8
Typhidot ® Test Tes ini memanfaatkan antigen 50 kD untuk mendeteksi IgM spesifik dan antibodi IgG terhadap S. typhi (25). Telah mengalami skala penuh evaluasi klinis multinasional diagnostik nilai (26, 27, 28). Tes dot EIA menawarkan kesederhanaan, kecepatan, spesifisitas (75%), ekonomi, awal diagnosis, kepekaan (95%) dan tinggi nilai prediksi negatif dan positif. Deteksi IgM mengungkapkan tifoid akut pada fase awal infeksi, sedangkan deteksi baik IgG dan IgM menunjukkan tifoid akut pada fase pertengahan infeksi. Di daerah endemisitas tinggi di mana tingkat penularan tifus tinggi deteksi meningkat IgG spesifik. Sejak IgG dapat bertahan selama lebih dari dua tahun setelah tifoid infeksi (29) deteksi IgG spesifik tidak dapat membedakan antara akut dan penyembuhan kasus. Selanjutnya, hasil positif palsu disebabkan

Typhidot test IgG IgM dan IgM assay raka.docx

  • Upload
    adanihe

  • View
    38

  • Download
    10

Embed Size (px)

Citation preview

Typhidot TestTes ini memanfaatkan antigen 50 kD untuk mendeteksi IgM spesifik dan antibodi IgG terhadapS. typhi (25).Telah mengalami skala penuh evaluasi klinis multinasional diagnostiknilai (26, 27, 28).Tes dot EIA menawarkan kesederhanaan, kecepatan, spesifisitas (75%), ekonomi,awal diagnosis, kepekaan (95%) dan tinggi nilai prediksi negatif dan positif.Deteksi IgM mengungkapkan tifoid akut pada fase awal infeksi, sedangkandeteksi baik IgG dan IgM menunjukkan tifoid akut pada fase pertengahan infeksi.Di daerah endemisitas tinggi di mana tingkat penularan tifus tinggi deteksimeningkat IgG spesifik.Sejak IgG dapat bertahan selama lebih dari dua tahun setelah tifoidinfeksi (29) deteksi IgG spesifik tidak dapat membedakan antara akut danpenyembuhan kasus.Selanjutnya, hasil positif palsu disebabkan oleh infeksi sebelumnyamungkin terjadi.Di sisi lain, IgG positif juga dapat terjadi dalam hal saat inireinfeksi.Dalam kasus reinfeksi ada respon imun sekunder denganmeningkatkan IgG yang signifikan terhadap IgM, sehingga yang terakhir tidak dapat dideteksi dan yang efek diperlukan tertutup.Sebuah strategi yang mungkin untuk memecahkan masalah ini adalah untuk memungkinkan deteksiIgM dengan memastikan bahwa itu adalah membuka kedok (30).Dalam rangka meningkatkan akurasi diagnostik disituasi ini Typhidot tes aslinya dimodifikasi dengan menonaktifkan IgG totalsampel serum.Studi dengan tes dimodifikasi, Typhidot-M , telah menunjukkan bahwainaktivasi IgG menghilangkan mengikat kompetitif dan memungkinkan akses antigen untukyang IgM spesifik ketika hadir.Deteksi IgM spesifik dalam waktu tiga jammenunjukkan infeksi tifoid akut.Evaluasi Typhidot dan Typhidot-M di klinispengaturan menunjukkan bahwa mereka lebih baik dibandingkan tes Widal dan budayametode (30).Dalam diagnosa laboratorium demam tifoid metode yang digunakan sebagai standar emas harusmendekati 100% dalam sensitivitas, spesifisitas dan nilai prediksi positif dan negatif.Evaluasi studi telah menunjukkan bahwa Typhidot-M adalah lebih unggul dari metode budaya(28).Meskipun budaya tetap menjadi standar emas itu tidak bisa cocok Typhidot-M disensitivitas (> 93%), nilai prediksi negatif dan kecepatan (28).Typhidot-M dapat menggantikantes Widal bila digunakan bersama dengan metode budaya untuk cepat danakurat diagnosis demam tifoid.Nilai prediktif negatif yang tinggi dari tes ini menunjukkanyang Typhidot-M akan berguna di daerah endemisitas tinggi.

IgMdipsticktes

UjiIgMtyphoiddipstickdirancang untukserodiagnosisdemamtifoidmelalui deteksiS.typhiantibodi spesifikIgM dalamserum darahatau seluruhsampel.Pengujianterdiri daridipstick,reagennon-enzimatikdeteksilyophilized, cairuntuk menyusun kembalideteksi reagen, cairanuntuk membasahistripujidipsticksebeluminkubasi denganreagenserum dandeteksi, dantabung reaksi.Komponenstabilselama dua tahunjika disimpanpada kisaran suhu4-25Cdi tempat yang keringdan dilindungidari paparanlangsungsinar matahari. Uji ini berdasarkan pada pengikatan S. typhi antibodi spesifik IgM terhadap S. typhi LPSantigen dan antibodi pewarnaan terikat oleh antibodi IgM anti-manusia terkonjugasiuntuk partikel pewarna koloid.Test strip putih dipstick mengandung antigenbergerak dalam garis yang berbeda.Strip ini juga memiliki garis kontrol dengan anti-manusiaIgM antibodi.Uji ini dilakukan dengan inkubasi dari strip tes dibasahi dalam campuran serum danreagen deteksi, serum yang diencerkan di 1:50 di reagen deteksi.Seluruh darahdapat diuji pada pengenceran 1:25 di reagen deteksi.Masa inkubasi tigajam pada suhu kamar.Ketika inkubasi selesai strip uji dibilasbersih dengan air dan kemudian dibiarkan kering.Hasilnya dibaca oleh inspeksi visualdari strip tes untuk pewarnaan dari garis antigen dan kontrol.Hasil pengujian dinilainegatif jika tidak ada pewarnaan dari garis antigen terjadi dan dinilai 1 +, 2 +, 3 + atau 4 + jika adayang lemah, pewarnaan kuat atau sangat kuat moderat seperti ditunjukkan oleh perbandingan denganreferensi berwarna strip.Garis kontrol harus noda di semua run.Evaluasi uji dipstick di laboratorium berbasis penelitian di Indonesia (31, 32),Kenya (33), Vietnam (33) dan Mesir (34) telah menunjukkan hasil yang konsisten.Studi inisensitivitas yang ditunjukkan dari 65% menjadi 77% untuk sampel yang dikumpulkan pada saat pertamakonsultasi dari budaya yang dikonfirmasi pasien dan kekhususan dari 95% sampai 100%.Ituhasil budaya dan investigasi serologis mungkin dipengaruhi oleh berbagai faktor,di antara mereka saat pengumpulan sampel dan penggunaan antibiotik sebelum konsultasidan sampel koleksi.Dalam penelitian yang dilakukan di Makassar, Indonesia, sensitivitasmetode kultur darah diperkirakan menjadi 66%, dan bahwa dari tes dipstickdihitung untuk kelompok gabungan dari budaya yang dikonfirmasi dan budaya-negatif pasiendengan diagnosis klinis akhir dari demam tifoid adalah 48%.Sensitivitas berkisar antara29% untuk sampel yang dikumpulkan pada minggu pertama sakit sampai 96% untuk sampel yang dikumpulkanpada tahap berikutnya.Pengujian pada tindak lanjut sampel menunjukkan serokonversi pada sebagian besaryang dipstick-negatif tipus pasien.Tes dipstick menyediakan alternatif yang cepat dan sederhana untuk diagnosis tipusdemam, terutama dalam situasi di mana fasilitas budaya tidak tersedia.Pengujian dapatdilakukan oleh orang tanpa pelatihan formal dan tanpa adanya khususperalatan.Listrik tidak diperlukan, sebagai komponen dapat disimpan tanpa pendingin.Hasil tes dipstick dapat diperoleh pada hari ketika pasien datang.Hal ini membuat pengobatan yang tepat mungkin.Antibodi spesifik biasanya hanya muncul seminggusetelah timbulnya gejala dan tanda.Ini harus selalu diingat ketika negatifhasil tes serologi sedang ditafsirkan.