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““Separando organelos”Separando organelos”
introducción.introducción.►Christian de duve.Christian de duve.
AntecedentesAntecedentes
Fraccionamiento celular.Fraccionamiento celular.►Masa.Masa.►Densidad.Densidad.►Tamaño.Tamaño.
Hipótesis. Hipótesis.
►Postulado homogeneidad bioquímica.Postulado homogeneidad bioquímica.
►Postulado de única ubicación.Postulado de única ubicación.
1. fracción ligera mitocondrial.1. fracción ligera mitocondrial.2.identifico otra discreta fracción 2.identifico otra discreta fracción
subcelular.subcelular.
Experimento. Experimento.
Experimento.Experimento.
- Centrifugación baja velocidad: Separa el núcleo de la célula.
ExperimentoExperimento►Subdivision de extracto citoplasmaticoSubdivision de extracto citoplasmatico
- Fracción mitocondrial pesada. Fracción mitocondrial pesada. (citocromo oxidasa).(citocromo oxidasa).
- Fracción mitocondrial de luz. (fosfatasa Fracción mitocondrial de luz. (fosfatasa acida).acida).
- Fracción microsomal. (glucosa 6 Fracción microsomal. (glucosa 6 fosfatasa).fosfatasa).
ExperimentoExperimento►UricasaUricasa- Patrón mitocondrial de luzPatrón mitocondrial de luz
- Puede ser aislada en otra población Puede ser aislada en otra población subcelularsubcelular
ExperimentoExperimento►ComprobaciónComprobación
- Centrifugación de equilibrio de Centrifugación de equilibrio de gradiente de densidadgradiente de densidad
- Nº de diferentes gradientesNº de diferentes gradientes
ExperimentoExperimento►Separa la fracción mitocondrialSepara la fracción mitocondrial
►Realiza fraccionamientos Realiza fraccionamientos - Gradiente de sacarosaGradiente de sacarosa- Organelos separados en base de su Organelos separados en base de su
densidaddensidad
5.15.1
►5.25.2
Discusión. Discusión. ►Examinando el inventario de enzimas Examinando el inventario de enzimas
resultantes en fracción celular , resultantes en fracción celular , entrega datos sobre sus funciones.entrega datos sobre sus funciones.
►Descubrimiento de lisosoma y Descubrimiento de lisosoma y peroxisoma.peroxisoma.
►Entrega de pistas sobre la función de Entrega de pistas sobre la función de los organelos. los organelos.