Plantilla TF Reprod. Bovina-2014 · Web viewEfecto del semen refrigerado vs congelado sobre el porcentaje de preñez en protocolos de inseminación artificial a tiempo fijo en vaquillonas

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PARA GRADUADOS

INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN BOVINA CÓRDOBA (IRAC)

COMPARACION ENTRE EL USO DE SEMEN

FRESCO VERSUS CONGELADO EN PROGRAMAS

DE IATF

Hector Ezequiel Lopepe

Trabajo Final Para optar al Grado Académico de

Especialista en Reproducción Bovina

Córdoba - Año 2015

Trabajo final de la Especialización en Reproducción Bovina

AGRADECIMIENTOS

A mi amigo, socio y compañero MV. Bruno Bonadeo.

A los Dres. Gustave Decuadro Hansen, Jorge Cabodevila y Santiago Perez Wallace, por su valiosa colaboración en este trabajo.

A los docentes de la especialidad Dres. Gabrien Bó y Andrés Tríbulo por la buena predisposición.

A nuestros clientes, por confiar y creer en nuestro trabajo.

INDICE2



1. RESUMEN ...............................................................................................4

2. INTRODUCCIÓN....................................................................................5

OBJETIVO GENERAL..........................................................................8

OBJETIVOS ESPECÍFICOS.................................................................8

2. MATERIALES Y MÉTODOS................................................................9

2.1. ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO...................................................9

2.2. COLECTA DE SEMEN Y PROCESAMIENTO....................................10

2.3. SEMEN CONTROL.....................................................................................11

2.4. ANÁLISIS DE DATOS...........................................................................12

3. RESULTADOS.......................................................................................13

4. DISCUSIÓN............................................................................................16

5. CONCLUSIONES..................................................................................18

6. BIBLIOGRAFÍA....................................................................................19

3



1. RESUMEN:

El presente trabajo tuvo por objetivo comprobar si el uso de semen fresco mejora la

tasa de preñez en programas de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo (IATF), en rodeos

comerciales de carne. Se utilizaron 1309 vacas con cría, vacas secas y vaquillonas Bos

Taurus, distribuidas en cuatro establecimientos en Provincia de Buenos Aires. Se

conformaron en todos los rodeos dos grupos aleatorios de vientres: Grupo A semen

fresco (n=790) y Grupo B congelado comercial (n=519). Se colectaron seis toros por

electroeyaculación, en los cuales se evaluó y diluyo su semen con 15 x 106

espermatozoides por dosis y se utilizó refrigerado en el Grupo A. En el Grupo B se

utilizó semen congelado comercial de once toros (9 nacionales, 2 importados), que

habían superado los estándares mínimos para las pruebas in vitro. Los datos se

analizaron por regresión logística. Los resultados obtenidos mostraron diferencias

significativas para las variables: Tipo de semen (mayor para fresco que para congelado;

P<0,01), Categoría de vientres (vaca con cría, vaca seca o vaquillona; P<0,05) y

fertilidad de los toros utilizados (P<0.05). No se encontraron diferencias significativas

entre los inseminadores (P>0.05). En conclusión el uso de semen fresco, mejora los

porcentajes de preñez en IATF y permite un mayor aprovechamiento de toros

genéticamente superiores de la región.

Palabras clave: semen fresco – preñez – fertilidad-genética

4



2. INTRODUCCIÓN

La inseminación artificial (IA) es la biotecnología de mayor difusión entre los

ganaderos del mundo. La misma posee un gran Impacto en el avance genético

poblacional y un costo reducido (Brogliatti et al. 2012). La creciente necesidad de

semen de toros de alta perfomance genética, produjo el desarrollo y el refinamiento de

las tecnologías de producción de semen y almacenamiento de semen bovino tanto de

carne como de leche. En 1980 el número de inseminaciones alrededor del mundo

superaba los 130 millones (Bonadonna y Succi, 1980), ya en 1995 el número de dosis

producidas en el planeta superaba los 200 millones, siendo el 95 % congelado (crio

preservado), excepto en un reducido número de países como Nueva Zelanda, Francia,

Holanda, Australia y el este Europeo, donde se utilizaban unos 4 millones de dosis en

estado líquido, ya sea en el modo refrigerado o conservado a temperatura ambiente

(Chupin y Tibbier, 1995).

El principio de la dilución y refrigeración del semen bovino es proporcionar la

sobrevida del espermatozoide por períodos prolongados de tiempo (2 a 4 días)

(Salisbury y Van Demark, 1961). El mantenimiento refrigerado a 5ºC disminuye la tasa

metabólica de la célula, extendiendo así su supervivencia: avance que se conoció a

través del descubrimiento de la yema de huevo y sus propiedades como buffer y

protector de las membranas celulares (Phillips, 1939). No obstante, no todos los

cambios producto de la disminución de la actividad metabólica son favorables para la

célula, por ejemplo la disminución de la actividad Na/K+, también disminuye a 5ºC,

decreciendo la difusión de los iones a través de la membrana, aumentando de esta forma

la concentración intracelular de Na+, hecho que va en detrimento de la vida del

espermatozoide. (Quinn y White, 1966, 1967; Sweadner y Goldin, 1980). El desarrollo

de CAPROGEN (con su posterior adición de Catalasa) (Shannon et al, 1972), permitió

utilizar el semen a temperatura ambiente entre 15 ºC y 27 ºC, con buenas tasas de

fertilidad hasta el día 5 post dilución (Vishwanath y Sannon, 1997).

La criopreservación del semen bovino produce daños irreversibles en las

membranas espermáticas tales como expansión y alteración de las membranas 5



plasmáticas y acrosoma, cambios en el medio osmótico, alteración del mecanismo del

Calcio y cambios en la actividad enzimática. La capacitación espermática, la reacción

acrosomica, y la posterior unión de los espermatozoides al ovocito, requieren de una

actividad de membrana bioquímicamente activa. Los cambios posteriores a la

congelación, producen la desestabilización de las membranas espermáticas, proceso que

se asemeja a los cambios sufridos en la capacitación fisiológica del esperma. Teniendo

en cuenta que los espermatozoides capacitados y/o con su reacción acrosomica

desarrollada tienen una menor sobrevida (cambios sufridos durante la congelación), esto

explica la disminución en la fertilidad del semen congelado (Tartaglione et al, 2004).

La fertilidad del semen de los distintos toros y procesado por diferentes métodos

tanto en estado líquido (fresco o diluido a temperatura ambiente) como congelado, ha

sido medida por años por la Tasa de No Retorno, la cual es una medida indirecta de la

fertilidad que definió específicamente Rycroft en 1992, como el porcentaje de vacas

que no retornan al servicio en un plazo determinado de tiempo después de una

inseminación, por lo general de 60 a 90 días (Dalton, 2013).

Distintos estudios se llevaron a cabo a lo largo del tiempo comparando semen

congelado o en estado líquido, previa colecta, dilución y ajustes de concentración de las

muestras obtenidas tanto en carne como en leche. Gerard (2005) en Francia, revisó ocho

campañas de inseminación midiendo tasas de no retorno de semen fresco (refrigerado a

5º) utilizado hasta la tercer jornada post colecta versus semen congelado de los mismos

toros. No encontró diferencias significativas entre la tasa de preñez, tanto por semen

fresco como congelado. Si encontró diferencias cuando se analizaron las jornadas de

utilización de los mismos toros en semen fresco comparando sus días de utilización,

donde disminuía drásticamente la tasa de preñez a partir de la segunda jornada post

colecta. Además revisó el incremento de producción de dosis que significaba para los

centros productores de semen la incorporación del semen fresco. Debido a que la dosis

producida en fresco se produjo con una concentración de 3 a 5 millones de

espermatozoides totales por dosis, mientras los mismos toros produjeron una dosis para

6



criopreservación de 10 a 18 millones de espermatozoides totales por pajuela, se

producían de 2.5 a 3 veces más dosis por toro.

En trabajos realizados en Francia se observó que en los protocolos de IATF existe

un 15 a 20 % de vacas que ovulan en otro momento generalmente después de la mayoría

del rodeo. Esas vacas fuera del periodo óptimo son en principio penalizadas por semen

de toros sub fértiles o de sobrevida menor en el tracto genital, sabiendo que para detectar

estos animales es necesaria una batería de test que no se dispone en un Centro de IA

convencional (citometría entre otros) (Decuadro Hansen, 2015).

Durante el uso comercial de semen fresco (para aquellos países que lo utilizaron) se

conservó durante 3 días. Existiendo una caída de la TNR a partir de la hora 48,

encontrándose algunos reproductores que disminuyeron antes. El semen fresco en estos

casos proporcionó 2 puntos menos de tasa de gestación que el congelado.

Las concentraciones que se utilizaron fueron de 2 a 5 millones de espermatozoides

totales x dosis (dependiendo del toro) y esto fue uno de los motivos de la utilización del

semen fresco: multiplicar el uso de toros de calidad genética altamente solicitados

(generalmente ganado Holstein).

Tanto en Nueva Zelanda como en Europa el semen se conservó en forma anaeróbica,

sin nada de oxígeno. Para ello, en Europa las dosis se almacenaron en pajuelas

especiales impermeables al oxigeno (anaerobiosis total), iguales físicamente a las

pajuelas clásicas pero con un tapón diferente y el plástico no era de PVC, sino un

material impermeable completamente al oxígeno, refrigeradas a 4ºC.

En Nueva Zelanda la dosis se mantuvo a 20ºC en Caprogen®, diluyente que posee

gran complejidad para realizarlo, porque parte de los componentes de su fórmula afectan

su calidad (catalasa y ácido caproico). Para garantizar la anaerobiosis el diluyente se

gasificó con nitrógeno, y luego las dosis se envasaron en máquinas instaladas debajo de

una campana de nitrógeno (Decuadro Hansen, 2015).

7



OBJETIVO GENERAL

El presente trabajo tiene por objetivo comprobar si el uso de semen fresco aumenta

la tasa de preñez en programas de IATF en rodeos comerciales de carne.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Entre los objetivos específicos se encuentran: Mejorar la perfomance reproductiva

general de los rodeos de carne usando semen fresco. Aumentar la tasa de

aprovechamiento de reproductores locales de alto valor genético (ajustando la relación

dosis, concentración, preñez). Comparar las tasas de preñez entre vacas, vacas secas y

vaquillonas inseminadas a tiempo fijo. Verificar si los datos a campo coinciden con la

bibliografía internacional.

8



2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1. ANIMALES Y LUGAR DE TRABAJO

El presente trabajo se llevó a cabo en cuatro establecimientos de la provincia

de Buenos Aires, ubicados en los partidos de Adolfo Gonzales Chávez, Adolfo

Alsina, General Paz y Azul. Se utilizaron 1309 vacas (con 40 días post parto en

adelante), vacas secas y vaquillonas para carne, BosTaurus, con una condición

corporal entre 3 y 4 (3.3 promedio), (escala 1 a 5). Se realizó el trabajo durante tres

estaciones reproductivas (primavera 2013, otoño 2014 y primavera 2014)

Los vientres se inseminaron en su totalidad sobre pastoreo de praderas

naturales o implantadas, y la vaquillona recibió solo en su recría suplementación

invernal, pero no durante el servicio o a posterioridad del mismo.

TRATAMIENTOS

Todas las vacas recibieron palpación transrectal al inicio del tratamiento de

sincronización, rechazándose aquellos animales que no se encontraban aptos para ser

incluidos en el mismo. En este mimo día (Día 0) recibieron un dispositivo

intravaginal impregnado con progesterona (0.5 g DIB Syntex, Argentina) y se les

aplicó 2 mg de Benzoato de estradiol (BE, Syntex) vía IM profunda. El día 7 u 8 se

les retiro el dispositivo, y se inyectaron 150 µg de D-Cloprostenol (Ciclase, Syntex,

Argentina), junto con 1 mg de Cipionato de estradiol (Cipiosyn, Syntex, Argentina),

ambos vía IM profunda, y recibieron IATF a las 48 hs. posteriores al retiro del

dispositivo.

Se conformaron en todos los rodeos dos grupos aleatorios de vientres: Grupo

A semen fresco (producido por nuestro equipo; n=790) y Grupo B congelado

comercial (n=519).

El semen fresco y el congelado comercial fueron equilibrados, de manera tal

de presentar calidades seminales similares.

9



El diagnostico de gestación se realizó entre los 30-35 días post IATF, por

ultrasonografía transresctal (Sono Scape SSI 600, Modo M, transductor Lineal 5

Mhz). Todos los vientres recibieron palpación transresctal entre los 80-90 días post

IATF.

2.2.COLECTA DE SEMEN Y PROCESAMIENTO

Se colectaron seis toros para utilizar en fresco en los distintos lotes por

electroeyaculación (Electrojac J5, USA). El proceso consistió, en una colecta previa

(7-10 días anteriores a la IATF) para evaluar los parámetros de calidad seminal

(Vigor, % Motilidad de progresiva, concentración y morfología espermática a través

de la tinción de eosina-nigrosina) a través de observación directa por microscopía. En

todos los casos, se colecto el semen el día previo (12-15 hs anteriores a la IATF). Se

realizaron dos colectas por toro con un intervalo de treinta minutos entre ellas y cada

muestra obtenida se pre-diluyo durante 15 minutos una parte de semen en una parte

de diluyente, se utilizó indistintamente leche y yema de huevo (leche 100%

descremada con el agregado del 20% de yema de huevo, elaboración artesanal) o

diluyente comercial con glicerol (BIOXCELL®, IMV, Francia), incubadas a 30ºC, en

baño María. Luego de la predilución se realizó una segunda evaluación microscópica

y, posterior a esta se llevó adelante la dilución total ajustando la concentración del

semen a 15 millones de espermatozoides totales por dosis. Después se mantuvo el

semen otros 15 minutos a 30ºC y finalizado este período se refrigeraron las muestras

a 5ºC hasta su uso al día siguiente. Se fijó un mínimo de 60% de motilidad progresiva

con vigor 4 al final de la evaluación para el semen refrigerado, seleccionándose la

mejor de las dos muestras elaboradas para cada reproductor (Tabla 1).

Todas las muestras fueron envasadas en pajuelas de 0.5 ml (IMV, Francia) previo a

su utilización y selladas con alcohol polivinilico (IMV, Francia). El semen

refrigerado se asignó al azar conformando el Grupo A (n=790)

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Tabla 1. Calidad de semen fresco de cada uno de los reproductores utilizados en el

ensayo

Toro* Diluyente %MP1 Vigor %EZ nor.2 Estab.3 Temp.4

Ortiz Bioxcell 65 4 90 La

Primera

Primavera

2013

Shorthorn Bioxcell 70 4 92 El

Combate

Primavera

2013

4318 Bioxcell 75 4 95 El

Combate

Primavera

2013

Ilusionista Leche

yema

75 4 90 San

Carlos

Primavera

2014

Ilusionista Leche

yema

70 4 90 El

Combate

Primavera

2014

Ch1037 Leche

yema

65 4 88 El

Combate

Primavera

2014

Puma Leche

yema

60 3 94 El

Alfanje

Otoño

2014

*No se incluye la concentración (Ver semen control). 1%MP: porcentaje de motilidad

progresiva.2% EZ nor.: porcentaje de espermatozoides normales. 3Estab.:

Establecimiento. 4Temp.: Temporada de inseminación.

2.3.SEMEN CONTROL

El semen congelado comercial, fue adquirido a centros comerciales de venta de

genética, que fueron evaluados por los test in vitro donde se evaluó porcentaje de

motilidad progresiva y vigor a la hora 0 y 2 post descongelado junto al porcentaje de

espermatozoides normales por tinción de eosina nigrosina (prueba de

termorresistencia), superando los parámetros mínimos y se utilizó al azar en cada uno

de los lotes conformando el Grupo B (n=519). Se utilizaron 11 toros de semen

comercial, que recibieron al azar desde 9 vacas hasta 160, dependiendo esta

11



variabilidad del tamaño de los lotes y la libertad de prueba con la que se contó en

cada rodeo. Se utilizaron 11 toros de semen comercial, que recibieron al azar desde 9

vacas hasta 160, dependiendo esta variabilidad del tamaño de los lotes y la libertad de

prueba con la que se contó en cada rodeo. La concentración del semen fresco como

del congelado fue evaluada a través de la cámara de Neubauer utilizada para el

recuento de espermatozoides. Nueve de estos reproductores fueron de origen nacional

(genética argentina) y procesados por centros argentinos (Pascuale, 15 x 106

espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; West, 9 x 106 espermatozoides

con motilidad progresiva por dosis; Chakourú 48, 18 x 106 espermatozoides con

motilidad por dosis; Brutal, 17 x 106 espermatozoides con motilidad progresiva por

dosis; Jacinto, 10 x 106 espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; Soguero,

8 x 106 espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; Legado, 9 x 106

espermatozoides con motilidad progresiva por dosis; Vistoso, 20 x 106

espermatozoides con motilidad progresiva por dosis y Yarara 318, 7 x 106

espermatozoides con motilidad progresiva por dosis), solo dos de ellos de origen

canadiense (Lego, 8 x 106 y Absolute, 9 x 106 espermatozoides con motilidad

progresiva por dosis, respectivamente).

2.4.ANÁLISIS DE DATOSLos datos se analizaron estadísticamente mediante el programa InfoStat (InfoStat,

2008 UNC). Se utilizó regresión logística, donde se evaluaron las variables: Tipo de

semen (fresco vs congelado), Categoría (vaca con cría vs vaca seca y vaquillona),

Establecimiento, Inseminador y Toro (evaluando la fertilidad individual de cada

reproductor).

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3. RESULTADOS

Los resultados obtenidos del análisis, mostraron diferencias significativas en

algunas de las variables analizadas entre ellas: tipo de semen (P=0.0001), porcentaje

de preñez según categoría (P<0.05), como así también entre la fertilidad del semen de

los toros utilizados (P<0.05).

No se encontraron diferencias significativas entre los inseminadores (P>0.05) a lo

largo del trabajo.

El uso de semen fresco en los rodeos evaluados, logro incrementar los porcentajes de

preñez obtenidos en IATF, de manera significativa sobre el uso de semen congelado

(Tabla 2)

Tabla 2. Porcentaje de preñez de semen fresco versus congelado en vacas y

vaquillonas de carne inseminadas a tiempo fijo

SEMEN

FRESCO

(Grupo A)

SEMEN

CONGELADO

(Grupo B)

% Preñez

Fresco

% Preñez

Congelado

VACAS

IATF

790 519 66.07a

(522/790)

55.23b

(285/519)

abValores con distinto superíndice difieren significativamente (P<0.01)

Entre las categorías de vientres evaluadas la correspondiente a vaca con cría,

presento valores significativamente superiores de preñez (P<0.05) con respecto a las

vacas secas (sin cría al pie) y vaquillonas. Es importante remarcar que en las vacas

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con ternero al pie (post parto de 40 días en adelante) fue donde se obtuvieron los

resultados más altos de porcentajes de preñez utilizando semen fresco. (Tabla 3)

Tabla 3. Porcentaje de preñez vaca con cría versus vaquillona y vaca seca

Preñez Fresco

(%)

Preñez

Congelado (%)

Preñez Total

(%)

Vaca Con Cría 66.88 55.81 61.35 a

Vaca Seca y

Vaq.

56.35 54.32 55.29 b

ab Valores con distinto superíndice difieren significativamente (P<0.05)

Se analizó también si existieron diferencias entre los establecimientos en los

cuales se realizó el relevamiento de datos, encontrándose también diferencias

significativas (P<0.05) entre dos de los establecimientos. (Tabla 4)

Tabla 4. Porcentaje de preñez de los distintos establecimientos

Vientres

IATF

Preñez

IATF

Porcentaj

e Servicio Año

LA

PRIMERA 303 170 56,11b PRIM 2013

EL

COMBAT

E 370 256 69,19a PRIM 2013

EL

ALFANGE 150 112 74,67ab OTO 2014

SAN

CARLOS 151 89 58,94ab PRIM 2014

COMBAT 333 202 60,66ab PRIM 2014

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E

ab Valores con distintas letras difieren significativamente (P<0.05)

La fertilidad entre el semen de los toros utilizados también presento diferencias

significativas (P<0.05), aunque no se encontraron diferencias entre ninguno de los

reproductores utilizados en fresco, si existieron entre algunos de estos y aquellos

congelados que presentaron menor fertilidad. (Tabla 5)

Tabla 5. Porcentaje de preñez de los distintos toros utilizados

IATF n PREN

PORCE(

%)

TIPO DE

SEMEN

R4318 227 172 75,77a Fresco

Shorthorn 28 22 78,57a Fresco

CH1037 78 49 62,82ab Fresco

ILUSIONIST

A 233 142 60,94ab Fresco

ORTIZ 124 74 59,68ab Fresco

PUMA 100 62 62,00ab Fresco

ABSOLUTE 10 7 70,00abCONGELAD

O

LEGO 10 9 90,00aCONGELAD

O

BRUTAL 28 19 67,86abCONGELAD

O

CHAK48 116 62 53,45abCONGELAD

O

JACINTO 9 6 66,67abCONGELAD

O

PASCUALE 18 11 61,11ab CONGELAD

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O

SOGUERO 37 16 43,24bCONGELAD

O

VISTOSO 50 28 56,00abCONGELAD

O

WEST 40 22 55,00abCONGELAD

O

YARARA

318 160 81 50,63bCONGELAD

O

LEGADO 39 26 66,67abCONGELAD

OabValores con distinta letra difieren significativamente (P<0.05)

4. DISCUSIÓN

La Inseminación artificial es una técnica eficiente y muy importante para el

mejoramiento genético bovino. El descubrimiento de nuevos agentes crioprotectores

y el avance en el desarrollo de diluyentes, han producido que el uso de semen fresco

haya sido gradualmente abandonado, aunque este último presente algunas ventajas

sobre el criopreservado. (Verberckmoes et al. 2005).

El proceso de congelado expone a los espermatozoides a un shock térmico, dando

como resultado daños en la membrana plasmática y el acrosoma (Woelders et al.,

1997; Celeghini et al., 2008). Durante la criopreservación se producen cristales de

hielo, y la redistribución de lípidos de membrana, alterando también el intercambio

de iones, resultando de ello una disminución de la viabilidad, la fertilidad y en

algunos casos hasta la muerte del espermatozoide. (Kaka et al, 2014). En cambio, el

semen refrigerado, posee un gran número de espermatozoides intactos, capaces de

fertilizar comparado con el semen congelado. Esto justifica su uso. No obstante, este

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proceso depende de su correcta manipulación y los diluyentes elegidos para su

preservación hasta la inseminación (Crespilho et al., 2012).

En Argentina se realizaron algunos trabajos comparando semen fresco y congelado

de los mismos toros, si bien encontraron diferencias numéricas a favor del primero no

pudieron arribar a diferencias significativas (Tribulo et al., 2005; Torquatti et al.,

2006; Vater et al., 2006; Felice et al., 2012).

Crespilho et al (2014), encontró que la fertilidad del semen refrigerado por 48 hs.,

luego de colectado, presenta resultados similares o inferiores al semen

criopreservado. Esto estuvo asociado a un alto estrés oxidativo, peroxidación de los

lípidos de membrana y fragmentación del ADN. Un trabajo reciente (Papa, et al

2014) en Brasil, contrastó estos resultados, obteniendo una tasa de preñez superior

(P<0.05) del semen fresco diluido en BB® (diluyente comercial) con agregado de

glicerol en IATF, por sobre el semen congelado descongelado también diluido en BB

®. El semen fresco diluido en BB® con agregado de glicerol obtuvo el cincuenta uno

por ciento (n=278), el semen fresco diluido en BB® sin glicerol obtuvo el cuarenta y

cuatro por ciento (n=268) y el congelado el cuarenta y uno por ciento (n=216).

Además, lograron corroborar a través de análisis computarizados de imágenes

(CASA;HTM-IVOS 12, Hamilton Thorne Research, Beverly, MA, USA), y por

citometría de flujo, la mejor performance que presenta el semen refrigerado versus el

congelado, en parámetros de medición objetiva donde se encontraron diferencias

significativos en: porcentaje de motilidad total (TM%;P<0.05), porcentaje de

motilidad progresiva (PM%; P<0.05) Velocidad media (VAP; P<0.05), velocidad

lineal (VSL; P<0.05), velocidad curvilínea (VCL; P<0.05), frecuencia de batido de

cola (TBF; P<0.05), rectitud (STR; P<0.05), linealidad (LIN;P<0.05), rapidez

espermática (RAP; P<0.05), integridad de membranas plasmáticas y acrosomales

(IPAM;P<0.05), índice de fragmentación de ADN (DFI; P<0.05) mientras que no se

encontraron diferencias en: peroxidación lipídica (LP;P>0.05), estrés oxidativo (OS;

P>0.05) y capacitación (CAP; P>0.05).

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De acuerdo con los resultados presentados en los párrafos anteriores, el

presente trabajo también obtuvo una diferencia significativa cuando se desafío el

semen congelado versus el semen fresco. La diferencia radicó, que el trabajo

realizado en Brasil, pudo utilizar sistemas de medición objetiva (CASA y Citometría

de Flujo) donde el semen fresco (refrigerado con y sin glicerol), mantuvo valores

superiores al congelado en todos los parámetros de medición que presentan relación

con la fertilidad.

5. CONCLUSIONES

El uso de semen fresco, posibilito aumentar los resultados de preñez obtenidos

en IATF con respecto al semen congelado.

El creciente uso de la IATF, a nivel mundial y resultados obtenidos similares a

este trabajo en el resto de Sudamérica, vuelven a poner al semen fresco como una

herramienta de potencial ilimitado para mejorar la eficiencia reproductiva de los

rodeos, maximizando el uso de individuos de alto merito genético producidos

localmente en cada país. Previo al advenimiento de la IATF, esta técnica no podía

superar al semen congelado, debido a la brusca caída que sufría en fertilidad con el

correr de las horas. Además logra aumentar la cantidad de preñeces a primo

inseminación de la categoría que más exigencias presenta para concebir en IATF, la

vaca con cría al pie.

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El semen fresco además, incrementa la tasa de aprovechamiento de los toros en

los centros de producción de semen, aunque serán necesarios más trabajos asociados

a IATF, para comprobar si se mantienen las diferencias significativas en preñez

respecto al semen criopreservado, cuando su concentración disminuya hasta valores

por debajo de los umbrales conocidos. Por último, puede permitir tasas de fertilidad

aceptables en aquellos toros que no la posean luego del proceso de congelado, debido

a que las células refrigeradas no sufren injurias a nivel de membrana, ni de su medio

intracelular. El presente trabajo encontró diferencias significativas entre algunos de

los toros utilizados en fresco y aquellos que obtuvieron menores índices de preñez en

congelado. A pesar de la gran variabilidad que existe entre eyaculados de los mismos

toros y entre ellos, es de esperar que si lográsemos identificar individuos con altas

tasas de fertilidad. Se puedan estabilizar porcentajes de preñez más elevados que los

logrados hasta aquí en IATF.

6. BIBLIOGRAFÍA

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Congr. Anim. Artif. Insem. Madrid, Spain, vol.5, pp. 655-657.

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fertilidad. Especialidad en Reproducción Bovina. Curso congelado de semen. Anexo. pp

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Rodrigues P.H.M., 2008. Effects that bovine sperm cryopreservation using two different

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Chupin, D., Thibier M., 1995. Survey of the present status of the use of artificial

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artificial a tiempo fijo. X Simposio Internacional de Reproducción Animal – IRAC

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