POR: ANGÉLICA AQUINO MARÍA GARRIGA MERARIS SOTO LUIS E. OQUENDO Tinción de esporas, tinción de flagelos y otras pruebas para identificar bacilos Gram-positivos

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  • POR: ANGLICA AQUINO MARA GARRIGA MERARIS SOTO LUIS E. OQUENDO Tincin de esporas, tincin de flagelos y otras pruebas para identificar bacilos Gram-positivos
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  • CATALASA -, NO FORMADORES DE ESPORAS Bacilos Gram +
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  • Hay tres especies de Erysipelothrix: Erysipelothrix rhusiopathiae Erysipelothrix tonsillarum Erysipelothrix inopinata Erysipelothrix rhusiopathiae es la nica que causa enfermedades en humanos
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  • Gram-positiva Catalasa negativa No formadora de esporas Tiende a formar largos filamentos No motiles Ureasa negativo Erisipeloide Produce H 2 S http://www.actasdermo.org/es/forma-cutanea-difusa- erisipeloide/articulo/13052968/
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  • Sensible a: Penicilina Cefalosporinas Eritromicina Clindamicina Resistente a: vancomicina http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet /BiologyPages/A/Antibiotics.html
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  • Deben ser cultivadas en caldo nutriente con: 1% de glucosa 5% de CO2 A 35 C Tambin crece en agar chocolate y agar sangre En agar sangre las colonias son no hemolticas
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  • Despus de 48h de incubacin se ven dos diferentes tipos de colonias Pequea, forma lisa transparente, reluciente y bordes enteros Grande, colonias speras, estructura curvea, bordes irregulares
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  • Aracnobacterium, 9 especies Aracnobacterium haemolyticum Aracnobacterium pyogenes Aracnobacterium bernardiae Catalasa negativa Agar Sangre Beta-hemlisis
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  • Tincin de Flagelos
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  • Tincin de flagelos Los flagelos son rganos de locomocin Los flagelos estn compuestos por cerca de 20 protenas, con aproximadamente otras 30 protenas para su regulacin y coordinacin La flagelina es la principal del flagelo Tiene su origen en el protoplasma de la clula bacteriana
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  • Tipos de flagelos
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  • Mtodos Kodak Cubrir la preparacin durante 5 a 10 minutos Lavarlo por 2 3 minutos Observar la placa de la periferia hacia el centro Mtodo Leifson Fuscina bsica en alcohol etlico Acido tnico en agua destilada Cloruro de sodio en agua destilada
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  • Tinte RYU Se utiliza en el borde del cubreobjetos Despus de 5 a 10 minutos se examina la muestra
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  • NO FORMADORES DE ESPORA, ACTINOMICETOS AERBICOS FILAMENTOSOS Bacilos Gram +
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  • Actinomicetos Grupo heterogneo Bacterias filamentosas ramificadas Similar al crecimiento de hongos Aerobios / Anaerobios facultativos Crecimiento lento No motil
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  • Acid-fast stain http://www.biotechinfo.in/study-material-/acid-fast-staining-by-ziehl-neelsen-method/
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  • Acid-fast Stain http://www.highlands.edu/academics/divisions/scipe/biology/labs/ro me/acid_fast_stain.htm http://classes.midlandstech.edu/carterp/Courses/bio225/Lab%20Stuff /Stains/Bacterial%20Stains.htm
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  • Nococardia spp. Presente en suelo y en material vegetativo No motil Parcialmente cido- resistentes Se utiliza prueba modificada Utiliza cido dbil (0.5% a 1% H 2 SO 4 ) En humanos causa infecciones pulmonares y subcutneas sistmica afeccin al Sistema Nervioso Central La infeccin progresa rpidamente
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  • Actinomadura spp. Gordonia spp. A. madurae se diferencia por ser Xilosa positivo Reduce nitrato No tiene micelio No motil Parcialmente cido- resistente Otros Actinomicetos
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  • Rhodococcus spp. R. equis Parcialmente cido- resistente. Se diferencia por exhibir colonias rosa-salmn en Agar Sangre Parecido a Klebsiella http://people.upei.ca/jlewis/html/lab_4_coryn e-_mycobacterium.html
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  • Identificacin Actinomicetos
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  • FORMADORES DE ESPORAS, NO FILAMENTOSOS, CATALASA + Bacilos Gram +
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  • Esporas Resistentes a condiciones ambientales adversas. Organismos que producen esporas: Hongos Plantas Bacterias http://promocionxxii.med-unjfsc.edu.pe/2011/10/genero- clostridium.html Clostridium difficile
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  • Formacin de esporas
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  • Tincin de Esporas 1. Fijar la bacteria en la laminilla. 2. Colocar un pedazo de papel toalla en la laminilla. 3. Echar verde malaquita sobre el papel toalla.
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  • Tincin de Esporas 4. Calentar la laminilla por 5 minutos. 5. Lavar el frotis con agua destilada. 6. Cubrir el frotis con safranina por 30 segundos.
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  • Tincin de Esporas 7. Lavar con agua destilada y secar. B. anthracis http://textbookofbacteriology.net/Anthrax.html
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  • Bacilos formadores de esporas Gram positivos Catalasa positivos Aerbicos / Anaerbicos facultativos Muchas de las especies crecen en Agar de Sangre Bacillus spp. & Clostridium spp.
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  • Bacillus spp. B. anthracis No motil No fermenta lactosa Infecciones humanas B. cereus Infecciones humanas Motiles Beta hemoltico B. thuringienses Insectos Beta hemoltico B. subtillis Beta hemoltico Aspecto liso, mucoide o rugoso
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  • B. anthracis Son grandes, grises y planas. En Agar Sangre no son hemolticas. Son halfilas y crecen en medios alcalinos. Susceptibles a penicilina, fluroquinolinas, entre otros.
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  • Medusa head B. anthracis http://biogefahr.shopkeeper.de/cgi-bin/nw/biogefahr-de/
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  • B. cereus Tiene dos enterotoxinas Emtica Diarrea Crece a 37C en Agar Sangre. Resistentes a penicilina. Susceptible a vancomicina y clindamicina. Figura 16-19 Bacillus cereus en Agar de Sangre
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  • BACILOS CATALASA +, NO FORMADORES DE ESPORAS Y NO FILAMENTOSOS Identificacin de Bacilos Gram + Aerbicos
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  • Caractersticas Generales Se encuentran en el ambiente (agua y suelo) con facilidad. No se consideran altamente patognicos, mas sin embargo se estn aislando en infecciones clnicas con mayor frecuencia. Unos pocos son menos comunes, mas causan enfermedades severas.
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  • Diagrama de Identificacin
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  • Corynebacteria C. (ulcerans, diphtheriae, pseudotuberculosis) Catalasa + No motil CTBA (medio) forman halo marrn C. diphtheria No produce ureasa Fermenta glucosa y maltosa Reduce nitrato a nitrito Prueba de Elek para detectar toxina
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  • Eleks Test Corta papel de filtro de 75% dimetro de plato de agar y 2 cm de ancho. Saturar con antitoxina C. diphtheria y esperar que seque. Aadir suero de conejo y potassium tellurite al agar caliente.
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  • Eleks Test Coloca los papeles en el plato de agar caliente y deja que llegue al fondo. Luego de slido, aade el organismo y pon paralelo a este, controles negativos y positivos. Incubar de 18- 24 horas.
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  • Identificacin de C. diphtheria
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  • Rothia and Listeria Rothia spp. Cocos Gram + Disimulan ser Bacilos Familia Micrococcacea Nitrato + No motil Hidrolizan esculina Ureasa Negativa 2/3 catalasa + Listeria monocytogenes Bacilos Gram + Familia Listericea Catalasa + Hidrolizan esculina Motiles B-hemolticos Crece en 6.5% NaCl
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  • IDENTIFICACIN Y DIFERENCIACIN DE BACILOS GRAM POSITIVOS Resultados de Pruebas Bioqumicas
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  • Pruebas de Identificacin http://es.slideshare.net/jmhr23/bacilos-gram-positivos-aerobios-no-esporulados
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  • Pruebas de Identificacin https://www.scribd.com/doc/28806551/Bacteriologia-diagnostica
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  • Pruebas de Identificacin Tabla 1 Identificacin y Diferenciacin de gneros relacionados PruebasListeriaLactobacillusErysipelothrix MicroscopiaCocobacilosBacilos Catalasa+-- VancomicinaSRR Motilidad + (flagelos) -- H2SH2S--+ Bilis Esculina+-- NaCl 6.5%+-- B hemlisisV-- S Susceptible, R Resistente, V - Variable http://bvs.panalimentos.org/local/file/Manual_Listeria_monocytogenes_2008.pdf
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  • Pruebas de Identificacin http://bvs.panalimentos.org/local/file/Manual_Listeria_monocytogenes_2008.pdf
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  • Pruebas de Identificacin Diferenciacin de especies del gnero Bacillus Pruebas B. firmusB. subtillisB. sphaericus Catalasa+++ Espora+ (central) Oxidasa--+ Licuefaccin de gelatina+++ Hidrlisis de almidn++- Citrato-+- Crecimiento NaCl 7%++d Reduccin Nitratod+- Crecimiento anaerbico--- Fermentacin Glucosa++- L-arabinosa-+- D-xilosa-+- D-manitol+-- Ureasa- -+ Motilidad++- VP-+- Indol--- d Reaccin dbil http://javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis404.pdf