PPT SPEKTROFOTOMETER

8/10/2019 PPT SPEKTROFOTOMETER

1/26

Spektrofotometri UV dan UV-Vis


2/26

OLEH KELOMPOK:

Nurhayati (F1C112010)

Arlina (F1C112019)

Nurliana (F1C112034)

Sundari (F1C112036)

Ria prantika (F1C112042)


3/26

Spektrofotometri merupakan suatu metoda

analisa yang didasarkan pada pengukuranserapan sinar monokromatis oleh suatu lajur

larutan berwarna pada panjang gelombamg

spesifik dengan menggunakan monokromatorprisma atau kisi difraksi dengan detektor fototube.

Apa itu Spektrofotometri ?


4/26

Prinsip Spektrofotometri

Larutan sampel dikenai radiasi elektromagnetik, sehingga menyerap

energi / radiasi terjadi interaksi antara radiasi elektromagnetik

dengan materi (atom/molekul)

Jumlah intensitas radiasi yang diserap oleh larutan sampel dikonversi

dengan konsentrasi analit data kuantitatif


5/26

Analisis Spektrofotometri

Analisis spektrofotometri : analisis kimia yang didasarkan pada

pengukuran intensitas warna larutan yang akan ditentukan

konsentrasinya dibandingkan dengan larutan standar, yaitu larutan

yang telah diketahui konsentrasinya.

Penentuan konsentrasi didasarkan pada absorpsimetri, yaitu metode

analisis kimia yang didasarkan pada pengukuran absorpsi (serapan)

radiasi gelombang elektromagnetik.


6/26

Cara kerja spektrofotometer

1. Tempatkan larutan pembanding, misalnya blangko dalam sel pertamasedangkan larutan yang akan dianalisis pada sel kedua.

2. Kemudian pilih foto sel yang cocok 200nm-650nm (650nm-1100nm) agar

daerah yang diperlukan dapat terliputi.

3. Dengan ruang foto sel dalam keadaan tertutup nolgalvanometer didapat

dengan menggunakan tombol dark-current.

4. Pilih yang diinginkan, buka fotosel dan lewatkan berkas cahaya pada

blangko dannol

galvanometer didapat dengan memutar tombol

sensitivitas.

5. Dengan menggunakan tombol transmitansi, kemudian atur besarnya pada

100%. Lewatkan berkas cahaya pada larutan sampel yang akan dianalisis.

Skala absorbansi menunjukkan absorbansi larutan sampel.


7/26

Spektrofotometri UV merupakan salah satu metode analisis

yang dilakukan dengan pangjang gelombang 100-400 nm atau595299 kJ/mol.

Zat yang dapat dianalisis menggunakan spektrofotometri UVadalah zat dalam bentuk larutan dan zat tersebut tidak tampakberwarna. Jika zat tersebut berwarna maka perlu direaksikandengan reagen tertentu sehingga dihasilkan suatu larutantidak berwarna.
http://wanibesak.wordpress.com/http://wanibesak.wordpress.com/


8/26


9/26

Panjang gelombang Warna Warna komplementer

400 nm 435 nm Ungu Hijau kekuningan

435 nm 480 nm Biru Kuning

480 nm 490 nm Biru kehijauan Jingga

490 nm 500 nm Hijau kebiruan Merah

500 nm 560 nm Hijau Ungu kemerahan

560 nm 580 nm Hijau kekuningan Ungu

595 nm610 nm Jingga Biru kehijauan

610 nm 680 nm Merah Hijau kebiruan

680 nm- 700 nm Ungu kemerahan Hijau


10/26

Radiasi Elektromagnetik

V = Wave Number (cm-1)

l = panjang gelombang (nm-1)

C = kecepata cahaya = 3 x 1010cm/sec.

u = frekuensi (Hz)

Energi foton :

C = u

h (Tetapan Planck) = 6.62 x 10-27(Ergsec)

V =

C

E = h = h C

C

=


11/26

Spektrum Elektromagnetik

Tipe Radiasi Frekuensi (Hz) Panjang Gelombang

Gamma-rays 1020-1024


12/26

Hubungan Transmitansi dan Absorbansi

Transmitansi :T = I/IoI : intensitas cahaya setelah melewati sampel

Io : intensitas cahaya awal

Hubungan Absorbansi dengan %T :A = -logT = -log(I/ Io)

T= (I/Io) = 10-A

%T = (I/Io) x 100

A = -logT = log(1/T)


13/26

Penyimpangan Hukum Lambert-Beer

Larutan pekat

Pada konsentrasi larutan yang terlalu pekat, Absorbansiyang terbaca terlalu tinggi, sehingga grafik tidak linearLarutan yang diukur harus encer

Faktor instrumentasi sinar yang diserap tidak

monokromatis menyebabkan 2 panjang gelombangmaksimum

Faktor kimia karena terjadinya reaksi disosiasi,asosiasi, polimerisasi, solvolisis

Jika terjadi reaksi

konsentrasi zat yang akan diukurberkurang


14/26

Komponen Istrumen Spektrofotometer


15/26

Spektrofotometer

sumber cahaya digunakan untuk pengukuran serapan molekul.

monokromator digunakan untuk memisahkan spektrum warnasesuai dengan panjang gelombang yang dipilih.

detektor digunakan untuk mendeteksi panjanggelombang cahaya yang telah melewati sampel

amplifier digunakan untuk meningkatkan signal


16/26

Komponen Lampu

Spektrofotometer UV

1. Lampu Gas hidrogen

2. Lampu Merkuri

Spektrofotometer Visible

Lampu Tungsen


17/26

Komponen Monokromator

Cahaya : - semua cahaya

- cahaya polikromatik

Monokromator memilih cahaya monokromatik (Cahaya satuwarna )

Cahaya merahyang diserapoleh larutan

hijau


18/26

Detektor

Berfungsi menangkap cahaya yang diteruskandari sampel dan mengubahnya menjadi aruslistrik. Syarat-syarat sebuah detektor :

Kepekaan yang tinggi

Perbandingan isyarat atau signal denganbising tinggi

Respon konstan pada berbagai panjanggelombang.

Waktu respon cepat dan signal minimum

tanpa radiasi.Signal listrik yang dihasilkan harus

sebanding dengan tenaga radiasi.


19/26

Macam-Macam Detektor

Detektor foto (Photo detector)

Photocell, misalnya CdS.

Phototube

Hantaran foto

Dioda foto

Detektor panas


20/26

Struktur kimia dan absorpsi UV

Larutan yang dapat dianalisis denganspektrofotometer UV senyawa yang

mempunyai gugus kromofor

Gugus kromofor : gugus molekul yangmengandung sistem elektronik yang dapat

menyerap energi pada daerah UV


21/26

Tipe Instrumen Spektrofotometer

1. Single-beam instrument ( satu berkas sinar )

digunakan untuk kuantitatif dengan mengukurabsorbansi pada panjang gelombang tunggal. Singlebeam menghasilkan pengukuran sinar UV dan sinartampak. Skema Instrumen Single Beam :


22/26

2. Double-beam instrument ( dua berkas sinar )

Instrument yang digunakan dengan panjang gelombang190 samapai 750 nm, mempunyai dua sinar yang dibentukoleh potongan cermin yang membentuk V yang disebut

pemecahan sinar. Skema instrumen Double Beam :


23/26

Aplikasi spektrofotometer UV

ProteinGlucose Determination

Enzyme Activity (Hexokinase)

Amino Acids (aromatic)


24/26

Struktur Kimia dan Absorpsi Visible

Larutan yang dapat dianalisis denganspektrofotometer visible senyawa yangberwarna

Contoh : KMnO4Apabila senyawa tersebut tidak berwarna,maka perlu ditambahkan pengompleks yangdapat membentuk warna

Contoh : analisis logam Pb


25/26

Aplikasi spektrofotometer visible

Niacin

Pyridoxine

Vitamin B12

Metal Determination (Fe)

Fat-quality Determination (TBA)

Enzyme Activity (glucose oxidase)


26/26

Sekian dan Terima Kasih

Documents

PPT SPEKTROFOTOMETER