Revista instituto ciencias forenses

CIENCIAS FORENSESINSTITUTO DE

Importancia de la calidad de los laboratorios forenses...4

Nº1MARZO 2016

Personas desaparecidas: fenómeno nacional que afecta a miles de fami-lias...36

Observando el lugar de intervención ...41

Fortalecimiento de los laboratorios de servicios periciales estatales...6

Estandarización de un método para la búsqueda de disparoslaboratorio de química forense...9

Validación Parámetros de amplifica-ción. Laboratorio de Genética Foren-se...18

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Víctor Antonio Carrancá BourgetFiscal General del Estado

Luz María Reyna Carrillo FabelaDirectora General

Rosa María Torres GarcíaDirectora Técnico Operativo Pericial

Rogelio Maxil TirsoDirector de Calidad

Leticia Sánchez VillasanaDirectora de Laboratorios

Florencia Bertoni Directora de Criminalística

Luz María Reyna Carrillo FabelaEditora

Cristina Ortiz LópezDiseño y Producción

Sergio Sánchez CalvoPágina web

e-mail: [email protected]

www.fge.puebla.gob.mx

Rogelio Maxil Tirso, Leticia Sánchez VillasanaConsejo editorial

- Certificación de Peritos y Acreditación de Laboratorios

Importancia de la calidad en los laboratorios forensesLuz María Reyna Carrillo Fabela, Rogelio Maxil Tirso.

Fortalecimiento de los laboratorios de servicios periciales estatalesLic. Claudia Esmeralda Sánchez Porras, Q.F.B. Leticia Guadalupe Sánchez Villasana.

- Artículos Científicos

Estandarización de un método para la búsqueda de residuos de disparo. Laboratorio de química forenseQ.F.B. Xóchitl Vázquez Solano, Q.F.B. Iván Merino Ojeda.

Validación Parámetros de amplificación. Laboratorio de Genética ForenseM.C. Florencia Bertoni, M.C. Dolores Bautista España, M.C. Rosario Carreón, I.B. Jorge Medel Sánchez, I.B. Roberto Quintana Vega, Tec. Gabriela Pérez Sánchez, Dra. Valerie Fuller.

Personas desaparecidas: fenómeno nacional que afecta a miles de familias Ingrid Espinosa Romero.

- Casos Forenses

Observando el lugar de intervención Lic. Erika Castillo Montiel, M.L. Luz María Reyna Carrillo Fabela.

DIRECTORIO Hablemos de...

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El cinco de enero de 2016 rindió protesta como Fiscal Ge-neral del Estado de Puebla, el Lic. Víctor Antonio Carrancá

Bourget ante la transformación de la Procuraduría General del Estado de Puebla hacia la Fiscalía General.

La actual Institución opera como un órgano autónomo, dota-do de personalida jurídica y patrimonio propios, con la fina-lidad de responder a lineamientos basados en principios de eficiencia, imparcialidad, legalidad, objetividad, profesionalis-mo, responsabilidad y respeto a los derechos humanos, ape-gándose a las exigencias del Nuevo Sistema de Justicia Penal.

Con motivo de esta transformación, el Fiscal General del Es-tado de Puebla realizó ajustes al organigrama, uno de ellos per-mitió que la antes Dirección General de Servicios Periciales se fortaleciera para convertirse en el Instituto de Ciencias Forenses. Víctor Antonio Carrancá Bourget

Fiscal General del Estado de Puebla.

Ante las exigencias del nuevo sistema de justicia penal en México y la globalización de las normas

de calidad existentes en muchos laboratorios forenses de Europa y EEUU, ha surgido la necesidad de que los laboratorios Forenses de México implementen un sis-tema de gestión de calidad, es decir, deben contar con manuales de calidad, políticas, procedimientos técni-cos científicos y evidencia documental de los análisis que realizan; todo bajo los estándares internacionales tales como la Norma ISO/IEC 17020 y Norma ISO/IEC 17025, así como la formación de auditores inter-nos, metrología básica, estimación de incertidumbre, control de calidad y validación de métodos.

Con la acreditación de las áreas Forenses se da cer-tidumbre de que los laboratorios y unidades de

inspección aplican las regulaciones, normas o están-dares correspondientes con precisión que les permite

IMPORTANCIA DE LA CALIDADEN LOS LABORATORIOS FORENSES

Luz María Reyna Carrillo Fabela & Rogelio Maxil Tirso

comprobar y sustentar los resultados obte-nidos como medios de prueba en los Jui-cios Orales.

En el Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado se inició el

proceso de acreditación de los Laborato-rios Forenses a partir del año 2011, con el diseño de los laboratorios que albergarían los servicios periciales, la construcción de los mismos y su inauguración en enero del año 2014, a la par se llevó a cabo la capa-citación del personal pericial, entre la que resalta por su importancia el curso de “Aná-lisis y Procesamiento de la Escena del Cri-men” efectuado en el año 2013, impartido a los peritos en criminalística por instructores expertos en CSI de ICITAP (International

4Certificación de Peritos y acreditación de Laboratorios

Criminal Investigation and Training Assistance Program) del Departamento de Justicia del Gobierno de los Estados Unidos de Norteamérica, así como desde el año de 2011 se dio inicio con la elaboración de Manuales de Procedimientos en las diversas áreas periciales.

Con el acertado cambio de Procuraduría General de Justi-cia a Fiscalía General del Estado a partir del cinco de ene-

ro del año 2016 y la atinada decisión del primer Fiscal General del Estado de crear el Instituto de Ciencias Forenses despla-zando la entonces Dirección General de Servicios Periciales también en enero de 2016, con una nueva estructura orgáni-ca y el fortalecimiento de los laboratorios en infraestructura, equipo y materiales, se consolida firmemente el Instituto de Ciencias Forenses para aspirar a la acreditación de sus labora-torios forenses bajo la Norma ISO/IEC 17020 y Norma ISO/IEC 17025. El Estado de Puebla al igual que los demás Esta-dos de la República Mexicana se encuentra inmerso en este cambio en la manera de trabajar, y en realidad, es el reto que todo Laboratorio Forense tiene o debe tener, llegar a trabajar con Calidad.

5 Certificación de Peritos y acreditación de Laboratorios

* Especialista en Medicina Legal, Directora Ge-neral del Instituto de Ciencias Forenses de la Fis-calía General del Estado de Puebla.

* Maestro en Ciencias, Director de Calidad del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía Ge-neral del Estado de Puebla.


Desde hace varios años el Progra-ma Internacional de Capacitación

y Asistencia en Investigación Criminal (ICITAP), por sus siglas en inglés, ha rea-lizado diversas actividades en apoyo al desarrollo forense de los Servicios Peri-ciales bajo la Iniciativa Mérida, firmada entre México y Estados Unidos.

En Junio del 2015 el Director Interino de ICITAP-México invitó a la entonces Di-rección General de Servicios Periciales de la Procuraduría General de Justicia del Estado de Puebla a participar en el PROYECTO DE EVALUACION DE LOS LABORATORIOS FORENSES ESTATA-LES, en las áreas de Documentos Cues-tionados y Química Forense, proyec-to que consistió en la visita a diversos Laboratorios Forenses de nuestro País,

FORTALECIMIENTO DE LOS LABORATORIOS DESERVICIOS PERICIALES ESTATALES

Lic. Claudia Esmeralda Sánchez Porras, Q.F.B. Leticia Guadalupe Sánchez Villasana.

con el objeto de evaluar los procedimientos técnicos e iden-tificar sus necesidades de equipamiento para identificar las posibilidades de acreditación de sus Laboratorios de acuerdo a la Norma ISO/IEC 17025 y así facilitar la implementación del Sistema Penal Acusatorio.

7 Certificación de Peritos y acreditación de Laboratorios

Formando así dos grupos de traba-jo, el primero por Peritos de la Pro-

curaduría General de la República, y el segundo, conformado por peritos de las Procuradurías Estatales de los Estados de Baja California, Sinaloa, Guanajuato y Puebla en las discipli-nas forenses de Química, Genética, Balística, Dactiloscopia, Documentos Cuestionados, Manejo de la Eviden-cia y Calidad, guiados por un Coor-dinador de Grupo de ICITAP, quienes recibimos capacitación especializada por expertos del Departamento de la Defensa de los Estados Unidos y lle-vando a la práctica los conocimien-tos, para evaluar a los Laboratorios Forenses en sus diversas áreas den-tro del Laboratorio Central de Servi-cios Periciales de la Procuraduría Ge-neral de la República.

El proyecto tuvo una duración de tres meses visitando más de cuarenta y cinco Laboratorios Forenses y sus respectivas Pro-

curadurías Estatales del país y recientemente se agregaron tres Estados a la lista, recibiendo cálidas bienvenidas y compromisos para lograr los objetivos de las mismas, dejando en cada inte-grante un cúmulo de experiencias al conocer el profesionalismo, objetividad, lealtad, responsabilidad y entrega en las actividades que cada área realiza, culminando las visitas con un reporte final que refleja el estado actual de cada área.

* Líder Técnico del Laboratorio de Documentos Cuestionados. Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.* Directora de Laboratorios del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.

Con el fin del Proyecto sin duda se tendrán grandes beneficios a nuestro País y a cada Laboratorio Forense de los diversos

Estados visitados dignificando la actividad pericial, logrando la homologación de procedimientos técnicos y de equipamiento en apoyo a una adecuada implementación del Sistema Penal Acusa-torio en nuestro País.


La satisfacción de formar parte del pri-mer grupo de Evaluadores de Laborato-

rios de Servicios Periciales en la República Mexicana, representa una gran responsabi-lidad y compromiso para los Laboratorios de Documentos Cuestionados y Química Forense del actual Instituto de Ciencias Fo-renses de la Fiscalía General del Estado de Puebla, experiencias que compartimos y conocimientos que aplicamos para el be-neficio y progreso de las ciencias forenses en estas áreas dentro y fuera de la Institu-ción para la implementación y mejora del Nuevo Sistema de Justicia Penal.

Q.F.B. Xóchitl Vázquez Solano.Q.F.B. Iván Merino Ojeda.

ESTANDARIZACIÓN DE UN MÉTODOPARA LA BÚSQUEDA DE RESIDUOS DE DISPAROLaboratorio de Química Forense

9 Artículos Científicos

INTRODUCCIÓN

El Laboratorio de Química Forense dentro del ámbito legal realiza el análisis de muestras mediante técnicas científicas

que los respaldan, apoyando de forma importante al organis-mo penal encargado de brindar justicia ciudadana. Por tal ra-zón la tecnología usada debe proporcionar resultados confia-bles mediante técnicas normalizadas, con la responsabilidad de garantizar la veracidad de sus resultados.

En los casos donde se involucra un arma de fuego es impor-tante determinar la presencia de residuos de disparo de arma de fuego (partículas GSR), las partículas GSR son formadas por el rápido enfriamiento de Pb, Ba y Sb vaporizado, des-pués de la elevada temperatura de ignición de los compo-nentes del fulminante. Cuando la mezcla del fulminante se funde, éste escapa del arma en forma de vapor o “pluma” a través de las aberturas disponibles del arma. Entonces, se solidifica en partículas finas y se deposita en las manos, ropa

Víctor Antonio Carrancá BourgetFiscal General del Estado de Puebla.


y superficies de la proximidad inmediata de la descarga del arma.El análisis por Microscopía Electrónica de Barrido/ Espectroscopía de Ener-gía Dispersiva (SEM/EDS); a pesar de ser de larga duración, es considerado a nivel internacional la mejor opción de-bido a que tiene alta sensibilidad, pro-porciona la composición elemental y la imagen de la partícula que nos permite observar las características morfológi-cas y de tamaño, con la ventaja de con-servar el indicio en comparación con técnicas como la absorción atómica o rodizonato de sodio, entre otras.

Lo ideal sería que las Instituciones en-cargadas de impartir Justicia en la Re-

pública Mexicana que cuentan con SEM y realizan la búsqueda de residuos de disparo de arma de fuego cuenten con documentos que garanticen la fiabilidad del análisis que están realizando, y se

apeguen a lo señalado por la norma ASTM 1588-10ε1, la cual rige el ensayo ya antes planteado, temática que fue presentada durante los cursos: 1er. Simposio-Taller Internacional “Aplica-ciones Forenses en Microscopía Electrónica de Barrido”, llevado a cabo los días 15 y 16 de enero de 2015 y en el Curso

Internacional Avanzado “Residuos de Ar-mas de Fuego por Microscopía Electró-nica de Barrido”, efectuado los días el 29 y 30 de junio de 2015, ambos en las instala-ciones de la entonces Procuraduría General de Justicia del Estado de Puebla (ahora Fis-calía General del Estado).

Debido a las exigencias internaciona-les de calidad es crucial contar con un

método o técnica estandarizada que sus-tente la labor del perito al momento de ser considerado como testigo experto dentro del nuevo sistema de justicia penal..

* Perito en Microanálisis, Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fis-calía General del Estado de Puebla.

* Pasantía en el Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía Ge-neral del Estado de Puebla.


MATERIALES

• SEM marca JEOL modelo JSM-6610LV • Detector de rayos X marca OXFORD mo delo N-MAX50• Estándar sintético Planotec GSR and Par ticle Analysis Calibration Kit marca Ted pella.• Estándar multielemental de C, Co, Au, Rh marca Ted pella.• Norma ASTM 1588-10 ϵ1


MÉTODO

Para estandarizar la búsqueda de partí-culas GSR en el Laboratorio de Química

Forense de la Fiscalía General del Estado de Puebla se realizó el análisis de un estándar de partículas sintéticas GSR (Estándar sin-tético Planotec GSR and Particle Analysis

Calibration Kit marca Ted pella), que mide 8mm x 8 mm y consiste en un carbono vítreo; además una almohadilla de referencia con dimensiones 0.1 x 0.1 mm2, la cual contiene las partículas a identificar:

- 3 partículas con un diámetro de alrededor de 10µm, 15 µm, y 20 µm respectivamente- 22 partículas con un diámetro alrededor de 0.5µm,- 25 partículas con un diámetro alrededor de 0.8µm,- 26 partículas con un diámetro alrededor de 1.2µm, y- 27 partículas con un diámetro alrededor de 2.4µm

Con una composición de Pb/Sb/Ba, precipitados de forma aleatoria sobre un área de 6mm x 6mm. Ésta área está deli-mitada por cuatro insignias en cada esquina, asociados por cualquier cuadrado (10x10 µm) o una partícula circular (10 µm de diámetro).


PARÁMETROS DE ANÁLISIS

• Alto vacío• L.C.: 85 µA• KV: 20• SS: 65• WD: 10• DT: 64%• PT: 4• Magnificación:550x• Resolución media• Umbrales: 45-253

RESULTADOS

Fig. 1. Ubicación de las partículas del estándar PLANO.

Fig. 2. Ubicación de las partículas detectadas.


DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Con base en los resultados obtenidos, los cuales se mues-tran en la Tabla 1 se considera que los parámetros uti-

lizados en el método son idóneos para realizar la búsqueda de partículas GSR, ya que se logra detectar el 100% de las partículas con diámetro de 0.8 µm a 20 µm.La detección de partículas GSR con diámetro de 0.5µm se ve disminuida posiblemente por los siguientes factores:

• Pérdida de partículas por manipulación excesiva.• Deficiencia en la detección debido al soporte utilizado.• Disminución en la detección por efectos de la matriz.


Tabla 1. Concentrado de las partículas detectadas.

CONCLUSIONES

El uso de métodos normalizados para la búsqueda de re-siduos de disparo de arma de fuego por SEM/EDS en el

Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Fo-rense permitirá emitir resultados confiables y de calidad, for-taleciendo la participación del perito en el nuevo sistema de justicia penal.


Las técnicas analíticas no destructivas son de gran importancia en el ámbito foren-

se ya que es posible realizar un re análisis de la muestra siempre que se tenga los cui-dados adecuados para preservar el indicio.

El SEM con el que cuenta el Laborato-rio de Química Forense del Instituto de

Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla cumple con los requisitos técnicos que exige la norma internacional ASTM 1588-10ε1 para el análisis de resi-duos de disparo de arma de fuego, ya que se detectaron partículas de 0.5 µm.

REFERENCIAS

• Fluctuaciones en las propiedades magnéti-cas y de magnetotransporte de superconduc-tores de alta temperatura crítica, Carlos Arturo Parra Vargas, Tesis de doctorado en ciencias físicas, Universidad Nacional de Colombia, Fe-brero 2010.• Current methods in forensic gunshot residue analysis, A.J. Schwoeble, David L. Exline, CRC Press 2000. Pp 21-22.• Manual práctico del Juicio Oral. Diana Cris-tal González Obregón. Tercera edición. 2014.


• El Nuevo Sistema de Justicia Penal Acusato-rio, desde la Perspectiva Constitucional. Prime-ra edición, México, 2011 , Consejo de la Judi-catura Federal Poder Judicial de la Federación.• INCA Feature Instructions manual.• JEOL instructions manual No. ISM6610/6610L-V/6610A/6610LA-11E. Agosto 2012.• Norma Internacional ASTM 1588-10 ϵ1.• Guide for Primer Gunshot Residue Analysis by Scanning Electron Microscopy/Energy Dis-persive X-Ray Spectrometry 11-29-11.


INTRODUCCIÓN

La presente investigación fue presentada por la M.C. Flo-rencia Bertoni en la 7ª Conferencia de la Academia de

Ciencias Forenses celebrada en la ciudad de Praga, República Checa el día 07 de septiembre de 2015, así como también la Doctora en Ciencias Dolores Bautista España presentó la mis-ma investigación en el 26 Simposio Internacional de Identifica-ción Humana llevada a cabo en la ciudad de Grapevine, Texas el días 11 de octubre de 2015, ambas profesionales son Peritos en Genética Forense del Laboratorio de Genética Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Es-tado de Puebla.

La determinación de un perfil génetico a través de ADN en especial mediante la técnica de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) constituye un procedimiento óptimo cuando necesitamos analizar muestras biológicas y realizar pruebas de identidad humana. La identificación individual es deseable

VALIDACIÓN PARÁMETROS DE AMPLIFICACIÓNLaboratorio de Genética Forense

M.C. Florencia Bertoni, M.C. Dolores Bautista España, M.C. Rosario Ca-rreón, I.B. Jorge Medel Sánchez, I.B. Roberto Quintana Vega, Tec. Gabriela Pérez Sánchez, Dra. Valerie Fuller.

en una serie de situaciones, incluyendo la determi-nación de los autores de delitos violentos como el asesinato y la violación, resolver la paternidad no es-tablecida, y la identificación de restos de personas desaparecidas o víctimas de desastres masivos.

Algunas muestras forenses que se remiten a los laboratorios de genética forense con el fin de

realizar el análisis, no son óptimas debido a la baja concentración de ADN y/o la fragmentación del mis-mo, debido a las condiciones ambientales adversas a que son sometidas. La implementación de técnicas más sensibles que logren obtener perfiles genéticos en muestras degradadas es fundamental en los la-boratorios modernos.

En la ciencia forense, el análisis por PCR también ha revolucionado la biología molecular por la ca-

pacidad de hacer millones de copias de una secuen-cia específica de ADN, lo cual ha permitido estudiar material poco abundante y aun degradado. Actual-mente se han desarrollado nuevos sistemas de PCR múltiple altamente sensibles y específicos sin embargo,


presentan un alto costo y requieren de una validación interna de acuerdo a las necesidades específicas de cada labora-torio. Los métodos más comunes para la eva-luación de los Kits implican el aumento en el número de ciclos en la reacción de PCR y la reducción en el volumen de la reacción (RV-PCR) La estrategia de reducción de volumen implica la re-ducción proporcional del volumen de la reacción de PCR, siendo el beneficio potencial, una reducción en el costo de los análisis.

Peritos en Genética Forense del Laboratorio de Genética Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.Asesora de ICITAP (International Criminal In-vestigation and Training Asistance Program), U.S. Department of Justice, Criminal Division.


El objetivo de este estudio fue determinar el grado en que los volúmenes de reacción de PCR pueden reducirse sin

comprometer la calidad de los resultados y si la reducción en el volumen puede satisfacer una morfología y proporciones en altura de los picos mientras se consume la menor cantidad de ADN molde. Abordando los efectos estocásticos, la re-producibilidad y los niveles de sensibilidad de los kits, obser-vando cómo influye el aumento en el número de ciclos y las ventajas y desventajas de usar ambas estrategias.


MATERIALES

Kit Globalfiler® PCR Amplification. Nú-mero de lote: 131100, Polímero Número de lote: 1311062, Buffer ánodo. Número de lote: 1311145, Buffer cátodo. Número de lote: 1312170, Arreglo capilar. Serie 07, Escalera alélica. Número de lote:1312019, Formamida. Número de lote: 1312045, ADN Control 007. Concentración 0.10 ng/ μl, Termociclador Geneamp® Pcr System 9700, Analizador genético ABI Prism 3500, GeneMapper ID-X v1.4 Sof-tware, Pipetas de 0.5-10 μl, Puntas con filtro,Tubos eppendorf.

MÉTODO

Se examinaron tres volúmenes de reac-ción dePCR:Full(25μl),V1 (10μL)

yV2(5μL), en cada volumen se redujo la cantidad de ADN molde proporcionalmen-

te al volumen de reacción de amplificación. El volumen de reacción completa(25μl) se incluyó a fin de establecer una línea base de rendimiento.Serie de diluciones de 60pg/μla0.40625pg/μl, por quin-tuplicado para dar un total de 40 muestras por volumen en-sayado (Tabla 1).

Tabla 1. Serie de diluciones y consentraciones de ADN utilizadas durante el ensayo.


Volumen de Amplificación: Para las muestras fue utilizado el volumen de reacción, siguiendo las cantidades y el protocolo designados en el manual de usuario del Kit GlobalfilerTM PCR, utilizando como volumen final 25µl, así como también se realizó una modificación al volumen final a 10µl y 5µl.

PARÁMETROS DE AMPLIFICACIÓN

Los ciclos utilizados en el termociclador utilizando GeneAmp System 9700 fueron de 28 y 29 ciclos (Tabla 2).

Tabla 2. Parámetros de Amplificación del Kit Globalfiler de Applied Biosystems

Todos los análisis para esta validación fueron realizados en condiciones ambientales del laboratorio.

ANALIZADOR GENÉTICO

Todas las muestras se procesaron realizando corridas electroforéticas

en el Analizador Genético 3500 y ana-lizadas con GeneMapper ID-X Software Versión 1.4.

Zona verde: Ambos alelos están presentes, Zona blanca: Representa perdida alélica, el valor de las unidades de fluorescen-cia relativas se representan en cada cuadro.Zona roja: No amplificación.Zona azul: Se etiquetaron más de dos alelos en el marcador.Zona amarilla: Ambos alelos presentes pero hay desbalance de picos.

Tabla.

Se realizó un consenso de las diluciones que tienen la concentración de 7.5pg/ul a 15pg/ul de ADN.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos por ensayo se muestran en la siguiente gráfica, cada color cuenta con un significado el cual se precisa al pie de la misma.

CONSENSO PARA MUESTRAS CON BAJO NIVEL DE AWDN


OBSERVACIÓN DE EVENTOS

A partir de los datos observados en la tabla de los ensayos realizados a 29 y 28 ciclos con distintos volúmenes y concentraciones se graficó:

a) La frecuencia de eventos tales como perdida alélica (blanco), desbalance de picos (amarillo), presencia de los dos alelos (verde), presencia de más de dos alelos (azul), ausencia de resultados (rojo).

b) Los eventos estocásticos:


RESULTADOS LINEALIDAD

Se obtuvo a partir del marcador TH01 las gráficas de linealidad para cada ensayo:





RESULTADOS EVENTOS ESTOCASTICOS

Se observó la frecuencia de eventos estocásticos como se muestra en las siguientes gráficas: a) 28 CICLOS b) 29 CICLOS


RESULTADOS CONSENSO

A partir de las concentraciones de 15pg/μL y 7.5pg/μL (con muy baja cantidad de ADN) a 29 ciclos y volumen de 5μL se obtuvo el siguiente perfil de consenso.


RESULTADOS COEFICIENTE DE VARIACION

Se realizó el Coeficiente de variación del analizador genético automatizado ABI PRISM 3500 life techno-logy. Obteniéndose el siguiente gráfico:

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS a. Se observaron los mismos eventos en los dos ensayos a 28 y 29 ciclos con los distintos volúme-nes y concentraciones: perdida alélica, desbalan-ce de picos heterocigotos, presencia de más de dos picos, ausencia de resultados y balance de picos heterocigotos. b. El umbral estocástico (Promedio estocástico RFU + 3 desviaciones estándar) en condicio-nes de 29 ciclos aumentó en el volumen de 5ul variando alrededor de 128RFU con relación al


volumen total a 25ul, y disminuyó alre-dedor de 17RFU en el volumen de 10ul.

c. La linealidad que se observa en el marcador TH01 en cada uno de los ex-perimentos a 29 ciclos nos indica que hay proporcionalidad entre los RFU´s y concentraciones observados.

d. No hay diferencias significativas en los resultados a 29 ciclos entre las con-diciones recomendadas por el fabrican-te de Global filer (25uL), y las condicio-nes experimentales (10 y 5uL).

e. En volumen de 5 uL se observaron resultados, aun en concentraciones por debajo de 7.5 pg/uL. Sin embargo la mayoría de estos presentaron perdida alélica.

f. Lo anterior lleva a una mayor cantidad de eventos estocásticos a volumen de 5 uL.

g. En concentraciones bajas (15 - 7.5 pg/uL) se recomienda realizar un consenso de tres o más repeticiones por muestra para obtener mayor confiabilidad en el perfil genético obte-nido.

h. Se observó un Coeficiente de Variación de 44 % en el arreglo capilar utilizado en la validación del kit Global filer.

CONCLUSIONES

Se observó mayor sensibilidad a 29 ciclos. Por lo tanto este sería el protocolo recomendable para el trabajo cotidiano

de muestras en el laboratorio de genética.

Siempre y cuando se reduzca proporcionalmente la concen-tración de ADN, los volúmenes de 5 ó 10ul se podrán usar obteniendo resultados similares a los obtenidos con las con-diciones recomendadas por el fabricante 25ul.

Una de las ventajas de reducir el volumen, es el uso de menor cantidad de ADN molde ya que en las condiciones recomen-dadas por el fabricante utilizaríamos 15ul de este ADN mol-


de, mientras que en volumen de 10ul usaríamos 6ul de ADN molde y en vo-lumen de 5ul únicamente 3ul de ADN molde, lo cual nos permite realizar un mayor número de ensayos con la mis-ma muestra sin agotarla.

Otra ventaja de la reducción de vo-lumen es la disminución del costo

por reacción, ya que si consideramos las condiciones del fabricante con 25ul, una reducción a 5ul nos permite obte-ner 5 reacciones por el mismo costo.Aun realizando un consenso de tres re-acciones no se utiliza la misma cantidad de recursos (mix ADN) en comparación con las condiciones del fabricante para una reacción.Los resultados obtenidos en la reduc-ción de volumen no se ven afectados en cuanto a los parámetros analizados; obteniendo resultados similares en los tres volúmenes ensayados.

Realizar estos experimentos con diluciones tan bajas como 3.25pg/ul-0.40625pg/ul no es recomendable en virtud de que no se aporta mayor información, en cambio arroja más datos estocásticos. Sobre todo en volumen de 5ul.

REFERENCIAS • Applied Biosystems - AmpFlSTRR Globalfiler TM PCR Amplification Kit User’s Guide, 2014 - Life Technologies Corporation.

• Butler JM, 2005, Forensic ADN Typing, Biology, Technology, and Ge-netics of STR Markers, Elsevier Academic Press, USA, Segunda Edición, 660 Páginas.

• Budowle Bruce, Eisenberg A.J., and van Daal A. - Validity of Low Copy Number Typing and Applications to Forensic Science - Croatian Medical Journal 2009 June; 50(3): 207–217.

• Fregeau C.J., Aubin R.A., Elliott J.C., Gill S.S., Fourney R.M. - Characteri-zation of human lymphoid cell lines GM9947 and GM9948 as intra- and interlaboratory reference standards for ADN typing. Genomics 1995;28: 184–97.

• Fregeau CJ, Bowen KL, Leclair B, Trudel I, Bishop L, Fourney RM. Amp-FlSTR® Profiler PlusTM Short Tandem Repeat ADN analysis of casework


samples, mixture samples and non-human ADN samples amplified un-der Reduced PCR Volume conditions (25 μL). Journal of Forensic Science 2003; 48(5):1–13.

• Gaines, M.L., Wojtkiewicz, P. W., Valentine, J.A., & Brown, C.L. - Redu-ced Volume PCR Amplification Reactions Using the AmpFlSTR® Profiler PlusTM Kit. - Journal of Forensic Science 2002, 47, 1224-1237.

• Gill P, Whitaker J, Flaxman C, Brown N, Buckleton J. - An investigation of the rigor of interpretation rules for STR’s derived from less than 100pg of ADN. - Forensic Science International 2000;112:17–40.

• M.W.Bessekri1, H. Cherbiti1, R Bucht2, V Fuller.2 1Department of Biology, Institute Nationale de Criminalistique et Criminologie, Gendar-merie Nationale of Algeria. 2US Department of Justice International Criminal Investigative Training Assistance Program, Algeria. “Consen-sus profiling: building confidence in low-template ADN casework speci-mens”. 2014 ISHI Conference, Phoenix, AZ. Sept 29-Oct 3, 2014.

• MW Bessekria, F Agsousa, S Lazreg,a , R Buchtb, V Fuller Department of Biology, Institute Nationale de Criminalistique et Criminologie, Gendar-merie Nationale of Algeria. US Department of Justice International Cri-minal Investigative Training Assistance Program, Algeria. “Comparative study on the effects of reduced PCR reaction volumes and increased cycle number, on the sensitivity and the stochastic threshold of the AmpFlSTR Identifiler® Plus kit.” Forensic Science International :Genetics Supple-ment Series 4(2013)306e-307e.

• Valerie Mattimore Fuller. “Accessibility and the Backlog: Rethinking ADN Capability and Capacity” in Forensic Magazine. Vicon Publi-shing: Amherst, New Hampshire. April / May 2011.

• A. Abdeli 1, S. Lazreg 1, K. Daho 1, M. Bes-sekri 1, H. Cherbiti 1, R. Bucht 2, V. Fuller 2 (Department of Biology, Institute Nationale de Criminalistique et Criminologie, Gendarmerie Nationale of Algeria and the 2US Department of Justice International Criminal Investigative Training Assistance Program, Algeria). A Sim-ple Double-Study to Simultaneously Deter-mine Six Major Validation Parameters within STR-based Criminal Forensic ADN Rrofiling. Presented at the 6th European Academy of Forensic Science Conference - EAFS 2012. The Hague University of Applied Sciences’ Graven-hage, Zuid-Holland, Netherlands. August 20-24, 2012.

• A. Abdeli, S. Lazreg, K. Daho, M. Bessekri, H. Cherbiti, R. Bucht, V. Fuller. Concurrent Internal Validation of Four Forensic STR ADN Profiling Kits Using a Single Genetic Analyzer. Co-pre-sented by the Department of Biology - Institute


Nationale de Criminalistique et Criminologie - Gendarmerie Nationale – Algeria, and the US Department of Justice - International Criminal Investigative Training Assistance Program – Algeria. AAFS 2012 Annual Meeting, Atlanta, GA. February 23rd, 2012.

• V. Fuller. An Untracked Quality Issue in Fo-rensic ADN Profiling: Consequences of Unmo-nitored Measurement Uncertainty in Electroki-netic Injection Performance in Capillary-Based Genetic Analyzers. 9th Annual Mid-Ameri-ca Forensic ADN Conference, Columbia, MO. April 5-7, 2011. .


INTRODUCCIÓN

La desaparición de personas es un fenómeno considerado como “La Ausencia de un individuo que integra un núcleo familiar del

cual se desconoce su paradero”, este cometido ha estado presente durante muchas generaciones y continua ocurriendo a nivel mundial, causando un gran sufrimiento a las familias, a las comunidades, so-ciedades y a toda la humanidad.

Actualmente en México se tienen estadísticas de las personas desa-parecidas de diversas fuentes institucionales, arrojando por ejemplo: las cifras de la SEGOB Secretaria de Gobernación. SECRETARIADO EJECUTIVO DEL SISTEMA NACIONAL DE SEGURIDAD PÚBLICA, con registro a partir de las fechas Enero 2014- octubre 2015, con un total de 26,670 personas de quienes no se sabe de su paradero, siendo 19,407 hombres y 7,263 mujeres.

PERSONAS DESAPARECIDASFENÓMENO QUE AFECTA A MILES DE FAMILIAS

Ingrid Espinosa Romero.


Gráfica1.PorcolaboracionsegúnlaSEGOB, fecha de consulta 5 de febrero 2016.

Las cifras presentan el total de registros de personas relacionadas con averiguaciones previas del fuero común que permanecen sin localizar al corte del 31 de octubre del 2015 (ver nota metodológica), distribui-das por entidad federativa.

FUENTE: SEGOB Secretaria de Gobernación. SECRETARIADO EJECUTIVO DEL SISTEMA NACIONAL DE SEGURIDAD PÚBLICA. http://secretariadoejecutivo.gob.mx/rnped/es-tadisticas-fuerocomun.php.


Gráfica 2. Por colaboracion según la FGE, SE-GOB, www.pgr.gob.mx/transparencia/paginas/per-sonasdesaparecidas según la PGR fecha de cosulta 4 de agosto 2015.

Gráfica3.PorcolaboracionsegúnlaFGE,SEGOB,www.pgr.gob.mx/transparen-cia/paginas/personasdesaparecidas según la PGR fecha de cosulta 4 de agosto 2015.

Para la fuente de información Estadística sobre personas desparecidas según la Procuraduría General de la Republica (P.G.R.), el resul-tado Estadístico es de 361 personas desaparecidas, con el conocimiento de que esta dependencia tiene competencia de asuntos del orden federal.


El Estado de Puebla en esta estadística ocupa el lugar vigé-simo tercero con un solo desaparecido, haciendo mención que en determinados casos la PGR atrae asuntos por su rele-vancia, y en el caso de los desaparecidos en las que atrajo la investigación, estas son las cifras que arroja.

CAUSAS MÁS FRECUENTES DE DESAPARICIÓN

DE PERSONAS

Tomando como base las declaraciones de los denunciantes ante el Ministerio Público, dentro de las causas de desa-

parición de personas que con mayor frecuencia se presentan se encuentran: • Abandono del hogar de manera voluntaria.- Se presenta en casos en que no se desea continuar viviendo en familia por malos tratos, incomprensión, abuso sexual por integrantes de la familia, problemas escolares, la independencia deseada por el individuo, entre otras.• Privación de la libertad.- Se presenta en los casos de se-cuestro, la privación de la vida (homicidio-feminicidio) con ausencia del cuerpo y la desaparición forzada.3, 4.

Del estudio Científico-Descriptivo- Comparativo, realizado en el de-

partamento de personas desaparecidas del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado, del to-tal de personas desaparecidas para la zona centro del Estado de Puebla 55% correspondieron al sexo femenino y al masculino 45%.

ESTADÍSTICAS PARA EL ESTA-DO DE PUEBLA


45% 55%

Gráfica1. Porcentaje de desaparecidos en la zona centro de Puebla según su género.

GRÁFICA DE PORCENTAJE SEGÚN GÉNERO

Masculino

Femenino


Con los datos aportados por los familiares de los desaparecidos se conforma el cuestionario antemortem (AM) para recolectar datos de personas desaparecidas y

se realiza la búsqueda con la ayuda de las siguientes herramientas:

• Expedientes postmortem.- que es la recopilación de la información fisonómi-ca, antropológica, dental y particularidades de un cadáver.

• Software Metamorfho.- que es un medio electrónico que permite ingresar el nombre de la persona desaparecida rastreando exclusivamente la identidad de personas civiles, personas delincuentes y decesos sin identidad.

MÉTODO DE BÚSQUEDA DE PERSONAS DESAPARECIDAS EN EL INSTITUTO DE CIENCIAS FORENSES


RESULTADOS

De las personas desaparecidas de Enero a Diciembre del año 2015 para

la zona centro, se ingresaron los nombres al sistema methamorfho (programa com-putarizado), logrando localizar a 91 perso-nas, de las cuales con identidad de civiles correspondieron a 31 del sexo masculino y 9 del sexo femenino, entendiendo por personas con identidad de civiles aque-llos que se encuentran vivos, no están in-volucrados en algun hecho delictuoso, y no están desaparecidos pues se sabe que están dentro de nuestra entidad o país; toda vez que con fechas actuales han hecho uso de documentos que solo este sistema expide y de acuerdo a las fechas que proporciona el familiar del desapare-cido (a), en cuyos casos se le informa al familiar que su desaparecido (a) solo está alejado de su núcleo familiar.

Por lo que respecta a las personas con detenciones recientes, el sistema arrojó el reporte de 6 personas detenidas de sexo mas-culino y ninguna del sexo femenino.

CONCLUSIONES

Con el presente trabajo se llega a la conclusión de crear un Centro Nacional de Información y Atención de Personas

en Calidad de Desaparecidas, que dentro de sus atribuciones se encuentre:• Concentrar los datos estadísticos de todos y cada uno de los Estados• Emitir estadísticas oficiales a nivel nacional• Recibir las peticiones de búsqueda de los familiares de las personas desaparecidas de forma directa o por conducto del Centro Estatal de Información de Personas en Calidad de Des-aparecidas.• Dar respuesta a las peticiones de colaboración de las diferentes Instituciones (CNDH, FEVIMTRA, CAPEA, Fiscalías y Procuradurías de los Estados, entre otras)• Concentrar la base de datos de cada Estado de la República Mexicana y dado el caso, de otros países, mediante la utilización


de un software en el que se almacene la información recabada mediante los cuestionarios AM y PM.• Recibir información de Instituciones en las que se sos-peche que la persona se encuentra en calidad de desconoci-da tales como Albergues, Hospitales, Asociaciones de Alco-hólicos y Drogadictos Anónimos, Casas de Asistencia, Asilos Públicos, Asociaciones de Neuróticos Anónimos, Centros de Protección a Víctimas, Centros de Reclusión, entre otros.• Recibir información de Instituciones en las que se en-cuentren cadáveres en calidad de desconocidos tales como: SEMEFO, Procuradurías, Fiscalías, Hospitales, entre otros.

Con lo anterior, se espera dar respuesta en menor tiempo a los familiares que buscan a personas desaparecidas, así como evi-

tarles mayores costos en su localización al no tener que andar pere-grinando de Institución a Institución, ni viajando de un Estado a otro. Lo que evitará no solo la revictimización sino que a la vez, permitirá localizar a las personas y reintegrarlas a su núcleo familiar en los ca-sos que estén vivas, y en los casos de fallecimiento terminar lo más pronto posible con la angustia e incertidumbre de los familiares me-diante la identificación del cadáver, para lo cual es necesario contar con servidores públicos comprometidos, capacitados y sensibiliza-dos ante este problema social que lamentablemente va en aumento.

REFERENCIAS

• SEGOB Secretaria de Gobernación. SECRETA-RIADO EJECUTIVO DEL SISTEMA NACIONAL DE SEGURIDAD PÚBLICA. http://secretaria-doejecutivo.gob.mx/rnped/estadisticas-fuero-comun.php. Última Modificación 30/Noviem-bre/2015.

• CICR COMITÉ INTERNACIONAL GENEVE. PERSONAS DESAPARECIDAS, ANÁLISIS FO-RENSE DE ADN E IDENTIFICACIÓN DE RESTOS HUMANOS. 2009.

• MORGAN, OLIVER. TIDBALL-BINZ, MORRIS. VAN ALPHEN, DANA. La Gestión de cadáveres en situaciones de desastre: Guía práctica para equipos de respuesta. Organización Panameri-cana de la Salud, 2006, 2009.


OBSERVANDO EL LUGAR

DE INTERVENCIÓN Lic. Erika Castillo Montiel, M.L. Luz María Reyna Carrillo Fabela.

El lugar de intervención o también llamado escena del crimen entre sus múltiples denominaciones (lugar de los hechos, lu-

gar del hallazgo, lugar de enlace, escena del delito, entre otros) se ha transformado a través del tiempo, adecuándose a la rea-lidad social imperante, pero en síntesis, contiene un sinnúmero de información indiciaria de gran valor dentro de la investiga-ción misma, que debe ser preservada, localizada, documenta-da por cualquiera de sus formas, embalada y analizada, para que permita la obtención de un resultado que aporte un valor significativo dentro de la investigación que se esté realizando. Como lo menciona la conocida frase “Los ojos no ven lo que el cerebro no conoce”, en la intervención a un lugar, si el investi-gador no observa y analiza la relación que tienen los indicios con el hecho, independientemente de la cantidad y variedad de indicios, nunca podrá considerarlos y los ignorará, aún se encuentren frente a sus ojos. Todo lo contrario, cuando el ex-perto forense observa el lugar de intervención, puede ubicar, documentar e interpretar dichos indicios, aumentando la posi-bilidad de que el trabajo de investigación sea exitoso, por eso resulta tan importante la Observación.

No son pocas las ocasiones en que los sujetos activos han recurrido a

innumerables recursos con tal de eludir su responsabilidad en la comisión de un hecho delictivo, alterando el lugar de intervención, ya sea colocando indicios en otro lugar; generando mayor canti-dad de supuestos indicios; colocando a las víctimas en una posición diferente a la original de la muerte; entre otras cir-cunstancias, no obstante, cuando el pe-rito investigador ha realizado un proceso efectivo de observación es capaz de de-tectar las inconsistencias.

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ANÁLISIS DE CASO FORENSE

Fecha de intervención: 15 de Septiembre de 2010.Lugar: Domicilio conocido.Tipo de hecho: Homicidio doloso.

Antecedentes del caso: Sujeto probable responsable de los hechos declara que se encontraba en compañía de la víc-

tima cuando ésta cae súbitamente a nivel del piso, descono-ciendo las razones, aludiendo algún problema de salud deriva-do de su edad, posteriormente, y debido a que la complexión física de la víctima superaba a la del sujeto activo, este último lo arrastra hasta la cama para tratar de brindarle los primeros auxilios.Testigos de los hechos.- Ninguno.

*Licenciada en Criminología, Criminalística y Técnicas Periciales, Supervi-sora del Departamento de Criminalística, Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.**Especialista en Medicina Legal, Directora General del Instituto de Cien-cias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.

INDICIOS LOCALIZADOS

· Esquirlas óseas sobre tórax del cadáver y sarape.· Manchas hemáticas por retrosalpicadura, y proyecciones de la herida en la pared.

DICTAMENES SOLICITADOS

· Criminalística· Fotografía· Genética Forense· Dactiloscopia· Química Forense

1.- El lugar donde refiere el probable responsable sucedieron los hechos se ubica en el área destinada al comedor (ver fotografía número 1) y la posición final tras el arrastre según la declaración (ver fotografía número 2).

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Fotografía 1

Fotografía 2

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Se puede advertir en la zona donde se menciona sufrió caída la víctima, la presencia de manchas por transferencia, observése que las mismas no guardan correspondencia con un mecanismo de producción por caída, en donde se espera en-contrar manchas por salpicadura e inclusive lago hemático además de transferencia y no única-mente transferencia que además se observa fue producida de manera manual y por tanto inten-cional (ver fotografía número 3).

Fotografía 4

Fotografía 5

Fotografía 3

2.- En las fotografías 4 y 5 obsérvese el patrón de las manchas hemáticas en zigzag y en la fotografía 6 en forma semicircular, lo que permite advertir inconsisten-cias en la declaración del probable responsable, debido a que en el lugar donde se menciona sucede la caída y posterior arrastre, el patrón de las manchas hemáticas no es unidireccional y uniforme, sino multidireccional, de menor amplitud que el tamaño del cuerpo y que fueron realizados con un textil de características dife-rentes al de las prendas en posesión de la víctima.

Fotografía 7

Fotografía 9

Fotografía 8

Fotografía 10

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3.- Obsérvese también la existencia de discontinuidad en el piso entre las man-chas hemáticas, lo que permite descartar un patrón de arrastre de un cuerpo (Foto-grafía 6, 7 y 8).

4.- En la zona de afectación (recámara) se observa patrón de manchas hemáticas producidas a gran velocidad por retrosal-picadura en la pared norte y oriente, así como en el techo (Fo-tografía 9 y 10), como las producidas por un mecanismo de contusión activa con un objeto romo y duro sobre la región anatómica involucrada (cráneo), colocando a este lugar como el punto donde se llevó a cabo el hecho.

Fotografía 6

5.- Es tan importante la observación que si se corroborará la hipótesis de caída, la manera de la muerte sería accidental pero de corroborarse la hipótesis de contusión directa en cráneo la manera de la muerte sería homicidio doloso.

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Fotografía 11

6.- A diferencia del caso anterior, póngase aten-ción en el patrón de mancha hemática de víc-tima lesionada por proyectil de arma de fuego en cráneo, el rastreo hemático que dejó el cuer-po al ser arrastrado (Fotografía 11).

ANÁLISIS DIFERENCIAL

1.- Un patrón de mancha genuino muestra continuidad en las líneas de arrastre a diferen-cia del caso anterior en donde al realizarse de forma manual e intencional las líneas de arras-tre no llevan un lógica secuencial (zig-zag).

2.- El patrón de arrastre genuino no presenta discontinui-dad a pesar de la irregularidad de la superficie, nótese en la fotografía 9 que a pesar de la diferencia de alturas el patrón no se interrumpe.

3.- Dentro del patrón de arrastre se aprecian áreas de mi-cro salpicadura que indican que es la propia zona de la le-sión la que va realizando dicho patrón en conjunción con la cinemática del arrastre.

4.- Dentro del arrastre por lo regular se aprecian patrones del textil o prenda que vestía la víctima mismos que van paralelos al resto del patrón.

5.- Dentro del arrastre se observan depósitos hemáticos de mayor abundancia provenientes de las zonas corpora-les sangrantes.

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CONCLUSIÓN

La observación constituye un paso fundamental dentro del análisis y procesamiento del lugar de intervención, que permitirá la elaboración de las hipótesis de la inves-

tigación de un probable hecho delictuoso sobre sólidos cimientos y preparará el te-rreno para continuar el procesamiento con éxito, como por ejemplo, buscar el objeto productor de la lesión o lesiones; del textil utilizado; tomar mediciones antropomé-tricas del cuerpo (tórax y pelvis) para correlacionar con las mediciones del ancho de las manchas hemáticas producidas por el supuesto arrastre; realizar el análisis de los patrones de manchas hemáticas, entre otros, que a la postre permita corroborar los principios criminalísticos (correspondencia, reconstrucción de hechos, de probabili-dad, de producción).

La observación es el primer paso del método científico aplicado a la criminalística de campo y dentro del procesamiento del lugar de intervención ocupa el segundo

paso, de ahí la importancia de hacer énfasis en este paso porque de él se desprende todo el análisis y todas las operaciones que se realicen en el lugar de intervención.

Tal y como ya se ha mostrado anteriormente cuando un perito procesador del lugar de intervención realiza una buena observación del lugar se reduce la posibilidad de

pasar desapercibidos los indicios que tiene al frente, como apuntaba el Dr. Rafael Mo-reno González, el éxito de la investigación es resultado de la apreciación inteligente del lugar bajo el escrutinio mental activo.

Nota: Caso verídico, se omitieron todos los datos personales.

Ubicación de la etapa de observación:

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