Österreichische Agentur für Gesundheit und Ernährungssicherheit GmbH www.ages.at

Helga Reisenzein, Johann Schaffer Institute for Sustainable Plant Production, AGES Spargelfeldstr. 191, A-1220 Vienna, Austria Feuerbrand Roundtable AGES, Wien, 26.01.2016

Überwachung der Sensitivität von Erw inia amylovora gegen das Antibiotikum

Streptomycinsulfat als Begleitmaßnahme zur Antibiotika-Anwendung im österreichischen

Obstbau

www.ages.at 2 Reisenzein, 2016

• Überwachung der Resistenzentwicklung von E. amylovora in

Österreich seit 2006

• Allgemeine Einführung

- Streptomycin-Wirkungsmechanismus

- Resistenzentstehung und -mechanismen

- Risikofaktoren für eine Resistenzentwicklung und –ausbreitung

- Internationale Trends

Überblick

www.ages.at 3 Reisenzein, 2016

Streptomycin - Wirkungsmechanismus

www.ages.at 4 Reisenzein, 2016

E. amylovora ist als resistenzgefährdet einzustufen !

1. Anwendungsbedingungen des AB - Anwendungshäufigkeiten - Dosierung

2. Resistenzpotentials des Schaderregers - Epidemiologie des Schaderregers - Generationszeit, Wachstumsraten - Isolierung der pathogenen Population (z.B. Glashaus) - Mutationsfrequenz

Risikofaktoren:

Resistenzentwicklung im Freiland

www.ages.at 5 Reisenzein, 2016

Überleben von resistenten Stämmen auch ohne Selektionsdruck zeitlich begrenzt

möglich!

• Fitness der resistenten Bakterienstämme im Freiland

- Anfangs herabgesetzte Fitness von SM-resistenten Stämmen

- Bei bestehendem Selektionsdruck Etablierung der resistenten Stämmen möglich

Resistenzausbreitung im Freiland

Risikofaktoren

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0102030405060708090

100

1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001

Frequency (%)

Diagramm nach Manulis, S. et al., Plant Disease, 2003, Vol. 87

Häufigkeit von streptomycin-resistenten E. amylovora - Stämmen in Israel

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• seit 2006 von der AGES in Kooperation mit APSD Vorarlberg durchgeführt • seit 2008 erweitertes Monitoring in Kooperation mit den allen APSD der Länder

• Ergebnisse im Resistenzbericht Österreich - AURES veröffentlicht

Überwachung der Resistenzentwicklung von E. amylovora in Österreich

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• Probenziehung - Probenziehungsplan auf Basis des geplanten SM-Einsatzes

• Keimisolierung und Identifizierung - Verdachtsproben (Anreicherung, Isolierung, Identifizierung durch PCR)

• Überprüfung der Empfindlichkeit gegenüber SM

- High level resistance screen nach CLSI-Standards (Kirby-Bauer Test)

- Bestimmung der MIC: high range E-test Streifen (0,064 – 1024µg/ml SM)

- Testisolate: 100µl Bakteriensuspension mit def. Keimdichte auf King´s B Platten und 48 Std. Inkubation

Methodik

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2009 2010 2012 2013

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Vbg. 0,0 0 5,7 1 1 1 0 8,3 3 1 0 0 0,0 0

Tirol 2,7 0 1,0 0 0 0,0 0 0 0 0 0,0 0

Stmk. 22,1 6 4 0 0 345,9 11 4 4 0 81,9 10 5 3 0 137,7 3 0 0 0

Bgld. 8,0 30 0 0 0 8,6 24 0 0 0 0 0 0 0 0 0,0 0

NÖ 3,2 0 12,0 0 0 28,8 0 0 0 0 33,5 0

Gesamt 36,0 36 4 0 0 373,2 36 5 5 0 119,0 13 6 3 0 171,2 3 0 0 0

2013 2012 2010 2009

Überblick über die mit SM-behandelten Kernobstflächen und die Probenzahlen &

Untersuchungsergebnisse

www.ages.at 10

Keine epidemiologischen cut off Werte für E. amylovora !

E-Test

Kontrolle Isolat

Verteilung der minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von verschiedenen E. amylovora -Isolaten

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Wildtyp-Isolate 2014

Wildtyp-Isolate 2013

Wildtyp-Isolate 2012

Wildtyp-Isolate 2011

Wildtyp-Isolate 2010

Wildtyp-Isolate 2009

Wildtyp-Isolate 2008

Wildtyp-Isolate 2007

Wildtyp-Isolate 1993-2006

Sensitivitätsbereich von E. amyovora Wildtyp-Isolaten

Verteilung der minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von verschiedenen E. amylovora -Isolaten

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MHK [µg/L]

Isolate aus Anlagen mit Streptomycin-Behandlung (2012)

Isolate aus Anlagen mit Streptomycin-Behandlung (2010)

Isolate aus Anlagen mit Streptomycin-Behandlung (2008)

Sensitivitätsbereich von E. amyovora Isolaten aus Streptomycin-behandelten Kernobstflächen

Verteilung der minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von verschiedenen E. amylovora -Isolaten

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1. Die aus Streptomycin-behandelten Kernobstanlagen getesteten E. amylovora Isolate keine Resistenzbildung gegenüber Streptomycin 2. E. amylovora Isolaten aus unbehandelten Kernobstanlagen bzw.

von Einzelwirtspflanzen (Wildtyp Isolate) keine Veränderung des Sensitivitätsbereiches

Zusammenfassende Beurteilung des Resistenzmonitorings

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http://www.ages.at/fileadmin/AGES2015/Themen/Arzneimittel_Medizinprodukte_Dateien/AURES/AURES_2014.pdf

Jährlicher AURES - Bericht