２０１６ 年 ９ 月 Ｖｏｌ３４ Ｎｏ９Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１６ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ８６０～８６７

研究论文 ＤＯＩ １０３７２４ ＳＰＪ１１２３２０１６０６０１０

lowast收稿日期２０１６０６０５lowast通讯联系人Ｅｍａｉｌ５４９８５８０４７ ｑｑｃｏｍ基金项目广西科技基础条件平台建设项目（１２１１２０１Ｄ）广西食品药品检验所科研项目（ＫＹ２０１６０２） Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｉｔｅｍ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ （Ｎｏ １２１１２０１Ｄ） Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｏ

ｇｒａｍ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ （Ｎｏ ＫＹ２０１６０２）

ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

张科明１　 梁飞燕２　 邓　 鸣１　 刘向红１　 许杨彪１　 赵　 庄１lowast

（１ 广西食品药品检验所 广西 南宁 ５３００２１ ２ 广西东盟食品药品安全检验检测中心 广西 南宁 ５３００２１）

摘要采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法提取和净化猪肉样品建立了同时测定磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺和性激素共 ７ 类 ３５ 种兽药残留的液相色谱串联质谱（ＬＣＭＳ ＭＳ）检测方法 样品经

Ｎａ２ＥＤＴＡ（乙二胺四乙酸） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液２1049008 ５ （体积分数）乙酸乙腈溶液提取提取液经盐析后取乙腈相用氨基（ＮＨ２）吸附剂分散固相萃取净化后在电喷雾离子源正离子多反应监测（ＭＲＭ）模式下进行测定基质外标法

定量 ３５ 种兽药在 １1049008 ０～５０1049008 ０ μｇ Ｌ 范围内线性关系良好相关系数均大于 ０1049008 ９９６ 在 ３ 个不同添加水平下的平均

回收率为 ７１1049008 ８ ～１１３1049008 ５相对标准偏差为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８（ｎ＝ ６）检出限和定量限分别为 ０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ 和 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ 该方法操作简单净化效果好灵敏度高适用于猪肉中兽药多残留的同时快速定性定量分析关键词ＱｕＥＣｈＥＲＳ液相色谱串联质谱法多类兽药残留猪肉

中图分类号Ｏ６５８　 　 　 文献标识码Ａ　 　 　 文章编号１０００８７１３（２０１６）０９０８６００８

Ｍｕｌｔｉｒｅｓｉｄｕｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅｍｕｓｃｌｅ ｂｙ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ

ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙＺＨＡＮＧ Ｋｅｍｉｎｇ１ ＬＩＡＮＧ Ｆｅｉｙａｎ２ ＤＥＮＧ Ｍｉｎｇ１ ＬＩＵ Ｘｉａｎｇｈｏｎｇ１

ＸＵ Ｙａｎｇｂｉａｏ１ ＺＨＡＯ Ｚｈｕａｎｇ１lowast

（１ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｎａｎｎｉｎｇ ５３００２１ Ｃｈｉｎａ２ ＧｕａｎｇｘｉＡｓｅａｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｓａｆｅｔｙ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｎａｎｎｉｎｇ ５３００２１ Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ Ａ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ｗｉｔｈ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ７ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅｓ ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｏｒｓ ｂｅｔａａｇｏｎｉｓｔｓｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｓ ａｍｎａｔａｄｉｎｅ ａｎｄ ｓｅｘ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ Ｔｈｅ ｄｒｕｇｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡ （ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉａｍｉｎｅ ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ２1049008 ５ （ｖ ｖ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｅｒｅ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｕｓｉｎｇ ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＮＨ２ ｓｏｒｂｅｎｔ ａｎｄ ｆｉｎａｌｌｙ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｔａｎｄｅｍｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ｍｏｄｅ ｖｉａ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎＴｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｗｅｒｅａｌｌ ａｂｏｖｅ ０1049008 ９９６ Ｔｈｅ ｂｌａｎｋ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｓｐｉｋｅｄ ａｔ ｔｈｒｅｅ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ７１1049008 ８ ｔｏ １１３1049008 ５ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ０1049008 ６ ｔｏ ９1049008 ８（ｎ＝ ６） Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔｓ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｍｉｔｓ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ０1049008 ０１－１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ａｎｄ ０1049008 ０４－３1049008 ３７μｇ ｋｇ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｉｓ ｅａｓｙ ｔｏ ｏｐｅｒａｔｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅＫｅｙ ｗｏｒｄｓ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ （ ＬＣＭＳ ＭＳ）ｍｕｌｔｉｃｌａｓｓ ｍｕｌｔｉｒｅｓｉｄｕｅ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

　 　 为了促进生长防治各类疾病降低死亡率兽药被广泛应用于生猪养殖 但由于在兽药使用过程

中滥用误用以及不遵守休药期等现象屡禁不止使得药物及其代谢物在生猪体内残留由此造成的餐

桌污染和引发的中毒事件时有发生严重威胁人类

健康 β受 体 激 动 剂 金 刚 烷 胺 （ ａｍｎａｔａｄｉｎｅＡＭＴ）性激素是禁限用药物磺胺类磺胺类增效

剂四环素类和喹诺酮类兽药是兽医临床上常用且

容易被滥用的药物农业部对上述兽药制定了最高

残留限量（ＭＲＬｓ） ［１］涉及十几类数百种兽药 因

此建立一种快速简便灵敏可靠可同时检测猪

肉中多类兽药的检测方法十分必要　 　 液相色谱串联质谱法因具有高灵敏度和高选

择性的优势已成为同时检测复杂动物组织样品中

多类兽药残留的主流方法［２－８］ 但这些方法只能同

时检测磺胺类喹诺酮类磺胺类增效剂金刚烷胺β受体激动剂和四环素类兽药之中的 ２ ～ ４ 类但同

时测定上述 ７ 类药物在猪肉中残留量的检测方法尚

未见报道　 　 本研究采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法［９１０］ 提取

和净化猪肉样品解决了四环素类兽药难与其他兽

药同时检测的问题结合液相色谱串联质谱仪检

测建立了同时测定猪肉中磺胺类（１８ 种）磺胺类

增效剂（１ 种）β受体激动剂（５ 种）四环素类（４种）喹诺酮类（３ 种）金刚烷胺和性激素（３ 种）共７ 类 ３５ 种兽药残留的新方法 该方法简便快速灵敏可靠能满足限量要求可为猪肉中药物多残留的

定性和定量分析提供技术支持亦可为动物源性食

品中残留兽药的分析提供借鉴

１　 实验部分

１１　 仪器与试剂

　 　 ＡＰＩ ４５００ Ｑｔｒａｐ 四极杆串联线性离子阱质谱仪

（美国 ＡＢ 公司） Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣ３０ＡＤ 系列高效液

相色谱仪（日本岛津公司） ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８ 色谱

柱（ １００ ｍｍ times ４1049008 ６ ｍｍ ２1049008 ５ μｍ美国 Ｗａｔｅｒｓ 公

司） ＭｉｌｌｉＱ 超纯水仪 （美国 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ 公司）Ｇ５６０Ｅ 快速混匀器（美国 Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ 有限

公司） Ｓ１２０Ｈ 超声波发生器（德国 Ｅｌｍａ 公司）３３０Ｋ冷冻离心机（德国 Ｓｉｇｍａ 公司）　 　 甲醇乙腈甲酸均为色谱纯（美国 Ｆｉｓｈｅｒ 公

司 ） 冰 乙 酸 氯 化 钠 （ ＮａＣｌ ） 无 水 硫 酸 钠

（Ｎａ２ＳＯ４）无水硫酸镁（Ｍｇ２ＳＯ４）柠檬酸（Ｃ６Ｈ８Ｏ７

middotＨ２Ｏ）磷酸氢二钠（Ｎａ２ＨＰＯ３middot１２Ｈ２Ｏ）乙二胺

四乙酸钠（Ｎａ２ＥＤＴＡmiddot２Ｈ２Ｏ）均为分析纯购自国

药集团化学试剂有限公司氨基（ＮＨ２）吸附剂ＰＳＡ（ｐｒｉｍａｒｙ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ）十八烷基硅烷（Ｃ１８）氟罗里硅土（ ｆｌｏｒｉｓｉｌ ＦＣＰ）购自上海安谱科学仪器

有限公司硅藻土 Ｃｅｌｉｔｅ ５４５（粒径０1049008 ０２～０1049008 １ ｍｍ）购自德国 Ｍｅｒｃｋ 公司中性氧化铝酸性氧化铝

（２００～３００ 目上海亚四化学试剂有限公司）水为

超纯水　 　 １８ 种磺胺类标准品包括磺胺甲噻二唑（ ｓｕｌｆａｍｅｔｈｉｚｏｌｅ ＳＭＴ）磺胺二甲异噁唑（ｓｕｌｆｉｓｏｘａｚｏｌｅＳＩＺ）磺胺氯哒嗪 （ ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ ＳＣＰ）磺胺嘧啶 （ ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ ＳＤＺ）磺胺甲基异噁唑

（ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ ＳＭＺ） 磺胺噻唑 （ ｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ ＳＴ）磺胺间甲氧嘧啶（ｓｕｌｆａｍｏｎｏｍｅｔｈｏｘｉｎｅＳＭＭ）磺胺甲基嘧啶（ｓｕｌｆａｍｅｒａｚｉｎｅ ＳＭＲ）磺胺

邻二甲氧嘧啶（ｓｕｌｆａｄｏｘｉｎ ＳＤＸ）磺胺吡啶（ｓｕｌｆａｐｙｒｉｄｉｎｅ ＳＰＤ） 磺胺对甲氧嘧啶 （ ｓｕｌｆａｍｅｔｅｒＳＦＭ）磺胺二甲嘧啶（ ｓｕｌｆａｍｅｔｈａｚｉｎｅ ＳＤＭ）磺胺苯吡唑（ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｉｎｅ ＳＰＰ）磺胺间二甲氧

嘧啶（ ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ ＳＤＴ）磺胺二甲

异嘧啶 （ ｓｕｌｆｉｓｏｍｉｄｉｎｅ ＳＭ２）琥珀酰磺胺噻唑

（ｓｕｃｃｉｎｙｌｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ ＳＳＴ）磺胺喹噁啉（ ｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ ＳＱ）磺胺噁唑（ｓｕｌｆａｍｏｘｏｌ ＳＡＸ） ５种 β受体激动剂标准品包括盐酸克伦特罗（ ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ ＣＬＴ）莱克多巴胺盐酸盐（ ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅＲＴＰ）硫酸沙丁胺醇（ ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ ＳＢＡ）克伦潘

特 （ ｃｌｅｎｐｅｎｔｅｒｏｌ ＣＬＰＴ）马布特罗 （ｍａｂｕｔｅｒｏｌＭＢＴ） 以上化合物纯度均大于 ９２1049008 ０购自德国

Ｄｒ Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ 公司 １ 种磺胺类增效剂标准品甲氧苄啶（ ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ ＴＭＰ） ４ 种四环素类标

准品包括四环素（ ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ ＴＣ）土霉素（ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ ＯＴＣ ） 金 霉 素 （ ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅＣＨＴＣ）美满霉素（ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ ＭＣ） ３ 种喹诺酮

类标准品包括诺氟沙星（ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ ＮＯＲ）氧氟

沙星 （ ｏｆｌｏｘａｃｉｎ ＯＦＬ）恩诺沙星 （ ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎＥＮＲ） ３ 种性激素类标准品包括黄体酮（ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ＰＧＴ）睾酮 （ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ＴＳ）甲睾酮

（ｍｅｔｈｙｌｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ＭＴＳ）以及金刚烷胺 以上

化合物纯度均大于 ９９1049008 ０购自中国药品生物制品

检定研究院１２　 标准溶液的配制

　 　 分别称取各标准品适量磺胺类兽药及其增效

剂β受体激动剂四环素类兽药性激素类兽药用

甲醇溶解并定容金刚烷胺用 １ （体积分数下同）甲酸乙腈溶液溶解并定容喹诺酮类兽药用 ０1049008 ０３ｍｏｌ Ｌ ＮａＯＨ 溶液溶解后用甲醇定容均配制成质

middot１６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

量浓度为 １ ０００ ｍｇ Ｌ 的单标准储备液置于棕色瓶

中于－１８ 冰箱中保存 将上述储备液用甲醇稀

释为 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准中间液用于优化质谱

参数 用时根据需要用 ０1049008 １ 甲酸水乙腈（９０ ∶１０ｖ ｖ）逐级稀释为混合标准工作液临用新配　 　 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲溶液（ｐＨ４1049008 ０）的配制准确称取 １２1049008 ９ ｇ Ｃ６Ｈ８Ｏ７middotＨ２Ｏ１０1049008 ９ｇ Ｎａ２ＨＰＯ３middot１２Ｈ２Ｏ３７1049008 ２ ｇ Ｎａ２ＥＤＴＡmiddot２Ｈ２Ｏ加超纯水 ９００ ｍＬ 溶解用 １ ｍｏｌ Ｌ ＮａＯＨ 调 ｐＨ 值至

４1049008 ０加超纯水稀释至 １ ０００ ｍＬ１３　 样品处理

　 　 准确称取匀质后试样 ２1049008 ０ ｇ（精确至 ０1049008 １ ｇ）于５０ ｍＬ 离 心 管 中 加 入 ５1049008 ００ ｍＬ ０1049008 １ ｍｏｌ ＬＮａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲溶液于快速混匀器上涡

旋 ２ ｍｉｎ超声提取 ５ ｍｉｎ 以 ４ ０００ ｒ ｍｉｎ 的速度

离心 ５ ｍｉｎ将上清液置于另一 ５０ ｍＬ 离心管中残余物再用 ２０1049008 ００ ｍＬ ２1049008 ５ 乙酸乙腈溶液提取一次取上清液合并两次上清液 依次加入 ２1049008 ０ ｇ ＮａＣｌ和 ２1049008 ０ ｇ 无水 Ｎａ２ＳＯ４涡旋 ５ ｍｉｎ以 １０ ０００ ｒ ｍｉｎ的速度离心 ５ ｍｉｎ 精密移取上清液 （乙腈相）１０1049008 ００ ｍＬ 于 ５０ ｍＬ 离心管中加入 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 吸

附剂涡旋 ２ ｍｉｎ以 １０ ０００ ｒ ｍｉｎ 的速度离心 ５ｍｉｎ取上清液氮吹至干 加入 １1049008 ００ ｍＬ ０1049008 １ 甲酸

水乙腈（７５ ∶２５ ｖ ｖ）溶解残渣经超声溶解和涡旋

混匀后过 ０1049008 ２２ μｍ 有机滤膜滤液供 ＬＣＭＳ ＭＳ测定１４　 空白基质匹配混合标准溶液的配制

　 　 取空白基质样品按 １３ 节方法处理样品浓缩

至干后加入混合标准工作溶液 １1049008 ００ ｍＬ 复溶涡旋混匀过 ０1049008 ２２ μｍ 滤膜即得空白基质匹配混合

标准溶液１５　 色谱条件

　 　 色谱柱ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８柱柱温４０ 进样

量５ μＬ 流动相 Ａ 为 ０1049008 １ 甲酸乙腈溶液流动相

Ｂ 为 ０1049008 １ 甲酸水溶液流速０1049008 ５ ｍＬ ｍｉｎ 梯度洗

脱程序０～２ ｍｉｎ ５ Ａ～２０ Ａ ２～４ ｍｉｎ ２０ Ａ～２５ Ａ ４～７ ｍｉｎ ２５ Ａ～５５ Ａ ７～９ ｍｉｎ ５５ Ａ９～１３ ｍｉｎ ５５ Ａ～ ９０ Ａ １３ ～ １７ ｍｉｎ ９０ Ａ １７～１８ ｍｉｎ ９０ Ａ～５ Ａ １８～２１ ｍｉｎ ５ Ａ１６　 质谱条件

　 　 电喷雾离子（ＥＳＩ）源正离子扫描多反应监测

（ＭＲＭ）喷雾电压 （ ＩＳ） ５ ５００ Ｖ 离子源温度

（ＴＥＭ） ６５０ 气帘气（ＣＵＲ）流速３５ Ｌ ｍｉｎ雾化气（ＧＳ１）流速５５ Ｌ ｍｉｎ辅助加热气（ＧＳ２）流

速５５ Ｌ ｍｉｎ射入电压（ＥＰ） １０ Ｖ碰撞室射出电

压（ＣＸＰ） １３ Ｖ质谱采集参数见表 １表 １　 ３５ 种兽药的质谱参数

Ｔａｂｌｅ １　 Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｆｏｒ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓＤｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶ

Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｉｚｏｌｅ （ＳＭＴ） ６２２ ２７１２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３０ １８Ｓｕｌｆｉｓｏｘａｚｏｌｅ （ＳＩＺ） ７９２ ２６８２ １０８１ １５６２lowast ５５ ２８ ２０Ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ （ＳＣＰ） ７３５ ２８５２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３３ ２０Ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ （ＳＤＺ） ４８８ ２５１２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３２ ２０Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ （ＳＭＺ） ７７０ ２５４２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３０ ２０Ｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ （ＳＴ） ５０１ ２５６３ １０８１ １５６２lowast ５５ ２８ ２０Ｓｕｌｆａｍｏｎｏｍｅｔｈｏｘｉｎｅ （ＳＭＭ） ７０３ ２８１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３５ ２３Ｓｕｌｆａｍｅｒａｚｉｎｅ （ＳＭＲ） ５５７ ２６５１ １０８１ １５６２lowast ９０ ３７ ２３Ｓｕｌｆａｄｏｘｉｎ （ＳＤＸ） ７５８ ３１１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３４ ２５Ｓｕｌｆａｐｙｒｉｄｉｎｅ （ＳＰＤ） ５２２ ２５０３ １０８１ １５６２lowast ９０ ３０ ２１Ｓｕｌｆａｍｅｔｅｒ （ＳＦＭ） ６４２ ２８１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３０ ２２Ｓｕｌｆａｍｅｔｈａｚｉｎｅ （ＳＤＭ） ６１８ ２７９２ １８６２ １２４２lowast ９４ ２３ ２８Ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｉｎｅ （ＳＰＰ） ８４６ ３１５１ １５６２ １６０３lowast ９０ ２６ ２７Ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ （ＳＤＴ） ７５７ ３１１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３４ ２５Ｓｕｌｆｉｓｏｍｉｄｉｎｅ （ＳＭ２） ４４０ ２７９２ １８６２ １２４２lowast ９２ ２１ ２６Ｓｕｃｃｉｎｙｌｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ （ＳＳＴ） ５４１ ３５６１ １９２３ ２５６２lowast ８０ ３３ ２４Ｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ （ＳＱ） ８３３ ３０１２ １０８１ １５６２lowast ７０ ３５ ２０Ｓｕｌｆａｍｏｘｏｌ （ＳＡＸ） ５７６ ２６８２ １０８１ １５６２lowast ８２ ２８ ２１Ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ （ＴＭＰ） ５２１ ２９１０ ２３０２ １２３１lowast １２０ ２８ ２８Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ （ＣＬＴ） ６９１ ２７７１ １３２１ ２０３１lowast ５０ ３６ ２２Ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ （ＲＴＰ） ５６１ ３０２２ １２１０ １６４２lowast ５０ ２８ ２１Ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ （ＳＢＡ） ３７６ ２４０１ １６６１ １４８０lowast ５０ １８ ２５Ｃｌｅｎｐｅｎｔｅｒｏｌ （ＣＬＰＴ） ７６０ ２９１０ ２７３０ ２０３０lowast ５０ １４ ２０Ｍａｂｕｔｅｒｏｌ （ＭＢＴ） ７７２ ３１１２ ２９３０ ２３７０lowast ５０ １６ ２４Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ （ＡＭＴ） ５５５ １５２０ ９３０ １３５１lowast ４０ ２８ ７

middot２６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 １　 （续）Ｔａｂｌｅ １　 （Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ）

Ｄｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＴＣ） ５９７ ４４５１ １５４１ ４１００lowast ８０ ３６ ２７Ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＯＴＣ） ５３９ １６１１ ４４３１ ４２６１lowast ８０ １８ ２７Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＣＨＴＣ） ７４１ ４７９２ ４６２０ ４４４１lowast ８０ ３０ ２４Ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ （ＭＣ） ４８５ ４５８１ ３５２１ ４４１２lowast ８０ ４０ ２５Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ （ＮＯＲ） ５０６ ３２００ ２３３１ ２７６２lowast ８０ ３２ ２４Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＯＦＬ） ５１２ ３６２２ ２６１０ ３１８１lowast ８０ ３７ ２５Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＥＮＲ） ５７５ ３６０１ ２４５１ ３１６１lowast ８０ ３６ ２６Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ （ＰＧＴ） １１９７ ３１５１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ３０Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＴＳ） １００５ ２８９１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ２６Ｍｅｔｈｙｌｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＭＴＳ） １０４５ ３０３１ ９７０ １０９１lowast １３０ ３０ ３０　 ｔＲ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ lowast Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｉｏｎ

图 １　 猪肉中 ３５ 种兽药的总离子流图Ｆｉｇ １　 Ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ

ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ

２　 结果与讨论

２１　 仪器条件的优化

２１１　 色谱条件

　 　 本研究采用乙腈作为有机相考察了在水相中

添加 ０1049008 １ 甲酸０1049008 １ 乙酸０1049008 ０１ ｍｏｌ Ｌ 乙酸铵对

色谱分离和质谱灵敏度的影响 结果表明添加乙

酸铵时四环素类兽药峰形较差且灵敏度下降明显添加甲酸和乙酸后各化合物离子化效率更高峰形

得到明显改善灵敏度普遍较好 由于甲酸酸性更

强其效果优于乙酸　 　 当乙腈中加入 ０1049008 １ 甲酸后各化合物的响应

信号更强分离度及重复性更好且基线噪音明显降

低 因此本试验最终采用 ０1049008 １ 甲酸乙腈０1049008 １ 甲

酸水溶液作为流动相　 　 采用选定的流动相和色谱柱优化梯度洗脱程

序所有待测物都得到良好的峰形和较高的灵敏度６ 组同分异构体 ＳＩＺ ＳＡＸＳＭＭ ＳＦＭＳＤＸ ＳＤＴＳＤＭ ＳＭ２ＴＭＰ ＣＬＰＴ 和 ＳＰＰ ＰＧＴ 具有相同的准

分子离子分别为 ｍ ｚ ２６８1049008 ２２８１1049008 ２３１１1049008 ２２７９1049008 ２２９１1049008 ０ 和 ３１５1049008 １可通过保留时间或碎片离子的差异

得到区分 图 １ 为 ２０ μｇ ｋｇ 添加水平下猪肉中目

标化合物的总离子流色谱图 由于色谱柱残留的硅

烷醇基团促进 ＣＨＴＣ 产生互变异构及差向异构因此会形成一个较长较宽的前沿色谱峰［１０］（见图 ２）２１２　 质谱条件

　 　 采用直接进样方式将 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准溶

液进样分别进行正离子和负离子全扫描分析所有

待测物响应最佳的准分子离子峰均在正离子模式下

获得母离子均为［Ｍ＋Ｈ］ ＋ 以准分子离子为母离

子进行二级质谱扫描得到各个化合物相应的碎片

离子根据欧盟决议［１１］中有关质谱分析方法必须不

少于 ４ 分的规定选择信号强度较大且信噪比较高

的两个碎片离子作为特征子离子其中丰度相对最

图 ２　 金霉素的提取离子色谱图Ｆｉｇ ２　 Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ＣＨＴＣ

强的为定量离子其次为定性离子然后再对得到的

二级质谱参数如去簇电压（ＤＰ）和碰撞能量（ＣＥ）等进行优化使定性离子与定量离子产生的离子对强

度达到最大 优化得到的质谱参数见表 １２２　 样品前处理条件的优化

２２１　 提取方式的选择

　 　 在动物肌肉组织中β受体激动剂一般以结合

middot３６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

态和游离态两种形态存在因此国家标准方法［１２］ 采

用酶解法检测其残留总量 但该方法耗时长不利

于快速筛查 鉴于 ３５ 种兽药中只有 ５ 种 β受体激

动剂如采用酶解法检测将增加前处理时间同时也

影响其他兽药的回收率因此本试验直接用 ０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液以及 ２1049008 ５ 乙酸

乙腈溶液复合提取游离态的 ＣＬＴＲＴＰＳＢＡＣＬＰＴ和 ＭＢＴ２２２　 提取溶剂的选择

　 　 提取溶剂的选择是本研究的难点和重点 本试

验考察了乙腈［１３］ 甲醇 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ［１４］０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０） ［１５］乙酸乙腈（５ ∶９５ ｖ ｖ） ［１６］氨水乙腈（１ ∶９９ ｖ ｖ） ［１７］

６ 种提取溶剂 结果表明有机溶剂如乙腈甲醇具

有良好的沉淀蛋白质及提取目标化合物的能力然而用甲醇提取时会带入更多的极性基质干扰物增加后续净化难度 用单一有机溶剂提取时除大部

分磺胺类及 β受体激动剂兽药外待测物平均回收

率均比较低当提取溶剂中加入适量的乙酸时金刚

烷胺性激素磺胺增效剂等化合物的提取效果均比

较理想但四环素类兽药平均回收率仅为 ４８当提

取溶剂为碱性乙腈时磺胺类四环素类及喹诺酮类

兽药平均回收率均不足 ３５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０）以及

０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）均可以很好地提取大部分化合物但前者对四环素类

兽药提取效果相对较差（平均回收率不足 ６０）这可能与四环素类兽药与二价金属离子的螯合作用有

关［１８］而 Ｎａ２ＥＤＴＡ 缓冲溶液的加入可以竞争配合

基质中存在的大多数金属离子使四环素类兽药游

离出来　 　 鉴于 ７ 类兽药理化性质差异较大本研究考虑

采用复合提取方式即用 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）进行第一遍提取用 ５乙酸乙腈溶液进行第二遍提取 图 ３ 为 ２０ μｇ ｋｇ添加水平下７ 类药物在不同提取溶剂和吸附剂下

的平均回收率（吸附剂均为 ２００ ｍｇ ＮＨ２）　 　 鉴于 ３５ 种待测物大部分带有伯胺或仲胺基团具有一定弱碱性提取溶剂中加入适量乙酸会促进

上述目标物的离子化效率从而获得更好的提取效

果 本试验分别比较了 １２1049008 ５５７ 乙酸乙腈

溶液的提取效果发现磺胺类化合物受溶液酸度影

响较大 当酸度过低时磺胺类兽药在溶液中的解

离程度低使其提取回收率偏低当酸度大于 ５

图 ３　 ７ 类兽药在不同（ａ）提取溶剂和（ｂ）吸附剂下的平均回收率

Ｆｉｇ ３　 Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆｔｈｅ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｕｓｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （ ａ）ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａｎｄ （ｂ） ｓｏｒｂｅｎｔｓ

　

　 Ｓｏｌｖｅｎｔｓ （ Ｓｏｌ） １ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ０1049008 ２ ｍｏｌ ＬＮａ２ＨＰＯ４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ２ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡ（ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉａｍｉｎｅ ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｐＨ ４1049008 ０ ） ３ ５ （ ｖ ｖ ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ４ １（ｖ ｖ） ａｍｍｏｎｉａ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （ｐＨ ４1049008 ０） ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ５ （ｖ ｖ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｓｏｒｂｅｎｔｓ （Ｓｏｒ） １ ２００ ｍｇ Ｃ１８ ２ ２００ｍｇ ＮＨ２ ３ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎａ ４ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎｕｍ ｏｘｉｄｅ ５ ２００ｍｇ ｃｅｌｉｔｅ ６ ２００ ｍｇ ｆｌｏｒｉｓｉｌ （ ＦＣＰ ） ７ ２００ ｍｇ ｐｒｉｍａｒｙｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ （ＰＳＡ） ６００ ｍｇ ＭｇＳＯ４

时大部分磺胺类待测物会发生一定程度的降解故本试验采用 ２1049008 ５ 的乙酸乙腈作为复提取溶剂２２３　 净化条件的优化

　 　 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法一般以 ＮａＣｌ 与 ＮａＯＡｃ无水

ＭｇＳＯ４ 与无水 Ｎａ２ＳＯ４ 作为盐析剂与脱水剂 本试

验向提取溶液中加入 ＮａＯＡｃ 与无水 ＭｇＳＯ４结果

发现磺胺类四环素类以及喹诺酮类兽药回收率均

有不同程度的降低特别是四环素兽药的回收率降

低显著这是由于四环素类兽药易与 Ｍｇ２＋形成螯合

物 通过反复试验发现 ２ ｇ ＮａＣｌ 与 ２ ｇ 无水

Ｎａ２ＳＯ４ 协同效果最好３５ 种待测物的回收率为

６７1049008 １ ～１１４1049008 ８　 　 本文分别考察了 Ｃ１８ＮＨ２中性氧化铝酸性

氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 共 ７种吸附剂的净化效果 使用不同吸附剂时各类兽药

的平均回收率见图３ｂ结果表明中性氧化铝酸

middot４６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 ２　 猪肉空白样品中 ３５ 种兽药的基质效应加标回收率以及精密度（ｎ＝６）Ｔａｂｌｅ ２　 Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｖｅｒａｇｅ ｓｐｉｋｅｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ （ＲＳＤｓ）

ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ （ｎ＝６）

Ｄｒｕｇ Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ２ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ １０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ５０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ＳＭＴ ０６９ １０５１ ４６ １０５７ ４６ ８０５ ７２ＳＩＺ ０７８ １０３７ ３４ １０７１ ３７ ８１５ ６４ＳＣＰ ０７７ １１２８ １５ １０３５ ３４ ７７２ ７６ＳＤＺ ０７５ １０９５ ２９ １０７２ ２７ ７９０ ３７ＳＭＺ ０８３ ９３４ ３１ １１０７ ２０ ７８９ ６７ＳＴ ０６８ １１００ ３４ １０９４ ６５ ７８８ ６３ＳＭＭ ０４１ ８７３ ２４ １０９７ １７ ８９０ ３７ＳＭＲ ０７６ ８６４ ４７ １０８５ ２８ ８０１ ５１ＳＤＸ ０８４ １００７ ３０ １１１７ ２２ ８４０ ５４ＳＰＤ ０７３ ９５９ ２６ １１２２ １３ ８２４ ２３ＳＦＭ ０５４ １０２９ ２１ １１２７ ０６ ８２４ ３６ＳＤＭ ０７６ １０２７ ２３ １０１３ ３３ ７９２ ４２ＳＰＰ ０８４ １０２６ ２４ １０３３ ２０ ７５９ ６８ＳＤＴ ０８８ １０５５ ２６ １１１５ １５ ７７８ ６４ＳＭ２ ０３５ １０５５ ２２ １００６ １７ ７８１ ３９ＳＳＴ ０７９ ８１５ ４１ ９６２ ３０ ８０７ ４０ＳＱ ０８４ ９９７ １９ １０２６ ４１ ７８０ ７５ＳＡＸ ０７０ １０６９ ５１ １１３５ ７５ ７５８ ９８ＴＭＰ ０７８ ８３８ ４３ １０５７ ３５ ７９４ １５ＣＬＴ ０５２ ９４９ ５８ １０６７ ２９ ８６７ ２８ＲＴＰ ０９３ ９７０ ３３ １０８４ ２４ ７７９ ６３ＳＢＡ ０９７ ９７８ ３７ １０５６ １０ ８２７ ４３ＣＬＰＴ ０８５ ９２４ ３５ １０２３ ３７ ８２９ ４０ＭＢＴ ０８８ ８７９ ２９ １００５ ０９ ７８９ ２４ＡＭＴ ０７７ ９９２ ２０ ８８５ ２９ ７１８ １０ＴＣ ０４０ ８２８ ４１ ９１９ ２６ ９７６ ５１ＯＴＣ ０４５ ９８２ ４０ １０２３ ３０ ９０１ ３３ＣＨＴＣ ０２６ １０２４ ３１ ９３６ ３１ ８２４ ２４ＭＣ ０５８ １０２８ ５０ １００２ ５３ ９２８ ３６ＮＯＲ １０７ １０３６ ３４ １０３４ ２７ ８９２ ３８ＯＦＬ ０８３ ９６０ ４２ ９７５ ２２ ８０１ ２４ＥＮＲ ０９０ １０１９ ２４ １０００ ２５ ７９７ ２８ＰＧＴ ０７６ ８４１ ２８ ９９６ ３２ ８２８ ２１ＴＳ ０８２ １０００ １８ ９５８ ２３ ７６２ ３５ＭＴＳ ０８１ ９７５ ２９ １０２７ ２１ ７８０ ２８

性氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 对

四环素类喹诺酮类性激素类以及部分磺胺类兽药

均有不同程度的吸附且基线噪音大干扰峰多净化效果不理想 Ｃ１８ 和 ＮＨ２ 吸附剂净化效果类似但 ＮＨ２ 净化后的溶液更澄清更干净杂质干扰峰

更少 试验比较了不同用量 （ １００２００４００ ｍｇ）ＮＨ２ 以及 １００ ｍｇ ＮＨ２ 和 １００ ｍｇ Ｃ１８ 吸附剂的净

化效果 结果表明使用 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 可以获得良

好的净化效果且不会对待测物产生明显的吸附２２４　 基质效应的评价

　 　 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化

合物）与目标化合物竞争电离所致［１９］ 在配置电喷

雾源的 ＬＣＭＳ 定性定量分析中基质效应影响仪器

的灵敏度和重复性从而影响检测结果的准确度

为评价基质效应分别制备空白基质标准曲线（添加含量为 １２５１０２０５０ μｇ ｋｇ）以及相应含量的

溶剂标准曲线 根据基质标准曲线与溶剂标准曲线

的斜率比值来评价基质效应［２０］ 若比值在 ０1049008 ８ ～１1049008 ２ 范围内则表明基质效应不明显 本文对 ３５ 种

兽药的基质效应进行了评价（见表 ２）可以看出猪肉样品中 ７７ 以上的兽药基质效应不明显仅有少

部分兽药如 ＳＭＭＳＦＭＳＭ２ＣＬＴ 以及四环素类兽

药呈现出较强的基质效应 综上所述本研究的前

处理方法可有效去除脂肪等引起的基质效应但为

了获得更加准确的定量结果本试验仍采用空白基

质匹配标准曲线以抵消或补偿基质效应２２５　 线性方程检出限与定量限

　 　 按 １４ 节方法配制 ６ 个水平的基质匹配混合标

middot５６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

　 　 为了促进生长防治各类疾病降低死亡率兽药被广泛应用于生猪养殖 但由于在兽药使用过程

中滥用误用以及不遵守休药期等现象屡禁不止使得药物及其代谢物在生猪体内残留由此造成的餐

桌污染和引发的中毒事件时有发生严重威胁人类

健康 β受 体 激 动 剂 金 刚 烷 胺 （ ａｍｎａｔａｄｉｎｅＡＭＴ）性激素是禁限用药物磺胺类磺胺类增效

剂四环素类和喹诺酮类兽药是兽医临床上常用且

容易被滥用的药物农业部对上述兽药制定了最高

残留限量（ＭＲＬｓ） ［１］涉及十几类数百种兽药 因

此建立一种快速简便灵敏可靠可同时检测猪

肉中多类兽药的检测方法十分必要　 　 液相色谱串联质谱法因具有高灵敏度和高选

择性的优势已成为同时检测复杂动物组织样品中

多类兽药残留的主流方法［２－８］ 但这些方法只能同

时检测磺胺类喹诺酮类磺胺类增效剂金刚烷胺β受体激动剂和四环素类兽药之中的 ２ ～ ４ 类但同

时测定上述 ７ 类药物在猪肉中残留量的检测方法尚

未见报道　 　 本研究采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法［９１０］ 提取

和净化猪肉样品解决了四环素类兽药难与其他兽

药同时检测的问题结合液相色谱串联质谱仪检

测建立了同时测定猪肉中磺胺类（１８ 种）磺胺类

增效剂（１ 种）β受体激动剂（５ 种）四环素类（４种）喹诺酮类（３ 种）金刚烷胺和性激素（３ 种）共７ 类 ３５ 种兽药残留的新方法 该方法简便快速灵敏可靠能满足限量要求可为猪肉中药物多残留的

定性和定量分析提供技术支持亦可为动物源性食

品中残留兽药的分析提供借鉴

１　 实验部分

１１　 仪器与试剂

　 　 ＡＰＩ ４５００ Ｑｔｒａｐ 四极杆串联线性离子阱质谱仪

（美国 ＡＢ 公司） Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣ３０ＡＤ 系列高效液

相色谱仪（日本岛津公司） ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８ 色谱

柱（ １００ ｍｍ times ４1049008 ６ ｍｍ ２1049008 ５ μｍ美国 Ｗａｔｅｒｓ 公

司） ＭｉｌｌｉＱ 超纯水仪 （美国 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ 公司）Ｇ５６０Ｅ 快速混匀器（美国 Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ 有限

公司） Ｓ１２０Ｈ 超声波发生器（德国 Ｅｌｍａ 公司）３３０Ｋ冷冻离心机（德国 Ｓｉｇｍａ 公司）　 　 甲醇乙腈甲酸均为色谱纯（美国 Ｆｉｓｈｅｒ 公

司 ） 冰 乙 酸 氯 化 钠 （ ＮａＣｌ ） 无 水 硫 酸 钠

（Ｎａ２ＳＯ４）无水硫酸镁（Ｍｇ２ＳＯ４）柠檬酸（Ｃ６Ｈ８Ｏ７

middotＨ２Ｏ）磷酸氢二钠（Ｎａ２ＨＰＯ３middot１２Ｈ２Ｏ）乙二胺

四乙酸钠（Ｎａ２ＥＤＴＡmiddot２Ｈ２Ｏ）均为分析纯购自国

药集团化学试剂有限公司氨基（ＮＨ２）吸附剂ＰＳＡ（ｐｒｉｍａｒｙ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ）十八烷基硅烷（Ｃ１８）氟罗里硅土（ ｆｌｏｒｉｓｉｌ ＦＣＰ）购自上海安谱科学仪器

有限公司硅藻土 Ｃｅｌｉｔｅ ５４５（粒径０1049008 ０２～０1049008 １ ｍｍ）购自德国 Ｍｅｒｃｋ 公司中性氧化铝酸性氧化铝

（２００～３００ 目上海亚四化学试剂有限公司）水为

超纯水　 　 １８ 种磺胺类标准品包括磺胺甲噻二唑（ ｓｕｌｆａｍｅｔｈｉｚｏｌｅ ＳＭＴ）磺胺二甲异噁唑（ｓｕｌｆｉｓｏｘａｚｏｌｅＳＩＺ）磺胺氯哒嗪 （ ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ ＳＣＰ）磺胺嘧啶 （ ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ ＳＤＺ）磺胺甲基异噁唑

（ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ ＳＭＺ） 磺胺噻唑 （ ｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ ＳＴ）磺胺间甲氧嘧啶（ｓｕｌｆａｍｏｎｏｍｅｔｈｏｘｉｎｅＳＭＭ）磺胺甲基嘧啶（ｓｕｌｆａｍｅｒａｚｉｎｅ ＳＭＲ）磺胺

邻二甲氧嘧啶（ｓｕｌｆａｄｏｘｉｎ ＳＤＸ）磺胺吡啶（ｓｕｌｆａｐｙｒｉｄｉｎｅ ＳＰＤ） 磺胺对甲氧嘧啶 （ ｓｕｌｆａｍｅｔｅｒＳＦＭ）磺胺二甲嘧啶（ ｓｕｌｆａｍｅｔｈａｚｉｎｅ ＳＤＭ）磺胺苯吡唑（ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｉｎｅ ＳＰＰ）磺胺间二甲氧

嘧啶（ ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ ＳＤＴ）磺胺二甲

异嘧啶 （ ｓｕｌｆｉｓｏｍｉｄｉｎｅ ＳＭ２）琥珀酰磺胺噻唑

（ｓｕｃｃｉｎｙｌｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ ＳＳＴ）磺胺喹噁啉（ ｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ ＳＱ）磺胺噁唑（ｓｕｌｆａｍｏｘｏｌ ＳＡＸ） ５种 β受体激动剂标准品包括盐酸克伦特罗（ ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ ＣＬＴ）莱克多巴胺盐酸盐（ ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅＲＴＰ）硫酸沙丁胺醇（ ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ ＳＢＡ）克伦潘

特 （ ｃｌｅｎｐｅｎｔｅｒｏｌ ＣＬＰＴ）马布特罗 （ｍａｂｕｔｅｒｏｌＭＢＴ） 以上化合物纯度均大于 ９２1049008 ０购自德国

Ｄｒ Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ 公司 １ 种磺胺类增效剂标准品甲氧苄啶（ ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ ＴＭＰ） ４ 种四环素类标

准品包括四环素（ ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ ＴＣ）土霉素（ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ ＯＴＣ ） 金 霉 素 （ ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅＣＨＴＣ）美满霉素（ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ ＭＣ） ３ 种喹诺酮

类标准品包括诺氟沙星（ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ ＮＯＲ）氧氟

沙星 （ ｏｆｌｏｘａｃｉｎ ＯＦＬ）恩诺沙星 （ ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎＥＮＲ） ３ 种性激素类标准品包括黄体酮（ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ ＰＧＴ）睾酮 （ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ＴＳ）甲睾酮

（ｍｅｔｈｙｌｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ＭＴＳ）以及金刚烷胺 以上

化合物纯度均大于 ９９1049008 ０购自中国药品生物制品

检定研究院１２　 标准溶液的配制

　 　 分别称取各标准品适量磺胺类兽药及其增效

剂β受体激动剂四环素类兽药性激素类兽药用

甲醇溶解并定容金刚烷胺用 １ （体积分数下同）甲酸乙腈溶液溶解并定容喹诺酮类兽药用 ０1049008 ０３ｍｏｌ Ｌ ＮａＯＨ 溶液溶解后用甲醇定容均配制成质

middot１６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

量浓度为 １ ０００ ｍｇ Ｌ 的单标准储备液置于棕色瓶

中于－１８ 冰箱中保存 将上述储备液用甲醇稀

释为 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准中间液用于优化质谱

参数 用时根据需要用 ０1049008 １ 甲酸水乙腈（９０ ∶１０ｖ ｖ）逐级稀释为混合标准工作液临用新配　 　 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲溶液（ｐＨ４1049008 ０）的配制准确称取 １２1049008 ９ ｇ Ｃ６Ｈ８Ｏ７middotＨ２Ｏ１０1049008 ９ｇ Ｎａ２ＨＰＯ３middot１２Ｈ２Ｏ３７1049008 ２ ｇ Ｎａ２ＥＤＴＡmiddot２Ｈ２Ｏ加超纯水 ９００ ｍＬ 溶解用 １ ｍｏｌ Ｌ ＮａＯＨ 调 ｐＨ 值至

４1049008 ０加超纯水稀释至 １ ０００ ｍＬ１３　 样品处理

　 　 准确称取匀质后试样 ２1049008 ０ ｇ（精确至 ０1049008 １ ｇ）于５０ ｍＬ 离 心 管 中 加 入 ５1049008 ００ ｍＬ ０1049008 １ ｍｏｌ ＬＮａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲溶液于快速混匀器上涡

旋 ２ ｍｉｎ超声提取 ５ ｍｉｎ 以 ４ ０００ ｒ ｍｉｎ 的速度

离心 ５ ｍｉｎ将上清液置于另一 ５０ ｍＬ 离心管中残余物再用 ２０1049008 ００ ｍＬ ２1049008 ５ 乙酸乙腈溶液提取一次取上清液合并两次上清液 依次加入 ２1049008 ０ ｇ ＮａＣｌ和 ２1049008 ０ ｇ 无水 Ｎａ２ＳＯ４涡旋 ５ ｍｉｎ以 １０ ０００ ｒ ｍｉｎ的速度离心 ５ ｍｉｎ 精密移取上清液 （乙腈相）１０1049008 ００ ｍＬ 于 ５０ ｍＬ 离心管中加入 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 吸

附剂涡旋 ２ ｍｉｎ以 １０ ０００ ｒ ｍｉｎ 的速度离心 ５ｍｉｎ取上清液氮吹至干 加入 １1049008 ００ ｍＬ ０1049008 １ 甲酸

水乙腈（７５ ∶２５ ｖ ｖ）溶解残渣经超声溶解和涡旋

混匀后过 ０1049008 ２２ μｍ 有机滤膜滤液供 ＬＣＭＳ ＭＳ测定１４　 空白基质匹配混合标准溶液的配制

　 　 取空白基质样品按 １３ 节方法处理样品浓缩

至干后加入混合标准工作溶液 １1049008 ００ ｍＬ 复溶涡旋混匀过 ０1049008 ２２ μｍ 滤膜即得空白基质匹配混合

标准溶液１５　 色谱条件

　 　 色谱柱ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８柱柱温４０ 进样

量５ μＬ 流动相 Ａ 为 ０1049008 １ 甲酸乙腈溶液流动相

Ｂ 为 ０1049008 １ 甲酸水溶液流速０1049008 ５ ｍＬ ｍｉｎ 梯度洗

脱程序０～２ ｍｉｎ ５ Ａ～２０ Ａ ２～４ ｍｉｎ ２０ Ａ～２５ Ａ ４～７ ｍｉｎ ２５ Ａ～５５ Ａ ７～９ ｍｉｎ ５５ Ａ９～１３ ｍｉｎ ５５ Ａ～ ９０ Ａ １３ ～ １７ ｍｉｎ ９０ Ａ １７～１８ ｍｉｎ ９０ Ａ～５ Ａ １８～２１ ｍｉｎ ５ Ａ１６　 质谱条件

　 　 电喷雾离子（ＥＳＩ）源正离子扫描多反应监测

（ＭＲＭ）喷雾电压 （ ＩＳ） ５ ５００ Ｖ 离子源温度

（ＴＥＭ） ６５０ 气帘气（ＣＵＲ）流速３５ Ｌ ｍｉｎ雾化气（ＧＳ１）流速５５ Ｌ ｍｉｎ辅助加热气（ＧＳ２）流

速５５ Ｌ ｍｉｎ射入电压（ＥＰ） １０ Ｖ碰撞室射出电

压（ＣＸＰ） １３ Ｖ质谱采集参数见表 １表 １　 ３５ 种兽药的质谱参数

Ｔａｂｌｅ １　 Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｆｏｒ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓＤｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶ

Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｉｚｏｌｅ （ＳＭＴ） ６２２ ２７１２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３０ １８Ｓｕｌｆｉｓｏｘａｚｏｌｅ （ＳＩＺ） ７９２ ２６８２ １０８１ １５６２lowast ５５ ２８ ２０Ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ （ＳＣＰ） ７３５ ２８５２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３３ ２０Ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ （ＳＤＺ） ４８８ ２５１２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３２ ２０Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ （ＳＭＺ） ７７０ ２５４２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３０ ２０Ｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ （ＳＴ） ５０１ ２５６３ １０８１ １５６２lowast ５５ ２８ ２０Ｓｕｌｆａｍｏｎｏｍｅｔｈｏｘｉｎｅ （ＳＭＭ） ７０３ ２８１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３５ ２３Ｓｕｌｆａｍｅｒａｚｉｎｅ （ＳＭＲ） ５５７ ２６５１ １０８１ １５６２lowast ９０ ３７ ２３Ｓｕｌｆａｄｏｘｉｎ （ＳＤＸ） ７５８ ３１１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３４ ２５Ｓｕｌｆａｐｙｒｉｄｉｎｅ （ＳＰＤ） ５２２ ２５０３ １０８１ １５６２lowast ９０ ３０ ２１Ｓｕｌｆａｍｅｔｅｒ （ＳＦＭ） ６４２ ２８１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３０ ２２Ｓｕｌｆａｍｅｔｈａｚｉｎｅ （ＳＤＭ） ６１８ ２７９２ １８６２ １２４２lowast ９４ ２３ ２８Ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｉｎｅ （ＳＰＰ） ８４６ ３１５１ １５６２ １６０３lowast ９０ ２６ ２７Ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ （ＳＤＴ） ７５７ ３１１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３４ ２５Ｓｕｌｆｉｓｏｍｉｄｉｎｅ （ＳＭ２） ４４０ ２７９２ １８６２ １２４２lowast ９２ ２１ ２６Ｓｕｃｃｉｎｙｌｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ （ＳＳＴ） ５４１ ３５６１ １９２３ ２５６２lowast ８０ ３３ ２４Ｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ （ＳＱ） ８３３ ３０１２ １０８１ １５６２lowast ７０ ３５ ２０Ｓｕｌｆａｍｏｘｏｌ （ＳＡＸ） ５７６ ２６８２ １０８１ １５６２lowast ８２ ２８ ２１Ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ （ＴＭＰ） ５２１ ２９１０ ２３０２ １２３１lowast １２０ ２８ ２８Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ （ＣＬＴ） ６９１ ２７７１ １３２１ ２０３１lowast ５０ ３６ ２２Ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ （ＲＴＰ） ５６１ ３０２２ １２１０ １６４２lowast ５０ ２８ ２１Ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ （ＳＢＡ） ３７６ ２４０１ １６６１ １４８０lowast ５０ １８ ２５Ｃｌｅｎｐｅｎｔｅｒｏｌ （ＣＬＰＴ） ７６０ ２９１０ ２７３０ ２０３０lowast ５０ １４ ２０Ｍａｂｕｔｅｒｏｌ （ＭＢＴ） ７７２ ３１１２ ２９３０ ２３７０lowast ５０ １６ ２４Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ （ＡＭＴ） ５５５ １５２０ ９３０ １３５１lowast ４０ ２８ ７

middot２６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 １　 （续）Ｔａｂｌｅ １　 （Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ）

Ｄｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＴＣ） ５９７ ４４５１ １５４１ ４１００lowast ８０ ３６ ２７Ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＯＴＣ） ５３９ １６１１ ４４３１ ４２６１lowast ８０ １８ ２７Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＣＨＴＣ） ７４１ ４７９２ ４６２０ ４４４１lowast ８０ ３０ ２４Ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ （ＭＣ） ４８５ ４５８１ ３５２１ ４４１２lowast ８０ ４０ ２５Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ （ＮＯＲ） ５０６ ３２００ ２３３１ ２７６２lowast ８０ ３２ ２４Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＯＦＬ） ５１２ ３６２２ ２６１０ ３１８１lowast ８０ ３７ ２５Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＥＮＲ） ５７５ ３６０１ ２４５１ ３１６１lowast ８０ ３６ ２６Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ （ＰＧＴ） １１９７ ３１５１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ３０Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＴＳ） １００５ ２８９１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ２６Ｍｅｔｈｙｌｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＭＴＳ） １０４５ ３０３１ ９７０ １０９１lowast １３０ ３０ ３０　 ｔＲ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ lowast Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｉｏｎ

图 １　 猪肉中 ３５ 种兽药的总离子流图Ｆｉｇ １　 Ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ

ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ

２　 结果与讨论

２１　 仪器条件的优化

２１１　 色谱条件

　 　 本研究采用乙腈作为有机相考察了在水相中

添加 ０1049008 １ 甲酸０1049008 １ 乙酸０1049008 ０１ ｍｏｌ Ｌ 乙酸铵对

色谱分离和质谱灵敏度的影响 结果表明添加乙

酸铵时四环素类兽药峰形较差且灵敏度下降明显添加甲酸和乙酸后各化合物离子化效率更高峰形

得到明显改善灵敏度普遍较好 由于甲酸酸性更

强其效果优于乙酸　 　 当乙腈中加入 ０1049008 １ 甲酸后各化合物的响应

信号更强分离度及重复性更好且基线噪音明显降

低 因此本试验最终采用 ０1049008 １ 甲酸乙腈０1049008 １ 甲

酸水溶液作为流动相　 　 采用选定的流动相和色谱柱优化梯度洗脱程

序所有待测物都得到良好的峰形和较高的灵敏度６ 组同分异构体 ＳＩＺ ＳＡＸＳＭＭ ＳＦＭＳＤＸ ＳＤＴＳＤＭ ＳＭ２ＴＭＰ ＣＬＰＴ 和 ＳＰＰ ＰＧＴ 具有相同的准

分子离子分别为 ｍ ｚ ２６８1049008 ２２８１1049008 ２３１１1049008 ２２７９1049008 ２２９１1049008 ０ 和 ３１５1049008 １可通过保留时间或碎片离子的差异

得到区分 图 １ 为 ２０ μｇ ｋｇ 添加水平下猪肉中目

标化合物的总离子流色谱图 由于色谱柱残留的硅

烷醇基团促进 ＣＨＴＣ 产生互变异构及差向异构因此会形成一个较长较宽的前沿色谱峰［１０］（见图 ２）２１２　 质谱条件

　 　 采用直接进样方式将 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准溶

液进样分别进行正离子和负离子全扫描分析所有

待测物响应最佳的准分子离子峰均在正离子模式下

获得母离子均为［Ｍ＋Ｈ］ ＋ 以准分子离子为母离

子进行二级质谱扫描得到各个化合物相应的碎片

离子根据欧盟决议［１１］中有关质谱分析方法必须不

少于 ４ 分的规定选择信号强度较大且信噪比较高

的两个碎片离子作为特征子离子其中丰度相对最

图 ２　 金霉素的提取离子色谱图Ｆｉｇ ２　 Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ＣＨＴＣ

强的为定量离子其次为定性离子然后再对得到的

二级质谱参数如去簇电压（ＤＰ）和碰撞能量（ＣＥ）等进行优化使定性离子与定量离子产生的离子对强

度达到最大 优化得到的质谱参数见表 １２２　 样品前处理条件的优化

２２１　 提取方式的选择

　 　 在动物肌肉组织中β受体激动剂一般以结合

middot３６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

态和游离态两种形态存在因此国家标准方法［１２］ 采

用酶解法检测其残留总量 但该方法耗时长不利

于快速筛查 鉴于 ３５ 种兽药中只有 ５ 种 β受体激

动剂如采用酶解法检测将增加前处理时间同时也

影响其他兽药的回收率因此本试验直接用 ０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液以及 ２1049008 ５ 乙酸

乙腈溶液复合提取游离态的 ＣＬＴＲＴＰＳＢＡＣＬＰＴ和 ＭＢＴ２２２　 提取溶剂的选择

　 　 提取溶剂的选择是本研究的难点和重点 本试

验考察了乙腈［１３］ 甲醇 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ［１４］０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０） ［１５］乙酸乙腈（５ ∶９５ ｖ ｖ） ［１６］氨水乙腈（１ ∶９９ ｖ ｖ） ［１７］

６ 种提取溶剂 结果表明有机溶剂如乙腈甲醇具

有良好的沉淀蛋白质及提取目标化合物的能力然而用甲醇提取时会带入更多的极性基质干扰物增加后续净化难度 用单一有机溶剂提取时除大部

分磺胺类及 β受体激动剂兽药外待测物平均回收

率均比较低当提取溶剂中加入适量的乙酸时金刚

烷胺性激素磺胺增效剂等化合物的提取效果均比

较理想但四环素类兽药平均回收率仅为 ４８当提

取溶剂为碱性乙腈时磺胺类四环素类及喹诺酮类

兽药平均回收率均不足 ３５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０）以及

０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）均可以很好地提取大部分化合物但前者对四环素类

兽药提取效果相对较差（平均回收率不足 ６０）这可能与四环素类兽药与二价金属离子的螯合作用有

关［１８］而 Ｎａ２ＥＤＴＡ 缓冲溶液的加入可以竞争配合

基质中存在的大多数金属离子使四环素类兽药游

离出来　 　 鉴于 ７ 类兽药理化性质差异较大本研究考虑

采用复合提取方式即用 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）进行第一遍提取用 ５乙酸乙腈溶液进行第二遍提取 图 ３ 为 ２０ μｇ ｋｇ添加水平下７ 类药物在不同提取溶剂和吸附剂下

的平均回收率（吸附剂均为 ２００ ｍｇ ＮＨ２）　 　 鉴于 ３５ 种待测物大部分带有伯胺或仲胺基团具有一定弱碱性提取溶剂中加入适量乙酸会促进

上述目标物的离子化效率从而获得更好的提取效

果 本试验分别比较了 １２1049008 ５５７ 乙酸乙腈

溶液的提取效果发现磺胺类化合物受溶液酸度影

响较大 当酸度过低时磺胺类兽药在溶液中的解

离程度低使其提取回收率偏低当酸度大于 ５

图 ３　 ７ 类兽药在不同（ａ）提取溶剂和（ｂ）吸附剂下的平均回收率

Ｆｉｇ ３　 Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆｔｈｅ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｕｓｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （ ａ）ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａｎｄ （ｂ） ｓｏｒｂｅｎｔｓ

　

　 Ｓｏｌｖｅｎｔｓ （ Ｓｏｌ） １ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ０1049008 ２ ｍｏｌ ＬＮａ２ＨＰＯ４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ２ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡ（ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉａｍｉｎｅ ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｐＨ ４1049008 ０ ） ３ ５ （ ｖ ｖ ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ４ １（ｖ ｖ） ａｍｍｏｎｉａ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （ｐＨ ４1049008 ０） ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ５ （ｖ ｖ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｓｏｒｂｅｎｔｓ （Ｓｏｒ） １ ２００ ｍｇ Ｃ１８ ２ ２００ｍｇ ＮＨ２ ３ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎａ ４ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎｕｍ ｏｘｉｄｅ ５ ２００ｍｇ ｃｅｌｉｔｅ ６ ２００ ｍｇ ｆｌｏｒｉｓｉｌ （ ＦＣＰ ） ７ ２００ ｍｇ ｐｒｉｍａｒｙｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ （ＰＳＡ） ６００ ｍｇ ＭｇＳＯ４

时大部分磺胺类待测物会发生一定程度的降解故本试验采用 ２1049008 ５ 的乙酸乙腈作为复提取溶剂２２３　 净化条件的优化

　 　 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法一般以 ＮａＣｌ 与 ＮａＯＡｃ无水

ＭｇＳＯ４ 与无水 Ｎａ２ＳＯ４ 作为盐析剂与脱水剂 本试

验向提取溶液中加入 ＮａＯＡｃ 与无水 ＭｇＳＯ４结果

发现磺胺类四环素类以及喹诺酮类兽药回收率均

有不同程度的降低特别是四环素兽药的回收率降

低显著这是由于四环素类兽药易与 Ｍｇ２＋形成螯合

物 通过反复试验发现 ２ ｇ ＮａＣｌ 与 ２ ｇ 无水

Ｎａ２ＳＯ４ 协同效果最好３５ 种待测物的回收率为

６７1049008 １ ～１１４1049008 ８　 　 本文分别考察了 Ｃ１８ＮＨ２中性氧化铝酸性

氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 共 ７种吸附剂的净化效果 使用不同吸附剂时各类兽药

的平均回收率见图３ｂ结果表明中性氧化铝酸

middot４６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 ２　 猪肉空白样品中 ３５ 种兽药的基质效应加标回收率以及精密度（ｎ＝６）Ｔａｂｌｅ ２　 Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｖｅｒａｇｅ ｓｐｉｋｅｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ （ＲＳＤｓ）

ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ （ｎ＝６）

Ｄｒｕｇ Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ２ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ １０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ５０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ＳＭＴ ０６９ １０５１ ４６ １０５７ ４６ ８０５ ７２ＳＩＺ ０７８ １０３７ ３４ １０７１ ３７ ８１５ ６４ＳＣＰ ０７７ １１２８ １５ １０３５ ３４ ７７２ ７６ＳＤＺ ０７５ １０９５ ２９ １０７２ ２７ ７９０ ３７ＳＭＺ ０８３ ９３４ ３１ １１０７ ２０ ７８９ ６７ＳＴ ０６８ １１００ ３４ １０９４ ６５ ７８８ ６３ＳＭＭ ０４１ ８７３ ２４ １０９７ １７ ８９０ ３７ＳＭＲ ０７６ ８６４ ４７ １０８５ ２８ ８０１ ５１ＳＤＸ ０８４ １００７ ３０ １１１７ ２２ ８４０ ５４ＳＰＤ ０７３ ９５９ ２６ １１２２ １３ ８２４ ２３ＳＦＭ ０５４ １０２９ ２１ １１２７ ０６ ８２４ ３６ＳＤＭ ０７６ １０２７ ２３ １０１３ ３３ ７９２ ４２ＳＰＰ ０８４ １０２６ ２４ １０３３ ２０ ７５９ ６８ＳＤＴ ０８８ １０５５ ２６ １１１５ １５ ７７８ ６４ＳＭ２ ０３５ １０５５ ２２ １００６ １７ ７８１ ３９ＳＳＴ ０７９ ８１５ ４１ ９６２ ３０ ８０７ ４０ＳＱ ０８４ ９９７ １９ １０２６ ４１ ７８０ ７５ＳＡＸ ０７０ １０６９ ５１ １１３５ ７５ ７５８ ９８ＴＭＰ ０７８ ８３８ ４３ １０５７ ３５ ７９４ １５ＣＬＴ ０５２ ９４９ ５８ １０６７ ２９ ８６７ ２８ＲＴＰ ０９３ ９７０ ３３ １０８４ ２４ ７７９ ６３ＳＢＡ ０９７ ９７８ ３７ １０５６ １０ ８２７ ４３ＣＬＰＴ ０８５ ９２４ ３５ １０２３ ３７ ８２９ ４０ＭＢＴ ０８８ ８７９ ２９ １００５ ０９ ７８９ ２４ＡＭＴ ０７７ ９９２ ２０ ８８５ ２９ ７１８ １０ＴＣ ０４０ ８２８ ４１ ９１９ ２６ ９７６ ５１ＯＴＣ ０４５ ９８２ ４０ １０２３ ３０ ９０１ ３３ＣＨＴＣ ０２６ １０２４ ３１ ９３６ ３１ ８２４ ２４ＭＣ ０５８ １０２８ ５０ １００２ ５３ ９２８ ３６ＮＯＲ １０７ １０３６ ３４ １０３４ ２７ ８９２ ３８ＯＦＬ ０８３ ９６０ ４２ ９７５ ２２ ８０１ ２４ＥＮＲ ０９０ １０１９ ２４ １０００ ２５ ７９７ ２８ＰＧＴ ０７６ ８４１ ２８ ９９６ ３２ ８２８ ２１ＴＳ ０８２ １０００ １８ ９５８ ２３ ７６２ ３５ＭＴＳ ０８１ ９７５ ２９ １０２７ ２１ ７８０ ２８

性氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 对

四环素类喹诺酮类性激素类以及部分磺胺类兽药

均有不同程度的吸附且基线噪音大干扰峰多净化效果不理想 Ｃ１８ 和 ＮＨ２ 吸附剂净化效果类似但 ＮＨ２ 净化后的溶液更澄清更干净杂质干扰峰

更少 试验比较了不同用量 （ １００２００４００ ｍｇ）ＮＨ２ 以及 １００ ｍｇ ＮＨ２ 和 １００ ｍｇ Ｃ１８ 吸附剂的净

化效果 结果表明使用 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 可以获得良

好的净化效果且不会对待测物产生明显的吸附２２４　 基质效应的评价

　 　 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化

合物）与目标化合物竞争电离所致［１９］ 在配置电喷

雾源的 ＬＣＭＳ 定性定量分析中基质效应影响仪器

的灵敏度和重复性从而影响检测结果的准确度

为评价基质效应分别制备空白基质标准曲线（添加含量为 １２５１０２０５０ μｇ ｋｇ）以及相应含量的

溶剂标准曲线 根据基质标准曲线与溶剂标准曲线

的斜率比值来评价基质效应［２０］ 若比值在 ０1049008 ８ ～１1049008 ２ 范围内则表明基质效应不明显 本文对 ３５ 种

兽药的基质效应进行了评价（见表 ２）可以看出猪肉样品中 ７７ 以上的兽药基质效应不明显仅有少

部分兽药如 ＳＭＭＳＦＭＳＭ２ＣＬＴ 以及四环素类兽

药呈现出较强的基质效应 综上所述本研究的前

处理方法可有效去除脂肪等引起的基质效应但为

了获得更加准确的定量结果本试验仍采用空白基

质匹配标准曲线以抵消或补偿基质效应２２５　 线性方程检出限与定量限

　 　 按 １４ 节方法配制 ６ 个水平的基质匹配混合标

middot５６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

量浓度为 １ ０００ ｍｇ Ｌ 的单标准储备液置于棕色瓶

中于－１８ 冰箱中保存 将上述储备液用甲醇稀

释为 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准中间液用于优化质谱

参数 用时根据需要用 ０1049008 １ 甲酸水乙腈（９０ ∶１０ｖ ｖ）逐级稀释为混合标准工作液临用新配　 　 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲溶液（ｐＨ４1049008 ０）的配制准确称取 １２1049008 ９ ｇ Ｃ６Ｈ８Ｏ７middotＨ２Ｏ１０1049008 ９ｇ Ｎａ２ＨＰＯ３middot１２Ｈ２Ｏ３７1049008 ２ ｇ Ｎａ２ＥＤＴＡmiddot２Ｈ２Ｏ加超纯水 ９００ ｍＬ 溶解用 １ ｍｏｌ Ｌ ＮａＯＨ 调 ｐＨ 值至

４1049008 ０加超纯水稀释至 １ ０００ ｍＬ１３　 样品处理

　 　 准确称取匀质后试样 ２1049008 ０ ｇ（精确至 ０1049008 １ ｇ）于５０ ｍＬ 离 心 管 中 加 入 ５1049008 ００ ｍＬ ０1049008 １ ｍｏｌ ＬＮａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲溶液于快速混匀器上涡

旋 ２ ｍｉｎ超声提取 ５ ｍｉｎ 以 ４ ０００ ｒ ｍｉｎ 的速度

离心 ５ ｍｉｎ将上清液置于另一 ５０ ｍＬ 离心管中残余物再用 ２０1049008 ００ ｍＬ ２1049008 ５ 乙酸乙腈溶液提取一次取上清液合并两次上清液 依次加入 ２1049008 ０ ｇ ＮａＣｌ和 ２1049008 ０ ｇ 无水 Ｎａ２ＳＯ４涡旋 ５ ｍｉｎ以 １０ ０００ ｒ ｍｉｎ的速度离心 ５ ｍｉｎ 精密移取上清液 （乙腈相）１０1049008 ００ ｍＬ 于 ５０ ｍＬ 离心管中加入 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 吸

附剂涡旋 ２ ｍｉｎ以 １０ ０００ ｒ ｍｉｎ 的速度离心 ５ｍｉｎ取上清液氮吹至干 加入 １1049008 ００ ｍＬ ０1049008 １ 甲酸

水乙腈（７５ ∶２５ ｖ ｖ）溶解残渣经超声溶解和涡旋

混匀后过 ０1049008 ２２ μｍ 有机滤膜滤液供 ＬＣＭＳ ＭＳ测定１４　 空白基质匹配混合标准溶液的配制

　 　 取空白基质样品按 １３ 节方法处理样品浓缩

至干后加入混合标准工作溶液 １1049008 ００ ｍＬ 复溶涡旋混匀过 ０1049008 ２２ μｍ 滤膜即得空白基质匹配混合

标准溶液１５　 色谱条件

　 　 色谱柱ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８柱柱温４０ 进样

量５ μＬ 流动相 Ａ 为 ０1049008 １ 甲酸乙腈溶液流动相

Ｂ 为 ０1049008 １ 甲酸水溶液流速０1049008 ５ ｍＬ ｍｉｎ 梯度洗

脱程序０～２ ｍｉｎ ５ Ａ～２０ Ａ ２～４ ｍｉｎ ２０ Ａ～２５ Ａ ４～７ ｍｉｎ ２５ Ａ～５５ Ａ ７～９ ｍｉｎ ５５ Ａ９～１３ ｍｉｎ ５５ Ａ～ ９０ Ａ １３ ～ １７ ｍｉｎ ９０ Ａ １７～１８ ｍｉｎ ９０ Ａ～５ Ａ １８～２１ ｍｉｎ ５ Ａ１６　 质谱条件

　 　 电喷雾离子（ＥＳＩ）源正离子扫描多反应监测

（ＭＲＭ）喷雾电压 （ ＩＳ） ５ ５００ Ｖ 离子源温度

（ＴＥＭ） ６５０ 气帘气（ＣＵＲ）流速３５ Ｌ ｍｉｎ雾化气（ＧＳ１）流速５５ Ｌ ｍｉｎ辅助加热气（ＧＳ２）流

速５５ Ｌ ｍｉｎ射入电压（ＥＰ） １０ Ｖ碰撞室射出电

压（ＣＸＰ） １３ Ｖ质谱采集参数见表 １表 １　 ３５ 种兽药的质谱参数

Ｔａｂｌｅ １　 Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｆｏｒ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓＤｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶ

Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｉｚｏｌｅ （ＳＭＴ） ６２２ ２７１２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３０ １８Ｓｕｌｆｉｓｏｘａｚｏｌｅ （ＳＩＺ） ７９２ ２６８２ １０８１ １５６２lowast ５５ ２８ ２０Ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ （ＳＣＰ） ７３５ ２８５２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３３ ２０Ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ （ＳＤＺ） ４８８ ２５１２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３２ ２０Ｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅ （ＳＭＺ） ７７０ ２５４２ １０８１ １５６２lowast ５５ ３０ ２０Ｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ （ＳＴ） ５０１ ２５６３ １０８１ １５６２lowast ５５ ２８ ２０Ｓｕｌｆａｍｏｎｏｍｅｔｈｏｘｉｎｅ （ＳＭＭ） ７０３ ２８１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３５ ２３Ｓｕｌｆａｍｅｒａｚｉｎｅ （ＳＭＲ） ５５７ ２６５１ １０８１ １５６２lowast ９０ ３７ ２３Ｓｕｌｆａｄｏｘｉｎ （ＳＤＸ） ７５８ ３１１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３４ ２５Ｓｕｌｆａｐｙｒｉｄｉｎｅ （ＳＰＤ） ５２２ ２５０３ １０８１ １５６２lowast ９０ ３０ ２１Ｓｕｌｆａｍｅｔｅｒ （ＳＦＭ） ６４２ ２８１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３０ ２２Ｓｕｌｆａｍｅｔｈａｚｉｎｅ （ＳＤＭ） ６１８ ２７９２ １８６２ １２４２lowast ９４ ２３ ２８Ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｉｎｅ （ＳＰＰ） ８４６ ３１５１ １５６２ １６０３lowast ９０ ２６ ２７Ｓｕｌｆａｄｉｍｅｔｈｏｘｙｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ （ＳＤＴ） ７５７ ３１１２ １０８１ １５６２lowast ９０ ３４ ２５Ｓｕｌｆｉｓｏｍｉｄｉｎｅ （ＳＭ２） ４４０ ２７９２ １８６２ １２４２lowast ９２ ２１ ２６Ｓｕｃｃｉｎｙｌｓｕｌｆａｔｈｉａｚｏｌｅ （ＳＳＴ） ５４１ ３５６１ １９２３ ２５６２lowast ８０ ３３ ２４Ｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ （ＳＱ） ８３３ ３０１２ １０８１ １５６２lowast ７０ ３５ ２０Ｓｕｌｆａｍｏｘｏｌ （ＳＡＸ） ５７６ ２６８２ １０８１ １５６２lowast ８２ ２８ ２１Ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ （ＴＭＰ） ５２１ ２９１０ ２３０２ １２３１lowast １２０ ２８ ２８Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ （ＣＬＴ） ６９１ ２７７１ １３２１ ２０３１lowast ５０ ３６ ２２Ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ （ＲＴＰ） ５６１ ３０２２ １２１０ １６４２lowast ５０ ２８ ２１Ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ （ＳＢＡ） ３７６ ２４０１ １６６１ １４８０lowast ５０ １８ ２５Ｃｌｅｎｐｅｎｔｅｒｏｌ （ＣＬＰＴ） ７６０ ２９１０ ２７３０ ２０３０lowast ５０ １４ ２０Ｍａｂｕｔｅｒｏｌ （ＭＢＴ） ７７２ ３１１２ ２９３０ ２３７０lowast ５０ １６ ２４Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ （ＡＭＴ） ５５５ １５２０ ９３０ １３５１lowast ４０ ２８ ７

middot２６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 １　 （续）Ｔａｂｌｅ １　 （Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ）

Ｄｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＴＣ） ５９７ ４４５１ １５４１ ４１００lowast ８０ ３６ ２７Ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＯＴＣ） ５３９ １６１１ ４４３１ ４２６１lowast ８０ １８ ２７Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＣＨＴＣ） ７４１ ４７９２ ４６２０ ４４４１lowast ８０ ３０ ２４Ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ （ＭＣ） ４８５ ４５８１ ３５２１ ４４１２lowast ８０ ４０ ２５Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ （ＮＯＲ） ５０６ ３２００ ２３３１ ２７６２lowast ８０ ３２ ２４Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＯＦＬ） ５１２ ３６２２ ２６１０ ３１８１lowast ８０ ３７ ２５Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＥＮＲ） ５７５ ３６０１ ２４５１ ３１６１lowast ８０ ３６ ２６Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ （ＰＧＴ） １１９７ ３１５１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ３０Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＴＳ） １００５ ２８９１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ２６Ｍｅｔｈｙｌｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＭＴＳ） １０４５ ３０３１ ９７０ １０９１lowast １３０ ３０ ３０　 ｔＲ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ lowast Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｉｏｎ

图 １　 猪肉中 ３５ 种兽药的总离子流图Ｆｉｇ １　 Ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ

ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ

２　 结果与讨论

２１　 仪器条件的优化

２１１　 色谱条件

　 　 本研究采用乙腈作为有机相考察了在水相中

添加 ０1049008 １ 甲酸０1049008 １ 乙酸０1049008 ０１ ｍｏｌ Ｌ 乙酸铵对

色谱分离和质谱灵敏度的影响 结果表明添加乙

酸铵时四环素类兽药峰形较差且灵敏度下降明显添加甲酸和乙酸后各化合物离子化效率更高峰形

得到明显改善灵敏度普遍较好 由于甲酸酸性更

强其效果优于乙酸　 　 当乙腈中加入 ０1049008 １ 甲酸后各化合物的响应

信号更强分离度及重复性更好且基线噪音明显降

低 因此本试验最终采用 ０1049008 １ 甲酸乙腈０1049008 １ 甲

酸水溶液作为流动相　 　 采用选定的流动相和色谱柱优化梯度洗脱程

序所有待测物都得到良好的峰形和较高的灵敏度６ 组同分异构体 ＳＩＺ ＳＡＸＳＭＭ ＳＦＭＳＤＸ ＳＤＴＳＤＭ ＳＭ２ＴＭＰ ＣＬＰＴ 和 ＳＰＰ ＰＧＴ 具有相同的准

分子离子分别为 ｍ ｚ ２６８1049008 ２２８１1049008 ２３１１1049008 ２２７９1049008 ２２９１1049008 ０ 和 ３１５1049008 １可通过保留时间或碎片离子的差异

得到区分 图 １ 为 ２０ μｇ ｋｇ 添加水平下猪肉中目

标化合物的总离子流色谱图 由于色谱柱残留的硅

烷醇基团促进 ＣＨＴＣ 产生互变异构及差向异构因此会形成一个较长较宽的前沿色谱峰［１０］（见图 ２）２１２　 质谱条件

　 　 采用直接进样方式将 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准溶

液进样分别进行正离子和负离子全扫描分析所有

待测物响应最佳的准分子离子峰均在正离子模式下

获得母离子均为［Ｍ＋Ｈ］ ＋ 以准分子离子为母离

子进行二级质谱扫描得到各个化合物相应的碎片

离子根据欧盟决议［１１］中有关质谱分析方法必须不

少于 ４ 分的规定选择信号强度较大且信噪比较高

的两个碎片离子作为特征子离子其中丰度相对最

图 ２　 金霉素的提取离子色谱图Ｆｉｇ ２　 Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ＣＨＴＣ

强的为定量离子其次为定性离子然后再对得到的

二级质谱参数如去簇电压（ＤＰ）和碰撞能量（ＣＥ）等进行优化使定性离子与定量离子产生的离子对强

度达到最大 优化得到的质谱参数见表 １２２　 样品前处理条件的优化

２２１　 提取方式的选择

　 　 在动物肌肉组织中β受体激动剂一般以结合

middot３６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

态和游离态两种形态存在因此国家标准方法［１２］ 采

用酶解法检测其残留总量 但该方法耗时长不利

于快速筛查 鉴于 ３５ 种兽药中只有 ５ 种 β受体激

动剂如采用酶解法检测将增加前处理时间同时也

影响其他兽药的回收率因此本试验直接用 ０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液以及 ２1049008 ５ 乙酸

乙腈溶液复合提取游离态的 ＣＬＴＲＴＰＳＢＡＣＬＰＴ和 ＭＢＴ２２２　 提取溶剂的选择

　 　 提取溶剂的选择是本研究的难点和重点 本试

验考察了乙腈［１３］ 甲醇 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ［１４］０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０） ［１５］乙酸乙腈（５ ∶９５ ｖ ｖ） ［１６］氨水乙腈（１ ∶９９ ｖ ｖ） ［１７］

６ 种提取溶剂 结果表明有机溶剂如乙腈甲醇具

有良好的沉淀蛋白质及提取目标化合物的能力然而用甲醇提取时会带入更多的极性基质干扰物增加后续净化难度 用单一有机溶剂提取时除大部

分磺胺类及 β受体激动剂兽药外待测物平均回收

率均比较低当提取溶剂中加入适量的乙酸时金刚

烷胺性激素磺胺增效剂等化合物的提取效果均比

较理想但四环素类兽药平均回收率仅为 ４８当提

取溶剂为碱性乙腈时磺胺类四环素类及喹诺酮类

兽药平均回收率均不足 ３５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０）以及

０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）均可以很好地提取大部分化合物但前者对四环素类

兽药提取效果相对较差（平均回收率不足 ６０）这可能与四环素类兽药与二价金属离子的螯合作用有

关［１８］而 Ｎａ２ＥＤＴＡ 缓冲溶液的加入可以竞争配合

基质中存在的大多数金属离子使四环素类兽药游

离出来　 　 鉴于 ７ 类兽药理化性质差异较大本研究考虑

采用复合提取方式即用 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）进行第一遍提取用 ５乙酸乙腈溶液进行第二遍提取 图 ３ 为 ２０ μｇ ｋｇ添加水平下７ 类药物在不同提取溶剂和吸附剂下

的平均回收率（吸附剂均为 ２００ ｍｇ ＮＨ２）　 　 鉴于 ３５ 种待测物大部分带有伯胺或仲胺基团具有一定弱碱性提取溶剂中加入适量乙酸会促进

上述目标物的离子化效率从而获得更好的提取效

果 本试验分别比较了 １２1049008 ５５７ 乙酸乙腈

溶液的提取效果发现磺胺类化合物受溶液酸度影

响较大 当酸度过低时磺胺类兽药在溶液中的解

离程度低使其提取回收率偏低当酸度大于 ５

图 ３　 ７ 类兽药在不同（ａ）提取溶剂和（ｂ）吸附剂下的平均回收率

Ｆｉｇ ３　 Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆｔｈｅ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｕｓｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （ ａ）ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａｎｄ （ｂ） ｓｏｒｂｅｎｔｓ

　

　 Ｓｏｌｖｅｎｔｓ （ Ｓｏｌ） １ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ０1049008 ２ ｍｏｌ ＬＮａ２ＨＰＯ４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ２ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡ（ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉａｍｉｎｅ ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｐＨ ４1049008 ０ ） ３ ５ （ ｖ ｖ ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ４ １（ｖ ｖ） ａｍｍｏｎｉａ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （ｐＨ ４1049008 ０） ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ５ （ｖ ｖ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｓｏｒｂｅｎｔｓ （Ｓｏｒ） １ ２００ ｍｇ Ｃ１８ ２ ２００ｍｇ ＮＨ２ ３ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎａ ４ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎｕｍ ｏｘｉｄｅ ５ ２００ｍｇ ｃｅｌｉｔｅ ６ ２００ ｍｇ ｆｌｏｒｉｓｉｌ （ ＦＣＰ ） ７ ２００ ｍｇ ｐｒｉｍａｒｙｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ （ＰＳＡ） ６００ ｍｇ ＭｇＳＯ４

时大部分磺胺类待测物会发生一定程度的降解故本试验采用 ２1049008 ５ 的乙酸乙腈作为复提取溶剂２２３　 净化条件的优化

　 　 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法一般以 ＮａＣｌ 与 ＮａＯＡｃ无水

ＭｇＳＯ４ 与无水 Ｎａ２ＳＯ４ 作为盐析剂与脱水剂 本试

验向提取溶液中加入 ＮａＯＡｃ 与无水 ＭｇＳＯ４结果

发现磺胺类四环素类以及喹诺酮类兽药回收率均

有不同程度的降低特别是四环素兽药的回收率降

低显著这是由于四环素类兽药易与 Ｍｇ２＋形成螯合

物 通过反复试验发现 ２ ｇ ＮａＣｌ 与 ２ ｇ 无水

Ｎａ２ＳＯ４ 协同效果最好３５ 种待测物的回收率为

６７1049008 １ ～１１４1049008 ８　 　 本文分别考察了 Ｃ１８ＮＨ２中性氧化铝酸性

氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 共 ７种吸附剂的净化效果 使用不同吸附剂时各类兽药

的平均回收率见图３ｂ结果表明中性氧化铝酸

middot４６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 ２　 猪肉空白样品中 ３５ 种兽药的基质效应加标回收率以及精密度（ｎ＝６）Ｔａｂｌｅ ２　 Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｖｅｒａｇｅ ｓｐｉｋｅｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ （ＲＳＤｓ）

ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ （ｎ＝６）

Ｄｒｕｇ Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ２ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ １０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ５０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ＳＭＴ ０６９ １０５１ ４６ １０５７ ４６ ８０５ ７２ＳＩＺ ０７８ １０３７ ３４ １０７１ ３７ ８１５ ６４ＳＣＰ ０７７ １１２８ １５ １０３５ ３４ ７７２ ７６ＳＤＺ ０７５ １０９５ ２９ １０７２ ２７ ７９０ ３７ＳＭＺ ０８３ ９３４ ３１ １１０７ ２０ ７８９ ６７ＳＴ ０６８ １１００ ３４ １０９４ ６５ ７８８ ６３ＳＭＭ ０４１ ８７３ ２４ １０９７ １７ ８９０ ３７ＳＭＲ ０７６ ８６４ ４７ １０８５ ２８ ８０１ ５１ＳＤＸ ０８４ １００７ ３０ １１１７ ２２ ８４０ ５４ＳＰＤ ０７３ ９５９ ２６ １１２２ １３ ８２４ ２３ＳＦＭ ０５４ １０２９ ２１ １１２７ ０６ ８２４ ３６ＳＤＭ ０７６ １０２７ ２３ １０１３ ３３ ７９２ ４２ＳＰＰ ０８４ １０２６ ２４ １０３３ ２０ ７５９ ６８ＳＤＴ ０８８ １０５５ ２６ １１１５ １５ ７７８ ６４ＳＭ２ ０３５ １０５５ ２２ １００６ １７ ７８１ ３９ＳＳＴ ０７９ ８１５ ４１ ９６２ ３０ ８０７ ４０ＳＱ ０８４ ９９７ １９ １０２６ ４１ ７８０ ７５ＳＡＸ ０７０ １０６９ ５１ １１３５ ７５ ７５８ ９８ＴＭＰ ０７８ ８３８ ４３ １０５７ ３５ ７９４ １５ＣＬＴ ０５２ ９４９ ５８ １０６７ ２９ ８６７ ２８ＲＴＰ ０９３ ９７０ ３３ １０８４ ２４ ７７９ ６３ＳＢＡ ０９７ ９７８ ３７ １０５６ １０ ８２７ ４３ＣＬＰＴ ０８５ ９２４ ３５ １０２３ ３７ ８２９ ４０ＭＢＴ ０８８ ８７９ ２９ １００５ ０９ ７８９ ２４ＡＭＴ ０７７ ９９２ ２０ ８８５ ２９ ７１８ １０ＴＣ ０４０ ８２８ ４１ ９１９ ２６ ９７６ ５１ＯＴＣ ０４５ ９８２ ４０ １０２３ ３０ ９０１ ３３ＣＨＴＣ ０２６ １０２４ ３１ ９３６ ３１ ８２４ ２４ＭＣ ０５８ １０２８ ５０ １００２ ５３ ９２８ ３６ＮＯＲ １０７ １０３６ ３４ １０３４ ２７ ８９２ ３８ＯＦＬ ０８３ ９６０ ４２ ９７５ ２２ ８０１ ２４ＥＮＲ ０９０ １０１９ ２４ １０００ ２５ ７９７ ２８ＰＧＴ ０７６ ８４１ ２８ ９９６ ３２ ８２８ ２１ＴＳ ０８２ １０００ １８ ９５８ ２３ ７６２ ３５ＭＴＳ ０８１ ９７５ ２９ １０２７ ２１ ７８０ ２８

性氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 对

四环素类喹诺酮类性激素类以及部分磺胺类兽药

均有不同程度的吸附且基线噪音大干扰峰多净化效果不理想 Ｃ１８ 和 ＮＨ２ 吸附剂净化效果类似但 ＮＨ２ 净化后的溶液更澄清更干净杂质干扰峰

更少 试验比较了不同用量 （ １００２００４００ ｍｇ）ＮＨ２ 以及 １００ ｍｇ ＮＨ２ 和 １００ ｍｇ Ｃ１８ 吸附剂的净

化效果 结果表明使用 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 可以获得良

好的净化效果且不会对待测物产生明显的吸附２２４　 基质效应的评价

　 　 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化

合物）与目标化合物竞争电离所致［１９］ 在配置电喷

雾源的 ＬＣＭＳ 定性定量分析中基质效应影响仪器

的灵敏度和重复性从而影响检测结果的准确度

为评价基质效应分别制备空白基质标准曲线（添加含量为 １２５１０２０５０ μｇ ｋｇ）以及相应含量的

溶剂标准曲线 根据基质标准曲线与溶剂标准曲线

的斜率比值来评价基质效应［２０］ 若比值在 ０1049008 ８ ～１1049008 ２ 范围内则表明基质效应不明显 本文对 ３５ 种

兽药的基质效应进行了评价（见表 ２）可以看出猪肉样品中 ７７ 以上的兽药基质效应不明显仅有少

部分兽药如 ＳＭＭＳＦＭＳＭ２ＣＬＴ 以及四环素类兽

药呈现出较强的基质效应 综上所述本研究的前

处理方法可有效去除脂肪等引起的基质效应但为

了获得更加准确的定量结果本试验仍采用空白基

质匹配标准曲线以抵消或补偿基质效应２２５　 线性方程检出限与定量限

　 　 按 １４ 节方法配制 ６ 个水平的基质匹配混合标

middot５６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 １　 （续）Ｔａｂｌｅ １　 （Ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ）

Ｄｒｕｇ ｔＲ ｍｉｎ Ｐａｒｅｎｔ ｉｏｎ （ｍ ｚ） Ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｏｎｓ （ｍ ｚ） Ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｖ Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｅＶＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＴＣ） ５９７ ４４５１ １５４１ ４１００lowast ８０ ３６ ２７Ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＯＴＣ） ５３９ １６１１ ４４３１ ４２６１lowast ８０ １８ ２７Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ （ＣＨＴＣ） ７４１ ４７９２ ４６２０ ４４４１lowast ８０ ３０ ２４Ｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅ （ＭＣ） ４８５ ４５８１ ３５２１ ４４１２lowast ８０ ４０ ２５Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ （ＮＯＲ） ５０６ ３２００ ２３３１ ２７６２lowast ８０ ３２ ２４Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＯＦＬ） ５１２ ３６２２ ２６１０ ３１８１lowast ８０ ３７ ２５Ｅｎｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ （ＥＮＲ） ５７５ ３６０１ ２４５１ ３１６１lowast ８０ ３６ ２６Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ （ＰＧＴ） １１９７ ３１５１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ３０Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＴＳ） １００５ ２８９１ ９７０ １０９１lowast １３０ ２３ ２６Ｍｅｔｈｙｌｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ （ＭＴＳ） １０４５ ３０３１ ９７０ １０９１lowast １３０ ３０ ３０　 ｔＲ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｔｉｍｅ lowast Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｉｏｎ

图 １　 猪肉中 ３５ 种兽药的总离子流图Ｆｉｇ １　 Ｔｏｔａｌ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ

ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ

２　 结果与讨论

２１　 仪器条件的优化

２１１　 色谱条件

　 　 本研究采用乙腈作为有机相考察了在水相中

添加 ０1049008 １ 甲酸０1049008 １ 乙酸０1049008 ０１ ｍｏｌ Ｌ 乙酸铵对

色谱分离和质谱灵敏度的影响 结果表明添加乙

酸铵时四环素类兽药峰形较差且灵敏度下降明显添加甲酸和乙酸后各化合物离子化效率更高峰形

得到明显改善灵敏度普遍较好 由于甲酸酸性更

强其效果优于乙酸　 　 当乙腈中加入 ０1049008 １ 甲酸后各化合物的响应

信号更强分离度及重复性更好且基线噪音明显降

低 因此本试验最终采用 ０1049008 １ 甲酸乙腈０1049008 １ 甲

酸水溶液作为流动相　 　 采用选定的流动相和色谱柱优化梯度洗脱程

序所有待测物都得到良好的峰形和较高的灵敏度６ 组同分异构体 ＳＩＺ ＳＡＸＳＭＭ ＳＦＭＳＤＸ ＳＤＴＳＤＭ ＳＭ２ＴＭＰ ＣＬＰＴ 和 ＳＰＰ ＰＧＴ 具有相同的准

分子离子分别为 ｍ ｚ ２６８1049008 ２２８１1049008 ２３１１1049008 ２２７９1049008 ２２９１1049008 ０ 和 ３１５1049008 １可通过保留时间或碎片离子的差异

得到区分 图 １ 为 ２０ μｇ ｋｇ 添加水平下猪肉中目

标化合物的总离子流色谱图 由于色谱柱残留的硅

烷醇基团促进 ＣＨＴＣ 产生互变异构及差向异构因此会形成一个较长较宽的前沿色谱峰［１０］（见图 ２）２１２　 质谱条件

　 　 采用直接进样方式将 １1049008 ０ ｍｇ Ｌ 的混合标准溶

液进样分别进行正离子和负离子全扫描分析所有

待测物响应最佳的准分子离子峰均在正离子模式下

获得母离子均为［Ｍ＋Ｈ］ ＋ 以准分子离子为母离

子进行二级质谱扫描得到各个化合物相应的碎片

离子根据欧盟决议［１１］中有关质谱分析方法必须不

少于 ４ 分的规定选择信号强度较大且信噪比较高

的两个碎片离子作为特征子离子其中丰度相对最

图 ２　 金霉素的提取离子色谱图Ｆｉｇ ２　 Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ＣＨＴＣ

强的为定量离子其次为定性离子然后再对得到的

二级质谱参数如去簇电压（ＤＰ）和碰撞能量（ＣＥ）等进行优化使定性离子与定量离子产生的离子对强

度达到最大 优化得到的质谱参数见表 １２２　 样品前处理条件的优化

２２１　 提取方式的选择

　 　 在动物肌肉组织中β受体激动剂一般以结合

middot３６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

态和游离态两种形态存在因此国家标准方法［１２］ 采

用酶解法检测其残留总量 但该方法耗时长不利

于快速筛查 鉴于 ３５ 种兽药中只有 ５ 种 β受体激

动剂如采用酶解法检测将增加前处理时间同时也

影响其他兽药的回收率因此本试验直接用 ０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液以及 ２1049008 ５ 乙酸

乙腈溶液复合提取游离态的 ＣＬＴＲＴＰＳＢＡＣＬＰＴ和 ＭＢＴ２２２　 提取溶剂的选择

　 　 提取溶剂的选择是本研究的难点和重点 本试

验考察了乙腈［１３］ 甲醇 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ［１４］０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０） ［１５］乙酸乙腈（５ ∶９５ ｖ ｖ） ［１６］氨水乙腈（１ ∶９９ ｖ ｖ） ［１７］

６ 种提取溶剂 结果表明有机溶剂如乙腈甲醇具

有良好的沉淀蛋白质及提取目标化合物的能力然而用甲醇提取时会带入更多的极性基质干扰物增加后续净化难度 用单一有机溶剂提取时除大部

分磺胺类及 β受体激动剂兽药外待测物平均回收

率均比较低当提取溶剂中加入适量的乙酸时金刚

烷胺性激素磺胺增效剂等化合物的提取效果均比

较理想但四环素类兽药平均回收率仅为 ４８当提

取溶剂为碱性乙腈时磺胺类四环素类及喹诺酮类

兽药平均回收率均不足 ３５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０）以及

０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）均可以很好地提取大部分化合物但前者对四环素类

兽药提取效果相对较差（平均回收率不足 ６０）这可能与四环素类兽药与二价金属离子的螯合作用有

关［１８］而 Ｎａ２ＥＤＴＡ 缓冲溶液的加入可以竞争配合

基质中存在的大多数金属离子使四环素类兽药游

离出来　 　 鉴于 ７ 类兽药理化性质差异较大本研究考虑

采用复合提取方式即用 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）进行第一遍提取用 ５乙酸乙腈溶液进行第二遍提取 图 ３ 为 ２０ μｇ ｋｇ添加水平下７ 类药物在不同提取溶剂和吸附剂下

的平均回收率（吸附剂均为 ２００ ｍｇ ＮＨ２）　 　 鉴于 ３５ 种待测物大部分带有伯胺或仲胺基团具有一定弱碱性提取溶剂中加入适量乙酸会促进

上述目标物的离子化效率从而获得更好的提取效

果 本试验分别比较了 １２1049008 ５５７ 乙酸乙腈

溶液的提取效果发现磺胺类化合物受溶液酸度影

响较大 当酸度过低时磺胺类兽药在溶液中的解

离程度低使其提取回收率偏低当酸度大于 ５

图 ３　 ７ 类兽药在不同（ａ）提取溶剂和（ｂ）吸附剂下的平均回收率

Ｆｉｇ ３　 Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆｔｈｅ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｕｓｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （ ａ）ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａｎｄ （ｂ） ｓｏｒｂｅｎｔｓ

　

　 Ｓｏｌｖｅｎｔｓ （ Ｓｏｌ） １ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ０1049008 ２ ｍｏｌ ＬＮａ２ＨＰＯ４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ２ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡ（ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉａｍｉｎｅ ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｐＨ ４1049008 ０ ） ３ ５ （ ｖ ｖ ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ４ １（ｖ ｖ） ａｍｍｏｎｉａ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （ｐＨ ４1049008 ０） ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ５ （ｖ ｖ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｓｏｒｂｅｎｔｓ （Ｓｏｒ） １ ２００ ｍｇ Ｃ１８ ２ ２００ｍｇ ＮＨ２ ３ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎａ ４ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎｕｍ ｏｘｉｄｅ ５ ２００ｍｇ ｃｅｌｉｔｅ ６ ２００ ｍｇ ｆｌｏｒｉｓｉｌ （ ＦＣＰ ） ７ ２００ ｍｇ ｐｒｉｍａｒｙｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ （ＰＳＡ） ６００ ｍｇ ＭｇＳＯ４

时大部分磺胺类待测物会发生一定程度的降解故本试验采用 ２1049008 ５ 的乙酸乙腈作为复提取溶剂２２３　 净化条件的优化

　 　 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法一般以 ＮａＣｌ 与 ＮａＯＡｃ无水

ＭｇＳＯ４ 与无水 Ｎａ２ＳＯ４ 作为盐析剂与脱水剂 本试

验向提取溶液中加入 ＮａＯＡｃ 与无水 ＭｇＳＯ４结果

发现磺胺类四环素类以及喹诺酮类兽药回收率均

有不同程度的降低特别是四环素兽药的回收率降

低显著这是由于四环素类兽药易与 Ｍｇ２＋形成螯合

物 通过反复试验发现 ２ ｇ ＮａＣｌ 与 ２ ｇ 无水

Ｎａ２ＳＯ４ 协同效果最好３５ 种待测物的回收率为

６７1049008 １ ～１１４1049008 ８　 　 本文分别考察了 Ｃ１８ＮＨ２中性氧化铝酸性

氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 共 ７种吸附剂的净化效果 使用不同吸附剂时各类兽药

的平均回收率见图３ｂ结果表明中性氧化铝酸

middot４６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 ２　 猪肉空白样品中 ３５ 种兽药的基质效应加标回收率以及精密度（ｎ＝６）Ｔａｂｌｅ ２　 Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｖｅｒａｇｅ ｓｐｉｋｅｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ （ＲＳＤｓ）

ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ （ｎ＝６）

Ｄｒｕｇ Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ２ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ １０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ５０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ＳＭＴ ０６９ １０５１ ４６ １０５７ ４６ ８０５ ７２ＳＩＺ ０７８ １０３７ ３４ １０７１ ３７ ８１５ ６４ＳＣＰ ０７７ １１２８ １５ １０３５ ３４ ７７２ ７６ＳＤＺ ０７５ １０９５ ２９ １０７２ ２７ ７９０ ３７ＳＭＺ ０８３ ９３４ ３１ １１０７ ２０ ７８９ ６７ＳＴ ０６８ １１００ ３４ １０９４ ６５ ７８８ ６３ＳＭＭ ０４１ ８７３ ２４ １０９７ １７ ８９０ ３７ＳＭＲ ０７６ ８６４ ４７ １０８５ ２８ ８０１ ５１ＳＤＸ ０８４ １００７ ３０ １１１７ ２２ ８４０ ５４ＳＰＤ ０７３ ９５９ ２６ １１２２ １３ ８２４ ２３ＳＦＭ ０５４ １０２９ ２１ １１２７ ０６ ８２４ ３６ＳＤＭ ０７６ １０２７ ２３ １０１３ ３３ ７９２ ４２ＳＰＰ ０８４ １０２６ ２４ １０３３ ２０ ７５９ ６８ＳＤＴ ０８８ １０５５ ２６ １１１５ １５ ７７８ ６４ＳＭ２ ０３５ １０５５ ２２ １００６ １７ ７８１ ３９ＳＳＴ ０７９ ８１５ ４１ ９６２ ３０ ８０７ ４０ＳＱ ０８４ ９９７ １９ １０２６ ４１ ７８０ ７５ＳＡＸ ０７０ １０６９ ５１ １１３５ ７５ ７５８ ９８ＴＭＰ ０７８ ８３８ ４３ １０５７ ３５ ７９４ １５ＣＬＴ ０５２ ９４９ ５８ １０６７ ２９ ８６７ ２８ＲＴＰ ０９３ ９７０ ３３ １０８４ ２４ ７７９ ６３ＳＢＡ ０９７ ９７８ ３７ １０５６ １０ ８２７ ４３ＣＬＰＴ ０８５ ９２４ ３５ １０２３ ３７ ８２９ ４０ＭＢＴ ０８８ ８７９ ２９ １００５ ０９ ７８９ ２４ＡＭＴ ０７７ ９９２ ２０ ８８５ ２９ ７１８ １０ＴＣ ０４０ ８２８ ４１ ９１９ ２６ ９７６ ５１ＯＴＣ ０４５ ９８２ ４０ １０２３ ３０ ９０１ ３３ＣＨＴＣ ０２６ １０２４ ３１ ９３６ ３１ ８２４ ２４ＭＣ ０５８ １０２８ ５０ １００２ ５３ ９２８ ３６ＮＯＲ １０７ １０３６ ３４ １０３４ ２７ ８９２ ３８ＯＦＬ ０８３ ９６０ ４２ ９７５ ２２ ８０１ ２４ＥＮＲ ０９０ １０１９ ２４ １０００ ２５ ７９７ ２８ＰＧＴ ０７６ ８４１ ２８ ９９６ ３２ ８２８ ２１ＴＳ ０８２ １０００ １８ ９５８ ２３ ７６２ ３５ＭＴＳ ０８１ ９７５ ２９ １０２７ ２１ ７８０ ２８

性氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 对

四环素类喹诺酮类性激素类以及部分磺胺类兽药

均有不同程度的吸附且基线噪音大干扰峰多净化效果不理想 Ｃ１８ 和 ＮＨ２ 吸附剂净化效果类似但 ＮＨ２ 净化后的溶液更澄清更干净杂质干扰峰

更少 试验比较了不同用量 （ １００２００４００ ｍｇ）ＮＨ２ 以及 １００ ｍｇ ＮＨ２ 和 １００ ｍｇ Ｃ１８ 吸附剂的净

化效果 结果表明使用 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 可以获得良

好的净化效果且不会对待测物产生明显的吸附２２４　 基质效应的评价

　 　 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化

合物）与目标化合物竞争电离所致［１９］ 在配置电喷

雾源的 ＬＣＭＳ 定性定量分析中基质效应影响仪器

的灵敏度和重复性从而影响检测结果的准确度

为评价基质效应分别制备空白基质标准曲线（添加含量为 １２５１０２０５０ μｇ ｋｇ）以及相应含量的

溶剂标准曲线 根据基质标准曲线与溶剂标准曲线

的斜率比值来评价基质效应［２０］ 若比值在 ０1049008 ８ ～１1049008 ２ 范围内则表明基质效应不明显 本文对 ３５ 种

兽药的基质效应进行了评价（见表 ２）可以看出猪肉样品中 ７７ 以上的兽药基质效应不明显仅有少

部分兽药如 ＳＭＭＳＦＭＳＭ２ＣＬＴ 以及四环素类兽

药呈现出较强的基质效应 综上所述本研究的前

处理方法可有效去除脂肪等引起的基质效应但为

了获得更加准确的定量结果本试验仍采用空白基

质匹配标准曲线以抵消或补偿基质效应２２５　 线性方程检出限与定量限

　 　 按 １４ 节方法配制 ６ 个水平的基质匹配混合标

middot５６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

态和游离态两种形态存在因此国家标准方法［１２］ 采

用酶解法检测其残留总量 但该方法耗时长不利

于快速筛查 鉴于 ３５ 种兽药中只有 ５ 种 β受体激

动剂如采用酶解法检测将增加前处理时间同时也

影响其他兽药的回收率因此本试验直接用 ０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液以及 ２1049008 ５ 乙酸

乙腈溶液复合提取游离态的 ＣＬＴＲＴＰＳＢＡＣＬＰＴ和 ＭＢＴ２２２　 提取溶剂的选择

　 　 提取溶剂的选择是本研究的难点和重点 本试

验考察了乙腈［１３］ 甲醇 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ［１４］０1049008 １ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０） ［１５］乙酸乙腈（５ ∶９５ ｖ ｖ） ［１６］氨水乙腈（１ ∶９９ ｖ ｖ） ［１７］

６ 种提取溶剂 结果表明有机溶剂如乙腈甲醇具

有良好的沉淀蛋白质及提取目标化合物的能力然而用甲醇提取时会带入更多的极性基质干扰物增加后续净化难度 用单一有机溶剂提取时除大部

分磺胺类及 β受体激动剂兽药外待测物平均回收

率均比较低当提取溶剂中加入适量的乙酸时金刚

烷胺性激素磺胺增效剂等化合物的提取效果均比

较理想但四环素类兽药平均回收率仅为 ４８当提

取溶剂为碱性乙腈时磺胺类四环素类及喹诺酮类

兽药平均回收率均不足 ３５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ 柠檬酸０1049008 ２ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ４ 溶液（８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０）以及

０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）均可以很好地提取大部分化合物但前者对四环素类

兽药提取效果相对较差（平均回收率不足 ６０）这可能与四环素类兽药与二价金属离子的螯合作用有

关［１８］而 Ｎａ２ＥＤＴＡ 缓冲溶液的加入可以竞争配合

基质中存在的大多数金属离子使四环素类兽药游

离出来　 　 鉴于 ７ 类兽药理化性质差异较大本研究考虑

采用复合提取方式即用 ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ 缓冲液（ｐＨ ４1049008 ０）进行第一遍提取用 ５乙酸乙腈溶液进行第二遍提取 图 ３ 为 ２０ μｇ ｋｇ添加水平下７ 类药物在不同提取溶剂和吸附剂下

的平均回收率（吸附剂均为 ２００ ｍｇ ＮＨ２）　 　 鉴于 ３５ 种待测物大部分带有伯胺或仲胺基团具有一定弱碱性提取溶剂中加入适量乙酸会促进

上述目标物的离子化效率从而获得更好的提取效

果 本试验分别比较了 １２1049008 ５５７ 乙酸乙腈

溶液的提取效果发现磺胺类化合物受溶液酸度影

响较大 当酸度过低时磺胺类兽药在溶液中的解

离程度低使其提取回收率偏低当酸度大于 ５

图 ３　 ７ 类兽药在不同（ａ）提取溶剂和（ｂ）吸附剂下的平均回收率

Ｆｉｇ ３　 Ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｃｌａｓｓｅｓ ｏｆｔｈｅ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｕｓｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （ ａ）ｓｏｌｖｅｎｔｓ ａｎｄ （ｂ） ｓｏｒｂｅｎｔｓ

　

　 Ｓｏｌｖｅｎｔｓ （ Ｓｏｌ） １ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ０1049008 ２ ｍｏｌ ＬＮａ２ＨＰＯ４ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （８ ∶５ ｖ ｖ ｐＨ ４1049008 ０） ２ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡ（ ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉａｍｉｎｅ ｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ） Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｐＨ ４1049008 ０ ） ３ ５ （ ｖ ｖ ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ４ １（ｖ ｖ） ａｍｍｏｎｉａ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ５ ０1049008 １ ｍｏｌ Ｌ Ｎａ２ＥＤＴＡＭｃｌｌｖａｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ （ｐＨ ４1049008 ０） ａｎｄ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ５ （ｖ ｖ） ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ Ｓｏｒｂｅｎｔｓ （Ｓｏｒ） １ ２００ ｍｇ Ｃ１８ ２ ２００ｍｇ ＮＨ２ ３ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎａ ４ ２００ ｍｇ ａｌｕｍｉｎｕｍ ｏｘｉｄｅ ５ ２００ｍｇ ｃｅｌｉｔｅ ６ ２００ ｍｇ ｆｌｏｒｉｓｉｌ （ ＦＣＰ ） ７ ２００ ｍｇ ｐｒｉｍａｒｙｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｍｉｎｅ （ＰＳＡ） ６００ ｍｇ ＭｇＳＯ４

时大部分磺胺类待测物会发生一定程度的降解故本试验采用 ２1049008 ５ 的乙酸乙腈作为复提取溶剂２２３　 净化条件的优化

　 　 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法一般以 ＮａＣｌ 与 ＮａＯＡｃ无水

ＭｇＳＯ４ 与无水 Ｎａ２ＳＯ４ 作为盐析剂与脱水剂 本试

验向提取溶液中加入 ＮａＯＡｃ 与无水 ＭｇＳＯ４结果

发现磺胺类四环素类以及喹诺酮类兽药回收率均

有不同程度的降低特别是四环素兽药的回收率降

低显著这是由于四环素类兽药易与 Ｍｇ２＋形成螯合

物 通过反复试验发现 ２ ｇ ＮａＣｌ 与 ２ ｇ 无水

Ｎａ２ＳＯ４ 协同效果最好３５ 种待测物的回收率为

６７1049008 １ ～１１４1049008 ８　 　 本文分别考察了 Ｃ１８ＮＨ２中性氧化铝酸性

氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 共 ７种吸附剂的净化效果 使用不同吸附剂时各类兽药

的平均回收率见图３ｂ结果表明中性氧化铝酸

middot４６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 ２　 猪肉空白样品中 ３５ 种兽药的基质效应加标回收率以及精密度（ｎ＝６）Ｔａｂｌｅ ２　 Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｖｅｒａｇｅ ｓｐｉｋｅｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ （ＲＳＤｓ）

ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ （ｎ＝６）

Ｄｒｕｇ Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ２ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ １０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ５０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ＳＭＴ ０６９ １０５１ ４６ １０５７ ４６ ８０５ ７２ＳＩＺ ０７８ １０３７ ３４ １０７１ ３７ ８１５ ６４ＳＣＰ ０７７ １１２８ １５ １０３５ ３４ ７７２ ７６ＳＤＺ ０７５ １０９５ ２９ １０７２ ２７ ７９０ ３７ＳＭＺ ０８３ ９３４ ３１ １１０７ ２０ ７８９ ６７ＳＴ ０６８ １１００ ３４ １０９４ ６５ ７８８ ６３ＳＭＭ ０４１ ８７３ ２４ １０９７ １７ ８９０ ３７ＳＭＲ ０７６ ８６４ ４７ １０８５ ２８ ８０１ ５１ＳＤＸ ０８４ １００７ ３０ １１１７ ２２ ８４０ ５４ＳＰＤ ０７３ ９５９ ２６ １１２２ １３ ８２４ ２３ＳＦＭ ０５４ １０２９ ２１ １１２７ ０６ ８２４ ３６ＳＤＭ ０７６ １０２７ ２３ １０１３ ３３ ７９２ ４２ＳＰＰ ０８４ １０２６ ２４ １０３３ ２０ ７５９ ６８ＳＤＴ ０８８ １０５５ ２６ １１１５ １５ ７７８ ６４ＳＭ２ ０３５ １０５５ ２２ １００６ １７ ７８１ ３９ＳＳＴ ０７９ ８１５ ４１ ９６２ ３０ ８０７ ４０ＳＱ ０８４ ９９７ １９ １０２６ ４１ ７８０ ７５ＳＡＸ ０７０ １０６９ ５１ １１３５ ７５ ７５８ ９８ＴＭＰ ０７８ ８３８ ４３ １０５７ ３５ ７９４ １５ＣＬＴ ０５２ ９４９ ５８ １０６７ ２９ ８６７ ２８ＲＴＰ ０９３ ９７０ ３３ １０８４ ２４ ７７９ ６３ＳＢＡ ０９７ ９７８ ３７ １０５６ １０ ８２７ ４３ＣＬＰＴ ０８５ ９２４ ３５ １０２３ ３７ ８２９ ４０ＭＢＴ ０８８ ８７９ ２９ １００５ ０９ ７８９ ２４ＡＭＴ ０７７ ９９２ ２０ ８８５ ２９ ７１８ １０ＴＣ ０４０ ８２８ ４１ ９１９ ２６ ９７６ ５１ＯＴＣ ０４５ ９８２ ４０ １０２３ ３０ ９０１ ３３ＣＨＴＣ ０２６ １０２４ ３１ ９３６ ３１ ８２４ ２４ＭＣ ０５８ １０２８ ５０ １００２ ５３ ９２８ ３６ＮＯＲ １０７ １０３６ ３４ １０３４ ２７ ８９２ ３８ＯＦＬ ０８３ ９６０ ４２ ９７５ ２２ ８０１ ２４ＥＮＲ ０９０ １０１９ ２４ １０００ ２５ ７９７ ２８ＰＧＴ ０７６ ８４１ ２８ ９９６ ３２ ８２８ ２１ＴＳ ０８２ １０００ １８ ９５８ ２３ ７６２ ３５ＭＴＳ ０８１ ９７５ ２９ １０２７ ２１ ７８０ ２８

性氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 对

四环素类喹诺酮类性激素类以及部分磺胺类兽药

均有不同程度的吸附且基线噪音大干扰峰多净化效果不理想 Ｃ１８ 和 ＮＨ２ 吸附剂净化效果类似但 ＮＨ２ 净化后的溶液更澄清更干净杂质干扰峰

更少 试验比较了不同用量 （ １００２００４００ ｍｇ）ＮＨ２ 以及 １００ ｍｇ ＮＨ２ 和 １００ ｍｇ Ｃ１８ 吸附剂的净

化效果 结果表明使用 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 可以获得良

好的净化效果且不会对待测物产生明显的吸附２２４　 基质效应的评价

　 　 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化

合物）与目标化合物竞争电离所致［１９］ 在配置电喷

雾源的 ＬＣＭＳ 定性定量分析中基质效应影响仪器

的灵敏度和重复性从而影响检测结果的准确度

为评价基质效应分别制备空白基质标准曲线（添加含量为 １２５１０２０５０ μｇ ｋｇ）以及相应含量的

溶剂标准曲线 根据基质标准曲线与溶剂标准曲线

的斜率比值来评价基质效应［２０］ 若比值在 ０1049008 ８ ～１1049008 ２ 范围内则表明基质效应不明显 本文对 ３５ 种

兽药的基质效应进行了评价（见表 ２）可以看出猪肉样品中 ７７ 以上的兽药基质效应不明显仅有少

部分兽药如 ＳＭＭＳＦＭＳＭ２ＣＬＴ 以及四环素类兽

药呈现出较强的基质效应 综上所述本研究的前

处理方法可有效去除脂肪等引起的基质效应但为

了获得更加准确的定量结果本试验仍采用空白基

质匹配标准曲线以抵消或补偿基质效应２２５　 线性方程检出限与定量限

　 　 按 １４ 节方法配制 ６ 个水平的基质匹配混合标

middot５６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

表 ２　 猪肉空白样品中 ３５ 种兽药的基质效应加标回收率以及精密度（ｎ＝６）Ｔａｂｌｅ ２　 Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｖｅｒａｇｅ ｓｐｉｋｅｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ （ＲＳＤｓ）

ｏｆ ｔｈｅ ３５ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｐｏｒｃｉｎｅ ｍｕｓｃｌｅ （ｎ＝６）

Ｄｒｕｇ Ｍａｔｒｉｘ ｅｆｆｅｃｔ２ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ １０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ５０ μｇ ｋｇ

Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ＲＳＤ ＳＭＴ ０６９ １０５１ ４６ １０５７ ４６ ８０５ ７２ＳＩＺ ０７８ １０３７ ３４ １０７１ ３７ ８１５ ６４ＳＣＰ ０７７ １１２８ １５ １０３５ ３４ ７７２ ７６ＳＤＺ ０７５ １０９５ ２９ １０７２ ２７ ７９０ ３７ＳＭＺ ０８３ ９３４ ３１ １１０７ ２０ ７８９ ６７ＳＴ ０６８ １１００ ３４ １０９４ ６５ ７８８ ６３ＳＭＭ ０４１ ８７３ ２４ １０９７ １７ ８９０ ３７ＳＭＲ ０７６ ８６４ ４７ １０８５ ２８ ８０１ ５１ＳＤＸ ０８４ １００７ ３０ １１１７ ２２ ８４０ ５４ＳＰＤ ０７３ ９５９ ２６ １１２２ １３ ８２４ ２３ＳＦＭ ０５４ １０２９ ２１ １１２７ ０６ ８２４ ３６ＳＤＭ ０７６ １０２７ ２３ １０１３ ３３ ７９２ ４２ＳＰＰ ０８４ １０２６ ２４ １０３３ ２０ ７５９ ６８ＳＤＴ ０８８ １０５５ ２６ １１１５ １５ ７７８ ６４ＳＭ２ ０３５ １０５５ ２２ １００６ １７ ７８１ ３９ＳＳＴ ０７９ ８１５ ４１ ９６２ ３０ ８０７ ４０ＳＱ ０８４ ９９７ １９ １０２６ ４１ ７８０ ７５ＳＡＸ ０７０ １０６９ ５１ １１３５ ７５ ７５８ ９８ＴＭＰ ０７８ ８３８ ４３ １０５７ ３５ ７９４ １５ＣＬＴ ０５２ ９４９ ５８ １０６７ ２９ ８６７ ２８ＲＴＰ ０９３ ９７０ ３３ １０８４ ２４ ７７９ ６３ＳＢＡ ０９７ ９７８ ３７ １０５６ １０ ８２７ ４３ＣＬＰＴ ０８５ ９２４ ３５ １０２３ ３７ ８２９ ４０ＭＢＴ ０８８ ８７９ ２９ １００５ ０９ ７８９ ２４ＡＭＴ ０７７ ９９２ ２０ ８８５ ２９ ７１８ １０ＴＣ ０４０ ８２８ ４１ ９１９ ２６ ９７６ ５１ＯＴＣ ０４５ ９８２ ４０ １０２３ ３０ ９０１ ３３ＣＨＴＣ ０２６ １０２４ ３１ ９３６ ３１ ８２４ ２４ＭＣ ０５８ １０２８ ５０ １００２ ５３ ９２８ ３６ＮＯＲ １０７ １０３６ ３４ １０３４ ２７ ８９２ ３８ＯＦＬ ０８３ ９６０ ４２ ９７５ ２２ ８０１ ２４ＥＮＲ ０９０ １０１９ ２４ １０００ ２５ ７９７ ２８ＰＧＴ ０７６ ８４１ ２８ ９９６ ３２ ８２８ ２１ＴＳ ０８２ １０００ １８ ９５８ ２３ ７６２ ３５ＭＴＳ ０８１ ９７５ ２９ １０２７ ２１ ７８０ ２８

性氧化铝硅藻土氟罗里硅土以及 ＰＳＡ ＭｇＳＯ４ 对

四环素类喹诺酮类性激素类以及部分磺胺类兽药

均有不同程度的吸附且基线噪音大干扰峰多净化效果不理想 Ｃ１８ 和 ＮＨ２ 吸附剂净化效果类似但 ＮＨ２ 净化后的溶液更澄清更干净杂质干扰峰

更少 试验比较了不同用量 （ １００２００４００ ｍｇ）ＮＨ２ 以及 １００ ｍｇ ＮＨ２ 和 １００ ｍｇ Ｃ１８ 吸附剂的净

化效果 结果表明使用 ２００ ｍｇ ＮＨ２ 可以获得良

好的净化效果且不会对待测物产生明显的吸附２２４　 基质效应的评价

　 　 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化

合物）与目标化合物竞争电离所致［１９］ 在配置电喷

雾源的 ＬＣＭＳ 定性定量分析中基质效应影响仪器

的灵敏度和重复性从而影响检测结果的准确度

为评价基质效应分别制备空白基质标准曲线（添加含量为 １２５１０２０５０ μｇ ｋｇ）以及相应含量的

溶剂标准曲线 根据基质标准曲线与溶剂标准曲线

的斜率比值来评价基质效应［２０］ 若比值在 ０1049008 ８ ～１1049008 ２ 范围内则表明基质效应不明显 本文对 ３５ 种

兽药的基质效应进行了评价（见表 ２）可以看出猪肉样品中 ７７ 以上的兽药基质效应不明显仅有少

部分兽药如 ＳＭＭＳＦＭＳＭ２ＣＬＴ 以及四环素类兽

药呈现出较强的基质效应 综上所述本研究的前

处理方法可有效去除脂肪等引起的基质效应但为

了获得更加准确的定量结果本试验仍采用空白基

质匹配标准曲线以抵消或补偿基质效应２２５　 线性方程检出限与定量限

　 　 按 １４ 节方法配制 ６ 个水平的基质匹配混合标

middot５６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

色 谱 第 ３４ 卷

准溶液在选定的色谱条件和质谱参数下进行检测以目标化合物定量离子的峰面积（Ｙ）为纵坐标质量浓度（Ｘ μｇ Ｌ）为横坐标绘制工作曲线３５ 种兽

药的线性范围为 １1049008 ０ ～ ５０1049008 ０ μｇ Ｌ相关系数 ｒ 为

０1049008 ９９６ ７～１1049008 ０００ ０线性关系良好 以定量离子信噪

比Ｓ Ｎ＝ ３为样品的检出限（ＬＯＤｓ） Ｓ Ｎ ＝ １０ 为定

量限（ＬＯＱｓ）结果见表 ３ ３５ 种兽药的 ＬＯＤｓ 为

０1049008 ０１～１1049008 ０１ μｇ ｋｇ ＬＯＱｓ 为 ０1049008 ０４～３1049008 ３７ μｇ ｋｇ

表 ３　 ３５ 种兽药的基质匹配线性方程相关系数（ｒ）检出限和定量限

Ｔａｂｌｅ ３　 Ｍａｔｒｉｘｍａｔｃｈｅｄ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ （ ｒ） ＬＯＤｓ ａｎｄ ＬＯＱｓ ｏｆ ｔｈｅ ３５ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇｓ

　

Ｄｒｕｇ Ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｒＬＯＤ

（μｇ ｋｇ）ＬＯＱ

（μｇ ｋｇ）ＳＭＴ Ｙ＝ ４１５times１０４Ｘ＋１３５times１０４ ０９９８２ ００２ ００６ＳＩＺ Ｙ＝ ３７９times１０４Ｘ＋８８１times１０３ ０９９８０ ００４ ０１２ＳＣＰ Ｙ＝ ４３７times１０４Ｘ－２１６times１０３ ０９９７６ ００６ ０２１ＳＤＺ Ｙ＝ ６６８times１０４Ｘ＋４４５times１０３ ０９９８３ ００２ ００６ＳＭＺ Ｙ＝ ４４５times１０４Ｘ＋２７６times１０４ ０９９７７ ００８ ０２７ＳＴ Ｙ＝ ５３４times１０４Ｘ＋７９２times１０３ ０９９８０ ００４ ０１４ＳＭＭ Ｙ＝ １５６times１０４Ｘ＋７１２times１０３ ０９９６７ ０１４ ０４６ＳＭＲ Ｙ＝ １０１times１０５Ｘ＋９１５times１０４ ０９９７１ ００１ ００４ＳＤＸ Ｙ＝ １７８times１０５Ｘ＋１４２times１０５ ０９９９３ ００２ ００７ＳＰＤ Ｙ＝ ５３９times１０４Ｘ＋４２６times１０４ ０９９９３ ００３ ００８ＳＦＭ Ｙ＝ ４０６times１０４Ｘ＋１２５times１０４ ０９９９８ ００２ ００７ＳＤＭ Ｙ＝ ５８７times１０４Ｘ＋１８４times１０４ ０９９７５ ００３ ００９ＳＰＰ Ｙ＝ ２８９times１０４Ｘ＋２８８times１０３ ０９９８７ ００３ ０１２ＳＤＴ Ｙ＝ ２０６times１０５Ｘ＋１０７times１０５ ０９９９５ ００１ ００４ＳＭ２ Ｙ＝ ５０６times１０４Ｘ＋７２２times１０１ ０９９８１ ００４ ０１２ＳＳＴ Ｙ＝ ７４６times１０３Ｘ＋２４１times１０３ １００００ ０１７ ０５６ＳＱ Ｙ＝ ３９５times１０４Ｘ＋２０３times１０４ ０９９９５ ００５ ０１６ＳＡＸ Ｙ＝ ７２０times１０４Ｘ＋５９０times１０４ ０９９９７ ００４ ０１２ＴＭＰ Ｙ＝ ４５３times１０４Ｘ＋２４０times１０４ ０９９９８ ００６ ０１９ＣＬＴ Ｙ＝ ７９１times１０４Ｘ＋３５２times１０４ ０９９９２ ００６ ０２１ＲＴＰ Ｙ＝ ９０２times１０４Ｘ＋６３１times１０４ ０９９９９ ００１ ００５ＳＢＡ Ｙ＝ １００times１０５Ｘ＋２４７times１０４ １００００ ００２ ００７ＣＬＰＴ Ｙ＝ １７０times１０５Ｘ＋７１３times１０４ ０９９９９ ００２ ００８ＭＢＴ Ｙ＝ ２４０times１０５Ｘ＋８８９times１０４ ０９９９７ ００１ ００４ＡＭＴ Ｙ＝ ４７７times１０３Ｘ＋２８４times１０２ １００００ １０１ ３３７ＴＣ Ｙ＝ ４２３times１０３Ｘ＋２２６times１０３ ０９９８３ ０２１ ０７１ＯＴＣ Ｙ＝ ４８９times１０３Ｘ＋１０３times１０３ １００００ ０５２ １７４ＣＨＴＣ Ｙ＝ １７０times１０３Ｘ＋１５９times１０３ ０９９８７ ０２８ ０９２ＭＣ Ｙ＝ ３２９times１０３Ｘ－３１７times１０２ ０９９９６ ０２７ ０８９ＮＯＲ Ｙ＝ １２５times１０４Ｘ－３２４times１０３ ０９９９８ ００８ ０２７ＯＦＬ Ｙ＝ ３２８times１０４Ｘ－９２４times１０２ １００００ ００５ ０１７ＥＮＲ Ｙ＝ ２８３times１０４Ｘ＋１３６times１０４ ０９９９９ ００３ ００８ＰＧＴ Ｙ＝ ２０７times１０４Ｘ＋１６３times１０４ ０９９９５ ０１３ ０４５ＴＳ Ｙ＝ ２３３times１０４Ｘ＋５２４times１０３ ０９９９７ ０１０ ０３４ＭＴＳ Ｙ＝ １９３times１０４Ｘ－１２３times１０３ １００００ ００７ ０２４　 Ｙ ｐｅａｋ ａｒｅａ Ｘ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ μｇ Ｌ

２２６　 回收率和精密度

　 　 在空白猪肉样品中添加 ３５ 种兽药混合标准溶

液制备含量分别为 ２１０ 和 ５０ μｇ ｋｇ 的加标样品按上述前处理方法及测定条件进行回收率试验每

个添加水平做 ６ 次平行测定结果见表 ２ 各化合

物的平均回收率为 ７１1049008 ８ ～ １１３1049008 ５相对标准偏差

（ＲＳＤｓ）为 ０1049008 ６ ～９1049008 ８符合多残留分析的要求２３　 实际样品检测

　 　 采用本文所建立的方法对购自市场及超市的

２０ 份猪肉进行全面的筛查分析 检测结果显示 １份猪肉样品检出 ＳＭＺ残留量为 ２３1049008 ２ μｇ ｋｇ ２ 份

猪肉样品检出 ＳＱ残留量分别为 ３1049008 ０ μｇ ｋｇ 和 ６1049008 １μｇ ｋｇ其余样品均无兽药检出 为验证本方法的

可靠性对阳性猪肉样品采用 ＧＢ Ｔ ２１３１６２００７ 方

法进行验证其 ＳＭＺ 和 ＳＱ 的残留量分别为 ２５1049008 ０３1049008 ２ 和 ６1049008 ４ μｇ ｋｇ可见两种方法的测定结果非常接

近表明本法适用于猪肉中兽药残留的定性筛查及

定量测定

３　 结论

　 　 本文采用改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法建立了 ＬＣＭＳ ＭＳ 同时测定猪肉中磺胺类磺胺类增效剂β受体激动剂四环素类喹诺酮类金刚烷胺以及性

激素共 ７ 类 ３５ 种兽药的多残留分析方法 与现行

国家标准及行业标准相比该方法能实现同时分析

多类药物残留大大缩短了检测周期节约了检测成

本 本研究方法操作简便快速准确其灵敏度准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求为各

食品检测机构提供了简单快速的筛选方法来应对大

批量的猪肉中禁限用兽药的日常监控为保证人民

饮食安全提供了技术支持

参考文献

［１］ 　 Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｎｏ ２３５ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅrsquo ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ农业部 中华人民共和国农业部公告第 ２３５ 号 （２００２１２２４）［ ２００８０６２９］ ｈｔｔｐ ｙｚ ｈｚａｇｒｉ ｇｏｖ ｃｎ ｕｐｌｏａｄＦｉｌｅｓ ２００５１０ １１３０２２１５６４４０６ｄｏｃ

［２］ 　 Ｚｈａｏ Ｈ Ｘ Ｓｕｎ Ｙ Ｈ Ｄｉｎｇ Ｍ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（６） ６３５赵海香 孙艳红 丁明玉 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（６）６３５

［３］ 　 Ｗａｎｇ Ｌ Ｌｉ Ｙ Ｑ Ｗａｎｇ Ｈ Ｂ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１１ ３９（２） ２０３王炼 黎源倩 王海波 等 分析化学 ２０１１ ３９（２） ２０３

［４］ 　 Ｌｏｐｅｓ Ｒ Ｐ Ｒｅｙｅｓ Ｒ Ｃ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ ｅｔ ａｌ Ｔａｌａｎｔａ２０１２ ８９（１） ２０１

［５］ 　 Ｙａｎ Ｈ Ｌｉｕ Ｘ Ｃｕｉ Ｆ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ ２０１３ ９３８ ８［６］ 　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ

Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１２ ４０（２） ２７３罗辉泰 黄晓兰 吴慧勤 等 分析化学 ２０１２ ４０（２） ２７３

［７］ 　 Ｃａｏ Ｈ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｚ Ｚｈｕ Ｙ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｓｓ

middot６６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot

　 第 ９ 期 张科明等ＱｕＥＣｈＥＲＳ 结合液相色谱串联质谱法快速测定猪肉中多类兽药残留

Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１５ ３６（１） ２３曹慧 陈小珍 朱岩 等 质谱学报 ２０１５ ３６（１） ２３

［８］ 　 Ｂａｎ Ｆ Ｇ Ｈｕ Ｘ Ｊ Ｗｕ Ｎ Ｐ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ ２０１４ ４８（６） ４０班付国 胡兴娟 吴宁鹏 等 中国兽药杂志 ２０１４ ４８（６）４０

［９］ 　 Ｙｉ Ｊ Ｈ Ｄｕａｎ Ｚ Ｊ Ｆａｎｇ Ｇ Ｚ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０１３ １３（２） １５３易江华 段振娟 方国臻 等 中国食品学报 ２０１３ １３（２）１５３

［１０］　 Ｃａｐｒｉｏｔｔｉ Ａ Ｌ Ｃａｖａｌｉｅｒｅ Ｃ Ｐｉｏｖｅｓａｎａ Ｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ ２０１２ １２６８ ８４

［１１］　 Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｄｅｃｉｓｉｏｎ ２００２ ６５７ ＥＣ［１２］　 ＧＢ Ｔ ２２２８６２００８［１３］　 Ｌｕｏ Ｈ Ｔ Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｌ Ｗｕ Ｈ Ｑ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ

ｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０１１ ３０（１２） １３２９罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等 分析测试学报 ２０１１ ３０（１２） １３２９

［１４］ 　 Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｑ Ｌｉｕ Ｘ Ｍ Ｌｉ Ｘ ｅｔ ａｌ Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ２０１６ ６０６６７

［１５］ 　 Ｌｉ Ｎ Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｔ Ｌｉｕ Ｌ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１４ ３２（１２） １３１３李娜 张玉婷 刘磊 等 色谱 ２０１４ ３２（１２） １３１３

［１６］ 　 Ｂｕ Ｍ Ｎ Ｓｈｉ Ｚ Ｈ Ｋａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ２０１２ ３１（５） ５５２卜明楠 石志红 康健 等 分析测试学报 ２０１２ ３１（５）５５２

［１７］ 　 Ｗａｎｇ Ｈ Ｚｈａｏ Ｌ Ｙａｎｇ Ｈ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ２０１５ ３３（９） ９９５王浩 赵丽 杨红梅 等 色谱 ２０１５ ３３（９） ９９５

［１８］ 　 Ｔｓａｉ Ｗ Ｈ Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｃ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ２０１０ １２１７ ４１５

［１９］ 　 Ｔａｙｌｏｒ Ｐ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２００５ ３８（４） ３２８［２０］ 　 Ｇoacuteｍｅｚ Ｐeacuteｒｅｚ Ｍ Ｌ ＲｏｍｅｒｏＧｏｎｚａｌｅｚ Ｒ Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖｉｄａｌ Ｊ

Ｌ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｓｅｐ Ｓｃｉ ２０１３ ３６（７） １２２３

middot７６８middot