisi Operasional ........................................................... 18
1. Variabel utama ................................................................................... 18
2. Variabel pengacau .............................................................................. 18
3. Definisi operasional ........................................................................... 19
C. Bahan Penelitian ....................................................................................... 20
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
1. Bahan utama ....................................................................................... 20
2. Bahan kimia ....................................................................................... 20
D. Alat Penelitian .......................................................................................... 21
1. Alat ekstraksi ...................................................................................... 21
2. Alat uji hepatoprotektif ...................................................................... 22
E. Tata Cara Penelitian ................................................................................. 22
1. Determinasi buah P. americana ......................................................... 22
2. Pengumpulan bahan uji ...................................................................... 22
3. Pembuatan serbuk kulit buah P. americana ....................................... 22
4. Penetapan kadar air dalam serbuk kering kulit buah P. americana .... 23
5. Pembuatan sediaan etanol kulit buah P.americana............................. 23
6. Pembuatan CMC-Na 1 % ................................................................... 24
7. Penetapan konsentrasi ekstrak ........................................................... 24
8. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana ................... 25
9. Pembuatan larutan karbon tetraklorida dalam olive oil ...................... 25
10. Uji pendahuluan ................................................................................. 25
11. Pengelompokan hewan uji ................................................................. 26
12. Pembuatan serum ............................................................................... 27
13. Pengukuran aktivitas ALT–AST pada serum .................................... 27
F. Tata Cara Analisis Hasil ........................................................................... 28
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 29
A. Penyiapan Bahan ...................................................................................... 29
1. Hasil determinasi tanaman ................................................................. 29
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
2. Penetapan kadar air serbuk kering kulit buah P. americana ............... 30
3. Pembuatan serbuk kulit buah P. americana ........................................ 31
4. Pembuatan ekstrak etanol kulit buah P. americana ........................... 32
B. Uji Pendahuluan ....................................................................................... 34
1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida ............................. 34
2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji ................................. 36
3. Penetapan lama pemejanan ekstrak etanol kulit buah P. americana . 38
4. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana ................... 39
C. Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Kulit Buah P. americana terhadap
Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida ..................................................... 39
1. Kontrol negatif ................................................................................... 42
2. Kontrol hepatotoksik (karbon tetraklorida 2 mL/kgBB ...................... 43
3. Kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 1400 mg/kgBB 43
4. Kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350,
700, dan 1400 mg/kgBB pada tikus jantan terinduksi karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB ...................................................................... 46
D. Rangkuman Pembahasan ......................................................................... 53
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 55
A. Kesimpulan .............................................................................................. 55
B. Saran .......................................................................................................... 55
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 57
LAMPIRAN ......................................................................................................... 62
BIOGRAFI PENULIS ......................................................................................... 93
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel I. Komposisi dan Konsentrasi reagen ALT ............................................. 21
Tabel II. Komposisi dan Konsentrasi reagen AST ............................................. 21
Tabel III. Purata aktivitas serum ALT ± SE (U/I) tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam .. 36
Tabel IV. Hasil uji statistik aktivitas ALT setelah pemberian karbon tetraklorida
dosis 2 mL/kgBB pada waktu pencuplikan darah ke-0, ke-24 dan ke-48
jam ....................................................................................................... 38
Tabel V. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan AST, serta % efek hepatoprotektif
tikus perlakuaan ekstrak etanol kulit buah P.americana terinduksi
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ................................................. 40
Tabel VI. Hasil uji Mann-Whitney aktivitas serum ALT tikus perlakuan ekstrak
etanol kulit buah P. americana terinduksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB ............................................................................................. 42
Tabel VII. Hasil uji Mann-Whitney aktivitas serum AST tikus perlakuan ekstrak
etanol kulit buah P. americana terinduksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB ............................................................................................. 42
Tabel VIII. Data purata dan Standar Eror aktivitas ALT pada jam ke-0, 24, dan
48 ......................................................................................................... 68
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Gambar hati ....................................................................................... 9
Gambar 2. Mekanisme toksisitas karbon tetraklorida ........................................ 13
Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas ALT sel hati tikus, setelah
pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu
0, 24 dan 48 jam .............................................................................. 37
Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus perlakuaan
pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana ......................... 41
Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus perlakuaan
pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana ........................ 41
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto bagian kulit buah P. americana Mill. .................................... 63
Lampiran 2. Foto serbuk kulit buah P. americana Mill. .................................... 63
Lampiran 3. Foto ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill. .......................... 63
Lampiran 4. Foto larutan ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill. ............. 63
Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi buah P. americana Mill. ................ 64
Lampiran 6. Determinasi buah P. americana Mill. ............................................ 65
Lampiran 7. Perhitungan persen rendemen ekstrak etanol kulit buah P. americana
Mill. ................................................................................................. 65
Lampiran 8. Surat keterangan kadar air kulit buah P. americana Mill. .............. 66
Lampiran 9. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committe
(MHREC) ........................................................................................ 67
Lampiran10. Hasil uji statistik orientasi pencuplikan darah ................................ 68
Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak etanol kulit
buah P. americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB ........................................................................................ 71
Lampiran 12. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan ekstrak etanol kulit
buah P. americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB ........................................................................................ 81
Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia ................................... 91
Lampiran 14. Perhitungan efek hepatoprotektif ................................................... 92
Lampiran 15. Konversi waktu tikus ke manusia ................................................... 92
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan informasi efek
hepatoprotektif pemberian ekstrak etanol jangka pendek kulit buah P. americana pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan melihat penurunan aktivitas alanin transaminase (ALT) dan aspartat transaminase (AST) serta untuk mengetahui dosis efektif pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Tiga puluh ekor tikus dibagi ke dalam enam kelompok perlakuan secara acak dengan masing-masing sebanyak 5 ekor tikus. Kelompok I sebagai kontrol hepatotoksin diberikan larutan karbon tetrakolrida 2 mL/kgBB. Kelompok II sebagai kontrol negatif diberikan olive oil 2 mL/kgBB. Kelompok III sebagai kontrol ekstrak diberikan ekstrak etanol kulit buah P. americana 1.400 mg/kgBB. Kelompok IV, V, dan IV diberi ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350, 700 dan 1.400 mg/kgBB. Jam ke-6 setelah pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana, maka kelompok IV-VI dipejani dengan karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara intraperitonial, lalu setelah 24 jam diambil darah melalui sinus orbitalis mata, kemudian dilakukan pengujian aktivitas ALT-AST. Penurunan nilai aktivitas ALT dan AST merupakan gambaran efek hepatoprotektif dari ekstrak etanol kulit buah P. americana, dimana aktiviatas ALT dan AST merupakan indikator kerusakan hepar.
Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak etanol kulit buah P. americana memberikan efek hepatoprotektif yang ditunjukkan dengan penurunan nilai aktivitas serum ALT-AST pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida. Hasil penelitian yang diperoleh ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350, 700 dan 1.400 mg/kgBB memiliki persen efek hepatoprotektif berturut-turut sebesar 83,1; 17,9 dan 73,8 %. Dosis efektif yang diperoleh dari hasil penelitian ini adalah dosis 350 mg/kgBB.
Kata kunci : Persea americana Mill., hepatoprotektif, karbon tetraklorida, ALT, AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
ABSTRACT This research is aimed at getting information about hepatoprotective
effect of ethanol extract Persea americana Mill. skin for reducing activity of ALT and AST serum in rats induced by carbon tetrachloride and to know effective dose of ethanol extract fruit peel P. americana.
This research was an experimental research with direct randomized design. Thirty Wistar male rats were divided into six treatment groups were randomized to each of as many as 5 rats. The first group (hepatotoxin control) was given carbon tetrachloride 2 mL/kgBW. Then, the second group (negative control) was given olive oil 2 mL/kgBW. Third group (extract control) was given ethanol extract fruit peel Persea americana Mill. 1.4 g/kgBW. Groups IV, V, and IV was given ethanol extract of P. americana fruit peel doses of 0.35, 0.70, and 1.4 g / kgBW. Six hours after the administration of ethanol extract of P.americana fruit peel, the group IV-VI was given carbon tetrachloride dose of 2 mL/kg in intraperitonial, blood was collected from the orbital sinus eye to be measured ALT and AST serum activity. Impairment of activities of ALT and AST is a picture hepatoprotective effect of the ethanol extract of P.americana fruit peel, where activity ALT and AST is an indicator of liver damage.
Based of the result of the research, ethanol extract fruit peel Persea americana Mill. skin gave hepatoprotective effects for reducing activity of ALT and AST serum in rats induced by carbon tetrachloride. The results obtained bark ethanol extract of P. americana fruit peel doses of 0.35, 0.70, and 1.4 g / kg has a percent hepatoprotective effect respectively 83.1; 17.9; and 73.8%. Effective dose obtained from this study is that the dose of 0.35 g / kgBB.
Keywords : Persea americana Mill. skin, hepatoprotective, carbon tetrachlorde, ALT, AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Hepar merupakan kelenjar paling besar dari tubuh. Tiga fungsi utama
hepar adalah (1) produksi dan sekresi empedu ke dalam saluran cerna, (2)
berperan pada metabolisme lemak, karbohidrat, dan protein, dan (3) sebagai filter
dari darah terhadap kuman maupun zat-zat toksik (Widjaja, 2008). Hepar
memiliki fungsi dalam detoksifikasi dan inaktivasi zat kimia yang masuk dalam
tubuh sehingga zat kimia tersebut menjadi tidak berbahaya bagi tubuh, akibatnya
kerusakan fungsi pada organ hepar sehingga kemampuan regenerasi sel hepar
menghilang dan hepar mengalami kerusakan yang permanen. Kerusakan hepar
tersebut dapat menimbulkan kematian (Elya, Juheini, dan Emiyanah, 2010).
Menurut data yang diambil dari rekam medis pasien pada periode 2010-
2011 diketahui bahwa sebanyak 50 pasien (96% ) menggunakan obat penginduksi
kerusakan hati. Obat-obat yang banyak digunakan yaitu ranitidin (31,3%),
seftriakson (23,1 %), dan paracetamol (16,4%) (Cinthya, Ivan dan Rizky, 2012).
Menurut Elya dkk. (2010) bahwa untuk melihat fungsi organ hepar dapat
dilakukan dengan pengukuran aktivitas enzim aminotransferase, yaitu AST
(Aspartat aminotransferase) dan ALT (Alanin aminotransferase) yang terdapat
dalam plasma darah. Menurut Panjaitan, Ekowati, Chairul, Masriani, Zulfa, dan
Wasmen (2007), bahwa kerusakan hati ditandai dengan peningkatan kadar enzim
ALT, AST, alkali fosfatase (ALP), bilirubin total, dan protein total dalam serum.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
Karbon tetraklorida (CCL4) digunakan dalam penelitian ini sebagai
senyawa model yang dapat merusak fungsi hepar. Karbon tetraklorida (CCl4)
digunakan sebagai pemicu radikal bebas sebagai penyebab gangguan integritas
membran hepatosit sehingga menyebabkan keluarnya berbagai enzim dari
hepatosit. Enzim yang keluar dari hepatosit akan meningkat kadarnya dalam
serum sehingga dapat menjadi indikator kerusakan hepar (Handoko, 2005).
Karbon tetraklorida dapat menyebabkan degenerasi hidrofik, degenerasi melemak
dan zona nekrosis yang dilihat dari histopatologi jaringan hati (Kardena dan Ida,
2011). Penelitian Nopitasari (2013) menyatakan bahwa karbon tetraklorida
terbukti dapat meningkatkan aktivitas serum ALT dan AST yang tinggi dengan
dosis pemberian 2 mL/kg BB secara intraperitonial (i.p).
Pemanfaatan tanaman obat memainkan peran penting sebagai solusi dalam
menjaga kesehatan, mengatasi masalah kesehatan dan meningkatkan kulitas hidup
manusia, sehingga perlu dipertanggungjawabkan tentang khasiat tanaman yang
akan dipergunakan. P. americana Mill. merupakan salah satu jenis buah alpukat
yang berpotensi di Indonesia (Alfansuri, 2012). Vinha, Joana dan Sergio (2013)
menyebutkan bahwa di dalam kulit buah alpukat terdapat flavonoid, karotenoid,
fenolik, vitamin C dan vitamin E.
Flavonoid, atau bioflavonoid, adalah kelompok senyawa polifenol yang
terkandung dalam kebanyakan tanaman, dimana berpusat di biji, kulit buah, kulit
kayu, dan bunga. Sejumlah besar tanaman obat-obatan mengandung flavonoid,
yang memiliki aktivitas antibakteri, anti-inflamasi, anti alergi, antimutagenik,
antivirus, antineoplastik, anti-trombotik, dan tindakan vasodilatasi. Selain itu,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
flavonoid dibeberapa penelitian juga memberikan aktivitas antioksidan (Miller,
1996). Flavonoid diduga berpengaruh dalam menghambat kerusakan hepar
dengan cara mengikat radikal bebas sehingga dampaknya terhadap kerusakan
hepar berkurang (Handoko, 2005).
Pada penelitian ini digunakan ekstrak etanol kulit buah P. americana
dengan dasar penelitian Carpena, David, Maria, Petri, dan Mario (2011)
menyatakan bahwa dalam biji P. americana dapat diperoleh senyawa fenolik dan
aktivitas antioksidan dari hasil isolasi dengan pelarut organik bersifat polar.
Penggunaaan pelarut etanol diharapkan mampu menarik senyawa fenolik dan
aktivitas antioksidan dari biji P. americana, sehingga dilakukan cara yang sama
pada kulit buah P. americana untuk menarik senyawa fenolik dan aktivitas
antioksidan yang terkandung di dalam kulit buah P. americana.
Waktu pemejanan ekstrak etanol kulit buah P.americana dipilih rentang
6 jam sebelum induksi karbon tetraklorida dengan tujuan untuk melihat aktivitas
dari ekstrak etanol kulit buah P.americana dalam mengatasi kerusakan hati akibat
kerusakan yang ditimbulkan dari induksi karbon tetraklorida. Hal tersebut
berdasarkan penelitian Sasadara (2013) yang menyatakan waktu paling efektif
dalam memperoleh efek hepatoprotektif sebesar 101% pada perlakuan jam ke-6
pemberian ekstrak metanol biji P. americana. Nopitasari (2013) menyatakan
bahwa efek hepatoprotektif yang dihasilkan dari ekstrak etanol biji P.americana
dengan dosis 350; 700 dan 1.400 mg/kgBB berturut-turut sebesar 76,8; 76,5 dan
72,4 %.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
Penelitian ini menggunakan hewan uji tikus jantan sebab penelitian ini
merupakan penelitian lanjutan sehingga jenis kelamin hewan uji juga disamakan
dengan penelitian sebelumnya. Menurut penelitian Nopitasari (2013) bahwa
ekstrak atanol biji Persea americana Mill. dipejankan pada hewan uji tikus jantan.
Berdasarkan hal tersebut peneliti memiliki dasar yang kuat untuk dilakukannya
penelitian tentang pengaruh pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah P.
americana terhadap aktivitas ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida. Penelitian ini dilakukan dalam jangka pendek untuk mengetahui
dosis pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill. yang paling efektif
dalam mengatasi efek hepatoprotektif.
1. Rumusan masalah
a. Apakah pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill. jangka
pendek memberikan pengaruh hepatoprotektif terhadap penurunan
aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon
tetraklorida?
b. Berapakah dosis efektif pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit
buah P. americana Mill. yang dapat memberikan pengaruh
hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida ?
2. Keaslian penelitian
Vinha dkk. (2013), melaporkan bahwa di dalam kulit alpukat
mengandung flavonoid, karotenoid, fenolik, vitamin C dan vitamin E. Malanggi,
meiske dan Jessi (2012) melaporkan bahwa ekstrak etanol biji P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
memiliki persen aktivitas antioksidan yang tinggi (93,045%) sehingga dapat
dipertimbangkan sebagai salah satu sumber antioksidan alami. Imafidon dan
Amaechina (2010) melaporkan bahwa ekstrak biji P.americana Mill. efektif
dalam pengobatan hipertensi. Zuhrotun (2007) melaporkan bahwa ekstrak etanol
biji buah alpukat dapat meningkatkan aktivitas antidiabetes pada tikus yang dibuat
hiperglikemik. simplisia dan ekstrak etanol biji buah alpukat bentuk bulat
mengandung senyawa polifenol, tannin, flavonoid, triterpenoid, kuinon,
monoterpenoid dan seskuiterpenoid, sedangkan saponin hanya terdeteksi dalam
ekstrak. Arukwe, Amadi, Duru, Agomuo, Adindu, dan Odika (2012) melaporkan
P. americana pada daun, buah, dan biji mengandung senyawa kimia seperti tanin,
flavonoid, dan fenol.
Penelitian yang dilakukan oleh Panjaitan et al. (2007) melaporkan bahwa
kerusakan hati ditandai dengan peningkatan kadar enzim alanin transaminase
(ALT), aspartat transaminase (AST), alkali fosfatase (ALP), bilirubin total, dan
protein total dalam serum. Elya et al. (2010) mengukur aktivitas enzim
aminotransferase (AST dan ALT) sebagai parameter untuk melihat apakah
pemberian ekstrak etanol daun gandarusa pada mencit menimbulkan efek toksik
pada hati mencit. Penelitian Nopitasari (2013) melaporkan bahwa ekstrak biji P.
americana Mill. memiliki pengaruh hepatoprotektif terhadap aktivitas ALT dan
AST serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida. Sejauh penelusuran pustaka
yang dilakukan, penelitian efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak etanol kulit
buah P. americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST tikus jantan galus Wistar
terinduksi karbon tetraklorida belum pernah dilakukan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis.
b.
Penelitian ini di harapkan dapat bermanfaat bagi
perkembangan ilmu pengetahuan dalam pengobatan alternatif dengan kulit buah
P. americana Mill. sebagai hepatoprotektif.
Manfaat praktis
. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi
bagi masyarakat mengenai dosis efektif ekstrak etanol kulit buah P. americana
Mill. sebagai hepatoprotektif.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Membuktikan adanya pengaruh hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah
P. americana Mill. jangka pendek tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon
tetraklorida.
2. Tujuan khusus
Mengetahui dosis efektif ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill.
jangka pendek dapat memberikan efek hepatoprotektif tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Tanaman P. americana Mill.
1. Nama lain
Buah Apukado, Avocado, Buah Mentega (malaysia), Alligatorbirne,
Avocadobirne (Jerman), Avocado (Filipina), Adpukat, Avokad, Buah Apokat
(Indonesia), avocado (Italia), Abokado, Peruse (jepang) (Lim, 2012).
2. Sinonim
Laurus persea.L, Persea drymifolia Schlecht. And cham, Persea
gratissima Gaertn.f, Persea nubigena (Yasir, Das dan Kharya, 2010).
3. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Super Divisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub Kelas : Magnoliidae
Ordo : Laurales
Famili : Lauraceae
Genus : Persea
Spesies : P. americana Mill.
(Yasir et al., 2010)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
4. Kandungan
Penelitian Kumala, Hesty, dan Wahyu (2013) menyebutkan hasil
skrining fitokimia daun P.americana memiliki kandungan flavonoid, saponin dan
coumarin. Vinha dkk. (2013) menyebutkan bahwa di dalam kulit alpukat
mengandung senyawa fenolik, flavonoid, karotenoid, vitamin C dan vitamin E.
Penelitian lain Arukwe dkk. (2012) menyebutkan pada biji P.americana
mengandung tanin, flavonoid dan fenol. Biji alpukat kering yang berwarna
kecoklatan memiliki kandungan tanin (117 mg/kg) dan aktivitas antioksidan yang
tinggi (93,045%) sehingga dapat dipertimbangkan sebagai salah satu sumber
antioksidan alami (Malanggi et al., 2012).
5. Khasiat dan kegunaan
Penelitian Kumala dkk. (2013) menyebutkan kandungan metabolit daun
P.americana Mill, memiliki khasiat yang efektif sebagai antitumor, anti-inflamasi,
antibakteri, antivirus dan antihepatotoksik. Kulit alpukat mengandung senyawa
kimia (flavonoid) yang diduga dapat bekerja sebagai bahan aktif tabir surya
(Mokodompit, Hosea, dan Weny, 2013).
B. Anatomi dan Fisiologi Hati
Hepar adalah kelenjar yang paling besar dalam tubuh manusia dengan
berat 1500 gram atau 1,5 kg. Bagian superior dari hepar cembung dan terletak di
bawah kubah kanan diafragma. Bagian inferior hepar cekung dan dibawahnya
terdapat ginjal kanan, gaster, pankreas, dan usus. Hepar dibagi menjadi dua lobus,
yaitu lobus kiri dan kanan. (Baradero, Marry, dan Yakobus, 2008). Hati memiliki
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
bentuk umum prisma, dengan basisnya ke kanan dan puncaknya ke kiri,
pernyataan ini dapat dilihat pada gambar dibawah ini:
Gambar 1. Gambar hati (Medscape, 2013).
Hepar menerima dua macam darah yaitu darah yang kaya dengan
oksigen melalui arteria hepatika dan darah yang mengandung lebih banyak karbon
dioksida melalui vena porta. Salah satu fungsi utama hepar sebagai alat
pencernaan adalah menyekresi empedu. Empedu adalah cairan yang basa,
mengandung natrium bikarbonat, garam-garam empedu, pigmen empedu,
kolesterol, dan bilirubin. Hepar melaksanakan fungsi yang vital, sehingga manusia
tidak dapat hidup tanpa hepar. Hepar mempunyai peranan penting dalam
metabolisme karbohidrat, protein, dan lemak, yang dibawa ke hepar melalui vena
porta setelah absorpsi oleh vili usus halus (Baradero et al., 2008).
Hepar mendapat darah dari arteriae hepaticae 30% dan dari vena porta
hepatis 70%. Arteriae hepatica kanan dan kiri membawa darah yang kaya akan
oksigen. Sebaliknya darah dari vena porta hepatis miskin akan oksigen tetapi kaya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
akan hasil absorbsi makanan dari saluran pencernaan makanan. Darah vena dari
hepar dialirkan ke vena hepatica yang selanjutnya masuk ke dalam vena cava
inferior (Widjaja, 2008).
C. Kerusakan Hati
Kerusakan hati dapat dibagi dalam beberapa jenis sebagai akibat dari
efek toksik yang disebabkan oleh toksisitas, antara lain adalah :
1. Sirosis hati
Setelah terjadi peradangan dan bengkak, hati mencoba memperbaiki
dengan membentuk bekas luka atau parut kecit. Parut ini disebut “fibrosis” yang
membuat hati lebih sulit melakukan fungsinya. Sewaktu kerusakkan berjalan,
semakin banyak parut terbentuk dan mulai menyatu, dalam tahap selanjutnya
disebut “sirosis”. Pada sirosis, area hati yang rusak dapat menjadi sikatriks. Darah
tidak padat mengalir dengan baik pada jaringan hati yang rusak dan hati mulai
menciut, serta menjadi keras. Sirosis hati dapat terjadi karena virus Hepatitis B
dan C yang berkelanjutan, alkohol, perlemakan hati atau penyakit lain yang
menyebabkan sumbatan saluran empedu. Sirosis tidak dapat disembuhkan,
pengobatan dilakukan untuk mengobati komplikasi yang terjadi seperti muntah
dan keluar darah pada feses. Pemeriksaan yang dilakukan untuk deteksi adanya
sirosis hati adalah pemeriksaan enzim SGOT-SGPT, waktu protombin dan protein
(Albumin-Globulin) Elektroforesis (rasio Albumin-Globulin terbalik).
2. Perlemakan hati
Perlemakan hati terjadi bila penimbunan lemak melebihi 5% dari berat
hati atau mengenai lebih dari sepuluh jaringan sel hati. Perlemakan hati ini sering
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati. Kelainan ini dapat
timbul karena mengkonsumsi alkohol berlebih, disebut Alcoholic Steatohepatitis
(ASH), maupun bukan karena alkohol, disebut Non Alcoholic Steatohepatitis
(NASH).
3. Kolestasis
Kolestasis merupakan keadaan akibat kegagalan produksi dan/atau
pengeluaran empedu. Lamanya menderita kolestasis dapat menyebabkan gagalnya
penyerapan lemak dan vitamin A, D, E, K oleh usus, juga adanya penumpukan
asam empedu, bilirubin dan kelosterol di hati (Direktorat Bina Farmasi Komunitas
dan Klinik, DITJEN Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan, 2007).
D. Karbon Tetraklorida
Karbon tetraklorida merupakan molekul sederhana yang biasanya
digunakan dalam berbagai spesies, menyebabkan nekrosis dan perlemakan pada
hepar. Hati merupakan target utama dari toksisitas karbon tetraklorida yang
bergantung pada aktivitas metabolisme dari CYP2E1. Hati mengandung
konsentrasi sitokrom P-450, terutama di daerah centrilobular. Destruksi sitokrom
P-450 terjadi di daerah centrilobular dan mid-zonal di hepar (Timbrell, 2009).
Karbon tetraklorida mengakibatkan kerusakan pada semua organ, khususnya pada
ginjal (edema dan degenerasi lemak yang nyata pada tubuli) dan hepar (nekrosis
sentrilobular dan degenerasi lemak). Manisfestasinya adalah berupa oliguria,
ekterus, dan koma. Perbaikan fungsi yang menyeluruh pada hepar dan ginjal
masih dimungkinkan, tetapi secara perlahan (lambat) ( Staf Pengajar Departemen
Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya, 2008).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
Karbon tetraklorida merupakan senyawa yang lazim digunakan dalam
penelitian sebagai penginduksi kerusakan hati sehingga sering digunakan dalam
pengujian aktivitas hepatoprotektor suatu zat. Karbon tetraklorida (CCL4) akan
diubah oleh enzim Cytochorm P 450 yang ada di dalam hati menjadi CCL4 suatu
radikal bebas yang menyebabkan autolisis asam lemak yang terdapat pada
fosfolipid membran sel sehingga terjadi peningkatan permeabilitas membran sel
dan kerusakan membran sel. Tampak sel radang kronik. Adanya perdarahan
dimungkinkan radikal bebas merusak endotel pembuluh darah pada hati
(Chodidjah, Eni, dan Utari, 2007).
Nugraha, Ninisita, dan Sri (2008) dalam penelitian pemeriksaan
histopatologi bahwa induksi CCl4 mengakibatkan degenarasi sel dan nekrosis,
ditandai dengan perubahan bentuk hepatosit dari simetris menjadi lebih besar dan
tidak simetris. Hepatosit normal nampak lengkap dengan inti dan bentuk yang
simetris. Hepatosit dengan degenerasi sel dan nekrosis nampak adanya perubahan
bentuk dan keberadan inti sel. Induksi CCl4 menimbulkan radikal bebas yang
memicu terjadinya fibrosis hati. Dalam penelitian yang dilakukan, ketika ada
perlakuan dengan CCl4, hati menunjukkan perubahan drastis, perubahan lemak
yang luas, hepatosit membesar, compressed sinusoids, degenerasi lemak, nekrosis
dan infiltrasi oleh sel-sel inflamasi (Arhoghro, Ekpo, dan Ibeh, 2009).
Buku McPhee dan William (2006) memperkirakan mekanisme penyakit
hati akibat karbon tetraklorida memiliki efek radikal bebas yang menyebabkan
peroksidasi lipid, selain itu juga terjadi perubahan utama morfologi hati yang
ditimbulkan adalah toksik (nekrosis). Karbon tetraklorida dengan adanya enzim
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
sitokrom P-450 mengalami reduksi membentuk radikal bebas trichloromethyl
(●CCl3) kemudian diubah menjadi radikal triklorometilperoksi (CCl3O2●) yang
memiliki sifat lebih reaktif (Gambar 2). Paparan dari karbon tetraklorida dapat
meyebabkan sirosis hati, tumor hati, dan juga dapat meyebabkan kerusakan ginjal
(Timbrell, 2009).
Gambar 2 . Mekanisme toksisitas karbon tetraklorida (Timbrell, 2009).
E. Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST)
Alanin aminotransferase (ALT) dan aspartat aminotransferase (AST)
merupakan serum yang sering digunakan untuk melihat kerusakan sel hati
(Dipiro, Robert, Gary, Gry, Barbara, dan Michael, 2008). AST dan ALT serum
sering disebut uji fungsi hati, merupakan pengukuran kadar enzim-enzim yang
normalnya terletak di dalam hapatosit. Keberadaan keduanya dalam serum adalah
tanda nekrosis sel hati dan bukan merupakan indikasi sejati fungsi hati (McPhee
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
dkk., 2006). Peningkatan aktivitas ALT dalam serum merupakan indikator adanya
kerusakan yang terjadi dalam sel hati, terutama kerusakan yang bersifat akut (Sari,
Azizahwati, dan Retno, 2008).
Penelitian yang dilakukan oleh Elya, et al., (2010) mengukur aktivitas
enzim aminotransferase (AST dan ALT) sebagai parameter untuk melihat apakah
pemberian ekstrak etanol daun gandarusa pada mencit menimbulkan efek toksik
pada hati mencit. Alasannya adalah peningkatan kadar AST dan ALT dalam darah
dapat terjadi apabila ada pelepasan enzim secara intraseluler ke dalam darah yang
disebabkan oleh nekrosis sel-sel hati atau adanya kerusakan hati secara akut,
misalnya nekrosis hepatoselular atau infark miokard akut.
F. Landasan Teori
Hepar merupakan kelenjar paling besar dari tubuh. Tiga fungsi utama
hepar adalah (1) produksi dan sekresi empedu kedalam saluran cerna, (2) berperan
pada metabolisme lemak, karbohidrat, dan protein, dan (3) sebagai filter dari
darah terhadap kuman maupun zat-zat toksik (Widjaja, 2008). Fungsi normal hati
antara lain metabolisme energi dan interkonversi substrat, membentuk protein,
melarutkan, mengangkut dan menyimpan beragam zat yang tanpa peran hati akan
sulit diperoleh atau diserap dan dikeluarkan oleh jaringan (McPhee dkk., 2006).
Karbon tetraklorida merupakan senyawa yang lazim digunakan dalam
penelitian sebagai penginduksi kerusakan hati sehingga sering digunakan dalam
pengujian aktivitas hepatoprotektor suatu zat. Karbon tetraklorida (CCL4) akan
diubah oleh enzim Sitokrom P 450 yang ada di dalam hati menjadi CCL4 suatu
radikal bebas yang menyebabkan autolisis asam lemak yang terdapat pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
fosfolipid membran sel sehingga terjadi peningkatan permeabilitas membran sel
dan kerusakan membran sel. Tampak sel radang kronik. Adanya perdarahan
dimungkinkan radikal bebas merusak endotel pembuluh darah pada hati
(Chodidjah et al., 2007).
Penelitian Kumala dkk. (2013) menyebutkan hasil skrining fitokimia
daun P.americana memiliki kandungan flavonoid, saponin dan coumarin.
Malanggi dkk. (2012) menyebutkan bahwa di dalam biji alpukat memiliki persen
aktivitas antioksidan yang tinggi (93,045%) sehingga dapat dipertimbangkan
sebagai salah satu sumber antioksidan alami. Berdasarkan penelitian Carpena dkk.
(2011), bahwa biji P. americana mengandung senyawa fenolik dari hasil isolasi
dengan pelarut organik yang bersifat polar. Penelitian Nopitasari (2013) menduga
kandungan dalam biji buah P.americana yaitu senyawa flavonoid dan fenol yang
dapat tersari oleh pelarut yang bersifat polar yaitu etanol mampu melindungi sel
hati yang ditunjukkan dengan penurunan aktivitas ALT dan AST. Pernyataan
Nopitasari didukung dengan perolehan persen hepatoprotektif ekstrak etanol biji
buah P. americana dengan dosis 0,35; 0,70 dan 1,40 g/kgBB berturu-turut sebesar
76,8; 76,5 dan 72,4 %. Antioksidan biji buah P.americana berfungsi menghambat
radikal bebas dengan menginisiasi rantai reaksi oksidasi atau propagasi pada
rantai reaksi oksidasi, sehingga kerusakan oksidatif dapat berkurang. Pemberian
ekstrak metanol-air biji buah P.americana pada jam ke-1, 4, dan 6 memberikan
efek hepatoprotektif yang berbeda signifikan antar kelompok dengan persen
hepatoprotektif secara berturut-turut sebesar 67,7; 92,5 dan 101% (Sasadara,
2013). Kulit alpukat terkandung beberapa senyawa kimia (flavonoid) yang diduga
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
dapat bekerja sebagai bahan aktif tabir surya (Mokodompit et al., 2013). Vinha
dkk. (2013) menyebutkan bahwa di dalam kulit buah alpukat mengandung
senyawa flavonoid sebesar 44,3±3,1 mg/100g, sedangkan dalam penelitian
Arukwe et al., 2012 menyebutkan bahwa dalam biji buah P. americana
mengandung flavonoid 1,90±0,07 mg/100g. Menurut Wijayanti, Syarifuddin, dan
Soesanto, (2003) bahwa flavonoid rutin 100 mg dalam 0,5 mL aquades mampu
menjaga konsentrasi protein mikrosomal hati atau mimiliki daya antioksidan
dalam melindungi molekul protein dari radikal bebas CCl4.
Penelitian Redha, (2010) menyatakan bahwa flavonoid sebagai salah satu
kelompok senyawa fenolik yang banyak terdapat pada jaringan tanaman dapat
berperan sebagai antioksidan. Aktivitas antioksidan flavonoid bersumber pada
kemampuan mendonasikan atom hidrogennya atau melalui kemampuan
mengkelat logam. Penelitian Carpena dkk . (2011) berpendapat bahwa dalam biji
P. americana dapat diperoleh senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dari hasil
isolasi dengan pelarut organik bersifat polar. Penelitian Andriani, (2014)
menyebutkan bahwa hasil isolasi yang diperoleh menggunakan pelarut metanol
dengan nilai Rf 0,286 diduga merupakan senyawa flavonoid. Menurut Purwanti
(cit., Nopitasari, 2013) etanol dan metanol merupakan pelarut yang termasuk
golongan alkohol yang pada umumnya bersifat polar. Namun kedua pelarut
tersebut memiliki tingkat kepolaran yang berbeda, dimana metanol memiliki
tingkat kepolaran yang lebih polar bila dibandingkan dengan pelarut etanol karena
memiliki jumlah atom C yang lebih sedikit.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
G. Hipotesis
Pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill. jangka pendek
memiliki efek hepatotoprotektif pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon
tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan
penelitian acak lengkap pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel utama
a. Variabel bebas.
b.
Variabel bebas yang dipakai dalam penelitian ini adalah
variasi dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill..
Variabel tergantung.
2. Variabel pengacau
Variabel tergantung yang dipakai dalam penelitian ini
adalah efek hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill.
yang dilihat dari aktivitas ALT - AST tikus jantan galur Wistar.
a.
Kondisi hewan uji, yaitu tikus galur Wistar berjenis kelamin jantan, umur
2-3 bulan dan mempunyai berat badan 150-250 g, frekuensi pemberian
ekstrak etanol kulit buah P. americana selama 6 jam dan pemberiannya
secara per oral, cara pemberian hepatotoksin secara intraperitonial, bahan
uji yang digunakan berupa kulit buah P. americana.
Variabel pengacau terkendali.
b.
Kondisi patologis dari hewan uji.
Variabel pengacau tak terkendali
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
3. Definisi operasional
a. Kulit buah P. americana.
b.
Kulit buah P. americana diambil dari buah P.
americana Mill. yang telah matang, memiliki warna kulit yang hijau tua,
kulit buah tidak busuk dan masih segar, diperoleh dari satu depot Es Teler
yaitu Es Teler 77 dan diambil selama periode juni-juli 2014.
Ekstrak etanol kulit buah P. american Mill..
c.
Ektrak etanol kulit buah P.
americana merupakan ekstrak kental dari serbuk kering kulit buah P.
americana seberat 40,0 g yang dilarutkan dalam 200 mL pelarut etanol
70% secara maserasi selama 5x24 jam, hasil maserasi kemudian disaring
menggunakan corong Buchner yang dilapisi kertas saring, sehingga
diperoleh filtrat. Serbuk sisa perendaman diremaserasi kembali dengan
pelarut etanol 70% selama 2 hari dengan sesekali penggojogan. Setelah
dilakukan penggojogan disaring, dievaporasi, diuapkan di atas waterbath
pada suhu 800C hingga bobot tetap.
Efek hepatoprotektif.
d.
Kemampuan ekstrak etanol kulit buah P. americana
terhadap penurunan ALT-AST tikus jantan galur Wistar yang terinduksi
karbon tetraklorida yang sebelumnya telah diberikan ekstrak etanol kulit
buah P. americana dalam jangka pendek
Pemberian jangka pendek
e.
. Pemberian ekstrak etanol kulit buah P.
americana kepada hewan uji dengan waktu 6 jam sebelum pemberian
karbon tetraklorida.
Dosis efektif. Pemilihan dosis terkecil yang mampu memberikan
penurunan aktivitas serum ALT dan AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan adalah tikus jantan galur Wistar berumur 2-3
bulan dengan berat badan 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium
Imunologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
b. Bahan uji yang digunakan adalah serbuk kering kulit buah P. americana
yang diperoleh dari sebuah depot Es Teler 77 di Yogyakarta bulan Juni-
Juli 2014.
2. Bahan kimia
a. Karbon tetraklorida yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
b. Etanol (pelarut ekstrak) diperoleh dari General Labora Yogyakarta
c. Pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak etanol kulit buah P.
americana adalah larutan 1% CMC-Na yang diperoleh dari Laboratorium
Biofarmasetika Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
d. Kontrol negatif yang digunakan adalah olive oil merk Bertoli yang dibeli
dari Superindo Yogyakarta.
e. Pelarut ekstrak etanol kulit buah P. americana yang digunakan adalah
CMC-Na dalam bentuk serbuk yang diperoleh dari Laboratorium
Biofarmasetika Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
f. Reagen ALT
Reagen serum yang digunakan adalah reagen ALT Diasys. Komposisi
dan Konsentrasi dari reagen ALT adalah sebagai berikut :
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
Tabel I. Komposisi dan Konsentrasi reagen ALT
Komposisi pH Konsentrasi R1 : TRIS 7.15 140 mmol/L L-Alanine 700 mmol/L LDH (Lactate dehydrogenase) ≥ 2300 U/L R2 : 2-Oxoglutarate 85 mmol/L NADH 1 mmol/L Pyridoxal-5phosphate FS : Good’s buffer Pyridoxal-5- phosphate
9,6
100 mmol/L 13 mmol/L
g. Reagen AST
Reagen serum yang digunakan adalah reagen AST Diasys. Komposisi
dan Konsentrasi dari reagen AST adalah sebagai berikut :
Tabel II. Komposisi dan Konsentrasi reagen AST
Komposisi pH Konsentrasi R1 : TRIS 7.15 110 mmol/L L-Aspartate 320 mmol/L MDH (malate dehydrogenase) ≥ 800 U/L LDH (lactate dehydrogenase) ≥ 1200 mmol/L R2 : 2-Oxoglutarate 65 mmol/L NADH 1 mmol/L Pyridoxal-5phosphate FS : Good’s buffer Pyridoxal-5- phosphate
9,6
100 mmol/L 13 mmol/L
D. Alat Penelitian
1. Alat ektraksi
Alat-alat gelas yang meliputi gelas ukur, labu ukur, cawan porselen,
Erlenmeyer, Bekker glass, corong Buchner, batang pengaduk, Mesin
penyerbuk, pipet tetes, ayakan No. 40 Electric Sieve Shaker, timbangan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
analitik Mettler, moisture balance, orbital shaker , rotary vacuum evaporator,
oven, dan waterbath.
2. Alat uji hepatoprotektif
Alat-alat gelas yang meliputi Bekker glass, tabung reaksi, batang
pengaduk, gelas ukur, pipet tetes. Timbangan elektrik, vortex Genie,
sentrifuge Centurion, spuit per oral, spuit inta vena, syringe 3 cc Terumo®,
pipa kapiler, dan tabung Eppendorf.
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi buah P. americana
Determinasi dilakukan dengan mencocokkan buah P. americana yang
diperoleh dari depot Es Teler 77 di Yogyakarta dengan buah P. americana
berdasarkan acuan determinasi tanaman P. americana (Agrilink, 2001).
2. Pengumpulan bahan uji
Bahan uji yang digunakan adalah kulit buah P. americana. Pemilihan
kulit buah P. americana yang digunakan adalah buah P. americana yang
sudah matang, kulit buah yang masih segar, warna kulit hijau tua dan kulit
buah tidak membusuk. Kulit buah P. americana diperoleh dari depot Es Teler
77 di Yogyakarta periode Juni –Juli 2014.
3. Pembuatan serbuk kulit buah P. americana
Kulit buah P.americana dicuci bersih di bawah air mengalir. Setelah
bersih kulit dipotong kecil-kecil dan diangin-anginkan hingga kulit tidak
tampak basah kemudian dilakukan pengeringan menggunakan oven pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
suhu 50˚C selama 24 jam. Setelah kering kulit dibuat serbuk dan diayak
dengan ayakan nomor 40 karena jika serbuk terlalu halus akan mengendap
pada saat maserasi sehingga mempengaruhi proses ekstraksi. Pernyataan
tersebut berdasarkan teori bahwa pada saat melakukan ekstrak suatu
simplisia, tidak jarang terjadi bagian (potongan) yang sangat halus dari
simplisia melewati penyaring sehingga dapat membentuk endapan (Agoes,
2009)
4. Penetapan kadar air dalam serbuk kering kulit buah P. americana
Penetapan kadar air serbuk kulit buah P. americana bertujuan untuk
mengetahui kadar air dalam serbuk dan untuk memenuhi persyaratan serbuk
yang baik, yaitu kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan
Makanan, 1995). Penetapan kadar air serbuk kulit buah P. americana
dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas
Gadjah Mada Yogyakarta menggunakan metode gravimetri.
5. Pembuatan sediaan etanol kulit buah P. americana
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi. Sebanyak 40 g serbuk kulit
buah P. americana direndam dalam 200 ml pelarut etanol 70% pada suhu
kamar selama 5 x 24 jam. Setelah dilakukan perendaman, hasil maserasi
kemudian disaring menggunakan corong Buchner yang dilapisi kertas saring
sehingga diperoleh filtrat. Serbuk sisa perendaman dimaserasi kembali
dengan 200 mL etanol 70 % selama 2 x 24 jam. Filtrat hasil saringan
dipindahan ke labu alas bulat untuk dievaporasi untuk menguapkan cairan
penyari pada proses maserasi. Hasil evaporasi dituangkan dalam cawan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
porselen yang telah ditimbang sebelumnya karena hasil ekstrak merupakan
ekstrak kental yang memiliki sifat lengket. Cawan porselen yang berisi
larutan hasil evaporasi diuapkan di atas waterbath dengan suhu 800C untuk
mendapatkan ekstrak etanol kulit buah P. amerciana dengan bobot
pengeringan ekstrak yang tetap, kemudian dilakukan perhitungan rata-rata
rendemen dari replikasi ekstrak etanol kulit buah P. americana kental yang
telah dibuat. Persen rendemen ekstrak kental kulit buah P. americana
diperoleh berdasarkan perhitungan :
% Rendemen = total ekstrak kulit buah 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 Mill .total serbuk kulit buah 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 Mill .
X 100%
6. Pembuatan CMC-Na 1%
Ditimbang sebanyak 1,0 gram CMC-Na kemudian dilarutkan
menggunakan aquadest 50 mL, didiamkan selama 24 jam hingga CMC-Na
mengembang setelah itu di add dengan aquadest hingga 100 mL pada labu
ukur 100 mL.
7. Penetapan konsentrasi ekstrak
Konsentrasi yang dapat digunakan yaitu konsentrasi pekat yang dapat
dibuat dimana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dimasukkan serta
dikeluarkan dari spuit oral. Cara pembuatannya dengan melarutkan Sebanyak
3,5 gram ekstrak dalam labu ukur 50 mL dengan pelarut yang sesuai yaitu
CMC-Na 1% sehingga konsentrasi ekstrak dapat ditetapkan sebesar 7% b/v
atau 0,07 gram/mL atau 70 mg/mL. Penetapan konsentrasi ekstrak kulit buah
P.americana ini mengacu pada penelitian Sasadara (2013).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
8. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit buah P. amerciana
Penetapan peringkat dosis didasarkan pada perhitungan dengan bobot
tikus terbesar 250 mg, konsentrasi ektrak kulit buah P. americana yang dapat
dimasukkan dan dikeluarkan melalui spuit oral yaitu 7% atau 70 mg/mL,
serta volume maksimal pemberian oral yaitu 5 mL, maka dosis tertinggi dapat
ditentukan sebagai berikut:
BB x D = C x V
0,250 kg x D = 70 mg/mL x 5 mL D= 1400 mg/kg BB
Dosis tengah dan dosis rendah ditentukan dengan menurunkan dua
kelipatan dari dosis tertinggi, sehingga diperoleh dosis 700 dan 350 mg/Kg
BB. Dosis yang digunakan 350, 700, dan 1400 mg/kg BB. Penetapan dosis
ekstrak etanol kulit buah P.americana ini mengacu pada penelitian Nopitasari
(2013).
9. Pembuatan larutan karbon tetraklorida dalam olive oil
Larutan karbon tetraklorida dalam olive oil dibuat dengan cara
mengambil volume karbon tetraklorida secara seksama, kemudian dilarutkan
dengan olive oil dengan perbandingan 1 : 1.
10. Uji pendahuluan
a.
Pemilihan dosis karbon tetraklorida dilakukan untuk mengetahui
dosis karbon tetraklorida yang mampu menyebabkan kerusakan pada
organ hati tikus dengan melihat peningkatan aktivitas serum ALT dan
AST paling tinggi tetapi tidak menimbulkan kematian. Berdasarkan
Penetapan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
penelitian Wijaya (2013) dosis 2 mL/KgBB karbon tetraklorida secara
intraperitoneal mampu memberikan efek hepatotoksik.
b.
Aktivitas peningkatan ALT dan AST pada tikus teriduksi karbon
tetraklorida dengan dosis 2 mL/KgBB secara intraperitoneal diukur pada
jam ke-24, 48 dan72 setelah pemejanan. Hasil yang diperoleh dilihat
kenaikan yang paling tinggi dari kedua serum tersebut. Waktu
peningkatan serum ALT dan AST yang paling tinggi akan dijadikan
sebagai waktu pencuplikan darah dalam penelitian antihepatotoksik.
Penetapan waktu cuplikan darah
c.
Pemberian ekstrak metanol biji P. americana pada rentang waktu 6
jam sebelum induksi karbon tetraklorida merupakan waktu yang paling
efektif diberikan dengan nilai persen hepatoprotektif sebesar 101 %
dengan dosis pemberian ekstrak metanol biji P. americana 350 mg/kgBB
(Sasadara, 2013).
Penetapan waktu pemberian ekstrak kulit buah P. americana
11. Pengelompokkan hewan uji
Tiga puluh ekor tikus dibagi ke dalam enam kelompok perlakuan secara
acak dengan masing-masing sebanyak 5 ekor tikus.
a. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) larutan campuran karbon tetraklorida
: olive oil (1:1) dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal.
b. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dosis 2 mL/kgBB secara
intraperitoneal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
c. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi ekstrak etanol kulit buah P.
americana dosis 1,4 g/kg BB secara peroral.
d. Kelompok IV (dosis rendah) diberi ekstrak etanol kulit buah P.
americana dengan dosis 0,35 g/kg BB secara peroral.
e. Kelompok V (dosis tengah) diberi ekstrak etanol kulit buah P. americana
dengan dosis 0,70 g/kg BB secara peroral.
f. Kelompok VI (dosis tinggi) diberi ekstrak etanol kulit buah P. americana
dengan dosis 1,4 g/kg BB secara peroral.
Enam jam setelah pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana,
maka kelompok IV-VI dipejani dengan karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
secara intraperitoneal, lalu setelah 24 jam diambil darahnya melalui sinus
orbitalis mata, kemudian dilakukan pengujian aktivitas ALT-AST.
12. Pembuatan serum
Pengambilan darah dilakukan pada bagian sinus orbitalis mata tikus lalu
ditampung dalam tabung Eppendorf. Darah didiamkan selama ± 15 menit,
kemudian disentrifugasi selama 15 menit dengan kecepatan 8000 rpm dan
bagian supernatannya diambil. Kemudian dilakukan resentrifugasi dengan
kecepatan 8000 rpm selama 10 menit.
13. Pengukuran aktivitas ALT-AST pada serum
Aktivitas ALT dan AST dinyatakan dalam U/L. aktivitas enzim diukur
pada panjang gelombang 340 nm, pada suhu 370C dengan faktor koreksi
1745. Pengukuran aktivitas ALT dan AST ini dilakukan di Laboratorium
Parahita Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
F. Tata Cara Analisis Hasil
Data aktivitas ALT-AST dianalisis dengan Kolmogorov-Smirnov untuk
mengetahui normalitas data pada masing-masing kelompok perlakuan. Nilai
normal suatu data ditunjukkan dengan nilai p>0,05. Apabila hasil analisis statistik
Kolmogorov-Smirnov aktivitas ALT-AST menunjukkan distribusi data normal,
dilanjutkan dengan analisis One Way Anova dengan tingkat kepercayaan 95%.
Analisis ini digunakan untuk melihat homogenitas data. Apabila hasil tersebut
menunjukkan nilai signifikansi (p>0,05), berarti data tersebut homogen. Tahap
selanjutnya dengan uji Scheffe untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan antar
kelompok, jika diperoleh distribusi data yang tidak normal maka dilakukan
analisis data menggunakan Kruskal-Wallis untuk melihat homogenitasnya, dan
dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk melihat kebermaknaan perbedaan
antar kelompok.
Menurut penelitian Wijaya (2014) perhitungan persen efek
hepatoprotektif terhadap hepatotoksin parasetamol diperoleh dengan rumus
sebagai berikut :
[1 − (𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎 −𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑘𝑘𝑝𝑝 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑛𝑛𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑛𝑛 )
𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑘𝑘𝑝𝑝 𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑘𝑘𝑘𝑘𝑎𝑎 𝑝𝑝𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑎𝑎𝑡𝑡𝑎𝑎 −𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑘𝑘𝑝𝑝 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑛𝑛𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑛𝑛] x 100%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini memiliki tujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian dan
besar dosis efektif hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah P. americana jangka
pendek pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Penelitian
ini merupakan pengembangan dari penelitian sebelumnya yang sudah menguji
mengenai efek hepatoprotektif ekstrak etanol biji P. americana jangka panjang
terhadap tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida (Nopitasari,
2013). Pengukuran efek hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah P. americana
dengan melihat hasil aktivitas serum ALT dan AST. Efek hepatoprotektif
ditunjukkan berdasarkan penurunan aktivitas dari serum ALT dan AST setelah
pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana pada tikus jantan galur Wistar
yang terinduksi karbon tetraklorida. Aktivitas serum ALT dan AST yang diukur
dalam penelitian ini karena berdasarkan penelitian-penelitian terdahulu pada
umumnya kerusakan hati dapat dilihat dengan pengukuran aktivitas serum ALT
dan AST. Menurut Sihombing dan Raflizar (2010), bahwa untuk menilai fungsi
hepar dipilih uji serum transaminase yaitu ALT dan AST yang merupakan
indikator sensitif pada kerusakan sel-sel hepar.
A. Penyiapan Bahan
1. Hasil determinasi tanaman
Penelitian efek hepatoprotektif menggunakan kulit buah P. americana
sebagai bagian tanaman yang digunakan dalam uji aktivitas antihepatotoksik.
Determinasi digunakan untuk memastikan kebenaran bagian tanaman yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
digunakan dalam penelitian. Proses deteminasi dilakukan di Laboratorium
Farmakognosi Fitokimia, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta. Bagian tanaman yang digunakan dalam determinasi ini adalah buah
P. americana yang dicocokkan dengan beberapa jenis P. americana yang terdapat
diacuan determinasi tanaman P. americana (Agrilink, 2001). Pencocokan yang
dilakukan antara lain bentuk, warna kulit, ketebalan kulit, permukaan kulit,
ketebalan daging buah, dan berat buah. Berdasarkan hasil dari determinasi
tersebut bahwa buah P. americana yang diperoleh dari salah satu depot Es Teler
77 di Yogyakarta paling mirip dengan P. americana jenis Endranol.
2. Penetapan kadar air serbuk kering kulit buah P. americana
Tujuan penetapan kadar air dari serbuk kulit P. americana adalah untuk
mengetahui serbuk yang digunakan telah memenuhi persyaratan serbuk yang baik,
yaitu kurang dari 10 % (Direktrat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995),
selain itu digunakan juga sebagai standarisasi serbuk yang digunakan dalam
penelitian. Penetapan kadar air serbuk kulit buah P. americana di lakukan di
LPPT Universitas Gadjah Mada Yogyakarta dengan hasil kadar air sebesar 7,1 %
(terlampir) dengan metode gravimetri. Hasil ini menunjukkan bahwa kadar air
dari serbuk kulit buah P. americana memenuhi syarat serbuk yang baik.
Menurut Azizah dan Nina (2013), bahwa ekstrak sebagai bahan dan
produk kefarmasian yang berasal dari simplisia harus memenuhi persyaratan yang
telah ditetapkan untuk dapat menjadi obat herbal terstandar atau obat fitofarmaka.
Salah satu parameter mutu ekstrak secara kimia adalah kandungan senyawa aktif
simplisia tersebut. Selain itu, parameter non spesifik juga diperlukan untuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
mengetahui mutu ekstrak. Contoh parameter non spesifik yaitu penetapan kadar
air, kadar abu, dan kadar abu tidak larut asam. Penelitian ini tidak melakukan
penetapan kadar air ekstrak sebab hasil ekstrak yang didapatkan dalam penelitian
ini tidak dijadikan sebagai obat herbal terstandar atau obat fitofarmaka, sehingga
peneliti tidak melakukan uji mutu ekstrak yang digunakan. Selain itu, penelitian
ini hanya melihat apakah dugaan flavonoid yang terkandung dalam ekstrak kulit
buah P.americana mampu memberikan aktifitas antioksidan yang ditunjukkan
dengan penurunan aktivitas ALT-AST, sehingga peneliti menganggap bahwa
penetapan kadar air ekstrak etanol kulit buah P.americana tidak perlu dilakukan.
penelitian ini merupakan penelitian payung, untuk menghemat biaya maka hanya
dilakukan penetapan kadar air serbuk yang mewakili pemenuhan persyaratan
serbuk yang baik, karena dalam penelitian payung yang dilakukan, semua
penelitian menggunakan serbuk kulit buah P.americana. Pembeda penelitian
payung ini salah satunya adalah bentuk sediaan.
Penelitian lebih lanjut dapat dilakukan penetapan kandungan flavonoid
ekstrak etanol kulit buah P.americana. Penetapan kandungan flavonoid bertujuan
untuk mengetahui adanya kandungan flavonoid dan penentuan besar kadar
flavonoid dalam ekstrak. Penetapan kandungan flavonoid dapat digunakan
sebagai dasar bahwa benar dalam ekstrak yang digunakan dalam penelitian benar
memiliki senyawa flavonoid yang diduga sebagai antioksidan.
3. Pembuatan serbuk kulit buah P. americana
Pembuatan serbuk kulit buah P. americana diawali dengan pengumpulan
kulit buah P. americana yang diambil dari salah satu Depot Es Teler 77 di
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
Yogyakarta. Proses selanjutnya adalah pencucian dan pensortiran kulit P.
americana yang sesuai dengan langkah-langkah pembuatan simplisia. Tujuan dari
pencucian adalah supaya kulit P. americana bersih dari daging buah serta terbebas
dari kotoran dan debu yang menenpel. Penyortiran bertujuan untuk mendapatkan
kulit yang sesuai dengan ketentuan kulit yang bagus yaitu kulit yang masih segar
dan tidak busuk. Kulit buah P. americana yang telah terkumpul kemudian
dipotong kecil dan diangin-anginkan terlebih dahulu. Kulit buah P. americana
kemudian dikeringkan dalam oven pada suhu suhu 50˚C selama 24 jam. Setelah
kering kulit dibuat serbuk dan diayak dengan ayakan nomor 40. Pemilihan ayakan
nomor 40 karena partikel serbuk kulit buah P. americana yang halus akan
mengendap pada saat maserasi sehingga akan mempengaruhi hasil ekstrak.
Pernyataan tersebut berdasarkan teori bahwa pada saat melakukan ekstrak suatu
simplisia, tidak jarang terjadi bagian (potongan) yang sangat halus dari simplisia
melewati penyaring sehingga dapat membentuk endapan (Agoes, 2009)
4. Pembuatan ekstrak etanol kulit buah P. americana
Pembuatan ekstrak etanol kulit buah P. americana dilakukan dengan
metode maserasi. Metode maserasi yang dilakukan peneliti dengan cara
memasukkan serbuk simplisia sebesar 40 g ke dalam labu erlenmeyer, yang
kemudian dilakukan penambahan cairan penyari 200 mL berupa etanol 70%
kemudian ditutup dan didiamkan selama 5 x 24 jam pada suhu ruang, jangan lupa
dilakukan pengojokan sesekali. Setelah itu remaserasi selama 2 x 24 jam dengan
etanol 70 % jangan lupa dilakukan penggojokan. Filtrat hasil saringan dipindahan
ke labu alas bulat untuk dievaporasi untuk menguapkan cairan penyari pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
proses maserasi. Hasil evaporasi dituangkan dalam cawan porselen yang telah
ditimbang sebelumnya karena hasil ekstrak merupakan ekstrak kental yang
memiliki sifat lengket. Cawan porselen yang berisi larutan hasil evaporasi
diuapkan di atas waterbath dengan suhu 800C untuk mendapatkan ekstrak etanol
kulit buah P. amerciana dengan bobot pengeringan ekstrak yang tetap, kemudian
dilakukan perhitungan rata-rata rendemen dari replikasi ekstrak etanol kulit buah
P. americana kental yang telah dibuat.
Metode maserasi dipilih dalam penelitian ini sebagai penyari simplisia
kulit buah P. americana untuk mengambil zat aktif yang terkandung di dalam
kulit buah P. americana. Alasan peneliti menggunakan metode maserasi adalah
proses pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana. Berdasarkan teori
bahwa prosedur ekstraksi dengan metode maserasi merupakan prosedur yang
sederhana dan merupakan metode yang sesuai untuk skala kecil dan skala industri
(Agoes, 2010).
Kulit buah P. americana diketahui menggandung senyawa golongan
flavonoid (Vinha dkk., 2013). Flavonoid yang merupakan golongan terbesar dari
senyawa golongan fenol bersifat polar sehingga akan banyak terdapat pada
ekstrak etanol (Hardiana, 2012). Pemilihan pelarut didasarkan pada kecocokan
antara zat aktif dengan larutan penyari sehingga zat aktif akan larut dan
bercampur dengan cairan penyari (Sasadara, 2013). Berdasarkan hal tersebut
maka peneliti menggunakan cairan penyari etanol 70%, sebab diketahui bahwa
cairan penyari etanol merupakan pelarut polar yang mampu menyari senyawa
flavonoid, selain itu pada ekstrak etanol biji P. americana diperoleh persen
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
protektif dari efek hepatoprotektif sebesar 76,8; 76,5; dan 72,4% (Nopitasari,
2013). Berdasarkan penelitian Carpena dkk. (2011), bahwa biji P. americana
mengandung senyawa fenolik dari hasil isolasi dengan pelarut organik yang
bersifat polar.
Parameter standarisasi ekstrak etanol kulit buah P. americana dilihat dari
pencapaian bobot tetap dengan tujuan untuk menghitung sisa zat yang diperoleh
dengan bobot tetap setelah dilakukan penguapan di atas waterbath. Ekstrak dalam
cawan porselen di timbang setiap dua jam hingga bobot tetap. Hasil dari proses
penguapan didapatkan hasil ekstrak etanol kulit buah P. americana tidak
mengalami perubahan bobot ekstrak etanol, sehingga peneliti menganggap bahwa
ekstrak yang dihasilkan tidak mengandung pelarut penyari. Total ekstrak etanol
kulit buah P. americana yang diperoleh adalah 44,8 gram dari 8 kali replikasi,
sehingga diperoleh rata-rata ekstrak etanol kulit buah P. americana sebesar 5,6
gram. Persen rendemen ekstrak etanol kulit buah P. americana dalam penelitian
ini sebesar 14 %. Menurut Tensiska, Marsetio, dan Silvia, (2007) bahwa
perhitungan rendemen untuk mengukur efektivitas jenis pelarut untuk
mengekstrak komponen yang terkandung. Hasil rendemen yang didapatkan 14 %
artinya bahwa efektivitas pelarut etanol 70 % mampu mengekstrak kandungan
kulit buah P.americana sebesar 14 %
B. Uji Pendahuluan
1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida
Senyawa yang digunakan dalam penentuan hepatotoksin dalam penelitian
ini adalah karbon tetraklorida. Penentuan dosis karbon tetraklorida bertujuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
untuk mengetahui pada dosis berapa dapat menyebabkan hepatotoksik yang
ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan
galur Wistar. Berdasarkan penelitian Novitasari (2013) dan Avista (2013) bahwa
dosis 2 mL/kgBB karbon tetraklorida mampu memberikan efek hepatotoksik,
maka dalam penelitian ini peneliti memakai dosis hepatotoksik karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB, sehingga diharapkan dapat menjadi pembanding dalam
efek hepatoprotektif yang paling efektif dari ekstrak yang berbeda.
Karbon tetraklorida digunakan sebagai hepatotoksin yang dapat
menyebabkan kerusakan hati. Peningkatan aktivitas serum ALT dan AST akibat
induksi karbon tetraklorida 2 kali dibandingkan dengan kontrol, secara signifikan
mampu meyebabkan kerusakan sel hati (Rajendran, 2009). Karbon tetraklorida 2
mL/kgBB mampu menyebabkan kerusakan hati yang ditunjukkan dengan
peningkatan aktivitas serum ALT 2,99 kali dan serum AST 5,03 kali
dibandingkan dengan kontrol (Febrianti, 2013).
Pada penelitian ini dilakukan orientasi aktivitas serum ALT pada
pemberian dosis karbon tetraklorida 2 mL/kgBB. Hasil yang diperoleh terjadi
peningkatan 3,0 kali pada jam ke-24 dibandingkan dengan aktivitas serum ALT
pada jam ke-0 sebelum diberi perlakuan. Hasil orientasi aktivitas serum ALT
terjadi peningkatan yang signifikan, membuat peneliti menyimpulkan bahwa
dengan induksi 2 mL/kgBB karbon tetraklorida mampu merusak hati tikus atau
memberikan efek hepatotoksik pada tikus jantan galur Wistar. Peneliti hanya
memakai orientasi aktivitas serum ALT sebagai pedoman bahwa dosis 2
mL/kgBB karbon tetraklorida telah menyebabkan kerusakan hati pada tikus
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
karena pemeriksaan yang sering dilakukan untuk menilai kerusakan hati salah
satunya dengan pemeriksaan laboratorium dengan melihat enzim alanin
aminotransferase (ALT). Enzim ALT dalam keadaan normal berada di dalam
jaringan tubuh terutama hati, sementara enzim AST berada pada serum dan
jaringan terutama hati dan jantung (Sutedjo, 2006).
2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji
Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji bertujuan untuk
mengetahui pencapaian waktu maksimal karbon tetraklorida dengan dosis 2
mL/kgBB memberikan efek hepatotoksik, yang dapat diketahui dengan
peningkatan aktivitas serum ALT dan AST tertinggi pada jam tertentu.
Pencuplikan darah dilakukan melalui sinus orbitalis mata dengan selang waktu
tertentu yaitu jam ke 0, 24, dan 48 setelah karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
diberikan pada tikus jantan galur Wistar. Orientasi pencuplikan darah hewan uji
untuk aktivitas serum ALT dapat dilihat pada Tabel III dan Gambar 3.
Tabel III. Purata aktivitas serum ALT ± SE (U/I) tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Keterangan : SE= Standard Error
Selang waktu (jam)
Purata aktivitas serum ALT ± SE (U/I)
0 72,3±4,5 24 217,3±2,1 48 90,3±2,9
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas ALT sel hati tikus, setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24
dan 48 jam
Tampilan Tabel III dan Gambar diagram batang 3 aktivitas serum ALT ±
SE (U/I), diketahui bahwa aktivitas serum ALT pada jam ke-0 sebelum perlakuan,
jam ke-24, dan 48 berturut-turut adalah sebesar 72,3±4,5; 217,3±2,1; dan 90,3±2,9
U/L. Berdasarkan data tersebut, diketahui bahwa aktivitas serum ALT pada
pencuplikan darah jam ke-24 dengan pemberian karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB lebih tinggi dibandingkan dengan pencuplikan darah pada jam ke-0 dan
jam ke-48.
Pada pencuplikan darah jam ke-24 didapatkan peningkatan aktivitas
serum ALT 3,0 kali dari nilai aktivitas ALT jam ke-0, sedangkan pada jam ke-48
aktivitas ALT mengalami penurunan. Berdasarkan data tersebut maka peneliti
menggunakan waktu pencuplikan darah hewan uji pada jam ke-24 karena pada
jam tersebut terjadi peningkatan aktivitas serum ALT tertinggi dan memenuhi
kriteria terjadinya hepatotoksik. Menurut Febrianti (2013) bahwa karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB mampu menyebabkan kerusakan hati yang ditunjukkan
dengan peningkatan ALT 2,99 dibandingkan dengan kontrol.
Hasil uji statistik yang dilakukan bahwa kenaikan aktivitas serum ALT
pada jam ke-24, menunjukkan berbedaan bermakna bila dibandingkan dengan
U/L
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
aktivitas serum ALT pada jam ke-0 dan 48, artinya bahwa pada jam ke-24
aktivitas peningkatan enzim ALT lebih tinggi dibanding pada jam ke-0 dan 48.
Jam ke-0 dibandingkan dengan jam ke-48 berdasarkan uji statistik berbeda tidak
bermakna, artinya bahwa pada jam ke-48 aktivitas serum ALT mengalami
penurunan yang hampir sama dengan keadaan normal, sebab jam ke-0 adalah
keadaan normal tikus karena belum diinduksi karbon tetraklorida.
Tabel IV. Hasil uji statistik aktivitas ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada waktu pencuplikan darah ke-0, ke-24 dan ke-48 jam
Perlakuan Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48 Jam ke-0 BB TB Jam ke-24 BB BB Jam ke-48 TB BB
BB= berbeda bermakna (p<0.05) TB= berbeda tidak bermakna (p>0,05)
Hasil tersebut menjadi pedoman untuk peneliti dalam menentukan waktu
pencuplikan darah hewan uji pada jam ke-24 setelah pemberian karbon
tetraklorida dengan dosis 2 mL/kgBB. Penelitian lain menyebutkan bahwa karbon
tetraklorida merupakan toksikan akut yang dapat merusak fungsi hati dalam waktu
24 jam (Hasti, Husni, dan Amri, 2012).
3. Penetapan lama pemejanan ekstrak etanol kulit buah P. americana
Berdasarkan penelitian Sasadara (2013) perlakuan pemberian ekstrak
metanol biji P. americana pada rentang waktu 6 jam sebelum induksi karbon
tetraklorida merupakan waktu yang paling efektif diberikan dengan nilai %
hepatoprotektif sebesar 101 % dengan dosis pemberian ekstrak metanol biji P.
americana 350 mg/kgBB. Berdasarkan penelitian tersebut peneliti menggunakan
rentang waktu 6 jam dalam efek hepatoprotektif pemberian jangka pendek ekstrak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
etanol kulit buah P. americana terhadap aktivitas serum ALT-AST pada tikus
terinduksi karbon tetraklorida. Melihat adanya kemiripan penelitian yang
dilakukan, diharapkan penelitian ini dapat memperoleh efek hepatoprotektif dari
ekstrak yang berbeda.
4. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana
Penentuan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana bertujuan untuk
menentukan tingkatan dosis dari ekstrak etanol kulit buah P. americana yang
akan digunakan dalam penelitian ini. Berdasarkan penelitian Nopitasari (2013)
menyatakan bahwa hasil orientasi yang dilakukan menggunakan konsentrasi
tertinggi ekstrak etanol biji P. americana sebesar 70 mg/mL, dengan
pertimbangan bahwa pada konsentrasi tertinggi yang digunakan adalah
konsentrasi pekat yang dapat dibuat dan pada konsentrasi ekstrak tersebut dapat
dimasukkan dan dikeluarkan dari spuit oral. Hasil perhitungan dari konsentrasi 70
mg/mL diperoleh dosis maksimal 1,40 g/kgBB, kemudian ditentukan tingkatan
dosis ekstrak etanol biji P. americana, yaitu 0,35; 0,70; dan 1,40 g/kgBB.
Berdasarkan penelitian tersebut peneliti memilih dosis ekstrak etanol kulit buah P.
americana adalah 350; 700; dan 1.400 mg/kgBB, sehingga harapannya dapat
dibandingkan efek hepatoprotektif yang efektif dari ekstrak yang berbeda.
C. Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Kulit Buah P. americana Terhadap Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida
Tujuan penelitian ini adalah membuktikan adanya efek hepatoprotektif
dan dosis efektif ekstrak etanol kulit buah P. americana jangka pendek terhadap
aktivitas serum ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida. Jangka
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
pendek pada penelitian ini dilakukan dalam rentang waktu tertentu, yaitu
pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana pada jam ke-6 sebelum induksi
karbon tetraklorida.
Dosis ekstrak kulit buah P. americana yang digunakan dalam penelitian
ini adalah 350; 700; dan 1.400 mg/kgBB diberikan secara per oral, sedangkan
dosis karbon tetraklorida dengan pelarut olive oil adalah 2 mL/kgBB diberikan
secara intraperitonial. Tahap selanjutnya dilakukan pencuplikan darah hewan uji
pada jam ke-24 setelah pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida. Hasil yang
diperoleh ditampilkan pada tabel V. Pada tabel V juga terlampir % efek
hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah P. americana pada aktivitas ALT dosis
350, 700, dan 1400 mg/kgBB berturut-turut sebesar 83,1; 17,9; dan 73,8 %.
Tabel V. Purata±SE aktivitas serum ALT dan AST, serta % efek hepatoprotektif tikus perlakuan ekstrak etanol kulit buah P.americana terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Kelompok Purata aktivitas
ALT±SE (U/L)
Purata aktivitas
AST±SE (U/L)
Efek hepatoprotektif
ALT (%) I 246,8±10,2 762,2±43,1 - II 81,6±3,0 127,8±7,3 - III 254,3±4,6 152,6±5,8 - IV 109,5±13,0 221,9±34,8 83,1% V 217,1±29,1 788,7±72,2 17,9% VI 124,8±13,2 122,7±9,9 73,8%
Keterangan : I. kelompok kontrol hepatotoksik karbon tetraklorida 2 mL/kgBB II. kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB III. kelompok kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis
1400 mg/kgBB IV. kelompok ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350
mg/kgBB + CCl4 2 mL/kgBB V. kelompok ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700
mg/kgBB + CCl4 2 mL/kgBB VI. kelompok ekstrak etanol kulit buah P .americana dosis 1400
mg/kgBB + CCl4 2 mL/kgBB SE : Standard Error
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus perlakuan
pemberian ekstrak etanol kulit buah P.americana
Keterangan : EEKPA = Ekstrak Etanol Kulit buah P. americana Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus perlakuan
pemberian ekstrak etanol kulit buah P.americana
U/L
U/L
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
Tabel VI. Hasil uji Mann-Whitney aktivitas serum ALT tikus perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Kelompok I II III IV V VI
I - BB TB BB TB BB II BB - BB TB BB BB III TB BB - BB TB BB IV BB TB BB - BB TB V TB BB TB BB - BB VI BB BB BB TB BB -
Tabel VII. Hasil uji Mann-Whitney aktivitas serum AST tikus perlakuan
ekstrak etanol kulit buah P. americana terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Kelompok I II III IV V VI
I - BB BB BB TB BB II BB - BB TB BB TB III BB BB - TB BB TB IV BB BB TB - BB BB V TB BB BB BB - BB VI BB TB TB BB BB -
Keterangan BB = Berbeda bermakna (p<0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)
I. kelompok kontrol hepatotoksik karbon tetraklorida 2 mL/kgBB II. kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB III. kelompok kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 1400
mg/kgBB IV. kelompok ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB V. kelompok ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB VI. kelompok ekstrak etanol kulit buah P .americana dosis 1400 mg/kgBB +
CCl4 2 mL/kgBB
1. Kontrol negatif
Pada penelitian ini digunakan kontrol negatif berupa olive oil dengan
dosis 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Kontrol negatif adalah kontrol pelarut
hepatotoksin karbon tetraklorida, sehingga digunakan dosis yang sama. Tujuan
dilakukan pengujian kontrol negatif adalah untuk melihat pelarut olive oil
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
memiliki efek hepatotoksik atau tidak, dengan melihat aktivitas serum ALT dan
aktivitas serum AST pada jam ke-24 sesuai waktu pencuplikan darah hewan uji.
Penelitian Nopitasari (2013) menyatakan bahwa apabila terjadi kenaikan aktivitas
serum ALT dan AST pada kelompok kontrol hepatoksin maupun kelompok
perlakuan dipastikan bukan karena penggunaan olive oil sebagai pelarut. Kumar,
Sivaraj, Elumalai dan Kumar (2009) melaporkan bahwa pemperian olive oil pada
hewan uji tidak menimbulkan perubahan patologis yang signifikan bila
dibandingkan dengan kelompok normal yang diberikan perlakuan air suling.
Berdasarkan hal tersebut maka peneliti memakai kontrol negatif (olive oil) sebagai
dasar nilai aktivitas serum ALT dan AST normal dalam penelitian ini.
2. Kontrol hepatotoksik (karbon tetraklorida 2 mL/kgBB)
Kontrol hepatotoksik bertujuan untuk mengetahui pengaruh induksi
karbon tetraklorida 2 mL/kgBB terhadap kerusakan sel hati dan digunakan
sebagai patokan dalam menganalisis efek hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah
P. americana yang ditunjukkan dengan aktivitas ALT dan AST.
Berdasarkan hasil yang dilakukan peneliti, aktivitas serum ALT kontrol
hepatotoksik karbon tetraklorida 2 mL/kgBB sebesar 246,8±10,2 U/L sedangkan
kontrol olive oil aktivitas serum ALT sebesar 81,6±3,0 U/L. Bila dibandingkan
hasilnya maka terjadi peningkatan 3,0 kali dari kontrol olive oil. Aktivitas AST
kontrol hepatotoksik karbon tetraklorida 2 mL/kgBB sebesar 762,2±43,1 U/L
sedangkan untuk kontrol olive oil sebesar 127,8±7,3 U/L. Bila dibandingkan maka
terjadi peningkatan 5,9 kali dari kontrol olive oil.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Hasil analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST kontrol
hepatotoksik karbon tetraklorida berbeda bermakna (p<0,05) dengan kontrol olive
oil, artinya bahwa kontrol kanbon tetraklorida memberikan efek hepatotoksik
(merusak hati). Aktivitas serum ALT dibandingkan aktivitas serum AST
menunjukkan kenaikan yang lebih rendah (ALT 3,0 kali < AST 5,9 kali), karena
hasil yang diperoleh pada aktivitas AST tidak spesifik berada di dalam hati,
melaikan dalam berada pada serum dan jaringan terutama hati dan jantung
(Sutedjo, 2006). Kenaikan aktivitas serum ALT dan aktivitas serum AST yang
cukup signifikan tersebut, maka dosis karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
memberikan efek hepatotoksik pada tikus jantan galur Wistar.
3. Kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 1400 mg/kgBB
Pengujian kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana bertujuan
untuk melihat pengaruh pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana
terhadap aktivitas serum ALT dan AST tanpa diberikan induksi karbon
tetraklorida memberikan efek hepatotoksik atau tidak. Penggunaan dosis kontrol
ekstrak etanol kulit buah P. americana sebesar 1400 mg/kgBB karena dosis
tersebut merupakan peringkat dosis tertinggi dalam penelitian ini. Harapannya
dengan pemakaian dosis 1400 mg/kgBB mampu mempresentasikan kelompok
perlakuan peringkat dosis kecil (350 mg/kgBB), sedang (700 mg/kgBB), dan
dosis tertinggi (1400 mg/kgBB).
Hasil statistik aktivitas serum ALT antara kontrol ekstrak etanol kulit
buah P. americana dengan kontrol olive oil adalah berbeda bermakna. Hal yang
sama juga ditunjukkan oleh aktivitas serum AST untuk kontrol ekstrak etanol
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
kulit buah P. americana yang dibandingkan dengan kontrol olive oil. Hal ini
menggambarkan bahwa ekstrak etanol kulit buah P. americana dapat menaikkan
aktivitas serum ALT dan AST pada tikus.
Kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana dibandingkan dengan
kontrol hepatotoksik (karbon tetraklorida) menunjukkan nilai aktivitas serum ALT
berturut-turut 254,3±4,6 dan 246,8±10,2 U/L. Berdasarkan analisis statistik
perbandingan keduanya adalah berbeda tidak bermakna, artinya bahwa kontrol
ekstrak etanol kulit buah P. americana memberikan peningkatan nilai aktivitas
serum ALT dan hasilnya setara dengan aktivitas serum ALT pada kontrol
hepatotoksik karbon tetraklorida. Sementara untuk aktivitas serum AST untuk
perbandingan kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana dengan kontrol
hepatotoksik (karbon tetraklorida) menunjukkan nilai berturut-turut adalah
152,6±5,8 dan 762,2±43,1 U/L memberikan perbedaan bermakna, artinya bahwa
kontrol ekstrak etanol kulit buah P. americana memberikan kenaikan AST namun
kenaikannya tidak setara dengan aktivitas serum AST kontrol hepatotoksik karbon
tetraklorida.
Kesimpulan peneliti adalah bahwa kontrol ekstrak etanol kulit buah P.
americana untuk aktivitas serum ALT memiliki peningkatan nilai aktivitas serum
ALT dan peningkatannya hampir setara dengan nilai aktivitas ALT kontrol karbon
tetraklorida. Sementara untuk aktivitas serum AST memiliki peningkatan aktivitas
serum AST dan peningkatannya tidak setara dengan nilai aktifitas AST pada
kontrol karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
4. Kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350,
700, dan 1400 mg/kgBB pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida
2 mL/kgBB
Parameter yang digunakan untuk melihat efek hepatotoksik dari ekstrak
etanol kulit buah P. americana terhadap tikus jantan yang terinduksi karbon
tetraklorida didasarkan pada ada tidaknya penurunan aktivitas serum ALT dan
AST.
Kelompok IV adalah kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit buah P.
americana dosis 350 mg/kgBB memiliki aktivitas serum ALT sebesar 109,5±13,0
U/L bila dibandingkan dengan aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksik karbon
tetraklorida yang memilki nilai aktivitas sebesar 246,8±10,2 U/L. Secara uji
analisis statistik penurunan aktivitas serum ALT tersebut menunjukkan berbeda
bermakna, yang ditunjukkan dengan nilai signifikansi 0,008 (p<0,05), artinya
bahwa perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350 mg/kgBB
memiliki efek hepatoprotektif (Tabel VI). Aktivitas serum ALT pada kelompok
ini juga dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil yang memiliki aktivitas
serum ALT sebesar 81,6±3,0 U/L, secara statistik menunjukkan berbeda tidak
bermakna dengan nilai signifikansi 0,095 (p>0,05), artinya bahwa ekstrak etanol
kulit buah P. americana dosis 350 mg/kgBB mampu menurunkan aktivitas serum
ALT dan telah setara dengan keadaan normal ( kontrol negatif olive oil) (Tabel
VI). Pada aktivitas serum AST ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350
mg/kgBB memiliki nilai sebesar 221,9±34,8 U/L dibandingkan dengan aktivitas
serum AST kontrol hepatotoksik karbon tetraklorida yang memiliki aktivitas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
sebesar 762,2±43,1 U/L. Secara statistik penurunan aktivitas serum AST tersebut
menunjukkan berbeda bermakna, yang ditunjukkan dengan nilai signifikansi
0,008 (p<0,05), artinya bahwa ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350
mg/kgBB mampu menurunkan nilai aktivitas serum AST dan memiliki efek
hepatoprotektif (Tabel VII). Aktivitas serum AST kelompok ini dibandingkan
pula dengan kontrol negatif olive oil yang memiliki aktivitas serum AST sebesar
127,8±7,3 U/L, secara statistik menunjukkan berbeda tidak bermakna dengan nilai
signifikansi 0,056 (p>0,05), artinya bahwa ekstrak etanol kulit buah P. americana
dosis 350 mg/kgBB mampu menurunkan aktivitas serum AST dan telah setara
dengan keadaan normal ( kontrol negatif olive oil) (Tabel VII). Pengukuran
aktivitas serum ALT dan AST tersebut menunjukkan bahwa pemberian ekstrak
etanol kulit buah P. americana dosis 350 mg/kgBB pada tikus jantan yang
terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB memiliki efek hepatoprotektif
yang dapat dilihat dari penurunan aktivitas serum ALT-AST dan penurunan yang
terjadi sudah setara dengan keadaan normal.
Kelompok V adalah kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit buah P.
americana dosis 700 mg/kgBB memiliki aktivitas serum ALT sebesar 217,1±29,1
U/L bila dibandingkan dengan aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksik karbon
tetraklorida yang memilki nilai aktivitas sebesar 246,8±10,2 U/L. Secara uji
analisis statistik penurunan aktivitas serum ALT tersebut menunjukkan berbeda
tidak bermakna, yang ditunjukkan dengan nilai signifikansi 0,548 (p>0,05),
artinya bahwa perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700
mg/kgBB mempunyai aktivitas serum ALT yang hampir setara dengan kondisi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
kontrol hepatotoksik karbon tetraklorida (Tabel VI). Aktivitas serum ALT pada
kelompok ini juga dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil yang memiliki
aktivitas serum ALT sebesar 81,6±3,0 U/L, secara statistik menunjukkan berbeda
bermakna dengan nilai signifikansi 0,008 (p<0,05), artinya bahwa ekstrak etanol
kulit buah P. americana dosis 700 mg/kgBB menunjukkan penurunan aktivitas
serum ALT yang belum sampai ke keadaan normal ( kontrol negatif olive oil)
(Tabel VI). Pada aktivitas serum AST ekstrak etanol kulit buah P. americana
dosis 700 mg/kgBB memiliki nilai sebesar 788,7±72,2 U/L dibandingkan dengan
aktivitas serum AST kontrol hepatotoksik karbon tetraklorida yang memiliki
aktivitas sebesar 762,2±43,1 U/L. Secara statistik aktivitas serum AST tersebut
menunjukkan berbeda tidak bermakna, yang ditunjukkan dengan nilai signifikansi
0,841 (p>0,05), artinya bahwa ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700
mg/kgBB tidak menurunkan aktivitas serum AST dan nilai aktivitas serum AST
setara dengan keadaan kontrol hepatotoksis karbon tetraklorida. Aktivitas serum
AST kelompok ini dibandingkan pula dengan kontrol negatif olive oil yang
memiliki aktivitas serum AST sebesar 127,8±7,3 U/L, secara statistik
menunjukkan berbeda bermakna dengan nilai signifikansi 0,008 (p<0,05), artinya
bahwa ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700 mg/kgBB tidak mampu
menurunkan aktivitas serum AST, namun menyebabkan peningkatan aktivitas
AST (Tabel VII). Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST tersebut
menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700
mg/kgBB pada tikus jantan yang terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
memiliki efek hepatotoksik yang dapat dilihat dari peningkatan aktivitas serum
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
ALT dan AST. Hasil tersebut merupakan hasil dari penelitian, sehingga
bagaimanapun hasil dari sebuah penelitian menunjukkan hepatotoksisitas atau
hepatoprotektik tidak dipermasalahkan sebabnya. Seharusnya dengan perolehan
hasil pada dosis 2 (700 mg/kgBB) menyebabkan hepatotoksisitas pada aktivitas
ALT dan AST dilakukan penelitian kembali pada dosis tersebut, sehingga bisa
diketahui apakah pada dosis 2 memang bermasalah atau terdapat kesalahan dalam
penelitian yang dimungkinkan mempengaruhi hasil penelitian.
Kelompok VI adalah kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit buah P.
americana dosis 1400 mg/kgBB memiliki aktivitas serum ALT sebesar
124,8±13,2 U/L bila dibandingkan dengan aktivitas serum ALT kontrol
hepatotoksik karbon tetraklorida yang memilki nilai aktivitas sebesar 246,8±10,2
U/L. Secara uji analisis statistik penurunan aktivitas serum ALT tersebut
menunjukkan berbeda bermakna, yang ditunjukkan dengan nilai signifikansi
0,008 (p<0,05), artinya bahwa perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana
mampu menurunkan aktivitas serum ALT (Tabel VI). Aktivitas serum ALT pada
kelompok ini juga dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil yang memiliki
aktivitas ALT sebesar 81,6±3,0 U/L, secara statistik menunjukkan berbeda
bermakna dengan nilai signifikansi 0,008 (p>0,05), artinya bahwa ekstrak etanol
kulit buah P. americana dosis 1400 mg/kgBB mampu menurunkan aktivitas
serum ALT dan penurunannya belum setara dengan keadaan normal (kontrol
negatif olive oil) (Tabel VI). Pada aktivitas serum AST ekstrak etanol kulit buah
P. americana dosis 1400 mg/kgBB memiliki nilai sebesar 122,7±9,9 U/L
dibandingkan dengan aktivitas serum AST kontrol hepatotoksik karbon
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
tetraklorida yang memiliki aktivitas sebesar 762,2±43,1 U/L. Secara statistik
aktivitas serum AST tersebut menunjukkan berbeda bermakna, yang ditunjukkan
dengan nilai signifikansi 0,008 (p<0,05), artinya bahwa ekstrak etanol kulit buah
P. americana dosis 1400 mg/kgBB menurunkan aktivitas serum AST. Aktivitas
serum AST kelompok ini dibandingkan pula dengan kontrol negatif olive oil yang
memiliki aktivitas serum AST sebesar 127,8±7,3 U/L, secara statistik
menunjukkan berbeda tidak bermakna dengan nilai signifikansi 0, 841(p>0,05),
artinya bahwa ekstrak etanol kulit buah P. americana mampu menurunkan
aktivitas serum AST dan penurunan yang terjadi setara dengan keadaan normal
(Tabel VII). Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST tersebut menunjukkan
bahwa pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 1400 mg/kgBB
pada tikus jantan yang terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB memiliki
efek hepatoprotektif yang ditunjukkan dengan penurunan aktivitas serum ALT
dan AST.
Ketiga peringkat dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana aktivitas
serum ALT dibandingkan masing-masing peringkat dosisnya. Dosis 1 (350
mg/kgBB) dibandingkan dengan dosis 2 (700 mg/kgBB), secara statistik
menunjukkan berbeda bermakna yang berarti dosis 350 mg/kgBB ekstrak etanol
kulit buah P. americana memiliki aktivitas penurunan ALT yang cukup efektif
bila dibandingkan dengan aktivitas penerunan ALT pada dosis 700 mg/kgBB.
Dosis 1 (350 mg/kgBB) dibandingkan dengan dosis 3 (1400 mg/kgBB), secara
statistik menunjukkan berbeda tidak bermakna yang berarti bahwa dosis 350
mg/kgBB ekstrak etanol kulit buah P. americana memiliki aktivitas penurunan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
ALT setara dengan aktivitas penerunan ALT pada dosis 1400 mg/kgBB. Dosis 2
(700 mg/kgBB) dibandingkan dengan dosis 3 (1400 mg/kgBB), secara statistik
menunjukkan berbeda bermakna untuk aktivitas serum ALT yang berati bahwa
dosis 2 (700 mg/kgBB) memiliki aktivitas penurunan yang berbeda dengan
aktivitas penurunan ALT pada dosis 1400 mg/kgBB. Penurunan yang paling
efektif dari perbandingan dosis 700 mg/kgBB dengan dosis 1400 mg/kgBB adalah
dosis 1400 mg/kgBB. Berdasarkan rata-rata aktivitas serum ALT dari ketiga
peringkat dosis tersebut, peneliti mengurutkan dosis efektif yang menunjukkan
efek hepatoprotektif adalah dosis 350 mg/kgBB, dosis 1400 mg/kgBB dan dosis
700 mg/kgBB.
Ketiga peringkat dosis untuk aktivitas serum AST juga dibandingkan
masing-masing kelompok dosis. Dosis 1 (350 mg/kgBB) dibandingkan dengan
dosis 2 (700 mg/kgBB), secara statistik menunjukkan berbeda bermakna yang
berarti bahwa dosis 350 mg/kgBB ekstrak etanol kulit buah P. americana
memiliki aktivitas penurunan AST yang cukup efektif bila dibandingkan dengan
aktivitas penerunan AST pada dosis 700 mg/kgBB. Dosis 1 (350 mg/kgBB)
dibandingkan dengan dosis 3 (1400 mg/kgBB), secara statistik menunjukkan
berbeda bermakna yang berarti bahwa dosis 350 mg/kgBB ekstrak etanol kulit
buah P. americana memiliki aktivitas penurunan AST yang berbeda dengan dosis
3 (1400 mg/kgBB). Dosis 2 (700 mg/kgBB) dibandingkan dengan dosis 3 (1400
mg/kgBB), secara statistik menunjukkan berbeda bermakna yang berati bahwa
dosis 2 (700 mg/kgBB) memiliki aktivitas penurunan yang berbeda dengan
aktivitas penurunan AST pada dosis 1400 mg/kgBB. Berdasarkan rata-rata
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
aktivitas serum AST dari ketiga peringkat dosis tersebut, peneliti mengurutkan
dosis efektif yang menunjukkan efek hepatoprotektif adalah dosis 1400 mg/kgBB,
dosis 350 mg/kgBB dan dosis 700 mg/kgBB
Kesimpulan yang diambil oleh peneliti berdasarkan penurunan nilai
aktivitas serum ALT dan AST yang didapatkan dari ketiga peringkat dosis (350,
700, 1400 mg/kgBB) adalah bahwa dosis efektif yang mampu memberikan efek
hepatoprotektif adalah dosis 1 (350 mg/kgBB). Kesimpulan ini didukung dengan
perolehan % hepatoprotektif untuk masing-masing peringkat dosis 350, 700, dan
1400 mg/kgBB diperoleh berturut-turut adalah 83; 18; dan 74 % aktivitas serum
ALT dan 85; 4; 100,8 % aktivitas serum AST. Berdasarkan % hepatoprotektif
yang diperoleh dosis 1 (350 mg/kgBB) memiliki perbandingan % hepatoprotektif
aktivitas serum ALT dan AST yang relevan. Dosis 2 (700 mg/kgBB) memiliki
aktivitas serum ALT dan AST % hepatoprotektif yang kecil atau dapat diartikan
tidak signifikan memiliki efek hepatoprotektif. Dosis 3 (1400 mg/kgBB) memiliki
aktivitas serum ALT dan AST % hepatoprotektif yang berbeda atau perbandingan
% hepatoprotektif antara aktivitas serum ALT dan AST tidak relevan.
Efek hepatoprotektif juga dapat dilihat dengan melakukan uji
histopatologi hati hewan uji. Tujuan dari perlakukuan ini adalah untuk
memperkuat hipotesis dalam penelitian ekstrak etanol kulit buah P. americana
jangka pendek pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
Namun karena keterbatasan peneliti maka uji histopatologi hati hewan uji tidak
dilakukan, untuk menegakkan efek hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah P.
americana peneliti hanya melakukan uji aktivitas serum ALT dan AST. Uji
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
aktivitas ALT dan AST juga sudah dapat mewakili penelitian dalam melihat
kondisi hati.
Karbon tetraklorida yang digunakan sebagai indikator kerusakan hati
dapat diganti dengan parasetamol. Penelitian James, Philip dan Jack (2003)
menggunakan parasetamol sebagai senyawa induksi hepatotoksisitas. Berdasarkan
penelitian tersebut maka peneliti menyarankan parasetamol dapat digunakan
sebagai senyawa induksi untuk hepatotoksisitas dalam penelitian lanjutan dengan
ekstrak etanol kulit buah P. americana sebagai senyawa hepatoprotektif.
Ekstrak etanol kulit buah buah P. americana pada dosis sedang (700
mg/kgBB) menunjukkan peningkatan pada aktivitas ALT dan AST atau dapat
dikatakan bahwa pada dosis 700 mg/kg BB mampu memberikan efek
hepatotoksik, sehingga perlu dilakukan uji toksisitas akut yang dapat dinilai dari
LD50. Pengukuran ini bertujuan mencari dosis tunggal yang dapat menyebabkan
kematian 50% sekelompok hewan uji (Elya dkk., 2010).
D. Rangkuman Pembahasan
Tiga peringkat dosis ekstrak etanol kulit buah P.americana yaitu 350,
700, dan 1400 mg/kgBB dalam penelitian mampu memberikan efek
hepatoprotektif terhadap tikus yang terinduksi karbon tetraklorida yang dilihat
dari aktivitas serum ALT dan AST. Perolehan purata±SE aktivitas serum ALT
dan AST secara berturut-turut dari dosis 350, 700, dan 1400 mg/kgBB adalah
aktivitas serum ALT 109,5; 217,1; dan 124,8 U/L dan aktivitas serum AST 221,9;
788,7; dan 122,7 U/L. Hasil tersebut dapat menjawab rumusan masalah dalam
penelitian ini bahwa pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
jangka pendek memberikan pengaruh hepatoprotektif terhadap penurunan
aktivitas serum AST-ALT pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon
tetraklorida. Dosis efektif pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah P.
americana Mill. yang dapat memberikan pengaruh hepatoprotektif pada tikus
jantan terinduksi karbon tetraklorida dari hasil penelitian ini adalah dosis 1 (350
mg/kgBB). Pemilihan dosis 350 mg/kgBB sebagai dosis efektif karena
berdasarkan definisi operasional penelitian ini bahwa dosis efektif yang dimaksud
adalah dosis terkecil yang mampu memberikan penurunan aktivitas ALT dan AST
atau memberikan efek maksimal hepatoprotektif. Hasil penelitian diperoleh
bahwa % hepatoprotektif dari masing-masing ketiga peringkat dosis 350, 700, dan
1400 mg/kgBB adalah 83,1; 17,9 dan 73,8% untuk aktivitas ALT.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil yang diperoleh dan analisis statistik yang dilakukan,
maka dapat disimpulkan :
1. Pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill. jangka pendek
memberikan pengaruh hepatoprotektif pada tikus jantan galur Wistar
terinduksi karbon tetraklorida berupa penurunan aktivitas AST-ALT.
2. Dosis efektif hepatoprotektif ekstrak etanol kulit buah P. americana
Mill. pada tikus terinduksi karbon tetraklorida adalah sebesar 350
mg/kgBB.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai :
1. Pengujian histopatologi hati hewan uji sebagai data pengaruh
hepatoprotektif pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana selain
ditunjukkan dengan penurunan aktivitas ALT-AST.
2. Efek hepatoprotektif pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana
Mill. jangka pendek terhadap aktivitas ALT dan AST pada tikus yang
terinduksi parasetamol.
3. Pengujian toksisitas akut yang dinilai dari LD50 untuk ekstrak etanol kulit
buah P. americana.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
4. Pengujian kembali pada dosis 700 dan 1400 mg/kgBB untuk mengetahui
kebenaran hasil penelitian, karena pada dosis 700 mg/kgBB hasil
penelitian ini menunjukkan hepatotoksisitas.
5. Pengujian kandungan flavonoid kulit buah P.americana yang digunakan
dalam sebuah penelitian.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
DAFTAR PUSTAKA
Agrilink, 2001, Suplement to Avocado Information Kit, Queensland Horticulture Institute, Departement of Primary Industry, Queensland.
Agoes, G., 2009, Seri Farmasi Industri-2: Teknologi Bahan Alam, ITB, Bandung,
54 . Alfansuri, A. F., 2012, Identifikasi Chilling Injury Buah Alpukat (P. americana
Mill.) Dengan Gelombang Ultrasonik, Skipsi, 21, Institut Pertanian Bogor, Bogor
Andriani, T., 2014, Isolasi Flavonoid dari Ekstrak n-Heksan Biji Alpukat (Persea
americana Mill.) dan Uji Aktivitasnya Sebagai Antioksidan, Skripsi, Universitas Negeri Malang, Malang
Arhoghro, E.M., K.E. Ekpo, dan G.O. Ibeh, 2009, Effect of aqueous extract of
scent leaf (Ocimum gratissimum) on carbon tetrachoride (CCl4) induced liver damage in albino Wistar rats, Afr. J. Pharm. Pharmacol., 3 (11), 3.
Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M. K.C., Agomuo, E.N., Adindu, E. A., dan
Odika, P. C., et al., 2012, Chemical Composition of P. americana Leaf, Fruit and Seed, IJRRAS, 346-349.
Avista, A.D., 2013, Efek Hepatoprotektif Infusa Daun Swietenia mahagoni (L.)
Jacq. Pada Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tertraklorida, Skripsi, 43, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Azizah, B., dan Nina, S., 2013, Standarisasi Parameter Non Spesifik dan
Perbandingan Kadar Kurkumin Ekstrak Etanol dan Ekstrak Terpurifikasi Rimpang Kunyit, Jurnal Ilmiah Kefarmasian, 3 (01), 22-23.
Boradero, M., Mary, W.D., dan Yakobus, S., 2008, Klien Gangguan Hati
: Seri Asuhan Keperawatan, EGC, Jakarta, hal. 1-6. Carpena, J. G.R., David, M., Maria, J. A., Petri, K., and Mario, E., 2011, Avocado
(Persea americana Mill.) Phenolics, In Vitro Antioxidant and Antimicrobial Activities, and Inhibition of Lipid and Protein Oxidation in Porcine Patties, JAFC, 5630.
Chodidjah, Eni, W., dan Utari, 2007, Pengeruh Pemberian Air Rebusan Meniran
(Phyllanthm ninuriLinn) terhadap Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Wistar yang Terinduksi CCL4, Jurnal Anatomi Indonesia, 2 (01), 10.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Cinthya, S.E., Ivan, S.P., Rizky, A., 2012, Penggunaan Obat Penginduksi Kerusakan Hati pada Pasien Rawat Inap Penyakit Hati, Jurnal Farmasi Klinik Indonesia, 1 (2), 43.
Dipiro,J.T., Robert, L.T., Gary, C.Y., Gary, R.M., Barbara, G.W., dan Michael,
P., 2008, Pharmacotherapy A Pathophisiologic Approach, Edisi Ketujuh, McGrraw Hill, USA, pp. 636.
Direktorat Bima Farmasi Komunitas dan Klinik, Direktorat Jendral Bima
Kefarmasian dan Alat Kesehatan, 2007, Pharmaceutical Care Untuk Penyakit Hati, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal. 9.
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope
Indonesia, jilid IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Elya, B., Juheini, A., dan Emiyanah, 2010, Toksikologi Akut Daun Justicia
gendarussa Burm., MAKARA, 14 (2), 132. Febrianti, C.H., 2013, Efek Hepatoprotektif Jangka Waktu Enam Jam Ekstrak
Etanol Daun Macaranga tanarius L. Terhadap Aktivitas ALT-AST pada Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 41, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Handoko, L., 2005, Pengaruh ekstrak daun Apium graviolens terhadap perubahan
SGOT/SGPT tikus wistar jantan yang dipapar karbon tetraklorida, Skripsi, 13, Universitas Diponegoro, Semarang
Hardiana, R., Rudiyansyah, dan Titin, A.Z., 2012, Aktivitas Antioksidan Senyawa
Golongan Fenol Dari Beberapa Jenis Tumbuhan Famili Malvaceae, JKK, 1 (1), 8-13.
Hasti, S., Husni, M., dan Amri, B., 2012, Uji Aktivitas Hepatoproteksi dan
Toksisitas Akut dari Ekstrak Gambir Terstandarisasi, Jurnal Penelitian Farmasi Indonesia, 1 (1), 37.
Imafidon, K. E., and Amaechina, F. C., 2010, Effects of Aqueous Seed Extract of
P. americana Mill. (Avocado) on Blood Pressure and Lipid Profile in Hypertensive Rats, IDOSI Publications, 4 (2), 116.
James, L., Philip, R.M., and Jack, A. H., 2003, Acetaminophen-Induced
Hepatotoxicity, American Society for Pharmacology and Experimental Therapeutics, 31 (12), 1499.
Kardena, I. M., dan Ida, B.O.W., 2011, Kadar Perasan Kunyit yang Efektif
Memperbaiki Kerusakan Hati Mencit yang Dipicu Karbon Tetrachlorida, Jurnal Veteriner, 12 (1), 37.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Kumala, S., Hesty, U., and Wahyu, K. S., 2013, The Effect of Avocado (P.
americana Mill.) Leaves Extract Towords the Mouse’s Blood Glucose Decrease With the Glucose Tolerance Method, IJPSR, 4 (2), 663.
Kumar, P.V., Sivaraj, A., Elumalai EK., dan Kumar, B.S., 2009, Carbon
Tertrachloride-Induced Hepatotoxicity in Rats- Protective Role of Aqueous Leaf Extracts of Coccinia Grandis, Int.J. PharmTech Res, 1 (4), 1613-1614.
Lim, T. K., 2012, Edible Medical and Non-Medical Plants, Volume 3, Spingers
Dordrecht Heidelbergh, London New York, pp.78. Makodompit, A.N., Hosea, J.E., dan Weny, W., 2013, Penentuan Nilai Sun
Protective Factor (SPF) Secara In Vitro Krim Tabir Surya Ekstrak Etanol Kulit Alpukat, Pharmacon, 2 (03), 83-85.
Malangngi, L.P., Meiske, S. S., dan Jessy, J. E. P., 2012, Penetapan Kandungan
Tanin dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Buah Alpukat (Persea amerocana Mill.), FMIPA UNSRAT, 1 (1), 5-10.
McPhee, S.J., dan William, F.G., 2006, Pathophysiology of Disease: an
Introductin to Clinical Medicine, diterjemahkan oleh Brahm, U., hal. 425, 439, 446, EGC, Jakarta.
Medscape, 2013, Liver Anatomy, http://emedicine.medscape.com/article/1900159-
overview, diakses tanggal 17 Oktober 2014. Miller, A.L., 1996, Antioxidant Flavonoids: Structure, Function and Clinical
Usage, Alternative Medicine Review, 1 (2), 103. Nopitasari, K.Y., 2013, Efek Hepatoprotektif Pemberian Jangka Panjang Ektrak
Etanol Biji P. americana Mill. terhadap Aktivitas ALT dan AST Serum pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 61, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Nugraha, A.S., Ninisita, S.H., dan Sri, U.S., 2008, Efek Hepatoprotektif Ekstrak
Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) pada Hati Mencit Jantan Galur Swiss Induksi dengan CCl4, Jurnal Natur Indonesia, 11 (1), 28.
Panjaitan, R. G. P., Ekowati, H., Chairul, Masriani, Zulfa, Z., dan Wasmen, M.,
2007, Pengaruh Pemberian Karbon Tetraklorida Terhadap Fungsi Hati dan Ginjal Tikus, MAKARA KESEHATAN, 11 (1), 11-16.
Rajendran, R., Hemalatha, S., Akasakalai, K., Madhukrishna, C.H., Bavan, S.,
Vittal, dan Sundaram, R.M., 2009, Hepatoprotective Activity of Mimosa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
pudica Leaves Against Carbontetrachoride Induced Toxicity, Journal of Natural Products, 2, 120-121.
Redha, A., 2010, Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif dan Perannya Dalam
Sistem Biologis, Jurnal Belian, 09 (2), 196. Sasadara, M. M. V., 2013, Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Ekstrak Metanol
Biji P. americana Mill. terhadap Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 61-62, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Sari, S.P., Azizahwati, dan Retno, A., 2008, Efek Hepatoprotektif Rebusan Akar
Tapak Liman pada Tikus Putih yang Diinduksi dengan Karbom Tetraklorida, Jurnal Farmasi Indonesia, 4 (2), 75-81.
Sihombing, M., dan Raflizar, 2010, Status Gizi dan Fungsi Hati Mencit (Galur
CBS-Swiss) dan Tikus Putih (Galur Wistar) di Laboratorium Hewan Percobaan Puslitbang Biomedis dan Farmasi, Media Litbang Kesehatan, 20 (1), 34.
Staf Pengajar Departemen Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas
Sriwijaya, 2008, Kumpulan Kuliah Farmakologi, edisi 2, EGC, Jakarta, hal.742
Sutedjo, AY., 2006, Buku Saku Mengenal Penyakit Melalui Hasil Pemeriksaan
Laboratorium, Amara Books, Yogyakarta, 73-74. Tensiska, Marsetio, dan Silvia, O.N.Y., 2007, Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kasar Isoflavon dari Ampas Tahu, Hasil Penelitian, Universitas Padjajaran, Bandung.
Timbrell, J.A., 2009, Principles of Biochemical Toxicology, 4th Edition, Informa
Healthcare USA, New York, hal. 308 Tindall, B., 1995, Anatomy and Physiology for Nurses, diterjemahkan oleh
Syabariyah, S., hal. 347, EGC, Jakarta. Vinha, A.F., Joana, M., and Sergio, V.P.B., 2013, Physicochemical Parameters,
Phytochemical Composition and Antioxidant Activity of the Algarvian Avocado (P. americana Mill.), Canadian Center of Science and Education, 5 (12), 100-106.
Widjaja, I. H., 2008, Anatomi Abdomen, EGC, Jakarta, hal. 67, 72. Wijaya, L.S., 2013, Efek Antihepatotoksik Infusa Herba Mimosa pigra L.
Terhadap Tikus Putih Jantan Galur Wistar Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skrisi, 38, 43, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
Wijayanti, A.D., Syarifuddin, T., dan Soesanto, M., 2003, Effect of Antioxidant Flavonoid on Microsomal Protein Concertration of Rat’s Liver Induced by Carbontetrachoride, J.Sain Vet., XXI (2), 18.
Yasir, M., Das,S., and Kharya, M.D., 2010, The Phytochemical and
Pharmacological Profile of P. americana Mill., NCBI, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3249906/, diakses pada 14 Maret 2014.
Zuhrotun, A., 2007, Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat (P.
americana Mill. ) Bentuk Bulat, Karya Ilmiah, Universitas Padjadjaran Fakultas Farmasi, Jatinangor.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Lampiran 1. Foto bagian kulit buah P. americana Mill.
Lampiran 2. Foto serbuk kulit buah P.americana Mill.
Lampiran 3. Foto ekstrak etanol kulit buah P.americana Mill.
Lampiran 4. Larutan ekstrak etanol kulit buah P.americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi buah P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
Lampiran 6. Determinasi buah P. americana Mill.
Lampiran 7. Perhitungan persen rendemen ekstrak etanol kulit buah P. americana Mill.
% Rendemen = total ekstrak kulit 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 Mill .
total serbuk kulit 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 Mill . X 100%
= 44,8 𝑛𝑛𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎320 𝑛𝑛𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎
X 100% = 14 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Lampiran 8. Surat keterangan kadar air kulit buah P. americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Lampiran 9. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee (MHREC)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Lampiran 10. Hasil Uji Statistik Orientasi Pencuplikan Darah Tabel VIII. Data Purata dan Standar Eror Aktivitas ALT pada jam ke-0, 24,
dan 48
Keterangan : SE = Standar Eror
AKTIVITAS ALT ORIENTASI
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
Jam_0 3 72.3333 10.06645 63.00 83.00 Jam_24 3 2.1733E2 4.72582 212.00 221.00 Jam_48 3 90.3333 6.50641 84.00 97.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Jam_0 Jam_24 Jam_48 N 3 3 3 Normal Parametersa Mean 72.3333 2.1733E2 90.3333
Std. Deviation 1.00664E1 4.72582 6.50641
Most Extreme Differences
Absolute .219 .304 .187 Positive .219 .219 .187 Negative -.189 -.304 -.181
Kolmogorov-Smirnov Z .380 .527 .324 Asymp. Sig. (2-tailed) .999 .944 1.000 a. Test distribution is Normal.
Hasil uji normalitas One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test aktivitas ALT menunjukkan distribusi data normal (p>0,05). Selanjutnya homogenitas data diuji dengan Levene test.
Selang waktu (jam)
Purata aktivitas serum ALT ± SE (U/I)
0 72.3±4.50 24 217.3±2.11 48 90.3±2.91
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Oneway Descriptives
ALT
N Mean Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
1 3 72.3333 10.06645 5.81187 47.3269 97.3398 63.00 83.00 2 3 2.1733E2 4.72582 2.72845 205.5938 229.0729 212.00 221.00 3 3 90.3333 6.50641 3.75648 74.1705 106.4961 84.00 97.00 Total 9 1.2667E2 68.74773 22.91591 73.8225 179.5108 63.00 221.00
Test of Homogeneity of Variances
ALT Levene Statistic df1 df2 Sig.
.742 2 6 .515 Levene Statistic menunjukkan nilai p = 0,515 (p>0,05) yang
menunjukkan varians data yang sama sehingga uji hipotesis dapat dilakukan dengan One Way ANOVA dengan uji post hoc dengan menggunakan Scheffe
ANOVA
ALT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 37478.000 2 18739.000 338.657 .000
Within Groups 332.000 6 55.333 Total 37810.000 8
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Multiple Comparisons ALT scheffe
(I) perlakuan
(J) perlakuan
Mean Difference (I-
J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound Jam 0 Jam 24 -145.00000* 6.07362 .000 -164.4797 -125.5203
Jam 48 -18.00000 6.07362 .067 -37.4797 1.4797 Jam 24 Jam 0 145.00000* 6.07362 .000 125.5203 164.4797
Jam 48 127.00000* 6.07362 .000 107.5203 146.4797 Jam 48 Jam 0 18.00000 6.07362 .067 -1.4797 37.4797
Jam 24 -127.00000* 6.07362 .000 -146.4797 -107.5203 *. The mean difference is significant at the 0.05 level. Homogeneous Subsets
ALT Scheffe
Jam N Subset for alpha = 0.05 1 2
1 3 72.3333 3 3 90.3333 2 3 217.3333 Sig. .067 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Nilai signifikansi yang diperoleh adalah :
- Jam ke-0 dan 24 p = 0,000 (p<0,05) menunjukkan bahwa ada perbedaan
bermakna antara ke-2 kelompok.
- Jam ke-0 dan 48 p = 0,067 (p>0,05) menunjukkan bahwa ada perbedaan
tidak bermakna antara ke-2 kelompok.
- Jam ke-24 dan 48 p = 0,000 (p<0,05) menunjukkan bahwa ada perbedaan
bermakna antara ke-2 kelompok
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak
etanol kulit buah P. americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis
2 mL/kgBB Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
Kontrol_CCl4 5 2.4684E2 22.87855 221.00 270.00 Kontrol_Oliveoil 5 81.6000 6.87750 70.00 88.00 Kontrol_Ekstrak 5 2.5450E2 10.14446 247.70 272.20 Dosis_1 5 1.0950E2 29.15450 71.80 144.50 Dosis_2 5 2.1712E2 65.22160 135.60 298.50 Dosis_3 5 1.2270E2 22.31401 100.20 150.50
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Kontrol_CCl4 Kontrol_Oliveoil
Kontrol ekstrak 1400
mg/kgBB Dosis_1 Dosis_2 Dosis_3
N 5 5 5 5 5 5 Normal Parametersa
Mean 246.8400 81.6000 254.5000 1.0950E2 2.1712E2 1.2270E2 Std. Deviation 22.87855 6.87750 10.14446 2.91545E1 6.52216E1 2.23140E1
Most Extreme Differences
Absolute .241 .323 .343 .196 .243 .220 Positive .241 .176 .343 .196 .178 .220 Negative -.239 -.323 -.251 -.185 -.243 -.178
Kolmogorov-Smirnov Z .539 .723 .767 .439 .544 .491 Asymp. Sig. (2-tailed) .934 .673 .598 .991 .928 .969 a. Test distribution is Normal.
Hasil uji normalitas One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test aktivitas
ALT menunjukkan distribusi data normal (p>0,05). Selanjutnya homogenitas data diuji dengan Levene test.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Descriptives ALT
N Mean Std. Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
1 5 2.4684E2 22.87855 10.23160 218.4325 275.2475 221.00 270.00 2 5 81.6000 6.87750 3.07571 73.0605 90.1395 70.00 88.00 3 5 2.5430E2 10.32037 4.61541 241.4856 267.1144 246.70 272.20 4 5 1.0950E2 29.15450 13.03829 73.2999 145.7001 71.80 144.50 5 5 2.1712E2 65.22160 29.16799 136.1367 298.1033 135.60 298.50 6 5 1.2484E2 29.68523 13.27564 87.9809 161.6991 88.60 157.60 Total 30 1.7237E2 76.61101 13.98719 143.7596 200.9737 70.00 298.50
Test of Homogeneity of Variances
ALT Levene Statistic df1 df2 Sig.
7.218 5 24 .000
Levene test menunjukkan nilai p= 0,000 (p<0,05) yang menunjukkan
varians data yang tidak sama sehingga uji hipotesis dilakukan Kruskall-Wallis dengan uji post hoc dengan menggunakan Mann-Whitney.
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 30 1.7237E2 76.61101 70.00 298.50 Perlakuan 30 3.5000 1.73702 1.00 6.00
Kruskal-Wallis Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank
ALT 1 5 23.60
2 5 3.80
3 5 24.60
4 5 9.00
5 5 20.20
6 5 11.80
Total 30
Test Statisticsa,b
ALT
Chi-Square 23.441 Df 5 Asymp. Sig. .000 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Dengan uji Kruskall- Wallis, diperoleh nilai p= 0,000 (p <0,005) yang
menunjukkan bahwa paling tidak terdapat perbedaan aktivitas ALT antar
kelompok. Analisis Pos Hoc dilakukan dengan uji Mann-Whitney.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol CCl4
5 8.00 40.00
Kontrol olive oil 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 5.40 27.00
Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB 5 5.60 28.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 12.000 Wilcoxon W 27.000 Z -.104 Asymp. Sig. (2-tailed) .917 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 1.000a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
Nilai signifikansi yang diperoleh 1,000 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 6.20 31.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 4.80 24.00
Total 10 Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 9.000 Wilcoxon W 24.000 Z -.731 Asymp. Sig. (2-tailed) .465 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .548a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,548 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.80 19.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 7.20 36.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 4.000 Wilcoxon W 19.000 Z -1.776 Asymp. Sig. (2-tailed) .076 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .095a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,095 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
• Mann-Whitney Test
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol ekstrak etanol kulit buah1400 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
78
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol ekstrak etanol kulit buah 1400 mg/kgBB 5 7.00 35.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 4.00 20.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 5.000 Wilcoxon W 20.000 Z -1.567 Asymp. Sig. (2-tailed) .117 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .151a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,151 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Kontrol ekstrak etanol kulit buah1400 mg/kgBB 5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
79
• Mann-Whitney Test
Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Ekstrak etanol kulit buah 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.20 16.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 7.80 39.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 1.000 Wilcoxon W 16.000 Z -2.402 Asymp. Sig. (2-tailed) .016 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,016 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok. • Mann-Whitney Test
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,421 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Ekstrak etanol kulit buah 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 4.60 23.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 6.40 32.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 8.000 Wilcoxon W 23.000 Z -.940 Asymp. Sig. (2-tailed) .347 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .421a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
80
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
ALT Ekstrak etanol kulit buah 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 7.60 38.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 3.40 17.00
Total 10
Test Statisticsb
ALT
Mann-Whitney U 2.000 Wilcoxon W 17.000 Z -2.193 Asymp. Sig. (2-tailed) .028 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .032a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,032 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
Keterangan : EEKPA = ekstrak etanol kulit buah P. americana
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
81
Lampiran 12. Analisis statistik aktivitas serum AST perlakuan ekstrak
etanol kulit buah P. americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis
2 mL/kgBB Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
Kontrol_CCl4 5 7.6222E2 96.48493 666.00 867.60 Kontrol_Oliveoil 5 1.2782E2 16.34494 106.10 147.00 Kontrol_Sediaan 5 1.5260E2 13.03438 137.20 168.20 Dosis_1 5 2.2190E2 77.88219 129.60 321.70 Dosis_2 5 7.8872E2 161.45444 626.10 1059.00 Dosis_3 5 1.2270E2 22.31401 100.20 150.50
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Kontrol_CCl4
Kontrol_Oliveoil
Kontrol_Sediaan Dosis_1 Dosis_2 Dosis_3
N 5 5 5 5 5 5 Normal Parametersa
Mean 762.2200 127.8200 152.6000 2.2190E2 7.8872E2 1.2270E2 Std. Deviation 96.48493 16.34494 13.03438 7.78822E1 1.61454E
2 2.23140E
1 Most Extreme Differences
Absolute .302 .229 .185 .168 .354 .220 Positive .302 .156 .169 .168 .354 .220 Negative -.257 -.229 -.185 -.163 -.157 -.178
Kolmogorov-Smirnov Z .676 .512 .414 .376 .790 .491 Asymp. Sig. (2-tailed) .751 .956 .995 .999 .560 .969 a. Test distribution is Normal.
Hasil uji normalitas One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test aktivitas ALT menunjukkan distribusi data normal (p>0,05). Selanjutnya homogenitas data diuji dengan Levene test.
Descriptives AST
N Mean Std. Deviation Std. Error
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound
1 5 7.6222E2 96.48493 43.14937 642.4181 882.0219 666.00 867.60 2 5 1.2782E2 16.34494 7.30968 107.5251 148.1149 106.10 147.00 3 5 1.5260E2 13.03438 5.82915 136.4157 168.7843 137.20 168.20 4 5 2.2190E2 77.88219 34.82997 125.1965 318.6035 129.60 321.70 5 5 7.8872E2 161.45444 72.20462 588.2478 989.1922 626.10 1059.00 6 5 1.2270E2 22.31401 9.97913 94.9935 150.4065 100.20 150.50 Total 30 3.6266E2 308.42942 56.31125 247.4906 477.8294 100.20 1059.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
82
Test of Homogeneity of Variances
AST Levene Statistic df1 df2 Sig.
3.813 5 24 .011
Levene test menunjukkan nilai p= 0,011 (p<0,05) yang menunjukkan
varians data yang tidak sama sehingga uji hipotesis dilakukan Kruskall-Wallis dengan uji post hoc dengan menggunakan Mann-Whitney.
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
AST 30 3.6266E2 308.42942 100.20 1059.00 Perlakuan 30 3.5000 1.73702 1.00 6.00
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Perlakuan N Mean Rank
AST 1 5 25.20
2 5 6.80
3 5 13.00
4 5 16.00
5 5 25.80
6 5 6.20
Total 30
Test Statisticsa,b
AST
Chi-Square 23.797 Df 5 Asymp. Sig. .000 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: Perlakuan
Dengan uji Kruskall- Wallis, diperoleh nilai p= 0,000 (p <0,005) yang
menunjukkan bahwa paling tidak terdapat perbedaan aktivitas ALT antar
kelompok. Analisis Pos Hoc dilakukan dengan uji Mann-Whitney.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
83
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol CCl4
5 8.00 40.00
Kontrol olive oil 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 8.00 40.00
Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
84
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 350 mg/kgBB 5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 5.20 26.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB
5 5.80 29.00
Total 10 Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 11.000 Wilcoxon W 26.000 Z -.313 Asymp. Sig. (2-tailed) .754 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .841a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,841 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
85
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol CCl4 2 ml/kgBB 5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.40 17.00
Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB
5 7.60 38.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 2.000 Wilcoxon W 17.000 Z -2.193 Asymp. Sig. (2-tailed) .028 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .032a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,032 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
86
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.60 18.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 7.40 37.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 3.000 Wilcoxon W 18.000 Z -1.984 Asymp. Sig. (2-tailed) .047 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .056a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,056 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
87
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol olive oil 2 ml/kgBB 5 5.80 29.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 5.20 26.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 11.000 Wilcoxon W 26.000 Z -.313 Asymp. Sig. (2-tailed) .754 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .841a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,841 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB
5 4.00 20.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 350 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 7.00 35.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 5.000 Wilcoxon W 20.000 Z -1.567 Asymp. Sig. (2-tailed) .117 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .151a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,151 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
88
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB
5 3.00 15.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Kontrol ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB 5 7.40 37.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.60 18.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 3.000 Wilcoxon W 18.000 Z -1.984 Asymp. Sig. (2-tailed) .047 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .056a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,056 (p>0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda tidak bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
89
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.00 15.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 8.00 40.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 7.60 38.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB 5 3.40 17.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U 2.000 Wilcoxon W 17.000 Z -2.193 Asymp. Sig. (2-tailed) .028 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .032a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,032 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
90
• Mann-Whitney Test Ranks
Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks
AST Ekstrak etanol kulit buah P.americana 700 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 8.00 40.00
Ekstrak etanol kulit buah P.americana 1400 mg/kgBB +CCl4 2 ml/kgBB
5 3.00 15.00
Total 10
Test Statisticsb
AST
Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: Perlakuan
Nilai signifikansi yang diperoleh 0,008 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa berbeda bermakna antara kedua kelompok.
Keterangan :
EEKPA = ekstrak etanol kulit buah P. americana
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
91
Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia • Angka konversi tikus 200 g manusia 70 kg = 56,0
• Total ekstrak kulit buah P.americana 44,8 gram dari total serbuk yang
digunakan 320 gram. Sedangkan dosis ekstrak etanol kulit buah
P.americana 350 mg/kgBB. Persamaan dosis ekstrak yang digunakan
dengan dosis kulit buah P.americana adalah :
Total ekstrak kulit buah 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 Total serbuk kulit buah 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎
= Dosis ekstrak kulit buah 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎 Dosis serbuk kulit buah 𝑃𝑃.𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎𝑎
44,8 gram 320 gram
= 3,5 gram /kgBB x gram /kgBB
X = 25 gram/kgBB
• Dosis untuk manusia = dosis untuk tikus 200 g x angka konversi ke
manusia.
Maka ditetapkan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana
• Ekstrak etanol kulit buah P.americana dosis 350 mg/kgBB tikus :
0,35 g/kg BB = 0,35 g/1000g BB = 0,07g/200g BB
0,07 g/200g BB x 56,0 = 3,92 g/ 70 kg BB manusia
= 2,8 g/50 kg BB manusia
Maka ditetapkan dosis serbuk kulit buah P. americana
• Ekstrak etanol kulit buah P.americana dosis 25 g/kgBB tikus :
25 g/kg BB = 25 g/1000g BB = 5 g/200g BB
5 g/200g BB x 56,0 = 280 g/ 70 kg BB manusia
= 200 g/50 kg BB manusia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
92
Lampiran 14. Perhitungan Efek Hepatoprotektif
[1 − (𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎 −𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑘𝑘𝑝𝑝 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑛𝑛𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑛𝑛 )𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑘𝑘𝑝𝑝 𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑘𝑘𝑘𝑘𝑎𝑎 𝑝𝑝𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑎𝑎𝑡𝑡𝑎𝑎 −𝑝𝑝𝑝𝑝𝑎𝑎𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎 𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴𝐴 𝑝𝑝𝑘𝑘𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑘𝑘𝑝𝑝 𝑎𝑎𝑎𝑎𝑛𝑛𝑎𝑎𝑝𝑝𝑎𝑎𝑛𝑛
] x 100%
• Perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350 mg/kgBB [1 − (109,5−81,6)
246,8−81,6] x 100% = 83,1 %
• Perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 700 mg/kgBB
[1 − (217,1−81,6)246,8−81,6
] x 100% = 17,9% • Perlakuan ekstrak etanol kulit buah P. americana dosis 350 mg/kgBB
[1 − (124,8−81,6)246,8−81,6
] x 100% = 73,8 %
Lampiran 15. Konversi waktu tikus ke manusia 1 hari tikus = 1,2 bulan manusia
1 jam tikus = 1,5 hari manusia
4 jam tikus = 6 hari manusia
6 jam tikus = 9 hari manusia
(Sasadara, 2013)
.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
93
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Pemberian Jangka Pendek Ekstrak Etanol Kulit Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT- AST Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida” memiliki nama lengkab MM. Risa Puspitasari. Penulis lahir di Adiluwih pada tanggal 22 Mei 1993, merupakan putri ketiga dari tiga bersaudara dalam keluarga pasangan AL. Suyadi dan M. Sainah. Penulis mengawali masa pendidikannya di TK Darma Wanita Adiluwih (1997 - 1999) kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD
Negeri 1 Adiluwih (1999 – 2005). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh oleh penulis di SMP Negeri 1 Adiluwih (2005 – 2008) dan melanjutkan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Xaverius Pringsewu (2008 – 2011). Penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2011. Selama menempuh pendidikan sarjana, penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan. Penulis pernah menjadi panitia Sie. Keamanan dan Transportasi Keluarga Mahasiswa/i & Pelajar Katolik Sumatera Bagian Selatan (KMPKS) (2011), peserta dalam Pelatihan Pembuatan Produk Farmasi “Pharmacy (Re) Action” (2011), panitia Sie. Konsumsi acara Makrab KMPKS (2012), sebagai anggota Divisi Sosial KMPKS (2011-2012), panitia Sarasehan Spiritualitas Ignasian (2014), panitia Sie Konsumsi Acara Komisi Pemilihan Umum Gubernur BEMF & Ketua DPMF Farmasi (2013). Penulis pernah mengikuti Program Kreativitas Mahasiswa dengan judul “ Makan Bakpia Madiun Mengembangkan Kebiasaan Berprilaku Hidup Bersih, Sehat dan Nyaman dengan Media Panggung Boneka di Bawah Jembatan Bersama Anak-anak RW. 13 Jogoyudan, Kelurahan Gowongan , Kecamatan Jetis, Yogyakarta” (2014).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI