Pruebas bioquimicas
Pruebas bioqumicas1Prueba catalasaEnzima q poseen la mayora de
bacterias aerobias.
Descomponen el Perxido de hidrogeno -> Oxigeno y agua.
2 H2O22 H2O + O22El perxido de hidrgeno es un residuo
delmetabolismocelularde muchos organismos vivos y tiene entre otras
una funcin protectora contra microorganismos patgenos,
principalmenteanaerobios.Positivo: Px de burbujas
2Prueba oxidasaDetecta la enzima Citocromo-c-oxidasa
Los citocromos son enzimas que forman parte de la cadena de
transporte de electrones en la respiracin aerbica, transfiriendo
electrones al oxgeno, con la formacin final de agua.Tiras de papel
impregnada en solucin acuosa al 1% de cloruro de tetrametil
para-fenilendiamina
Rx positiva: azul-morado3Coagulasa (Prueba del tubo de ensayo)Es
una protena.
Coagulasa convierte el Fibringeno -> Fibrina*Protena px tb
por Yersinia pestisEvita fagocitosis.Coagulacin sangunea
Rx positiva: Formacin de coagulo. (S. aureus) Rx negativa: S.
epidermidis4Agar KliglerFermentacin de glucosa y lactosa.Px gasPx
SH2
K= ALCALINOA= ACIDO5
1 2 3 4A/A GAS: + H2S: -
K/A GAS: - H2S: -
3) K/A GAS: - H2S: +
4) K/K GAS: - H2S: -
6Agar Urea (Medio Christensen)La ureasa es una enzima presente
en numerosas bacterias. Esta enzima cataliza la hidrlisis de la
urea, con produccin de dixido de carbono y amonaco, lo que causa
una alcalinizacin del medio (rojo fenol)
7Medio SIM SH2: Para detectar la produccin de SH2 a partir de
tiosulfato sdico debe incorporarse al medio de cultivo un
indicador, dado que el H2S es incoloro.
Para tal fin se suele utilizar alguna sal de hierro (Sulfato de
hierro amonio) que reacciona con el SH2, para producir un
precipitado negro de sulfuro de hierro.
8Indol: La prueba de indol se emplea para detectar la presencia
de la enzima triptofanasa en bacterias, que degrada el aminocido
triptfano a indol.
Medio SIM
9Motilidad: turbidez en la lnea de siembra.Verlo a contraluz
Medio SIM10
1) H2S: + INDOL: - MOT: +3)H2S : - INDOL: - MOT: -2) H2S: -
INDOL: + MOT: +
11Agar DNAsaDeteccin de enzimas desoxirribonucleasas.
El cido desoxirribonucleico (ADN), se encuentra en grado
altamente polimerizado.
La presencia de la enzima, se puede detectar mediante el
agregado de cido clorhdrico 1N.
El HCl precipita el DNA presente, transformando el medio de
cultivo translcido, en opaco.
En donde haya DNA va a estar opaco.S. aureus: DNAsa +
12Agar Baird ParkerAislamiento de S. aureus.Es un medio
parcialmente selectivo. Utiliza la capacidad de los estafilococos
de reducir el telurito a telurio (colonias gris oscuro a negro)
Detecta la enzima lecitinasa a partir de la lecitina del huevo.
(zonas transparentes)
13
Agar Baird Parker14Agar MR-VP (Rojo de metilo y Voges
Proskauer)
Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un
microorganismo de fermentar la glucosa con produccin de cido por la
va cido mixta o con produccin de un producto final neutro (acetona)
por la va butanodilica
Se originaran productos finales:cidos: (acido lctico, acido
actico, acido frmico) -> para revelar se usa ROJO DE METILO
Neutros: (acetil metil carbinol) para revelar se usa ALFA NAFTOL
e HIDROXIDO DE POTASIO.
VP: Acetoina
Citrato de SimmonsSi el microorganismo utiliza el citrato como
fuente de carbono, tambin utiliza las sales de amonio como fuente
de nitrgeno, con produccin de amonaco, lo que da lugar a una
alcalinizacin del medio. ( verde -> azul intenso)
Enzima citrato permeasa
El desdoblamiento del citrato genera progresivamente,
oxalacetato y piruvato. Este ltimo, en presencia de un medio
alcalino, da origen a cidos orgnicos que al ser utilizados como
fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos
alcalinos.
Azul de bromotimolpH: 6.9 0.2 17
AlcalinizacinCitrato de SimmonsMedio LIA (Agar Lisina hierro)1)
Fermentacin Glucosa 2) Baja pH (acidez-> amarillo)3) Enzima:
-Descarboxilasa (metabolismo lisina ->Px aminas cadaverina (
eleva pH) torna morado pH: 6.7 0.2Px de Sulfuro de Hidrogeno
(H2S)Gas
Medio LIA (Agar Lisina hierro)
21ANTIBIOGRAMA1-2 x108 UFC625 nm espectrofotmetro0.08- 0.12
RESISTENTEPolimixina B:
