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UNIVERSIDAD POLITÉCNICA ESTATAL DEL CARCHI
TULCÁN - ECUADOR
AÑO: 2018
Contenido PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE HUMEDAD EN MUETRAS
FOLIARES ....................................................................................................................................... 4
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE CENIZA Y MATERIA ORGÁNICA
EN MUESTRAS FOLIARES ............................................................................................................... 9
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO CALCINACIÓN Y DIGESTIÓN ÁCIDA DE MUESTRAS
FOLIARES ..................................................................................................................................... 14
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACÍON DE FÓSFORO EN MUESTRAS
FOLIARES. .................................................................................................................................... 19
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACÍON DE NITRÓGENO EN MUESTRAS
FOLIARES- MÉTODO DE KJELDAHL .............................................................................................. 30
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE K, Ca Y Mg EN MUESTRAS
FOLIARES ..................................................................................................................................... 39
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE Fe, Cu, Zn Y Mg EN MUESTRAS
FOLIARES ..................................................................................................................................... 49
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO OBTENCIÓN DEL EXTRACTO DE SUELO CON OLSEN
MODIFICADO ............................................................................................................................... 58
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE pH EN SUELOS ....................... 61
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE MATERIA ORGÁNICA Y
NITRÓGENO TOTAL EN SUELOS- MÉTODO DE WALKLEY BLACK ................................................. 68
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE FÓSFORO ASIMILABLE EN
SUELOS-MÉTODO OLSEN MODIFICADO ...................................................................................... 78
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE K, Ca Y Mg ASIMILABLES EN
SUELOS-MÉTODO OLSEN MODIFICADO ...................................................................................... 90
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DETERMINACIÓN DE Fe, Cu, Zn y
Mn ASIMILABLES EN SUELOS – MÉTODO OLSEN MODIFICADO ............................................... 101
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE
HUMEDAD EN MUETRAS FOLIARES
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la determinación de humedad en muestras
foliares.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para determinar humedad en muestras foliares.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
AOAC 930.04. Loss on Drying (Moisture) in Plants
5.GENERAL
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, corno parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas puede hacer referencia a otros documentos concretos,
indicando los apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Humedad. - Cantidad de agua presente en una muestra. Es la relación
entre el agua contenida en los poros de la muestra, o agua libre, en una
masa dada de material respecto a la masa de sólidos que constituyen la
muestra.
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica.
basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
ml: Mililitros
g: Gramo
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento no requiere la utilización de sustancias
químicas peligrosas, sin embargo, es necesario el uso de mandil,
guantes y gafas de seguridad durante la realización de éste ensayo.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza de precisión
Estufa de aire forzado
6.1.2. Materiales
Bandeja de aluminio con tapa
6.1.3. Reactivos
No aplica
6.1.4. Materiales de Referencia
No aplica
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas
a ser realizadas
Previo a la realización del ensayo, se deberá verificar que las bandejas de aluminio
se encuentren en buen estado y limpias.
6.4. Realización
Pesar la bandeja vacía en la balanza de precisión. Anotar el peso.
Colocar toda la muestra entregada por el usuario sobre la bandeja,
procurando no dejar absolutamente nada en la bolsa.
Pesar la bandeja con la muestra en la balanza de precisión. Anotar el peso.
Colocar la bandeja con la muestra en la estufa de aire forzado y secar la
muestra a una temperatura entre 60 y 70 ºC hasta peso constante (la
temperatura máxima de secado es de 70 ºC).
Una vez seca la muestra, retirarla de la estufa y dejarla enfriar por alrededor
de 30 minutos en un lugar seco, tapando las bandejas con sus respectivas
tapas.
Pesar la bandeja con la muestra seca y anotar el peso.
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Los pesos obtenidos se anotan en el formato PEE/SFA/35-FO01, y con
ellos se realiza el siguiente cálculo:
% 𝐻 PH + B − PS + B
PH + B − PB 𝑥 100
en dónde:
H: Humedad
PH+B: Peso en gramos de la muestra húmeda más bandeja.
PS+B: Peso en gramos de la muestra seca más bandeja.
P B: Peso en gramos de la bandeja.
6.6.2. Aseguramiento de la Calidad
Control de temperatura de estufas
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
No aplica
6.6.4. Incertidumbre
Control de temperatura de estufas
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados de humedad serán expresados en porcentaje, y se reportarán
en el informe con 2 cifras decimales
7. ANEXOS
7.1. Anexo l. Registro de datos primarios de humedad en muestras
foliares
Fecha N°
Lab
HUMEDAD
Resp.
Peso
bandeja
vacía (g)
Peso
bandeja +
muestra
húmeda (g)
Peso
bandeja +
muestra
seca(g)
Peso
seco (g)
% H
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE CENIZA
Y MATERIA ORGÁNICA EN MUESTRAS FOLIARES
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la determinación de ceniza y materia orgánica en
muestras foliares.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para determinar ceniza y materia orgánica en muestras foliares.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
AOAC 930.05. Ash of Plants
5. GENERAL
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, corno parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas puede hacer referencia a otros documentos concretos,
indicando los apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Calcinación: Es un proceso térmico mediante el cual se elimina la materia
orgánica de una muestra.
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica.
basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
g: Gramo
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento no requiere la utilización de sustancias
químicas peligrosas, sin embargo, es necesario el uso de mandil, guantes
y gafas de seguridad durante la realización de éste ensayo.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza analítica
Mufla
6.1.2. Materiales
Crisol de porcelana tarado
Pinzas para crisol de 60 cm de longitud
Desecador
6.1.3. Reactivos
No aplica
6.1.4. Materiales de Referencia
No aplica
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas
a ser realizadas
Previo a la realización del ensayo, se deberá verificar que los crisoles se
encuentren tarados.
Numerar los crisoles en su base con lápiz, no utilizar esferográfico ni
marcador, caso contrario la identificación se borrará al momento de la
calcinación.
6.4. Realización
Pesar el crisol tarado vacío en la balanza analítica. Anotar el peso.
Pesar sobre el crisol 1g de muestra en la balanza analítica. Anotar el peso.
Colocar el crisol con la muestra en la mufla fría y subir gradualmente la
temperatura hasta 450ºC ± 5ºC, y mantener esa temperatura hasta que las
muestras se transformen en cenizas de coloración blanquecina o gris.
Apagar la mufla y esperar hasta que la temperatura baje hasta 120ºC
aproximadamente.
Retirar los crisoles de la mufla, colocarlos en un desecador y esperar hasta
que éstos se enfríen.
Pesar el crisol con la muestra calcinada en la balanza analítica. Anotar el
peso.
6.5. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.5.1. Cálculos
Los pesos obtenidos se anotan en el cuaderno correspondiente a "Cenizas y
MO Foliares", y con ellos se realiza el siguiente cálculo:
a) Cálculo para obtener el porcentaje de cenizas
% 𝐶 = 𝑃𝐶𝑧+𝐶 𝑥 𝑃𝑐
𝑃𝑚 𝑥 100
En dónde:
Cz = Ceniza
PCz+C = Peso en gramos de la muestra calcinada más el crisol.
Pc = Peso en gramos del crisol.
PM = Peso en gramos de la muestra
b) Cálculo para obtener el porcentaje de materia orgánica
% 𝑀𝑂 = 100 − % 𝐶𝑧
En dónde:
% Cz = Porcentaje de ceniza obtenido
6.5.2. Aseguramiento de la Calidad
El control de calidad interno incluye efectuar un duplicado cada 15 muestras.
6.5.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se
describen en la siguiente tabla:
Actividad
Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple Frecuencia Responsable
Corridas con
estándar de
referencia
≤5% Repetir el
ensayo
Al inicio de
los análisis RT/A
Para gestionar como trabajo de ensayo no-conforme, se debe aplicar el
procedimiento PGC/LA/08.
6.5.4. Incertidumbre
No se ha calculado la incertidumbre asociada para éste método de ensayo.
6.5.5. Informe de Resultados
Los resultados de cenizas y materia orgánica serán expresados en
porcentaje, y se reportarán en el informe con 2 cifras decimales
7. ANEXOS
No aplica
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO CALCINACIÓN Y DIGESTIÓN
ÁCIDA DE MUESTRAS FOLIARES
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la calcinación y digestión ácida de muestras
foliares, a fin de mineralizar los nutrientes presentes en la misma para su
posterior análisis.
2. ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares
y Aguas para digestar las muestras foliares previo al análisis de fósforo (P),
potasio (K), calcio (Ca), magnesio (Mg), hierro (Fe), cobre (Cu), zinc (Zn),
manganeso (Mn) y azufre (S).
3. TEMS A ENSAYAR, PARÁMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIA No aplica.
5. GENERAL
Los métodos de digestión ácida facilitan la disgregación de las estructuras
cristalinas, hecho que permite determinar la cantidad total de determinados
elementos presentes en las muestras.
Existen varios métodos de digestión ácida en función a los ácidos utilizados
y etapas de calentamiento. En general, el método consiste en hacer
reaccionar la muestra con una serie de sustancias con poder oxidante, como
el ácido nítrico y el peróxido de hidrógeno, calentando dichas mezclas en una
plancha térmica. Otras rutas de digestión emplean ácidos más fuertes como
el ácido fluorhídrico o el ácido perclórico, con el fin de disgregar compuestos
de gran resistencia.
En el presente método se busca eliminar la materia orgánica mediante
calcinación en la mufla, para luego digestar las cenizas con ácido clorhídrico.
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas puede hacer referencia a otros documentos concretos,
indicando los apartados, no repitiendo su contenido
5.2. Definiciones
Calcinación.- Es el proceso termal mediante el cual se destruye la
materia orgánica de una muestra determinada, oxidándola hasta
convertirla en CO2 y H2O.
Digestión.- En química, digestión es el proceso de someter a la
materia orgánica presente en una muestra a la acción de ácidos o
bases fuertes.
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica,
basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
g: Gramo
mL:Mililitro
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento requiere la utilización de sustancias químicas
peligrosas como el ácido clorhídrico, razón por la cual es necesario el uso
de mandil, guantes, gafas de seguridad, mascarilla contra vapores ácidos
y solventes orgánicos y sorbona durante la manipulación de ésta
sustancia.
5.5. Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar los resultados de los
análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza analítica
Mufla
Plancha de calentamiento
Sorbona
6.1.2. Materiales
Crisoles de porcelana
Embudos
Balón de 100 mi
Pipetas automáticas de 10 mi
Puntas para pipeta
Papel filtro
Policía
6.1.3. Reactivos
Ácido clorhídrico concentrado
Ácido clorhídrico 1:1
6.1.4. Materiales de referencia
No aplica
6.2. Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
6.3. Identificación Items de Ensayo, Preparación y Verificaciones
previas a ser realizadas
6.4. Realización
Pesar 1 g de muestra sobre un crisol de porcelana tarado en la balanza
analítica, identificando los crisoles con lápiz. Anotar el peso.
Colocar el crisol con la muestra en la mufla fría y subir gradualmente la
temperatura hasta 450ºC ± 5ºC, y mantener esa temperatura hasta que
las muestras se transformen en cenizas de coloración blanquecina o
gris.
Apagar la mufla y esperar hasta que la temperatura baje hasta 120ºC
aproximadamente.
Retirar los crisoles de la mufla, colocarlos en un desecador y esperar
hasta que éstos se enfríen.
Agregar al crisol de porcelana 4 mL de ácido clorhídrico concentrado.
Adicionar al crisol 1 mL de agua tipo l.
Digestar lentamente las cenizas sobre la plancha de calentamiento hasta
sequedad.
Retirar los crisoles de la plancha y esperar aproximadamente 30 min
hasta que éstos se enfríen.
Agregar 4 mL de ácido clorhídrico 1:1
Dejar en reposo durante 2 horas.
Filtrar el contenido del crisol recogiendo el filtrado en un balón aforado
de 100 mL.
Enjuagar cuidadosamente el crisol y el papel filtro con agua tipo I de 4 a
5 veces, frotando las paredes del crisol con ayuda de un policía.
Aforar a 100 mL con agua tipo I y homogenizar.
Con ésta solución obtenida, se procede a determinar el fósforo (P),
potasio (K), calcio (Ca), magnesio (Mg), hierro (Fe), cobre (Cu), zinc
(Zn), manganeso (Mn) y azufre (S).
6.5. Método de registro y datos a ser registrados
No registra
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
No aplica
6.6.2. Aseguramiento de la de Calidad
No aplica
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
No aplica
6.6.4. Incertidumbre
No aplica
6.6.5. Informe de resultados
No aplica
7. ANEXOS
7.1. Anexo l. Preparación de la solución de ácido clorhídrico 1:1
Colocar en un vaso de precipitación de 2000 mL 500 mL de agua tipo l.
Adicionar al vaso de precipitación lentamente 500 mL de ácido clorhídrico
concentrado, controlando la temperatura con un baño de agua fría.
Mezclar y esperar hasta que la solución se enfríe.
Almacenar la solución en un frasco limpio y bien identificado.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACÍON DE
FÓSFORO EN MUESTRAS FOLIARES.
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la determinación de fósforo (P) en muestras
foliares.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para determinar P en muestras foliares a partir de la solución madre
preparada de acuerdo al procedimiento de digestión
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
AOAC 931.01. Phosphorus in Plants
5.GENERAL
El presente método cuantifica el fósforo mediante espectrofotometría UV YIS,
mediante la formación ele un complejo coloreado "azul de molibdeno" que se
forma por la reacción del fósforo con solución sulfomolíbdica en presencia de
ácido ascórbico, mismo que se mide espectrofotométricamente mediante una
curva ele calibración elaborada con soluciones de fósforo de concentraciones
conocidas
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, corno parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas puede hacer referencia a otros documentos concretos,
indicando los apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Métodos espectrofotométricos: Es un conjunto de técnicas
instrumentales que permite comparar la radiación absorbida o transmitida
por una solución que contiene una cantidad desconocida de analito, vs. una
gama de soluciones que contienen una cantidad conocida del mismo
analito.
Longitud de onda: Es la distancia real recorrida por la onda, es decir, es
la distancia desde el inicio de un ciclo completo de una onda hasta su final.
La longitud de onda se la representa con la letra griega A, y su unidad
dentro del SI es el metro (m), sin embargo, para aplicaciones analíticas
espectrofotométricas se utiliza el submúltiplo nanómetro (nm).
Transmitancia: La transmitancia óptica se define como la fracción de luz
incidente, a una longitud de onda específica, que pasa a través de una
muestra. Su expresión matemática es:
𝑇 = 𝑙
𝑙𝑜
donde lo es la intensidad del rayo incidente, e l es la intensidad de la luz que
viene
de la muestra.
La transmitancia de una muestra está normalmente dada porcentualmente,
definida como:
𝑇 % = (𝑙
𝑙𝑜
) 𝑥 100%
Absorbancia: En espectroscopía, la absorbancia [(Aʎ es definida corno:
𝐴ʎ = −𝑙𝑜𝑔10 𝑇
Donde T, es la transmitancia.
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica.
basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
ml: Mililitro
g: Gramo
l: Litro
ppm: Partes por millón
Aʎ: Absorbancia
T: Transmitancia
ʎ: Longitud de onda
nm: Nanómetros
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, como el
ácido sulfúrico y la solución de hidróxido de sodio concentrada, por lo que
es indispensable la utilización del equipo de protección personal completa
(mandil, guantes, gafas y respirador con doble filtro para ácidos y vapores
orgánicos) y la sorbona cuando se manejen dichas sustancias.
La preparación y manipulación de la solución sulfomolíbdica que se utiliza
durante el ensayo, deberá realizarse con guantes.
Durante la preparación de la solución sulfornolíbdica la temperatura de la
solución se elevará por efecto de la disolución del ácido sulfúrico
concentrado. Para ello, se deberá controlar la temperatura con un baño
de agua fría.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Espectrofotómetro UY-YIS
Balanza analítica Scientech, código SFA/EM/030 o similar
Estufa
Baño María
Vortex
Sorbona
6.1.2. Materiales
Cápsula de porcelana
Balón aforado de 50, 100, 200 y 1000 ml.
Pipetas volumétricas de 1, 2, 4, 5, 10y 20 mi
Tubo de ensayo
Gradilla
Pipeta automática de 10 ml.
Puntas para pipetas de 10ml.
6.1.3. Reactivos
Molibdato de amonio
Ácido sulfúrico concentrado
Ácido ascórbico
Fosfato diácido de potasio
Agua tipo 1
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
Las condiciones ambientales se controlan de acuerdo a lo
establecidos en el Instructivo INT/SFA/01
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas
a ser realizadas
Para la realización del presente ensayo se debe haber obtenido previamente
la solución madre de la muestra foliar de acuerdo a la metodología descrita
en el INT/SFA/34.
A fin de evitar cualquier contaminación cruzada, es indispensable lavar muy
bien con jabón libre de fósforo el material de vidrio a utilizarse en el ensayo,
cepillando correctamente cada utensilio, para posteriormente secarlo en la
estura a 105 ºC.
Utilizar agua tipo I tanto para la preparación de las soluciones y estándares
como para la realización del ensayo.
6.4. Realización
De la solución madre preparada, realizar la dilución respectiva de acuerdo a
la concentración de fósforo que tenga la muestra. Generalmente una dilución
de 1/20 es apropiada, por lo tanto, colocar 5 ml de la solución madre en un
balón de 100 ml con una pipeta volumétrica, aforar a 100 ml con agua tipo I
y homogenizar la solución.
Colocar 5 ml de la dilución en un tubo de ensayo con ayuda de una pipeta
volumétrica.
Adicionar al tubo de ensayo 2 ml de ácido ascórbico al 1 % y 1 ml de solución
sulfomolíbdica con pipetas volumétricas o pipeta automática.
Agitar la mezcla contenida en el tubo alrededor de 5 segundos en el vortex.
Colocar la mezcla en un bailo maría a 80ºC ± 3ºC por 10 minutos.
Enfriar en un baño de agua fría durante 10 minutos aproximadamente.
Desarrollar el color a los estándares y al blanco ele la misma manera que se
hizo para las muestras.
Cargar en el Espectrofotómetro de UV-VIS el método para fósforo en
foliares, mismo que debe estar a una longitud de onda de 882 nm.
Realizar la curva ele calibración, encerando el equipo con el blanco, e
ingresando como cero de la curva al blanco.
Leer las absorbancias de las muestras.
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Para obtener la concentración del P en las muestras foliares en
porcentaje, se deberá realizar los siguientes cálculos:
% 𝑃 = 𝐿𝑒𝑐𝑡. 𝑥 𝑉𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 𝑥 𝐹𝑑
𝑃𝑚 𝑥 10000
En dónde:
Lect. = Lectura en ppm de P que se obtiene del espectrofotómetro UV-VIS.
Vmadre = Volumen en mi de la solución madre.
Fd = Factor de dilución respectivo.
Pm = Peso de la muestra en gramos.
10000 = Factor para convertir los ppm a porcentaje.
Los resultados así obtenidos, se anotan en el cuaderno correspondiente a
"Datos Fósforo de Foliares", en el cual se deberá asentar la sumilla del analista
responsable del análisis
6.6.2 . Aseguramiento de la Calidad
El control de calidad interno incluye efectuar una muestra control (MRC) cuya
concentración de P sea conocida al inicio de cada análisis.
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se
describen en la siguiente tabla:
Actividad
Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple Frecuencia Responsable
Corridas con
estándar de
referencia
≤5% Repetir el
ensayo
Al inicio de
los análisis RT/A
6.6.4. Incertidumbre
No se ha calculado la incertidumbre asociada para éste método de ensayo.
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados de P serán expresados en porcentaje, y se reportarán en el
informe con 2 cifras decimales
7. ANEXOS
7.1. Anexo I: Elaboración de la solución sulfomolíbdica.
7.2. Anexo II: Elaboración de la solución de ácido ascórbico al
1%.
7.3. Anexo III: Elaboración de estándares para la curva de
calibración.
7.4. Anexo IV: Registro de datos primarios de cenizas, materia
orgánica, nitrógeno, fósforo, azufre y boro en muestras foliares.
Anexo I
ELABORACIÓN DE LA SOLUCIÓN SULFOMOLÍBDICA
Pesar en la balanza analítica 25 g de molibdato de amonio en un vaso
de precipitación.
Trasvasar cuantitativamente el molibdato de amonio a un balón de 1 l.
Adicionar al balón aproximadamente 500 ml de agua tipo l.
Añadir lentamente 270 ml de ácido sulfúrico concentrado G. R.,
enfriando la solución con un baño de agua fría.
Una vez que la mezcla contenida en el balón esté completamente fría,
aforar con agua tipo I y homogenizar.
Almacenar la solución en un frasco ámbar perfectamente limpio y bien
etiquetado.
NOTA: Esta solución es sensible al calor y a la luz, sin embargo, si es
almacenada en un frasco ámbar y en refrigeración se conserva durante
varios meses sin deteriorarse.
Anexo II
ELABORACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO AL 1 %
Pesar 1g de ácido ascórbico en la balanza analítica sobre papel
aluminio.
Transferir cuantitativamente el ácido ascórbico a un balón aforado de
100 ml, mismo que debe estar cubierto con papel aluminio para evitar
que el ácido ascórbico se descomponga por acción de la luz.
Adicionar aproximadamente 60 ml de agua tipo al balón y disolver el
ácido ascórbico.
Aforar con agua tipo I y homogenizar la solución.
NOTA: Este reactivo es inestable y no se puede almacenar, por tal motivo,
se lo debe preparar el mismo día en que se va a realizar el análisis de P. Por
lo tanto, antes de preparar el reactivo, es necesario calcular el volumen que
se requiere para analizar la serie de muestras, tomando en consideración los
puntos de la curva, el blanco y las posibles diluciones.
Anexo III
ELABORACIÓN DE ÉSTÁNDARES PARA LAS CURVAS DE
CALIBRACIÓN
a) Elaboración de la solución madre de 1000 ppm de P
En caso de que no se disponga de una solución comercial de 1000 ppm
de P, proceder como sigue:
Pesar aproximadamente 6 g de fosfato monobásico de potasio
(KH2PO4) en una cápsula de porcelana.
Secar el fosfato monobásico de potasio en la estufa a 105 ºC por 2
horas.
Enfriar el fosfato monobásico de potasio en un desecador por 1 hora.
Pesar en la balanza analítica 4.394 g de fosfato monobásico de potasio
sobre papel aluminio.
Trasvasar cuantitativamente el fosfato monobásico de potasio a un
balón aforado de 1 l.
Disolver el fosfato monobásico de potasio con agua destilada tipo 1,
aforar y homogenizar la solución.
Almacenar la solución madre en un frasco plástico perfectamente limpio
y bien etiquetado en refrigeración.
b) Elaboración de la solución estándar de 50 ppm de P
Colocar 5 ml de la solución madre de 1000 ppm de P en un balón
aforado de 100ml con una pipeta volumétrica.
Aforar el balón a 100 ml con agua tipo I y homogenizar la solución.
Almacenar la solución estándar en un frasco plástico perfectamente
limpio y bien etiquetado.
c) Elaboración de los estándares P
Colocar en balones aforados de 100 ml perfectamente limpios, la
siguiente cantidad de solución estándar de 50 ppm de P con la ayuda
de pipetas volumétricas:
N° Estándar Concentración del
estándar (ppm)
Volumen de solución estándar
de 50 ppm de P en ml
1 0.0 0
2 0.5 1
3 2.0 4
4 6.0 12
5 10.0 20
6 15.0 30
Aforar el balón a 100 ml con agua destilada y homogenizar la solución.
Almacenar las soluciones estándar en frascos plásticos perfectamente
limpios y bien etiquetados.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACÍON DE
NITRÓGENO EN MUESTRAS FOLIARES- MÉTODO DE KJELDAHL
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la determinación de nitrógeno (N) en muestras
foliares.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para determinar N en muestras foliares.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
AOAC 978.04. Nitrogen (Total) (Crude Protein) in Plants
5.GENERAL
La determinación del nitrógeno total por el método de Kjeldhal se basa en la
conversión de los compuestos nitrogenados reactivos a sulfato de amonio
mediante la mineralización de la muestra con ácido sulfúrico concentrado, en
presencia de un alto contenido de sulfato potásico, con objeto de elevar el
punto de ebullición de la mezcla, y selenio como catalizador.
Posteriormente, se produce la liberación del ion amonio a partir del sulfato de
amonio mediante la adición de una solución de hidróxido de sodio
concentrado, mismo que es recogido sobre una solución indicadora con ácido
bórico, que luego es valorada por retroceso.
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, corno parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas puede hacer referencia a otros documentos concretos,
indicando los apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Retrotitulación. - Es un procedimiento donde el exceso de solución
patrón utilizada para consumir un analito se determina mediante titulación
con una segunda solución patrón.
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica.
basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
ml: Mililitros
g: Gramo
l: Litro
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, como el
ácido sulfúrico y la solución de hidróxido de sodio concentrada, por lo que
es indispensable la utilización del equipo de protección personal completa
(mandil, guantes, gafas y respirador con doble filtro para ácidos y vapores
orgánicos) y la sorbona cuando se manejen dichas sustancias.
Tener precaución al manipular los tubos Kjeldhal calientes luego de la
destilación, protegiéndose las manos con guantes de nitrilo y guantes de
calor, y lomando el tubo con ayuda de una pinza.
Los residuos del tubo Kjeldahl deben ser depositados en un recipiente
adecuado para su posterior eliminación.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza analítica
Balanza de precisión
Digestor y destilados Kjeldhal
6.1.2. Materiales
Tubos Kjeldhal
Papel celofán de 4 x 5 cm o papel aluminio
Dispensador de 25 ml
Núcleos de ebullición
Pinza para tubo Kjeldhal
Erlenmeyer de 250 ml
Bureta digital de 50 ml
Bureta clase A de LOO mi con llave de teflón
Balón aforado de 1 y 21
Vasos plásticos de precipitación de 600 y 1000 ml
6.1.3. Reactivos
Ácido sulfúrico concentrado
Solución de hidróxido de sodio al 40%
Solución de hidróxido de sodio al 15%
Solución de hidróxido de sodio 0.1 N
Solución de ácido sulfúrico 0.1 N
Indicador rojo de metilo
Indicador verde de bromocresol
Etanol absoluto
Sulfato de potasio
Sulfato de cobre
Selenio
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas
a ser realizadas
Antes de utilizar el digestor Kjeldhal, verificar que la solución de hidróxido de
sodio en dónde se recogen los vapores no se encuentre saturada, y que el
agua del reservorio de la bomba y del frasco de recolección este limpia
Procurar mantener un flujo de agua de enfriamiento apropiado en el digestor,
si éste es muy bajo podría ocasionar daños en el equipo.
Antes de utilizar el destilador Kjeldhal, verificar que el frasco de hidróxido de
sodio conectada al destilador contenga la solución al 40%, que la llave de
agua del flujo de enfriamiento este abierta, y que el frasco de agua destilada
este por lo menos hasta las tres cuartas partes del recipiente.
Lavar los tubos Kjeldhal inmediatamente después de utilizarlos, y
homogenizarlos con agua destilada luego de lavados.
6.4. Realización
Pesar en la balanza analítica 0.4 g de muestra sobre papel celofán o sobre
papel aluminio.
Si se utiliza papel celofán, encerrar la muestra dentro del papel enrollando
entre sí las cuatro puntas del mismo, y colocar ésta bolsita dentro de los
tubos Kjeldhal. Si se utiliza papel aluminio, adherir el papel conteniendo la
muestra a una varilla y colocar toda la muestra en el fondo del tubo Kjeldhal.
Adicionar l pastilla Kjeldahl más 20 ml de ácido sulfúrico concentrado.
Colocar el tubo en el digestor Kjeldhal.
Encender el scrubber y luego el digestor Kjeldhal. Programar éste ultimo de
la siguiente manera: 250º C por 10 minutos, 300º C por 5 minutos, y 420º C
por 45 minutos.
Dejar enfriar los tubos una vez finalizada la digestión.
Colocar en un erlenmeyer de 250 ml, 50 ml de ácido bórico al 4% con la
ayuda de una probeta, y 4 o 6 gotas del indicador rojo de tashiro.
Antes de iniciar la destilación, verificar la existencia de hidróxido de sodio
al 40% y asegurarse que el contenido de agua destilada tipo I esté en un
nivel apropiado.
Colocar el tubo Kjeldhal en el destilador, abrir la llave del agua de
enfriamiento y programar al equipo para que suministre 70 ml de hidróxido
de sodio al 40% y destile por el lapso de 4 minutos, con un tiempo de
depuración de 5 segundos a una temperatura de 100º C.
Colocar el erlenmeyer con ácido bórico al 4% en el destilador, a fin de
recoger el amoniaco que se desprenderá durante la destilación.
Accionar el botón rundel equipo.
Una vez concluida la destilación, retirar el erlenmeyer y titular el contenido
del mismo con solución de ácido clorhídrico 0.1 N hasta un viraje de color
verde azulado a rosado.
Por cada serie de muestras analizadas se deberá correr una muestra
control y un blanco para encontrar el valor del factor de corrección del
ácido utilizado. El blanco consiste en colocar 50 ml de ácido bórico al 4%
en un erlenmeyer y titularlo con la solución de ácido clorhídrico 0.1 N
utilizando rojo de Tashiro como indicador. El ácido bórico al 4% y el ácido
clorhídrico 0.1 N utilizados en el blanco deberán ser los mismos que se
utilicen en el análisis de las muestras.
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Los pesos obtenidos se anotan en el formato PEE/SFA/35-FO01, y con
ellos se realiza el siguiente cálculo:
𝑁 = (VHCl Muestra − VHCl Blanco )𝑥 𝑁HCl 𝑥14,01
MMuestra 𝑋10
Los resultados así obtenidos, se anotan en el formato PEE/SFA/36-FO01
6.6.2 . Aseguramiento de la Calidad
El control de calidad interno incluye efectuar una muestra control (MRC) cuya
concentración de N sea conocida al inicio de cada análisis.
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se
describen en la siguiente tabla:
Actividad
Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple Frecuencia Responsable
Corridas con
estándar de
referencia
≤5% Repetir el
ensayo
Al inicio de
los análisis RT/A
6.6.4. Incertidumbre
No se ha calculado la incertidumbre asociada para éste método de ensayo.
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados de N serán expresados en porcentaje, y se reportarán en el
informe con 2 cifras decimales
7. ANEXOS
7.1. Anexo I: Elaboración de ácido bórico al 4%
7.2. Anexo II: Elaboración del indicador Rojo de Tashiro.
7.3. Anexo III: Elaboración de la solución NaOH al 20%.
7.4. Anexo IV: Elaboración de la solución NaOH al 40%
7.5. Anexo V: Elaboración de la solución de HCl 0.1 N
7.6. Anexo VI: Registro de datos primarios de cenizas, materia
orgánica, nitrógeno, fósforo, azufre y boro en muestras foliares.
Anexo I
ELABORACIÓN DEL ÁCIDO BÓRICO AL 4%
Pesar en la balanza analítica 80 g de ácido bórico en un vaso de
precipitación.
Calentar aproximadamente 1500 ml el agua destilada tipo I a 60º C,
añadir el ácido bórico, agitar hasta su completa disolución.
Trasvasar cuantitativamente a un balón de 2 1, una vez frío aforar.
Almacenar a temperatura ambiente.
Anexo II
ELABORACIÓN DEL INDICADOR ROJO DE TASHIRO
Disolver 0.1 g de rojo de metilo en etanol absoluto y aforar a 100 ml.
Disolver 0.1 g de verde de bromocresol en etanol absoluto y aforar a
100 ml.
Mezclar una parte de la solución de rojo de metilo con tres partes de la
solución de verde de bromocresol y homogenizar la solución.
Almacenar el indicador en un frasco ámbar perfectamente limpio y bien
etiquetado.
Anexo III
ELABORACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE NaOH AL 20%
(Solución para recoger los gases de digestión)
Pesar 400 g de NaOH en la balanza de precisión sobre un vaso de
precipitación de 1000 ml.
Adicionar aproximadamente 900 ml de agua destilada y disolver el
NaOH, controlando la temperatura con un baño de agua fría.
Transferir cuantitativamente la solución contenida en el vaso a un balón
de 2000 ml.
Enfriar, aforar con agua destilada y homogenizar la solución.
Almacenar la solución que no se haya utilizado en un frasco plástico
perfectamente limpio y bien etiquetado.
Anexo IV
ELABORACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE NaOH AL 40%
(Solución para dosificar en el momento de la destilación)
• Pesar 800 g de NaOH en la balanza de precisión sobre un vaso plástico
ele precipitación de 2000 ml.
• Adicionar aproximadamente 1500 ml de agua destilada y disolver el
NaOH, controlando la temperatura con un baño de agua fría.
• Transferir cuantitativamente la solución contenida en el vaso a un balón
de 2000 ml.
• Enfriar, aforar a 2000 ml con agua destilada y homogenizar la solución.
Anexo V
ELABORACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE HCI 0.1 N
Colocar aproximadamente 100 ml de agua tipo I en un balón de 2000ml
Adicionar 16.58 ml de ácido clorhídrico concentrado.
Aforar a 2000 ml con agua destilada y homogenizar la solución.
Valorar la solución con hidróxido de sodio para encontrar la normalidad
real del ácido.
Guardar la solución en un frasco perfectamente limpio y etiquetado.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE K, Ca Y
Mg EN MUESTRAS FOLIARES
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la determinación de potasio (K), calcio (Ca) y
magnesio (Mg) en muestras foliares.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
para determinar K, Ca y Mg en muestras foliares a partir de la solución madre preparada
de acuerdo al procedimiento PEE/SFA/34.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
PGC/LA/01, Procedimiento General para la Gestión de la
Documentación
AOAC 975.03. Metals in Plants and Pet Foods
4.2. Documentos a utilizar conjuntamente con el presente procedimiento
INT/SFA/02, instructivo "Uso y verificación de equipo de absorción atómica".
PEE/SFA/34, Procedimiento Especifico de Ensayo "Calcinación y Digestión
Acida de Muestras Foliares"
PEE/SFA/38-FO01, Registro de datos primarios de análisis de metales en
muestras foliares
5.GENERAL
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, corno parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Métodos espectrofotométricos: Es un conjunto de técnicas instrumentales
que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución
que contiene una cantidad desconocida de analito, vs. una gama de soluciones
que contienen una cantidad conocida del mismo analito.
Absorción atómica: Es un método instrumental que esta basado en la
atomización del analito en matriz líquida, utilizando un nebulizador para crear
una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama,
en donde la muestra es desolvatada y expuesta a una energía a una
determinada longitud de onda emitida ya sea por una lámpara de cátodo hueco
construida con el mismo analito a determinar o una lámpara de descarga de
electrones.
Longitud de onda: Es la distancia real recorrida por la onda, es decir, es la
distancia desde el inicio de un ciclo completo de una onda hasta su final. La
longitud de onda se la representa con la letra griega ʎ, y su unidad dentro del
SI es el metro (m), sin embargo para aplicaciones analíticas
espectrofotométricas se utiliza el submúltiplo nanómetro (nm).
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica. basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
ml: Mililitro
g: Gramo
l: Litro
ppm: Partes por millón
Aʎ: Absorbancia
ʎ: Longitud de onda
nm: Nanómetros
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, como el
ácido clorhídrico concentrado, por lo que es indispensable la utilización del
equipo de protección personal completa (mandil, guantes, gafas y respirador
con doble filtro para ácidos y vapores orgánicos) y la sorbona cuando se
manejen dichas sustancias.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Espectrofotómetro de absorción atómica
Balanza analítica Scientech, código SFA/EM/030 o similar
Sorbona
Vortex
6.1.2. Materiales
Balón aforado de 50, 100, 200 y 1000 ml.
Pipetas volumétricas de 1, 2, 5, 10, 15 y 20 ml
Tubos de ensayo
Gradilla
Dispensador automático de 25 ml
Pipeta automática de 1 – 0 ml
Pipeta automática de 100 - 1000 µI
Puntas para pipetas de 1000 µI y 10 ml
6.1.3. Reactivos
Oxido de lantano G.R.
Ácido clorhídrico concentrado G.R.
Estándar comercial de 1000 ppm de K
Estándar comercial de 1000 ppm de Ca
Estándar comercial de 1000 ppm de Mg
Agua tipo 1
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
Las condiciones ambientales se controlan de acuerdo a lo
establecidos en el Instructivo INT/SFA/01
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas a
ser realizadas
Para la realización del presente ensayo se debe haber obtenido previamente la
solución madre de la muestra foliar de acuerdo a la metodología descrita en el
INT/SFA/34.
Antes de comenzar con la realización del presente procedimiento, se debe
preparar la solución de óxido de lantano tal como se indica en el Anexos I y
los estándares en el anexo ll.
Utilizar agua tipo I tanto para la preparación de las soluciones y estándares
como para la realización del ensayo.
6.4. Realización
Para Ca y K realizar una dilución 1/20, colocar 5ml de la solución madre
preparada mediante el PEE/SFA/34, 4 ml de H:Cl 1:1 y 10 ml de óxido de
lantano en un balón de 100 ml y aforar con agua tipo 1 y Para Mg realizar una
dilución 1/100, colocar 1 ml de la solución madre preparada mediante el
PEE/SFA/34, 4 ml de H:Cl 1:1 y 10 ml de óxido de lantano en un balón de 100
ml y aforar con agua tipo 1.
Mezclar bien en el vortex.
Colocar la lámpara y cargar en el software del espectrofotómetro de absorción
atómica el método del elemento a determinar.
Encender el quemador y encerar el equipo con el blanco.
Realizar la curva de calibración en el equipo, ingresando como cero el blanco.
Leer las absorbancias de las muestras y determinar la concentración del analito
en %.
6.5. Método de Registro y Datos a ser registrados
El resultado se reporta de forma directa en el formato PEE/SFA/38-FO01
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Para obtener la concentración del K, Ca y Mg en las muestras foliares en
porcentaje, se deberá realizar los siguientes cálculos:
% 𝐾, 𝐶𝑎 ó 𝑀𝑔 = 𝐿𝑒𝑐𝑡. 𝑥 𝑉𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 𝑥 𝐹𝑑
𝑃𝑚 𝑥 10000
En dónde:
Lect. = Lectura en ppm de K, Ca y Mg, según el caso, que se obtiene del
espectrofotómetro de absorción atómica.
Vmadre = Volumen en mi de la solución madre.
Fd = Factor de dilución en caso de que exista.
Pm = Peso de la muestra en gramos.
10000 = Factor para convertir los ppm a porcentaje.
Los resultados así obtenidos, se anotan en el formato PEE/SFA/37-FO01.
6.6.2 . Aseguramiento de la Calidad
El control de calidad interno incluye efectuar una muestra control (MRC) cuya
concentración de K, Ca y Mg sea conocida al inicio de cada análisis.
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se describen
en la siguiente tabla:
Actividad
Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple Frecuencia Responsable
Corridas con
estándar de
referencia
≤5% Repetir el
ensayo
Al inicio de
los análisis RT/A
6.6.4. Incertidumbre
No se ha calculado la incertidumbre asociada para éste método de ensayo.
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados de K, Ca y Mg serán expresados en porcentaje, y se reportarán
en el informe con 2 cifras decimales
7. ANEXOS
7.1. Anexo I: Preparación de la solución de óxido de lantano al 1 %.
7.2. Anexo II: Elaboración de estándares para las curvas de
calibración.
7.3. Anexo III: Registro de datos primarios de análisis de metales en
muestras foliares.
Anexo I
PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE ÓXIDO DE LANTANO AL 1 %.
Pesar 23.456 g de óxido de lantano en la balanza analítica sobre una
cápsula de porcelana.
Trasvasar cuantitativamente el óxido de lantano a un balón de 21.
Añadir aproximadamente 100 ml de agua tipo l.
Añadir lentamente 100 ml de ácido clorhídrico concentrado, enfriando la
solución con un baño de agua fría. Este procedimiento realizarlo en
sorbona.
Agitar la mezcla hasta que el óxido de lantano esté totalmente disuelto.
Aforar con agua tipo I y homogenizar la solución.
Almacenar la solución en un frasco de vidrio perfectamente limpio y bien
etiquetado.
Anexo II
ELABORACIÓN DE ÉSTÁNDARES PARA LAS CURVAS DE CALIBRACIÓN
a) Elaboración de los estándares para K
Preparar 200 ml de una solución madre de 200 ppm de K de la siguiente
manera:
Tornar 40 ml de estándar de K de 1000 ppm con pipeta volumétrica y aforar
a 200 ml con agua tipo l.
b) Elaboración de los estándares para Ca
Preparar 200 ml de una solución madre de 100 ppm de Ca de la siguiente
manera:
Tomar 20 ml de estándar de Ca de 1000 ppm con pipeta volumétrica y
aforar a 200 ml con agua tipo l.
c) Elaboración de los estándares para Mn
Preparar 200 ml de solución madre de 10 ppm de Mg de la siguiente
manera:
Tomar 2 ml de estándar de Mg de 1000 ppm con pipeta volumétrica y aforar
a 200 ml con agua tipo l.
Preparación de Mix
Metal ml de sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 1
K 4 4
200ml Ca 2 1
Mg 4 0.2
Metal ml de sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 2
K 10 10
200ml Ca 6 3
Mg 10 0.5
Metal ml de sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 1
K 20 20
200ml Ca 12 6
Mg 16 0.8
Metal ml de sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 1
K 40 40
200ml Ca 18 9
Mg 20 1
Colocar 8 ml de HCI 1: 1 y 20 mL de óxido de lantano al l %, aforar los
balones a 200 ml con agua tipo 1 y homogenizar las soluciones
Almacenar las soluciones estándar en frascos plásticos perfectamente
limpios y bien etiquetados.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE Fe, Cu, Zn
Y Mg EN MUESTRAS FOLIARES
1. OBJETO
Definir un procedimiento para la determinación de hierro (Fe), cobre (Cu), zinc (Zn)
y manganeso (Mn) en muestras foliares.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
para determinar (Fe), (Cu), (Zn) y (Mn)en muestras foliares a partir de la solución
madre preparada de acuerdo al procedimiento PEE/SFA/34.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Muestras foliares de las diferentes regiones del Ecuador.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
AOAC 975.03. Metals in Plants and Pet Foods
5.GENERAL
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, corno parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Métodos espectrofotométricos: Es un conjunto de técnicas instrumentales
que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución
que contiene una cantidad desconocida de analito, vs. una gama de soluciones
que contienen una cantidad conocida del mismo analito.
Absorción atómica: Es un método instrumental que esta basado en la
atomización del analito en matriz líquida, utilizando un nebulizador para crear
una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama,
en donde la muestra es desolvatada y expuesta a una energía a una
determinada longitud de onda emitida ya sea por una lámpara de cátodo hueco
construida con el mismo analito a determinar o una lámpara de descarga de
electrones.
Longitud de onda: Es la distancia real recorrida por la onda, es decir, es la
distancia desde el inicio de un ciclo completo de una onda hasta su final. La
longitud de onda se la representa con la letra griega ʎ, y su unidad dentro del
SI es el metro (m), sin embargo para aplicaciones analíticas
espectrofotométricas se utiliza el submúltiplo nanómetro (nm).
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica.
basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
ml: Mililitro
g: Gramo
l: Litro
ppm: Partes por millón
Aʎ: Absorbancia
ʎ: Longitud de onda
nm: Nanómetros
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, como el
ácido clorhídrico concentrado por lo que es indispensable la utilización del
equipo de protección personal completa (mandil, guantes, gafas y respirador
con doble filtro para ácidos y vapores orgánicos) y la sorbona cuando se
manejen dichas sustancias.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Espectrofotómetro de absorción atómica
6.1.2. Materiales
Balón aforado de 50, 100, 200 y 1000 ml.
Pipetas volumétricas de 1, 2, 4, 5, 10y 20 mi
6.1.3. Reactivos
Estándar comercial de 1000 ppm de Fe
Estándar comercial de 1000 ppm de Cu
Estándar comercial de 1000 ppm de Zn
Estándar comercial de 1000 ppm de Mn
Agua tipo 1
6.1.4. Materiales de Referencia
SFA/MRC007, Tomate Leaves NlST 1573a, Foliares.
SFA/MRCO08, Apple Leaves NIST 1515, Foliares.
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
Las condiciones ambientales se controlan de acuerdo a lo
establecidos en el Instructivo INT/SFA/01
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas a
ser realizadas
Para la realización del presente ensayo se debe haber obtenido previamente
la solución madre de la muestra foliar de acuerdo a la metodología descrita en
el INT/SFA/34.
Utilizar agua tipo I tanto para la preparación de las soluciones y estándares
como para la realización del ensayo.
6.4. Realización
Colocar la lámpara y cargar en el software del espectrofotómetro de absorción
atómica el método del elemento a determinar.
Encender el quemador y encerar el equipo con el blanco.
Realizar la curva de calibración en el equipo, ingresando como cero el blanco.
Leer las absorbancias de las muestras directamente de la solución madre y
determinar la concentración del analito en ppm.
NOTA: En caso de que se deba realizar una dilución en alguna muestra, utilícese el
blanco como solvente y considérese el factor de dilución respectivo.
6.5. Método de Registro y Datos a ser registrados
Los datos se registran en el formato PEE/SFA/38-FO01
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Para obtener la concentración del Fe, Cu, Zn y Mn en las muestras foliares
en ppm, se deberá realizar los siguientes cálculos:
% 𝐹𝑒, 𝐶𝑢, 𝑍𝑛 ó 𝑀𝑛 = 𝐿𝑒𝑐𝑡. 𝑥 𝑉𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 𝑥 𝐹𝑑
𝑃𝑚
En dónde:
Lect. = Lectura en ppm de Fe, Cu, Zn y Mn, según el caso, que se obtiene del
espectrofotómetro de absorción atómica.
Vmadre = Volumen en mi de la solución madre.
Fd = Factor de dilución en caso de que exista.
Pm = Peso de la muestra en gramos.
Los resultados así obtenidos, se anotan en el formato PEE/SFA/37-FO01.
6.6.2 . Aseguramiento de la Calidad
El control de calidad interno incluye efectuar una muestra control (MRC) cuya
concentración de Fe, Cu, Zn y Mn sea conocida al inicio de cada análisis.
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se describen
en la siguiente tabla:
Actividad
Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple Frecuencia Responsable
Corridas con
estándar de
referencia
≤5% Repetir el
ensayo
Al inicio de
los análisis RT/A
Para gestionar como trabajo de ensayo no-conforme, se debe aplicar el
procedimiento PGC/LA/08.
6.6.4. Incertidumbre
No se ha calculado la incertidumbre asociada para éste método de ensayo.
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados de Fe, Cu, Zn y Mn serán expresados en porcentaje, y se
reportarán en el informe con 2 cifras decimales
7. ANEXOS
7.1. Anexo I: Elaboración de estándares para las curvas de
caibración.
7.2. Anexo II: Registro de datos primarios de metales en muestras
foliares.
Anexo I
ELABORACIÓN DE ÉSTÁNDARES PARA LAS CURVAS DE CALIBRACIÓN
a) Elaboración de los estándares para Fe
Preparar 100 ml de una solución madre de 40 ppm de Fe de la siguiente
manera:
Tornar 4 ml de estándar de Fe de 1000 ppm con pipeta volumétrica y
aforar a 100 ml con agua tipo l.
b) Elaboración de los estándares para Cu
Preparar 100 ml de una solución madre ele 5 ppm de Cu ele la siguiente
manera:
Tomar 0.5 ml de estándar de Cu ele 1000 ppm con pipeta volumétrica y
aforar a 100 ml con agua tipo l.
e) Elaboración ele los estándares para Zn
Preparar 100 ml de solución madre ele I O ppm de Zn de la siguiente
manera:
Tomar 1 ml de estándar de Zn de 1000 ppm con pipeta volumétrica y
aforar a 100 ml con agua tipo l.
d) Elaboración de los estándares para Mn
Preparar 100 ml de solución madre de 40 ppm de Mn de la siguiente
manera:
Tomar 4 ml de estándar de Mn de 1000 ppm con pipeta volumétrica y
aforar a 100 ml con agua tipo l.
Preparación de Mix
Metal
ml de
sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 1
Cu 2 0.05
200ml Mn 1 0.2
Fe 2 0.4
Zn 4 0.2
Metal
ml de
sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 2
Cu 8 0.2
200ml Mn 2 0.4
Fe 10 2.0
Zn 8 0.4
Metal
ml de
sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 3
Cu 20 0.5
200ml Mn 10 2.0
Fe 20 4.0
Zn 16 0.8
Metal
ml de
sol.
Madre
Concentración
ppm
Volumen
de aforo
MIX 4
Cu 40 1.0
200ml Mn 20 4.0
Fe 40 8.0
Zn 20 1.0
Colocar 8 ml de HCI 1: 1
Aforar los balones a 200 ml con agua tipo I y hornogenizar las soluciones.
Almacenar las soluciones estándar en frascos plásticos perfectamente
limpios y bien etiquetados.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO OBTENCIÓN DEL EXTRACTO
DE SUELO CON OLSEN MODIFICADO
1. OBJETO
Definir un procedimiento para obtener el extracto de suelo utilizando como solución
extractora Olsen modificado.
2. ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para la obtención del extracto de suelo, mismo que servirá únicamente para
la determinación de P, K, Ca, Mg, Fe, Cu, Zn y Mn asimilables.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARÁMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Suelos agrícolas de las diferentes regiones del Ecuador
4. REFERENCIAS
4.1 Documentos utilizados en la elaboración
Metodología Unificada de la Red de Laboratorios de Suelos del Ecuador,
Catalogo INIAP cuarta aproximación Quito-2009.
5. GENERAL
5.1 Políticas
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2 Definiciones
Olsen. - Solución extractora para suelos alcalina compuesta por bicarbonato
de sodio y EDTA, ajustada a un pH de 8.5.
5.3 Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica, basado en los
requisitos de la norma NTE INEN ISO/lEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
mg: miligramos
Kg: kilogramos
mi: mililitros
NA: No aplica
5.4 Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento requiere la utilización de sustancias químicas
peligrosas, por lo que es necesario el uso de mandil, guantes y gafas de
seguridad durante la realización de éste ensayo.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidades Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar y supervisar la preparación
A Ejecutar la preparación
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza analítica Scientech, código SFA/EM/030 o similar
Balanza de precisión
Plancha de calentamiento-agitador código SFNEA/052 o similar
Potenciómetro código SFA/EM/037 o similar
Agitador Orbital código SFA/EA/006 o similar
6.1.2. Materiales
Erlenmeyer de 125 ml
Dispensador de 50 ml
Balón aforado de 2 1
Barras para agitador magnético
Vasos de precipitación de 100 ml
Papel filtro cualitativo
6.1.3. Reactivos
Bicarbonato de sodio
EDTA
Hidróxido de sodio
Ácido Acético
Agua tipo I
Carbón activado
6.2. Condiciones ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas. Se considera las condiciones definidas por los equipos
utilizados.
6.4. Realización
Pesar 2.5 g de suelo en un erlenmeyer de 125 ml.
Añadir 25 ml de solución extractante de Olsen modificado con un
dispensador.
Agitar en el agitador orbital por 10 minutos a 400 rpm.
Filtrar a través de un papel filtro cualitativo, recogiendo el filtrado en un
vaso de precipitación de 100 ml.
Con éste extracto proceder a cuantificar P, K, Ca, Mg, Fe, Cu. Zn y Mn
mediante los respectivos métodos de ensayo.
6.5 Método de Registro y Datos a ser Registrados
NA
6.6 Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
NA
6.6.2. Aseguramiento de la calidad
NA
7. ANEXOS
7.1. Anexo 1: Elaboración de la solución extractora de Olsen modificado
Pesar en una cápsula de porcelana 84.6 g de bicarbonato de sodio
(NaHCO3) y 7.44 g de EDTA.
Trasvasar cuantitativamente la mezcla de reactivos a un balón aforado
de 2l.
Disolver los reactivos con agua destilada tipo I y llenar de agua el balón
hasta cerca de la línea de aforo.
Ajustar el pH a 8.5 disolviendo lentejas de hidróxido de sodio con ayuda
de agitación magnética.
Aforar con agua tipo I y homogenizar la solución.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE pH EN
SUELOS
1. OBJETO
Establecer los lineamentos técnicos para la determinación de pH en muestra de suelos
agrícolas.
2.ALCANCE
El presente procedimiento es de aplicación para la determinación de pH en suelos
agrícolas de cualquier tipo.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Suelos agrícolas de las diferentes regiones del Ecuador en un rango entre 4 - 1 0 u pH.
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
PGC/LA/01, Procedimiento General "Gestión de la Documentación".
EPA 9045 D.
Metodología unificada Red de laboratorios de Suelos del Ecuador, Catálogo
INIAP cuarta aproximación Quito-2009.
5.GENERAL
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
pH.- Es una medida de la acidez o alcalinidad de una disolución. Se define
como el logaritmo negativo en base I O de la actividad de los iones hidrógeno
(H+).
Muestras de control interno. - Analito con concentraciones conocidas
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica. basado en los
requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
NA: No aplica
ml: Mililitros
g: Gramo
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento no requiere la utilización de sustancias químicas
peligrosas, sin embargo, es necesario tomar las precauciones debidas para
la manipulación como uso de guantes y de mandil.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza analítica Scientech, código SFNEM/030 o similar
Potenciómetro de mesa Mettler Toledo/Seven Multi código SFA/ EM/025 o
similar
Electrodos de vidrio
6.1.2. Materiales
Vasos plásticos de 50 ml
Varillas de agitación de vidrio
Papel absorbente
Agua destilada tipo I
6.1.3. Reactivos
Soluciones buffer pH: 4-7 y 10.
6.1.4. Materiales de Referencia
Se cuenta con material de referencia Código SFA/MRC005, con valor de
propiedad de 5,68 unidades de pH.
6.2 Condiciones Ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales específicas.
Se considera las condiciones definidas en las soluciones buffer que está en un
rango de 5 a 50 ºC.
Las condiciones ambientales se controlan de acuerdo a lo establecidos en el
Instructivo INT/SFA/01
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas a ser
realizadas
Preparación de la muestra es realizado de acuerdo al instructivo lNT/SFA/29
"Tratamiento de Muestras de Suelos".
La identificación de la muestra debe mantener los criterios establecido en el
instructivo INT/SFA/09
La balanza analítica y potenciómetro deben ser preparados y verificados de
acuerdo a Jo indicado en sus respectivos instructivos de uso.
6.4. Realización
Pesar 10 g de suelo en el vaso plástico de 50 ml
Agregar 25 ml de agua tipo l.
Mezclar manualmente durante 5 minutos con ayuda de una varilla de agitación.
Dejar en reposo durante 60 minutos aproximadamente.
Agitar enérgicamente con la varilla de vidrio la suspensión, lavar el electrodo con
agua destilada, introducir en la zona media del sobrenadante (cuidando de no
apoyar el electrodo en las paredes) y realizar la medición. Lavar el electrodo con
agua destilada antes de cada medición.
El equipo corrige variaciones de temperatura
6.5. Método de Registro y Datos a ser registrados
El resultado se genera por lectura directa de potenciómetro y se registran los datos
obtenidos en el formato PEE/SFA/06-FOOI.
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Los resultados se reportan de la medida directa del equipo y corregidos a 25ºC.
6.6.2. Aseguramiento de la Calidad
Los controles de calidad del método se realizan utilizando las siguientes actividades:
Lectura de estándar a partir de 15 muestras leídas.
Corridas con una muestra control interno.
Corridas con estándar de referencia
lnterlaboratorios
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se describen en la
siguiente tabla:
Actividad Criterio de aceptación y rechazo
Acción si no cumple
frecuencia Responsable
Corridas con una
muestra control
interno
≤ 5%
Verificar la
calibración del
electrodo si
persiste registrar
como trabajo de
ensayo no
conforme
Según el
Programa de
aseguramiento
de calidad de
los ensayos
RT Corridas con
estándar de
referencia
6,98 – 7,02
Unidades
de pH
Verificar la
calibración del
electrodo si
persiste registrar
como trabajo de
ensayo no
conforme
Interlaboratorios Z-score ≤ 2
Registrar como
trabajo de ensayo
no conforme
Para gestionar como trabajo de ensayo no-conforme, se debe aplicar el procedimiento
PGC/LA/08.
6.6.4. Incertidumbre
Se estima de acuerdo a lo establecido en el procedimiento PGT/LA/04
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados se expresan en valor de pH, y se reportan en el informe con dos cifras
decimales.
7. ANEXOS
7.1. Anexo l. Registro de datos primarios de pH en muestras de suelo
Fecha N°
Lab
pH Resp. Fecha N°
Lab
pH Resp. Fecha N°
Lab
pH Resp.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE MATERIA
ORGÁNICA Y NITRÓGENO TOTAL EN SUELOS- MÉTODO DE WALKLEY
BLACK
1. OBJETO
Definir un procedimiento para determinar el carbono orgánico existente en una
muestra de suelo, para posteriormente calcular la cantidad de materia orgánica y
nitrógeno total presente en la muestra.
2. ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para la determinación de la materia orgánica y nitrógeno total en muestras
de suelo.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARÁMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Suelos agrícolas de las diferentes regiones del Ecuador
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
PGC/LA/01, Procedimiento General "Gestión de la Documentación".
PAGE, A.L.; MILLER, R.H. y KEENEY, D. ED. 1982. Methods of Soil
analysis. Part II. Chemical and Microbiological properties. 2 end. Edition.
Madison WIS. American Society of Agronomy Inc. VT (Agronomy 9). pp.
4.2. Documentos a utilizar conjuntamente con el PG
INT/SFA/06 Instructivo "Uso y Verificación de Balanza"
INT/SFA/29 Instructivo "Tratamiento de Muestras de Suelos"
PEE/SFA/09-FO01 Registro de datos primario de Materia Orgánica y
Nitrógeno Total en muestras de suelos.
5. GENERAL
La materia orgánica del suelo es una mezcla heterogénea de residuos orgánicos de
vegetales o animales en cualquier grado de descomposición. El humus es una
mezcla compleja de sustancias coloidales y de formas inertes cercanas al C
elemental, como carbón, hulla o grafito que ocasionalmente se encuentran
presentes en cantidades apreciables.
Para analizar la materia orgánica en los suelos se puede utilizar métodos directos
basados en el proceso de combustión, en los cuales se mide cuantitativamente el
CO2 desprendido y métodos indirectos, donde la materia orgánica del suelo puede
ser tratada con una mezcla de K2Cr2O7 y H2SO4, de acuerdo con la siguiente
ecuación química:
2 Cr2O7 2- + 3C0 + 16H+ = 4Cr3+ + 3CO2 + 8H2O
Después de la reacción, el Cr2O7 2- reducido puede medirse por volumetría con una
retrotitulación con la sal de Mohr para cuantificar la cantidad de ion dicromato no
reducido, y posteriormente, conocer por diferencia la cantidad de ion dicromato que
reaccionó, y con ello el contenido de carbono orgánico en la muestra.
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Reacción de óxido-reducción (redox).- Reacción química en la cual existe
una transferencia de electrones entre los reactivos, dando lugar a un cambio
en los estados de oxidación de los mismos con respecto a los productos.
Retrotitulación. - Es un procedimiento donde el exceso de solución patrón
utilizada para consumir un analito se determina mediante titulación con una
segunda solución patrón.
5.3 Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica, basado en los
requisitos de la norma NTE INEN ISO/lEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
mg: miligramos
g: Gramos
ml: mililitros
l: Litro
N: Normalidad
MO: Materia Orgánica
NA: No aplica
5.4 Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, como el
ácido, sulfúrico concentrado y el dicromato de potasio, por lo que es
indispensable la utilización del equipo de protección personal completo
(mandil, guantes, gafas y respirador con doble filtro para ácidos y vapores
orgánicos).
La reacción de oxidación conlleva el desprendimiento de vapores ácidos
y tóxicos, por lo que ésta debe desarrollarse dentro de una campana de
extracción de gases.
La reacción de oxidación es exotérmica, por lo que se recomienda tener
mucho cuidado al manipular el erlenmeyer en dónde se lleva a cabo la
reacción, por si existe alguna rotura.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidades Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Balanza analítica
Balanza de precisión
Agitador magnético
6.1.2. Materiales
Erlenmeyer de 250 ml
Dispensador de 25 ml
Balón aforado de 1 l
Pipeta volumétrica de 10 ml
Bureta de 50 ml
Soporte universal
Pinza de bureta
Espátula
Cápsula de porcelana
Desecador
Barras para agitador magnético
6.1.3. Reactivos
Solución de dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1 N
Ácido Sulfúrico (H2SO4) concentrado grado técnico y grado reactivo
Solución de sal de Mohr (Fe(NH4)2(SO4)2-6H2O) 0,5 N
Ácido ortofosfórico concentrado
Solución de difenilamina 1%
Agua tipo I
6.1.4. Materiales de Referencia
No aplica
6.2. Condiciones ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas.
6.4 Realización
Pesar 0.5 g de suelo en un erlenmeyer de 250 ml. Para suelos cuyas
características físicas conllevan a sospechar que poseen abundante
materia orgánica (suelos negruzcos), se pesará 0.1 g.
Añadir 5 ml de la solución de dicromato de potasio 1N, y mezclar el
suelo con la solución mediante movimientos giratorios leves, tratando
de que la muestra no se quede pegada en las paredes.
Añadir 12.5 ml de ácido sulfúrico grado técnico, y mezclar suavemente
con movimientos giratorios, evitando que las partículas de suelo se
peguen en las paredes y queden fuera del contacto del oxidante.
Dejar en reposo 30 minutos.
Añadir 100 ml de agua destilada.
Adicionar 5 ml de ácido ortofosfórico concentrado.
Agregar 3 gotas de indicador difenilamina.
Titular con la solución de sal de Mohr 0.5 N hasta que el color de la
solución cambie a verde botella.
Simultáneamente realizar un blanco, el cual se prepara de la misma
manera que se indica en los puntos anteriores, pero sin muestra,
mismo que servirá para calcular la verdadera normalidad de la sal de
Mohr
Nota: Cuando al final de la valoración de una muestra se ha gastado menos de 1.0
ml o más ml que el valor utilizado para titular la muestra control y los blancos, es
conveniente repetir el análisis de esa muestra utilizando mayor o menor peso de
muestra según sea el caso; o en su defecto, cuando luego de adicionarle la solución
de dicromato de potasio y el ácido sulfúrico concentrado a la muestra, se aprecie a
simple vista un color verde intenso, se debe añadir de 2 a 4 ml más de dicromato
de potasio.
6.5. Método de Registro y Datos a ser registrados
El resultado se genera por volumetría y se registran los datos obtenidos en
el formato PEE/SFA/09-FO01
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Cálculo para determinar la normalidad de la solución de la Sal de Mohr:
𝑁𝐹𝑒𝑆𝑂4 =5 𝑚𝑙 𝐾2𝐶𝑟2𝑂7
𝑚𝑙 𝑑𝑒 (𝐹𝑒(𝑁𝐻4)2(𝑆𝑂4)2. 6𝐻2𝑂 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑒𝑛 𝑒𝑙 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
Cálculo para determinar el % de carbono orgánico
Es conocido que este método no oxida todo el carbono orgánico presente en
la muestra, sino que solo oxida el 77 %. Por tal motivo, para compensar el
porcentaje de carbono no oxidado, es necesario utilizar dentro de los cálculos
el factor 1.3, mismo que proviene de la relación 1/0.77. Así tenemos:
% 𝐶 𝑜𝑟𝑔 =(𝐵 − 𝑀)𝑥 𝑁 𝑥 0,003 𝑥 1,3 𝑥 100
𝑃𝑀=
(𝐵 − 𝑀)𝑥 𝑁 𝑥 0,39
𝑃𝑀
En donde:
B = Volumen en ml de sal de Mohr gastado en el blanco
M = Volumen en ml de la sal de Mohr gastado en la muestra
N = Normalidad de la sal de Mohr
0,003 = Peso en gramos de un miliequivalente de carbono
1,3 = Factor de eficiencia de oxidación del carbono orgánico
100 = Factor de conversión a porcentaje
PM = Peso de la muestra en gramos
Cálculo para determinar el % de materia orgánica
El Carbono es el principal elemento de materia orgánica del suelo, por tal
razón el contenido de carbono orgánico es expresado como la materia
orgánica presente en un suelo cuando se multiplica por el factor de Van
Bemmelen de 1.724. Este valor asume que la materia orgánica presente en
el suelo confiere un 58% de C orgánico. Así tenemos:
% MO = % C orgánico x 1,724
Cálculo para determinar el % de nitrógeno total:
%𝑁 =𝑀𝑂
20
En donde:
MO= Porcentaje de materia orgánica
6.6.2. Aseguramiento de la calidad
Los controles de calidad del método se realizan utilizando las siguientes
actividades:
Un duplicado cada 15 muestras.
Lectura del control interno al inicio de los análisis
6.6.3. Criterios de aceptación y rechazo
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se
describen en la siguiente tabla
Para gestionar como trabajo de ensayo no-conforme, se debe aplicar el
procedimiento PGC/LN08
6.6.4. Incertidumbre
No aplica
Actividad Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción
sino
cumple
Frecuencia Responsable
Duplicado de
muestra
± 2% Repetir el
análisis
Cada 15
muestras RT/A
Lectura del
control interno
1.5 – 2.5 ±10 % Repetir el
análisis
Al inicio de
los análsis
6.6.5. Informe de resultados
Los resultados de MO y N total serán expresados en %, y se reportarán en el
informe con 2 cifras decimales. Adicionalmente se colocará en el informe de
resultados el cuadro de interpretación indicado en el Anexo V.
7. ANEXOS
7.1. Anexo I: Preparación de la solución de dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1 N
Pesar en una cápsula de porcelana aproximadamente 50 g de K2Cr2O7
grado reactivo.
Colocar la cápsula de porcelana con el K2Cr2O7 en una estufa a 105 ºC
por 2 horas.
Sacar el K2Cr2O7 de la estufa y dejar enfriar en un desecador por 1 hora.
Pesar en papel aluminio 49.04 g de K2Cr2O7 con una balanza analítica.
Trasvasar cuantitativamente el K2Cr2O7 pesado a un balón aforado de 1
L.
Disolver totalmente el K2Cr2O7 contenido en el balón con agua TIPO I,
aforar y homogenizar la solución.
Guardar la solución de K2Cr2O7 en un frasco ámbar perfectamente limpio
y etiquetado.
7.2. Anexo II: Preparación de la solución de la sal de Mohr (Fe(NH4)2
(SO4)2.6H2O) 0.5 N.
Pesar en papel aluminio 196.05 g de (Fe(NH4)2 (SO4)2.6H2O) con una
balanza analítica.
Trasvasar cuantitativamente el (Fe(NH4)2 (SO4)2.6H2O) pesado a un balón
aforado de 1 l.
Disolver el (Fe(NH4)2 (SO4)2.6H2O) con aproximadamente 500 ml de agua.
Agregar 15 ml de H2SO4 concentrado y mezclar.
Adicionar agua destilada hasta la línea de aforo y dejar enfriar la solución.
Aforar y homogenizar la solución.
NOTA: Ésta solución se la puede almacenar máximo una semana, razón por la cual
es preferible preparar la cantidad necesaria para cada serie de muestras.
7.3. Anexo III: Preparación de la solución indicadora de difenilamina 1 %
Pesar en una cápsula de porcelana 0.5 g de difenilamina.
Disolver la difenilamina en 100 ml de ácido sulfúrico concentrado.
Agregar la mezcla anterior a 20 ml de agua destilada y homogenizar la
solución.
Guardar la solución indicadora en un frasco ámbar.
7.4. Anexo IV: Cuadro de Interpretación de la MO y N total
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS - REGIÓN COSTA
PARÁMETROS MO * (%) N*(%)
BAJO < 3.1 0-0.15
MEDIO 3.1 – 5.0 0.16 – 0.3
ALTO >5.0 >0.31
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS - REGIÓN SIERRA
PARÁMETROS MO * (%) N*(%)
BAJO < 1.0 0-0.15
MEDIO 1 – 2.0 0.16 – 0.3
ALTO >2.0 >0.31
7.5. Anexo VI: Registro de datos primario de Materia Orgánica y Nitrógeno Total en
muestras de suelos Fecha No.
Lab. Peso muestra (g)
Vol adicional dicromato (mL.)
Vol inicial bureta (mL)
Vol titulante (mL)
Cont K
MO (%)
N (%)
Resp.
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE FÓSFORO
ASIMILABLE EN SUELOS-MÉTODO OLSEN MODIFICADO
1. OBJETO
Definir un procedimiento para cuantificar fósforo (P) asimilable en muestras de
suelo.
2. ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para cuantificar P asimilable utilizando el extracto de suelo obtenido mediante
procedimiento Olsen modificado
3. ITEMS A ENSAYAR, PARÁMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Suelos agrícolas de las diferentes regiones del Ecuador
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
PGC/LA/01, Procedimiento General "Gestión ele la Documentación".
Metodología unificada Red de laboratorios de Suelos del Ecuador, Catálogo
5. GENERAL
El fósforo es esencial en todas las formas de vida conocidas, dado que constituye
un elemento clave en muchos procesos fisiológicos y bioquímicos. Se trata de un
componente presente en todas las células de todos los organismos vivos. El fósforo
aparece en estructuras complejas de ADN y ARN que, al contener y codificar la
información genética, controlan todos los procesos biológicos en las plantas.
Además, el fósforo es un componente fundamental del sistema de transporte de
energía en todas las células.
El fósforo desempeña un papel fundamental en la fotosíntesis, proceso por el que
las plantas absorben la energía del sol para sintetizar moléculas de carbohidratos,
es decir, de azúcares, que son transportados a los órganos de almacenamiento de
las plantas. Este proceso es esencial para todas las formas de vida y constituye el
primer paso en la cadena para producir alimentos, piensos y fibras.
Las raíces de las plantas absorben el fósforo del agua presente en el suelo y que
se denomina solución acuosa del suelo. Sin embargo, los compuestos de fósforo no
son muy solubles y, como consecuencia, la cantidad de fósforo que la planta puede
tomar de la solución acuosa del suelo tiende a ser mucho menor de la que necesita,
especialmente cuando la planta se encuentra en un periodo de fuerte crecimiento.
La carencia de fósforo afecta no solo al crecimiento de la planta y al desarrollo y
rendimiento de la cosecha, sino también a la calidad del fruto y a la formación de
las semillas. Asimismo, la carencia de fósforo puede retrasar la maduración de las
cosechas, con lo que se retrasa la recolección y se pone en riesgo la calidad del
producto.
El presente método cuantifica el fósforo asimilable mediante espectrofotometría UV-
YIS, partiendo del extracto de suelo obtenido con Olsen modificado. El fósforo es
determinado indirectamente por la formación de un complejo coloreado "azul de
molibdeno" que se forma por la reacción del fósforo con solución sulfomolíbdica en
presencia de ácido ascórbico, mismo que se mide espectrofotométricamente
mediante una curva de calibración elaborada con soluciones de fósforo de
concentraciones conocidas.
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
Métodos espectrofotométricos: Es un conjunto de técnicas
instrumentales que permite comparar la radiación absorbida o transmitida
por una solución que contiene una cantidad desconocida de analito, vs.
una gama de soluciones que contienen una cantidad conocida del mismo
analito.
Longitud de onda: Es la distancia real recorrida por la onda, es decir, es
la distancia desde el inicio de un ciclo completo de una onda hasta su final.
La longitud de onda se la representa con la letra griega λ, y su unidad
dentro del SI es el metro (m), sin embargo, para aplicaciones analíticas
espectrofotométricas se utiliza el submúltiplo nanómetro (nm).
Transmitancia: a transmitancia óptica se define como la fracción de luz
incidente, a una longitud de onda específica, que pasa a través de una
muestra. Su expresión matemática es:
𝑇 =𝐼
𝐼0
Donde I0 es la intensidad del rayo incidente, e I es la intensidad de la luz
que viene de la muestra.
La transmitancia de una muestra está normalmente dada
porcentualmente, definida como:
𝑇% = (𝐼
𝐼0) 𝑥100%
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica, basado en
los requisitos de la norma NTE INEN ISO/lEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
NA: No aplica
g: Gramos
ml: Mililitro
l: Litro
ppm: Partes por millón
Aλ: Absorbancia
T: Transmitancia
λ: Longitud de onda
Nm: Nanómetros
P: Fósforo
5.4. Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, como el
ácido sulfúrico concentrado, por lo que es indispensable la utilización del
equipo de protección personal completa (mandil, guantes, gafas y respirador
con doble filtro para ácidos y vapores orgánicos) y la sorbona cuando se
maneje dicha sustancia.
La preparación y manipulación de las soluciones "A" y "B" que se utilizan
durante el ensayo, deberán realizarse con guantes.
Durante la preparación del reactivo "A", la temperatura de la solución se
elevará por efecto de la disolución del ácido sulfúrico concentrado. Para ello,
se deberá controlar la temperatura con un baño de agua fría
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidades Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar de los resultados de los análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1. Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Espectrofotómetro UV-Vis
Balanza analítica
Estufa
Agitador magnético
Vortex
Potenciómetro
Sorbona
6.1.2. Materiales
Cápsula de porcelana
Balón aforado de 50, 100, 200, 250, 500, 1000 y 2000 mJ.
Barras para agitador magnético
Bureta de 50 ml
Tubos de ensayo
Gradillas
Pipeta automática de 1000 µl
Pipeta automática de 10 ml
Puntas para pipetas de 1000 µl y 10 ml
Vasos de precipitación de 100 ml
Papel aluminio
6.1.3. Reactivos
Tartrato de potasio y antimonio
Molibdato de amonio
Ácido sulfúrico concentrado G.R.
Ácido ascórbico
Goma de acacia ó arábiga
Fosfato monobásico de potasio P.A. o solución comercial para
espectrofotometría de 1000 ppm de P
Bicarbonato de sodio
EDTA
Hidróxido de sodio P.A.
Agua tipo I
6.2. Condiciones ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales específicas.
6.3. Identificación Ítems de Ensayo, Preparación y Verificaciones previas a
ser realizadas
Para la realización del presente ensayo se debe haber obtenido previamente
el extracto de suelo de acuerdo a la metodología descrita en el PEE/SFA/04.
Antes de comenzar con la realización del presente procedimiento, se debe
preparar el reactivo "B" tal como se indica en el Anexo ll.
A fin de evitar cualquier contaminación cruzada, es indispensable lavar muy
bien con jabón libre de fósforo el material de vidrio a utilizarse en el ensayo,
cepillando correctamente cada utensilio, para posteriormente secarlo en la
estufa a 105 ºC.
Para la realización del presente ensayo se deberá ocupar agua tipo I, tanto
para la preparación de las soluciones, como para el análisis.
Verificar de acuerdo al instructivo INT/SFA/13, Instructivo "Uso y Verificación
de Equipo UV-Vis".
6.4. Realización
Elaborar los estándares de 1 - 2.5 - 5 - 7 .5 y 10 ppm de P para la curva de
calibración, tal como se detalla en el Anexo IV.
Colocar en un tubo de ensayo 4 ml de agua tipo I con una pipeta automática.
Añadir 5 ml del reactivo "B" preparado tal como se indica en el Anexo II con
una pipeta automática. Si la mezcla del agua con el reactivo "B" da coloración
azul, desechar ese ensayo y volver a realizarlo, puesto que una coloración
azul antes de añadir la muestra significa contaminación. La mezcla agua y
reactivo "B" debe ser perfectamente transparente.
Adicionar en el tubo de ensayo 1 ml del extracto de suelo con una pipeta
automática.
Agitar la mezcla contenida en el tubo en el vortex.
Dejar reposar una hora sin exponer las soluciones a la luz directa.
Proceder de la misma manera con todos los puntos de la curva de
calibración, realizando adicionalmente un blanco de la misma forma
utilizando la solución de Olsen modificado.
Cargar en el Espectrofotómetro de UV-VIS el método para fósforo en suelos,
mismo que debe estar a una longitud de onda de 882 nm.
Realizar la curva de calibración, encerando el equipo con el blanco, e
ingresando como cero de la curva al blanco.
Leer las absorbancias de las muestras.
6.5. Método de Registro y Datos a ser registrados
El resultado se registra en el formato PEE/SFA/11-FO01 Registro de datos
primario de fósforo asimilable en muestras de suelos
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Para obtener la concentración de P en ppm de las muestras de suelo, se
deberá considerar el factor de dilución de 10, proveniente de la relación 25
ml de extractante / 2.5 g de muestra de suelo utilizada para obtener el
extracto de suelo. Para esto se puede proceder de las dos maneras
siguientes:
Correr la curva de calibración ingresando en el equipo las
concentraciones de 1 - 2.5 - 5 - 7.5 y 10 ppm, y luego multiplicar los
resultados obtenidos del espectrofotómetro por 10.
Correr la curva de calibración ingresando en el equipo las
concentraciones de 10 - 25 - 50 - 75 y 100 ppm, con la finalidad de reportar
directamente el valor proporcionado por el espectrofotómetro.
6.6.2. Aseguramiento de la Calidad
Los controles de calidad del método se realizan utilizando las siguientes
actividades:
• Corridas con una muestra control interno.
• Curva de calibración.
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se
describen en la siguiente tabla:
Actividad
Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no cumple Frecuencia Responsable
Corridas con
una muetra
control
interno
± 20% en
valor
aproximado
de 100 ppm
Verificar la calibración del
UV- VIS.
Cada grupo
de análisis RT/A
Curva de
calibración R2 ≥ 0,995
Quitar un punto de
calibración hasta que la
curva se ajuste y mínimo
con 3 puntos de
calibración, si no cumple
volver a calibrar.
Para gestionar como trabajo de ensayo no-conforme, se debe aplicar el
procedimiento PGC/LN08
6.6.3. Incertidumbre
No aplica
7. ANEXOS
7.1 Anexo I: Preparación del reactivo "A".
• Pesar en una cápsula de porcelana aproximadamente 1.5 g de tartrato
de potasio y antimonio.
• Secar en la estufa a 105 ºC el tartrato de potasio y antimonio contenido
en la cápsula de porcelana por 2 horas.
• Enfriar el tartrato de potasio y antimonio en un desecador por 1 hora.
• Pesar en la balanza analítica 1 g de tartrato de potasio y antimonio
sobre papel aluminio.
• Trasvasar cuantitativamente el tartrato de potasio y antimonio un balón
de 1 l.
• Disolver el tartrato de potasio y antimonio contenido en el balón con
aproximadamente 400 ml de agua tipo l.
• Añadir lentamente 165 ml de ácido sulfúrico concentrado G. R.,
enfriando la solución con un baño de agua fría.
• Pesar en la balanza analítica 7.5 g de molibdato de amonio en un papel
aluminio.
• Trasvasar cuantitativamente el molibdato de amonio a un vaso de
precipitación de 400 ml.
• Disolver el molibdato de amonio con aproximadamente 300 ml de agua
tipo I.
• Una vez que la mezcla de ácido sulfúrico y tartrato esté completamente
fría, adicionar la solución de molibdato.
• Aforar con agua tipo 1 y homogenizar la solución.
• Almacenar la solución en un frasco ámbar perfectamente limpio y bien
etiquetado.
NOTA: Esta solución es sensible al calor y a la luz, sin embargo, si es
almacenada en un frasco ámbar y en refrigeración se conserva durante varios
meses sin deteriorarse.
7.2 Anexo II: Preparación del reactivo "B".
• Pesar 1 g de ácido ascórbico en la balanza analítica sobre papel
aluminio.
• Pesar 1 g de goma arábiga en la balanza analítica sobre papel
aluminio.
• Transferir cuantitativamente tanto el ácido ascórbico como la goma
arábiga a un balón aforado de 1 l, mismo que debe estar cubierto con
papel aluminio para evitar que el ácido ascórbico se descomponga por
acción de la luz.
• Adicionar al balón 150 ml del reactivo "A" preparado tal como se indica
en el Anexo l.
• Disolver el ácido ascórbico y la goma arábiga en el reactivo "A" con
ayuda de agitación magnética.
• Aforar con agua tipo l y homogenizar la solución.
NOTA: El reactivo "B" es inestable y no se puede almacenar, por tal motivo, éste
reactivo se lo prepara el mismo día en que se va a realizar el análisis de P. Por lo
tanto, antes de preparar el reactivo "B", es necesario calcular el volumen que se
requiere para analizar la serie de muestras, tomando en consideración los puntos
de la curva, el blanco y las posibles diluciones.
7.3 Anexo III: Preparación de la solución extractora de Olsen modificado.
• Pesar en una cápsula de porcelana 84 g de bicarbonato de sodio
(NaHCO3) y 7.44 g de EDTA.
• Trasvasar cuantitativamente la mezcla de reactivos a un balón aforado de
2 l.
• Disolver los reactivos con agua destilada tipo I y llenar de agua el balón
hasta cerca de la línea de aforo.
• Ajustar el pH a 8.5 disolviendo lentejas de hidróxido de sodio con ayuda
de agitación magnética.
• Aforar con agua tipo l y homogenizar la solución.
7.4 Anexo IV: Elaboración de estándares para la curva de calibración.
a) Elaboración de la solución madre de 1000 ppm de P
En caso de que no se disponga de una solución comercial de 1000 ppm de P.
proceder como sigue:
• Pesar aproximadamente 6 g de fosfato monobásico de potasio
(KH2P04) en una cápsula de porcelana.
• Secar el fosfato monobásico de potasio en la estufa a 105 ºC por 2
horas.
• Enfriar el fosfato monobásico de potasio en un desecador por 1 hora.
• Pesar en la balanza analítica 4.394 g de fosfato monobásico de potasio
sobre papel aluminio.
• Trasvasar cuantitativamente el fosfato monobásico de potasio a un
balón aforado de 1 l.
• Disolver el fosfato monobásico de potasio con agua destilada tipo 1,
aforar y homogenizar la solución.
• Almacenar la solución madre en un frasco plástico perfectamente
limpio y bien etiquetado en refrigeración.
b) Elaboración de la solución estándar de 10 ppm de P
• Colocar 2.5 ml de la solución madre de 1000 ppm de P en un balón
aforado de 250 ml con una pipeta automática.
• Aforar el balón a 250 ml con solución extractora de Olsen modificado y
homogenizar la solución.
• Almacenar la solución estándar en un frasco plástico perfectamente limpio
y bien etiquetado en refrigeración.
c) Elaboración de los estándares de 1 - 2.5 - 5 y 7.5 ppm de P
• Colocar en balones aforados de 50 ml perfectamente limpios, la siguiente
cantidad de solución estándar de 10 ppm de P con la ayuda de una bureta
de 50 ml:
No. Estándar Concentración del
estándar (ppm)
Volumen de solución estándar
de 10 ppm de P en ml.
1 1 5
2 2.5 12.5
3 5 25
4 7.5 37.5
• Aforar el balón a 50 ml con solución extractora de Olsen modificado y
homogenizar la solución.
• Almacenar las soluciones estándar en frascos plásticos perfectamente
limpios y bien etiquetados en refrigeración.
7.5 Anexo V: Cuadro de Interpretación del P.
REGIÓN COSTA Y SIERRA
PARÁMETRO P (ppm)
BAJO 0 - 10
MEDIO 11 – 20
ALTO >21
7.6 Anexo VI: Registro de datos primarios de fosforo asimilable en muestra
de suelo.
No. Lab. Concentración (ppm) Abs
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN DE K, Ca Y
Mg ASIMILABLES EN SUELOS-MÉTODO OLSEN MODIFICADO
1. 0BJETO
Definir un procedimiento para cuantificar K, Ca y Mg asimilables en muestras de
suelo.
2. ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para cuantificar K, Ca y Mg asimilables utilizando el extracto de suelo
obtenido mediante Olsen modificado
3. ITEMS A ENSAYAR, PARAMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Analito Rango (cmol/kg)
Potasio 0,32 – 1,28
Calcio 3,12 – 12,50
Magnesio 0,62 – 2,50
4. REFERENCIAS
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
Metodología unificada Red de laboratorios de Suelos del Ecuador, Catálogo
INIAP cuarta aproximación Quito-2009.
5. GENERAL
El potasio (K), calcio (Ca) y magnesio (Mg) son macronutrientes, es decir son
elementos que son requeridos en grandes cantidades por las plantas. El potasio
tiene un rol muy importante, aumenta la resistencia a enfermedades y sequía, ayuda
en la actividad enzimática, en la fotosíntesis, en el balance de agua, y en el
crecimiento meristemático, favoreciendo la fructificación, la maduración y el
desarrollo de los frutos. El calcio estimula el desarrollo de las raíces y de las hojas,
interviene en la activación de varios sistemas de enzimas, y ayuda a neutralizar los
ácidos orgánicos de la planta. Por otra parte el magnesio está muy asociado con el
calcio y el potasio, favorece la absorción del fósforo, participa como activador
enzimático, y es el elemento constituyente principal de la molécula de clorofila,
fundamental en la fotosíntesis.
El presente método cuantifica el K, Ca y Mg asimilables mediante
espectrofotometría de absorción atómica, partiendo del extracto de sucio obtenido
con Olsen modificado.
5.1. Políticas
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser
administrados por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas
puede hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los
apartados, no repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
• Métodos espectrofotométricos: Es un conjunto de técnicas instrumentales que
permiten comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que
contiene una cantidad desconocida de analito, vs. una gama de soluciones que
contienen una cantidad conocida del mismo analito.
• Absorción atómica: Es un método instrumental que esta basado en la
atomización del analito en matriz líquida, utilizando un nebulizador para crear una
niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama, en
donde la muestra es desolvatada y expuesta a una energía a una determinada
longitud de onda emitida ya sea por una lámpara de cátodo hueco construida con el
mismo analito a determinar o una lámpara de descarga de electrones.
• Longitud de onda: Es la distancia real recorrida por la onda, es decir, es la
distancia desde el inicio de un ciclo completo de una onda hasta su final. La longitud
de onda se la representa con la letra griega A, y su unidad dentro del SI es el metro
(m), sin embargo, para aplicaciones analíticas espectrofotométricas se utiliza el
submúltiplo nanómetro (nm).
5.3. Abreviaturas
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica, basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
NA: No aplica
g: Gramos
mL: Mililitro
L: Litro
ppm: Partes por millón
cmol/kg: centimol por kilogramo
Aλ: Absorbancia
λ: Longitud de onda
nm: Nanómetros
5.4 Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
El presente procedimiento utiliza sustancias químicas peligrosas, por lo que es
indispensable la utilización del equipo de protección personal completo (mandil,
guantes, gafas y respirador con doble filtro para ácidos y vapores orgánicos) y
Sorbona cuando se maneje dicha sustancia.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar resultados de los
análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1 Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Espectrofotórnetro de absorción atómica
Balanza analítica
Agitador magnético
Vortex
Potenciómetro
Sorbona
6.1.2 Materiales
Balón aforado de 50, 100, 200 y 2000 mL
Pipetas volumétricas de l, 2, 4, 5, 10 y 20 mL
Dispensador automático de 25 mL
Tubos de ensayo
Gradillas
Pipeta automática de 100 - 1000 µl
Pipeta automática de l - 10 mL
Puntas para pipetas de 1000 µl y 10 mL
Papel aluminio
6.1.3 Reactivos
Oxido de lantano G.R.
Ácido clorhídrico concentrado G.R.
Estándar comercial de 1000 ppm de K
Estándar comercial de 1000 ppm de Mg
Estándar comercial de 1000 ppm de Ca
Bicarbonato de sodio
EDTA
Hidróxido de sodio G.R.
Agua tipo I
6.2 Condiciones ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas. Se considera las condiciones en los manuales de los
equipos de absorción atómica entre 10-35°C.
La identificación de la muestra debe mantener los criterios
establecidos en el instructivo INT/SFA/09
Verificar de acuerdo al instructivo INT/SFA/02, Instructivo "Uso y
Verificación de Equipo de Absorción Atómica".
6.4. Realización
Elaborar el blanco y los siguientes estándares de acuerdo a lo indicado
en el Anexo III:
Para K: 12.5 - 25.0- 37.5 y 50.0 ppm
Para Ca: 62.5 - 125.0 - 187.5 y 250 ppm
Para Mg: 7.5 - 15 - 22.5 y 30.0 ppm
Colocar en un tubo de ensayo 1 mL del extracto de suelo con una
pipeta automática.
Añadir 9 mL de agua tipo I y 15 mL de óxido de lantano al 1 %.
Agitar la mezcla contenida en el tubo con el vortex.
Colocar la lámpara y cargar en el software del espectrofotómetro de
absorción atómica el método del elemento a determinar.
Encender el quemador y encerar el equipo con el blanco.
Realizar la curva de calibración en el equipo, ingresando como cero el
blanco.
Leer las absorbancias de las muestras y determinar la concentración
del analito en ppm.
NOTA: En caso de que se deba realizar una dilución en alguna muestra, utilícese el
blanco como solvente y considérese el factor de dilución respectivo.
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
Para obtener la concentración del K, Ca y Mg en las muestras de suelo en
cmol/kg, que es igual a meq/100 mL, se deberá considerar los siguientes factores:
Factor de dilución 1:
Éste factor de dilución proviene de la relación 25 mL de extractante / 2.5
g de muestra de suelo utilizada para obtener el extracto de suelo. Es igual
a 10
Factor de dilución 2:
Éste factor de dilución proviene de la dilución de la muestra con agua y
con óxido de lantano (25 mL total/ 1 mL de alícuota), el mismo que es
igual a 25.
Factor para convertir los ppm en meq/100 mL:
Los datos que se obtienen del espectrofotómetro de absorción atómica se
encuentran en ppm, es decir en mg/1, y para convertir ésta unidad a
meq/100 mL se realizan los siguientes cálculos de conversión:
Para K:
1𝑚𝑔𝐾
𝑙𝑥
1𝑙
1000𝑚𝑙𝑥
1𝑚𝑒𝑞𝐾
39𝑚𝑔𝑘𝑥
100𝑚𝑙
100𝑚𝑙= 0,00256
𝑚𝑒𝑞𝐾
100𝑚𝑙
Para Ca:
1𝑚𝑔𝐾
𝑙𝑥
1𝑙
1000𝑚𝑙𝑥
1𝑚𝑒𝑞𝐾
20𝑚𝑔𝑘𝑥
100𝑚𝑙
100𝑚𝑙= 0,005
𝑚𝑒𝑞𝐶𝑎
100𝑚𝑙
Para Mg
1𝑚𝑔𝐾
𝑙𝑥
1𝑙
1000𝑚𝑙𝑥
1𝑚𝑒𝑞𝐾
12𝑚𝑔𝑘𝑥
100𝑚𝑙
100𝑚𝑙= 0,00833
𝑚𝑒𝑞𝑀𝑔
100𝑚𝑙
Cálculo para determinar la concentración de K, Ca y Mg en la muestra de
suelo:
Tomando en consideración los factores antes expuestos, para calcular la
concentración de K, Ca y Mg asimilables en las muestras de suelo, se puede
proceder de las dos maneras siguientes:
a) Correr la curva de calibración ingresando en el equipo las
concentraciones de 12.5 -25.0 - 37.5 y 50 ppm para K; 62.5 - 125.0 -
187.5 y 250 ppm para Ca y 7.5 - 15.0 - 22.5 y 30.0 ppm para Mg, y
luego multiplicar los resultados obtenidos del espectrofotómetro por
los siguientes factores:
Para K = 0.0256, que resulta de multiplicar el factor de dilución y el
factor de conversión de unidades (10 x 0.00256)
Para Ca = 0.05, que resulta de multiplicar el factor de dilución y el
factor de conversión de unidades (10 x 0.005)
Para Mg = 0.0833, que resulta de multiplicar el factor de dilución y el
factor de conversión de unidades (10 x 0.00833).
b) Correr la curva de calibración ingresando en el equipo las
concentraciones de 0.32 - 0.64-0.96 y 1.28 meq/ 100 m1 para K; 3. J 2 -
6.25 - 9.38 y 12.50 meq/100 mL para Ca y 0.62 - 1.25 - 1.87 y 2.50
meq/ 100 mL para Mg, con la finalidad de reportar directamente el valor
proporcionado por el espectrofotómetro.
Los resultados así obtenidos, se anotan en el cuaderno correspondiente
a "Datos Metales", en el cual se deberá asentar la sumilla del analista
responsable del análisis. Posteriormente, los resultados deberán anotarse
tanto física como electrónicamente en el "Registro de Resultados de
Muestras de Suelo".
6.6.2 Aseguramiento de la Calidad
Los controles de calidad del método se realizan utilizando las siguientes
actividades:
Corridas con una muestra control interno.
Medida de estándar
Curva de calibración.
6.6.3 Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se describen
en la siguiente tabla:
Actividad Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple
Frecuencia Responsable
Corridas con
una muestra
control interno
±20% para
cada metal
Verificar la
calibración del
equipo de
absorción
atómica
Cada grupo de
análisis
RT/A
Medida de
estándar
Leer un
estándar cada
15 muestras,
±20% de su
valor teórico
Volver a
realizar la
curva de
calibración.
Curva de
calibración
R2≥0,99 Quitar un punto
de calibración
hasta que la
curva se ajuste
y mínimo con 3
puntos de
calibración, si
no cumple
volver a
calibrar.
6.6.4. Incertidumbre
No aplica
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados de K, Ca y Mg asimilables serán expresados en cmol/kg
(cmol/kg = meq/ 100 mL), y se reportarán en el informe con 2 cifras
decimales. Adicionalmente se colocará en el informe de resultados el cuadro
de interpretación indicado en el Anexo IV.
7. Anexos
7.1 Preparación de la solución de óxido de lantano al 1%
Pesar 23.456 g de óxido de lantano en la balanza analítica sobre una
cápsula de porcelana.
Trasvasar cuantitativamente el óxido de lantano a un balón de 2 L.
Añadir aproximadamente 100 mL de agua tipo l.
Añadir lentamente 100 mL de ácido clorhídrico concentrado, enfriando
la solución con un baño de agua fría. Este procedimiento realizarlo en
sorbona.
Agitar la mezcla hasta que el óxido de lantano esté totalmente disuelto.
Aforar con agua tipo I y homogenizar la solución.
Almacenar la solución en un frasco de vidrio perfectamente limpio y
bien etiquetado.
7.2 Preparación de la solución extractora de Olsen modificado.
Pesar en una cápsula de porcelana 84,6 g de bicarbonato de sodio
(NaHCO3) y 7,44 g de EDTA.
Trasvasar cuantitativamente la mezcla de reactivos a un balón aforado
de 2 l.
Disolver los reactivos con agua destilada tipo I y llenar de agua el balón
hasta cerca de la línea de aforo.
Ajustar el pH a 8.5 disolviendo lentejas de hidróxido de sodio con
ayuda de agitación magnética.
Aforar con agua tipo l y homogenizar la solución.
7.3 Elaboración de estándares para las curvas de calibración
a) Elaboración del blanco
Colocar en un tubo de ensayo de 25 mL perfectamente limpio l mL de
solución
extractora de Olsen modificado con una pipeta automática.
Añadir 4 ml de óxido de lantano al 1% con un dispensador automático.
Añadir 20 ml de agua tipo I y homogenizar la solución en el vortex.
b) Elaboración de la solución madre para todos los metales
Preparar 200 mL de solución madre de la siguiente manera: Tomar 10
mL de estándarde K de 1000 ppm con pipeta volumétrica; tomar 50
mL de estándar de Ca de 1000 ppm con pipeta volumétrica y tomar 65
mL de estándar de Mg de 1000 ppm con pipeta volumétrica, aforar con
la solución Olsen modificado.
c) Elaboración de los estándares para todos los elementos
Colocar en balones aforados de 100 mL perfectamente limpios, la
siguiente cantidad de solución madre con la ayuda de pipetas
volumétricas:
No.
Estándar
Concentración
del estándar de
K (cmol/kg)
Concentración
del estándar de
Ca (cmol/kg)
Concentración
del estándar de
Mg (cmol/kg)
Volumen de
solución
madre en mL
1 0 0 0 0
2 0,32 3,12 0,62 25
3 0,64 6,25 1,25 50
4 0,96 9,38 1,87 75
5 1,28 12,50 2,50 0
Aforar los balones a 100 mL con solución extractora de Olsen
modificado y homogenizar las soluciones.
El estándar 1 es el blanco de calibración de la curva.
El estándar 5 es la misma solución madre para todos los metales.
Almacenar las soluciones estándar en frascos plásticos perfectamente
limpios y bien etiquetados en refrigeración, por un tiempo máximo de
un mes.
d) Elaboración de los estándares para todos los elementos
Colocar en un tubo de ensayo de 25 mL perfectamente limpio l mL
de cada estándar con una pipeta automática.
Añadir 4 mL de óxido de lantano al 1 % con un dispensador
automático.
Añadir 20 mL de agua tipo I y homogenizar la solución.
7.4 Cuadro de interpretación del K, Ca y Mg
Región Costa y Sierra
Parámetro Fe (ppm) Mn (ppm) Cu (ppm) Zn (ppm)
Bajo 0- 20 0 - 5 0 - 1 0 -3
Medio 21 - 40 6 - 15 1,1 - 4 3,1 - 6
Alto > 41 > 16 > 4,1 > 6,1
Fecha No. Lab
MACROELEMENTOS MICROELEMENTOS
K Ca Mg Fe Cu Zn
Diluc. Conc. (cmol/Kg)
Diluc. Conc. (cmol/Kg)
Diluc. Conc. (cmol/Kg)
Diluc. Conc. (cmol/Kg)
Diluc. Conc. (cmol/Kg)
Diluc. Conc. (cmol/Kg)
PROCEDIMIENTO ESPECÍFICO DE ENSAYO DETERMINACIÓN
DETERMINACIÓN DE Fe, Cu, Zn y Mn ASIMILABLES EN SUELOS – MÉTODO
OLSEN MODIFICADO
1. OBJETO
Definir un procedimiento para cuantificar Fe, Cu, Zn y Mn asimilables en muestras
de suelo.
2. ALCANCE
El presente procedimiento es aplicado por el Laboratorio de Suelos, Foliares y
Aguas para cuantificar Fe, Cu, Zn y Mn asimilables utilizando el extracto de suelo.
3. ITEMS A ENSAYAR, PARÁMETROS Y RANGOS DE APLICACIÓN
Analito Rango (mg/kg)
Cobre 7,50 – 30,00
Hierro 125,0 – 500,0
Manganeso 7,50 – 30,00
Zinc 5,00 – 20,00
4. REFERENCIA
Suelos agrícolas de las diferentes regiones del Ecuador en un rango de:
4.1. Documentos utilizados en la elaboración
• Metodología Unificada de la Red de Laboratorios de Suelos del Ecuador,
Catálogo INIAP cuarta aproximación Quito-2009.
5. GENERAL
Todos los documentos elaborados, como parte del SGC, deben ser administrados
por el Departamento de Calidad.
Todos los documentos se distribuyen en formato pdf.
Los documentos emitidos por el Laboratorio de Suelos, Foliares y Aguas puede
hacer referencia a otros documentos concretos, indicando los apartados, no
repitiendo su contenido.
5.2. Definiciones
• Métodos espectrofotométricos: Es un conjunto de técnicas
instrumentales que permiten comparar la radiación absorbida o
transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de
analito, vs. una gama de soluciones que contienen una cantidad conocida
del mismo analito.
• Absorción atómica: Es un método instrumental que está basado en la
atomización del analito en matriz líquida, utilizando un nebulizador para
crear una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que
da una llama, en donde la muestra es desolvatada y expuesta a una
energía a una determinada longitud de onda emitida ya sea por una
lámpara de cátodo hueco construida con el mismo analito a determinar o
una lámpara de descarga de electrones.
• Micronutrientes: Elementos que la planta absorbe en pequeñas
cantidades.
5.3 Abreviatura
SGC: Sistema de Gestión de Calidad y Competencia Técnica, basado en los requisitos de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025.
DL: Director de Laboratorios
RC: Responsable de Calidad
RT: Responsable Técnico
A: Analista
NA: No aplica
Kg: Kilogramos
mL: Mililitro
5.4 Nivel de riesgo y calificación. Instrucciones de Seguridad
• El presente procedimiento requiere la utilización de sustancias químicas
peligrosas, por lo que es necesario el uso de mandil, guantes, mascarilla
y gafas de seguridad durante la realización de éste ensayo.
• El tanque de acetileno debe ser cambiado cuando la presión llegue a 100
psi para evitar que la acetona llegue a dañar el quemador.
5.5 Responsabilidades
Cargo Responsabilidad Autoridad
RT Planificación de análisis Evaluar resultados de los
análisis
A Ejecutar los análisis
6. DESCRIPCIÓN
6.1 Equipos, materiales y reactivos
6.1.1. Equipos
Espectrofotórnetro de absorción atómica
Plancha de calentamiento
Balanza analítica
Agitador orbital
Vortex
Potenciómetro
6.1.2 Materiales
Balón aforado de 200, 1000 y 2000 mL
Pipetas volumétricas de 2, 3, 50 y100 mL
Tubos de ensayo
Gradillas
Papel aluminio
6.1.3 Reactivos
Estándar comercial de 1000 ppm de Fe
Estándar comercial de 1000 ppm de Cu
Estándar comercial de 1000 ppm de Zn
Estándar comercial de 1000 ppm de Mn
Bicarbonato de sodio
EDTA
Hidróxido de sodio G.R.
Agua tipo I
6.1.4 Materiales de Referencia
Se cuenta con material de referencia código SFA/MRI002
6.2 Condiciones ambientales
El método de referencia no establece condiciones ambientales
específicas. Se considera las condiciones en los manuales de los
equipos de absorción atómica entre 10-35°C.
6.4 Realización
Elaborar los siguientes estándares de acuerdo a lo indicado en el Anexo ll:
Para Fe: 12.5 - 25.0 - 37.5 y 50.0 ppm
Para Zn: 0.5 - 1.0 - 1.5 y 2.0 ppm
Para Cu: 0.75 - 1.50 - 2.25 y 3.00 ppm
Para Mn: 0.75 - 1.50 - 2.25 y 3.00 ppm
• Encender la lámpara y cargar en el software del espectrofotómetro de
absorción atómica el método del elemento a determinar.
• Encender el quemador y encerar el equipo con el blanco, que es solución
extractora de Olsen modificado.
• Realizar la curva de calibración en el equipo tomando como cero de la curva
el blanco.
• Leer las absorbancias de las muestras y determinar la concentración del
analito en mg/kg.
NOTA: En caso de que se deba realizar una dilución en alguna muestra, utilícese
la solución extractora de Olsen modificado como solvente.
6.6. Tratamiento de Resultados. Incertidumbre asociada
6.6.1. Cálculos
a) Correr la curva de calibración ingresando en el equipo las
concentraciones de 12.5 - 25.0 - 37.5 y 50.0 ppm para Fe; 0.5 - 1.0 -
1.5 y 2.0 ppm para Zn; 0.75 - 1.50 - 2.25 y 3.00 ppm para Cu y 0.75 -
1.50 - 2.25 y 3.00 ppm para Mn, y luego multiplicar los resultados
obtenidos del espectrofotómetro por el factor de dilución de 10, que
resulta de la preparación del extracto de suelos con Olsen modificado
b) Correr la curva de calibración ingresando en el equipo las
concentraciones de 125 - 250 - 375 - 500 ppm para Fe; 5 - 10 - 15 - 20
ppm para Zn; 7.5 - 15.0 - 22.5 - 30.0 para Cu: y 7.5 - 15.0 - 22.5 - 30.0
para Mn, con la finalidad de reportar directamente el valor
proporcionado por el espectrofotómetro.
Los resultados se reportan de la medida directa del equipo.
6.6.2. Aseguramiento de la Calidad
Los controles de calidad del método se realizan utilizando las siguientes
actividades:
• Corridas con una muestra control interno.
• Medida de estándar
• Curva de calibración.
6.6.3. Criterios de Aceptación o rechazo de los resultados
Los criterios de aceptación y rechazo del aseguramiento de calidad se
describen en la siguiente tabla:
Actividad Criterio de
aceptación y
rechazo
Acción si no
cumple
Frecuencia Responsable
Corridas con
una muestra
control interno
±20% para
cada metal
Verificar la
calibración del
equipo de
absorción
atómica
Cada grupo de
análisis RT/A
Medida de
estándar
Leer un
estándar cada
15 muestras,
±20% de su
valor teórico
Volver a
realizar la
curva de
calibración.
Curva de
calibración
R2≥0,99 Quitar un punto
de calibración
hasta que la
curva se ajuste
y mínimo con 3
puntos de
calibración, si
no cumple
volver a
calibrar.
6.6.4. Incertidumbre
No aplica
6.6.5. Informe de Resultados
Los resultados en mg/kg, y se reportan en el informe con dos cifras decimales para
Cu, Mn y Zn y con una cifra decimal para Fe.
7. ANEXOS
7.1 Preparación de la solución extractora de Olsen modificado.
Pesar en una cápsula de porcelana 84,6 g de bicarbonato de sodio
(NaHCO3) y 7.44 g de EDTA.
Trasvasar cuantitativamente la mezcla de reactivos a un balón aforado
de 2 l.
Disolver los reactivos con agua destilada tipo I y llenar de agua el balón
hasta cerca de la línea de aforo.
Ajustar el pH a 8.5 disolviendo lentejas de hidróxido de sodio con
ayuda de agitación magnética.
Aforar con agua tipo l y homogenizar la solución.
7.2 Elaboración de estándares para la curva de calibración
a) Elaboración de la solución madre para todos los metales
• Preparar 1000mL de solución madre de la siguiente manera:
Tomar 50mL de estándar de Fe de 1000 ppm con pipeta
volumétrica; tomar 2 ml de estándar de Zn de 1000 ppm con pipeta
volumétrica; tomar 3 mL de estándar de Cu de 1000 ppm con
pipeta volumétrica y tomar 3 mL de estándar de 1000 ppm de Mn
con pipeta volumétrica, aforar con agua tipo I.
b) Elaboración de los estándares para todos los elementos
• Colocar en balones aforados de 200 mL
• perfectamente limpios, la siguiente cantidad de solución madre
con la ayuda de pipetas volumétricas:
No.
Estándar
Concentración
del estándar
de Fe (ppm)
Concentración
del estándar
de Zn (ppm)
Concentración
del estándar
de Cu (ppm)
Concentración
del estándar
de Mn (ppm)
Volumen
de
solución
madre en
mL
1 0 0 0 0 0
2 12,5 0,5 0,75 0,75 50
3 25,0 1,0 1,50 1,50 100
4 37,5 1,5 2,25 2,25 150
5 50,0 2,0 3,00 3,00 0
• Aforar los balones a 200 mL con solución extractora de Olsen
modificado y homogenizar las soluciones.
• El estándar les el blanco de calibración de la curva (solución
Olsen modificado)
• El estándar 5 es la misma solución madre para todos los metales.
• Almacenar las soluciones estándar en frascos plásticos
perfectamente limpios y bien etiquetados en refrigeración, por un
tiempo máximo de un mes.