Shigella Thực Hành

7/21/2019 Shigella Thc Hnh

1/22

I. HNH NH NHUM GRAM

Shigella c 4 nhm:

+ Shigella dysenteiae

+ Shigella !le"nei


2/22

+ Shigella #$ydii

+ Shigella s$nnei


3/22

II. %NG &'NH (H)& SINH H*A

$,i Gl-c$seh/ng

sinh h0i

Manit1$l

act$s1e

Ueas1e

Ind$le

23metyl

5 (itate 6i78ng

S.6ysentei1ae

+ 1 1 1 9 + 1 1 1

S.le"nei + + 1 1 1 + 1 1 1S.%$ydii + + 1 1 1 + 1 1 1S.S$nnei + + +

ch;m1 1 + 1 1 1

(h< th=ch: 9: S.6ysenteiae ty>e ? d@0ng t=nh cBn lCi Dm t=nh.HEnh Fnh:

Shigella ln men glucose khng sinh hi, ln men

Manitol ( tr Shigella dysenteriae khng ln menManitol), hu ht khng ln men Lactose.

Ln men

glucose Ln men

Mantiol hng

ln men

lactose hng

sinh !"S


4/22

hng sinh !"S #rease $m t%nh

&h'n ng indol thay *i

&h'n ng + Metyl dng t%nh


5/22

&h'n ng -& $m t%nh

&h'n ng citrate $m t%nh

III. M& S HNH NH HUN J(

&RKNG &LNG MI &RONG:


6/22

Shigella boydiitrn mi trng Hektoen Enteric Agar.

Shigella sonneitrn mi trng Hektoen Enteric Agar, 48 gi

37C

Shigella flexneritrn mi trng SS Agar.


7/22

Shigella flexneritrn mi trng XL Agar.

!Shigella sonneitrn mi trng XL Agar, 7" gi n#i$t %& 37C


8/22

Shigella sonneitrn mi trng XL agar, 48 gi 37C

Shigella sonneitrn mi trng C#oco'ate Agar, 48 gi 37C


9/22

Shigella sonnei trn mi trng (acconke), 7" gi 37C


10/22

Shigella sonneitrn mi trng (acconke), 48 gi 37C

Shigella sonneitrn mi trng (acconke), "4 gi 37C


11/22

Shigella boydiim*c trn mi trng +'oo agar -'ate /A/0.

IV. QUI TRNH NH DANH:

4.1 Nguyn tcShigella l, tPc h-Qn Gam 1 =ch th@Tc h$Fng 4"? mcm hiV- h=h$Wc X h= h/ng di 78ng h/ng tC$ #,$ tY h/ng lZn men lact$sesaccha$se[ lZn men de"t$se nh@ng h/ng sinh h0i h/ng sinh7ihy7$s-n!-a. 5h\t hi]n shigella the$ ng-yZn t^c t_ng sinh ` m/i t@ng

>hb h> >hDn l;> 7 nhDn dCng c\c 7Wc t@ng , hfng 7Xnh #ng nh-8mGam , c\c >hFn ng sinh ha.

4.2 Trang thit ba) phng php truyn thng:16ng c thiVt yV- : 7jn ckn -e cy 7a >eti1Giai 7$Cn t_ng sinh:

%]nh >hQm

(anh tyt$ne s$ya

1Giai 7$Cn t_ng sinh chon loc: (anh t_ng sinh GN

1Giai 7$Cn >hDn l;>: M/i t@ng Hp


12/22

q6

MA(

6e$"ych$late (itate Aga1Giai 7$Cn hfng 7Xnh #ng >h@0ng >h\> sinh ha , h-yVt thanh:

M/i t@ng h/ng chon loc nh@ &SA

Simm$n citate

Aginie deca#$"ylase

ysine deca#$"ylase

Uease

Mal$nate

MR

5

Salicine qyl$se

(ell$#i$se

And$nit$l

6-lcit$l

In$sit$l

1hfng 7Xnh #ng thY nghi]m h\ng h-yVt thanh: N@Tc m-ri sinh l=

H-yVt thanh

b) Phng php hin i: 5h@0ng >h\> 5(R:

%8 =ch 5(R


13/22

6-ng dXch 7]m 5(R

Mki

N@Tc ..

15h@0ng >h\> A late" aggl-ti-ati$n %8 =ch ell$le"

%8 =ch %actigen

4.3 i tng thc hin: (\c 7ri t@ng thPc hi]n gkm c:

1 (Y nhDn "ut nghi]m.1 v th-;t iZn "ut nghi]m.1 Giwng iZn #8 m/n i sinh.

4.4 An t!n "inh h#c:&$ng -\ tEnh 7Xnh danh i h-Qn Shigella cxn >hFi 7Fm #F$ an

t$,n sinh .1 5hBng "ut nghi]m >hFi 7Fm #F$ an t$,n sinh hoc c> ?. (h<

c\c yZ- cx- sa-:+ (0 s` ;t cht:z &{ 7ng -xn \$ th@ng , 7k dbng c\ nhDn ch| _n -rng , ngh

ng0i >hFi #r t= #Zn ng$,i >hBng "ut nghi]m.z %kn }a tay c Bi n@Tc gxn cYa a ,$.z ( >h@0ng ti]n c- h3a "} l sP cr 7i]n.z Bi }a m^t hQn c> t$ng h- Pc "ut nghi]m.z H8> 7Png th-rc , dng c s0 c- #an 7x- 7@c tang #X th=ch

h> , s~n s,ng ch$ sY dng.z ( h] thrng 7i]n 7xy 7{ , n 7Xnh tiV> 7t t$,n #8 h] thrng.

NZn c my >h\t 7i]n dP >hBng 7 h t c\c tang thiVt #X thiVt yV- nh@t{ m m\y lCnh

z NZn l^> 7Wt h] thrng 7un chiV- s\ng hQn c> t$ng t@`ng h> csP cr mt 7i]n 7 nghiZn c- iZn c th i h3i >hBng "ut nghi]m m8tc\ch an t$,n.

z NZn c >hBng t^m c Bi h$a sen t$ng h- Pc >hBng "utnghi]m 7 "Y dng t$ng t@ng h> hQn c>.

+ &hiVt #X:z&{ an t$,n sinh hoc c> ?

z Nki h> @Tt a-t$claez &{ m


14/22

+ SY dng tang thiVt #X #F$ h8:z MWc \$ ch$,ng h$Wc 7kng >hc "ut nghi]m t$ng s-rt -\ tEnh

l,m t$ng >hBng "ut nghi]m.z 2e$ g_ng tay t$ng tt cF -\ tEnh tiV> "hQm ha

cht c ng-y c0 gDy hCi. Sa- hi s} dng th\$ #3 g_ng tay , }a tay7h0i nhim. hi "Fy a sP cr >hFi "} l d-ng -y tEnh.

z &t cF c\c tha$ t\c cxn 7@c thPc hi]n the$ >h@0ng >h\> giFm tri

thi- i]c tC$ c\c giot hay d-ng h=.

4.$ %nh &h'(:Bnh phm phn: #]nh srt th@0ng h,n nZn cy >hDn t-xn l 14 hi cha dng

khng !"nh#nZn l;> lCi nV- Dm t=nh. &$ng ng8 78c d$ n8i 78c tr c{a ih-Qn cy >hDn ngay t t-xn 7x- c,ng sTm c,ng trt.

+ (\ch ly: z y >hDn t@0i trt nht l, bng c nhi- nhxy m\- ch$ ,$ lo

sCch: 8ng mi]ng n^> Wn chWt c g^n m\i chj$ dng l ly mu phnkhng !"#) . 5hDn t@0i >hFi 7@ccy t$ng Bng h/ng -\ ? gi sa- hily m-.

NV- cxn 7@a tTi >hBng "ut nghi]m "a thE ch$ >hDn ,$ d-ng dXch #F$-Fn:

Gly"cin ? mlNacl gN@Tc ct ml

z ( th dbng #/ng t_m nhbng ,$ >hDn bng nhxy m\- ch$ ,$m/i t@ng ch-yZn ch` (ay %lai dbng cW> tub$ %a t&m bng 'trng( tub$%a ary * +lair ki gYi 7un >hBng th= nghi]m. M/i t@ng ch-yZn ch`(ay %lai c th gi} m- >hDn t$ng h0n 4 gi. &-y nhiZn >hFi tiVnh,nh cy c,ng sTm c,ng trt. &$ng t@ng h> nghi ng #]nh nhDn #X thtF d$ i h-Qn tF c th ch$ t_m #/ng ly >hDn ,$ rng m/i t@ng

>e>t$n im 7 a t_ng sinh a ch-yZn ch` 7un >hBng th= nghi]m.z ( th ly m- >hDn #ng t_m #/ng -]t h;- m/n ki ch$ ,$

m/i t@ng ch-yZn ch` dbng cW> tub$ %a t&m bng ' trng ( tub$ %aary *+lair) 7 gYi ngDy 7un >hBng th= nghi]m.


15/22

z ( th h/ng dbng m/i t@ng ch-yZn ch` nV- t_m #/ng ly>hDn dbngt&m bng ' trng ly mu)7@c n-/i cy t$ng Bng >hhDn:

z ( th cy >h$ng >h< ,$ m/i t@ng GN.z (y ngay >hDn hay cy t m/i t@ng >h$ng >h< 7w cy >hDn,$ h8> thCch >hDn l;> : M(hay pM% , SS hay q6 hay Hp.

z (\c h8> thCch >hDn l;> >hFi 7@c { 1( t$ng t{ m.z Sa- ?4 gi chon h


16/22

%@Tc : 2em { ` nhi]t 78 $( t$ng Bng 1?4gi.

?. (hon h-Qn lCc nghi ng l, Shigella

-an s\t h-Qn lCc:+ &$ng m/i t@ng cy SS: he

h/ng lZn men lact$se t S. s$nnei lZn men ch;m ng,y

h/ng sY dng nitat h/ng sinh H?S


17/22

c 6Pa ,$ t=nh cht h\ng ng-yZn

5hFn ng

NhmMannit$l

Knithine

deca#$"ylase

S. dysenteiae A 1 1

S. !le"ne % + 1

S. #$ydii ( + 1

S. s$nnei 6 + +

-y tEnh tiVn h,nh:

0iai n 1: c nh hig566a "&&

(\c thY nghi]m:

&Zn m/i t@ng n-/i cy M( q6 chon hhFn ng $"ydase 7 "\c 7Xnh ch=nh "\c h


18/22

.I.A l, m/i t@ng 7Wc 7@c 7i- chV the$ th nghiZng sD- , ccht ch thX m,- l, Red 5hen$l.

a/ ph'n (ng 0*" h1a g2c g34c0!, 56 3ac70!,.

Vt -F: Shigella s>> ch lZn men gl-c$se h/ng lZn men lact$se.5hxn sD- thCch #X acid ha c m,- ,ng >hxn nghiZng #X im hac m,- 73.

GiFi th=ch:

%an 7x- i h-Qn lZn men gl-c$se acid ha hai >hxn nghiZng ,sD- sa- E >hxn nghiZng i h-Qn moc nhanh 7w im ha sP #iVnd@ng >e>t$n , thFi a NH.

8/ ph'n (ng !"nh H-9

i h-Qn th{y >hDn S$di-m thi$s-l!ate tC$ th,nh h= H?S h= n,y>hFn ng

Ti s^t tC$ s^t s-l!ate ha tX m,- 7en. Shigella s>> h/ng c>hFn ng n,y.

B$c : ph'n (ng &AD ;&h,n+3 A3an"n, D,am"na!,/

5hFn ng n,y nhm >hDn #i]t >$te-s s>> Ti shigella s>> dPa tZnng-yZn t^c men 6eaminase hY amin c{a amin$ acid

>henylalanine th,nh m8t et$ acid cht n,y Vt h> Ti i$n s^tt$ng th-rc thY eic chl$ide 7 ch$ a m,- "anh l\ cDy.

Men n,y 7@c sFn sinh #`i >$te-s s>> nh@ng shigella s>> thEh/ng.

B$c


19/22

%i]n l-;n: shigella s>> h/ng c men -ease nZn ch$ >hFn ng Dmt=nh

B$c >: 7h? ngh"m kh' n@ng d" ng

Ng-yZn l=: nh}ng i h-Qn c l/ng chh\t hi]n#ng c\ch n-/i cy ,$ m/i t@ng thCch mm hi choc -e cy ci h-Qn th,nh m8t Cch thfng gi}a rng

(y 7Dm sD- i sinh ;t ,$ m/i t@ng thCch mm aga.

+ i sinh ;t di 78ng s l,m m/i t@ng 7c+ >h\t tin lan a h3i Vt cy.

+ i sinh ;t h/ng di 78ng s >h\t tin -anh

+ 7@ng cy m/i t@ng h/ng #X 7c.


20/22

0iai n 2: c nh cc 6!i hig5666a.

S0 7k 7Xnh danh c\c l$,i Shigella

4. &hY nghi]m Ti h\ng h-yVt thanh

&hPc hi]n tY nghi]m h\ng h-yVt thanh #ng h-yVt thanh 7a gi\ A %

( 6 t c\c dBng 7@c n-/i cy tZn m/i t@ng thCch h/ng chon loc.

a 5h@0ng >h\> ng@ng Vt tZn >hiVn =nh:

(\c #@Tc tiVn h,nh:

1Nh3 m8t giot h\ng h-yVt thanh lZn >hiVn =nh.

16bng -e cy ly ?1 h


21/22

1-an s\tnV- c ng@ng Vt "Fy a thE >hFn ng d@0ng t=nh

Nhm h-yVt thanh &Zn l$Ci i h-Qn Shigella

AA? Sh.dysenteiae

% Sh.!le"nei

((?( Sh.#$ydii

6 Sh.s$nnei

,m >hFn ng ng@ng Vt tZn >hiVn =nh Ti c\c h\ng h-yVt thanh

h\ng K c{a c\c nhm A % ( 6. &iVn h,nh c\c 7ri chiV- Dm t=nh tZnn@Tc m-ri sinh l.

+ NV- ng@ng Vt Ti h\ng h-yVt thanh nhm A thE Vt l-;n l, S.6ysenteiae

+ NV- ng@ng Vt Ti h\ng h-yVt thanh nhm % thE Vt l-;n l, S.!le"nei.

+ NV- ng@ng Vt Ti h\ng h-yVt thanh nhm ( thE Vt l-;n l, S.

#$yii.+ NV- ng@ng Vt Ti h\ng h-yVt thanh nhm 6 thE Vt l-;n l, S.

s$nnei.

@- :

NV- m8t grc i h-Qn ch$ >hFn ng sinh ha 7@c nghi ng l,Shigella nh@ng h/ng ch$ >hFn ng d@0ng t=nh Ti #t c l$Cih-yVt thanh ng@ng Vt n,$ tZn.Ng-yZn nhDn l, d$ m8t srShigella tC$ th,nh h\ng ng-yZn # mWt h\ng ng-yZn c thl,m chZ mt h\ng ng-yZn K , l,m ch$ >hFn ng ng@ng Vth/ng din a. E thV hi h/ng c #i- hi]n ng@ng Vt cxn thPchi]n i]c 7-n s/i dXch i h-Qn t$ng h$Fng >hhFn ngh-yVt thanh ng@ng Dm t=nh ri h-yVt thanh ng@ng Vt nhmshigella sa- hi h-yn toc i h-Qn 7@c 7-n nng. &a ly h-yntoc i h-Qn ch@a 7-n l,m >hFn ng h-yVt thanh ng@ng Vt


22/22

Salm$nella E c ,i grc Sam$nella h/ng sinh H?S , h/ng di78ng.

M8t sr ch{ng shigella h/ng ng@ng Vt Ti c\c h\ng h-yVt thanh

t@0ng ng d$ c h\ng ng-yZn che >h{ h\ng ng-yZn K. NV-nghi ng c h\ng ng-yZn thE 7-n h-yn dXch i h-Qn hBat$ng n@Tc m-rn sinh l $( t$ng ? >hhFnng.

C&hng php &ER:

v th-;t 5(R dbng >h\t hi]n shigella 7@c tiVn h,nh tZn cW> mki SHIGh-Vch 7Ci ch$ tEnh tP ?#> tZn >lasmid "Dm nhim 7Wc hi]- ch$

Shigella , cW> mki S h-Vch 7Ci ch$ tEnh tP c =ch th@Tc #>nm t$ng bng #F$ tkn cba S RNA hi]n di]n t$ng moi l$,i i h-Qn.

S$ Ti >h@0ng >h\> n-/i cy t-yn thrng >h@0ng >h\> n,y ch$ hi]--F ch=nh "\c , hay h0n ` ch| n >h\t hi]n nhi- i h-Qn gDy #]nhh0n , trn t =t thi gian.RiZng 7ri Ti Shigella thE ch$ >hu> >h\t hi]nshigella ` mc (U?g m- sa- ?4h t_ng sinhch$ Vt -F sa-?4h.

H&

Documents

Shigella Thực Hành