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USO DE MARCADORES MOLECULARES EN EL MEJORAMIENTO GENÉTICO Y SU APLICABILIDAD Christopher VIOT 1 1 CIRAD, UMR AGAP Av Agropolis - 34398 Montpellier Cedex 5 Francia [email protected] TALLER Y CONFERENCIA INTERNACIONAL “SITUACION ACTUAL DE LA VALORACIÓN, CONSERVACION Y USO DE LA DIVERSIDAD GENETICA DEL ALGODÓN CON FINES DE BIOSEGURIDAD”

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USO DE MARCADORES MOLECULARES EN EL

MEJORAMIENTO GENÉTICO Y SU APLICABILIDAD

Christopher VIOT1

1CIRAD, UMR AGAP

Av Agropolis - 34398 Montpellier Cedex 5 – Francia

[email protected]

TALLER Y CONFERENCIA INTERNACIONAL “SITUACION ACTUAL DE LA

VALORACIÓN, CONSERVACION Y USO DE LA DIVERSIDAD GENETICA DEL

ALGODÓN CON FINES DE BIOSEGURIDAD”

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Christopher VIOT, Uso de marcadores moleculares

en el mejoramiento genético y su aplicabilidad. In

Taller y Conferencia Internacional “Situación actual

de la valoración, conservación y uso de la diversidad

genética del algodón con fines de bioseguridad”,

MINAM-IPA-MINAGRI-UNALM, La Molina, Perú, 27

de septiembre de 2016 (2016).

RESUMEN

En fitomejoramiento de algodón, los marcadores del

ADN permiten diferenciar plantas individuales,

elaborar mapas genéticos incluyendo las posiciones

estimadas de genes de interés, asistir en la

selección de genes determinados o de ideotipos

moleculares, determinar la identidad entre

variedades y la pureza varietal.

La selección asistida por marcadores del ADN está

muy difundida en fitomejoramiento varietal y es

usada para controlar, durante una transferencia por

retrocruzamiento, la presencia de un transgen o de

un gen de un carácter de herencia simple, tal como

ciertas resistencias a enfermedades.

Para los caracteres cuantitativos, de base

mutligénica y compleja, las estrategias basadas

sobre el posicionamiento de QTLs a lo largo de los

mapas genéticos no resultaron en aplicaciones

exitosas en fitomejoramiento varietal. La orientación

actual es aplicar la selección genómica desarrollada

en mejoramiento animal, basada sobre números

muy importantes de marcadores.

Para la pureza varietal, la identidad entre

variedades, la ausencia o presencia de transgenes,

los los marcadores del ADN permiten respuestas

fiables, rápidas y baratas.

Para los recursos genéticos utilizados en

mejoramiento genético de plantas, el genotipado por

marcadores del ADN permite estructurarlos,

determinar la probabilidad de utilidad, la constitución

de colecciones de referencia y optimizar su gestión.

Las secuencias de genomas algodoneros

disponibles para todas las especies importantes

permiten buscar directamente marcadores del ADN

ligados a genes determinados.

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Uso de marcadores moleculares en el mejoramiento

genético y su aplicabilidad

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G.h x G.b

F 1

F 2

R IL

B C1

G.h

G.h

B C1S 1

B C2 G.h

B C2S 1

B C3 G.h

B C3S 1

B C4

x

x

x

x

2000

2001

2002

1999

F 5

K ey-step 1

K ey-step 2

Estrategia de SAM sobre una descendancia por retrocruzamiento / backross.

La selección es realizada en base a datos de genotipado : retrocruzamiento / backcross asistido por

marcadores.

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Phénoty

pe

Phénoty

pe

Phénoty

pe

Phénoty

pe

mk-1

mk-2

mk-3

mk-4

Localisation

approximative

du QTL

Phénoty

pe

Phénoty

pe

Phénoty

pe

Phénoty

pe

mk-1

mk-2

mk-3

mk-4

Localisation

approximative

du QTL

Principio de la

cartografía de un

QTL con

marcadores

cromosómicos

Localización

aproximativa

del QTL

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Método QTL directo : resultados de

cartografía de marcadores y de QTLs

de calidad de la fibra

Mapas genéticos con regiones probables

de QTLs para diferentes rastros

fenotípicos.

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Método QTL directo : ejemplo de sintesis cartografico de QTLs de calidad de la fibra

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QTL

correspondiendo

al carácter meta

Gen

Gen regulador

Gène A

QTL y genes de estructura o

regulación

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Método de QTLs para caracteres complejos de

herencia multigénica (fin)

Bilán por el momento negativo en creación

varietal algodonedra basada sobre los QTLs.

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Marcadores del ADN utilizados :

- Microsatélites o SSR, simple sequence repeat

- SNPs

Métodos de genotipaje (principales)

- PCR y electroforesis

- Micro-array

- Genotipado por secuenciado – GBS

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ADN Cebador

Nucleótido

ADN original

para replicar

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Selección genómica

15

De: David Cros, Practical aspects of genomic selection. OPGP

Workshop, March 4-13, 2015, Kuala Lumpur

Principio :

estimar los efectos de un

muy grande numero de

marcadores sobre los

fenotipos de una población

de plantas

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Mapa genético "consenso“, síntesis de dos mapas.

Carte génétique consensus

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Aplicación de los marcadores del ADN en el mejoramiento

genético:

Los marcadores del ADN permiten respuestas fiables, rápidas y baratas para:

Diferenciar plantas individuales:

identidad entre variedades

proximidad entre genotipos

pureza varietal

estructuración y gestión de los recursos genéticos

Controlar la presencia de un transgen o de un gen determinado:

transferencia por retrocruzamiento,

. selección de caracteres con herencia simple

(resistencias a enfermedades, grado de pilosidad, de gosipol)

En metodologías mas sofisticadas, permiten asistir en la selección de ideotipos

moleculares.

Las secuencias de genomas algodoneros disponibles para todas las especies

importantes permiten buscar directamente marcadores del ADN ligados a genes

determinados.

Selección asistida

por marcadores

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Genotipado microsatelite Precio (investigacion) Precio por dato

96 microplaca ABI 75.48 € 0.10 €

384 microplaca ABI 215.22 € 0.07 €

Costos de datos de genotipado molecular alta capacidad

Genotipado SNP Precio (investigacion) Precio por dato

1 SNP placa 96, LC480 25 € 0.26 €

1 SNP placa 384, LC480 75 € 0.20 €

48*48 Chip Fluidigm,

Biomark 48 SNP x 48

samples

352 € 0.14 €

96*96 Puce Fluidigm,

Biomark 96 SNP x 96

samples

599 € 0.06 €

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