TCNICAS DE CULTURA EM MICOLOGIA
Prof. Carlos Fernando dos Santos CRBM 3158
TCNICAS DE CULTURAPREPARO DE MEIOS DE CULTURA
gar Sabouraud Clorafenicol (SAB)Meio de enriquecimento - Semeia
vrios tipos de fungos. Na microbiologia meio seletivo
gua destilada.......1000ml(isentas de elementos
nutricionais)
Peptona................10gcarne degradados)
(Peptona de carne pedaos de
Dextrose...............40g (Carboidratos)
gar-gar.............20g (15 a 20g, por litro)
Clorafenicol...........50mg* pH.......................4,0 a 5,0
(Antibitico que inibe o crescimento bacteriano ou gentamicina
60mg)
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gar Sabouraud Clorafenicol (SAB)
TCNICAS DE CULTURAPREPARO DE MEIOS DE CULTURA
gar Batata Dextrose (BDA)(Meio de enriquecimento, infuso da
batata, no bom usar quando se quer crescimento de
microorganismo)
gua destilada.........500ml Infuso de batata.....500ml
Glicose....................10g (Fonte de carboidrato)
gar-gar.............15g (Dar consistncia)
Clorafenicol...........50mg* (Inibir o crescimentobacteriano)
pH.......................4,0 a 5,0
(pH cido)
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gar Batata Dextrose (BDA)
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gar Czapek (CZK)(Enriquecimento, para fungos presentes no solo e
diferencial, quando quer crescer fungos geoflico(afinidade com a
terra))
gua destilada.............................1000ml
Sacarose......................................30g (fonte
decarboidrato)
Nitrato de sdio...........................3g Fosfato dibsico de
potssio........1,0g Sulfato de magnsio....................0,5g
Cloreto de potssio......................0,5g Sulfato de
ferro............................0,01g
gar-gar....................................15g
Clorafenicol.................................50mg/L*
pH...............................................4,0 a 5,0
TCNICAS DE CULTURAPREPARO DE MEIOS DE CULTURA gar
Czapek (CZK)
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gar Mycosel (MYC)(Seletivo para dermatfilos)
gua destilada...................1000ml
Peptona.............................10g
Glicose...............................10g
gar-gar..........................15g
Ciclo-heximida...................0,4g (Inibe ocrescimento de fungos
saprofitos)
Clorafenicol.......................0,05g
pH.....................................4,0 a 5,0
(cido)
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gar Mycosel (MYC)
TCNICAS DE CULTURAPREPARO DE MEIOS DE CULTURA
gar Infuso de Crebro e Corao Bovino (BHI)(Meio seletivo, para
fungos que crescem em tecidos profuntos)
gua destilada............................1000ml Infuso de Crebro
e Corao(Difco)............................37g
gar-gar...................................20g
Clorafenicol.................................0,05g
pH...............................................7,4 (pHbsico)
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gar Infuso de Crebro e Corao Bovino (BHI)
IMPORTANTE Incubao a 35C!
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Meios Semi-slidos CaldosSemi-slidos
Caldos
TCNICAS DE CULTURAPREPARO DE MEIOS DE CULTURA
Observaes Importantes
Ferver meios que contm gar-gar Adicionar o antibitico somente
aps fervura do meio. Desprezar meios que queimarem Autoclavao ideal
=121C por 20 min.
TCNICAS DE CULTURA
ASSEPSIA E ESTERILIZAO Vidrarias Detergentes neutros Autoclave
121C/20min Meios de cultura Autoclave 121C/20min Bancadas lcool 70%
Hipoclorito de sdio Cmara de fluxo laminar lcool 70%, Luz UV 20
min. Filtro de ar milipore*
TCNICAS DE CULTURAASSEPSIA E ESTERILIZAO
Hipoclorito de Sdio
Desinfeco Pervia da Bancada Bico de Bunsein
TCNICAS DE CULTURADESINFECO
Vidrarias Meios de cultura utilizados Filtro milipore Caixas de
descarte (Descarpack)* Autoclave 121C durante 20 minutos.
TCNICAS DE CULTURADESINFECO E ESTERILIZAO
Autoclave 121C durante 20 minutos
Interior do Autoclave
Termmetro Barmetro
Autoclave Vertical
TCNICAS DE CULTURACINTICA DO CRESCIMENTO FNGICO LevedurasFisso
binria / Gemulao Colnias circulares com bordas variveis
Cicatriz gemular
Bordos Diferencialdos
Fisso binria / Gemulao
TCNICAS DE CULTURACINTICA DO CRESCIMENTO FNGICO Fungos
Filamentososde maturao distintas
Centrfugo Zonas
TCNICAS DE CULTURAENRIQUECIMENTO PARA ISOLAMENTO DE FUNGOS A
PARTIR DE AMOSTRAS SLIDAS
Caldo YG 25ml Balo de 250ml Rolha de gaze + algodo 25g da
amostra a ser analisada Crescimento de 5-7 dias Agitao constante(*)
Temperatura ambiente(*)
TCNICAS DE CULTURAENRIQUECIMENTO PARA ISOLAMENTO DE FUNGOS A
PARTIR DE AMOSTRAS SLIDAS
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS
Tcnica de pique central em placa de petri Tcnica de piques em
gradiente em PP. Tcnica de estrias em tubo com meio inclinado
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS
Pique Central
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS
TCNICAS DE CULTURAISOLAMENTO DE FUNGOS PS-CRESCIMENTO EM CALDO
ENRIQUECIDO
Placas de petri com gar SAB ou BDA Ala de platina em alquota
Cmara de fluxo laminar esterilizadalcool 70% Luz UV 20 min.
Piques em gradiente na placa de petri
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOSPiques em
Gradiente
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOSPique em Meio
Inclinado
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE LEVEDURAS
Tcnica de estrias em placa de petri Tcnica de estrias em tubo
com meio inclinado
TCNICAS DE CULTURASEMEIO DE LEVEDURAS
Tcnica de estrias em placa de petri Tcnica de estrias em tubo
com meio inclinado
TCNICAS DE CULTURAISOLAMENTO DE FUNGOS PS-CRESCIMENTO EM CALDO
ENRIQUECIDO
Cmara de fluxo laminar esterilizada
lcool 70% Luz UV 20 min.
OBRIGADO!
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