Recombinación homóloga Recombinación sitio-específico

Recombinación

Cómo se inicia la Recombinación?

Enzimas involucradas en la generación de la cadena sencillacon el extremo 3´OH libre

RecBCD helicasa y nucleasaque forman el sustrato para RecA

sitio chi5´GCTGGTGG3´3´CGACCACC5´

Filamento de Rec A

Rec A

Ruv A se une a las cuatro hebrasdel intermediario de Holliday

Ruv B es hexámero con actividad de ATPasa que sirve de motor para su movimiento. El consumo de ATP permite girar a la molécula

Ruv C es una endonucleasa que resuelvelos intermediarios de Holliday

En eucariontes no se han encontrado homólogos para las proteínas Ruv, pero sí para la Rec A

Resolución de las uniones Holliday

Enfermedades humanas asociadas a problemas en los mecanismos de reparación

Reparación del ADN

Depurinación y desaminación de bases

100 al día

5000 al día

La naturaleza de las basespermite detectar mejor el daño

Citocinas metiladas al desaminarse producen timina

Dímeros de timina

Exposición a radiacionesultravioleta

Mutaciones que pueden producir los errores en el ADN

MECANISMOS DE REPARACION

1- Fotoreactivación (ruptura de los dímeros de pirimidinas por acción de una fotoliasa (phr) activada mediante luz visible).

2- Escisión + reparación

* Reparación de nucleotidos aislados por lesión u.v: necesita la otra hebra como templado (hasta 30 bp)

Intervienen las endonucleasas uvrA,B,C y la helicasa uvrD

* Reparación de bases modificadas (sitiosAP, alquilación o metilación)

3- Reparación post- replicativa

* Reparación del apareamiento (“mismatch”): una metilasa reconoce DNA recientemente replicado (dam) e intervienen las proteínas “mut” (helicasas, etc)

* Reparación por recombinacion

Acción de la fotoliasa

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Reparación por escisión de bases

Reparación por escisión de nucleótidos

uvrABC (excinucleasa)

Mecanismos de reparación del ADN

Reparación por escisión en bacterias y en humanos

Mecanismos de reparación cuando las dos cadenas se dañan

Reparación por recombinación

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Reparación post-replicativa

Cómo distinguir la cadena molde cuando se repara un error?

Respuesta SOS

RecA está involucrada en activar la respuesta SOS

La recombinación puede involucrarla formación de heteroduplex o derecombinantes

Actividades de RecA