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Hiroshi Kawachi – Fujio Shimizu
COMPOSICIÓN MOLECULAR Y FUNCIÓN DEL
DIAFRAGMA DE HENDIDURA: NEFRINA, LA
MOLECULA RESPONSABLE DE LA
PROTEINURIA
Alguno estudios, muestran que la hendidura diafragmática
es la estructura responsable de ser barrera de retención
de proteínas en la pared glomérulo capilar; en conjunto de
componentes como la nefrina, ZO-1 p cadherina y FAT
que hacen parte de la misma.
Zo-1: identificado como componente de las zonas de oclusión.
Localizado en la superficie citoplasmática de la hendidura
diafragmática como punto de inserción de la nefrina
Nefrina: fue identificada como un gen producto de la mutación en el
síndrome nefrótico congénito (el bebe presenta proteínas en la orina)
mAb 516: induce una masiva proteinuria.
INTRODUCCIÓN.
• El capilar glomerular es altamente permeable al agua, pequeñas moléculas de
soluto y iones… pero sirve también para excluir la proteínas de la orina.
• Células endoteliales glomerulares
• Células de la membrana basal glomerular
• Células del epitelio glomerular (podocitos).
La unión entre los pies de los podocitos, que es el poro de hendidura, están
unidos por una pequeña membrana llamada hendidura diafragmática.
• El anticuerpo monoclonal anti hendidura diafragmática, producía una gran cantidad de
proteinuria en ratas.
• Síndrome nefrótico congénito de tipo terminal, es causado por la mutación de un gen que
se encarga de la producción de la nefrina que es un componente de la hendidura
diafragmática.
¿DONDE ESTA LA PRINCIPAL BARRERA DE
FILTRACIÓN?... EN LA MEMBRANA BASAL
GLOMERULAR, O EN HENDIDURA DIAGRAMÁTICA.
• Albumina.
• Selectividad por carga y por tamaño.
• Las células del endotelio fenestrado están cargadas negativamente. (podocaxilina)
Membrana basal glomerular es la membrana principal o
critica
Mbg solo es un pre filtrador , y la membrana critica
yace es en la hendidura diagramática.
¿ES LA MEMBRANA BASAL GLOMERULAR LA
BARRERA PRINCIPAL?
• Lamina densa
• Lamina rara: interna y externa
• Colagena tipo 4, laminina, fibronectina, nidogeno, entactina
• Síndrome de Alport ( ausencia de cadenas α3 y α4 de colagena IV)
Está es la principal estructura a cargo de mantener la selectividad del glomérulo, sin
embargo, este no es una barrera perfecta para detener la proteínas del plasma.
¿ES EL DIAFRAGMA DE HENDIDURA IMPORTANTE
COMO BARRERA? 25-60 nm
• Karnovsk y Graham en 1966 con algunos estudios demostraron que
el diafragma de hendidura juega un papel importante: En el mantenimiento de la función de la barrera de la Pared capilar glomerular (PEROXIDAZA y MIELOPEROXIDAZA)
• Concluyen que el diafragma de hendidura es la primera filtración
● Subestructura de cremallera , puentes cruzados, membranas
plasmáticas de los podocitos, al filamento central.
● Los podocitos: dotados en carga negativa, capa de poli aniones
epiteliales. Como acido sillico-rica. Una proteína de 140 kD,
podocalyxin.
BIOGÉNESIS
• Epitelio columna indiferenciado célula epitelial glomerular
Vesícula cumulo de caulas que forma luz en el centro
Etapas Cuerpo en forma de s
Desarrollo bucle capilar vesícula se invade de mesénquima en S
Maduración
Desarrollo del bucle capilar
Aumentan las interdigitaciones del
epitelio Epitelio glomerular Túbulo proximal
El mesénquima
• Inicialmente la membrana celular entre células adjuntas esta
cerrada, solo adosada por interdigitaciones y zona de oclusión
• Espacio intercelular: esta cubierto por un diafragma de hendidura
Podocito inmaduro: Podocito maduro
Tiene zona de oclusión y su estructura desparece
Estructura de escalera y se remplaza por el
diafragma de hendidura
El diafragma de la hendidura es formado en situ a partir de los componentes
basolaterales de la membrana plasmática de podocitos y los complejos de unión.
NEFRINA UN COMPONENTE CLAVE EN EL DIAFRAGMA DE
HENDIDURA
Gen NPHS1 NEFRINASuperficie del Podocito
Diafragma de hendidura
Poro de la hendidura
Ruotsalainen
Usando un anticuerpo especifico
para el sitio extracelular de la
Nefrina humanaProteína muy conservada
Importante rol en el
mantenimientoRegula el diámetro de
Los poros.
ESTRUCTURA DE LA NEFRINA
Proteína transmembranal de 1241 residuos y de la superfamilia de inmunoglobulinas.
Contiene ocho Ig tipo C2 como moduladores, una fibronectina tipo III como modulador ,
diez sitios de N-glicosilación en dominio extracelular.
Dominio citosólico contiene: 9 tirosinas
La Nefrina en ratones es 82% idéntica en la secuencia de aminoácidos (Holthofer)
NEFRINA
Receptor de adhesión y
una proteína de señal.Probablemente sea
DOMINIO EXTRACELULAR
DOMINIO INTRACELULAR Función crucial
Perdida o mutación de 132 de
155 residuos de este dominio Síndrome nefrótico congénito
Afinidad con la
proteína asociada a CD2 (CD2AP)
Interactúa con el dominio citoplasmático
de CD2 (proteína de membrana en células
T o natural Killer) que facilita adhesión con
el antígeno.
ANTI-NEFRINA MAB 5-1-6
1988 Orikasa establece que la mAb 5-1-6 causa proteinuria masiva.
Inmunohistoquimica demuestra que mAb 5-1-6 reconoce antígeno en el diafragma de
hendidura.
mAb 5-1-6 reconoce dominio extracelular de la nefrina.
Bajo mAb 5-1-6 no se observan cambios estructurales mayores.
Proteinuria tras inyección de mAb 5-1-6
• Se localiza en el diafragma de hendidura
• Constituyen una familia de glicoproteínas que
participan en la formación de uniones adherentes
entre 2 pedicelos adyacentes
• Zo-1 esta ubicada en la cara citoplasmática y
participa en la formación de zonas de oclusión.
P- CADHERINA
ASPECTOS CLÍNICOS DE LA DISFUNCIÓN DEL DIAFRAGMA DE
HENDIDURA
• ¿La disfunción del diafragma de hendidura causante de las proteinuria ?
• Enfermedades como la del síndrome de Alport, alteraciones GMB, contribuye a la proteinuria.
• Podocitos en la orina refleja la magnitud de la proteinuria Estos hallazgos sugieren que la disfunción
proteinuria podocitos. está implicado en el desarrollo de la glomerulonefritis proliferativa mesangial
CONCLUSIÓN• Estudios recientes han demostrado claramente que el diafragma de hendidura es la estructura más
importante como la barrera en el encantamiento-glomerular pared capilar.
• Nefrina, ZO-1, P-cadherina y FAT son componentes de la diafragma de ranura.
• ZO-1 se localiza en la superficie citoplásmica sólo en la inserción del diafragma de ranura, mientras
que la nefrina se encuentra en los folletos exteriores de las membranas plasmáticas.
GRACIAS.
