Reino: Fungi

Phylum: Ascomycota

Clase: Pneumocystidomycete

Orden: Pneumocystidales

Familia: Pneumocystidacae

Género: Pneumocystis

Especie: jirovecii

Pneumocystis carinii

Pneumocystis wakefieldiae

Pneumocystis jirovecii

Se desarrolla en un ciclo asexual de tres estadios:

Trofozoito o estado trófico, que es haploide, el más

pequeño (1.5 a 5 mu)

Prequíste (esporocito) de tamaño intermedio,

producto de la conjugación de dos células haploides, y que

pasa por fases de meiosis y mitosis, dando lugar a un

cigoto oval de cuatro núcleos, y

Quiste (5 a 8 mu) de pared gruesa que da lugar a ocho

esporas o ascosporas y que ya vacíos tienen forma de

copa o sombrero.

Infección producida por “Pneumocystis”

EucariotaUniceluarDistribuido universalmenteTropismo por vías respiratoriasAfecta diversas especies de mamíferoHUMANO patógeno oportunista

PcP: Pnemocystis Pneumonia

Malnutrición

Citotoxicos o

Corticoides

Onco

hematológicosSIDA

Inmuno deficiencias

congénitas

Transplantados

PAT Ó G E N O

O P O RT U N I S TA

Enfermdedad rara

y poco frecuente

Pneumonía común y

enfermedad marcadora de

SIDA

1989 QUIMIOPROFILAXIS anti PcP incidencia

Detección de Ac a edad temprana → exposición

frecuente

• NO reactiva infección adquirida durante la infancia

• Adquisición activa de novo de microorg. Transportados

por aires

PCR→ ADN P jirovecii

•Resultados positivos en personas sanas y asintomáticas post contacto con enfermo•Aire de habitaciones de pacientes con P j PCR +

Asintomática

Infantil epidémica o neumonía plasmocitaria

Formas respiratorias esporádicas en inmunodeficientes

Extrapulmonar

Síndrome

Toxi-infeccioso

Síndrome

RespiratorioSignos Rx

•Fiebre > 38 C

•Sudores

nocturnos

•Astenia

•Anorexia

•Pérdida de peso

•Disnea

•Taquipnea

•Tos seca

•cianosis

•Sugestivos pero

inespecíficos

•Indican daño

pulmonar

Puede haber afección extrapulmonar (1 a 3%) de ganglios, bazo, hígado, huesos, glándulas suprarrenales, gl. Tiroides, aparatos digestivo y urinario y de piel

Clínica:•Fiebre elevada•Astenia•Pérdida de peso•Disnea •Hepatoesplenomegalia•Lesiones papulosas o nodulares en piel•Derrame pleural•Perdida de la agudeza visual

Estudios no específicos:

Centellograma de ganglio

Nebulizaciones con Tc 99

LDH (elevada) resultado normal no excluye PcP

Proteína C reactiva

Ensayo serológico

Detección de Ac, pero existen desde temprana edadDeterminar 1-3 ß-D-glucano (S 92,3%. E 86,1%)

Inmunoflorescencia directa (ID) Sensibilidad cercana a 100 %Especificidad alrededor de 96 %

Otras metodologías:

Biología molecular

Alta sensibilidad, muestra no invasiva (buches)

Alto costo

Presencia de ADN en el ambiente

Indistinguible infección de portación

Evaluación de pronóstico de la enfermedad

oPresencia de mutación en el gen que codifica DHPS

(dihidropteroato sintetasa) posibles resistencia a

sulfas

EL DIAGNOSTICO DEFINITIVO DE PcP SE BASA

EN LA DEMOSTRACIÓN MORFOLÓGICA DEL

MICROORGANISMO POR MICROSCOPIA

Ante la ausencia de un sistema de cultivo in vitro para P. jirovecii, la base para el diagnóstico de la PcP es la visualización de los diferentes estadios del ciclo de vida de este patógeno.

Esputo inducido

BAL

Otros especímenes derivados del TR

Biopsia tranbronquial

Biopsia de pulmón a cielo abierto

ESPUTO INDUCIDO

n-acetilcisteína (NAC)

BAL

OBSERVACION

EN

FRESCO

COLORACION

EN

FRESCO

COLORACION

DE

PARED

QUISTICA

COLORACION

DE

ELEMENTOS

NO

QUISTICOS

FUNDAMENTO:

Se colorea debido a la composición de la pared del

quiste que contiene: polisacáridos, quitina y polímeros

de glucanos.

PAS

Gomori - Grocott

Azul de toluidina O

Gram-Weigert

Blanco de Calcoflúor

FUNDAMENTO:

Permite la observación de trofozoitos y cuerpos

intraquísticos

Giemsa

Modificaciones rápidas de Giemsa

IF (única que permite ver Q, T y CIQ)

Técnica de Tinción Azul de Toluidina

Preparación de reactivos

Reactivo de Sulfatación

Acido Acético Glacial 45 ml Acido Sulfúrico 15 ml

Reactivo Azul de Toluidina

Azul de Toluidina 0.16 gr. Agua Destilada 60 ml Acido Clorhídrico 2 ml Alcohol Etílico Absoluto 140 ml

Preparación de la muestra a procesar:

Lavado broncoalveolar:

Centrifugar a 2.500 rpm 5 min. Y realizar con el

sedimento al menos tres frotis.

Esputo ó secreción bronquial:

Agregar perlas de vidrio y dos o tres gotas de

hidróxido de sodio al 10 % . Realizar al menos 6

frotis.

Técnica de coloración

1) Reactivo de Sulfatación 10 minutos 2) Agua corriente bajo la canilla (lado opuesto al

preparado) 1 minuto 3) Reactivo azul de toluidina 5 minutos o 10 minutos

o mas según la antiguedad del reactivo 4) Alcohol etilico al 95 % 10 segundos5) Alcohol etílico puro 10 segundos 6) Alcohol etílico puro 10 segundos 7) Xilol (no es indispensable) 10 segundos

Observación Microscópica Observación microscopica con aumento 100 x

400 x

QUISTES

QUISTES

1000x

Se diagnostica por la presencia de quistes en forma de copa, con las sales argentias se ve las paredes quisticas de color negro, con giemsa no tiñe las paredes quisticas pero tiñe el contenido del quiste.

CUERPOS INTRAQUISTICOS

La incidencia de PcP está subestimada

El diagnostico es exclusivo del laboratorio

NO existe una coloración Gold-Standard

Es aconsejable realizar coloraciones

complementarias