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FEBRERO 2013

Técnicas Histológicas y Microscopio

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Page 1: Técnicas Histológicas y Microscopio

FEBRERO 2013

Page 2: Técnicas Histológicas y Microscopio

DESCRIBE LAS DESCRIBE LAS CARACTERÍSTICAS CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS, MICROSCÓPICAS,

ULTRAESTRUCTURALES ULTRAESTRUCTURALES

Y LAS TÉCNICAS PARA EL Y LAS TÉCNICAS PARA EL PROCESAMIENTO, PROCESAMIENTO, OBSERVACIÓN Y OBSERVACIÓN Y

DIAGNÓSTICO HISTOLÓGICO DIAGNÓSTICO HISTOLÓGICO DE LAS CÉLULAS Y TEJIDOS DE LAS CÉLULAS Y TEJIDOS

BÁSICOS. BÁSICOS.

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1- EXAMEN INMEDIATO O IN 1- EXAMEN INMEDIATO O IN VIVO:VIVO:

A) OBSERVACIÓN DE CÉLULAS A) OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EN EL ORGANISMO VIVO: EN EL ORGANISMO VIVO: ESPERMATOGRAMA.ESPERMATOGRAMA.

B) OBSERVACIÓN DE CÉLULAS B) OBSERVACIÓN DE CÉLULAS

QUE SE MANTIENEN VIVAS QUE SE MANTIENEN VIVAS LUEGO DE SER QUITADAS DEL LUEGO DE SER QUITADAS DEL ORGANISMOORGANISMO

2- EXAMEN MEDIATO O POST-2- EXAMEN MEDIATO O POST-MORTEN:MORTEN:

REQUIERE DE LA MUERTE REQUIERE DE LA MUERTE CELULAR Y SUPONE SEGUIR CELULAR Y SUPONE SEGUIR UNA SERIE DE PASOS, LAS UNA SERIE DE PASOS, LAS TÉCNICAS HISTOLÓGICASTÉCNICAS HISTOLÓGICAS

Page 5: Técnicas Histológicas y Microscopio

SON LOS DIFERENTES SON LOS DIFERENTES

PROCEDIMIENTOS, QUE SE PROCEDIMIENTOS, QUE SE

USAN PARA USAN PARA MANTENERMANTENER, EN LO , EN LO

POSIBLE, EL ASPECTO DE LAS POSIBLE, EL ASPECTO DE LAS

ESTRUCTURAS HISTOLÓGICAS ESTRUCTURAS HISTOLÓGICAS

DEL ORGANISMO VIVO, DEL ORGANISMO VIVO,

TRANSFORMÁNDOLAS EN TRANSFORMÁNDOLAS EN

DELGADOS CORTES DELGADOS CORTES

COLOREADOS QUE PUEDAN COLOREADOS QUE PUEDAN

POSTERIORMENTE SER POSTERIORMENTE SER

OBSERVADOS AL MICROSCOPIO.OBSERVADOS AL MICROSCOPIO.

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• FIJACIFIJACIÓÓNN• DESHIDRATACIÓNDESHIDRATACIÓN• ACLARAMIENTOACLARAMIENTO• INFILTRACIÓN E INFILTRACIÓN E

INCLUSIÓNINCLUSIÓN• SECCIÓN O SECCIÓN O

CORTECORTE• COLORACIÓNCOLORACIÓN• MONTAJEMONTAJE

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EN ESTE PROCEDIMIENTO SE INTRODUCE EL TEJIDO EN SUSTANCIAS QUE RETARDAN SUS ALTERACIONES Y CONSERVAN SU CONFIGURACIÓN NORMAL.

FORMALDEHIDO AL 10%. FORMALDEHIDO AL 10%.

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CONSISTE EN INTRODUCIR EL TEJIDO FIJADO EN CONSISTE EN INTRODUCIR EL TEJIDO FIJADO EN

FRASCOS DE FRASCOS DE ALCOHOL ABSOLUTOALCOHOL ABSOLUTO A A

CONCENTRACIONES ASCENDENTES Y TIEMPOS CONCENTRACIONES ASCENDENTES Y TIEMPOS

DETERMINADOS. PARA ELIMINAR EL AGUA.DETERMINADOS. PARA ELIMINAR EL AGUA.

70% 80% 95% 100% 100% 100%

30´ 45´ 45´ 60´ 60´ 60´

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ESTE PASO SUSTITUYE EL ALCOHOL POR EL ESTE PASO SUSTITUYE EL ALCOHOL POR EL XILOL XILOL

(VUELVE TRANSPARENTE AL TEJIDO(VUELVE TRANSPARENTE AL TEJIDO)),, QUE ES UN QUE ES UN

LÍQUIDO MISCIBLE CON LA PARAFINA. LÍQUIDO MISCIBLE CON LA PARAFINA.

XILOL XILOL

45´ 45´

Page 10: Técnicas Histológicas y Microscopio

ES LA FORMACIÓN DEL BLOQUE DE PARAFINA ES LA FORMACIÓN DEL BLOQUE DE PARAFINA (MEDIANTE LA INCLUSIÓN DEL TEJIDO EN ÉSTA) (MEDIANTE LA INCLUSIÓN DEL TEJIDO EN ÉSTA) RECIBIENDO EL NOMBRE DE RECIBIENDO EL NOMBRE DE TACOTACO

Page 11: Técnicas Histológicas y Microscopio

CONSISTE EN CORTAR EL TEJIDO EN CONSISTE EN CORTAR EL TEJIDO EN SECCIONES LO SUFICIENTEMENTE DELGADAS SECCIONES LO SUFICIENTEMENTE DELGADAS PARA PERMITIR EL PASO DE LA LUZ, EL CORTE PARA PERMITIR EL PASO DE LA LUZ, EL CORTE SE REALIZA CON UN MICRÓTOMO.SE REALIZA CON UN MICRÓTOMO.

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Page 13: Técnicas Histológicas y Microscopio

EL CORTE ES LLEVADO A UN RECIPIENTE EL CORTE ES LLEVADO A UN RECIPIENTE

BAÑO DE FLOTACIÓN (40º C)BAÑO DE FLOTACIÓN (40º C)

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LOS CORTES SE COLOCAN SOBRE UN PORTAOBJETOS LOS CORTES SE COLOCAN SOBRE UN PORTAOBJETOS Y LUEGO SE TIÑEN MEDIANTE COLORACIONES Y LUEGO SE TIÑEN MEDIANTE COLORACIONES HIDROSOLUBLES QUE PERMITEN DIFERENCIAR LOS HIDROSOLUBLES QUE PERMITEN DIFERENCIAR LOS DIVERSOS COMPONENTES CELULARES.DIVERSOS COMPONENTES CELULARES.

Page 15: Técnicas Histológicas y Microscopio

SE COLOCA EN UNA LAMINA PORTA OBJETO SE COLOCA EN UNA LAMINA PORTA OBJETO

Y SE LLEVA A LA Y SE LLEVA A LA ESTUFAESTUFA DURANTE DURANTE 15 a 15 a

20´ 20´ AA 80ºC 80ºC

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Extraer parafina Hidratar Colorear

2 tubos2 tubos

15´15´

100%100% 100%100% 100%100% 70%70%70%70%

70%70% 100%100% 100%100%

5´5´ 5´5´ 5´5´ 5´5´

5 Veces in/out5 Veces in/out

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UNA VEZ COLOREADA LA LAMINA, SE USA UNA VEZ COLOREADA LA LAMINA, SE USA MARTEXMARTEX

SE COLOCA UN CUBREOBJETO Y EL TEJIDO QUEDA SE COLOCA UN CUBREOBJETO Y EL TEJIDO QUEDA

LISTO PARA OBSERVARLO AL MICROSCOPIOLISTO PARA OBSERVARLO AL MICROSCOPIO

MARTEXMARTEX

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• LA HEMATOXILINA ES UN LA HEMATOXILINA ES UN COLORANTE BÁSICO QUE COLORANTE BÁSICO QUE TIÑE DE COLOR AZULOSO TIÑE DE COLOR AZULOSO A LOS COMPONENTES A LOS COMPONENTES ÁCIDOS DE LA CÉLULA.ÁCIDOS DE LA CÉLULA.

• LA EOSINA ES UN LA EOSINA ES UN COLORANTE ACIDO QUE COLORANTE ACIDO QUE TIÑE DE COLOR ROSADO TIÑE DE COLOR ROSADO A LOS COMPONENTES A LOS COMPONENTES BÁSICOS DE LA CÉLULA.BÁSICOS DE LA CÉLULA.

CORTE DE RIÑÓN H-E

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Ovario De Gata Hematoxilina -Eosina

Ganglio Raquídeo Plata

Hígado Carmín de Best

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Raíz de cebolla

Hematoxilina Férrica

Riñón

Hematoxilina-Eosina

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UN MICROSCOPIO ES UN DISPOSITIVO UN MICROSCOPIO ES UN DISPOSITIVO ENCARGADO DE HACER VISIBLES ENCARGADO DE HACER VISIBLES OBJETOS MUY PEQUEÑOS. OBJETOS MUY PEQUEÑOS. 

ES EL INSTRUMENTO MAS IMPORTANTE ES EL INSTRUMENTO MAS IMPORTANTE EN LA HISTOLOGÍA , DEBIDO AL EN LA HISTOLOGÍA , DEBIDO AL TAMAÑO DE LAS ESTRUCTURAS TAMAÑO DE LAS ESTRUCTURAS ANALIZADAS.ANALIZADAS.

SE CLASIFICA SEGÚN EL TIPO DE SE CLASIFICA SEGÚN EL TIPO DE FUENTE LUMINOSA QUE UTILICE.FUENTE LUMINOSA QUE UTILICE.

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LA CALIDAD DE LA IMAGEN AL MICROSCOPIO LA CALIDAD DE LA IMAGEN AL MICROSCOPIO NO SÓLO DEPENDE DE LA CAPACIDAD DE LA NO SÓLO DEPENDE DE LA CAPACIDAD DE LA LENTE PARA AMPLIFICARLENTE PARA AMPLIFICARSINO DE SU SINO DE SU RESOLUCIÓNRESOLUCIÓN QUE ES LA QUE ES LA CAPACIDAD DE LA LENTE PARA MOSTRAR QUE CAPACIDAD DE LA LENTE PARA MOSTRAR QUE DOS OBJETOS DISTINTOS ESTAN SEPARADOS DOS OBJETOS DISTINTOS ESTAN SEPARADOS POR UNA DISTANCIAPOR UNA DISTANCIA

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ÓPTICOÓPTICO•ÓPTICO SIMPLEÓPTICO SIMPLE•ÓPTICO ÓPTICO COMPUESTOCOMPUESTO

ELECTRÓNICOELECTRÓNICO•ELECTRÓNICO DE ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN TRANSMISIÓN •ELECTRÓNICO DE ELECTRÓNICO DE BARRIDOBARRIDO

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ULTRAMICROSCOPIO.ULTRAMICROSCOPIO.MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE

FASE. FASE. MICROSCOPIO DE INTERFERENCIA.MICROSCOPIO DE INTERFERENCIA.MICROSCOPIO CONFOCAL.MICROSCOPIO CONFOCAL.MICROSCOPIO DE POLARIZACIÓN.MICROSCOPIO DE POLARIZACIÓN.MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA.MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA.

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CONSISTE EN UNA CONSISTE EN UNA FUENTE FUENTE LUMINOSA, UN LUMINOSA, UN CONDENSADOR CONDENSADOR QUE ENFOCA LOS QUE ENFOCA LOS RAYOS DE LUZ RAYOS DE LUZ SOBRE LA SOBRE LA MUESTRA, UNA MUESTRA, UNA PLATINA EN LA PLATINA EN LA CUAL SE COLOCA CUAL SE COLOCA LA MUESTRA, UN LA MUESTRA, UN OBJETIVO Y UN OBJETIVO Y UN OCULAR .OCULAR .

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SISTEMA ÓPTICOSISTEMA ÓPTICO

SISTEMA DE SISTEMA DE ILUMINACIÓNILUMINACIÓN

SISTEMA SISTEMA MECÁNICOMECÁNICO

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OCULAROCULAR

OBJETIVOSOBJETIVOS

FUENTE DE LUZFUENTE DE LUZ

CONDENSADORCONDENSADOR

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Page 33: Técnicas Histológicas y Microscopio

LENTE LENTE SITUADA SITUADA CERCA DE LA CERCA DE LA PREPARACIÓN. PREPARACIÓN. AMPLÍA LA AMPLÍA LA IMAGEN DE IMAGEN DE ÉSTA 4X, ÉSTA 4X, 10X,40X,100X.10X,40X,100X.

Page 34: Técnicas Histológicas y Microscopio

SE ENCARGA DE SE ENCARGA DE CONCENTRAR EL CONCENTRAR EL HAZ DE LUZ HAZ DE LUZ SOBRE LA SOBRE LA PREPARACIÓN.PREPARACIÓN.

Page 35: Técnicas Histológicas y Microscopio

BASEBASE

COLUMNACOLUMNA

PLATINAPLATINA

CABEZALCABEZAL

BRAZOBRAZO

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REVOLVERREVOLVER

PLATINAPLATINA

TORNILLO TORNILLO MACROMÉTRICOMACROMÉTRICO

TORNILLO TORNILLO MICROMÉTRICOMICROMÉTRICO

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TORNILLO TORNILLO MACROMÉTRICOMACROMÉTRICO

TORNILLO TORNILLO MICROMÉTRICOMICROMÉTRICO

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USA UN HAZ DE USA UN HAZ DE ELECTRONES,PARA ELECTRONES,PARA PRODUCIR LA IMAGEN. PRODUCIR LA IMAGEN. ESTO PERMITE OBTENER ESTO PERMITE OBTENER UNA MAYOR UNA MAYOR AMPLIFICACIÓN Y AMPLIFICACIÓN Y RESOLUCIÓN. LA IMAGEN RESOLUCIÓN. LA IMAGEN PUEDE PLASMARSE EN PUEDE PLASMARSE EN UNA PELÍCULA Y UNA PELÍCULA Y PRODUCIR PRODUCIR MICROGRAFÍAS EN MICROGRAFÍAS EN BLANCO Y NEGRO.BLANCO Y NEGRO.

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PROPORCIONA UNA PROPORCIONA UNA IMAGEN IMAGEN TRIDIMENSIONAL DEL TRIDIMENSIONAL DEL ESPÉCIMEN.ESPÉCIMEN.

EL HAZ DE ELECTRONES EL HAZ DE ELECTRONES NO ATRAVIESA EL NO ATRAVIESA EL OBJETO, POR LO QUE OBJETO, POR LO QUE NO ES NECESARIO NO ES NECESARIO UTILIZAR CORTES UTILIZAR CORTES ULTRA FINOS.ULTRA FINOS.

LA IMAGEN OBTENIDA LA IMAGEN OBTENIDA ES OBSERVADA EN UNA ES OBSERVADA EN UNA PANTALLA DE TVPANTALLA DE TV

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M.OM.O M.E.TM.E.T M.E.BM.E.B

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MICROSCOPIO MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE ELECTRÓNICO DE

BARRIDOBARRIDO

MACROSCÓPICOMACROSCÓPICOMICROSCOPIO MICROSCOPIO

ÓPTICOÓPTICO

Page 44: Técnicas Histológicas y Microscopio

• CONOCER LA ESTRUCTURA , CONOCER LA ESTRUCTURA , ORGANIZACIÓN Y FUNCIONAMIENTO ORGANIZACIÓN Y FUNCIONAMIENTO DE CÉLULAS, TEJIDOS, ÓRGANOS, DE CÉLULAS, TEJIDOS, ÓRGANOS, NOS PERMITIRÁ COMPRENDER EN UN NOS PERMITIRÁ COMPRENDER EN UN FÚTURO, EL ORIGEN DE LOS FÚTURO, EL ORIGEN DE LOS CUADROS PATOLÓGICOS DE CUADROS PATOLÓGICOS DE NUESTROS PACIENTES, LOS QUE SE NUESTROS PACIENTES, LOS QUE SE INICIARAN CON ALTERACIONES A INICIARAN CON ALTERACIONES A NIVEL CELULAR.NIVEL CELULAR.