UNIVERSITE KASDI MERBAH OUAREGLA - bu.univ … · I-Généralités sur les plantes médicinales 2 I-1Définition 2 ... grand nombre de maladies qui étaient souvent mortelles, les

UNIVERSITE KASDI MERBAH OUAREGLA

Faculté des Sciences et Sciences de l’Ingénieur

Département de Génie des Procédés

Mémoire

MASTER ACADEMIQUE

Domaine : Sciences et Techniques

Filière : Génie des Procédés

Spécialité : Analyse et contrôle de qualité

Présenté Par : Boussehel fouzia

Thème

Devant le jury :

Le 08/06/2015

Ghiaba zineb UKMO Encadreur

Ben abdslam soulaf UKMO Présidente

Akchiche zineb UKMO Examinatrice

Année Universitaire 2014-2015

Etude phytochimique des gousses de

l’acacia arabica aux propriétés

antioxydants et antiradicalaires

Remerciement

Je tiens à remercie toute la derection de gene de proucide et mon encadreur * Gaiaba zaineb * et sertout *M . Moulay yamina* En fin je remercie chaleureument mon responsable de département *Mr. Tabchouche ahmed* Merci a tout ceux qui ont contribuéde pres au de lion ala rélisation de ce travail .

Liste des figures

Figure I-1 : L’arbre de l’Acacia arabica 6

Figure I-2 : Gousses de l’Acacia arabica 7

Figure II.1 : Schéma général de l’oxydation des acides gras et niveaux d’action des

antioxydants. 11

Figure IV-1 : Gousses et graines de l’Acacia arabica. 16

Figure IV-2 : extraction de compose phénolique 20

Figure V-1 : spectrophotomètre 23 23

Figure V-2. Courbe d’étalonnage de l’Acide gallique 24

Figure V.3 : Courbes représentants le pouvoir réductrice des extraits phénolique 24

Figure V.4 : Courbe étalonnage de la Rutine 26

Figure V.5: Comparaison entre la quantité des phénols totaux et les flavonoïdes dans les extraits

étudier 26

Figure V.6 : Courbe étalonnage de l’acide ascorbique dans extraits (V.C) 28

Figure V.7. : Courbe teste d’AEAC G et méthanol 29

Schéma IV-1 : Représentation schématique des étapes de l’étude réalisée. 19

Schéma IV-2. Extraction des composés phénoliques. 21

Liste des tableaux

Tableaux I 1: Présent système de plant 6

Tableau III-1. Principales classes de composés phénoliques 13

Tableaux IV 1 : De produite chimie utilise 15

Tableau VI-1. Teneurs en phénols totaux dans les extraits. 25

Tableau VI-2. Teneurs en flavonoïdes dans les extraits. 27

Tableau VI-3. Teneurs en pm dans les extraits 29

Tables des matières

PARTIE THEORIQUE

Liste des figures

Liste des tableaux

Remerciement

Introduction 1

Chapitre I : Etude général de l’acacia arabica

I-Généralités sur les plantes médicinales 2

I-1Définition 2

I-1-2 Définition d’une plante médicinale 2

I-1-3 L’importance de l’utilisation les plantes médicinales 3

I-1-4 Domaines d’application des plantes médicinales 4

I-2 Etude Botanique de l’Acacia arabica 3

I-2-1 Origine et répartition géographique 3

I-2-2 Fruit de plante médicinale 4

I-3 Croissance et développement 4

I -4 La phytothérapie 5

I -4-1-Définition de la Phytothérapie 5

Chapitre II : Notion de stress oxydative et l’activité antioxydant

II - l’activité antioxydant 8

II.1. Définition d’antioxydant 8

II -2 Radicaux libres 8

II -2-1 Définition d’un radical libre 8

II-4Définition du stress oxydatif 9

II L’activité antioxydant 9

II -4- 1 Définition l’activité antioxydant 9

II -4-2Mécanisme d’action d’un antioxydant 9

Chapitre III : Les composes phénolique

III Les composes phénolique 10

III-1 Définition de les composes phénolique 10

III - 2Classification des composes phénoliques 10

III - 3Les flavonoïdes 12

III -3-1 Définition des flavonoïdes 12

III – 3-2 Structure de flavonoïdes 12

Chapitre IV : partie expérimental

IV-1-1-Matériel et équipement 14

IV-1-2-Matériel végétal 14

IV-1-2-1 Identification de la matière première 14

IV-1-2-2 Caractères morphologiques 14

IV -1-2-3Caractères organoleptiques 15

IV-2-Méthodes 15

IV.2.1 Méthodes utilises 15.16

IV-2-2Extraction et analyse quantitative 17

1-Méthode d’extraction 17

Extraction des composés phénoliques 17.18

2- Analyse quantitative des composés phénoliques 19

a) Dosage des phénols totaux 20

b) Dosage des flavonoïdes 20

Procédure expérimentale 21

c -Test d’AEAC 22

Procédure expérimentale 22

IV-3Résultats de l’analyse quantitative 23

IV-3-1 Taux des phénols totaux 23

IV-3-2 Dosage des flavonoïdes 24

IV.3.2.2. Résultats et discussion 25

IV.4.2.1. Courbe d’étalonnage 27

Conclusion général 31

Référence bibliographie 32.33

résumé

Introduction générale

Introduction

1

Introduction

L’Algérie dispose d’une grande diversité floristique à laquelle s’ajoute une tradition séculaire

d’utilisation traditionnelle des plantes. La sélection de la plante Acacia arabica s’est fondée sur

son intérêt pharmaceutique dans la région de Tamanrasset, où elle est connue pour ses remèdes

contre plusieurs maladies telles que : les saignements de la gencive, les irritations de la gorge,

l’eczéma, la conjonctivite,…etc. elle est aussi utilisée pour ses propriétés antiseptiques et

antifongiques.

Le but de cette étude consiste à renforcer la connaissance phytochimique des extraits de la plante

d’Acacia arabica à savoir : les phénols totaux et les flavonoïdes, et à mettre en évidence leurs

activités antioxydants et inhibitrices de la corrosion, en vue de leur utilisation ultérieure dans le

domaine pharmaceutique ou industriel.

Le mémoire contient deux parties, la premier partie consiste à une étude bibliographique, elle

comporte trois chapitres, dans le premier chapitre on a s’intéresse à donner quelques

connaissances bibliographique sur la phytothérapie , le deuxième chapitre on a donné quelques

informations sur les composés phénoliques, le troisième chapitre est consacré pour donner

quelques connaissances sur les radicaux libres et l’activité antioxydant, ainsi les méthodes

utilisées pour l’évaluation du potentiel antioxydant dans des différents systèmes modèles .

Nous présenterons dans la partie expérimentale, une description botanique générale de l’arbre

comme un premier chapitre. La quantification des composés phénoliques totaux et l’évaluation

de l’activité antioxydant des différents extraits, seront le sujet de deuxième chapitre.

A l’issue de cette étude, nous attendons aux travers les résultats découlant de nos travaux, une

valorisation de cette partie de la plante par les tests réalisés.

Extraction et quantification des composés phénoliques des cosses et graines de l’Acacia arabica

par macération douce dans deux systèmes de solvants.

En fin le sixième chapitre discutera les résultats obtenus dans cette étude. Nous rapportons aussi

une étude comparative sur la propriété antioxydant des différents extraits obtenus afin de choisir

les composés les plus efficaces.

Chapitre I

Généralités sur les plantes

Chapitre Généralités sur la plante

2

I-Généralités sur les plantes médicinales

Pendant longtemps, les remèdes naturels et surtout les plantes médicinales furent le

principal, voire l’unique recours de la médecine de nos grands parents, cependant, malgré le

développement de l’industrie pharmaceutique qui a permis à la médecine moderne de traiter un

grand nombre de maladies qui étaient souvent mortelles, les plantes médicinales et les remèdes

qu’on pouvait en tirer ne furent jamais totalement abandonnés et les gens ne cessèrent jamais de

faire appel à la médecine traditionnelle, ce qui a conduit à maintenir vivante une tradition

thérapeutique connue depuis nos ancêtres. [1]

I-1Définition :

On appelle plante médicinale toute plante renfermant un ou plusieurs principes actifs

capables de prévenir, soulager ou guérir des maladies. Certaines plantes contenant toute une

gamme de matières efficaces, peuvent avoir des actions très différentes suivent leur mode de

préparation. [2]

Depuis toujours les plantes ont constitué la source majeure de médicaments grâce à la richesse de

ce qu’on appelle le métabolisme secondaire. Cependant, l’homme n’à découvert les vertus

bénéfiques des plantes que par une approche progressive, facilitée par l’organisation des rapports

sociaux, en particulier à partir du néolithique. [3]

Certaines plantes sont inoffensives, mais d'autres, dite nombreuses (digitale, belladone,

colchique, etc.), sont toxiques et ne sont utilisées que sous des formes bie contrôlées,

exclusivement commercialisées en pharmacie. L'emploi inconsidéré de plantes cueilles dans la

nature peut aboutir a des intoxications graves, voir mortelles. [4]

I-1-2 Définition d’une plante médicinale :

Une plante médicinale est une plante utilisée pour ses propriétés thérapeutiques. Cela

signifie qu'au moins une de ses parties (feuille, tige, racine etc.) peut être employée dans le but

de se soigner. Son efficacité relève de ses composés, très nombreux et très variés en fonction [5]

Des espèces, qui sont autant de principes actifs différents. [6]


3

I-1-3 L’importance de l’utilisation les plantes médicinales :

Les plantes médicinales sont soigner des maladies simples comme le rhume, ou d'en

prévenir de plus importantes comme l'ulcère, la migraine, l'infarctus en plus de certaines

allergies ou affections. Si l'on y ajoute leurs vertus réparatrices, tonifiantes, sédatives,

revitalisantes ou immunologiques, on mesure mieux l'aide précieuse qu'elles sont susceptibles de

nous apporter au quotidien. [7]

I-1-4 Domaines d’application des plantes médicinales :

Il y un intérêt progressif dans l'utilisation des plantes médicinales dans les pays

développés comme dans les pays en voie de développement, parce que les herbes fines

guérissent sans effet secondaire défavorable. Ainsi, une recherche de nouvelles drogues est un

choix normal. [8]

Utilisation en médecines en tant que médicament pour l’homme ; exemple : Réduisaient le

risque de nombreuses maladies chroniques comme le cancer, les accidents vasculaires

cérébraux et les coronaropathies.

Une action sur le système nerveux, la circulation sanguine, une action antibiotique,…etc. [9]

En alimentation : Assaisonnements, des boissons, des colorants et des composés

aromatiques. Les épices et les herbes aromatiques.

En cosmétique :

Des produits de beauté, parfums et articles de toilette, produits d’hygiène.

Des suppléments diététiques. [10]

I-2 Etude Botanique de l’Acacia arabica

Les légumineuses sont des plantes herbacées ou teigneuses, à feuilles isolées, stipulées et

généralement composées. Le fruit est une gousse ou légume, s’ouvrant par deux valves. Cette

famille est l’une des plus importantes du règne végétal avec 13000 espèces, est divisée du point

de vue systématique en trois sous-familles : Papilionacées, Césalpiniées et mimosée. [11]


4

Figure I-1. L’arbre de l’Acacia arabica [1].

Systématique de la plante

Se tableau repesent le système d’acacia arabica

Tableaux I-1: Présent système de plant

Règne Végétal Ordre Rosales

Sous règne Eucaryotes Sous-ordre Rosinées

Embranchement Spermaphytes Famille Fabaceae

S/Embranchement Angiospermes Sous famille Mimosoideae

Classe Dicotylédones Genre Acacia-Mil.

Sous classe Dialypétales Sous-genre Acacia arabica Wil

I-2-1 Origine et répartition géographique :

Acacia Arabica est indigène dans les zones sèches d’Afrique tropicale. En Afrique, on le

trouve du Sénégal. À l’Egypte et vers le sud, de l’Afrique orientale jusqu’au Mozambique on

Algérie il y a une petite quotité ver e sud. [12]

I-2-2 Fruit de plantes médicinales:

Gousse oblongue à linéaire, aplatie, de 4–22 cm × 1–2 cm, droite ou courbe, bords

entiers ou profondément comprimés entre les graines, l’emplacement de chaque graine

clairement marqué par une nette protubérance sur les valves des gousses, marron foncé à grise,


5

glabre ou duveteuse, indéhiscente, contenant 6–17 graines. Graines à contour elliptique à

circulaire, aplaties, de 6,5–9 mm × 5–8 mm, brun foncé à noir brunâtre. Plantule à germination

épigée ; cotylédons circulaires ovales, pétiolés. Figure I-2 [13]

Figure I-2. Gousses de l’Acacia arabica [1].

I-3 Croissance et développement :

Acacia Arabica est une espèce pionnière. Un système racinaire profond et étendu se

forme dans les endroits secs, la racine pivotante se développant d’abord suivie par les racines

latérales, qui deviennent compactes et massives avec l’âge. Dans les endroits inondés en

revanche, le système racinaire est largement latéral. Acacia arabica forme des nodosités et fixe

l’azote partout dans son aire de répartition naturelle. Il ne drageonne que très rarement. Acacia

arabica fleurit relativement tôt, vers l’âge de 3–4 ans environ dans des conditions idéales. La

floraison est prolifique et intervient sur les pousses de la saison en cours, principalement durant.

[14]

I -4 La phytothérapie :

La phytothérapie est un mot composé de deux mots grec ; phyto : plantes et trepia le mot

phytothérapie provient de deux mots grecs qui signifient essentiellement soigner avec les plantes.

Il s'agit d'une pratique millénaire basée sur un savoir empirique qui s'est transmis et enrichi au fil

d'innombrables générations15.

Dans le domaine de soin par les plantes, on remarque deux tendances majeures. Certain

intervenant met surtout l'accent sur les connaissances empirique des plantes et sur leurs effets


6

reconnus depuis la nuit des temps. Préconisant une approche holistique, ils s'intéressent aux

effets d’al dans sa globalité, sur tout individu. D'autres se basent davantage sur les connaissances

biochimiques et se préoccupant plutôt des symptômes des maladies et de l'action des principes

actifs des plantes. 16]

I -4-1-Définition de la Phytothérapie :

D'un point de vue étymologique, le terme « pytos » de phytothérapie provient du grec

ancien avec le terme plus précis de « phyton » et signifie « végétal ». La phytothérapie est donc

la « thérapie par le végétal ou par le monde végétal», c’est la connaissance et l'utilisation des

propriétés thérapeutiques des plantes. [17]

Chapitre II

Notion de stress oxydative

et l’activité antioxydant

Chapitre II Notion de stress oxydative et l’activité antioxydant

7

II - L’activité antioxydant :

II.1. Définition d’antioxydant :

Le terme « antioxydant » désigne une substance qui, ajoutée à faible dose à des matières

spontanément à l’air, est capable d’empêcher l’action de l’oxygène. Elle interfère sur le

processus normal d’oxydation en augmentant le temps au bout duquel cette oxydation aura

produit des odeurs indésirables et une détérioration décelable.

Toutefois, pour être efficace, les antioxydants doivent être additionnés le plus tôt possible dans le

processus de fabrication. Ils ne peuvent en effet inverser la réaction d’oxydation, mais seulement

la ralentir ou stopper [16].

II -2 Radicaux libres :

Les radicaux libres ont un rôle majeur dans a formation de stress antioxydant. Ces

radicaux sont des produits des irradiation (par la lumière UV, rayons X et les rayons ϒ),des

réaction métalcataysées ; comme its sont produits par les neutrophiles et les macrophages

pendant l’inflammation et par les réaction de transport d’électron catalysées au niveau des

mitochondries .L’ingestion d’alcool, des antibiotique ,des anticancéreux, l’infection au VIH ont

pour effet d’accroitre la production des radicaux libres dans l’organisme

(FAVIER ;MOHAMMEDI ).Ces radicaux sont présent également comme dépolluants dans

l’atmosphère (VALKO) . [17]

II -2-1 Définition d’un radical libre

La majeure partie de la toxicité de l’oxygène provient de la formation de radicaux libres.

Selon la définition proposée par Halliwell et Gutteridge, les radicaux libres sont des espèces

capables d’existes indépendante, contenant un ou plusieurs électrons non appariées dits électrons

célibataires, ces radicaux peuvent se former par transferts mono-électroniques ou par scission

homolytique de liaison covalente l’équation suivant [20]


8

Après une rupture homolytique, chacun des deux électrons intervenant dans la liaison entre les

atomes A et B gagne l’orbitale externe de ces atomes, qui deviennent alors des radicaux libres

[21]

II-3-Définition du stress oxydatif :

Le stress oxydatif réfère à une perturbation dans la balance métabolique cellulaire durant

laquelle, la génération d’oxydants accable le système de défenses antioxydants, que ce soit par

une augmentation de la production d’oxydants et/ou par une diminution des défenses

antioxydants [22].

II -4 L’activité antioxydant :

Pour échapper aux conséquences du stress oxydant, il est nécessaire de rétablir l’équilibre

oxydant / antioxydant afin de préserver les performances physiologiques de l’organisme.

Les antioxydants font actuellement l’objet de nombreuses études car, en plus d’un intérêt certain

dans la conservation des denrées comestibles, ils pourraient s’avérer utiles dans la prophylaxie et

le traitement des maladies dans lesquels le stress oxydant est incriminé. [23]

II –4- 1 Définition l’activité antioxydant :

Un antioxydant est défini comme étant toute substance qui peut retarder ou empêcher

l’oxydation des substrats biologiques, se sont des composés qui réagissent avec les radiaux libres

et les rendent ainsi inoffensifs. La raison pour laquelle les antioxydants sont importants vient du

fait que l’oxygène est un élément potentiellement toxique puisqu’il peut être transformé en

formes plus réactives telles que le su peroxyde , le peroxyde d’hydrogène , l’oxygène single et

les radicaux hydroxyle ,collectivement connu sous le nom d’oxygène actif (BOYD) [24]

II -4-2Mécanisme d’action d’un antioxydant:

D’une manière générale, un antioxydant peut empêcher l’oxydation d’un autre substrat en

s’oxydant lui-même plus rapidement que celui-ci. Un tel effet résulte d’une structure de donneur

d’atome d’hydrogène ou d’électrons souvent aromatiques cas de dérives du phénol. En plus leurs

radicaux intermédiaires sont relativement stables du fait de la délocalisation par résonance et par

manque de positions appropriées pour être attaqué par l’oxygène moléculaire. [25]


9

Figure II.1 : Schéma général de l’oxydation des acides gras et niveaux d’action des

antioxydants.

Chapitre III

Les composes phénoliques

Chapitre III les composés phénoliques

10

III Les composes phénolique

III-1 Définition de les composes phénolique :

Les composes phénolique ou poly phénols sont des métabolites secondaires caractérisés

par la présence d’un cycle aromatique portant des groupement hydroxyles libres ou engagés avec

un glucide .ils sont présents dans toutes parties des végétaux supérieurs ( racines ,tiges ,feuilles ,

fleurs , pollens ,fruits ,graines et bois ) et dans le miel (naturellement ,puis qu’est tire son origine

des plantes que butinent les abeilles ) , ils sont aussi impliqués dans de nombreux processus

physiologiques comme la croissance cellulaire ,la rhizogenése , la germination des graines ou la

maturation des fruits . [26]

III - 2Classification des composes phénoliques :

Les composes phénolique regroupent un vaste ensemble de substances chimiques

comprenant au mois un noyau aromatique, et un ou plusieurs groupes hydroxyle, en plus d’autres

constituants. [28]

Les principales classes qui sont largement répandues :

Les acides phénoliques (acides hydroxybenzoïques, acides hydroxycinnamiques),

Les flavonoïdes.

Les tanins et lignines


11

Squelette

carboné

Classe Exemple Origine structure

C6 Phénols simples Catéchol Nombreuses

espèces

C6-C1 Acides

hydroxybenzoïque

p-

hydroxybenzoïque

Epices,

fraise

C6-C3 Acides

hydroxycinnamiques

Acide caféique,

Acide férulique

Pomme de

terre,

pomme,

citrus

Phénylpropène Myristicin, Eugénol

Coumarines Scopolitine

Isocoumarines Myristicine,

Eugénol

Chromones Eugénine Noix

C6-C4 Juglone,

plumbagine

C6-C1-C6 Xanthones Mangiferine

C6-C2-C6 Stilbènes Resvératrol Vigne

Anthraquinones

C6-C3-C6 Flavonoïdes,

isoflavonoïdes

Quercétine,

cyanidine,

daidzéine

Fruits,

légumes,

fleurs,soja,

pois

(C6-C3)2 Néolignanes Eusidérine Pin

Lignanes Pinorésinol

(C6-C3-C6 Biflavonoïdes Amentoflavone

(C6-C3)n Lignines Bois, fruits à

noyaux,

raisins, kaki

(C6-C3-

C6)n

Tanins condensés

Tableau III-1. Principales classes de composés phénoliques [28]

OH

OHHO

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Hydrochinon2.svg?uselang=fr

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Ac-p-hydroxybenzoique.svg?uselang=fr

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Umbelliferone_acsv.svg?uselang=fr

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Juglone.png?uselang=fr

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Kaempferol.svg?uselang=fr

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Kaempferol.svg?uselang=fr


12

III – 3 Les flavonoïdes :

Ces composé ne comportent pas des groupements OH en position 3, et présentent de

fortes similitudes de structures avec les flavonoïdes. Dans cette catégorie, il faut ranger les

flavonoïdes responsables de la saveur amère de certaines pamplemousses, citrons, orange : la

naringine (naringénol lié à du glucose et du rhamnus),l’hespéridine. (Alais et linden, ) [29]

III -3-1 Définition des flavonoïdes :

Le terme "flavonoïdes", utilisé pour la première fois par Geissman et tlinrenier, Le terme

flavonoïdes rassemble une très large gamme de composes naturels appartenant à la famille des

polyphenoles sont présents dans toutes les parties des végétaux supérieurs (racines, tiges,

feuilles, fleurs, pollens, fruits, graines, bois). Leur fonction principale semble être la coloration

des plantes (au-delà de la chlorophylle, des caroténoïdes et des béta laines), si leur présence est

parfois masquée par leur présence sous forme «leuco », ce qui explique leur intérêt commercial

dans l’industrie alimentaire

Les flavonoïdes (du latin favus, jaune) sont des substances généralement colorées répondues

chez les végétaux ; on les trouve dissoutes dans la vacuole à l’état d’hétérosides ou comme

constituants de plastes particuliers, le chromo plastes. [30]

III-3-2 Structure de flavonoïdes :

Les flavonoïdes ont une origine biosynthétique commune et ils possèdent tous un

squelette de base à quinze atomes de carbone constitué de deux unités aromatiques, de cycle en

C6, reliés par une chaine en C3 [31]

Chapitre IV

Partie expérimentale

Chapitre IV Partie expérimentale

13

Mode opératoire

L’opération est dans l’laboratoire génie de procédés

Le matériel utilisé dans la partie expérimentale, est décrit ci-après :

Solvants et produits chimiques :

Tableaux IV 1 : Les produits chimiques utilisés

Produits Propriétés

Méthanol Pureté de 99% Biochem Chemopharma

Acétone Pureté de 99% Merk

Eau distillée

Ether de pétrole d=0,65

Acétate d’éthyle d=88,1, 99,8%, C4H8O2

Ethanol 95%, d=46,7

Sulfate d’ammonium SO4 (NH4)2, d=132,14

Acide orthophosphorique H3PO4 (85%) Riedel

Acide chlorhydrique P=36% d=1.178 M=36.5 g/mol

Réactif de Folin d=1,22

DMF

Na2CO3 d=105,99, 99,8%

Verrerie et petit matériel:

Pipette de 1ml, 10ml, 25ml.

Fioles de 10ml, 20ml, 50ml et 100ml.

Tubes à essai.

Ellen Meyer

Entonnoirs.

spectrophotomètre.

Béchers de 50ml, 100ml.

Spatule

Ampoules à décanter.

Ballons


14

IV-1-1-Matériel et équipement

Les équipements et conditions expérimentales de nos expériences sont indiqués dans

l’annexe.

IV-1-2-Matériel végétal

Les cosses (gousses égrenées) et les graines de l’Acacia arabica ont été collectées en

2014, l’arbre est de la région d’Amsel, à 30 Km du centre de la wilaya de Tamanrasset par MME

Moulay.

Le séchage des gousses a été effectué dans un endroit aéré sous l’ombre à une

température ambiante, puis le stockage dans des sacs en tissu jusqu'à utilisation. Pour le broyage,

il a été fait par le broyeur électrique, on a obtenu des poudres fines de couleurs marron et

jaunâtre des cosses et graines respectivement. Ces poudres ont été utilisées pour les

investigations photochimiques mentionnées ci-après. [29]

IV -1-2-1 Identification de la matière première

IV-1-2-2 Caractères morphologiques :

Les gousses de l’acacia arabica sont droites, rugueuses et de couleur brun grisâtre.

Figure IV-1 : Gousses et graines de l’Acacia arabica.


15

IV-1-2-3Caractères organoleptiques :

La poudre des gousses égrenées (gousses) de l’Acacia arabica est de couleur marron,

d’odeur faible et de saveur astringente.

La poudre des graines de l’Acacia arabica est de couleur jaunâtre, d’odeur faible et de

saveur astringente. [30]

IV-2-Méthodes :

IV.2.1. Méthodes utilises :

Ces méthodes sont consacrées à la mise en point d’une méthode permettant d’extraire et

de doser les parties étudies de la plante en polyphénols totaux, à fin d’une part de pouvoir les

classer suivant leur activité antioxydant, et d’autre part de découvrir des propriétés biologiques

des extraits ou des molécules isolés.

Tous utilisent des extraits préparés à partir de la poudre végétale, c’est pourquoi dans un

premier temps deux types d’extraits bruts ont été préparés, à savoir un extrait au méthanol et un

extrait à l’acétone. La raison de choix de ces deux solvants est de couvrir une large gamme de

polarité dans le cadre d’un calibrage préliminaire. Par la suite les extraits obtenus ont été étudiés

dans divers domaines. [31]

Nos études ont été surtout guidées par deux idées majeures suivantes :

La quantification d’extraits en composés phénoliques totaux et en flavonoïdes par des

simples méthodes basées sue la spectrophotométrie UV.

Dans l’optique de découvrir de nouvelles molécules possédant une activité antioxydant

pour lutter contre les radicaux libres responsables de la dégradation des cellules vivantes, nos

extraits ont été testés pour leur effet antioxydant dans deux systèmes modèles. [32]

Compte tenu de nos objectifs que nous sommes fixes, la démarche expérimentale que nous avons

adapté est de mettre au point une technique d’extraction des composés phénoliques dans les

différentes parties étudiées permettant de procéder ensuite à la fois à un dosage quantitatif de


16

l’activité antioxydant des extraits et à un isolement des composés responsables de cette activités.

[33]

Dans un premier temps nous testons deux méthodes d’extraction pour la quantification des

phénols totaux. Dans un second temps, nous décrivons les différents moyens d’évaluation de

l’activité antioxydant.

La complexité des mélanges d’extraits, nous amène à mettre au point une méthode d’extraction

simple pour l’extraction des polyphenoles.

Enfin, nous isolons purifions les composés phénoliques responsables à cette activité antioxydant.

Le schéma pesant les étapes réalise. [34]

Remarque : pour évalué l’efficacité de chacune des parties étudiées de la plante, nous avons

appliqué un protocole identique d’extraction par deux solvants différents déjà cités avant, et de

dosage des phénols totaux ainsi que le dosage de l’activité antioxydant pour chacun des extraits

parties étudiées.

Matière végétale

Séchage

Broyage mécanique

Pesée

Extraction des composés

Phénoliques

- Dosage des polyphénols

totaux.

- Dosage des flavonoïdes.

- Evaluation de l’activité

antioxydante.

- Evaluation de l’activité

inhibitrice.


17

Schéma IV-1. Représentation schématique des étapes de l’étude réalisée.

IV-2-1-Extraction et analyse quantitative

1-Méthode d’extraction :

La méthode d’extraction des composés phénoliques utilisée est celle d’Amiot (hertog )

modifiée (Djeridane ). L’objectif de l’étape de l’extraction est de séparer les substances

phénoliques de la poudre solide et de les faire passer en solution. [35]

Elle est réalisée en trois étapes :

Extraction des composés phénoliques :

Les échantillons déjà séchés à l’abri de la lumière et à température ambiante, sont

finement broyés. La poudre ainsi obtenue est ensuite macérée dans deux mélanges méthanol/eau

(8 :2 V/V) et acétone/eau (7 :3 V/V) séparément, pendant 48 heures à température ambiante.

Les extraits hydrométhanoliques et hydroacétoniques ont été récupérés dans un premier temps

après filtration des mélanges, la phase aqueuse a été éliminée des filtrats par évaporation sous

pression réduite dans un rota vapeur. Permettant ainsi d’obtenir des extraits caractérisés par une

couleur brune foncée pour ceux des cosses, et une couleur verte foncée pour ceux des graines qui

sont considérés comme étant les extraits bruts des cosses et graines de l’Acacia arabica.

Dépigmentation

Cette étape appelée aussi élimination des lipides, consiste à faire passer les extraits bruts

par une extraction liquide-liquide en utilisant l’éther de pétrole comme solvant d’extraction :

Pour les extraits obtenus par macération dans le système méthanol/eau, les lipides

ont été extraits en trois fois 120ml/120ml/60ml d’éther de pétrole.

Pour les extraits obtenus par macération dans le système acétone/eau, les lipides

ont été extraits en trois fois 180ml/180ml/90ml d’éther de pétrole.


18

Purification des composés phénoliques

Ensuite, les composés phénoliques ont été extraits par extraction liquide-liquide en

utilisant l’acétate d’éthyle, en ajoutant des solutions de l’acide orthophosphorique et de sulfate

d’ammonium au cours de l’extraction pour améliorer le rendement en composés phénoliques

Figure IV-2 : extraction de compose phénolique


19

Schéma IV-2. Extraction des composés phénoliques.

2- Analyse quantitative des composés phénoliques

a) Dosage des phénols totaux :

Le dosage des polyphenoles totaux a été effectué par une méthode adaptée par Singleton

et Ross (en1965) avec le réactif de Folin-Ciocalteu [36]. Le réactif est formé d’acide

phosphotungstique H3PW12O40 et d’acide phosphomolybdique H3PMo12O4, qui sont réduits lors

de l’oxydation des phénols en oxydes bleus de tungstène (W8O23) et de molybdène (Mo8O3), ce

qui nous aide à doser les phénols dans le visible à une longueur d’onde de l’ordre de 760nm.


20

Procédure expérimentale :

Une courbe d’étalonnage standard a été obtenue à partir des solutions d’acide gallique de

différentes concentrations. 100μl de chaque solution ont été introduits à l’aide d’une

micropipette dans des tubes à essai, suivis de l’addition de 500μl du réactif de Folin-Ciocalteu.

Après incubation pendant 2 minutes, 2ml de carbonate de sodium à 20% ont été ajoutés, puis

les solutions ont été secouées immédiatement et sont maintenues à l’obscurité pendant 30

minutes à température ambiante. L’absorbance de chaque solution a été déterminée à 760nm

contre un blanc (même solution précédente à l’exception de l’extrait phénolique : l’acide

gallique). Sur un spectrophotomètre.

Les lectures de la densité optique à 760nm, des solutions ainsi préparées ont permis de tracer la

courbe d’étalonnage de l’acide gallique. L’analyse quantitative des phénols totaux des extraits

phénoliques a été réalisée par la même procédure.

b) Dosage des flavonoïdes

La quantification des flavonoïdes a été effectuée par une méthode adaptée par Zishen et

al [37] basée sur la complication des flavonoïdes par l’aluminium en utilisant une solution de

trichlorure d’aluminium comme réactif dans cette méthode.

Procédure expérimentale :

La rutine a été utilisée comme étalon. Pour tracer la courbe d’étalonnage, Une solution de

0.2 g/l de rutine a été préparée dans le méthanol. Avec ce solution mère, on prépare une série des

solutions diluées d’une concentration 0.01 jusqu'à 0.12 g/l. 1 ml de chaque solution ainsi préparé

a été mélangé avec 1 ml d’une solution méthanoïque de chlorure de sodium (AlCl3 10%), en

suite phosphatée. Les solutions ont été secouées immédiatement et bien mélangées, puis ils se

sont maintenus dans un bain marie pendant 30min à une température de 50°C, ensuite on ajoute

de l’acide trichloracétique (TCA 10%). On prend de chaque tube 2.5ml et on ajoute 2.5ml d’eau

distillée, 0.5 de solution de FeCl3 (0.1%) [38].

L’absorbance de chaque solution a été mesurée à 700nm contre un blanc, ces lectures ont permis

de tracer la courbe d’étalonnage de l’acide ascorbique. Les différents extraits ont été traités de la

même façon pour tracer les courbes représentantes de la variation du pouvoir réducteur exprimée

en absorbance en fonction de l’inverse du nombre de dilution.


21

c) Evaluation du pouvoir antioxydant:

Des nombreuses méthodes sont utilisées pour l'évaluation de l'activité antioxydant des composés

phénoliques purs ou des extraits. La plupart de ces méthodes sont basées sur la col0ration ou la

décol0ration d’un réactif dans le milieu réactionnel. Dans notre étude on utilisé un test chimique

à savoir : le test Antioxydant Power Assay qui mesure le pouvoir de réduction des ions de fer

[39]

Le pouvoir réducteur des composés phénoliques (Reducing Power Assay) :

Ce test a est découvert par oyaizu 1896 [40] .Ce test est considéré comme un test direct et rapide

que est utilisé pour mesurer le pouvoir des antioxydants non enzymatiques, et utilisé pour

déterminer I ‘activité antioxydant d’ extraits étudies dans un milieu neutre

Ce test est basé sur la réduction des ions [Fe (CN) 6]3 à des ions de [Fe (CN) 6]2 qui donne

(avec la présence des ions Fe3⁺) une coloration bleu claire, dont on peut mesurée 1' absorbance à

longueur d'onde λ= 700 nm, et ce par le mécanisme réactionnel suivant :

Fe(CN)6 + é(produit par les phénols) + Fe3+

[Fe(CN)6 ]4-

+Fe3+

Coloration jaune Complexe bleu

L’activité antioxydant est mesurée avec un nouveau terme appelé AEAC : qui présente

L’activité antioxydant en équivalant de l’acide ascorbique d’extraits étudie (Ascorbic

Acide Equivalent Antioxydant Capacité)

L’évolution de l'activité antioxydant de nos extraits est comparée par rapport à l'acide ascorbique

(vitamine C) et cela en traçant une courbe d'étalonnage de ce déminé .

Courbe d'étalonnage :

On prépare des solutions d'acide ascorbique (vitamine C) de concentration de 0.01 jusqu'à

0.1 g/1. 1 ml de chaque solution ont été introduits à l'aide d'une pipette dans des tubes à essai,

suivis de l'addition de 2.5 ml d'une solution K3Fe(CN)6 1%), 2.5 ml de solution tampon

phosphaté. Les solutions ont été secouées immédiatement et bien mélangées, puis ils sont

maintenus dans un bain marie pendant 30 minutes à une température de 50 °C. En suite, on

ajoute 2.5 ml de |acide trichroracétique (TCA 10%). on prend de chaque tube 2.5ml introduit

dans un autre tube à essai et on ajoute 2.5 ml de l’eau distillé, 0.5 ml de solution

FeCl3 (0.1 %).[40]

.

L'absorbance de chaque solution a été déterminée à 700 nm contre un blanc. Le lecteur de la

densité optique à700 nm, des solutions ainsi préparées ont permis de tracer la courbe détalonnage

de l'acide ascorbique (Vitamine C).

Remarque : on prend l’acide gallique comme un standard comparatif.


22

Figure IV-4 : spectrophotomètre

Chapitre V

Résultats et discussion

Chapitre V Résultats et descut

23

V-1-Résultats de l’analyse quantitative

V-1- Des phénols totaux :

La teneur en composés phénoliques d’extrait a été calculée à partir de la courbe

d’étalonnage de l’acide gallique (figure V-1), et exprimée en milligrammes par gramme de la

matière sèche équivalent en acide gallique.

Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau V-1

Remarque : on prend l’acide gallique comme un standard comparatif.

Figure V-1. Courbe d’étalonnage de l’Acide gallique.

Résultats et discussion :

L’analyse quantitative des phénols totaux des extraits phénoliques a été réalisée en adaptant la

même procédure utilisée pour l’établissement de la courbe d’étalonnage. La quantité des phénols

totaux dans les extraits est exprimée en équivalant d’acide gallique en milligramme par 1g de la

matière végétale (mg/g). Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau

La concentration de chaque variété est déterminée par la relation suivante

𝑪 𝒎𝒈/𝒈 = 𝑨

𝑲 × 𝑭 ×

𝑽

𝑷

y = 3,354xR² = 0,996

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

0 0,1 0,2 0,3 0,4

abco

ban

ce (

76

0 n

m)

C g/ml


24

Tableau V-1. Teneurs en phénols totaux dans les extraits.

Solvant d’extraction

Echantillon

Acétone / Eau Méthanol / Eau

Gousse 187.75 mg/g 103.2mg/g

A partir des ces résultats de tableau V-1 on remarque que la quantité de polyphenoles

dans les gousses méthanol puis petite que la quantité de polyphenoles dans les gousses actons

V-1-2 Dosage des flavonoïdes :

Le trichlorure d'aluminium forme un complexe très hydroxydes OH des phénols. Ce

complexe jaune absorbe la d'onde 410 nm, stable avec les groupements lumière visible à une

longueur.

V-1-2-1Courbe d’étalonnage

Les flavonoïdes sont estimés par une spectroscopie l’UV, dont la Rutine est utilisé confirme un

standard à une longueur d’onde 410 nm. Courbe d'étalonnage :

Une solution de 0.2 g/l de rutine a été préparée dans le méthanol. Avec ce solution mère, on

prépare une série des solutions diluées d'une concentration 0.01 jusqu'à O.l2 g l .Avec 0.5 ml de

chaque solution ainsi préparée mélangée avec I ml d'une solution méthanoïque de chlorure de

sodium (AlCl3 10yo), on y ajoute I ml d'une solution aqueuse d’acétate de sodium (CH3COONa

0.1 N) Ces solutions ont été bien mélangées, puis maintenues à 1'obscurité pendant 30 minutes à

la température ambiante.

L'absorbance du mélange a été mesurée par spectroscopie UV à longueur d’onde 410 nm contre

un blanc. En utilisant les valeurs des absorbances obtenues pour les différentes solutions de

Rutine ainsi préparées, nous avons tracé la courbe d'étalonnage (Figure V.2).


25

Figure V.2: Courbe étalonnage de la Rutine.


Les différents extraits sont traités de la même façon que ceux des solutions standards Rutine. La

quantité des flavonoïdes dans chaque extrait est exprimée en milligramme par gramme en

équivalent en Rutine. L'ensemble des résultats obtenus par ce test est regroupé dans le tableau

(V.2) ci-après :

Tableau V-2. Teneurs en flavonoïdes dans les extraits

solvant

échantillon

Acétone /eau Méthanol /eau

gousse 0.166 mg/g 0.786 mg/g

Dans les extraits des gousse méthanol la quantité de flavonoïdes est plus petite par pour a la

quantité de flavonoïdes dans gousse acétone.

A partir de ce résultats on pus comparaison :

Comparaison entre phénol totaux et flavonoïdes présenté dans cet histogramme :

y = 7,693xR² = 0,993

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14

abso

rbo

nc

A(

41

0 N

M)

C g/ml

A


26

Figure V.7: Comparaison entre la quantité des phénols totaux et les flavonoïdes dans les extraits

étudient


Apre le histogramme on consulte que la quantité de phénol totaux dans G méthanol et plus

gronde para pour ou G action par contre la quantité de flavonoïde dans G action petite que G

méthanol.

G(Acétone) : Extrait a cétonique des gousses.

G(Méthanol) : Extrait méthodique des gousses. .

V-2 Evaluation du pouvoir antioxydant :

Des nombreuses méthodes sont utilisées pour l’évaluation de l’activité antioxydante des

composés phénoliques purs ou des extraits. La plupart de ces méthodes sont basées sur la

coloration ou la décoloration d’un réactif dans le milieu réactionnel. Dans notre étude nous avons

utilisé trois différents tests chimiques à savoir : le test ferric Reducing / Antioxydant Power

Assay qui mesure le pouvoir de réduction des ions de fer et le test phosphomolybdate qui mesure

le pouvoir réducteur des composés phénoliques.

0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

200

Phénol totauxPhénol totauxPhénol totaux

Flavonoides

G : Gousse


27

V.4.1. Le pouvoir réducteur des composés phénoliques (Reducing Power

Assay) :

Ce test est découvré par Oyaizu 1896 .Ce test est considéré comme un test direct et rapide

dont est utilisé pour mesurer le pouvoir des antioxydants non enzymatiques, et utiliser pour

déterminer l’activité antioxydant des extraits étudies dans un milieu neutre .

Ce test est basé sur la réduction des ions [Fe (CN)6]3-

à des ions de [Fe (CN)6]4-

qui donne

dans la présence des ions Fe3+

un coloration bleu clair, qui peut être mesurer leur absorbance à

longueur d’onde λ= 700 nm , cela par le mécanisme réactionnel suivant :

𝑭𝒆 𝑪𝑵 𝟔 𝟑− + é 𝒑𝒓𝒐𝒅𝒖𝒊𝒕 𝒑𝒂𝒓 𝒍𝒆𝒔 𝒑𝒉é𝒏𝒐𝒍𝒔 ⟶ 𝑭𝒆 𝑪𝑵 𝟔

𝟒− + 𝑭𝒆 𝟑+

𝒄𝒐𝒍𝒐𝒓𝒂𝒕𝒊𝒐𝒏 𝒋𝒂𝒖𝒏𝒆 𝑪𝒐𝒎𝒑𝒍𝒆𝒙𝒆 𝒃𝒍𝒆𝒖

L’activité antioxydant est mesuré avec un nouveau terme appelé AEAC : qui présente

l’activité antioxydant en équivalant de l’acide ascorbique des extraits étudies (Ascorbic Acide

Equivalent Antioxydant Capacity).

L’évolution de l’activité antioxydant de nos extraits est comparée par rapport à l’acide

ascorbique (vitamine C) et cela en traçant une courbe d’étalonnage de ce dernier.

V.4.1.1. Courbe d’étalonnage :

On prépare des solutions d’acide ascorbique (vitamine C) de concentration de 0.01 jusqu'à 0.1

g/l. 1 ml de chaque solution ont été introduits à l’aide d’une pipette dans des tubes à essai, suivis

de l’addition de 2.5 ml d’une solution K3Fe(CN)6 (1%), 2.5 ml de solution tampon phosphaté.

Les solutions ont été secouées immédiatement et bien mélangées, puis ils sont maintenus dans un

bain marie pendant 30 minutes à une température de 50 °C. En suite, on ajoute 2.5 ml de l’acide

trichloracétique (TCA 10%). On prend de chaque tube 2.5 ml et on introduit dans un autre tube à

essai et on ajoute 2.5 ml de l’eau distillé, 0.5 ml de solution de FeCl3 (0.1 %).


28

V-4-1-2 Courbe d’étalonnage

Il est nécessaire de mettre en évidence l’efficacité de cet antioxydant de référence à ce

test et cela en traçant une courbe d’étalonnage de la l’acide ascorbique (Vitamine C)

(Figure V.3). L’absorbance de chaque solution a été déterminée à 700 nm contre un

blanc. Les lectures de la densité optique à700 nm, des solutions ainsi préparées ont

permis de tracer la courbe détalonnage de l’acide ascorbique (Vitamine C) (Figure

V.3).

Figure V.3 : Courbe étalonnage de l’acide ascorbique (V. C)

Les différents extraits sont traités de la même façon que ceux des solutions standards de

l’acide ascorbique (Vitamine C). Nous avons tracé les courbes représentants la variation du

pouvoir réducteur exprimée en absorbance en fonction de l’inverse du nombre de dilution

(Figure V.1).

y = 5,002xR² = 0,996

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25

abcr

bo

nce

(7

00

)

concentration M


29

Figure V.2 : Courbe teste d’AEAC G action et méthanol

y = 85,3xR² = 0,998

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

-2,08 E-1 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01

Ab

sorb

ance

(6

95

nm

)

1/nomber dilition

G (Acetone)

y = 147,3xR² = 0,987

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

1,6

0 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012

abco

rbo

nce

69

5n

m

1/Nomber diltion

G méthanol

R² = 0,996

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35

abco

rbo

nce

69

5

1/nomber dilition

acide gallique


30

Tableau V-3. Les valeur d’AEAC d’ extraits étudient

Activité antioxydant d’AEAC(M)

solvant

Echantillon

Gousse méthanol Gousse action

extraie 226.4785mg/g 166.7115mg/g

Acide 4.1925mg/g

Le résultat d’AEAC et avec la différance de duitions et extraie on obtenue une quantité

plus grand dans les gousses action que la gousse méthanol

Les résultats de tableau (V.4) d’activité réductrice exprimée en AEAC, montrent clairement

que tous les extraits ont un pouvoir réducteur important.

On remarque que le pouvoir réducteur est varié dans extraits mais suit le même sens que celui

remarqué dans le cas de Reducing Power Assay.

On remarque que l’extraits de gousse ont le pouvoir réducteur le plus important, dont l’extrait

méthanoïque de ces derniers a le pouvoir réducteur le plus grand par pour a extrait dans acétone.

Ces résultats peut être expliqués que les extraits des gousse présentent un pouvoir réducteur

important renferment des molécules ayant un potentiel réducteur donneur d’électron plus fort.


31

Notre contribution à l'étude des extraits phénoliques des gousses de l'arbre «Acacia

arabica» si que leur activité antioxydant, se socle par un certain nombre d’acquis.

Après une première partie consacrée aux données de la littérature concernant les

structures chimiques des composés phénoliques et leurs activité antioxydant, nous intéressés

dans la partie expérimentale à la mise au point de l’extraction des composés phénoliques, la

quantification de ces composés dans leurs extraits, et enfin la mesure de l'activité antioxydant des

extraits parun tests chimiques .

Dans le cadre de ce travail, nous sommes intéresses de contribuer à la valorisation des espèces

locales. Compte tenu son intérêt scientifique.

Dans un premier temps de cette étude nous avons fait un extraction par deux systèmes

différentes : Méthanol/Eau 8/2 v/v et Acétone/Eau 7/3 V/V, solvants polaires.

Puis, nous avons évalué les quantités des phénols totaux de nos extraits en adaptant la méthode

de Singleton et Ross, dont la quantité de 103.2 mg/g pour les extraits méthanoïques et de 187.75

mg/g pour les extraits a cétonique.

En parallèle, l’analyse quantitative de contenu en flavonoïdes réalisée en utilisant la méthode

colorimétrique du chlorure d’aluminium. On a trouvé que la quantité est de 0,786 mg/g pour les

extraits méthanoïque et de 0.166 mg/g pour extraits cétonique.

De ces résultats, on a conclue que ces extraits sont riches en composés phénoliques quantités des

flavonoïdes des extraits sont très faibles par rapport aux quantités des phénols totaux.

Le test d’évaluation clue pouvoir antioxydant montrent que les extraits étudiés ont activité

antioxydant importante dont tous le test confirment que les extraits étudiés ont L ne activité

antioxydant supérieure à celles de l'acide ascorbique et à laide gallique qui sont utilisé dans

l'industrie alimentaire comme produits de conservation.

.

Conclusion générale

Références

bibliographiques

Références bibliographiques

32

[1] Investigation Phytochimique de l’Acacia arabica Aux propriétés antioxydants et inhibitrices

2011-2012.

[2] Sorg, O.(2004) Oxidative stress: a theoretical model or a biological reality. Comptes

Rendus Biologies. 327: 649-662.

[3, 6,7] Favier, A. (2003) Intérêt conceptuel et expérimental dans la compréhension des

mécanismes des maladies et potentiel thérapeutique. L’actualité Chimique. 108-115.

[4] Kohen, R., Nyska, A. (2002) Oxidation of biological systems : oxidative stress

phenomena, antioxidants, redox reactions and methods for their quantification. Toxicologic

Pathology. 30: 620-650.

[5,6,7] Lehucher-Michel, M.P., Lesgards, J.F., Delubac, O., Stocker, P., Durand, P., Prost, M.

(2001) Stress oxydant et pathologies humaines. La Presse médicale. 30: 1076-1081.

[8,9] Halliwell, B., Whiteman, M. (2004) Measuring reactive species and oxidative damage

in vivo and in cell culture : how should you do it and what do the results mean?. British

journal of pharmacology. 142: 31-2.

[10,11] Investigation Phytochimique de l’Acacia arabica Aux propriétés antioxydantes et

inhibitrices 2011-2012.


inhibitrices 2011-2012.

[14, 15] Koechlin-Ramonatxo, C. (2006) Oxygen, oxidative stress and antioxidant

supplementation,or an other way for nutrition in respiratory diseases. Nutrition clinique

et métabolique. 20:165-177

[16, 17] contribution a l’étude de l’activité antioxydant de Zingiber officinalis et curcuma longa


33

[18]BONNEFONT-ROUSSELOTet al..2003

[19 ,20] Sorg, O.(2004) Oxidative stress: a theoretical model or a biological reality. Comptes

Rendus Biologies. 327: 649-662.

[21,22] contribution a l’étude de l’activité antioxydant de Zingiber officinalis et curcuma longa

BOYDet…2003

[23)] Quantification des principes actifs et l’évaluation du pouvoir antioxydant de i . L'Acacia

arabica 2009-2010

[24]BOIZOTetCHARPENTIER ,2006

[25]Alais et Linden,1997

[26]Dosage biochimique de trois échentillons de miel naturalet extraction des composé de

polyphénols


inhibitrices 2011-2012

[29] CORBO M.R., LANCIOTTI R., GARDINI F. & SINIGLAGLIA GUERZONI M. E.

(2000). Effects of Hexanal, trans-2-Hexanal and storage Temprature on Shelf Life of Fresh

Sliced Apples. Journal of agricultural and food chemistry, 48, 2401-2408.

[30] ANTOLOVICH M, PRENZLER P.D, PATSALIDES E., McDONALD S & ROBARDS

K. (2002). Methods for testing antioxydant activity. The royal Society of Chemistry Analyst,

127, 183-192

[31, 33] Investigation Phytochimique de l’Acacia arabica Aux propriétés antioxydantes et

inhibitrices 2011-2012

[33,34] Quantification des principes actifs et l’évaluation du pouvoir antioxydant de L'Acacia

arabica 2009-2010


34

[35, 36] Harbone et Grayer 1988

[37, 38] Effects of Hexanal, trans-2-Hexanal and storage Temprature on Shelf Life of Fresh

Sliced Apples. Journal of agricultural and food chemistry, 48, 2401-2408.

[39] Miller.N.J, Jrice'Evans.J, Jdavies .M, Gopinathan .v and Milner .A, A novel

method for measuring antioxidant capaciÿ and its application to monitoring the

antioxidant status in premature neoates, clin sci, 1993, p S4 pp 407_412

[40] Megala .J, Geetha .4, Free radical-scavenging and H*, K+-ATpase inhibition

activities of Pithecellobium dulce, Food chemistry l2l, 2010, p l l20-l l2g

Résumé

Nous avons dans ce travail d'étudier l'arbre, puis l'extraction des composés phénoliques,

puis nous avons étudié l'efficacité de la direction de la production de réactions aux racines,

puis en testant l'oxydation du fer

Mots clés: Acacia arabica, phénols totaux, activité antioxydant des flavonoïdes d’AEAC .

ملخص

و رلك باستخالص الُمشكباث االلفينىليت ثم قمنا بذساست فعاليتها اتجاه العمىسة قمنا في هزا العمل بذساست شجشة

التفاعالث المنتجت للُجزوس و رلك عن طشيق اختباس اكسذة الحذيذ

.d’AEAC، والنشاط المضادة لألكسذة الفالفىنىيذ ، الفينىالث،Acacia arabica: المفتاحيةكلمات ال

Abstract

We have in this work studying the tree and then extraction of phenolic compounds and then

we studied the effectiveness of the direction of producing reactions to the roots and then by

testing the iron oxidation

Keywords: Acacia arabica, total phenols, flavonoids and antioxidant activity AEAC

Documents

UNIVERSITE KASDI MERBAH OUAREGLA - bu.univ … · I-Généralités sur les plantes médicinales 2 I-1Définition 2 ... grand nombre de maladies qui étaient souvent mortelles, les