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TECHNIQUE DE MARQUAGE EN MASSE DE CIVELLES {Anguilla Anguilla L.) PAR BALNÉATION RAPIDE DANS LE FLUOROCHROME.

APPLICATION AU MARQUAGE A LA TETRACYCLINE DE 500 KG DE CIVELLES

Mar ina A L C O B E N D A S (1) , F rédér ique L E C O M T E (1) , J . C A S T A N E T (1) ,

F.J. M E U N I E R (1) , P. M A I R E (2) E T M. H O L L (3)

avec la co l labora t ion t e c h n i q u e d e G. P A N O N (2)

(1) UA C N R S N° 1137, Équipe de Recherche "Format ions squelet t iques", Laboratoi re d 'Anatomie

C o m p a r é e , Univers i té Par is 7, 2 p lace Juss i eu , 75251 PARIS C e d e x 05 .

(2) Conse i l Supér ieur de la P ê c h e , Dé léga t ion Rég iona le N° 3, 18 rue de Nomeny , 57158

M O N T I G N Y - L E S - M E T Z .

(3) Conse i l Supér ieur de la Pêche , 134 a v e n u e de Malakoff , 7 5 0 1 6 PARIS .

Reçu le 3 octobre 1990 Received 3 October, 1990

Accepté le 22 avril 1991 Accepted 22 April, 1991

R É S U M É

L' immers ion d e s c ive l les (Anguilla anguilla L.) dans une so lu t ion h y p e r o s m o t i q u e (5 %

de ch lo rure de sod ium) pendan t 3 '30 pu is d a n s une solut ion con tenan t 1 % de ch lorhydra te

de te t racyc l ine (CHTC) ou 2 % d e f luo rescé ine ( D C A F ) pendan t e n c o r e 3 '30 , ent ra îne une

accé léra t ion de la v i tesse d 'en t rée de ces deux marqueurs v i taux d a n s l 'o rgan isme des po issons

et un m a r q u a g e rap ide des o rganes ca lc i f iés (ver tèbres et o to l i thes) . D e s résul ta ts s imi la i res

son t ob tenus en p laçant les c ive l les d a n s une so lu t ion con tenan t à la fo is 5 % de chlorure de

sod ium et 1 % de C H T C ou 2 % de D C A F pendan t 3 '30. Le choc o s m o t i q u e est p roposé

c o m m e une avancée techn ique pour le m a r q u a g e vital en m a s s e d e s larves, des a lev ins et

des s tades juvén i les car il pe rme t d 'aba isser cons idé rab lemen t le t e m p s de con tac t nécessa i re

ent re les po issons et la so lut ion de f luo romarqueur .

Nous p résen tons une app l ica t ion d e cet te techn ique pour le m a r q u a g e de 5 0 0 kg de

c ive l les avec de la te t racyc l ine. La réa l isat ion de cet te man ipu la t ion a d e m a n d é une journée

et d e m i e de travai l à 5 pe rsonnes . Les résul tats ob tenus sont de t rès b o n n e qual i té pu isque

l'on obt ient 100 % de s p é c i m e n s m a r q u é s dont 70 % le sont fo r tement . Il est donc possib le

de marquer une g rande quant i té d e c ive l les d a n s un laps de t e m p s rédui t . Le p rob lème de la

reconna issance in situ des an imaux a ins i m a r q u é s est d iscu té .

M A S S A L L A B E L L I N G O F E L V E R S W I T H F A S T B A L N E A T I O N IN F L U O R O C H R O M E S .

A P P L I C A T I O N T O T E T R A C Y C L I N E L A B E L L I N G O F 5 0 0 K G O F E L V E R S .

S U M M A R Y

Immers ion of e lvers (Anguilla anguilla L.) in an hyperosmot i c so lu t ion (5 % sodium

chlor ide) for about 3 a n d a half m inu tes , and then immers ing t h e m in ano the r so lu t ion conta in ing

1 % of te t racyc l ine ch lo rhydra te ( C H T C ) or 2 % of ca lce in (DCAF) du r i ng 3 a n d a half minutes

exposu re , resul ted in a fast up take of t hese two vital f l uo roch roms into t h e f ish and a label l ing

of calc i f ied o rgans (ver tebrae a n d oto l i ths) . Simi lar resul ts w e r e a lso ob ta ined by placing the

f ish in a so lut ion con ta in ing bo th 5 % of s o d i u m ch lor ide and 1 % C H T C or 2 % D C A F for 3

Article available at http://www.kmae-journal.org or http://dx.doi.org/10.1051/kmae:1991007

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a n d a half m inu tes . Th is osmot i c shock is p roposed as a pract ica l technic for vi tal mass label l ing

of la rvae or fry s ince the s imu l taneous osmot ic shock and ba lneat ion is a signif icant improvement

of the m e t h o d by reduc ing cons iderab ly the time of contact be tween f ishes and label l ing so lu t ion.

W e p r o p o s e an app l ica t ion of th is technic for label l ing 500 kg of e lvers wi th te t racyc l ine.

T h e e x p e r i m e n t n e e d e d one and a half day for f ive pe rsons to carry out the operat ion . The

resu l ts a re of ve ry good qual i ty, s ince w e obtain 100 % of label led spec imens , 70 % of wh ich

a re h igh ly labe l led . T h e n it is poss ib le to label an impor tant quant i ty of f ishes in a reduced

t ime . T h e p r o b l e m of in situ recogn i t ion of the label led an ima ls is d i scussed .

1 . I N T R O D U C T I O N

L e s é t u d e s é c o l o g i q u e s c h e z les p o i s s o n s ( m i g r a t i o n , c r o i s s a n c e , s t r u c t u r e et

d y n a m i q u e d e populat ion. . . ) nécess i ten t des techn iques de reconna issance des an imaux

d a n s le mi l ieu nature l . De n o m b r e u s e s méthodes ont é té mises au point, à cet effet, depu is

d e l o n g u e s a n n é e s . C i tons par e x e m p l e cel les re levant de la techn ique des "marquages-

r e c a p t u r e s " : m a r q u e s ex te rnes , ta touages , marques ch im iques internes par inject ion sous -

c u t a n é e (voir J A K O B S O N , 1970 ; L A I R D et STOTT, 1978 ; H E R B I N G E R et al., 1990) ;

t ou te fo i s ce p r o c é d é ne s ' app l i que , en généra l , q u ' à d e s an imaux de tai l le re la t i vement

impo r tan te , c 'est -à-d i re des subadu l tes et des adul tes. En out re , les man ipu la t ions qu 'e l les

en t ra înen t son t souven t à la fo is fac teur de stress pour les an imaux et consommat r i ces de

t e m p s pou r les expér imen ta teu rs .

Pou r rédu i re la lou rdeur d e s man ipu la t ions tout en permet tan t la p répara t ion d 'un

p lus g r a n d n o m b r e d ' an imaux , de nouve l les mé thodes ont été p roposées . Elles permet tent ,

d e p l u s , d e d i m i n u e r les pr ix de rev ien t et l es s t r ess , tou t en t rava i l lan t sur des pet i ts

a n i m a u x , qu' i l s 'ag isse d 'espèces d e pet i te tai l le, des juvén i les , vo i re des s tades larvaires

ou m ê m e e m b r y o n n a i r e s . C e s m é t h o d e s sont :

— les i m p l a n t s m a g n é t i q u e s ( L E A R Y et M U R P H Y , 1 9 7 5 ; C H A M P I G N E U L L E ef al.,

1987) ;

— les t e c h n i q u e s de choc t he rm ique provoquant une str ie caractér is t ique sur les oto l i thes

( M O S E G A A R D et al., 1987) .

— le m a r q u a g e vi tal en m a s s e ( T S U K A M O T O , 1985 ; N A G I E C et al., 1988 ; R U H L É et

G R I E D E R , 1989) .

Ce t t e dern iè re techn ique a d o n n é lieu à d iverses é tudes expér imenta les et semb le la

p lus p r o m e t t e u s e des trois c o m m e m o y e n de m a r q u a g e en masse des an imaux . Elle dér ive

d e s t e c h n i q u e s d e m a r q u a g e vital m ises au point chez les po issons ( W E B E R et RIDGWAY,

1962 , 1967) essen t ie l l ement pour l 'étude de la d y n a m i q u e de la c ro issance du squelet te . Le

m a r q u a g e vi tal es t ut i l isé le p lus souven t dans des é tudes concernan t le t issu osseux pour

éva lue r d i f fé rents aspec ts de la d y n a m i q u e de l 'os téogenèse et du reman iemen t (LOPEZ,

1 9 7 0 ; S I M M O N S et al., 1 9 7 0 ; B O I V I N et M E U N I E R , 1 9 7 8 ) . Il e s t é g a l e m e n t

f r é q u e m m e n t u t i l i s é c o m m e m o y e n de v a l i d a t i o n d e s l e c t u r e s d ' â g e p a r l a

sque le t t och rono log ie (pour les Os té ich thyens consu l ter VAN COILL IE , 1967 ; C A M P A N A et

N E I L S O N , 1 9 8 2 ; N E I L S O N et G E E N , 1 9 8 2 ; B E A M I S H et M c F A R L A N E , 1 9 8 3 ;

B E A M I S H et al., 1984 ; M c F A R L A N E et B E A M I S H , 1987) .

L e s m a r q u e u r s v i t a u x s o n t d e s s u b s t a n c e s q u i se f i xen t s é l e c t i v e m e n t sur les

s u r f a c e s s q u e l e t t i q u e s en vo ie d e m iné ra l i sa t i on ( os , d e n t s , c a r t i l a g e s ca lc i f iés . . . ) au

m o m e n t de l 'admin is t rat ion du produi t . Cette f ixat ion est pé renne . Les subs tances ut i l isées

p résen ten t , en out re , la propr ié té d 'absorber les rayons UV pour émet t re une f luorescence

d a n s le spec t re v is ib le. Ce t te propr ié té est uti l isée pour le repérage du marqueur à l 'échel le

m i c r o s c o p i q u e ( M I L C H et al., 1957 ; M E U N I E R , 1972, 1974) .

L e s m o d a l i t é s d ' u t i l i s a t i o n d e s m a r q u e u r s , d ' a b o r d s t a n d a r d i s é e s c h e z l es

T é t r a p o d e s , on t é té rap idemen t adap tées aux po i ssons osseux (KOBAYASHI et al., 1964 ;

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W E B E R et RIDGWAY, 1967 ; M E U N I E R , 1972 , 1982 ; M E U N I E R et B O I V I N , 1974 , 1978 ;

D E K K E R , 1986 ; M c F A R L A N E ET B E A M I S H , 1 9 8 7 ) . M a i s t o u s c e s t r a v a u x reposen t

essent ie l lement sur l 'admin is t rat ion des produ i ts par in jec t ion, ce qu i , en prat ique, limite le

n o m b r e d ' a n i m a u x q u e l 'on p e u t t ra i te r . D ' au t res m o d e s d ' a d m i n i s t r a t i o n p e r m e t t e n t

d ' a u g m e n t e r ce n o m b r e de f a ç o n s ign i f i ca t i ve . C 'es t ce q u ' o n appe l l e le "marquage en

masse" . O n fait a lors appe l soit à l ' ingest ion des f l uo roch romes avec les a l iments ( W E B E R

et R I D G W A Y , 1 9 6 7 ; J O N E S , 1 9 6 9 ) , so i t à la t e c h n i q u e d e b a l n é a t i o n ( p r é s e n c e du

ma rqueu r en so lu t ion d a n s le mi l ieu) ( W E B E R et R IDGWAY, 1962 ; C H O A T E S , 1964 ;

T S U K A M O T O , 1985, 1989 ; D A B R O W S K I et T S U K A M O T O , 1986 ; T S U K A M O T O et al.,

1989) . Dans ces deux cas , la di f f icul té essent ie l le rés ide dans le con t rô le de la quant i té

m i n i m u m de f l uo roch rome ind ispensab le à un bon marquage . C e seui l est b e a u c o u p moins

faci le à maît r iser qu 'avec d e s in ject ions ( M E U N I E R et B O I V I N , 1978) .

Chez les po issons , l ' in t roduct ion du marqueur d a n s l 'a l iment r isque de donner des

résul tats décevan ts si le produi t d i f fuse t rop rap idemen t d a n s le mi l ieu avan t que le poisson

ne se n o u r r i s s e . En o u t r e , l ' é p i t h é l i u m i n tes t i na l es t p l u s o u m o i n s " p e r m é a b l e " a u x

mo lécu les du m a r q u e u r ; ce qu i in f lue d i r e c t e m e n t sur les q u a n t i t é s à admin is t re r pour

ob ten i r un m a r q u a g e e f f i cace . Les me i l l eu rs résu l ta ts on t en fait é t é o b t e n u s chez d e s

espèces p lanc tonophages (Corégones ) nour r ies de c rus tacés p lanc ton iques préa lab lement

marqués à la te t racyc l ine ( N A G I E C et N A G I E C , 1983 ; N A G I E C et al., 1985) .

La b a l n é a t i o n ( b a i n s d e d u r é e d é t e r m i n é e d a n s d e s s o l u t i o n s d e c o n c e n t r a t i o n

déf in ie) dans le marqueu r paraî t p lus p rome t teuse m ê m e s'il est dif f ici le, là auss i , d 'évaluer

la q u a n t i t é de s u b s t a n c e a c t i v e e f f e c t i v e m e n t a b s o r b é e (pa r l ' ép i t hé l i um b r a n c h i a l et

t é g u m e n t a i r e ?) par le p o i s s o n . Il es t poss ib le en ef fet , en u t i l i sant d e s concen t ra t i ons

v a r i é e s , de d é t e r m i n e r les d o s e s et les d u r é e s d ' a c t i o n o p t i m a l e s p e r m e t t a n t un b o n

m a r q u a g e des t i ssus sque le t t i ques , dans des cond i t ions b io log iques sa t is fa isantes pour les

a l e v i n s ( W E B E R e t R I D G W A Y , 1 9 6 2 ; S C H M I T T , 1 9 8 4 ; T S U K A M O T O , 1 9 8 5 ;

D A B R O W S K I et T S U K A M O T O , 1986 ; K I N G S F O R D et M I L I C I C H , 1987 ; W I L S O N ef al.,

1 9 8 7 ; T S U K A M O T O , 1 9 8 8 ) . C e t t e t e c h n i q u e a m ê m e é t é u t i l i s é e s u r d e s œ u f s

e m b r y o n n é s non éc los de c o r é g o n e ( D A B R O W S K I et T S U K A M O T O , 1986) ou encore, sur

des oeufs f ra î chement pondus de trui te ( R U H L É et G R I E D E R , 1989) . Toutefo is , m ê m e si

ces techn iques permet ten t d ' augmen te r ne t tement les quan t i tés de po i ssons t ra i tés, e l les

son t enco re t rop lou rdes pour p répare r p lus ieurs cen ta ines de k i los d 'a lev ins pu isque le

t e m p s de ba lnéat ion s 'éta le de 12 à 4 8 heures se lon les e s p è c e s et les concent ra t ions de

marqueurs ut i l isées.

Nous p roposons une amél io ra t ion de la techn ique de ba lnéa t ion norma le qui permet

de rédui re cons idé rab lemen t le t e m p s d 'act ion m i n i m u m des m a r q u e u r s chez les civel les,

g râce à la réal isat ion d 'un "choc osmot ique" . Cet te mé thode , m ise au point sur d e s lots de

50 spéc imens , est ensu i te a d a p t é e au t ra i tement de p lus ieurs d i za ines de ki los d e civel les .

2. M A T É R I E L ET M É T H O D E S

2 . 1 . M ise a u point de la t e c h n i q u e d e ba lnéat ion rap ide

2 . 1 . 1 . Matér ie l

Les e x p é r i e n c e s on t é té fa i tes sur d e s c ive l les c a p t u r é e s (f in de l 'h iver-début du

pr in temps) dans le cou rs infér ieur de la Loi re, au début de leur migra t ion anad rome . Les

an imaux , d 'une tai l le m o y e n n e d e 7 c m , son t au s tade V B à VUo se lon la c lass i f icat ion de

ELIE et al., (1982) . C h a q u e lot est const i tué d e 50 c ive l les. A p r è s t ra i tement par balnéat ion,

les lots sont ma in tenus dans un aqua r i um d 'eau couran te , d a n s un v o l u m e d'environ 20

l i tres, à une tempéra tu re d e 12 +1-2 °C. Les an imaux ne sont pas nour r is pendan t les 15

jours d 'observa t ion pos t -expér imen ta le .

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2 .1 .2 . M é t h o d e d e m a r q u a g e

Le p r i n c i p e de la m é t h o d e de m a r q u a g e est de f a i r e p é n é t r e r r a p i d e m e n t une

quan t i t é su f f i san te de f l uo romarqueur dans l 'organisme des po issons et ce , s imu l tanément ,

pou r un n o m b r e impor tant de s p é c i m e n s .

Deux p r o c é d é s de m a r q u a g e en masse des c ive l les, par choc osmo t i que , ont été

tes tés :

— c h o c o s m o t i q u e (3,30 mn) suivi de la balnéat ion (3,30 mn) dans le f luorochrome ;

— c h o c o s m o t i q u e et ba lnéa t ion s imu l tanés (durée : 3 ,30 mn) .

L e s lo ts d e 50 c i ve l l es son t ba lnéés d a n s un v o l u m e de 100 ml de so lu t ion de

f l u o r o c h r o m e .

Le choc osmot ique p rop remen t dit a été réal isé avec du chlorure de sod ium (NaCI) à

5 % .

Deux f l uo romarqueu rs c lass iques des t issus sque le t t iques ont été ut i l isés :

a) le ch lo rhydra te de te t racyc l ine (=CHTC) à la concent ra t ion de 1 %.

b) la f l u o r e s c é i n e ou " 2 , 7 - B i s < - b i s ( c a r b o x y m e t h y l ) - a m i n o m e t h y l > - f l u o r e s c e i n "

( = D C A F ) à la c o n c e n t r a t i o n de 2 % d a n s du b i ca rbona te de s o u d e à 2 % (ce dern ie r

p e r m e t t a n t d 'obteni r une so lub i l isat ion complète du produi t ) . Pour le choc osmot ique et la

ba lnéa t i on s imu l tanés avec la f luorescé ine , le ch lorure de sod ium a été uti l isé à 3 % afin

de ten i r c o m p t e de l 'é lévat ion de la p ress ion osmot ique indui te par le b icarbonate de soude .

Deux sér ies de cont rô les ont é té réal isées para l lè lement aux expér iences décr i tes c i -

d e s s u s :

a) con t rô les sans f l uo romarqueur pour tester l'effet du seu l choc osmot ique sur la surv ie

d e s c ive l les : un lot de c ive l les a été p lacé 3,30 mn dans une solut ion de NaCI à 5 %, un

d e u x i è m e 10 m n dans une so lu t ion de NaCI à 5 %, un dern ier 5 mn dans une solut ion de

NaCI à 10 %.

b) con t rô les pour d isposer de données sur la morta l i té des c ivel les en é levage, hors

e x p é r i m e n t a t i o n : un lot t é m o i n a é té placé d a n s l 'eau d u rob ine t , un au t re d a n s une

so lu t ion d e b i ca rbona te à 2 %.

2.1 .3 . Tests d e morta l i té et d e marquage

La mor ta l i té dans les d i f férents lots a été suivie, sur une pér iode de 15 jours après la

f in du t ra i tement , par le d é c o m p t e quo t id ien des spéc imens t rouvés mor ts chaque mat in .

La qua l i té du m a r q u a g e a été analysée sur les oto l i thes et les ver tèbres cauda les .

Q u i n z e à v ingt s p é c i m e n s de c h a q u e lot sont f ixés dans l 'alcool 70° au bout de 15 jours de

su rve i l l ance . Les ver tèbres cauda les sont débarrassées à la p ince de la muscu la ture et montées

en t re l ame et lamel le d a n s une rés ine hydrophobe (Euki t t ) , après une désydra ta t ion totale des

p ièces par l 'é thanol . Les oto l i thes sont également montés ent re lame et lamel le dans cette

rés ine ap rès ex t rac t ion et s é c h a g e rap ide . Les prépara t ions ob tenues sont observées avec

un m i c r o s c o p e à f l uo rescence en lumière bleue (fi ltre d 'exc i ta t ion BG 12 et f i l tre d'arrêt K 530) .

La qua l i té d e s marqueu rs est c lassée en quatre catégor ies : négati f , fa ib le, bon , très bon .

2 .2 . Réa l i sa t ion de l 'opérat ion e n "grand c h a m p "

Af in d e p rocéder à des a lev inages dans le Rhin, 500 kg de c ive l les ont été préparés

par ba lnéa t i on avec c h o c osmo t i que , dans une solut ion de ch lo rhydra te de tet racyc l ine. Les

t r a i t emen ts on t é té e f fec tués d a n s les instal lat ions des Étab l i ssements B E A U R , fourn isseur

d e s c ive l les ; a ins i les s t ress dûs aux manipulat ions on t é té rédui ts au m a x i m u m , ce qui a

t rès p r o b a b l e m e n t faci l i té le succès de l 'opération de m a r q u a g e . La ba lnéat ion a eu lieu les

10 et 11 m a r s 1989 et a d e m a n d é une journée et dem ie de travai l à 5 pe rsonnes .

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Les c ive l les, cap tu rées dans l 'estuaire de la Loire par d e s pêcheu rs profess ionnels ,

d a n s les 4 à 5 jou rs p récédan t l 'opérat ion de m a r q u a g e , ont été c o n s e r v é e s en bonnes

cond i t ions phys io log iques d a n s des bass ins appropr iés . La longueur tota le moyenne des

c ivel les était de 6,9 c m pour un po ids de 256 mg c h a c u n e : e l les é ta ient au s tade V l ^ i

se lon la c lass i f icat ion d e EL IE et al., (1982) .

Les c ive l les on t é té t ra i tées par lots de 5 kg p l a c é s d a n s d e s s a c s p e r m é a b l e s ,

fabr iqués avec du vo i lage de ny lon d 'une mai l le de 1 m m de cô té . Dix sacs de 5 kg sont

p longés success i vemen t , deux par deux , dans un v o l u m e d e 50 litres de solut ion co lorante.

C e t t e s o l u t i o n , r e n o u v e l é e c o m p l è t e m e n t t o u s les 5 0 kg d e c i v e l l e s . est p r é p a r é e

e x t e m p o r a n é m e n t par quant i té de 100 I (100 l i tres d 'eau , 1 kg de te t racyc l ine et 5 kg de

sel de mer, le tout ag i té pendan t 45 minu tes avec une hé l ice f ixée en bout d 'arbre d 'un

moteur é lec t r ique) . Les six p remie rs sacs restent 3 '30 d a n s la so lu t ion , les quatre derniers

4 ' à 5' pour c o m p e n s e r l ' appauvr issement éven tue l en te t racyc l ine de cel le-c i .

Après le m a r q u a g e , les c ivel les sont remises dans un bass in de s tockage jusqu 'au

momen t d e leur cond i t i onnement pour le t ransport se lon la techn ique mise au point par les

Étab l issements B E A U R (lots de 1,5 kg, à sec en casset te de po lys tyrène avec un noyau de

glace). El les sont ensu i te convoyées en camion iso therme sur les l ieux de l 'alevinage. Les

civel les ont été déve rsées le 14 mars aux points de d é v e r s e m e n t habi tuels dans le Rhin.

3. R É S U L T A T S - D I S C U S S I O N

3 . 1 . M ise a u point d e la t e c h n i q u e de ba lnéat ion rap ide

3 . 1 . 1 . I n c i d e n c e d e la ba lnéa t ion -choc o s m o t i q u e sur la surv ie d e s civel les

Les lots soum is au seu l choc osmot ique ne p résen ten t pas une mortal i té supér ieure à

cel le des deux lots t émo ins (eau , NaHCC>3 ; Tab leau I). Le su iv i pos t -expér imenta l des lots

trai tés avec les f l uo romarqueu rs ne révèle pas non p lus de mor ta l i té supér ieu re à celle observée

pour les lots t émo ins . O n conc lu t à l 'absence d'effet tox ique de la ba lnéat ion-choc osmot ique

sur les c ive l les. Des c ive l les g a r d é e s en é levage pendan t p lus ieurs mois après l 'expér ience

présentent en effet une c ro i ssance normale .

Tableau I : Mor ta l i té d e s c ive l les et qual i té d u m a r q u a g e d e s oto l i thes et des ver tèbres

a v e c la te t racyc l ine ( C H T C ) et la f l u o r e s c é i n e ( D C A F ) ; N = pourcentage

d e s p é c i m e n s m a r q u é s ; Q = p ropor t ion d e s s p é c i m e n s présentant un

m a r q u a g e b o n o u t rès b o n .

Table I : Morta l i ty of t h e e lvers and intensity of the f luorescent m a r k on t h e otoliths

a n d t h e ver tebrae w i t h te t racycl ine ( C H T C ) a n d ca lce in ( D C A F ) ; N = percent

of labe l led s p e c i m e n s ; Q = p ropor t ion of s p e c i m e n s wi th g o o d or very

g o o d labe l l ing .

C h o c C h o c M a r q u e u r C ib le puis

ba lnéat ion +

ba lnéa t ion T é m o i n s Mortal i té

morta l i té 1/50 0 eau 0

Oto l i the N 9 0 % 100 % N a H C 0 3 2 % 0

C H T C Q 3/5

Ver tèbre N 5 0 % 100 %

O 4/5 N a C I 5 % , 3'5 0

morta l i té 0 0 N a C I 5 % , 10' 0

Oto l i the N 6 0 % 75 % NaCI 10 %, 5' 1/30 D C A F Q 2/5 2/3

Ver tèbre N

Q

4 5 %

1/6

100 %

4/5

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991) 321 : 4 3 - 5 4 — 4 8 —

3.1 .2 . A n a l y s e d u m a r q u a g e

Les d e u x m a r q u e u r s sont re t rouvés sur les marges des oto l i thes et des ver tèbres

( f ig . 1 , 2) d a n s les d i f fé ren tes sé r i es expé r imen ta les . O n ob t ien t 100 % de s p é c i m e n s

m a r q u é s avec la te t racyc l ine et la f luorescé ine. On ne met pas en év idence de d i f férence

i m p o r t a n t e , pour les deux c o m b i n a i s o n s (choc osmot ique suivi de la ba lnéat ion ou choc

o s m o t i q u e et ba lnéa t i on s i m u l t a n é s ) , dans l a qual i té d e s m a r q u a g e s pou r les o to l i thes

(Tab leau I). En revanche , pour les ver tèbres, les résultats sont mei l leurs avec le p rocédé en

un t e m p s . C e dern ier se ra donc pré féré à celui en deux temps , d 'au tant p lus qu' i l d im inue

s ign i f i ca t i vement la du rée de la manipulat ion e t réduit éga lement le s t ress occas ionné aux

a n i m a u x .

A lo rs q u e la f l uo rescé ine est cou rammen t uti l isée pour le m a r q u a g e du squelet te des

p o i s s o n s ( M E U N I E R , 1974 ; M E U N I E R et BOIV IN , 1978 ; M E U N I E R et PASCAL, 1981 ;

B O U J A R D et M E U N I E R , 1991) , un marquage des oto l i thes par ce f l uo roch rome n'a été

s i g n a l é q u ' u n e s e u l e fo is d a n s la l i t térature pour Sciaenops ocellatus, Micropogonias

undulatus et Leiostomus xanthurus (WILSON et al., 1987).

O n no te que pour un m ê m e type de pièce (otol i the ou ver tèbre) , la te t racyc l ine donne

t o u j o u r s d e s r é s u l t a t s i d e n t i q u e s ou me i l l eu rs à c e u x de la f l u o r e s c é i n e pou r ce qu i

c o n c e r n e l ' intensité du m a r q u a g e (f ig. 1). Pour ces deux marqueu rs l 'otol i the fourni t des

résu l ta ts é g a u x ou infér ieurs à ceux ob tenus pour la ver tèbre (Tableau I).

L e s c i v e l l e s s o n t un m a t é r i e l r é s i s t a n t et f a v o r a b l e p o u r d e s e x p é r i e n c e s d e

m a r q u a g e en m a s s e de popu la t i ons . Les condi t ions phys io log iques par t icu l iè res de ces

a n i m a u x en c o u r s d e m ig ra t i on a n a d r o m e a u m o m e n t de leur c a p t u r e ne son t pas un

o b s t a c l e à leur ba lnéa t i on . Cec i n 'est peut-être pas su rp renan t pour une espèce don t le

c y c l e b i o l o g i q u e se dé rou le à la fo is en mi l ieu mar in et en eau d o u c e . Toute fo is , nous

n 'avons a u c u n e base de c o m p a r a i s o n avec d 'aut res té léos téens pu isqu 'à l 'heure actuel le

s e u l e l 'angui l le a fait l 'objet d ' une expér imenta t ion de m a r q u a g e vi tal a c c o m p a g n é d 'un

c h o c o s m o t i q u e .

L a t e c h n i q u e du c h o c o s m o t i q u e déjà ut i l isée pour la v a c c i n a t i o n en m a s s e de

popu la t i ons de t ru i tes ( A M E N D et F E N D E R , 1976) est t ransposab le pour le marquage en

m a s s e d e c ive l les . Le ga in de t e m p s par rapport à la s imple ba lnéat ion est cons idérab le . En

ef fet , c h e z les c ive l les un m a r q u a g e en balnéat ion s imple (solut ion de C H T C de 100 à 300

p p M ; D C A F d e 100 à 3 0 0 p p M ) es t o b t e n u avec d e s b a i n s d e 12 à 4 8 h s e l o n les

c o n c e n t r a t i o n s (résul tats non pub l iés) . C e s valeurs sont du m ê m e ordre q u e cel les données

par les au teu rs pour la ba lnéa t ion s imp le chez d ivers aut res Té léos téens ( H E T T L E R , 1984 ;

S C H M I T T , 1984 ; T S U K A M O T O , 1985 ; D A B R O W S K I et T S U K A M O T O , 1986) . Le choc

o s m o t i q u e e n t r a î n e d o n c u n e accé lé ra t i on , d e 300 à 4 0 0 fo is e n v i r o n , d e s p r o c e s s u s

d ' abso rp t i on d e s f l uo romarqueu rs et de dépôt s u r les t issus minéra l isés. C'est cer ta inement

un p h é n o m è n e osmo t i que nature l équ iva lent qui intervient dans le cas de m a r q u a g e d 'œufs

d e t ru i te au m o m e n t de la f éconda t ion (RUHLÉ et G R I E D E R , 1989) .

Le l ieu d e p a s s a g e d e s f l u o r o m a r q u e u r s ne peu t pas ê t re d é t e r m i n é a v e c nos

e x p é r i e n c e s . D a n s le cas de la vacc ina t ion d e s t ru i tes ( A M E N D et F E N D E R , 1976) , ce

s e r a i t p r é f é r e n t i e l l e m e n t pa r le s y s t è m e de la l i gne l a t é r a l e e t a c c e s s o i r e m e n t pa r

l 'ép i thé l ium branch ia l que se ferai t l 'absorption des sé ruma lbumines . Des ana lyses restent

à fa i re pou r tes ter cet te hypo thèse d a n s le cas des f luo rochromes chez la c ivel le. Quo i qu' i l

e n s o i t , n o s e x p é r i e n c e s c o n f i r m e n t l ' access ib i l i t é r a p i d e d e s m a r q u e u r s aux t i s sus

m i n é r a l i s é s d è s lo rs qu ' i l s s o n t e n t r é s dans les l i qu ides i n t e r n e s d e l ' o r g a n i s m e d e s

p o i s s o n s ( M E U N I E R , 1982) .

c

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991) 321 : 43 -54 — 49 —

F i g u r e 1 : A ) O t o l i t h e d ' u n e c i v e l l e m a r q u é e p a r la t e t r a c y c l i n e (ba lnéat ion et c h o c

o s m o t i q u e s imu l tanés ) .

B) O t o l i t h e d ' u n e c i v e l l e m a r q u é e p a r la f luorescé ine (ba lnéat ion et c h o c

o s m o t i q u e s imu l tanés ) .

C) O t o l i t h e d ' u n e c i v e l l e t é m o i n ( B a r r e = 100 u m ) .

F i g u r e 1 : A ) O t o l i t h o f a t e t r a c y c l i n e l a b e l l e d e l v e r (ba lnéa t ion a n d o s m o t i c s h o c k

s i m u l t a n e o u s l y ) .

B ) O t o l i t h o f a c a l c e i n l a b e l l e d e l v e r ( b a l n é a t i o n a n d o s m o t i c s h o c k

s i m u l t a n e o u s l y ) .

C) C o n t r o l o t o l i t h ( B a r = 100 urn ) .

F i g u r e 2 : A ) Ex t rémi té c a u d a l e d e la c o l o n n e ver tébra le d ' u n e c i v e l l e m a r q u é e par la

t e t r a c y c l i n e .

B) Ver tèbres c a u d a l e s d ' u n e c i v e l l e m a r q u é e p a r la f luorescé ine .

L ' i n t e n s i t é d u m a r q u a g e e s t i n f é r i e u r e à c e l l e o b t e n u e a v e c l a

t e t r a c y c l i n e ( B a r r e = 100 u m ) .

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991) 321 : 4 3 - 5 4 — 5 0 —

F i g u r e 2 : A ) C a u d a l e x t r e m i t y o f t h e v e r t e b r a l a x i s o f a n e l v e r l a b e l l e d w i t h

t e t r a c y c l i n e .

B ) C a u d a l v e r t e b r a e o f a n elver l a b e l l e d w i t h c a l c e i n .

T h e i n t e n s i t y o f t h e l a b e l l i n g is w e a k e r t h a n w i t h t e t r a c y c l i n e (Bar =

100 u rn ) .

F i g u r e 3 : O t o l i t h e d ' u n e a n g u i l l e t t e marquée à la t e t r a c y c l i n e ( l o r s d e l ' a l e v i n a g e e n

M a r s 1 9 8 9 ) e t r e c a p t u r é e à K e m b s e n A v r i l 1 9 9 0 . O n o b s e r v e q u e le

d i a m è t r e d e l ' a n n e a u f l u o r e s c e n t e s t p r o c h e d e c e l u i d e s c i v e l l e s d e la

f i g u r e 1 A a u m o m e n t d e l ' a lev inage ( B a r r e = 100 u rn ) .

F i g u r e 3 : O t o l i t h o f a y o u n g ee l l abe l l ed w i t h t e t r a c y c l i n e ( e l v e r s l a b e l l e d in M a r c h

1989) r e c a p t u r e d at K e m b s in A p r i l 1990. T h e d i a m e t e r o f t h e f l u o r e s c e n t

r i n g is c l o s e t o t h e o n e o f the l a b e l l e d e l v e r o f f i g u r e 1 A ( B a r = 100 u rn ) .

3.2 . O p é r a t i o n e n " g r a n d c h a m p "

Les opéra t ions de ba lnéat ion se sont ef fectuées dans de b o n n e s cond i t ions . Aucune

a u g m e n t a t i o n de la morta l i té par rappor t à des témoins non tra i tés et conse rvés dans les

m ê m e s cond i t i ons d e s tockage , n'a é té constatée dans les 48 h su ivan t l 'opérat ion. Ce

résu l ta t con f i rme donc ceux ob tenus au laboratoire, d 'une part sur des lots de 50 civel les,

d 'au t re par t su r des lots de 500 g (soit environ 1500 c ivel les) , pour la mise au point de la

p r é s e n t e man ipu la t ion et qui ava ient mont ré l 'absence de mortal i té.

P e n d a n t le t ra i tement ba lnéat ion-choc osmot ique , les c ivel les rejet tent un abondant

m u c u s . A u r e t o u r d a n s le b a c d e s t o c k a g e , ap rès le t r a i t e m e n t , e l l e s p r é s e n t e n t un

c o m p o r t e m e n t de nage norma l .

Un con t rô le de l 'eff icacité du marquage a été fait sur un échant i l lon de c ivel les pris

d a n s les d e u x b a c s de s t o c k a g e . L 'é tude d e s o to l i thes et d e s v e r t è b r e s c a u d a l e s , au

m i c r o s c o p e à f l u o r e s c e n c e , m o n t r e un succès total du m a r q u a g e p u i s q u e nous a v o n s

1 0 0 % d e s p é c i m e n s p r é s e n t a n t d e s p ièces m a r q u é e s , don t s e u l e m e n t 30 % le sont

f a i b l emen t . En out re , si l 'on t ient c o m p t e de la rapidité des opéra t ions , not re mé thode de

m a r q u a g e en masse s 'avère d 'un g rand intérêt. Il est dès ma in tenan t poss ib le d 'env isager

d 'ut i l iser une opéra t ion s imi la i re avec d'autres espèces dès lors que les a lev ins suppor tent

le c h o c o s m o t i q u e et le marqueu r f luorescent ut i l isé.

Le p rob lème essent ie l dans la méthodo log ie p roposée conce rne la reconna issance,

e n m i l i e u o u v e r t , d e s p o i s s o n s m a r q u é s dès lors qu ' i l s se m é l a n g e n t aux popu la t i ons

n a t u r e l l e s . En effet, le m a r q u a g e ch im ique d e s t issus m inéra l i sés du sque le t te par des

f l u o r o c h r o m e s ne la i sse a u c u n e m a r q u e ex terne v is ib le , n o t a m m e n t d a n s le cas de la

te t racyc l i ne . Il est donc ind ispensab le de prélever l'un des o rganes c ib les pour contrô ler la

p r é s e n c e ef fect ive du marqueu r et reconnaî t re, ainsi, son carac tè re expér imen ta l . Pour les

é t u d e s e n m i l i eu na tu re l , la p l upa r t d e s po issons of f rent la poss ib i l i t é de p r é l è v e m e n t

d ' é l é m e n t s du de rmosque le t te (écai l les ou rayons de nageoi res) sans sacr i f ier les an imaux .

D a n s le c a s d e s angui l les , les écai l les ne semblent pas in téressantes. En effet, leur peti te

ta i l le et leurs re lat ions in t imes avec le derme rendent dél icat un p ré lèvemen t rapide non

t r auma t i san t . En outre, e l les se déve loppen t assez tard et sont inex is tantes sur les s tades

de d é v e l o p p e m e n t de type "c ivel le" ( JELLYMAN, 1979). Il semb le pré férab le d 'env isager le

p r é l è v e m e n t de rayons d e n a g e o i r e . Cependan t , la t e t racyc l i ne , sens i b l e à la lumiè re ,

r i sque d e d isparaî t re des p ièces squelet t iques s e t rouvant en posi t ion superf ic ie l le dans les

o r g a n i s m e s , n o t a m m e n t l es é c a i l l e s ( L A I R D et S T O T T , 1 9 7 8 ; M E U N I E R et S I R E ,

o b s e r v a t i o n s non publ iées) et les rayons de nageoi re. Il faudra donc ut i l iser un o rgane plus

p r o f o n d , o to l i the ou ver tèbre par e x e m p l e , mais de ce fait, sacr i f ier l 'an imal . Le marquage

d u sque le t t e par des f l uo roch romes , et no tamment la te t racyc l ine, a une forte rémanence

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991)321 : 43 -54 — 51 —

( W E B E R et R IDGWAY, 1967 ; NAGIEC et al., 1985) et ne d isparaî t qu 'à part ir du m o m e n t

o ù la s t r u c t u r e s u p p o r t e s t e l l e - m ê m e d é t r u i t e p a r d e s p h é n o m è n e s d ' é r o s i o n -

reconst ruc t ion . De fait , chez de nombreux Té léos téens , par t i cu l iè rement chez l 'anguil le, les

r é g i o n s p é r i c h o r d a l e s d u c o r p s v e r t é b r a l ne s o n t p r a t i q u e m e n t p a s s o u m i s e s à c e s

p rocessus . Il est donc permis d 'espérer ret rouver le ma rqueu r sur les ver tèbres après un

t e m p s assez long . Il en v a de m ê m e d e s o to l i thes qui son t des s t ruc tu res à c ro issance

cont inue qui ne p résen ten t pas ou peu (MUGIYA et U C H I M U R A , 1989) de p h é n o m è n e s d e

résorpt ion. Dans les deux cas , il se ra sans dou te nécessa i re d e préparer des t ranches d e

matér ie l non déca lc i f i é pour avoi r une me i l l eu re qua l i t é d ' o b s e r v a t i o n du marqueur . E n

r e v a n c h e , en m i l i eu f e r m é con t rô l é , d è s lo rs q u e l 'on a la ma î t r i se d e s d é v e r s e m e n t s

d ' a n i m a u x d a n s d e s b a s s i n s , l e s d i f f i c u l t é s d e r e c o n n a i s s a n c e d e s i n d i v i d u s

expér imen taux , e x p o s é e s c i -dessus , sont cons idé rab lemen t d im inuées .

En p ra t i que , à la su i te de l ' expér imenta t ion "g rand c h a m p " trois lots d 'angu i l le t tes

cap tu rés l 'un à K e m b s et les deux aut res à Rh inau sur le Rh in , respec t i vemen t en Avr i l

1990 et en Jui l le t et Oc tob re 1990 , ont révé lé la p r é s e n c e d e c inq s p é c i m e n s avec d e s

o to l i t hes m a r q u é s par la t e t racyc l i ne . La c o m p a r a i s o n d e c e s o to l i t hes a v e c c e u x d e s

c ivel les expé r imen ta les mont ren t des m a r q u e s f l uo rescen tes ident iques (f ig. 1A et 3). U n

résu l ta t posi t i f d e c a p t u r e d 'angu i l l e t tes m a r q u é e s , q u i n z e mo is ap rès un a lev inage d e

c i ve l l es t ra i t ées à la t e t r acyc l i ne par b a l n é a t i o n - c h o c o s m o t i q u e , d a n s un é t a n g de la

S o m m e (mi l ieu semi - fe rmé) v ient con f i rmer la fa isabi l i té et l ' intérêt de cet te mé thode d e

m a r q u a g e en masse pour des expér iences de d y n a m i q u e de popu la t ions i ch tyennes m ê m e

en mi l ieu ouver t .

4. C O N C L U S I O N

La t echn ique du m a r q u a g e vital en m a s s e de j eunes s tades de déve loppemen t d e

po issons est à l 'heure ac tue l le en plein d é v e l o p p e m e n t c o m m e le mon t re l 'enr ich issement

régul ier de la b ib l iograph ie par de nouveaux résul ta ts de ce type . Cependan t , il ressort d e

ces d i f férentes é tudes que les auteurs pra t iquent ce que nous appe l le rons la "ba lnéat ion

s imp le" fa isant in terveni r des doses op t ima les de ma rqueu r (co r respondant à cel les établ ies

d a n s les expé r i ences d 'admin is t ra t ion par in ject ion) avec d e s t e m p s d 'ac t ion moyens d e

l 'ordre de 2 4 heures .

La m i s e au po in t d ' u n e b a l n é a t i o n a v e c c h o c o s m o t i q u e s i m u l t a n é cons t i t ue un

appor t c o n s é q u e n t à la m é t h o d e en permet tan t d e rédu i re d 'env i ron 3 à 400 fois la du rée

de la ba lnéa t ion . Le succès sur le p lan techn ique de la mise en œ u v r e de not re expér ience

en g r a n d c h a m p m o n t r e qu ' i l d e v i e n t é g a l e m e n t p o s s i b l e d e t ra i te r un n o m b r e é l e v é

d 'an imaux juvén i les avec une main d'oeuvre l imi tée d a n s un t e m p s court . Les appl icat ions

d 'une tel le t echn ique , soit pour des t ravaux expé r imen taux sur la c ro issance , soit pour d e s

é tudes éco log iques , devra ien t êt re déve loppées sur d 'au t res e s p è c e s .

S a n s s o u s - e s t i m e r les d i f f i cu l tés i n h é r e n t e s à la r e c o n n a i s s a n c e in natura d e s

s p é c i m e n s m a r q u é s par rappor t aux n o n - m a r q u é s , not re t echn ique de m a r q u a g e vital e n

m a s s e par b a l n é a t i o n rap ide de j e u n e s a lev ins do i t pouvo i r con t r ibuer , d a n s ce r t a i nes

s i tua t ions , à l ' amé l io ra t ion d e s p ro toco les e x p é r i m e n t a u x , so i t e n mi l ieu ouve r t , soit e n

m i l i eu f e r m é . En tou t é ta t de c a u s e e l le p r é s e n t e un in té rê t n o n nég l i geab le d a n s les

t ravaux de laborato i re .

5. R E M E R C I E M E N T S

Nous exp r imons notre grat i tude à M. MABIT, D i rec teur des Étab l i ssements B E A U R

(44400 R E Z É ) pou r les fac i l i tés qu' i l a m ises à no t re d i spos i t i on d a n s la réa l isat ion d u

m a r q u a g e d e s 5 0 0 kg de c ive l les.

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991) 321 : 43 -54 — 5 2 —

N o u s r e m e r c i o n s les É t a b l i s s e m e n t s S A N D O Z qui on t f ou rn i g r a c i e u s e m e n t le

c h l o r h y d r a t e de te t racyc l ine.

No t re t ravai l a bénéf ic ié d 'une a ide du Conse i l Supér ieur de la Pêche : contrat du 30

ju in 1988 .

6. B I B L I O G R A P H I E

A M E N D D.F., F E N D E R D.C., 1976. Uptake of bovine se rum a lbumin by ra inbow trout f rom

hype rosmo t i c so lu t ions : a mode l for vacc inat ing f ish. Science, 192, 793 -794 .

B E A M I S H R.J., M c F A R L A N E G.A., 1983. The forgot ten requ i rement for age val idat ion in

f i sher ies biology. Trans. Am. Fish. Soc, 112, 735-743.

B E A M I S H R.J., M c F A R L A N E G.A., DHILTON D.E., 1984. Use of oxy te t racyc l ine and other

m e t h o d s to va l i da te a m e t h o d of age de te rm ina t i on for sab le f i sh in Proc. In tern .

Sab le f i sh Sympos . , A laska S e a Grant Report , 83-3 , 95-116.

B O I V I N G. , M E U N I E R F.J., 1978 . Bone format ion and f luorescent label l ing in te leost f ishes.

Symp. "Tissus calcifiés des Poissons", Brest , 12-13 Mai 1978, 5p .

B O U J A R D T., M E U N I E R F.J., 1 9 9 1 . Cro issance de l 'épine pectora le , h is to log ie osseuse et

d i m o r p h i s m e s e x u e l c h e z l ' a t i p a , Hoplosternum littorale H a n c o x , 1 8 2 8

(Ca l l i ch thy idae , S i lu r i fo rme) . Cybium, 15, 55-68.

C A M P A N A S.E. , N E I L S O N J.D. , 1982 . Daily g rowth increments in otol i ths of s tarry f lounder

(Platichthys stellatus) a n d t h e in f luence of s o m e env i r onmen ta l va r i ab les in the i r

p r o d u c t i o n . Can. J. Fish. Aquat. Sci., 39, 937-942 .

C H A M P I G N E U L L E A., E S C O M E L J . , L A U R E N T Ph. , 1987. M a r q u a g e d 'omb les cheval ier

(Salvelinus alpinus) de pet i te tai l le par in ject ion de m ic romarques magné t i sées . Bull.

Fr. Pêche Pise, 304, 2 2 - 3 1 .

C H O A T E S J . , 1964. Use of te t racyc l ine drugs to mark advanced fry and f inger l ing brook

t rou t (Salvelinus fontinalis). Trans. Amer. Fish. Soc, 93, 3 0 9 - 3 1 1 .

D A B R O W S K I K., T S U K A M O T O K., 1986. Tetracycl ine tagging in co regon id e m b r y o s and

la rvae . J. Fish Biol., 29, 691 -698 .

D E K K E R W., 1986. A g e read ing of european ee ls us ing tet racycl ine label led otol i ths. Inter.

Coun. Explor. Sea, 16, 1-14.

E L I E P., L E C O M T E - F I N I G E R R., C A N T R E L L E I., C H A R L O N N., 1 9 8 2 . Dé f in i t i on d e s

l imi tes d e s di f férents s tades p igmenta i res durant la phase civel le d'Anguilla anguilla

L. (Po i sson té léos téen angu i l l i fo rme) . Vie Milieu, 32, 149-157.

H E R B I N G E R C M . , N E W K I R K G.F. , L A N E S S T . , 1990 . I nd i v idua l m a r k i n g of a t lan t i c

s a l m o n : eva lua t ion of co ld b rand ing a n d jet in ject ion of a lc ian b lue in severa l f in

loca t ions . J. Fish Biol., 36, 99-101

H E T T L E R W.F. , 1984. Mark ing otol i ths by immers ion of mar ine f ish larvae in te t racyc l ine.

Trans. Am. Fish. Soc, 113, 370 -373 .

J A K O B S O N J . , 1970. O n f ish and tagg ing . Oceanogr. Mar. Biol. Ann. Rev., 8, 457 -499 .

J E L L Y M A N D . J . , 1 9 7 9 . S c a l e d e v e l o p m e n t a n d a g e d e t e r m i n a t i o n in N e w Z e a l a n d

f r eshwa te r eels (Anguilla spp. ) . N. Z. J. Mar. Freshwater Res., 13, 23 -30 .

J O N E S I.W., 1969 . No tes on mark ing sa lmon f inger l ings with te t racyc l ine. Ann. Progr. Rept.

Oregon. Fish. Com., 6 p.

K I N G S F O R D M.J. , M I L I C I C H M.J. , 1987 . Preset t lement phase of Parika scaber (Pisces :

M o n a c a n t h i d a e ) : a t empe ra te reef f ish. Mar. Ecol. Prog. Ser, 36, 65 -79 .

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991)321 : 43 -54 — 53 —

K O B A Y A S H I S. , Y U K I R., F U R I T., K O S U G I Y A M A T., 1 9 6 4 . C a l c i f i c a t i o n in f i s h and

she l l f i sh . I - Te t racyc l ine label l ing pa t t e rns of s ca l e , c e n t r u m and oto l i th in young

go ld f i sh . Bull. Jap. Soc. Sci. Fish., 30, 6 -13 .

L A I R D L .M . , S T O T T B., 1 9 7 8 . M a r k i n g a n d t a g g i n g in T. B a g e n a l Edt . , M e t h o d s fo r

a s s e s s m e n t of f ish product ion in f resh wa te rs , IBP H a n d b o o k NO 3, Ox fo rd , 84-100 .

L E A R Y D.F., M U R P H Y G . I . , 1 9 7 5 . A s u c c e s s f u l m e t h o d for t a g g i n g t h e s m a l l , f rag i le

engrau l id (Stolephorus purpureus). Trans. Am. Fish. Soc, 104, 53-55 .

L O P E Z E., 1 9 7 0 . L'os ce l lu la i re d 'un p o i s s o n t é l é o s t é e n Anguilla anguilla L. I - Étude

h is tocy to log ique et h is tophys ique. Z. Zeli, 109, 5 5 2 - 5 6 5 .

M c F A R L A N E G.A., B E A M I S H R.J., 1987. Se lec t ion of d o s a g e s of oxyte t racyc l ine f o r a g e

va l idat ion s tud ies . Can. J. Fish. Aquat. Sci., 44, 9 0 5 - 9 0 9 .

M E U N I E R F., 1 9 7 2 . M a r q u a g e s s i m p l e s et m a r q u a g e s m u l t i p l e s d u t i s s u o s s e u x d e

q u e l q u e s T é l é o s t é e n s par d e s s u b s t a n c e s f l u o r e s c e n t e s . C. R. Acad. Sci., 275,

1685-1688 .

M E U N I E R F., 1974 . La techn ique de m a r q u a g e vital des t issus sque le t t iques des po issons .

Bull. Fr. Pisc, 255, 51 -57 .

M E U N I E R F.J., 1982 . É tude expér imenta le d e l 'excrét ion de la te t racyc l ine chez la carpe.

Cyprinus carpio L. (Cypr in idae, Té léos téen) . Résu l ta ts pré l iminai res. Cybium, 6 (1),

53-64 .

M E U N I E R F., B O I V I N G. , 1974. Divers aspec ts de la f ixat ion du ch lo rhydra te de te t racyc l ine

sur les t issus sque le t t iques de que lques Té léos téens . Bull. Soc. Zool. Fr., 99, 495 -

504 .

M E U N I E R F.J., B O I V I N G . , 1978 . A c t i o n d e la f l u o r e s c é i n e , de l 'a l i zar ine , du b leu d e

ca lcé ine et de d iverses doses de te t racyc l ine sur la c ro issance de la truite et de la

ca rpe . Ann. Biol. Anim. Bioch. Biophys., 18, 1293 -1308 .

M E U N I E R F.J., P A S C A L M., 1 9 8 1 . É tude e x p é r i m e n t a l e d e la c r o i s s a n c e cyc l i que d e s

r a y o n s d e n a g e o i r e de la c a r p e (Cyprinus carpio L. ) . R é s u l t a t s p r é l i m i n a i r e s .

Aquaculture, 26, 23 -40 .

M I L C H R.A., R A L L D.P., T O B I E J .E. , 1957. Bone local izat ion of the te t racyc l ines . J. Nat.

Cancer Inst, 19, 8 7 - 9 1 .

M O S E G A A R D H., S T E F F N E R N.G. , R A G N A R S S O N B., 1 9 8 7 . M a n i p u l a t i o n o f oto l i th

mic ros t ruc tu res as a m e a n of mass -mark i ng sa lmon id yolk sac fry. Proc. 5th Congr.

Europ. Ichthyol., S tockho lm 1985, 2 1 3 - 2 2 0 .

M U G I Y A Y , U C H I M U R A T., 1989. Oto l i th resorp t ion i n d u c e d by anae rob i c s t r ess in t h e

go ld f i sh , Carassius auratus. J. Fish Biol., 35, 813 -818 .

N A G I E C M., D A B R O W S K I K., N A G I E C C , M U R A W S K A E., 1 9 8 8 . M a s s - m a r k i n g of

co regon id larvae and fry by te t racyc l ine tagg ing of otol i ths. Aquae. Fish. Manag., 19,

171-178.

N A G I E C M., N A G I E C C , 1983. Mark ing of juven i le wh i te f ish (Coregonus lavaretus I.) by

te t racyc l ine ant ib iot ics. Rocznik Nauk Rolniczych, 100, 107-114.

N A G I E C M., N A G I E C C , D A B R O W S K I K., M U R A W S K A E., 1985 . Mark ing o f juven i le

whi te f ish Coregonus lavaretus (L.) w i th te t racyc l ine ant ib iot ics. Acta Ichthyol. Piscat.

13, 47 -57 .

N E I L S O N J .D. , G E E N G.H . , 1982. Dai ly g r o w t h i nc remen ts in oto l i ths of s tarry f lounder

(Platichthys stellatus) a n d the i n f l uence of s o m e e n v i r o n m e n t a l v a r i a b l e s in the i r

p roduc t ion . Can. J. Fish. Aquat. Sci., 39, 937 -942 .

Bull. Fr. Pêche Piscic. (1991)321 : 43 -54 — 5 4 —

R U H L É C , G R I E D E R C , 1 9 8 9 . N o u v e l l e m é t h o d e d e m a r q u a g e v i t a l d ' œ u f s d e

s a l m o n i d é s p a r i n c o r p o r a t i o n o s m o t i q u e d e t e t r a c y c l i n e à la f é c o n d a t i o n :

expé r iences pré l imina i res sur des œufs de truite fario (Salmo trutta fario) et de trui tes

a rc -en-c ie l (Oncorhynchus mykiss). Bull. Fr. Pêche Piscic., 315, 181-188.

S C H M I T T P.D., 1984. Mark ing g rowth increments in otol i ths of larval and juven i le f ish by

i m m e r s i o n in te t racyc l ine to examine t h e rate of increment fo rmat ion . Fish. Bull. 82,

2 3 7 - 2 4 2 .

S I M M O N S D.J. , S I M M O N S N.B., M A R S H A L L J.H. , 1970. The uptake of ca lc ium-45 in the

ace l lu la r boned toad f i sh . Calc. Tiss. Res., 5, 2 0 6 - 2 2 1 .

T S U K A M O T O K., 1985 . M a s s mark ing of ayu eggs and larvae by te t racyc l ine- tagg ing of

o to l i ths . Bull. Jap. Soc. Sci. Fish., 51, 9 0 3 - 9 1 1 .

T S U K A M O T O K., 1988 . Oto l i th tagg ing of a y u embryo wi th f luorescent subs tances . Nip.

Suisan Gak., 54, 1289-1295 .

T S U K A M O T O K., 1989. Otol i th dai ly increments in the Japanese ee l . Nip. Suisan Gak., 55,

1 0 1 7 - 1 0 2 1 .

T S U K A M O T O K., K U W A D A H. , H I R O K A W A J . , O Y A M. , S E K I Y A S . , F U J I M O T O H.,

I M A I Z U M I K., 1 9 8 9 . S i z e - d e p e n d e n t mo r ta l i t y of red sea b r e a m , Pagrus major,

j u ven i l es re leased wi th f luorescent otol i th-tags in News Bay, J a p a n . J. Fish Biol., 35

( supp l . A . ) , 59-69 .

V A N C O I L L I E R., 1 9 6 7 . É t u d e à l 'a ide de te t racyc l i ne de la c ro i ssance pé r i od ique des

éca i l les de Té léos téens . Nat. Can., 94, 29 -58 .

W E B E R D.D. , R I D G W A Y G.J . , 1962 . The depos i t i on of te t racyc l ine d r u g s in b o n e and

sca les of f ish and its poss ib le use for mark ing. Progr. Fish. Cult, 24, 150-155.

W E B E R D.D., R I D G W A Y G.J . , 1967 . Marking pacif ic sa lmon wi th te t racyc l ine ant ib iot ics.

J. Fish. Res. Brd. Can., 24, 849 -865 .

W I L S O N C.A. , B E C K M A N D.W., D E A N J.M., 1987. Ca lce in as a f l uo rescen t m a r k e r of

o to l i ths of larval a n d juven i le f ish. Trans. Am. Fish. Soc, 116, 668 -670 .