Upload
others
View
7
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
PENGARUH PEMBERIAN JANGKA PANJANG
INFUSA KULIT Persea americana Mill.
TERHADAP AKTIVITAS ALKALI FOSFATASE
PADA TIKUS JANTAN TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Diajukan oleh:
Maria Desita Putri
118114035
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2014
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
“I am sure that neither death nor life, nor angles,
nor principalities, nor power, nor things present,
nor things to come, not height, nor depth,
nor any creature shall separate me from the love of God”
(Doug Nolk & Tom Fettke dalam lagu He Loved Me)
“There can be miracles when you believe”
(Whitney Houston dalam lagu When You Believe)
“The one that can make you happy is you, yourself.
Don’t put your happiness in someone else”
(Anastasia Kinanti)
Kupersembahkan karya ini untuk:
Yesus yang selalu menopang dan setia menemaniku
Bapak, Ibu, Mas, Alma, alm. Mbah Lukas,
serta Almamater Universitas Sanata Dharma
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kepada Bapa yang Maha Baik atas segala
kasih dan karunia, berkat, serta anugerah yang setiap hari diberikan sehingga
penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “PENGARUH PEMBERIAN
JANGKA PANJANG INFUSA KULIT Persea americana Mill. TERHADAP
AKTIVITAS ALKALI FOSFATASE PADA TIKUS JANTAN
TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA” dengan baik dan lancar. Skripsi
ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Strata
Satu Program Studi Farmasi (S.Farm) Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta.
Penulis menyadari bahwa dalam proses pelaksanaan dan penyusunan
skripsi ini ada banyak pihak yang telah memberi bantuan dan dukungan. Oleh
karena itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengijinkan
penulis menjalankan pembelajaran selama masa studi.
2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing skripsi
yang telah setia membimbing, mendampingi, memberikan saran dan
semangat selama proses penyusunan skripsi ini.
3. Bapak Prof. Dr. C.J. Soegihardjo, Apt., selaku Dosen Penguji pada skripsi ini
yang telah memberikan saran kepada penulis.
4. dr. Fenty, M.Kes., Sp.PK., selaku Dosen Penguji pada skripsi ini, atas saran
dan dukungannya kepada penulis.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
5. Ibu Dr. Sri Hartati Yuliani, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fakultas
Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua fasilitas
laboratorium untuk kepentingan dan keberlangsungan skripsi.
6. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam
determinasi Persea americana Mill.
7. Bapak Heru, Bapak Suparjiman, Bapak Kayat, Mas Andi, Mas Sigit, Mas
Otok selaku Laboran Laboratorium Fakultas Farmasi atas bantuan dan
dukungannya kepada penulis selama proses pengerjaan skripsi.
8. Bapak Aloysius Dominikus Sutarto, Ibu Rosalia Catharina Surajini, Mas
Ignatius Mariandrianto Saputra, Pudensiana Alma Nugrahaeni, alm. Mbah
Andrea Bukur Tuminem atas segala cinta, doa, motivasi, dan bantuan yang
selalu menghangatkan.
9. Teman-teman “Tim Persea americana Mill.” atas kerjasama dan bantuannya.
10. Seluruh anggota “Rempong Family” Yosef Yudha, Anastasia Kinanti, Kris
Rahardian, Trisona Agustina, Elisabeth Okta, dkk yang memberi warna dan
kisah unik yang selalu penulis rindukan.
11. Puteri Lokastithi dan Tyas Bani Pamerdi kawan SMA yang tak terlewatkan.
12. Para anggota Mendes Sejati Jolinna Michelia Bitti, Angeline Syahputri, dan
Marcellina Avistya yang banyak memberikan cerita.
13. Seluruh anggota “Syalala Family” Reri, Ci Henny, Koko Rendy, Papa John,
Detta Detto, dan Princess Sisca atas doa dan kiriman malaikatnya.
14. Teman-teman FKK A 2011, FSM A 2011, dan seluruh teman-teman angkatan
2011 atas kebersamaan selama masa studi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .......................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................. ii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................ iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................. v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS............................. vi
PRAKATA .......................................................................................... vii
DAFTAR ISI ....................................................................................... x
DAFTAR TABEL ............................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR .......................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................... xvi
INTISARI ............................................................................................ xvii
ABSTRACT .......................................................................................... xviii
BAB I. PENGANTAR ........................................................................ 1
A. Latar Belakang ................................................................................ 1
1. Perumusan masalah .................................................................. 3
2. Keaslian penelitian ................................................................... 3
3. Manfaat penelitian .................................................................... 4
B. Tujuan Penelitian ............................................................................. 5
1. Tujuan umum ............................................................................ 5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
2. Tujuan khusus ........................................................................... 5
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .......................................................... 6
A. Hati .................................................................................................... 6
1. Anatomi dan fisiologi hati ........................................................... 6
2. Fungsi hati ................................................................................... 8
3. Jenis kerusakan hati ..................................................................... 8
4. ALP .............................................................................................. 10
B. Karbon Tetraklorida ........................................................................... 11
C. Persea americana Mill. ...................................................................... 14
1. Taksonomi .................................................................................... 14
2. Nama lain ..................................................................................... 14
3. Morfologi ..................................................................................... 15
4. Kandungan kimia ......................................................................... 15
5. Khasiat dan kegunaan .................................................................. 15
D. Landasan Teori .................................................................................. 16
E. Hipotesis ............................................................................................ 17
BAB III. METODE PENELITIAN ........................................................ 18
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ......................................................... 18
B. Variabel dan Definisi Operasional ..................................................... 19
1. Variabel utama ............................................................................. 19
2. Variabel pengacau ........................................................................ 19
3. Definisi operasional ...................................................................... 19
C. Bahan Penelitian ................................................................................. 19
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
1. Bahan utama .................................................................................. 19
2. Bahan kimia ................................................................................... 20
D. Alat dan Instrumen Penelitian ............................................................. 20
E. Tata Cara Penelitian ............................................................................ 21
1. Determinasi Persea americana Mill. ............................................ 21
2. Pengumpulan bahan uji ................................................................. 21
3. Pembuatan serbuk kulit Persea americana Mill. .......................... 21
4. Penetapan kadar air pada serbuk kering kulit Persea americana
Mill. ................................................................................................ 21
5. Pembuatan infusa kulit Persea americana Mill. ............................ 22
6. Pembuatan larutan CCl4 ................................................................. 22
7. Uji pendahuluan ............................................................................. 22
8. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji ...................................... 25
9. Pembuatan serum ........................................................................... 25
10. Pengukuran aktivitas ALP ............................................................. 26
F. Tata Cara Analisis Hasil ...................................................................... 26
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................. 27
A. Determinasi Persea americana Mill. ................................................... 27
B. Penetapan Kadar Air ............................................................................ 27
C. Penentuan Dosis Infusa ........................................................................ 28
D. Penentuan Dosis Hepatotoksik Karbon Tetraklorida ........................... 28
E. Penentuan Waktu Pencuplikan Darah .................................................. 29
F. Penentuan Lama Pemejanan Infusa Kulit Persea americana Mill. ...... 31
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
G. Hasil Uji Pengaruh Pemberian Infusa Kulit Persea americana Mill. ... 31
H. Kontrol Olive Oil Dosis 2 mL/kgBB .................................................... 33
I. Kontrol Karbon Tetraklorida Dosis 2 mL/kgBB .................................. 34
J. Kontrol Infusa Kulit Persea americana Mill. (IKPA)
Dosis 1600 mg/kgBB............................................................................. 34
K. Kelompok Perlakuan Infusa Kulit Persea americana Mill. (IKPA)
Dosis 362,81; 761,90; dan 1600 mg/kgBB pada Tikus Jantan
Terinduksi Karbon Tetraklorida Dosis 2 ml/kgBB ............................... 35
L. Rangkuman Pembahasan ...................................................................... 38
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 40
A. Kesimpulan............................................................................................ 40
B. Saran ..................................................................................................... 40
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 41
LAMPIRAN....................................................................................... ........ 45
BIOGRAFI PENULIS ............................................................................... 61
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Komposisi dan konsentrasi reagen ALP Abbott 20
Tabel II. Rata-rata aktivitas serum tikus paska induksi karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam 29
Tabel III. Hasil uji Scheffe aktivitas serum tikus paska
induksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam 30
Tabel IV. Rata-rata ± SE aktivitas ALP serum tikus pada kelompok
perlakuan 32
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas ALP serum tikus pada
kelompok perlakuan 33
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur lobulus hati. 6
Gambar 2. Metabolisme karbon tetraklorida di hati. 12
Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas serum tikus paska
induksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada
selang waktu 0, 24, dan 48 jam. 30
Gambar 4. Diagram batang rata-rata ± SE aktivitas ALP
serum tikus pada kelompok perlakuan. 32
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto buah Persea americana Mill. 45
Lampiran 2. Foto serbuk kulit Persea americana Mill. 45
Lampiran 3. Foto infusa kulit Persea americana Mill. 46
Lampiran 4. Hasil uji determinasi Persea americana Mill. 47
Lampiran 5. Hasil uji kadar air serbuk kering kulit Persea
americana Mill. 48
Lampiran 6. Surat Ethical Clearance 49
Lampiran 7. Analisis statistik data aktivitas ALT uji
pendahuluan waktu pencuplikan darah hewan uji
setelah diinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB 50
Lampiran 8. Analisis statistik data aktivitas ALP kelompok perlakuan 53
Lampiran 9. Perhitungan penetapan peringkat dosis infusa kulit Persea
americana Mill. pada kelompok perlakuan 57
Lampiran 10. Perhitungan konversi dosis untuk manusia 58
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
INTISARI
Penilitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian jangka
panjang infusa kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas alkali fosfatase
(ALP) serum pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida serta mengetahui
ada tidaknya kekerabatan antara dosis pemberian infusa kulit Persea americana
Mill. dengan penurunan aktivitas ALP.
Jenis penelitian bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak
lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan 30 tikus jantan galur Wistar,
umur 2-3 bulan dengan berat badan 150-250 gram. Tikus dibagi secara acak
dalam 6 kelompok sama banyak. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi karbon
tetraklorida dan olive oil (1:1) dengan dosis 2 mL/kgBB secara i.p. Kelompok II
(kontrol negatif) diberi olive oil sebanyak 2 mL/kgBB secara i.p. Kelompok III
(kontrol sediaan) diberi infusa kulit Persea americana Mill. dosis 1600 mg/kgBB
setiap hari secara berturut-turut selama 6 hari. Kelompok IV, V, dan VI
(perlakuan) diberi infusa kulit Persea americana Mill. dengan seri dosis 362,81;
761,90; dan 1600 mg/kgBB selama 6 hari secara berturut-turut, kemudian setelah
pemberian infusa dilakukan pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB.
Pada jam ke-24 paska induksi karbon tetraklorida, semua kelompok diambil
darahnya pada daerah sinus orbitalis mata untuk penetapan aktivitas ALP.
Aktivitas ALP serum dianalisis secara statistik dengan One Way ANOVA.
Berdasarkan hasil penelitian, infusa kulit Persea americana Mill.
memberikan pengaruh terhadap penurunan aktivitas ALP serum tikus jantan
terinduksi karbon tetraklorida, serta tidak ada kekerabatan antara dosis pemberian
infusa kulit Persea americana Mill. dengan penurunan aktivitas ALP serum tikus
jantan terinduksi karbon tetraklorida.
Kata kunci: Persea americana Mill., infusa, karbon tetraklorida, ALP
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
ABSTRACT
The aim of study research is to find out the influence of administer long
term Persea americana Mill. peel infusion for the alkaline phosphatase (ALP)
activity in rat induced by carbon tetrachloride and to find out the correlation
between dose of Persea americana Mill. peel infusion and the decline in ALP
activity.
This study purely experimental research with randomized complete direct
sampling design. This research used male rats of Wistar strain as subjects, aged
2-3 months, and 150-250 for its weights. 30 male rats were divided randomly into
6 groups. Group I (hepatotoxins controlled-group) was given carbon tetrachloride
and olive oil (1:1) at a dose of 2 ml/kgBW in i.p. Group II (negative controlled-
group) was given olive oil at a dose of 2 ml/kgBW in i.p. Group III (infusion
controlled-group) was given Persea americana Mill. peel infusion at a dose 1600
mg/kgBW for 6 days. Group IV, V and VI (treatment group) were given Persea
americana Mill. peel infusion at a dose 362,81; 761,90; and 1600 mg/kgBW for 6
days, then at 7th
day, 2 ml/kgBW of carbon tetrachloride was administered
intraperitonially. At the 24th
hours after carbon tetrachloride administration, blood
samples from all group were taken through the eyes orbital sinus for measuring
the ALP activity. The data were analyzed by one way ANOVA.
The result of this research showed that Persea americana Mill. peel
infusion had effect to decline ALP activity in rat induced by carbon tetrachloride,
and there is no correlation between dose of Persea americana Mill. peel infusion
and the decline of ALP activity in rat induced by carbon tetrachloride.
Keywords: Persea americana Mill., infusion, carbon tetrachloride, ALP
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Hati merupakan organ yang berperan penting dalam metabolisme, seperti
metabolisme karbohidrat, lemak, dan asam amino (Mader, 2010). Hati memiliki
berat 1400 g dan terletak di kuadran kanan atas abdomen di ruang peritoneum
tepat di bawah sisi kanan diafragma dan di bawah rongga dada. Hati menerima
hampir 25% curah jantung, yaitu sekitar 1500 mL darah per menit (McPhee dan
Ganong, 2010). Jaringan hati dapat rusak oleh infeksi dan zat beracun yang
mengalir lewat aliran darah (Singh, 2008). Insiden kerusakan hati di
Johannesburg, Afrika Selatan pada tahun 2004-2009 berkisar 10,7 kasus per tahun
pada pasien yang menerima terapi antiretroviral (Mirira, 2011). Kerusakan hati
ada berbagai jenis, beberapa di antaranya adalah steatosis, nekrosis, kolestasis,
dan sirosis. Berdasar penelitian Lesmana, Lesmana, Pakasi, dan Krisnuhoni
(2012), kasus steatosis di Indonesia terjadi pada 30% pasien hepatitis B.
Prevalensi kolestasis pada sepsis neonatorum adalah 38,9% di RSUP Sanglah
Denpasar (Karyana, Putra, dan Yanti, 2012), sedangkan prevalensi sirosis hati di
Jawa dan Sumatera berkisar antara 3,6-8,4% (Mondrowinduro, 2014).
Kerusakan membran sel dan organel di hati menyebabkan enzim-enzim
hati intrasel masuk ke dalam pembuluh darah sehingga terjadi peningkatan kadar
atau aktivitas. Enzim-enzim tersebut, yaitu aspartat dan alanin aminotransferase
(AST dan ALT), alkali fosfatase (ALP), bilirubin total, dan albumin total. ALP
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
adalah protein yang ada di jaringan tubuh dan dapat ditemukan di hati, saluran
empedu, dan tulang (Dudgale, 2013). Di hati, ALP mengkatalisasi hidrolisis ester
fosfat organik dalam suasana basa. Aktivitas ALP dalam darah dapat meningkat
melalui kebocoran kanalikuli dan membran plasma pada kerusakan sel hati
(Pramushinta, 2008). Berdasarkan alasan tersebut, peneliti menggunakan aktivitas
enzim ALP serum sebagai parameter kerusakan hati.
Tanaman herbal di sekitar kita sering digunakan sebagai pengobatan,
baik pencegahan atau penyembuhan, termasuk pengobatan penyakit hati. Persea
americana Mill. adalah tanaman yang mengandung senyawa fenolik dan
flavonoid sehingga dapat digunakan untuk pengobatan penyakit hati karena
mampu menangkap radikal bebas yang dapat menyebabkan steatosis (Vinha,
Moreira, and Barreira, 2013).
Vinha, et al., (2013) melaporkan bahwa kandungan total fenolik dan
flavonoid pada biji dan kulit Persea americana Mill. relatif hampir sama. Pada
penelitian Putri (2013), dilaporkan bahwa pemberian jangka panjang infusa biji
Persea americana Mill. mampu menurunkan aktivitas ALT-AST serum sebagai
indikator kerusakan hati pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida 2
mL/kgBB. Berdasarkan dua penelitian tersebut, peneliti ingin melihat pengaruh
pemberian jangka panjang infusa kulit Persea americana Mill. dengan dosis yang
sama, dalam mencegah kerusakan hati dengan melihat penurunan aktivitas ALP
serum tikus terinduksi karbon tetraklorida.
Pada umumnya, masyarakat menggunakan herbal dalam pengobatan
dengan metode perebusan. Oleh sebab itu, penelitian ini menggunakan ekstrak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
infusa, karena metode tersebut merupakan metode yang paling mendekati
kebiasaan masyarakat. Selain itu, senyawa yang dituju adalah senyawa fenolik
dan flavonoid yang dapat diekstrak dengan air panas (Singh, Verma, and Singh,
2012).
1. Perumusan masalah
Permasalahan yang diajukan dalam penelitian ini adalah:
a. Apakah pemberian infusa kulit Persea americana Mill. mempunyai
pengaruh terhadap penurunan aktivitas ALP serum pada tikus jantan
terinduksi karbon tetraklorida?
b. Apakah ada kekerabatan antara dosis pemberian dengan penurunan aktivitas
ALP serum tikus terinduksi karbon tetraklorida?
2. Keaslian penelitian
Sebelumnya pernah dilakukan penelitian yang berhubungan dengan Persea
americana Mill., diantaranya:
a. Putri (2013) melaporkan bahwa pemberian jangka panjang infusa biji
Persea americana Mill. mampu menurunkan aktivitas ALT-AST serum
terinduksi karbon tetraklorida.
b. Vinha, et al. (2013) melaporkan bahwa kandungan flavonoid dan fenolik
pada biji dan kulit Persea americana Mill. relatif hampir sama.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
c. Torres, Garbo, and Walde (2014) melaporkan bahwa ekstrak heksana dan
etanol dari kulit Persea americana Mill. dapat digunakan sebagai larvasida
alami untuk mengontrol vektor dengue.
d. Servillon, Dingal, Lusica, Yamson, and Balonebro (2014) melaporkan
bahwa ekstrak kulit Persea americana Mill. memiliki aktivitas antimikroba
seperti antibiotik Vancomycin dan Cefepime.
e. Carpena, Morcuende, Andrade, Kylli, and Estévez (2011) melaporkan
bahwa kulit Persea americana Mill. mengandung fenolik, memiliki
aktivitas antioksidan dan antimikroba, serta mampu menghambat oksidasi
lipid dan protein pada daging roti.
Berdasarkan penelusuran pustaka yang dilakukan, belum pernah ada
penelitian mengenai pengaruh pemberian infusa kulit Persea americana Mill.
terhadap aktivitas Alkali Fosfatase pada tikus jantan terinduksi karbon
tetraklorida.
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
Penelitian ini mampu memberikan informasi yang berhubungan dengan
pengaruh pemberian infusa kulit Persea americana Mill.
b. Manfaat praktis
Hasil penelitian ini mampu memberikan informasi kepada masyarakat
terkait kekerabatan antara dosis pemberian infusa kulit Persea americana
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
Mill. dengan penurunan aktivitas ALP sebagai salah satu pengobatan
alternatif kerusakan hati.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Mengetahui pengaruh pemberian jangka panjang infusa kulit Persea
americana Mill. terhadap penurunan aktivitas ALP serum pada tikus jantan
terinduksi karbon tetraklorida.
2. Tujuan khusus
a. Mengetahui pengaruh pemberian jangka panjang infusa kulit Persea
americana Mill. terhadap aktivitas ALP serum pada tikus jantan terinduksi
karbon tetraklorida.
b. Mengetahui kekerabatan antara dosis pemberian infusa kulit Persea
americana Mill. dengan penurunan aktivitas ALP serum pada tikus jantan
terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Hati
1. Anatomi dan fisiologi hati
Hati terletak di kuadran kanan atas abdomen di ruang peritoneum tepat di
bawah sisi kanan diafragma dan di bawah rongga dada (McPhee dan Ganong,
2010). Hati pada orang dewasa memiliki berat 1400-1600 gram, yaitu sekitar
2.5% berat badan. Hati menerima darah dari vena porta (60% sampai 70%) dan
arteri hepatica (30% sampai 40%) (Robbins dan Cotran, 2010).
Gambar 1. Struktur lobulus hati (McPhee dan Ganong, 2010).
Hati terdiri dari dua jenis sel utama, yaitu hepatosit dan sel Kupffer
(Gambar 1). Hepatosit aktif secara metabolis dan berasal dari epitel, sedangkan
sel Kupffer merupakan sel makrofag yang berada di lapisan dalam sinusoid
hepatik. Makrofag ini membunuh bakteri atau partikel asing yang masuk ke
vena porta melalui dinding usus halus. Sel-sel tersebut tersusun membentuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
satuan anatomik yang disebut lobulus, ditunjang oleh kerangka retikulin di
sekitar pembuluh vaskular yang disebut sinusoid. Antara sinusoid dengan
lempeng hepatosit terdapat ruang yang mengandung cairan interstisium (tanpa
eritrosit), tempat zat gizi dan produk sisa berdifusi untuk berpindah antara
darah sirkulasi dan hati (Sacher and McPherson, 2002; Shier, Butler, and
Lewis, 2006).
Darah masuk ke hati melalui dua sumber, yaitu arteri dan vena. Arteri
hepatika membawa darah arteri langsung dari aorta yang kaya oksigen dan
membawa produk sisa metabolik dari seluruh tubuh. Vena porta mengalirkan
darah yang sebelumnya mengalir melalui jaringan perifer limpa dan dari
saluran cerna. Cabang arteri hepatika dan vena porta mencapai bagian perifer
setiap lobulus melalui triad porta agar tercapai distribusi zat gizi yang
maksimum ke hapatosit. Dengan demikian, darah sinusoid adalah campuran
darah arteri dan vena. Vena sentral menerima semua darah dan mengambalikan
ke sirkulasi sistemik melalui vena hepatika yang besar, yang mengalirkannya
ke vena kava inferior. Dua pertiga darah yang beredar melalui hati berasal dari
vena porta, sisanya dari aorta, sehingga darah sinusoid mengandung lebih
sedikit oksigen dibanding darah yang masuk ke sebagian besar organ lain
(McPhee dan Ganong, 2010; Sacher and McPherson, 2002).
Empedu merupakan produk sekretori hati yang disekresikan oleh
hepatosit ke tubulus-tubulus halus, yang disebut kanalikulus biliaris.
Kanalikulus biliaris yang menyatu membentuk duktulus, yang menempati
kerangka jaringan ikat dan menunjang vena porta serta cabang arteri hepatika.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
Duktulus-duktulus empedu menyatu membentuk saluran empedu intrahati yang
semakin besar, akhirnya membentuk duktus ekstrahepatik yang mengalirkan
empedu dari hati ke kandung empedu (Sacher and McPherson, 2002).
2. Fungsi hati
Hati berperan penting dalam aktivitas metabolik. Hati berfungsi untuk
merombak sel darah merah yang tua; mengekskresi bilirubin sebagai produk
perombakan hemoglobin di empedu; detoksifikasi racun; menyimpan Fe2+
dan
vitamin A, D, E, dan K yang larut air; memproduksi protein plasma seperti
albumin dan fibrinogen; menyimpan glukosa sebagai glikogen setelah makan;
merombak glikogen menjadi glukosa untuk menjaga kadar glukosa dalam
darah; memproduksi urea hasil perombakan asam amino; dan membantu dalam
regulasi kolesterol dalam darah serta mengubahnya menjadi garam empedu
(Mader, 2010).
3. Jenis Kerusakan Hati
Toksin dapat merusak hati dengan berbagai jenis kerusakan seperti:
a. Perlemakan hati (Steatosis). Perlemakan hati dapat timbul karena konsumsi
berlebih dari alkohol atau racun dengan bahan kimia seperti CCl4,
dimetilnitrosamin, polyhalogenated biphenyls, atau fosfor. Steatosis
dikarakterisasi dengan penumpukan droplet trigliserida di sitoplasma, yang
dapat mengganggu sintesis dan transport lipoprotein (trigliserida, fosfolipid,
dan glikoprotein). Trigliserida dilepaskan di darah dalam bentuk VLDL.
Namun apabila sintesis lipoprotein terganggu, maka lipopreotein tersebut
tidak dapat disekresi ke dalam darah, dan terjadi penumpukan di sel hati
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
(Timbrell, 2009). Pemeriksaan yang dilakukan pada kerusakan ini adalah
pemeriksaan enzim alanin aminotransferase (ALT), aspartat
aminotransferase (AST), dan ALP (Dudgale, 2013).
b. Kematian hepatosit (Necrosis). Penampakan morfologi nekrosis merupakan
hasil denaturasi protein intraselular dan digesti enzimatik dari hepatosit
yang mati, ditandai dengan peningkatan jumlah eosinofil di sitoplasma dan
tampak homogen dibanding sel normal karena telah kehilangan glikogen
(Robins dan Cotran, 2010). Keparahan sel ini bergantung pada senyawa
toksik, dimana nekrosis bisa terjadi secara lokal maupun menyebar hingga
seluruh bagian hati. Pemeriksaan yang dapat dilakukan pada kerusakan ini
adalah pemeriksaan enzim ALT, AST, glutamate dehydrogenase (GLDH),
ornithine-carbonyl-transferase, γ-glutamyl transpeptidase, dan sorbitol
dehydrogenase (Timbrell, 2009).
c. Kolestasis. Kolestasis merupakan kondisi patologis karena gangguan
pembentukan maupun aliran cairan empedu, yang menyebabkan
penumpukan zat warna empedu pada parenkim hepatik. Pembentukan
empedu terjadi tergantung pada transportasi ATP empedu ke lumen
kanalikuli. Pada beberapa senyawa kimia tertentu yang dapat mempengaruhi
permeabilitas membran dan mengganggu gradien Na+ dan K
+, senyawa
tersebut dapat menyebabkan terjadinya kolestasis. Gangguan pembentukan
maupun aliran cairan empedu dapat terjadi akibat kerusakan kanal empedu
baik ekstra maupun intra hepatik, atau gangguan sekresi cairan empedu
hepatik. Karakteristik kolestatis hasil laboratorium ditunjukkan dengan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
peningkatan serum ALP dan GGT, enzim yang ada pada selaput hepatosit
dan sel epitel saluran empedu (Robins dan Cotran, 2010).
d. Sirosis. Akibat adanya inflamasi pada sel hati, maka sel hati memperbaiki
dengan membentuk bekas luka atau parut kecil yang disebut fibrosis.
Adanya fibrosis menyebabkan fungsi hati terganggu. Padahal, semakin
rusak hati, semakin banyak fibrosis yang terbentuk dan mulai menyatu, dan
disebut sirosis. Area hati yang rusak akibat sirosis dapat menjadi permanen
dan sikatriks sehingga darah tidak dapat mengalir dengan baik pada jaringan
hati yang rusak dan hati mulai menciut, serta menjadi keras (Direktorat Bina
Farmasi Komunitas dan Klinik, 2007).
4. ALP
Alkaline phosphatase (ALP) adalah protein yang ada di jaringan tubuh,
mengkatalisis hidrolisis ester fosfat organik dalam suasana basa (Pramushinta,
2008). Di mitokondria, ALP menghidrolisis ATP menjadi ADP dan Pi (Zhang,
Buchet, Azzar, 2004). ALP kadar tinggi terdapat dalam sel-sel yang cepat
membelah atau aktif secara metabolis, seperti di hati, saluran empedu, dan
tulang (Sacher and McPherson, 2002). Di hati, ALP dapat ditemukan di
mitokondria hepatosit dan membran plasma sel kanalikuli biliaris (Talwar and
Srivastava, 2003).
Untuk mengetahui aktivitas ALP dapat dilakukan pengukuran uji dengan
darah. Nilai normal aktivitas ALP manusia adalah 53-128 U/L pada pria dan
42-98 U/L pada wanita (Dudgale, 2013). Peningkatan aktivitas ALP memiliki
dua makna, yaitu peningkatan normal dan tidak normal. Peningkatan normal
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
biasanya terjadi pada wanita hamil dan anak-anak pada masa pertumbuhan.
Peningkatan tidak normal dapat terjadi karena obstruksi biliaris, tumor tulang
osteoblastik, osteomalasia, gangguan hati atau hepatitis, hiperparatiroid,
leukimia, atau limfoma (Dudgale, 2013).
Meningkatnya aktivitas ALP serum dari hati biasanya berkaitan dengan
kolestasis, tetapi tidak sepenuhnya spesifik untuk kolestasis. Peningkatan
kurang dari tiga kali lipat dapat dijumpai pada hampir semua jenis penyakit
hati (Longo dan Fauci, 2013). Peningkatan aktivitas ALP 3-10x dari nilai
normal menunjukkan adanya obstruksi biliaris ekstrahepatik oleh batu, oklusi
inkomplit, duktus intrahepatik atau ekstrahepatik, sedangkan peningkatan lebih
dari 10x nilai normal menunjukkan adanya sirosis biliaris primer,obstruksi
duktus biliaris ekstrahepatik oleh tumor, infiltrasi granulomatosa atau
neoplastik daerah porta, serta atresia kongenital duktus biliaris intrahepatik
(Sacher and McPherson, 2002). Aktivitas enzim ALP digunakan sebagai
indikator adanya gangguan sistem sekresi hati (Ernawati, 2006).
B. Karbon Tetraklorida
Karbon tetraklorida merupakan cairan jernih yang mudah menguap, tidak
berwarna, dengan aroma yang manis, berbau menyengat agak menyerupai
kloroform, memiliki titik didih 76,8°C. Cairan yang mempunyai titik lebur -23°C
ini dapat larut dalam etanol, aseton, naphtha; dapat dicampur dengan alkohol,
benzen, kloroform, eter, karbon disulfida, petroleum eter, minyak; tetapi sangat
sukar larut dalam air. Karbon tetraklorida yang memiliki berat molekul 153,8227
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
g/mol dapat mengalami dekomposisi menjadi bentuk klorin dan phosgene
(Phillips, 2014).
Karbon tetraklorida diproduksi dalam jumlah besar untuk cairan lemari
pendingin dan propellants untuk kaleng aerosol, sebagai pelarut minyak, lemak,
pernis, wax, karet dan resin, dan bahan pembersih. Sejak tahun 2002, penggunaan
karbon tetraklorida sudah dilarang di masyarakat karena akan mempengaruhi
organ hati, ginjal, dan sistem saraf pusat, baik paparan melalui inhalasi maupun
oral, bila terpapar pada manusia. Namun penggunaan cairan ini masih dapat
dijumpai di kawasan industri (McCarthy, 2000).
Gambar 2. Metabolisme karbon tetraklorida di hati (Timbrell, 2009).
Hati adalah target utama akibat toksisitas karbon tetraklorida, karena
karbon tetraklorida (CCl4) dimetabolisme oleh enzim CYP2E1 yang banyak
terdapat di hati. Metabolisme karbon tetraklorida menghasilkan radikal
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
triklorometil (●CCl3) (Gambar 2). Senyawa radikal ini akan mengalami beberapa
reaksi. Radikal triklorometil akan mengikat lemak mikrosomal dan protein,
kemudian bereaksi langsung dengan membran fosfolipid dan kolesterol yang akan
menimbulkan efek toksik; dengan atom hidrogen akan membentuk klorofom;
dengan oksigen akan membentuk peroksidasi lipid yang toksik; dan dengan
oksigen akan membentuk radikal peroksi triklorometil (Timbrell, 2009).
Pembentukan peroksidasi lipid di retikulum endoplasma (RE) akan menyebabkan
membran mengalami autokatalitis. Kurang dari 30 menit setelah pemaparan,
terjadi pemecahan lemak tak jenuh yang memberikan senyawa karbonil, seperti 4-
hydroxynenal dan hydroxyalkenal yang dapat menghambat sintesis enzim dan
protein plasma. Selama 2 jam setelah pemaparan CCl4 terjadi pembengkakan RE
halus serta pemisahan ribosom dari RE halus (Kumar, Abbas, Fausto, and
Mitchell, 2007).
Pemejanan karbon tetraklorida dapat mengakibatkan trigliserida
menumpuk di hepatosit dan tampak sebagai droplet lipid. Lipid dalam hepatosit
ini menghambat sintesis protein, dan mengakibatkan berkurangnya produksi
lipoprotein kompleks. Lipoprotein kompleks bertanggung jawab terhadap
transport lipid keluar dari hepatosit. Gangguan ini mengakibatkan lipid
terakumulasi dalam hepatosit dan terjadi steatosis (Timbrell, 2009). Selain itu,
terjadi pula kerusakan pada mitokondria, penurunan jumlah ATP sebagai hasil
kegagalan transport ion dan pembengkakan sel yang progresif; kerusakan
membran plasma akibat produksi aldehid lemak dari peroksidasi lipid di RE. Pada
akhirnya, toksisitas CCl4 akan menyebabkan terjadinya influks kalsium dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
kematian sel (Kumar, et al., 2007). Peningkatan aktivitas ALP di darah dapat
terjadi akibat adanya kebocoran membran plasma sel (Sacher and McPherson,
2002) serta pembengkakan sel hepatosit akibat paparan CCl4 yang menyebabkan
kanalikuli biliaris terdesak dan mengalami penyempitan sehingga terjadi
kolestasis (Gupta, 2012).
C. Persea americana Mill.
1. Taksonomi
Kerajaan : Plantae (Tumbuhan)
Sub kerajaan : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Super divisi : Spermatophyta (Tumbuhan berbiji)
Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas : Magnoliopsida (Berkeping dua atau dikotil)
Sub kelas : Magnoliidae
Bangsa : Laurales
Keluarga : Lauraceae
Genus : Persea
Varietas : P. americana Mill. (USDA, 2014)
2. Nama lain
Butter fruit, Avocado, Avocado-pear, Alligator pear (Inggris); Avocat,
Avocatier, Zaboka, Zabelbok (Perancis); Avocadobirne (Jerman); Avokad,
Adpukat (Indonesia); Apukado, Avokado (Malaysia); Pagua, Aguacate
(Spanyol); Awokado (Thailand) (World Agroforestry Centre, 2002).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
3. Morfologi
Tanaman P. americana Mill. dapat tumbuh di iklim tropis maupun
subtropis, daunnya berwarna hijau (Idris, Ndukwe, Gimba, 2009), tinggi
tanaman P. americana Mill. mencapai 9-20 m (World Agroforestry Centre,
2002). Daun P. americana Mill. memiliki panjang 7-41 cm dengan berbagai
variasi bentuk (elips, oval, lanset), berwarna merah saat muda dan menjadi
kasar serta berwarna hijau tua saat matang. Bunganya berwarna hijau
kekuningan dan berdiameter 1-1,3 cm (World Agroforestry Centre, 2002).
Kulit buah P. americana Mill. berwarna hijau dan berdaging tebal berwarna
kuning (Leite, Brito, Cordeliro, Brilhante, Sidrim, Bertini, et al., 2009), lembut
dan bertekstur seperti krim (Alhassan, Sule, Atiku, Wudil, Abubakar,
Mohammed, 2012).
4. Kandungan kimia
Dalam penelitiannya, Vinha, et al. (2013) menemukan bahwa kulit
Persea americana Mill. memiliki kandungan fenolik, flavonoid, karotenoid,
vitamin C, dan vitamin E.
5. Khasiat dan kegunaan
Daun Persea americana Mill. dapat dimanfaatkan sebagai diuretik,
astringen, mengobati batuk, pelancar menstruasi, emollient, dan antibakteri
(Hariana, 2007). Persea americana Mill. juga banyak digunakan dalam
Ayurveda serta berbagai pengobatan seperti monorrhagia, hipertensi, bronkitis,
dan diare (Yasir, Das, and Kharya, 2010). Ekstrak heksana dan etanol dari kulit
Persea americana Mill. dapat digunakan sebagai larvasida (Torres, et al.,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
2014); ekstrak kulit Persea americana Mill. memiliki aktivitas antimikroba
(Servillon, et al., 2014); serta mampu menghambat oksidasi lipid dan protein
pada daging roti (Carpena, et al., 2011).
D. Landasan Teori
Hati adalah kelenjar terbesar pada tubuh manusia dengan berat 1400-
1600 gram pada orang dewasa (Robbins dan Cotran, 2010), berperan penting
dalam aktivitas metabolik, seperti merombak sel darah merah yang tua,
mengekskresi bilirubin, detoksifikasi racun, dan memproduksi protein plasma
(Mader, 2010). Aktivitas ALP di atas nilai normal menunjukkan adanya penyakit
tertentu, seperti gangguan hati (Dudgale, 2013), dan dapat digunakan sebagai
indikator adanya gangguan sistem sekresi hati (Ernawati, 2006).
Karbon tetraklorida merupakan senyawa model yang mampu
menginduksi kerusakan hati. Karbon tetraklorida yang dimetabolisme oleh
CYP2E1 akan menghasilkan radikal bebas triklorometil. Radikal bebas tersebut
akan mengalami berbagai reaksi. Salah satu reaksinya mengakibatkan terjadinya
peroksidasi lipid yang dapat menghambat sintesis protein. Sintesis protein yang
terhambat mengakibatkan produksi lipoprotein menurun dan terjadi
penghambatan transport lipid keluar dari hepatosit. Penumpukan lipid dalam
hepatosit inilah yang disebut steatosis. Peroksidasi lipid juga dapat mengganggu
homeostasis Ca2+
sehingga menyebabkan kematian sel (Timbrell, 2009).
Pada penelitian yang dilakukan Putri (2013), pemberian jangka panjang
infusa biji Persea americana Mill. mampu memberikan efek hepatoprotektif
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
dengan melihat penurunan aktivitas serum ALT-AST pada tikus terinduksi karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB. selain itu, mengacu pada penelitian Vinha, et al., (2013),
kandungan total fenolik dan flavonoid pada biji dan kulit Persea americana Mill.
relatif hampir sama. Berdasarkan hal tersebut, maka dilakukan penelitian yang
nantinya akan diketahui pengaruh pemberian jangka panjang infusa kulit Persea
americana Mill. dalam mencegah kerusakan hati dengan melihat penurunan
aktivitas ALP serum tikus terinduksi karbon tetraklorida.
E. Hipotesis
Pemberian jangka panjang infusa kulit Persea americana Mill. dapat
menurunkan aktivitas ALP pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan
rancangan acak lengkap pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
Variabel-variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah:
1. Variabel utama
a. Variabel bebas. Variasi dosis pemberian infusa kulit Persea americana
tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida.
b. Variabel tergantung. Penurunan aktivitas enzim alkali fosfatase tikus
jantan terinduksi karbon tetraklorida setelah pemberian infusa kulit Persea
americana selama 6 hari.
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam
penelitian ini adalah kondisi hewan uji yang digunakan, yaitu tikus jantan
galur Wistar yang berumur 2-3 bulan, dengan berat badan antara 150-250
gram; cara pemberian hepatotoksin secara intraperitoneal; cara pemberian
infusa kulit Persea americana secara per oral; frekuensi waktu pemberian
infusa kulit Persea americana Mill. (satu kali sehari selama 6 hari
berturut-turut dengan waktu pemberian yang sama); dan bahan uji berupa
kulit Persea americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
b. Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam
penelitian ini adalah kondisi patologis dari tikus jantan galur Wistar yang
digunakan sebagai hewan uji.
3. Definisi operasional
a. Infusa kulit Persea americana Mill. Infusa serbuk kering kulit Persea
americana Mill. didapatkan dengan cara menginfundasi 8 gram serbuk
kering kulit Persea americana Mill. dalam 100,0 ml air pada suhu 90°C
selama 15 menit.
b. Pemberian jangka panjang. Didefinisikan sebagai pemberian infusa kulit
Persea americana Mill. satu kali sehari selama enam hari berturut-turut
dalam waktu pemberian yang sama.
c. Penurunan aktivitas ALP. Didefinisikan sebagai penurunan aktivitas ALP
serum tikus dosis perlakuan yang dibandingkan dengan aktivitas ALP
serum tikus kontrol hepatotoksin.
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus jantan galur
Wistar yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan 150-250 gram yang
diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
b. Bahan uji yang digunakan adalah kulit Persea americana Mill. yang
diperoleh dari salah satu depot es di Yogyakarta selama bulan Juni-Juli
2014.
2. Bahan kimia
a. Bahan hepatotoksin yang digunakan adalah karbon tetraklorida yang diperoleh
dari Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta.
b. Pelarut hepatotoksin digunakan larutan olive oil Bertoli® yang diperoleh
dari Supermarket Mirota Kampus, Yogyakarta.
c. Kontrol negatif yang digunakan adalah olive oil Bertoli®.
d. Pelarut untuk infusa digunakan aquadest yang diperoleh dari Laboratorium
Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
e. Reagen serum ALP
Komposisi dan konsentrasi dari reagen ALP Abbott yang digunakan adalah
sebagai berikut.
Tabel I. Komposisi dan konsentrasi reagen ALP Abbott Komposisi Konsentrasi
Reagen 1
2-Amino-2-methylpropanol >1.2 mol/L
Magnesium >7.2 mmol/L
Zinc Sulfate >3.6 mmol/L
HEDTA >7.2 mmol/L
Reagen 2
4-Nitrophenyl Phospate >171.6 mmol/L
D. Alat dan Instrumen Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain oven, mesin
penyerbuk, ayakan, panci enamel, termometer, stopwatch, beaker glass, gelas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
ukur, cawan porselen, penangas air, kain flannel, tabung reaksi, labu ukur, pipet
tetes, batang pengaduk (Pyrex Iwaki Glass®), timbangan analitik Mettler
Toledo®, sentrifuge Centurion Scientific®, vortex Genie Wilten®, spuit injeksi
per oral dan syringe 3 cc Terumo®, pipa kapiler, tabung Eppendorf, dan moisture
balance.
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi Persea americana Mill.
Determinasi dilakukan dengan mencocokkan Persea americana Mill.
yang diperoleh dari salah satu depot es di Yogyakarta dengan buku acuan.
2. Pengumpulan bahan uji
Bahan uji yang digunakan adalah kulit Persea americana Mill. yang
masih segar dan tidak busuk selama bulan Juni-Juli 2014.
3. Pembuatan serbuk kulit Persea americana Mill.
Kulit Persea americana Mill. dicuci bersih dan dipisahkan dari kulitnya.
Setelah itu, kulit dipotong-potong lalu dikeringkan dalam oven pada suhu 50°C
selama 24 jam. Setelah kulit benar-benar kering, kulit dihaluskan dan diayak
dengan ayakan nomor 40 agar kandungan fitokimia dalam kulit Persea
americana Mill. lebih mudah terekstrak karena luas permukaan serbuk lebih
besar.
4. Penetapan kadar air pada serbuk kering kulit Persea americana Mill.
Serbuk kering kulit Persea americana Mill. yang sudah diayak,
dimasukkan ke dalam alat moisture balance sebanyak ± 5 g kemudian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
diratakan. Bobot serbuk kering kulit tersebut ditetapkan sebagai bobot sebelum
pemanasan (bobot A), setelah itu dipanaskan pada suhu 110°C. Serbuk kering
kulit Persea americana Mill. yang sudah dipanaskan ditimbang kembali dan
dihitung sebagai bobot setelah pemanasan (bobot B). Kemudian dilakukan
perhitungan terhadap selisih bobot A terhadap bobot B yang merupakan kadar
air serbuk kulit Persea americana Mill.
5. Pembuatan infusa serbuk kulit Persea americana Mill.
Serbuk kering kulit Persea americana Mill. ditimbang 8,0 g dan
dimasukkan ke dalam 16,0 ml pelarut aquadest dan kemudian ditambahkan lagi
aquadest sebanyak 100,0 ml, kemudian dipanaskan pada suhu 90°C dan dijaga
tetap dalam suhu tersebut selama 15 menit. Waktu 15 menit dihitung ketika
suhu campuran mencapai 90°C. Setelah 15 menit, campuran tersebut diambil
dan diperas menggunakan kain flanel kemudian tambahkan air panas
secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infusa kulit Persea
americana Mill. yang dikehendaki.
6. Pembuatan larutan karbon tetraklorida
Larutan karbon tetraklorida dibuat dalam konsentrasi 50%, dengan cara
melarutkan 50 ml karbon tetraklorida ke dalam olive oil sebanyak 50 ml
berdasarkan hasil penelitian Janakat dan Al-Merie (2002).
7. Uji pendahuluan
a. Penetapan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida. Pemilihan dosis ini
dilakukan untuk mengetahui pada dosis berapa karbon tetraklorida mampu
menyebabkan kerusakan hati tikus yang ditandai dengan peningkatan ALT-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
AST dalam serum darah paling tinggi. Dosis hepatotoksik ini mengacu
pada penelitian Janakat dan Al-Merie (2002) dan orientasi melalui induksi
hewan uji dengan karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara i.p.
b. Penetapan dosis infusa kulit Persea americana Mill. Berdasar penelitian
yang dilakukan Putri (2013), konsentrasi infusa biji Persea americana Mill.
yang mampu memberikan efek hepatoprotektif adalah 8 g/100 mL. Selain
itu, mengacu pada penelitian Vinha, et al. (2013), kandungan flavonoid
pada kulit dan biji Persea americana Mill. relatif sama. Maka penelitian ini
menggunakan dosis seperti pada penelitian yang dilakukan Putri.
Peringkat dosis didasarkan pada pengobatan yang biasa digunakan pada
masyarakat yaitu ± 2 sendok makan (4 g) serbuk kulit Persea americana
Mill. yang direbus dengan 250 ml air. Maka dosis perlakuan yang
digunakan adalah 4 g/70 kgBB manusia. Konversi dosis tikus (manusia 70
kg ke tikus 200g) = 0,018.
Dosis untuk 200 g tikus = 0,018 x 4g = 0,72 g/200 g BB = 360 mg/kgBB
sebagai dosis rendah. Konsentrasi maksimal infusa kulit Persea americana
Mill. yang dapat dibuat adalah 8 g/ 100 ml, dengan asumsi berat badan
hewan uji maksimal adalah 250 g, dan volume maksimal pemberian infusa
secara p.o = 5 ml. Berdasarkan perhitungan,
D x 250 g = 8 g/ 100ml x 5 ml
D = 1600 mg/kgBB, dosis ini disebut dosis tinggi perlakuan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
Untuk mendapatkan dosis tengah perlakuan, terlebih dahulu dihitung faktor
kelipatan dari dosis rendah dan dosis tinggi yang sudah diperoleh.
Perhitungan faktor kelipatan adalah sebagai berikut :
𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑡𝑖𝑛𝑔𝑔𝑖
𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑟𝑒𝑛𝑑𝑎ℎ
𝑛−1
N = Jumlah peringkat dosis yang digunakan. Penelitian ini menggunakan 3
peringkat dosis maka n = 3, sehingga perhitungannya sebagai berikut :
1600
360
3−1= 2,1 (faktor kelipatan)
Berdasarkan faktor kelipatan yang diperoleh maka dosis tengah dan dosis
rendah perlakuan ditentukan sebagai berikut,
D = 1600 mg/ kgBB : 2,1 = 761,90 mg/ kgBB (dosis tengah)
D = 761,90 mg/ kgBB : 2,1 = 362,81 mg/ kgBB (dosis rendah)
c. Penetapan waktu pencuplikan darah
Berdasarkan penelitian Janakat dan Al-Merie (2002), waktu optimum
kenaikan serum ALT-AST akibat pemejanan karbon tetraklorida 2 ml/kgBB
adalah pada jam ke-24. Penetapan waktu pencuplikan ini ditentukan dengan
orientasi tiga kelompok perlakuan waktu, yaitu pada jam ke–0, 24, dan 48
setelah pemejanan karbon tetraklorida. Setiap kelompok perlakuan terdiri
dari 5 hewan uji yang pengambilan darahnya dilakukan melalui pembuluh
sinus orbitalis mata kemudian diukur aktivitas ALT-AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
8. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji
Digunakan 30 ekor tikus jantan galur Wistar sebagai hewan uji yang
dibagi secara acak dalam 6 kelompok perlakuan masing-masing sejumlah lima
ekor tikus.
a. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi larutan karbon tetraklorida : olive
oil (1:1) dosis 2 ml/kgBB secara i.p.
b. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dosis 2 ml/kgBB secara i.p.
c. Kelompok III (kontrol IKPA) diberi infusa kulit P. americana Mill. dosis
1600 mg/kgBB secara p.o. selama 6 hari berturut-turut.
d. Kelompok IV (IKPA dosis 362,81 mg/kgBB) diberi infusa kulit P.
americana Mill. secara p.o. sekali sehari selama 6 hari berturut-turut.
e. Kelompok V (IKPA dosis 761,90 mg/kgBB) diberi infusa kulit P.
americana Mill. secara p.o. sekali sehari selama 6 hari berturut-turut.
f. Kelompok VI (IKPA dosis 1600 mg/kgBB) diberi infusa kulit P. americana
Mill. secara p.o. sekali sehari selama 6 hari berturut-turut.
Pada hari ketujuh kelompok IV-VI diberi larutan karbon tetraklorida
dosis 2 ml/kgBB secara intraperitonial. Setelah 24 jam paska induksi karbon
tetraklorida, tikus diambil darahnya melalui sinus orbitalis mata, kemudian
diukur aktivitas ALP.
9. Pembuatan serum
Darah diambil melalui sinus orbitalis mata hewan uji dan ditampung
dalam tabung Eppendorf dan didiamkan selama 15 menit, lalu disentrifugasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
selama 15 menit dengan kecepatan 5000 rpm, lalu dipisahkan bagian
supernatannya.
10. Pengukuran aktivitas ALP
Penetapan aktivitas ALP ditetapkan berdasarkan reaksi enzimatik
menggunakan reagen kit Abbott® ALP yang terdiri dari reagen 1 (2-Amino-2-
methylpropanol > 1.2 mol/L, Magnesium > 7.2 mmol/L, Zinc Sulfate > 3.6
mmol/L, dan HEDTA > 7.2 mmol/L) dan reagen 2 (4-Nitrophenyl Phosphate >
171.6 mmol/L). Prosedur penetapan aktivitas ALP berdasarkan prosedur kerja
dari Abbott®. Pengukuran aktivitas ALP ini dilakukan di Laboratorium
Parahita, Yogyakarta.
F. Tata Cara Analisis Hasil
Data aktivitas ALP diuji dengan Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui
distribusi data tiap kelompok hewan uji. Apabila didapat distribusi data yang
normal maka analisis dilanjutkan dengan analisis pola searah (One Way ANOVA)
dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing
kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk melihat perbedaan
masing-masing antar kelompok bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak
bermakna (tidak signifikan) (p>0,05). Namun bila didapatkan distribusi tidak
normal, maka dilakukan analisis dengan uji Kruskal Wallis untuk mengetahui
perbedaan aktivitas ALP antar kelompok. Setelah itu dilanjutkan dengan uji Mann
Whitney untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan tiap kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian jangka
panjang infusa kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas ALP serum dan
mengetahui kekerabatan antara dosis pemberian infusa kulit Persea americana
Mill. dengan penurunan aktivitas ALP yang dihasilkan pada tikus jantan
terinduksi karbon tetraklorida.
Hasil penelitian yang akan dibahas adalah determinasi Persea americana
Mill., penetapan kadar air serbuk kulit Persea americana Mill., dan pemeriksaan
aktivitas ALP serum.
A. Determinasi Persea americana Mill.
Determinasi bertujuan untuk memastikan bahwa bahan yang digunakan
untuk penelitian memang benar bahan yang dimaksud, di mana pada penelitian ini
bahan yang digunakan adalah kulit Persea americana Mill. Determinasi dilakukan
secara makroskopis dengan mencocokkan Persea americana Mill. yang diperoleh
dari salah satu depot es di Yogyakarta dengan buku acuan. Hasil determinasi yang
diperoleh adalah kulit yang digunakan benar kulit Persea americana Mill.
B. Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air dari serbuk kulit Persea americana Mill. bertujuan
untuk mengetahui serbuk tersebut telah memenuhi persyaratan serbuk yang baik,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
yaitu kurang dari 10% (Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).
Penetapan kadar air serbuk kulit Persea americana Mill. ditetapkan di LPPT
Universitas Gajah Mada Yogyakarta dengan metode gravimetri. Hasil penetapan
kadar air sebuk kulit Persea americana Mill. memiliki kadar sebesar 7,1%, hal ini
menunjukkan bahwa kadar air serbuk kulit Persea americana Mill. memenuhi
persyaratan serbuk yang baik.
C. Penentuan Dosis Infusa
Berdasar penelitian yang dilakukan Putri (2013), konsentrasi infusa biji
Persea americana Mill. yang mampu memberikan efek hepatoprotektif adalah 8
g/100 mL. Selain itu, mengacu pada penelitian Vinha, et al. (2013), kandungan
flavonoid pada kulit dan biji Persea americana Mill. tidak berbeda bermakna.
Maka penelitian ini menggunakan konsentrasi dosis seperti pada penelitian yang
dilakukan Putri, dengan dosis pemberian infusa kulit Persea americana Mill.
1600 mg/kgBB sebagai dosis tinggi; 761,90 mg/kgBB sebagai dosis tengah; dan
362,81 mg/ kgBB sebagai dosis rendah.
D. Penentuan Dosis Hepatotoksik Karbon Tetraklorida
Penentuan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida bertujuan untuk
mengetahui dosis karbon tetraklorida yang mampu menyebabkan kerusakan hati
tikus dengan tanda peningkatan aktivitas ALP dalam serum darah. Dosis
hepatotoksik ini mengacu pada penelitian Janakat dan Al-Merie (2002) dan hasil
orientasi melalui induksi hewan uji dengan karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
secara i.p. Di mana dosis tersebut menyebabkan kerusakan ringan pada hati
berupa steatosis (Timbrell, 2009).
Pada saat orientasi, peneliti menggunakan ALT sebagai parameter
kerusakan hati akibat toksisitas karbon tetraklorida. Hal ini mengacu pada
penelitian Vohra dan Gupta (2013) bahwa kerusakan hati akibat paparan karbon
tetraklorida mengakibatkan peningkatan aktivitas ALT yang sebanding dengan
peningkatan ALP.
E. Penentuan Waktu Pencuplikan Darah
Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji bertujuan untuk
mengetahui waktu optimal karbon tetraklorida 2 mL/kgBB yang mampu
memberikan efek kerusakan hati maksimal berdasar kenaikan aktivitas serum
ALT-AST tertinggi pada tikus. Karbon tetraklorida 2 mL/kgBB diinduksikan pada
tikus, kemudian tikus diambil darahnya dengan selang waktu 0, 24, dan 48 jam.
Tabel II. Rata-rata aktivitas serum tikus paska induksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam (n=3)
Selang waktu (jam) Rata-rata aktivitas serum ALT ± SE (mg/dL)
0 72,3 ± 4,5
24 217,3 ± 2,1
48 90,3 ± 2,9
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas serum tikus paska induksi
karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam.
Uji Kolmogorov-Smirnov pada aktivitas serum ALT tikus jam ke-0, 24,
dan 48 menunjukkan signifikansi 0, 999 (p>0,05); 0,944 (p>0,05); dan 1,000
(p>0,05). Hasil analisis pola searah One Way ANOVA menunjukkan signifikansi
0,515 (p>0,05), sehingga dapat disimpulkan bahwa variansi data homogen.
Kemudian data dianalisis dengan uji Scheffe untuk mengetahui kebermaknaan
perbedaan antar kelompok tersebut.
Tabel III. Hasil uji Scheffe aktivitas serum tikus paska induksi karbon tetraklorida
dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, dan 48 jam
Selang waktu (jam) 0 24 48
0 B TB
24 B B
48 TB B
Keterangan: B= Berbeda bermakna (p0,05); TB= Berbeda
tidak bermakna (p>0,05).
Pada tabel II, nampak bahwa aktivitas serum ALT tertinggi terjadi pada
pencuplikan darah jam ke-24 (217,3 ± 2,1 mg/dL). Hasil uji Scheffe pun
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
menunjukkan bahwa peningkatan aktivitas serum ALT jam ke-24 yang terjadi
signifikan dan berbeda bermakna dibandingkan dengan jam ke-0 dan 48. Hal ini
menunjukkan bahwa terjadi kerusakan hati dengan parameter peningkatan
aktivitas ALT serum tersebut. Pada jam ke-48, aktivitas ALT serum tikus
mengalami penurunan (90,3 ± 2,9 mg/dL) yang secara statistik berbeda tidak
bermakna terhadap jam ke-0. Hal ini menunjukkan bahwa pada jam ke-48 fungsi
hati kembali normal. Berdasarkan analisis tersebut, maka ditetapkan waktu
pencuplikan darah aktivitas serum ALT paska induksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB adalah jam ke-24.
F. Penentuan Lama Pemejanan Infusa Kulit Persea americana Mill.
Penentuan lama pemejanan infusa kulit Persea americana Mill.
berdasarkan penelitian Putri (2013) yang berjudul “Efek Hepatoprotektif Infusa
Biji Persea americana Mill. terhadap Aktivitas ALT-AST Serum pada Tikus
Terinduksi Karbon Tetraklorida”, yaitu pemejanan ekstrak selama 6 hari berturut-
turut, kemudian pada hari ketujuh hewan uji diinduksi karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB.
G. Hasil Uji Pengaruh Pemberian Infusa Kulit Persea americana Mill.
Penelitian ini diawali dengan pemejanan infusa kulit Persea americana
Mill. pada hewan uji satu kali sehari selama 6 hari, kemudian diinduksi karbon
tetraklorida untuk melihat pengaruh pemberiannya. Data aktivitas ALP serum
dianalisis dengan One Way ANOVA untuk melihat homogenitas dan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
signifikansinya. Kemudian data kebermaknaan perbedaan antar perlakuan diuji
dengan uji Scheffe (tabel V).
Tabel IV. Rata-rata ± SE aktivitas ALP serum tikus pada kelompok perlakuan
Kelompok Perlakuan
Rerata
aktivitas ALP
± SE (mg/dL)
I Kontrol CCl4 dosis 2 mL/kgBB 440,2 ± 37,7
II Kontrol olive oil dosis 2 mL/kgBB 274,2 ± 25,7
III IKPA 1600 mg/kgBB 242,6 ± 14,5
IV IKPA 362,81 mg/kgBB + CCl4 dosis
2 mL/kgBB 167,0 ± 10,4
V IKPA 761,90 mg/kgBB + CCl4 dosis
2 mL/kgBB 236,4 ± 17,1
VI IKPA 1600 mg/kgBB + CCl4 dosis 2
mL/kgBB 504,4 ± 49,4
Keterangan: IKPA= Infusa Kulit Persea americana Mill.
Gambar 4. Diagram batang rata-rata ± SE aktivitas ALP serum tikus pada
kelompok perlakuan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas ALP serum tikus pada kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
hepato-
toksin
Kontrol
negatif
Kontrol
IKPA
IKPA
362,81 +
CCl4
IKPA
761,90 +
CCl4
IKPA
1600 +
CCl4
Kontrol
hepatotoksin B B B B TB
Kontrol
negatif B TB TB TB B
Kontrol
IKPA B TB TB TB B
IKPA 362,81
+ CCl4 B TB TB TB B
IKPA 761,90
+ CCl4 B TB TB TB B
IKPA 1600 +
CCl4 TB B B B B
Keterangan: IKPA= Infusa kulit Persea americana Mill.; B= Berbeda bermakna
(p0,05); TB= Berbeda tidak bermakna (p>0,05).
H. Kontrol Olive Oil Dosis 2 mL/kgBB
Pengukuran aktivitas ALP pada kontrol olive oil bertujuan untuk
menegaskan bahwa pelarut (olive oil) yang digunakan tidak memberikan
pengaruh hepatotoksik terhadap serum tikus. Penggunaan dosis pada olive oil
sama dengan dosis CCl4 agar hasilnya nanti dapat dibandingkan, sehingga
diperoleh pembuktian bahwa peningkatan aktivitas ALP pada serum tikus murni
karena CCl4.
Berdasarkan penelitian Rosari (2013) dan Putri (2013), penggunaan olive
oil dosis 2 mL/kgBB tidak memberikan efek hepatotoksik berupa peningkatan
aktivitas ALT. Adapun Vohra dan Gupta (2013) melaporkan bahwa peningkatan
aktivitas ALT sebanding dengan peningkatan aktivitas ALP. Berdasarkan
penelitian tersebut, maka peneliti menggunakan olive oil sebagai pelarut
hepatotoksin. Aktivitas ALP serum kontrol olive oil 274,2 ± 25,7 mg/dL dapat
digunakan sebagai acuan normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
I. Kontrol Karbon Tetraklorida Dosis 2 mL/kgBB
Pengukuran aktivitas ALP pada kontrol karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
bertujuan untuk mengetahui pengaruh hepatotoksik senyawa model. Panjaitan,
Handharyani, Chairul, Masriani, Zakiah, dan Manalu (2007) melaporkan bahwa
pemberian karbon tetraklorida 1,0 mL/kgBB menyebabkan peningkatan aktivitas
ALP serum tikus 1,6 kali dari nilai normal dan hasil uji histopatologi
menunjukkan bahwa efek hepatotoksik yang ditimbulkan berupa steatosis.
Aktivitas ALP serum tikus kelompok kontrol hepatotoksin yang diberi
perlakuan CCl4 2 mL/kgBB (440,2 ± 37,7 mg/dL) bila dibandingkan dengan
kelompok kontrol negatif yang diberi perlakuan olive oil 2 mL/kgBB (274,2 ±
25,7 mg/dL) pada uji Scheffe menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna dan
terjadi peningkatan aktivitas ALP serum tikus 1,6 kali (Tabel V). Peningkatan
aktivitas ALP pada kontrol hepatotoksin ini membuktikan bahwa karbon
tetraklorida menyebabkan kerusakan pada hati.
J. Kontrol Infusa Kulit Persea americana Mill. (IKPA)
Dosis 1600 mg/kgBB
Pengukuran aktivitas ALP pada kontrol IKPA bertujuan untuk
mengetahui pengaruh pemberian IKPA terhadap hati tanpa pemberian toksin
karbon tetraklorida, apakah memberikan efek hepatotoksik atau tidak. Dosis yang
digunakan dalam kontrol ini adalah dosis tertinggi, karena diharapkan dosis ini
mampu menggambarkan kondisi hati dengan pemberian dosis di bawahnya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Aktivitas ALP serum tikus pada kelompok kontrol IKPA (242,6 ± 14,5
mg/dL) bila dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif (274,2 ± 25,7 mg/dL)
pada uji statistik menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna. Namun apabila
dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin, terdapat perbedaan yang
bermakna. Hal ini membuktikan bahwa pemberian IKPA dosis 1600 mg/kgBB
tidak menimbulkan peningkatan aktivitas ALP serum, yang mengindikasikan
tidak terjadi kerusakan di hati tikus.
K. Kelompok Perlakuan Infusa Kulit Persea americana Mill. (IKPA)
Dosis 362,81; 761,90; dan 1600 mg/kgBB pada Tikus Jantan
Terinduksi Karbon Tetraklorida Dosis 2 mL/kgBB
Penurunan aktivitas ALP serum tikus akibat pemberian IKPA berbagai
dosis perlu dievaluasi untuk mengetahui pengaruh hepatoprotektif sediaan
tersebut. Evaluasi ini dilakukan pada hari kedelapan setelah hewan uji diberi
IKPA selama enam hari berturut-turut, kemudian pada hari ketujuh hewan uji
diinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB.
Kelompok IKPA 362,81 mg/kgBB yang memiliki aktivitas ALP 167,0 ±
10,4 mg/dL dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin yang memiliki
aktivitas ALP 440,2 ± 37,7 mg/dL menunjukkan adanya perbedaan yang
bermakna (Tabel V). Namun apabila kelompok IKPA 362,81 mg/kgBB
dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif yang memiliki aktivitas ALP
274,2 ± 25,7 mg/dL, terlihat adanya perbedaan yang tidak bermakna (Tabel V).
Hal ini membuktikan bahwa IKPA dosis rendah mempunyai efek dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
menurunkan aktivitas ALP serum tikus terinduksi karbon tetraklorida, yang mana
aktivitas ALP setara seperti keadaan normal.
Kelompok IKPA 761,90 mg/kgBB yang memiliki aktivitas ALP 236,4 ±
17,1 mg/dL dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin yang memiliki
aktivitas ALP 440,2 ± 37,7 mg/dL menunjukkan adanya perbedaan yang
bermakna (Tabel V). Namun apabila kelompok IKPA 761,90 mg/kgBB
dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif yang memiliki aktivitas ALP
274,2 ± 25,7 mg/dL, terlihat adanya perbedaan yang tidak bermakna (Tabel V).
Aktivitas ALP serum tikus pada kelompok IKPA 761,90 mg/kgBB setara dengan
kelompok kontrol negatif, yaitu seperti keadaan normal. Hal ini membuktikan
bahwa IKPA dosis tengah mempunyai efek dalam menurunkan aktivitas ALP
serum tikus terinduksi karbon tetraklorida.
Kelompok IKPA 1600 mg/kgBB yang memiliki aktivitas ALP 504,4 ±
49,4 mg/dL dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin yang memiliki
aktivitas ALP 440,2 ± 37,7 mg/dL menunjukkan adanya perbedaan yang tidak
bermakna (Tabel V). Aktivitas ALP serum tikus pada kelompok IKPA 1600
mg/kgBB setara dengan kelompok kontrol hepatotoksin. Namun apabila
kelompok IKPA 1600 mg/kgBB dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif
yang memiliki aktivitas ALP 274,2 ± 25,7 mg/dL, terlihat adanya perbedaan yang
bermakna (Tabel V). Hal ini membuktikan bahwa IKPA dosis tinggi mempunyai
pengaruh terhadap peningkatan aktivitas ALP serum tikus. Penyebab peningkatan
aktivitas ALP ini dimungkinkan karena terjadinya reaksi autooksidasi, di mana
konsentrasi tinggi dari flavonoid sebagai antioksidan justru akan menjadi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
prooksidan yang memiliki karakter sama persis dengan radikal bebas (Carocho
and Ferreira, 2013).
Perbandingan aktivitas ALP serum tikus dari ketiga dosis IKPA tersebut
menunjukkan bahwa dosis 362,81 dan 761,90 mg/dL memberikan pengaruh
dalam menurunkan aktivitas ALP serum tikus terinduksi karbon tetraklorida.
Namun pada IKPA dosis 1600 mg/dL, aktivitas ALP serum tikus setara dengan
kelompok kontrol hepatotoksin, yang bermakna IKPA dosis tinggi mempunyai
efek meningkatkan aktivitas ALP serum tikus.
Pada tabel IV atau gambar 4, terlihat bahwa dengan pemberian IKPA
dosis rendah, penurunan aktivitas ALP serum yang dihasilkan justru lebih besar
bila dibandingkan dengan pemberian IKPA dosis tinggi. Hasil uji Scheffe
menunjukkan bahwa perlakuan IKPA dosis rendah memberikan perbedaan yang
tidak bermakna bila dibandingkan dengan dosis tengah, sedangkan dosis tengah
memberikan perbedaan yang bermakna bila dibandingkan dengan dosis tinggi.
Hal ini menunjukkan semakin tinggi dosis tidak mempengaruhi penurunan
aktibitas ALP, sehingga tidak ada kekerabatan antara dosis pemberian IKPA
dengan penurunan aktivitas ALP serum yang dihasilkan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
L. Rangkuman Pembahasan
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian infusa kulit Persea
americana Mill. dosis rendah dan tengah mampu menurunkan aktivitas ALP
serum tikus dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin, artinya dosis
tersebut mampu memberikan pengaruh perubahan biokimiawi terhadap kerusakan
hati akibat senyawa model karbon tetraklorida.
Data aktivitas ALP serum tikus menunjukkan bahwa dengan pemberian
IKPA dosis rendah, penurunan aktivitas ALP serum yang dihasilkan justru lebih
besar bila dibandingkan dengan Pemberian IKPA dosis tinggi. Hasil uji Scheffe
menunjukkan bahwa perlakuan IKPA dosis rendah memberikan perbedaan yang
tidak bermakna bila dibandingkan dengan dosis tengah, sedangkan dosis tengah
memberikan perbedaan yang bermakna bila dibandingkan dengan dosis tinggi.
Hal ini menunjukkan semakin tinggi dosis tidak mempengaruhi penurunan
aktibitas ALP, sehingga tidak ada kekerabatan antara dosis pemberian IKPA
dengan penurunan aktivitas ALP serum yang dihasilkan.
Senyawa model pada penelitian ini akan membentuk radikal bebas
triklorometil (●CCl3) akibat metabolisme oleh CYP2E1 pada retikulum
endoplasma. Dengan adanya oksigen, radikal bebas triklorometil akan membentuk
radikal peroksi triklorometil (Panjaitan, dkk., 2007). Radikal peroksi triklorometil
yang lebih reaktif kemudian menyerang lipid membran RE dan terjadi peroksidasi
lipid serta akan dihasilkan senyawa 4-hydroxyalkenal dan hydroxyalkenal.
Senyawa tersebut dapat menghambat sintesis protein dan enzim glukosa-6-
fosfatase. Sintesis protein yang terhambat mengakibatkan produksi lipoprotein
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
menurun, sehingga transport lipid keluar dari hepatosit terhambat dan terjadilah
steatosis (Timbrell, 2009). Kandungan flavonoid sebagai antioksidan dalam infusa
kulit Persea americana Mill. mampu menurunkan aktivitas ALP serum tikus.
Mekanisme yang mungkin terjadi adalah flavonoid menangkap radikal
triklorometil sehingga tidak terbentuk senyawa toksik dan akhirnya RE hati tidak
rusak. Namun belum diketahui pasti mekanisme aksi senyawa tersebut bekerja di
komponen sel yang mana. Untuk lebih meyakinkan mekanisme ini, maka dapat
dilakukan penelitian khusus tentang mekanisme aksi infusa kulit Persea
americana Mill. sebagai hepatoprotektif secara in vitro. Selain itu, untuk
memastikan letak kerusakan yang ditimbulkan CCl4 maka perlu dilakukan
penelitian lanjutan yang melihat parameter selain ALP, seperti bilirubin.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil dan analisis statistik, maka dapat disimpulkan:
1. Pemberian jangka panjang infusa kulit Persea americana Mill. memberikan
pengaruh terhadap penurunan aktivitas ALP serum tikus jantan terinduksi
karbon tetraklorida.
2. Tidak ada kekerabatan antara dosis pemberian infusa kulit Persea americana
Mill. dengan penurunan aktivitas ALP serum tikus jantan terinduksi karbon
tetraklorida.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang:
1. Mekanisme aksi infusa kulit Persea americana Mill. dalam memberikan
proteksi pada hati.
2. Pengaruh pemberian IKPA terhadap parameter kerusakan hati yang lain,
seperti bilirubin.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
DAFTAR PUSTAKA
Alhassan, A. J., Sule, M. S., Atiku, M. K., Wudil, A. M., Abubakar, H.,
Mohammed, S. A., 2012, Effects of Aqueous Avocado Pear (P. americana)
Seed Extract on Alloxan Induced Diabetes Rats, Greener Journal of
Medical Sciences, 2 (1), 5-11.
Carocho, M., and Ferreira, I.C.F.R., 2013, A Review on Antioxidants,
Prooxidants and Related Controversy: Natural and Synthetic Compounds,
Screening and Analysis Methodologies and Future Perspectives, Food and
Chemical Toxicology, 51, 15-25.
Carpena, J.G.R., Morcuende, D., Andrade, M.J., Kylli, P., and Estévez, M., 2011,
Avocado (Persea americana Mill.) Phenolics, In Vitro Antioxidant and
Antimicrobial Activities, and Inhibition of Lipid and Protein Oxidation in
Porcine Patties, Journal Agricultural and Food Chemistry, 59 (10), 5625-
5635.
Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan Klinik, 2007, Pharmaceutical Care untuk
Penyakit Hati, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, 1995, Farmakope indonesia,
Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, hal. 46.
Dudgale, D. C., 2013, ALP-Blood Test, Medline Plus,
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003470.htm, diakses
tanggal 14 April 2014.
Ernawati, M. D. W., 2006, Pengaruh Paparan Udara Halotan dengan Dosis
Subanestesi terhadap Gangguan Hati Mencit, Repository Universitas
Andalas, http://repository.unand.ac.id/869/1/4_md_wiwik.doc, diakses
tanggal 4 Mei 2014.
Gupta, R.C., 2012, Veterinary Toxicology Basic and Clinical Principles, 2nd
Edition, Elsevier, New York, p. 259.
Hariana, H. A., 2007, Tumbuhan Obat dan Khasiatnya, Seri 1, Penebar Swadaya,
Depok, hal. 10-11.
Idris, S., Ndukwe, G. I., Gimba, C. E., 2009, Preliminary Phytochemical
Screening and Antimicrobial Activity of Seed Extracts of P. americana
(Avocado Pear), Bayero Journal of Pure and Applied Sciences, 2(1), 173-
176.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
Janakat, S., dan Al-Merie, H., 2002, Optimization of the dose and route of
injection, and characterization of the time course of carbon tetrachloride-
induced hepatotoxicity in the rat, J. Pharm. Tox. Methods, 48, 41-44.
Karyana, I.P.G., Putra, I.G.N.S., dan Yanti, N.P.V.K., 2012, Kolestasis pada
Sepsis Neonatorum di RSUP Sanglah Denpasar, Sari Pediatri, 14 (4), 211-
217.
Kumar, V., Abbas, A.K., Fausto, N., and Mitchell, R.N., 2007, Robbins Basic
Pathology, 8th
Edition, Elsevier Inc., New York, pp. 13-19.
Leite, J. J. G., Brito, E. H. S., Cordeliro, R. A., Brilhante, R. S. N., Sidrim, J. J. C.,
Bertini, L. M., et al., 2009, Chemical Composition, Toxicity and Larvicidal
and Antifungal Activities of P. americana (Avocado) Seeds Extracts,
Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 42(2), 110-113.
Lesmana, L.A., Lesmana, C.R., Pakasi, L.S., and Krisnuhoni, E., 2012,
Prevalence of Hepatic Steatosis in Chronic Hepatitis B Patients and Its
Association with Disease Severity, Acta Medica Indonesia, 44, 35-39.
Longo, D.L., dan Fauci, A.S., 2013, Harrison: Gastroenterologi dan Hepatologi,
EGC, Jakarta, hal. 299-302.
Mader, S. S., 2010, Human Biology, 11th
ed., McGraw-Hill, New York, pp. 166-
168.
McCarthy, G., 2000, Carbon Tetrachloride,
http://www.epa.gov/ttnatw01/hlthef/carbonte.html, diakses tanggal 26
November 2014.
McPhee, S.J., dan Ganong, W.F., 2010, Patofisiologi Penyakit, EGC, Jakarta, hal.
421.
Mirira, M., 2011, Insidence of and Risk Factor for Hepatotoxicity Following
Antiretroviral Initiation in Patients Attending Themba Lethu Clinic,
Johannesburg, Thesis, iv-v, University of The Witwatersrand, Johannesburg.
Mondrowinduro, P., 2014, Disfungsi Diastolik Vebtrikel Kiri pada Pasien Sirosis
Hati di Rumah Sakit Cipto Mangunkusumo: Prevalensi dan Hubungannya
dengan Derajat Disfungsi Hati, Thesis, Universitas Indonesia, Jakarta.
Panjaitan, R.G.D., Handharyani, E., Chairul, Masriani, Zakiah, Z., dan Manalu,
W., 2007, Pengaruh Pemberian Karbon Tetraklorida Terhadap Fungsi Hati
dan Ginjal Tikus, Makara, Kesehatan, 11 (1), 11-16.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
Phillips, S.J., 2014, Carbon Tetrachloride, http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/carbon_tetrachloride#section=
Use-and-Manufacturing, diakses tanggal 26 November 2014.
Pramushinta, A.A., 2008, Pengaruh Pemberian Teh Hijau terhadap Kadar Enzim
Alkali Fosfatase Serum Tikus Wistar yang Diberi Kloramfenikol, Skripsi, 3-
10, Universitas Diponegoro, Semarang.
Putri, N. L. P. D. P., 2013, Efek Hepatoprotektif Infusa Biji Persea americana
Mill. terhadap Aktivitas ALT-AST Serum pada Tikus Terinduksi Karbon
Tetraklorida, Skripsi, 53, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Robbins dan Cotran, 2010, Pathologic Basis of Disease, 8th
ed., Elsevier Inc.,
New York, pp. 834-889.
Rosari, A., 2013, Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Dekok Biji Persea
americana Mill. terhadap Aktivitas ALT-AST pada Tikus Terinduksi
Karbon Tetraklorida, Skripsi, xvii, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Sacher, R.A., and McPherson, R.A., 2002, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan
Laboratorium, Edisi 11, EGC, Jakarta, hal. 360-384.
Servillon, R.J.T., Dingal, M.C.C., Lusica, M.C., Yamson, M.K.A., and Balonebro,
M.J.B., 2014, Antibacterial Activity of Persea americana (Avocado) Peel
Extract Against Staphylococcis aureus, Psedomonas aeruginosa,
Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Multi Drug
Resistant Clinical Isolates, Iamure Multidisciplinary Research,
http://iamure.com/publication/index.php/ijscl/article/view/702, diakses
tanggal 30 Agustus 2014.
Shier, D., Butler, J., and Lewis, R., 2006, Hole’s Essentials of Human Anatomy &
Physiology, 9th
ed., McGraw-Hill, New York, pp. 399-402.
Singh, I., 2008, Textbook of Anatomy with Colour Atlas, Jaypee Brothers,
Panama, p. 695.
Singh, R., Verma, P.K., and Singh, G., 2012, Total Phenolic, Flavonoids, and
Tannin Contents in Different Extracts of Artemisia absinthium, Journal of
Intercultural Ethnopharmacology, 1 (2), 101-104.
Talwar, G.P., and Srivastava, L.M., 2003, The Textbook of Biochemistry and
Human Biology, 3rd Edition, New Delhi, p. 268.
Timbrell, J.A., 2009, Principles of Biochemical Toxicology, 4th Edition, Informa
Healthcare, New York, pp. 195-201, 308-311.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Torres, R.C, Garbo, A.G., and Walde, R.Z.M.L, 2014, Larvicidal Activity of
Persea americana Mill. Against Aedes aegypti, Asian Pacific Journal of
Tropical Biomedicine, 4 (12), 960-964.
USDA, 2014, P. americana Mill. – Avocado,
https://plants.usda.gov/core/profile?symbol=PEAM3#tabImages, diakses
tanggal 21 April 2014.
World Agroforestry Centre, 2002, Botanic Nomenclature to Agroforestry trees:
Persea americana,
http://www.worldagroforestry.org/treedb2/speciesprofile.php?Spid=1274,
diakses tanggal 1 Mei 2014.
Vinha, A.F., Moreira, J., and Barreira, V.P., 2013, Physicochemical Parameters,
Phytochemical Composition and Antioxidant Activity of the Algarvian
Avocado (Persea americana Mill.), Journal of Agricultural Science, 5 (12),
100-109.
Vohra, P., and Gupta, N.K., 2013, Carbon Tetrachloride Induced Toxicity in Liver
of Albino Mice, Indian Journal of Applied Research, 3 (9), 273-275.
Yasir, M., Das, S., and Kharya, M.D., 2010, The Phytochemical and
Pharmacological Profile of P. americana Mill., Pharmacognosy Review, 4,
77-84.
Zhang, L., Buchet, R., and Azzar, G., 2004, Phosphate Binding in the Active Site
of Alkaline Phosphatase and the Interaction of 2-Nitroacetophenone with
Alkaline Phosphatase-Induced Small Structural Changes, Biophysical
Journal, 86 (6):3873-3881.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
LAMPIRAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Lampiran 1. Foto buah Persea americana Mill.
Lampiran 2. Foto serbuk kulit Persea americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
Lampiran 3. Foto infusa kulit Persea americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Lampiran 4. Hasil uji determinasi Persea americana Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
Lampiran 5. Hasil uji kadar air serbuk kering kulit Persea americana
Mill.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Lampiran 6. Surat Ethical Clearance
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Lampiran 7. Analisis statistik data aktivitas ALT uji pendahuluan
waktu pencuplikan darah hewan uji setelah diinduksi karbon
tetraklorida 2 ml/kgBB
NPar Tests
Descriptives
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
ALT 0 3 72.3333 10.06645 63.00 83.00
ALT 24 3 2.1733E2 4.72582 212.00 221.00
ALT 48 3 90.3333 6.50641 84.00 97.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
ALT_0 ALT_24 ALT_48
N 3 3 3
Normal Parametersa Mean 72.3333 2.1733E2 90.3333
Std. Deviation 1.00664E1 4.72582 6.50641
Most Extreme Differences Absolute .219 .304 .187
Positive .219 .219 .187
Negative -.189 -.304 -.181
Kolmogorov-Smirnov Z .380 .527 .324
Asymp. Sig. (2-tailed) .999 .944 1.000
a. Test distribution is Normal.
Oneway
Descriptives
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
ALT 0 3 72.3333 10.06645 5.81187 47.3269 97.3398 63.00 83.00
ALT 24 3 2.1733E2 4.72582 2.72845 205.5938 229.0729 212.00 221.00
ALT 48 3 90.3333 6.50641 3.75648 74.1705 106.4961 84.00 97.00
Total 9 1.2667E2 68.74773 22.91591 73.8225 179.5108 63.00 221.00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Test of Homogeneity of Variances
ALT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.742 2 6 .515
ANOVA
ALT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 37478.000 2 18739.000 338.657 .000
Within Groups 332.000 6 55.333
Total 37810.000 8
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
ALT
Scheffe
(I) Perlakuan (J) Perlakuan
Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
ALT 0 ALT 24 -145.00000* 6.07362 .000 -164.4797 -125.5203
ALT 48 -18.00000 6.07362 .067 -37.4797 1.4797
ALT 24 ALT 0 145.00000* 6.07362 .000 125.5203 164.4797
ALT 48 127.00000* 6.07362 .000 107.5203 146.4797
ALT 48 ALT 0 18.00000 6.07362 .067 -1.4797 37.4797
ALT 24 -127.00000* 6.07362 .000 -146.4797 -107.5203
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
Homogeneous Subsets
ALT
Scheffe
Perlakua
n N
Subset for alpha = 0.05
1 2
ALT 0 3 72.3333
ALT 48 3 90.3333
ALT 24 3 217.3333
Sig. .067 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
Lampiran 8. Analisis statistik data aktivitas ALP kelompok perlakuan
NPar Tests
Descriptive Statistics
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
kontrol_hepatotoksin 5 4.4020E2 84.36054 359.00 579.00
kontrol_negatif 5 2.7420E2 57.41690 198.00 351.00
kontrol_IKPA 5 2.4260E2 32.40062 206.00 282.00
IKPA_362.81 5 1.6700E2 23.32381 132.00 196.00
IKPA_761.90 5 2.3640E2 38.13529 195.00 292.00
IKPA_1600 5 5.0440E2 110.40063 386.00 665.00
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
kontrol_he
patotoksin
kontrol_ne
gatif
kontrol_IKP
A
IKPA_362.
81
IKPA_761.
90 IKPA_1600
N 5 5 5 5 5 5
Normal
Parametersa
Mean 440.2000 274.2000 242.6000 167.0000 236.4000 504.4000
Std.
Deviation 84.36054 57.41690 32.40062 23.32381 38.13529 110.40063
Most
Extreme
Differences
Absolute .291 .175 .185 .198 .187 .198
Positive .291 .165 .185 .182 .187 .198
Negative -.168 -.175 -.183 -.198 -.139 -.163
Kolmogorov-Smirnov Z .652 .390 .414 .444 .419 .442
Asymp. Sig. (2-tailed) .789 .998 .995 .989 .995 .990
a. Test distribution is
Normal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
Oneway
Descriptives
ALP
N Mean
Std.
Deviation Std. Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
kontrol
hepatotoksin 5 4.4020E2 84.36054 37.72718 335.4526 544.9474 359.00 579.00
kontrol
negatif 5 2.7420E2 57.41690 25.67762 202.9075 345.4925 198.00 351.00
kontrol IKPA 5 2.4260E2 32.40062 14.49000 202.3693 282.8307 206.00 282.00
IKPA 362.81 5 1.6700E2 23.32381 10.43072 138.0397 195.9603 132.00 196.00
IKPA 761.90 5 2.3640E2 38.13529 17.05462 189.0488 283.7512 195.00 292.00
IKPA 1600 5 5.0440E2 110.40063 49.37266 367.3195 641.4805 386.00 665.00
Total 30 3.1080E2 135.79254 24.79221 260.0942 361.5058 132.00 665.00
Test of Homogeneity of Variances
ALP
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.052 5 24 .107
ANOVA
ALP
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 432149.600 5 86429.920 20.218 .000
Within Groups 102599.200 24 4274.967
Total 534748.800 29
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
ALP
Scheffe
(I) Perlakuan (J) Perlakuan
Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
kontrol
hepatotoksin
kontrol negatif 166.00000* 41.35199 .023 16.3123 315.6877
kontrol IKPA 197.60000* 41.35199 .005 47.9123 347.2877
IKPA 362.81 273.20000* 41.35199 .000 123.5123 422.8877
IKPA 761.90 203.80000* 41.35199 .003 54.1123 353.4877
IKPA 1600 -64.20000 41.35199 .786 -213.8877 85.4877
kontrol negatif kontrol
hepatotoksin -166.00000
* 41.35199 .023 -315.6877 -16.3123
kontrol IKPA 31.60000 41.35199 .987 -118.0877 181.2877
IKPA 362.81 107.20000 41.35199 .280 -42.4877 256.8877
IKPA 761.90 37.80000 41.35199 .972 -111.8877 187.4877
IKPA 1600 -230.20000* 41.35199 .001 -379.8877 -80.5123
kontrol IKPA kontrol
hepatotoksin -197.60000
* 41.35199 .005 -347.2877 -47.9123
kontrol negatif -31.60000 41.35199 .987 -181.2877 118.0877
IKPA 362.81 75.60000 41.35199 .651 -74.0877 225.2877
IKPA 761.90 6.20000 41.35199 1.000 -143.4877 155.8877
IKPA 1600 -261.80000* 41.35199 .000 -411.4877 -112.1123
IKPA 362.81 kontrol
hepatotoksin -273.20000
* 41.35199 .000 -422.8877 -123.5123
kontrol negatif -107.20000 41.35199 .280 -256.8877 42.4877
kontrol IKPA -75.60000 41.35199 .651 -225.2877 74.0877
IKPA 761.90 -69.40000 41.35199 .727 -219.0877 80.2877
IKPA 1600 -337.40000* 41.35199 .000 -487.0877 -187.7123
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
IKPA 761.90 kontrol
hepatotoksin -203.80000
* 41.35199 .003 -353.4877 -54.1123
kontrol negatif -37.80000 41.35199 .972 -187.4877 111.8877
kontrol IKPA -6.20000 41.35199 1.000 -155.8877 143.4877
IKPA 362.81 69.40000 41.35199 .727 -80.2877 219.0877
IKPA 1600 -268.00000* 41.35199 .000 -417.6877 -118.3123
IKPA 1600 kontrol
hepatotoksin 64.20000 41.35199 .786 -85.4877 213.8877
kontrol negatif 230.20000* 41.35199 .001 80.5123 379.8877
kontrol IKPA 261.80000* 41.35199 .000 112.1123 411.4877
IKPA 362.81 337.40000* 41.35199 .000 187.7123 487.0877
IKPA 761.90 268.00000* 41.35199 .000 118.3123 417.6877
*. The mean difference is significant at the 0.05
level.
Homogeneous Subsets
ALP
Scheffe
Perlakuan N
Subset for alpha = 0.05
1 2
IKPA 362.81 5 167.0000
IKPA 761.90 5 236.4000
kontrol IKPA 5 242.6000
kontrol negatif 5 274.2000
kontrol hepatotoksin 5 440.2000
IKPA 1600 5 504.4000
Sig. .280 .786
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Lampiran 9. Perhitungan penetapan peringkat dosis infusa kulit
Persea americana Mill. pada kelompok perlakuan
Penetapan peringkat dosis :
Konsentrasi infusa kulit Persea americana Mill. sebesar 8% (Putri, 2013)
Bobot tikus maksimal yaitu 250 g
Volume pemberian infusa secara per oral maksimal pada tikus yaitu 5 mL
Penentuan dosis rendah infusa kulit Persea americana Mill. didasarkan pada
penggunaan rebusan kulit Persea americana Mill. di masyarakat sebesar 4
g/hari.
Dosis manusia 70 kgBB = 4 g
Konversi dosis manusia 70 kg ke tikus 200 g = 0,018
Dosis untuk tikus 200 gBB = 0,018 x 4 g = 0,72 g/200 gBB = 360 mg/kgBB
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Penetapan dosis tertinggi infusa kulit Persea americana Mill.
D X BB = C X V
dosis x berat badan tikus = konsentrasi infusa x volume pemberian
D x 250 g = 8g/100 mL x 5 mL
Dosis = 1600 mg/kgBB
Penetapan dosis tengah di dasarkan pada faktor kelipatan dari kedua dosis,
dengan nilai n = 3
Faktor kelipatan = 𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑡𝑖𝑛𝑔𝑔𝑖
𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑟𝑒𝑛𝑑𝑎 ℎ
𝑛−1
1600
360
2
= 2,1
Dosis tengah = 1600 mg/kgBB : 2,1 = 761,9 mg/kgBB
Dosis rendah = 761,9 mg/kgBB : 2,1 = 362,8 mg/kgBB
Lampiran 10. Perhitungan konversi dosis untuk manusia
Konversi tikus 200 g ke manusia 70 kgBB = 56,0
Penetapan Dosis Infusa Kulit Persea americana Mill. :
Dosis manusia = dosis tikus 200 gBB x angka konversi ke manusia
1. Infusa Kulit Persea americana Mill. dosis 362,8 mg/kgBB
= 362,8 mg/1000 gBB
= 72,6 mg/200gBB tikus x 56,0
= 4056,6 mg/70kgBB
= 58,08 mg/kgBB manusia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
2. Infusa Kulit Persea americana Mill. dosis 761,9 mg/kgBB
= 761,9 mg/1000 gBB
= 152,38 mg/200gBB tikus x 56,0
= 8533,28 mg/70kgBB
= 121,9 mg/kgBB manusia
3. Infusa Kulit Persea americana Mill. dosis 1600 mg/kgBB
= 1600 mg/1000 gBB
= 320 mg/200gBB tikus x 56,0
= 17920 mg/70kgBB
= 256 mg/kgBB manusia
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi berjudul “Pengaruh Pemberian
Jangka Panjang Infusa Kulit Persea americana Mill.
terhadap Aktivitas Alkali Fosfatase pada Tikus
Jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida” memiliki
nama lengkap Maria Desita Putri. Penulis dilahirkan di
Banjarnegara pada tanggal 13 Desember 1992,
merupakan putri kedua dari tiga bersaudara dalam
keluarga pasangan Aloysius Dominikus Sutarto dan
Rosalia Catharina Surajini. Penulis mengawali
pendidikan di TK YPPPK Klampok, Banjarnegara
(1997-1999), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat
Sekolah Dasar di SD YPPPK Klampok, Banjarnegara
(1999-2005). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama
ditempuh oleh penulis di SMP Santo Borromeus Purbalingga (2005-2008),
kemudian melanjutkan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 1
Purbalingga (2008-2011). Penulis kemudian melanjutkan pendidikan sarjana di
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma pada tahun 2011. Semasa kuliah,
penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan dan unit kegiatan mahasiswa baik di
dalam maupun di luar kampus. Penulis pernah menjadi anggota divisi Dana dan
Usaha Pharmacy Performance (2011), anggota divisi Pendamping Kelompok
INSADHA (2012), Sekretaris Aksi Hari Kesehatan dan Lingkungan Hidup
(2012), Sekretaris Forum Komunikasi Mahasiswa Katolik Keuskupan Purwokerto
(FKMKKP) periode 2012-2013, koordinator divisi Publikasi, Dekorasi, dan
Dokumentasi Sambut Sahabat FKMKKP (2013), anggota divisi Koreografi PSM
“Cantus Firmus” periode 2013-2014. Penulis pernah menjadi asisten praktikum
Biokimia (2013). Selain itu, penulis merupakan salah satu peserta PIMNAS XXV
di Yogyakarta (2012), pemenang Lomba Paduan Suara bagi Mahasiswa PTS se-
Kopertis Wilayah V Yogyakarta (2013), serta pemenang Lomba PESPARAWI
Mahasiswa Tingkat Nasional XIII di Jakarta (2014).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI