REVERSIÓN DEL FENOTIPO DE DESGASTE DE LINFOCITOS T-CD4+ MEDIADA POR CÉLULAS DENDRÍTICAS PLASMACITOIDES

Mª Reyes Jiménez León

Laboratorio de Infección por VIH y farmacocinética de antivirales. Unidad de gestión clínica de Enfermedades Infecciosas, Microbiología y Medicina

Preventiva, Hospital Universitario Virgen del Rocío (HUVR), Instituto de Biomedicina de Sevilla (IBIS) Sevilla/España.

PO-20

GeSIDA 2019

La inflamación crónica persistente de bajo grado parece ser uno de los principales

detonantes de los eventos no sida (ENOS), principal causa de muerte en pacientes

VIH bajo tratamiento antirretroviral combinado .

La fuente de esta inflamación es la activación deletérea de componentes del

sistema inmunitario innato que conducen a una desregulación de los linfocitos T y

su consecuente desgaste.

INTRODUCCIÓN GeSIDA 2019

INTRODUCCIÓN

Tim-3 CD4 Tcell

TIGIT

PD-1

Lag-3

TCR Exposición persistente a un

antígeno.

• Baja respuesta a estímulos.

• Disminución de la capacidad de proliferación.

• Expresión aberrante de citoquinas.

• Pérdida de función efectoras.

• Aumento de reservorio.

Mecanismos de desgaste celular: GeSIDA 2019

HIPÓTESIS Y OBJETIVOS Hipótesis: La manipulación de la funcionalidad de las pDCs mediada por los TLR podría favorecer una respuesta efectiva de las pDCs en sujetos infectados por VIH con objetivo de revertir el desgaste de los linfocitos CD4+.

Objetivo: Estudiar si pDCs estimuladas con agonistas de receptores tipo Toll (TLR)-7 y -9 son capaces de revertir el fenotipo de desgaste en los linfocitos-T.

TLR9

TLR7

GeSIDA 2019

MATERIALES Y MÉTODOS

pDCs

pDCs +/- estímulos TLR : AT-2 GS9620 CpG-A CpG-C

+

pDCs 5 Donantes Sanos

5 Pacientes Naïve

6 Pacientes cART

CD4

Análisis mediante citometría de flujo multiparamétrico

de Linfocitos T-CD4:

Subpoblaciones: CD45RA, CD27

Immune Checkpoint: LAG3, TIGIT, TIM3, PD1

Citoquinas: IL2, TNF-α, INF-g, IL17a

Ex-vivo: pDCs CD4

Agonista TLR7

Agonista TLR9

+/- GAG GeSIDA 2019

RESULTADOS

EX-VIVO %C

D4

+C

D4

5R

A-C

D2

7+

TIG

IT+

VIR

cA

RT

HD

0

2

4

6

8

0 .0 3 0

%C

D4

+C

D4

5R

A-C

D2

7+

TIM

3+

VIR

cA

RT

HD

0 .0

0 .5

1 .0

1 .5

0 .0 5 1

%C

D4

+C

D4

5R

A-C

D2

7+

LA

G3

+

VIR

cA

RT

HD

0

1

2

3

4

5

0 .0 1 7

%C

D4

+C

D4

5R

A-C

D2

7+

PD

1+

VIR

cA

RT

HD

0

1 0

2 0

3 0

4 0

0 .0 1 7

LAG3 TIGIT

PD1 TIM3

GeSIDA 2019

RESULTADOS

EX-VIVO CD4+CD45RA+CD27-

0.047

0.028

NAÏVE TRATAMIENTO SANO

5 Funciones

4 Funciones

3 Funciones

2 Funciones

1 Función

CD107a

IL-2

IL17a

INFγ

TNFα

GeSIDA 2019

RESULTADOS %

CD

4+

CD

45

RA

-CD

27

+ L

AG

3+

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

0

5

1 0

1 5 S E A T 2 C p G A C p G C G S 9 6 2 0

0 .0 5 0 .0 0 0 8 0 .0 0 0 8 0 .0 0 4 3 0 .0 8

%C

D4

+ C

D4

5R

A-C

D2

7+

TIG

IT+

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

0

2 0

4 0

6 0

S E A T 2 C p G A C p G C G S 9 6 2 0

0 .0 5 1 0 .0 5 1 0 .0 5 1 0 .0 5 1 0 .0 5 1

GeSIDA 2019

RESULTADOS %

CD

4+

CD

45

RA

-CD

27

+ P

D1

+

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

0

1 0

2 0

3 0

4 0 S E A T 2 C p G A C p G C G S 9 6 2 0

n s n s n s n s n s

%C

D4

+ C

D4

5R

A-C

D2

7+

TIM

3+

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

VIR

cA

RT

HD

0

1

2

3

4 S E A T 2 C p G A C p G C G S 9 6 2 0

n s n s n s n s n s

GeSIDA 2019

RESULTADOS %

CD

4+

CD

45

RA

-CD

27

+ I

L2

+

NS

-GA

G

AT

-2-G

AG

Cp

G-A

-GA

G

Cp

G-C

-GA

G

GS

9620-G

AG

0

1

2

3

0 .0 4 6 9

%C

D4

+ C

D4

5R

A-C

D2

7+

IL

17

a+

NS

-GA

G

AT

-2-G

AG

Cp

G-A

-GA

G

Cp

G-C

-GA

G

GS

9620-G

AG

0 .0

0 .2

0 .4

0 .6

0 .8

1 .0

0 .0 1 5 6

0 .0 3 1 3

%C

D4

+ C

D4

5R

A-C

D2

7+

IN

F

+

NS

-GA

G

AT

-2-G

AG

Cp

G-A

-GA

G

Cp

G-C

-GA

G

GS

9620-G

AG

0 .0

0 .2

0 .4

0 .6

0 .8

0 .0 1 5 6

0 .0 3 1 3

0 .0 1 5 6

0 .0 3 1 3

%C

D4

+ C

D4

5R

A-C

D2

7+

TN

F

+

NS

-GA

G

AT

-2-G

AG

Cp

G-A

-GA

G

Cp

G-C

-GA

G

GS

9620-G

AG

0 .0

0 .5

1 .0

1 .5

0 .0 1 5 6

0 .0 1 5 6

0 .0 4 6 9

IL2 IL17a

INFγ TNFα

GeSIDA 2019

RESULTADOS %

CD

4+

CD

45

RA

-CD

27

+

CD

10

7a

- IL

2+

IL1

7a

+IN

F

+T

NF

+

NS

-GA

G

AT

-2-G

AG

Cp

G-A

-GA

G

Cp

G-C

-GA

G

GS

9620-G

AG

0 .0 0

0 .0 5

0 .1 0

0 .1 5

0 .0 3 1

0 .0 3 7

%C

D4

+ C

D4

5R

A-C

D2

7-

CD

10

7a

- IL

2-I

L1

7a

-IN

F

+T

NF

+

NS

-GA

G

AT

-2-G

AG

Cp

G-A

-GA

G

Cp

G-C

-GA

G

GS

9620-G

AG

0 .0 0

0 .0 5

0 .1 0

0 .1 5

0 .0 2 5

0 .0 3 7

0 .0 1 0

CD107a-IL2+IL17a+INFγ+TNFα+ CD107a-IL2-IL17a-INFγ+TNFα+ GeSIDA 2019

Las pDCs estimuladas con agonistas de TLR7 y 9 permitieron la reversión parcial

del fenotipo de desgaste así como un aumento en la polifuncionalidad de los

linfocitos T-CD4+ en pacientes bajo ART.

Estos resultados pueden tener importantes implicaciones en la reducción de los

efectos deletéreos que conducen a la aparición de ENOs y con la reducción de los

niveles de reservorio de VIH.

CONCLUSIONES

GeSIDA 2019

AGRADECIMIENTOS Dr. Luis López-Cortes

Dr. Pompeyo Viciana

Dr. Ezequiel Ruiz-Mateos

Dra. Nuria Espinosa

Dra. Cristina Roca

Dr. Cesar Sotomayor

Dra. Marta Herrero

Inmaculada Rivas

Silvia Llaves

Yusnelkis Milanés

Montserrat Dominguez

Dra. Alicia Gutiérrez

Dra. Karin Neukam

Dr. Mohamed Rafii

María Trujillo

Carmen Gasca

Esperanza Muñoz

Ana Serna

Macarena López

GeSIDA 2019