Síntesis de Colágeno y Elasticidad de la Piel - … · la síntesis de las cadenas polipeptídicas. Una vez que los polipéptidos pasan por el retículo endoplasmático rugoso de

14/Cosméticos & Tecnología Latinoamérica www.cosmeticsonline.la Vol. 1, marzo-abril 2010

Este artículo relata el estudio de la correlación entre la síntesis de colágeno y la elasticidad de la piel, utilizando las técnicas de espectroscopía de fl uorescencia y cutometría. Los resultados indican un aumento signifi cativo en la síntesis de colágeno y la elasticidad de la piel (p<0,05, prueba t de Student, con un intervalo de confi anza de 95%) después del tratamiento con productos cosméticos evaluados.

Este artigo se reporta ao estudo de correlação entre a síntese de colágeno e a elasticidade da pele, utilizando-se as técnicas de espectroscopia de fl uorescência e cutometria. Os resultados indicaram aumento signifi cativo da síntese de colágeno e da elasticidade da pele (p<0,05, teste t-Student, com IC 95%) após tratamento com produtos cosméticos avaliados.

This article reports the study of correlation between the synthesis of collagen in skin elasticity, using the techniques of fl uorescence spectroscopy and cutometria. The results indicated a signifi cant increase in collagen synthesis and skin elasticity (p<0.05, Student t test, with 95% confi dence interval) after treatment with cosmetic products evaluated.

a bibliografía actual señala que el aumento de la síntesis del colágeno

puede mejorar la elasticidad de la piel. De esta manera, este estudio tiene como obje-tivo correlacionar la síntesis de colágeno con la elasticidad, utilizando las técnicas in vivo de espectroscopia de fl uorescencia y cutometría.

La biosíntesis del colágeno se inicia en el retículo endoplasmático rugoso, con la síntesis de las cadenas polipeptídicas. Una vez que los polipéptidos pasan por el retículo endoplasmático rugoso de los fi broblastos que los sintetizarán, los resi-duos de prolina y lisina son hidroxilados y glicosilados, siguiéndose la conforma-ción de los polipéptidos en la forma de triple hélice, originando la molécula del procolágeno. Estas moléculas pasan en-tonces por el aparato de Golgi, donde son empacadas en gránulos secretorios y se-cretadas hacia el espacio extracelular en el tejido conectivo. Así es excretado, el pro colágeno, debido a la acción de enzimas extracelulares, sufre la fragmentación de los dominios en el helicoidal C e N-termi-nales, lo que provoca la formación de la molécula del colágeno. Las moléculas de colágeno espontáneamente se organizan en fibrillas. Finalmente, después de la acción de la enzima extracelular lisil-

oxidasa, las fibrillas espontáneamente forman las ligaciones cruzadas.1

Las ligaciones cruzadas intermo-leculares son esenciales para proveer estabilidad mecánica a las estructuras formadas con colágeno, siendo que su confi guración se ve afectada por el tipo de tejido en que está presente, modifi cándose conforme la funcionalidad específi ca del tejido en que se localice.

La principal estructura presente en la piel es la ligación cruzada estable his-tidino-hidroxilisinonor-leucina (HHL), derivada de la ligación entre los grupos alisina, hidroxilisina e histidina del colá-geno tipo I (el más abundante en la piel, con masa molecular de aproximadamen-te 285 kD, diámetro 14 Å y longitud de 3000 Å).2

Entre las substancias endógenas de la piel que fl uorecen después de su ex-citación (fl uoróforos) están: el NADH, el colágeno, la elastina, los aminoácidos aromáticos (triptófano y tirosina), las porfi rinas y la FAD, cuyos espectros ya fueron caracterizados in vitro.2

En la piel es posible encontrar dos picos máximos de excitación, un en 295 nm, originado del estrato córneo y de la epidermis viable, y atribuido a la cadena lateral aromática del aminoácido triptófa-

no presente en las estructuras proteicas, y otro en 340 nm, originado de la dermis y atribuido a las ligaciones cruzadas de co-lágeno tipo I,3 que presentan fl uorescencia debido a los residuos del aminoácido histidina.

Según los estudios anteriormente publicados,2 la concentración de HHL aumenta con el envejecimiento intrínse-co, provocando, en última instancia, la reducción de la elasticidad de la piel debi-do al aumento en el número de ligaciones cruzadas (enrojecimiento estructural). De esta forma, la intensidad de la señal en el espectro de excitación a 340 nm disminuye.

Y la intensidad de la señal del triptó-fano en el espectro de excitación a 295 nm está fuertemente relacionada a la pro-liferación celular. Conforme la piel en-vejece intrínsecamente, la proliferación epidérmica disminuye, disminuyendo la intensidad de la señal a 295 nm en el espectro de excitación.4

Se observa, en la piel no expuesta al envejecimiento extrínseco (como el foto envejecimiento), alteraciones del orden de 10 a 20% en las señales del triptófano y del colágeno cada diez años de enveje-cimiento intrínseco.5

Considerando el corto intervalo de tiempo del estudio y estando las áreas de la piel evaluada, protegidas de la acción de la radiación ultravioleta, causante del fo-toenvejecimiento, se puede considerar la intensidad de la señal del triptófano como una referencia interna, prácticamente constante durante el período del estudio. De esta forma, cualquier modifi cación en el índice de síntesis de colágeno puede ser supervisada mediante la relación entre las intensidades en 340 nm (ligación cruzada de colágeno) y 295 nm (triptófano) en el espectro de excitación.

Síntesis de Colágeno y Elasticidad de la Piel

Daniela Brotto Lopes Terci, Viviane C. Albarici, Maria Fernanda Camargo, Adriano S. Pinheiro, Douglas Terci, Kosmoscience Ciência e Tecnologia Cosmética Ltda., Valinhos SP, Brasil.Valeria Longo, Elson LongoUniversidad Federal de São Carlos, São Carlos SP, Brasil

L

CTLA_092_Sintese.indd 14CTLA_092_Sintese.indd 14 5/3/2010 15:30:545/3/2010 15:30:54

www.cosmeticsonline.la Cosméticos & Tecnología Latinoamérica/15 Vol. 1, marzo-abril 2010

El aumento de la relación entre las intensidades I340/I295 refl e-ja, por lo tanto, el aumento en el número de ligaciones cruzadas de colágeno, consecuencia del aumento de la síntesis de esta molécula.

La espectroscopía de fl uorescencia fue utilizada, en este estudio, como una técnica moderna para caracterización in vivo de la síntesis de colágeno en la piel.

La Figura 1 ilustra el funcionamiento de la metodología. El espectro generado por una fuente de luz continua (arco de xenón) pasa por un monocromador de doble-grada, con el fi n de obtener un barrido de longitudes de onda de 260 a 360 nm, direccionado a la piel mediante el brazo de una sonda de fi bra óptica bifurcada.

La radiación excitante es absorbida por los cromó-foros endógenos de la piel (máximo de absorción a 295 nm para triptófano y 340 nm para las ligaciones cruza-das de colágeno), y la fl uorescencia resultante (máximos en 360 nm para triptófano y 400 nm para las ligaciones cruzadas de colágeno) es captada nuevamente por la sonda. La radiación fl uorescente captada pasa por un monocromador fi jado a 380 nm (entre los niveles máximos de emisión del triptófano y de las ligaciones cruzadas de colágeno) y es detectado por medio de un tubo fotomultiplicador.

Como resultado, es obtenido un espectro de excitación, que es fi ltrado en función de la longitud de onda promedio de máxi-ma emisión para triptófano/ligaciones cruzadas de colágeno, reduciendo la interferencia de la matriz (piel).

Para determinar la elasticidad de la piel, caracterizada como una propiedad mecánica, varios métodos pueden ser empleados. La mayoría de los métodos usados se fundamentan en la relación estrés-tensión: la piel es sometida a una fuerza (estrés) y la de-formación resultante (tensión) es medida. Una amplia revisión, realizada por Piërard et al. e Rodrigues,6,7 indicó que las técnicas más utilizadas en estos estudios son aquellas fundamentadas en fenómenos de tensión, indentación, succión y torsión. Las técnicas fundamentadas en succión son ampliamente usadas, ya que las condiciones límites de la aplicación de los métodos de succión están claramente defi nidas y, además, el vacío es aplicado vertical y paralelamente sobre la superfi cie de la piel.

El Cutometer MPA 580 (Courage-Khazaka, Colonia, Alemania), equipo fundamentado en el método de succión, es muy utilizado para medidas in vivo en la química cosmética. Bajo condiciones experimentales controladas de temperatura y humedad, es posi-ble determinar varios parámetros que engloban las propiedades elásticas, viscosas y plásticas de la piel. El análisis de estos pa-rámetros puede proporcionar subsidios para la evaluación de la efi cacia de productos cosméticos. Por ejemplo, es posible evaluar la elasticidad de la piel mediante la relación entre los valores de deformación de ésta en milímetros, obtenida durante los procesos de relajamiento (Ur) y el estiramiento (Ue), elasticidad = Ur/Ue, conforme ilustra la Figura 2.

MetodologíaAspectos éticosEl estudio fue planeado y conducido según las determinaciones de la Resolución Brasileña nº 196/96, del Consejo Nacional de Salud, sobre Directrices y Normas Reglamentarias de Investigación que Involucra a Seres Humanos.

Selección de las voluntarias Fueron seleccionadas, a partir del banco de datos de voluntarias de Kosmoscience, 15 voluntarias en conformidad con los crite-rios de inclusión y exclusión adoptados para el estudio:

Inclusión: Rango de edades: 18 a 45 años Sexo: femenino Fototipos: II o III, según clasifi cación de

Fitzpatrick Lipodistrofi a ginoide grados I o II, según escala

Nurnberger-Muller Concordancia en no alterar hábitos ni

medicamentos durante el estudio Concordancia en suspender cualquier otro

tratamiento estético durante el estudioExclusión:Estar haciendo uso de drogas inmunosupresoras Exposición al sol o bronceado artifi cial durante el

período del estudio Presencia de dermatosis infl amatorias activas o

lesiones névicas en los lugares de estudio (muslo y glúteos)

Las voluntarias participantes fueron debidamente orientadas por el investigador responsable sobre los objetivos y métodos del estudio, y fi rmaron un Término de Libre Consentimiento.

Figura 1. Ilustración del mecanismo de la espectroscopía de fl uorescencia aplicada a la evaluación de cromóforos de la piel

M1 e M2 = monocromadores de doble-gradaTry = triptófanoLCC = ligaciones cruzadas de colágenoexc = excitaciónen = emisiónTFM = detector tipo tubo fotomultiplicador

Figura 2. Ilustración de la gráfi ca de deformación de la piel en función del tiempo obtenido mediante la técnica de cutometría. La elasticidad es defi nida como la relación Ur/Ue

Región de estiraminetoSucción a presión constante

Def

orm

ació

n de

la p

iel (

mm

) Región de relajamientoPresión = cero

Ue

Ur



Preparación del panelLas voluntarias fueron instruidas a suspender el uso de todo tipo de cosméticos y tratamientos estéticos en los lugares de prueba (glúteos y muslos) 48 horas antes del inicio del estudio y, durante todo el período del estudio, a utilizar solamente los productos proporcionados por el laboratorio, dos veces al día (por la mañana y por la noche).

Las voluntarias permanecieron en sala climatizada a 22±2°C y 55±5% UR, en posición de decúbito ventral, con biquini, durante 20 minutos. Previamente fueron obtenidas las medidas espectrofl uorimétricas y cuto-métricas.

Determinación de la síntesis de colágeno- Equipo: fue utilizado el espectrofl uorímetro Fluorolog-

Jobin Yvan, Modelo FL3-12, equipado con sonda de fi bra óptica bifurcada de 6 mm de diámetro.

- Operatividad: para cada tiempo de evaluación, inicial y después de 60 días de tratamiento, fue obtenido, para cada pierna, 1 espectro promedio de excitación en la faja de 260 a 360 nm y emisión en 380 nm. Cada espectro promedio representativo fue obtenido mediante seis lecturas en cada pierna, posicionando la sonda en contacto leve sobre la piel, entre la región glútea alta y el muslo posterior mediano, como está indicado en la Figura 3.

- Análisis de los datos: para cada voluntaria fue obtenido un valor promedio de intensidad de excitación para el triptófano a 295 nm (I295) y para las ligaciones cruzadas de colágeno tipo I plausibles de digestión por pepsina a 340 nm (I340).

Fue calculada la relación I340/I295 en cada tiempo de evalua-ción, denominada SCti,j (i = 0 ó 60 días y j = producto placebo, p, o activo, a) siendo que el aumento en la relación entre las intensidades evidencia el aumento de la síntesis de colágeno en la piel, ya que la intensidad de emisión del triptófano en la piel es prácticamente constante en las condiciones del estudio. El efecto de aumento en la síntesis de colágeno en la piel, evaluado mediante el método de la espectroscopia de fl uorescencia, fue denominado SC%,j y calculado según la Ecuación 1, para j = producto activo o placebo.

- Análisis estadísticos: fueron realizados con la utilización del software GraphPad Prism 4.03 (GraphPad Software, San Diego, CA, EE.UU.). El comparativo entre los estados iniciales para cada pierna/producto fue realizado utilizando los valores iniciales de síntesis de colágeno (SC = I340/I295) con el uso del método de prueba t-Student, pareado, bimodal, con intervalo de confi anza de 95%, aplicado a Et0,a versus Et0,p. El comparativo entre el estado inicial y el fi nal, para cada producto, también fue realizado con la utilización del método del prueba t-Student, pareado, bimodal, con intervalo de confi anza de 95%, aplicado a los valores de SCt0,x versus SCt60,x, donde x = activo o placebo.

El comparativo entre los productos activos y el placebo fue realizado con el uso del mismo método estadístico, sin embargo aplicado a las relaciones calculadas entre los valores fi nales e iniciales por voluntaria: (SCt60/SCt0)a versus (SCt60/SCt0)p.

Determinación de la elasticidad de la piel- Equipo: fue utilizado o equipo Cutometer MPA 580 (nu-

mero de serie 22050696). - Operatividad: la elasticidad promedio representativa fue

obtenida mediante seis lecturas en cada pierna, posicionando la sonda en contacto leve sobre la piel, entre la región glútea alta y el muslo posterior mediano, como está indicado en la Figura 3.

- Análisis de los datos: los datos fueron recolectados y analizados mediante el software del equipo, MPA for Windows NT/XP, obteniéndose el parámetro de elasticidad a partir de la curva de deformación de la piel en función del tiempo (a presión constante). La elasticidad de la piel fue determinada mediante la relación entre los valores de deformación de la piel en milímetros, obtenida durante los procesos de relajamiento (Ur) y el estira-miento (Ue), elasticidad = Ur/Ue, conforme ilustra la Figura 2.

El efecto de aumento de la elasticidad de la piel, evaluado mediante el método de la cutometría, fue denominado E%,j e cal-culado según la Ecuación 2, para j = producto activo o placebo:

- Análisis estadísticos: fueron realizados utilizando el soft-ware GraphPad Prism 4.03 (GraphPad Software, San Diego, CA, EE.UU.). El comparativo entre los estados iniciales para cada pierna/producto fue realizado con el uso de los valores iniciales de elasticidad (Ur/Ue), utilizando el método del prueba t-Student, pareado, bimodal, con intervalo de confi anza de 95%, aplicado a Et0,a versus Et0,p. El comparativo entre el estado inicial y el fi nal, para cada producto también fue realizado con la utilización del método del prueba t-Student, pareado, bimodal, con intervalo de confi anza de 95%, aplicado a los valores de Et0,x versus Et60,x, donde x = activo o placebo. El comparativo entre los productos activos y el placebo fue realizado utilizando el mismo método estadístico, sin embargo aplicado a las relaciones calculadas entre los valores fi nales e iniciales por voluntaria:

(Et60/Et0)a versus (Et60/Et0)p

Ecuación 1. Cálculo del aumento de porcentaje en la síntesis de colágeno en la piel con base en los datos obtenidos por espectroscopia de fl uorescencia

SC%,j = 100*(SCt60,j – SCt0,j)

SCt0,j

Ecuación 2. Cálculo del aumento de porcentaje de la elasticidad de la piel con base en los datos obtenidos mediante cutometría

E%,j = 100*( Ur/Ue t60,j – Ur/Ue t0,j)

Ur/Ue t0,j

Figura 3. Ilustración de las ubicaciones de medidas, al centro de los glúteos y al lado del muslo, a la altura del trocanter



Resultados y DiscusiónLos datos obtenidos en la determinación de la síntesis de

colágeno para las 15 voluntarias participantes del estudio están relacionados en la Tabla 1.

Inicialmente, fue realizado el análisis estadístico de las medidas basales (iniciales), con el objetivo de identifi car una diferencia signifi cativa entre las regiones glúteas (izquierda y derecha) que pudiese infl uenciar los resultados del estudio. Los resultados del análisis están descritos en la Tabla 2 y, según estos, no hubo diferencia signifi cativa (p>0,05) entre los lados derecho e izquierdo de las regiones glúteas en términos de la relación basal entre las intensidades de fl uorescencia de las ligaciones cruzadas de colágeno y del triptófano en la piel. Esto indica que la síntesis de colágeno basal en la región glútea de aplicación del producto activo (SCt0,a) era igual a la síntesis de colágeno basal en la región glútea de aplicación del producto placebo (SCt0,p).

La Gráfi ca 1 ilustra los resultados en términos del efecto de aumento de porcentaje de la síntesis de colágeno en la piel, SC%, calculado según la Ecuación 1 descrita anteriormente.

Los datos obtenidos fueron estadísticamente evaluados, comparándose los valores después de 60 días de tratamiento

a los valores basales, buscando identifi car si hubo efecto en el aumento de la síntesis de colágeno en la piel comparándose los resultados entre el producto activo y el placebo.

Los resultados del análisis estadístico están relacionados en la Tabla 3, y, según estos, después de 60 días de uso de los productos, considerando los resultados promedio de las 15 voluntarias participantes, el valor promedio para la síntesis de colágeno fue signifi cativamente superior al basal, tanto para el producto activo como para el producto placebo. Este resultado indicó que ambos productos presentaron efecto signifi cativo en el aumento de la síntesis de colágeno en la piel. Mientras tanto, según los resultados del análisis estadístico comparativo entre el producto activo e el placebo, el producto activo proporcionó, después de 60 días de tratamiento, un aumento de porcentaje de la síntesis de colágeno en la piel signifi cativamente superior al del producto placebo. El producto activo fue aproximadamente 6,5 veces más efi caz que o producto placebo en el aumento de porcentaje de la síntesis de colágeno en la piel.

De acuerdo con los resultados, el producto activo proporcionó un aumento promedio de la síntesis de colágeno en la piel de 5,9% y el placebo de 0,9%.

Los datos obtenidos para la determinación de la elasticidad de la piel están relacionados en la Tabla 4.

Inicialmente, fue realizado el análisis estadístico de las me-didas basales, buscando identifi car una diferencia signifi cativa entre las regiones glúteas (izquierda y derecha) que pudiese infl uenciar los resultados del estudio. Los resultados del análisis están descritos en la Tabla 5 y, según estos, no hubo diferencia signifi cativa (p>0,05) entre las regiones glúteas en términos de

Producto placebo Producto activo Voluntaria t0 t60 t60/t0 SC% t0 t60 t60/t0 SC% 1 1,676 1,718 1,025 2,51 1,772 1,923 1,085 8,52 2 1,756 1,767 1,006 0,63 1,714 1,854 1,082 8,17 3 1,765 1,77 1,003 0,28 1,675 1,734 1,035 3,52 4 1,673 1,71 1,022 2,21 1,726 1,86 1,078 7,76 5 1,775 1,793 1,010 1,01 1,639 1,769 1,079 7,93 6 1,79 1,81 1,011 1,12 1,759 1,79 1,018 1,76 7 1,607 1,63 1,014 1,43 1,837 1,89 1,029 2,89 8 1,721 1,73 1,005 0,52 1,696 1,85 1,091 9,08 9 1,81 1,83 1,011 1,10 1,659 1,831 1,104 10,37 10 1,797 1,81 1,007 0,72 1,628 1,84 1,130 13,02 11 1,726 1,74 1,008 0,81 1,759 1,79 1,018 1,76 12 1,684 1,691 1,004 0,42 1,75 1,82 1,040 4,00 13 1,851 1,86 1,005 0,49 1,754 1,861 1,061 6,10 14 1,771 1,772 1,001 0,06 1,734 1,754 1,012 1,15 15 1,71 1,72 1,006 0,58 1,723 1,76 1,021 2,15

Tabla 1. Valores de la síntesis de colágeno, SC = I340/I295.

Paired t test P value 0,4957Are means signif. different? (P < 0.05) NoOne- or two-tailed P value? Two-tailedt, DF t=0.6995 df=14Number of pairs 15Mean of differences 0,0191395% confi dence interval -0.03954 to 0.07781R squared 0,03377Correlation coeffi cient (r) -0,5774P Value (one tailed) 0,0121

Tabla 2. Análisis estadístico de la síntesis de colágeno, SC = I340/I295; SCt,0a versus SCt0,p

Table Analyzed Ct0,,p vs. Ct60,p Ct0,,a vs. Ct60,a (Ct60/Ct0)p vs. (Ct60/Ct0)aPaired t test P value P<0.0001 P<0.0001 P<0.0001Are means signif. different? (P < 0.05) Yes Yes YesOne- or two-tailed P value? Two-tailed Two-tailed Two-tailedt, df t=5.441 df=14 t=6.382 df=14 t=5.422 df=14Number of pairs 15 15 15Mean of differences -0,01593 -0,1001 -0,0496795% confi dence interval -0.02221 to -0.009652 -0.1337 to -0.06643 -0.06932 to -0.03002R squared 0,6789 0,7442 0,6774Correlation coeffi cient (r) 0,9852 0,3865 0,2776P Value (one tailed) P<0.0001 0,0773 0,1583

Tabla 3. Análisis estadístico de la síntesis de colágeno. Comparación de los valores de SC = I340/I295 antes y después del tratamiento y comparación entre productos



la relación basal entre la elasticidad de la piel. Esto indica que la elasticidad de la piel en la región glútea de aplicación del producto activo (Et0,a) era igual a la elasticidad basal en la región glútea de aplicación del producto placebo (Et,0p).

La Gráfi ca 2 ilustra los resultados en términos del efecto de aumento de porcentaje de la elasticidad de la piel, E%, calculado según la Ecuación 2 descrita anteriormente.

Los datos obtenidos fueron estadísticamente eva-luados, comparándose los valores después de 60 días de tratamiento a los valores basales, buscando identificar si hubo efecto en el aumento de la elasticidad de la piel com-parando los resultados entre el producto activo y el placebo. Los resultados del análisis estadístico están relacionados en la Tabla 6, y, según estos, después de 60 días de uso de los produc-tos, considerando los resultados promedio de las 15 voluntarias participantes, el valor promedio para la elasticidad de la piel fue signifi cativamente superior al basal, tanto para el producto activo como para el producto placebo. Este resultado indicó que ambos productos presentaron efecto signifi cativo en el aumento de la elasticidad de la piel.

Mientras tanto, según los resultados del análisis estadístico comparativo entre los productos activos y placebo, el produc-to activo proporcionó, después de 60 días de tratamiento, un aumento de porcentaje de la síntesis de colágeno en la piel sig-nifi cativamente superior al del producto placebo. El producto activo fue aproximadamente 7,4 veces más efi ciente que el producto placebo en el aumento de porcentaje de la elasticidad de la piel.

De acuerdo con los resultados, el producto activo propor-cionó un aumento promedio signifi cativo en la elasticidad de la piel de 8,1% (en relación al estado basal), signifi cativamente superior al del producto placebo, que alcanzó el valor promedio signifi cativo de 1,1%.

De modo general, los resultados obtenidos indicaron un au-mento signifi cativo de la síntesis de colágeno y de la elasticidad de la piel después de tratamiento con productos cosméticos. Las evaluaciones de correlación entre variables fueron realizadas con la utilización del método de Pearson y considerando un intervalo de confi anza de 95%. La Gráfi ca 3 presenta la curva de correlación entre el aumento de la síntesis de colágeno y de la elasticidad de la piel para ambos tratamientos.

Mediante de las curvas de correlación presentadas en las Gráfi cas 3A y 3B fue posible observar una buena correlación (R>0,9, p<0,0001) entre el aumento de la síntesis de colágeno y el de la elasticidad. Esto evidencia que el aumento de la síntesis de colágeno de la piel está intrínsecamente relacionado al aumento de la elasticidad.

Producto placebo Producto activo Voluntaria t0 t60 t60/t0 E% t0 t60 t60/t0 E% 1 0,570 0,590 1,035 3,51 0,629 0,721 1,146 14,63 2 0,796 0,801 1,006 0,63 0,553 0,623 1,127 12,66 3 0,595 0,597 1,003 0,34 0,607 0,628 1,035 3,46 4 0,593 0,610 1,029 2,87 0,52 0,563 1,083 8,27 5 0,578 0,582 1,007 0,69 0,573 0,636 1,110 10,99 6 0,623 0,630 1,011 1,12 0,667 0,677 1,015 1,50 7 0,489 0,498 1,018 1,84 0,594 0,611 1,029 2,86 8 0,611 0,615 1,007 0,65 0,571 0,623 1,091 9,11 9 0,650 0,660 1,015 1,54 0,569 0,655 1,151 15,11 10 0,589 0,593 1,007 0,68 0,586 0,741 1,265 26,45 11 0,514 0,520 1,012 1,17 0,659 0,672 1,020 1,97 12 0,504 0,505 1,002 0,20 0,582 0,612 1,052 5,15 13 0,630 0,630 1,000 0,00 0,527 0,55 1,044 4,36 14 0,677 0,680 1,004 0,44 0,602 0,625 1,038 3,82 15 0,605 0,606 1,002 0,17 0,625 0,634 1,014 1,44

Tabla 4. Valores de la elasticidad de la piel, obtenidos por la relación entre los parámetros Ur y Eu

Paired t test P value 0,6760Are means signif. different? (P < 0.05) NoOne- or two-tailed P value? Two-tailedt, DF t=0.4268 df=14Number of pairs 15Mean of differences 0,0106795% confi dence interval -0.04295 to 0.06428R squared 0,01284Correlation coeffi cient (r) -0,3025P Value (one tailed) 0,1366

Tabla 5. Análisis estadístico de la elasticidad cutánea. Comparación de los valores de (Et0,a) vs (Et,0p)

Table Analyzed Et0,p v s. Et60,p Et0,a vs. Et60,a (Et60/Et0)a vs. (Et60/Et0)pPaired t test P value 0,001 0,0005 0,0012Are means signif. different? (P < 0.05) Yes Yes YesOne- or two-tailed P value? Two-tailed Two-tailed Two-tailedt, DF t=4.160 df=14 t=4.502 df=14 t=4.044 df=14Number of pairs 15 15 15Mean of differences -0,0062 -0,04713 -0,070895% confi dence interval -0.009397 to -0.003003 -0.06959 to -0.02467 -0.1084 to -0.03324R squared 0,5528 0,5914 0,5387Correlation coeffi cient (r) P Value (one tailed) 0,997 0,6339 0,2311

Tabla 6. Análisis estadístico del aumento de la elasticidad de la piel. Comparación de los valores de Ue/Ur = antes y después del tratamiento y comparación entre productos



ConclusionesLos resultados indicaron el aumento significativo de la

síntesis de colágeno y de la elasticidad de la piel después de tra-tamiento con los productos cosméticos. También fue observada una buena correlación entre el aumento de la síntesis de colágeno y de la elasticidad.

Los resultados confi rmaron que la espectroscopia de fl uores-cencia es una técnica no invasiva, muy adecuada para cuantifi car el colágeno de la piel in vivo y que la cutometría es una técnica tradicional y adecuada para medir las propiedades mecánicas de la piel, como la elasticidad.

También fue evidenciado que el aumento de la síntesis de colágeno de la piel está intrínsecamente relacionado al aumento de la elasticidad.

Referencias

1. Voet D, Voet JG. Biochemistry. 2nd edition. John Wiley & Sons Inc, New York, 1995

2. Yamauchi M et al. Collagen Cross-Linking in Sun-Exposed and Unexposed Sites of Aged Human Skin. J Invest Dermatol 97(5):938-941, 1991

3. Kollias N et al. Endogenous Skin Fluorescence Includes Bands that may Serve as Quantitative Markers of Aging and Photoaging. J Invest Dermatol 111(5):776-780, 1998

4. Gillies R et al. Fluorescence Excitation Spectroscopy Provides Infor-mation About Human Skin In vivo. J Invest Dermatol 115(4):704-707, 2000

5. Moreira PL et al. Collagen Quantifi cation by DRS. In: 15th Congress of the European Academy of Dermatology and Venerology, Rhodes, 2006

6. Piërard GE, Nikkels-Tassoudjii N, Piërard-Franchimont C: Infl uence of the test area on the mechanical proprerties of the skin, Dermatol-ogy (191):9-15, 1995

7. Rodrigues L, EEMCO Group: EEMCO Guidance to the in vivo assessment of tensile functional properties of the skin, Part 2: Instrumentation and test modes, Skin Pharmacol Appl Skin Physiol (67):52-67, 2001

Adaptado de trabajo presentado al 19º Congreso Latinoameri-cano e Ibérico de Químicos Cosméticos, en octubre de 2009, en Guayaquil, Ecuador

Síntesis de colágeno, SC - I340/I295

Gráfi ca 3. Curva de correlación entre elasticidad y síntesis de colágeno después de 60 días de tratamiento: (A) producto placebo y (B) producto activo

Síntesis de colágeno, SC - I340/I295

1,000 1,005 1,010 1,015 1,020 1,025

1,040

1,035

1,030

1,025

1,020

1,015

1,010

1,005

1,000

0,995

Ela

stic

idad

(Ue/

Ur)

A

Coefi ciente de correlación = 0,958Desviación = 0,003n = 15p < 0,0001

1,000 1,005 1,010 1,015 1,020 1,025

1,040

1,035

1,030

1,025

1,020

1,015

1,010

1,005

1,000

0,995

Ela

stic

idad

(Ue/

Ur)

B

Coefi ciente de correlación = 0,919Desviación = 0,003n = 15p < 0,0001

Aumento de la elasticidad (%)

Gráfi ca 2. Distribución de los resultados en términos de aumento de la elasticidad fi nal de la piel en relación a la inicial

Producto control

Producto activoMedia = 1,1%

Media = 8,1%

0 3 6 9 12

6

4

2

0

Frec

uenc

ia

Gráfi ca 1. Histograma de los valores de aumento de porcentaje en la síntesis de colágeno en la piel después de 60 días de estudio en relación a la condición inicial

Producto control

Producto activoMedia = 0,9%

Media = 5,9%

Aumento de la síntesis de colágeno (%) 0 3 6 9 12

6

4

2

0

Frec

uenc

ia


Documents

Síntesis de Colágeno y Elasticidad de la Piel - … · la síntesis de las cadenas polipeptídicas. Una vez que los polipéptidos pasan por el retículo endoplasmático rugoso de