Ppt Alat Lab Hplcfix

7/24/2019 Ppt Alat Lab Hplcfix

1/16

HPLCOleh :

Dewi Larasati (P27838113001)

Cita Sarista (P27838113002)

Ahmad Dzul!ri (P2783811300")

#aizah #irdausi (P27838113007)

$%i&hatu' ashi&ha (P2783811301)


2/16

HPLC (High-Performance Liquid Chromatographymerupakan salah satu metode yang biasa digununtuk memisahkan sekaligus mengetahui konsesuatu zat yang terkandung dalam suatu campur


3/16

Prinsip Dasar

Prinsip dasar dari HPLC adalah dengan pompa, fasa gerak (cair) dialirkan melalui kodetektor

!emudian cuplikan dimasukan ke dalam aligerak dengan cara penyuntikan Perbedaan k

interaksi antara solut"solut terhadap fasa diamter#adi pemisahan !omponen yang interaksinyakan keluar dari kolom lebih dahulu $etiap koyang keluar kolom dideteksi oleh detektor


4/16

Cara !er#a %lok DiagramReservoir hold *erisi +elarut, Pada sistem i'i- +elarutdise*ut .u/a mobile phase are'a me'/alami+er/eraa' sam+ai +r%ses +e'detesia', High-pressure pump di/u'aa' u'tu me'/hasila' da'

me'/uur e&e+ata' mobile phase dalam satua'milliliter +er me'it, '.et%r *eru'/si se*a/ai tem+atmasu'a sam+le a'/ aa' di+isaha' da' dia'alisis,Sam+le aa' dialira' *ersama de'/a' mobile phase(+elarut) me'u.u %l%m HPLC, 5%l%m HPLC terdiri darimaterial a'/ di*utuha' dalam +r%ses +emisaha',6aterial i'i dise*ut stationary phase, Detet%rdi/u'aa' u'tu melihat separated compound bandsse*a/ai elute dari %l%m HPLC, Mobile phase eluar

dari detet%r da' dieluara' se*a/ai lim*ah ataudium+ula' .ia di*utuha',

Detet%r dihu*u'/a' de'/a' &%m+uter- sistem HPLCaa' meream si'al a'/ di*utuha' u'tume'/hasila' &hr%mat%/ram +ada dis+la u'tudiide'tiasi da' u'tu me'/etahui *esar %'se'trasi+ada masi'/masi'/ &am+ura', 5are'a arateristidari sam+le a'/ diide'tiasi *er*eda- maa

diem*a'/a' *e*era+a dete&t%r, Se*a/ai &%'t%h- .ia&am+ura' da+at me'/a*s%r*si si'ar ultrai%let- maa


5/16

!omponen"komponen HPLC

atempat sampel & 'empat sampel berfungsi untmengimpan sampel yang akan dipisahkan dalam

b n#ektor &n#ektor adalah alat yang digunakan mengin#eksi sampel yang akan dipisahkan

c Detektor &$uatu detektor dibutuhkan untuk

mendeteksi adanya komponen sampel di dalam dan menghitung kadamya (analisis kuantitatif)

d pompa

e mesin pengendali


6/16

umlah $ampel HPLC

$ampel cuplikan harus dimasukkan ke dalam kosebagai lapisan setipis mungkin *kuran sampel+"- mL Dua cara untuk melakukan in#eksi& caradan katup pemasukan cuplikan mikro (micro-samvalve)


7/16

umlah sampel .C

$ample harus mudah menguap dan memiliki ksttermal pada suhu pengoperasian $ampel dimaske dalam aliran gas melalui lubang in#eksi yang pada bagian atas kolom $uatu aliran gas yangsinambung mengelusi komponen"komponen dardan kemudian mencapai detektor yang dihubub

dengan suatu sistem pencatat %erikut diagramn


8/16

!olom pada HPLC

/da tipe& " !olom analitik dengan performance tinggi, diamete

+"0 mm

" !olom preparati1e, diameter lebih besar

'abung kolom dibuat dari kaca dan ba#a tahan karat

kolom -,2"0 meter atau lebih, rata"rata -,3 m !olomlebih pan#ang akan menghasilkan resolusi bertambahtetapi perlu tekanan tinggi 'abung kolom dapat dikeselubung air (water jacket) untuk pengaturan suhu kolom (kemasan kolom) tergantung cara kromatogradipakai (adsorpsi, partisi, atau penukaran ion)


9/16

!olom .C

/da dua tipe utama kolom dalam kromatogra4 gas"cpertama, tube pan#ang dan tipis berisi material pad'ipe kedua, lebih tipis dan memiliki fase diam yangberikatan dengan pada bagian terdalam permukaan

!olom biasanya dibuat dari ba#a tak berkarat dengapan#ang antara + sampai 6 meter, dengan diameter

sampai 6 mm !olom digulung sehingga dapat disesdengan o1en yang terkontrol secara termostatis

!olom dipadatkan dengan tanah diatomae, yang mebatu yang sangat berpori 'anah ini dilapisis denganbertitik didih tinggi, biasanya polimer lilin


10/16

enis enis Detektor HPLC

"Detektor 7luorescence "Detektor *8

"9efracti1e nde: Detector


11/16

Detektor HPLC

/da beberapa cara untuk mendeteksi substansi yang temele;ati kolom


12/16

Detektor .C

/da beberapa tipe detektor yang biasa digunakanDetektor ionisasi nyala merupakan detektor yangumum dan lebih mudah untuk di#elaskan daripadadetektor alternatif lainnyaDalam mekanisme reaksi detektor ionisasi nyala,pembakaran senya;a organik merupakan hal yangsangat kompleks $elama proses, se#umlah ion"ionelektron"elektron dihasilkan dalam nyala !ehadiraion dan elektron dapat dideteksi

$eluruh detektor ditutup dalam o1en yang lebih padibanding dengan temperatur kolom Hal itu


13/16

D='=!'>9

HPLC @C


14/16

7asa Diam

HPLC

7isa diam berupa adsorben yang tidak boleh larut dalam fasa

gerak

*kuran yang lebih kecil (? s@d +-mm) dan tekanan sampai0--- psi *kuran yang kecil dari fasa diam menyebakan fasadiam mempunyai luas permukaan yang besar, keseimbangan

antar fasa men#adi lebih baik dan e4sien pemisahandipertinggi

@C

7asa diam berupa suatu cairan bertitik did

serapannya lebih banyak berupa partisi ydan adsopsi memain


15/16

enis 7asa gerak pada HPLC

%erdasarkan kepolaran fasa diam dan fasa gerak + 7ase Aormal (Aormal Phase)

!ombinasi antara fase diam polar dan fase gerak polar (misal& fase diam& silika atau alumina, faseheksana atau i"propileter)

7ase 'erbalik (9e1ersed Phase)

7ase diam non"polar dan fase geraknya polar (air,metanol, asetonitril) kepolaran fase gerak lebdibanding fase diamnya


16/16

7asa .erak

HPLC

7asa gerak merupakan suatu cairan

@C

fase gerak adalah gas seperti hel

Documents

Ppt Alat Lab Hplcfix