4
Pembuatan Inokulum Pembuatan Larutan Disinfektan Suspensi kuman uji setara dengan Me Farland III Setarakan kekeruhan Pindahkan biakan kuman Biakan S. aureus Larutaan Me Farland III (10 9 kuman/m Suspense kuman 10 8 kuman/ml 10 7 kuman/ml setara dengan 10 9 kuman/ml 10 6 4,5 ml NaCl 0,9% 4,5 ml NaCl 0,9% 4,5 ml NaCl 0,9% Disinfektan 9 ml air suli 4,5 ml air 7 ml air suli 7 ml air suli 1:10 1:80 1:10 0 1:15 0 1 ml 0,5 ml 0,5 ml

prosedur mikro

Embed Size (px)

DESCRIPTION

prosedur ikrobiologi

Citation preview

Pembuatan Inokulum

Pembuatan Larutan Disinfektan

Angka Lempeng Total Disiapkan 5 tabung reaksi atau lebih masing-masing telah diisi dengan 9 ml larutan pengencer NaCl fisiologis Dari hasil homogenisasi sampel pada persiapan sampel yang merupakan pengenceran 10-1 dipipet 1 ml kedalam tabung yang pertama dikocok sampai homogeny hingga diperoleh pengenceran 10-1 Dibuat pengenceran selanjutnya hingga 10-5 atau sesuai dengan yang diperlukan Dari setiap pengenceran dipipet 1 ml kedalam cawan petri dan dibuat duplo. Kedalam cawan petri dituangkan 10-20 ml media AN Cawan petri segera digoyang dan diputar sedemikian rupa sehingga suspense tersebut merata Untuk mengetahui sterilitas media dan larutan pengenceran dibuat blanko Setelah media memadat, cawan petri diinkubasi 37oC selama 24 jam dengan posisi dibalik. Jumlah koloni yang tumbuh diamati dan dihitung. SKEMA KERJA ANGKA LEMPENG TOTAL BAKTERI

Pindahkan biakan kuman dengan ose

Setarakan kekeruhan

Larutaan Me Farland III (109kuman/ml)

Suspensi kuman uji setara dengan Me Farland III (104kuman/ml)

4,5 ml NaCl 0,9%

4,5 ml NaCl 0,9%

4,5 ml NaCl 0,9%

Suspense kuman 108 kuman/ml107 kuman/ml setara dengan

109kuman/ml 106 kuman/ml

Biakan S. aureus

0,5 ml

0,5 ml

1 ml

7 ml air suling

4,5 ml air suling

7 ml air suling

9 ml air suling

7 ml air suling

1:150

1:10

1:100

1:80

Disinfektan

Volume akhir menjadi 5 ml

1 ml

1 ose

1 ose

1 ose

1 ose

Fenol 1:80

Uji I 1:80

Uji II 1:100

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

Uji III 1:150

5 ml NB

5 ml NB

5 ml NB

Fenol F5 F10 F15 1:80

Disinfektan Des 1:100Des 1:100 Des 1:100 1:100 5 10 15

Disinfektan Des 1:80Des 1:80 Des 1:80 1:80 5 10 15

Disinfektan Des 1:150Des 1:150 Des 1:150 1:150 5 10 15

0,5 ml

0,5 ml

0,5 ml

0,5 ml

Inoculum 104 kuman/ml

1 ml buang

1 ml

1 ml

1 ml

1 ml

Setelah media memadat

(+) 10-20 ml media NA

(+) 10-20 ml media NA

(+) 10-20 ml media NA

(+) 10-20 ml media NA

(+) 10-20 ml media NA

10-6

10-5

10-4

10-3

10-2

Hitung jumlah koloni yang tumbuh

Inkubasi pada suhu 370C selama 24 jam dengan posisi cawan terbalik

Goyangkan sehingga suspense homogen

Pipet 1 ml sampel hasil homogenisasi

Siapkan 5 buah tabung / lebih @ isi 4 ml larutan NaCl fisiologis