Puji Lestari 2009, Poliuri

8/16/2019 Puji Lestari 2009, Poliuri

1/8

ISBN 978-602-95471-0-8

Seminar Nasional Biologi XX dan Kongres PBI XIV UIN Maliki Malang 24-25 Juli 2009 i


2/8

ISBN 978-602-95471-0-8

104 Prosiding Biteknologi

PEMANFAATAN TANAMAN BROTOWALI (Tinospora crispa L .)

SEBAGAI ANTIDIABETIK

Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada

ABSTRAK

Dalam rangka mempertahankan keanekaragaman hayati khususnya tanaman obat di

Indonesia, maka perlu dilakukan penelitian ilmiah tentang khasiat tanaman obat. Dalam

kajian ini telah diteliti kemampuan ekstrak etanol akar, batang dan daun brotowali

terhadap kadar glukosa darah tikus putih jantan hiperglikemik.

Penelitian ini dirancang secara acak lengkap menggunakan tikus putih jantan, galur

Spargue Dawley, 2 bulan, berat badan 200-230 g selama 28 hari. Dua puluh tikus dibuat

hiperglikemik dengan menggunakan aloksan 125 mg/kg bb, selanjutnya dibagi menjadi 4kelompok yaitu (1) kontrol hiperglikemik, (2) diberikan ekstrak etanol akar sebesar 115

mg/kgbb, (3) diberikan ekstrak etanol batang sebesar 115 mg/kgbb dan (3) diberikan

ekstrak etanol daun sebesar 115 mg/kgbb. Sebagai kontrol normal digunakan 5 ekor tikus

yang diberi aquades. Kadar glukosa darah ditentukan dengan metode spektrofotometri.

Hasil penelitian dianalisis dengan ANOVA dan DMRT (p


3/8

ISBN 978-602-95471-0-8

Seminar Nasional Biologi XX dan Kongres PBI XIV UIN Maliki Malang 24-25 Juli 2009 105

yang paling banyak digunakan adalah bagian batang sedangkan bagian lainnya yaitu akar

dan daun belum banyak digunakan, karena belum diketahui manfaatnya oleh masyarakat.

TUJUANTujuan dari penelitian ini adalah mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol

akar, daun dan batang brotowali (Tinospora crispa L.) dalam menurunkan kadar glukosa

darah tikus hiperglikemik.

CARA KERJA

a. Rancangaan Percobaan

Rancangan Percobaan yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu Rancangan

Acak Lengkap dengan 3 perlakuan dan 2 kontrol. Duapuluh ekor tikus jantan galur SD

yang telah mengalami kondisi hiperglikemik di bagi ke dalam 4 kelompok yaitu

kelompok kontrol hiperglikemik, kelompok perlakuan ekstrak etanol akar , perlakuan

ekstrak etanol batang dan perlakuan ekstrak etanol daun brotowali (T.crispa L.) dan 5ekor lainnya yang tidak diinjeksi aloksan digunakan sebagai kontrol normal (Tabel 1).

b. Pembuatan Ekstrak Etanol Batang, Daun dan Akar BrotowaliPembuatan ekstrak dilaksanakan di CV. Chemix Pratama, Bantul, Yogyakarta.

Ketiga bahan diekstrak secara terpisah. Bahan yang akan diekstraksi pertama kali

dihancurkan dengan mesin penggiling , selanjutnya bahan yang telah hancur tersebut

ditambah dengan etanol 96 % ± 500 ml dan didiamkan selama 10 menit. Selanjutnya

campuran tersebut di blender sampai halus dan selajutnya disaring dengan kain. filtrat

yang diperoleh selanjutnya diuapkan dengan waterbath sampai sisa etanol menguap.

Setelah filtrat mengental (etanol sudah mengguap) selanjutnya dioven agar diperoleh

ekstrak dengan kadar air seminimal mungkin. Dari proses tersebut akan diperoleh ekstrak

berupa pasta. Selanjutnya dilakukan penghitungan kadar air pasta dengan menggunakan

metode botol timbang. Dengan demikian dapat diketahui kadar murni ekstrak yang

dihasilkan dalam bentuk pasta

c. Pembuatan Tikus HiperglikemikAloksan dengan dosis 125 mg/kgbb dilarutkan dengan NaCl 1 N sehingga

diperoleh larutan aloksan dengan dosis 1ml/25mg/200gbb dan diberikan kepada 20 ekor

tikus melalui subkutan dengan menggunakan jarum suntik.

d. Perlakuan Terhadap Hewan UjiLima kelompok tikus selanjutnya diberi perlakuan sesuai dengan Tabel 1 selama

28 hari. Pemberian ekstrak dilakukan secara oral dan ekstrak diberikan sesuai dosis yang

dilarutkan dengan akuades.

Tabel 1. Kelompok perlakuan dan kontrol.

Kelompok PerlakuanK (-) Diberi aquades (tikus normal) + pakan BR II

K (+) Aloksan 125mg/kgbb + aquades (kontrol hiperglikemia) + pakan

BR II

P1 Aloksan125mg/kgbb + ekstrak batang 115 mg/bb + pakan BR II

+ aquades

P2 Aloksan 125mg/kgbb + ekstrak daun 115 mg/bb + pakan BR II +

aquades

P3 Aloksan 125mg/kgbb + ekstrak akar 115 mg/bb + pakan BR II +

aquades

Keterangan : bb = berat badan


4/8

ISBN 978-602-95471-0-8


e. Pengukuran kadar glukosa darahPengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan menggunakan Kit produk

Diasys. Analisis dilakukan secara enzimatik dengan metode GOD PAP dan kadarnyadiukur secara spektrofotometrik. Reagen yang digunakan adalah Glukosa GOD FS

(glukosa test dari merk diasys). Selanjutnya data yang diperoleh dianalisis dengan

ANAVA dan DMRT (Duncan Multiple Range Test).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Kadar glukosa darah tikus kondisi hiperglikemik

Sebelum perlakuan dimulai, dilakukan injeksi aloksan pada 20 ekor tikus

untuk membuat kondisi hiperglikemik.

Tabel 2. Kadar glukosa darah sebelum dan sesudah pemberian aloksan

Waktu pengukuran Rerata kadar glukosa darah ± SD

Sebelum 70,66 ± 22,8a

Sesudah 355,62 ± 54,59b

Keterangan :

Angka yang diikuti huruf yang berbeda pada tiap kolom menunjukan adanya

beda nyata

(n=20; p< 0,05)

sebelum : kadar glukosa darah normal sebelum injeksi aloksan

sesudah : kadar glukosa darah 13 hari setelah injeksi aloksan

Pengukuran kadar glukosa darah yang dilakukan sebelum dan sesudah pemberian

aloksan dimaksudkan untuk mengetahui kondisi normal dan kondisi hiperglikemik yang

terjadi. Dari Tabel 2. Di atas dapat dilihat bahwa kadar glukosa darah 13 hari setelah

pemberian aloksan telah melebihi normal dan berbeda nyata secara signifikan. Hal ini

kemungkinan disebabkan terjadinya inhibisi pelepasan insulin oleh sel β pankreas

(selective necrosis of islet of Langerhans) tikus sehingga akan mengurangi jumlah sekresi

insulin yang berakhir pada meningkatnya kadar glukosa dalam darah sehingga terjadi

kondisi hiperglikemik.

Setelah kondisi hiperglikemik dicapai maka keduapuluh ekor tikus tersebut dibagi

menjadi empat kelompok perlakuan seperti Tabel 1. Selanjutnya juga dilakukan

pengukuran kadar gkukosa darah tikus normal sebagai data awal perlakuan dan dianalisis

dengan ANAVA. Dengan demikian asumsi perlakuan dimulai dengan awal (kondisi

hiperglikemik) yang homogen dapat dipenuhi.Selanjutnya perlakuan dimulai dan pengukuran kadar glukosa darah diukur pada

hari ke-2,7,14,21 dan 28.

Kadar glukosa darah antar kelompok perlakuan

Tabel 3. Rerata kadar glukosa darah tikus putih (Rattus norvegicus L.) jantan yang diberi

ekstrak etanol, akar, batang dan daun brotowali (Tinospora crispa L.)

Rerata kadar glukosa darah ± SD (mg/dl)

Kel.

perlakuan hari ke-0 hari ke-2 hari ke-7 hari ke-14 hari ke-21 hari ke-28


5/8

ISBN 978-602-95471-0-8


K (-)53,88 ±

14,53a

98,6 ±

7,86a

95,02 ±

33,62 a

74,02 ±

7,73 a

74,12 ±

7,95 a

73,95 ±

11,06a

K (+)358,02 ±

20,23b

338,37 ±

18,51 b

314,86 ±

53,99 b

246,75 ±

54,22 b

256,54 ±

189, b

298,02±

67,13bc

P1384,12 ±

4,14b

357,37 ±

14,83 b

353,82 ±

16,58 b

320,25 ±

34,29 b

308,44 ±

43,66 b

282,9 ±

137,04 b

P2359,76 ±

22,89b

321,22 ±

59,45 b

332,95 ±

34,29 b

286,67 ±

52,17 b

204,74 ±

143,03ab

206,54±

113,4ac

P3320,58 ±

103,06b

298,77 ±

98,64 b

306,5 ±

43,66 b

289,69 ±

110,17 b

178,74 ±

184,43ab

108,15±

59,28a

Keterangan :

Angka yang diikuti huruf yang berbeda pada tiap kolom menunjukan adanya beda

nyata (n=5; p< 0,05)

K (-) : aquades + pakan BR II sebagai kontrol normal

K (+) : aloksan 125 mg/kgbb + aquades + pakan BR II sebagai kontrol

hiperglikemik

P1 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak akar 115mg/kgbb +aquades+pakan BR

II

P2 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak batang 115mg/kgbb +aquades+ pakan

BR II

P3 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak daun 115mg/kgbb +aquades+pakan BR

II

Dari Tabel 3 di atas dapat dilihat perbandingan antara ketiga kelompok perlakuan

dan kontrol. Selain itu juga terlihat bahwa sampai dengan hari ke-14 keseluruhan

perlakuan, ekstrak etanol akar, batang dan daun menunjukkan hasil yang sama dalam uji

statistik yaitu tidak berbeda nyata dengan kontrol hiperglikemik dan berbeda nyata

dengan kontrol normal. Pada hari terakhir, yaitu pada hari ke-28 terlihat penurunan rerata

kadar glukosa terbesar terjadi pada pemberian ekstrak daun brotowali (Tinospora crispa

L.). Kelompok yang diberi ekstrak daun brotowali (Tinospora crispa L.) menunjukkan

perbedaan yang signifikan dengan kontrol hiperglikemik dan dengan perlakuan ekstrak

akar. Disamping itu kelompok tersebut juga tidak berbeda nyata dengan kontrol normal.

Meski demikian secara kualitatif ketiga kelompok perlakuan baik dengan

pemberian ekstrak etanol daun, batang maupun akar, ketiganya menunjukkan adanya

penurunan rerata kadar glukosa seiring dengan lama waktu perlakuan. Hal inimenunjukkan ketiganya memiliki kemampuan sebagai anti hiperglikemik. Berdasarkan

penelitian sebelumnya (Sudarsono,1996) dinyatakan bahwa ekstrak etanol batang

brotowali memiliki kemampuan sebagai obat anti diabetes dikarenakan mengandung

komposisi beberapa alkaloid. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol

akar dan daun brotowali juga memiliki kemampuan dalam menurunkan kadar glukosa

darah tikus hiperglikemik. Hal ini diduga karena terdapat kandungan jenis alkaloid atau

golongan metabolit sekunder lainnya yang sama dengan batang. Perbedaan persentase

penurunan rerata kadar glukosa (Tabel 5) kemungkinan disebabkan oleh perbedaan

konsentrasi alkaloid atau golongan metabolit sekunder lainnya yang diduga aktif sebagai

senyawa anti hiperglikemik.

Adanya fluktuasi kadar glukosa darah masing-masing waktu perlakuan

menunjukkan adanya mekanisme pemulihan alami yang dilakukan oleh tubuh. Pemulihan


6/8

ISBN 978-602-95471-0-8


ini dilakukan tubuh dengan beberapa cara yaitu dengan pelepasan sisa-sisa cadangan

insulin untuk meningkatan transpor glukosa ke dalam sel, dan apabila kadar glukosa

darah telah dianggap terlalu tinggi hingga melebihi ambang ginjal (renal threshold) makatubuh akan merespon dengan mengeluarkan glukosa melalui kencing (Guyton, 1974).

Untuk mengeluarkan glukosa melalui ginjal sendiri dibutuhkan air yang lebih banyak

sehingga hal ini juga menyebabkan tubuh merespon dengan banyak minum air

(Dalimartha, 2000) dan perilaku-perilaku tersebut terlihat pada kelompok hiperglikemik

sampai pada akhir penelitian (hari ke-28) .

Tabel 4. Rerata kadar glukosa darah tikus putih (Rattus norvegicus L.) jantan

antar waktu perlakuan ekstrak etanol akar, batang dan daun brotowali (Tinospora

crispa L.)

Keterangan :

Angka yang diikuti huruf yang berbeda pada tiap kolom menunjukan adanya beda nyata

(n=5; p< 0,05)

K (-) : aquades + pakan BR II sebagai kontrol normal

K (+) : aloksan 125 mg/kgbb + aquades + pakan BR II sebagai kontrol hiperglikemik

P1 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak akar 115mg/kgbb +aquades+pakan BR II

P2 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak batang 115mg/kgbb +aquades+ pakan BR II

P3 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak daun 115mg/kgbb +aquades+pakan BR II

Berdasarkan hasil uji statistik yang dilakukan maka diperoleh hasil seperti pada

Tabel 4. Pada tabel tersebut terlihat bahwa perbedaan nyata (dari hari ke-nol) kadar

glukosa darah pada ketiga perlakuan, ekstrak etanol akar, batang dan daun menunjukkan

waktu yang berbeda. Pada perlakuan ekstrak etanol akar dan batang perbedaan signifikan

sudah terlihat pada hari ke-21 sedangkan pada perlakuan ekstrak etanol daun perbedaan

signifikan baru terjadi pada hari ke-28. Hal ini menunjukkan adanya perbedaan

kemampuan kerja ketiga ekstrak tersebut dalam menurunkan kadar glukosa darah. Hal ini

kemungkinan disebabkan oleh pengaruh kuantitas atau jumlah senyawa aktif (metabolit

sekunder yang diduga mampu menurunkan kadar glukosa darah) yang terdapat pada

ketiga ekstrak tersebut


7/8

ISBN 978-602-95471-0-8


Selanjutnya juga dihitung persentase penurunan antara waktu pengukuran kadar

glukosa dan dianalisis dengan ANAVA, hasilnya seperti pada Gambar 1

Gambar 1. Persentase penurunan kadar glukosa darah ekstrak etanol akar, batang dan

daun brotowali pada masing-masing waktu perlakuan (Tinospora crispa L.)

Keterangan :% kadar glukosa: (kadar glukosa darah hari ke-0– kadar glukosa hari ke-X) x 100 %

Kadar glukosa hari ke-0

P1 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak akar 115mg/kgbb +aquades+pakan BR IIP2 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak batang 115mg/kgbb +aquades+ pakan BR II

P3 : aloksan 125 mg/kgbb + ekstrak daun 115mg/kgbb +aquades+pakan BR II

Dari Gambar 1 dapat dilihat pula bahwa dari ketiga perlakuan, persentase

penurunan kadar glukosa terbesar terjadi pada hari ke-28 pada perlakuan ekstrak etanol

daun brotowali (Tinospora crispa L.). Hal ini menegaskan kembali bahwa pada dosis

yang sama ekstrak daun brotowali memberikan hasil yang lebih baik dalam menurunkan

kadar glukosa darah dibandingkan dengan ekstrak etanol akar dan batang brotowali.

Dari penelitian ini terbukti bahwa brotowali (Tinospora crispa L.) dengan organ

utamanya akar, batang dan daun memiliki kemampuan sebagai obat anti hiperglikemik.

Mekanisme kemampuan anti hiperglikemik yang ditunjukkan oleh brotowali (Tinospora

crispa L.) diduga kuat terjadi melalui stimulasi pelepasan insulin melalui modulasikonsentrasi β -cell Ca

2+handling dan bukan melalui interferensi penyerapan glukosa ke

dalam peripheral cells (Noor & Ashcroft, 1998).

KESIMPULANEkstrak etanol daun brotowali (Tinospora crispa L.) dengan dosis 115mg/kg bb

mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus hiperglikemik paling optimal

dibandingkan dengan ekstrak etanol akar dan batang (Tinospora crispa L.)

DAFTAR PUSTAKABiro Pusat Statistik. 1995. Statistik Kesehatan. Biro Pusat Statistik. Jakarta. Indonesia

Dalimartha, Setiawan. 2000. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Diabetes Mellitus.Penebar Swadaya. Jakarta


8/8

ISBN 978-602-95471-0-8


Guyton, A.C. 1974. Function of Human Body 4th ed . W.B Saunders Company. London

Noor H & Ashcroft S.J. 1998. Pharmacological characterisation of the

antihyperglycaemic properties of Tinospora crispa extract. Journal of Ethnopharmacology. Elsevier Science Ireland Ltd.

Suharmiati. 2003. Pengujian Bioaktivitas Anti Diabetes Mellitus Tumbuhan Obat.

Cermin Dunia Kedokteran. Badan Penelitian dan Pengembangan Pelayanan dan

Teknologi. Departemen Kesehatan RI. Surabaya

Sudarsono.1996. Tumbuhan Obat Pusat Penelitian Obat Tradisional.

UGM.Yogyakarta.

Documents

Puji Lestari 2009, Poliuri