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Replicación del ADN
Secuencia de bases idénticas
La replicación es semiconservativa
Replicación del cromosoma bacteriano
Horquilla de replicación
Cadena líder y cadena retrasada (cadena contínua y cadena discontínua)
La replicación es bidireccional
ADN polimerasas de bacterias
Las ADN polimerasas catalizan la reacción
Alta precisión en la polimerización
Actividad de exonucleasa (3´--5´)
Por qué no existen polimerasas que catalicen en dirección 3´---5´
ADN primasa
Síntesis de la cadena retrasada o discontínua
ADN ligasa
ADN helicasa
Rompe los puentes de hidrógeno entre las bases
Estructura de las helicasas
Proteínas de unión a cadena sencilla (SSB)
Pol I Pol II pol III
gen pol A polB polC
PM (kDa) 103 90 130
mol/cél. 400 100 10
Vmax 20 nt/s 3 nt/s 750 nt/s
3' exonucl. + + no
5' exonucl + no no
procesiv. 3-200 10000 500000
ADN polimerasas de E. coli
DNA pol I: en la replicación, sustituye el ARN (cebador) por ADN
ADN superenrollado.
DNA topoisomerasa I
Topoisomerasas tipo II (DNA Girasa) participan en la terminación de la replicación de moléculas circulares.
Modelo del dímero
El origen de replicación • ¿cómo es la señal en el ADN que marca el
origen? • ¿qué proteínas reconocen esa señal? • ¿es un sitio único? • ¿cómo se regula el inicio de la síntesis de
ADN a partir del origen?
¿Qué particularidad tiene el ADN en el sitio de inicio de la replicación?
3 secuencias repetidas directos, de 13 pb, ricas en AT
4 repetidos inversos, de 9 pb
OriC
Modelo de la iniciación de la replicación en oriC, en E. coli
DnaA DnaB helicasa, DnaC DnaG primasa SSB
Proteínas que interactúan con el ADN en el sitio de inicio de la replicación:
ATP
En dependencia de la polaridad que presente la secuencia Ter y por tanto la ubicación de la proteína Tus se detendrá en una u otra horquilla de replicación. La unión de la proteína Tus a la secuencia consenso frena a la horquilla de replicación correspondiente.
Terminación en procariontes
Origen de replicación en eucariotas
Origen de la replicación en eucariontes
Los cromosomas eucariontes tienen múltiples origenes de replicación
No todos los orígenes de replicación se activan al mismo tiempo
ADN polimerasas en células eucariotas
¿Cómo completar la replicación de genomas lineales?
Telomerasa
Las células controlan el tamaño de su telómero