Upload
others
View
7
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
ZÁKLADY OBECNÉ A KLINICKÉ BIOCHEMIE 2004ZÁKLADY OBECNÉ A KLINICKÉ BIOCHEMIEZÁKLADY OBECNÉ A KLINICKÉ BIOCHEMIE 20042004
Technologie kvantitativních metod
Petr Štern
kapitola ve skriptech - 4.2.2
Technologie kvantitativních metod
Petr Štern
kapitola ve skriptech - 4.2.2
22
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
200 600 1000 1400 1800 2200 2600400 800 1200 1600 2000 2400
vlnová délka [nm]
Ener
gie 4000 °C
3000 °C2000 °C
U V V I S I R
b.t. W ~ 3600 °C
Spektrální distribuční křivky Spektrální distribuční křivky W žárovkyW žárovky
Optické zdrojeOptické zdroje
33
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Optické zdrojeOptické zdroje
200 300 400 vlnová délka [nm]
Ener
gie
Rozdělení spektrální energie u Rozdělení spektrální energie u nízkonapěťové nízkonapěťové deuteriovédeuteriovévýbojkyvýbojky
200 600 1000 1400 1800 vlnová délka [nm]
400350300250200150100
500R
elat
ivní
ene
rgie
[ar
b.j.]
U V V I S I R
Distribuce Distribuce spektrální energie spektrální energie vysokotlaké vysokotlaké XeXevýbojkyvýbojky
44
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Optické detektoryOptické detektoryDopadající záření
K A
E ⊕
~ 90 V
RL k zesilovači fotónkafotónka
Směr osvětlení
k
1 3
2 a
R R R R
BA
k – fotokatodaa – anoda1, 2, 3 – dynodyR – odpory děliče napětíB – zdroj konstantního napětíA – měřič fotoelektrického
proudu
fotonásobičfotonásobič
55
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Konfigurace optických prvků ve fotometriiKonfigurace optických prvků ve fotometrii
Obvykléuspořádání
Diodovépole
mřížka
mřížka
bílé světlo
bílé světlo
červené
červené
modré
modré
vzorek
vzorek
detektorštěrbina
rotující mřížka pro měření různých vlnových délek
všechny vlnové délky jsou měřeny současně
diodové pole
66
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Monochromátor
DěličpaprskuEliptické
zrcadlo
Vstupníštěrbina
Filtry
Xevýbojka
Eliptickévstupnízrcadlo
Měřícífotodetektor
Referenčnífotodetektor
Eliptickézrcadlo
Referenčnífotodetektor
Měřícífotodetektor
Kyveta
9 kanálůoptických
vláken
96 jamekmikrodestičky
Děličpaprsku
Konkávníholografická
mřížka
Schéma vertikálního fotometruSchéma vertikálního fotometru
77
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Principy detekce v reflexní fotometriiPrincipy detekce v reflexní fotometrii
VláknaVlákna -- pulzující světlo LEDpulzující světlo LEDdopadá na bíloudopadá na bílou vnitřní stěnuvnitřní stěnukoule a je odráženo všemi směrykoule a je odráženo všemi směry
FilmFilm –– měření reflexe se provádí měření reflexe se provádí z opačné strany, než byl aplikovánz opačné strany, než byl aplikovánvzorekvzorek
88
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
PlamenováPlamenováatomová absorpční atomová absorpční spektrofotometriespektrofotometrie
Hořák
Měrný paprsek
Referenční paprsek
Clonka
Fotonásobič
Monochromátor
Zrcadla
Deutériová výbojka
Dutá katodová výbojka
99
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Schéma konstrukce kvalitního Schéma konstrukce kvalitního fluorimetrufluorimetru
MŘÍŽKA MŘÍŽKA
REFERENČNÍFOTONÁSOBIČ
FILTR
DIFÚZNÍDESKA
CLONKA
KYVETA
FOTONÁSOBIČPRO VZOREK
EMISNÍMONOCHROMÁTORY
EXCITAČNÍMONOCHROMÁTORY
XENONOVÁŽÁROVKA
DĚLIČPAPRSKU
1010
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Schéma měřící komorySchéma měřící komorypro pro elektroluminiscencielektroluminiscenci
Elektrody 2 V
SvětloRutheniový
komplex
1111
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Optické schéma turbidimetrie a nefelometrieOptické schéma turbidimetrie a nefelometrie
TURBIDIMETRIETURBIDIMETRIE
NEFELOMETRIENEFELOMETRIE
1122
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Elektrochemické metodyElektrochemické metodydvojí konstrukce iontovědvojí konstrukce iontově--selektivních elektrodselektivních elektrod
1313
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Elektrochemické metodyElektrochemické metodyCOCO22 elektrodaelektroda
Vnitřní elektroda Ag/AgCl
Držadlo skleněné elektrody
Plastikové pouzdro
Plášťelektrody
Referenční elektroda Ag/AgCl
Fosfátový pufrNaHCO3
Vstup vzorku Výstup vzorku
Těsnící kroužek
Skleněná membrána citlivá na pHPorézní vložka
Membrána propustná pro CO2(silikonová guma)Kyveta
Skleněné okénko
1414
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Elektrochemické metodyElektrochemické metodyClarkovaClarkova OO22 elektrodaelektroda
Katoda –0,65 V Pt drátSkleněná
tyč
Plastikové pouzdro
Kryt elektrody
Těsnicí kroužek
Výstup vzorku
Pt-katoda (odkrytý konec drátu)
Polypropylenová membrána propustná pro O2Kyveta
Skleněné okénko
Anoda 0V Ag/AgClFosfátový pufr
Vstup vzorku
1515
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Elektrochemické metodyElektrochemické metodyschéma schéma coulometrucoulometru pro stanovení chloridůpro stanovení chloridů
1616
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
ElektroforézaElektroforéza
zónová kapilárnízónová kapilární
1717
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Izotopové metody Izotopové metody γγ--počítačpočítač
Pipetovací jednotka
Inku
bačn
í je
dnot
ka
Prom
ývac
í je
dnot
kaDetekční jednotka
1818
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Chromatografické metodyChromatografické metody
PlynováPlynová
chromatografiechromatografie
Vysoko účinnáVysoko účinná
kapalinovákapalinová
chromatografiechromatografie
1919
TECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METODTECHNOLOGIE KVANTITATIVNÍCH METOD PETR ŠTERNPETR ŠTERN
Hmotnostní spektrometrieHmotnostní spektrometrie