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Vibrio cholerae non-O1 non-O139の 血 清 型分 布,

そ の毒 素 産 生性 お よび新 血 清型 の追加 につ いて

神奈川県衛生研究所細菌病理部

山井 志朗 沖 津 忠行

国立感染症研究所腸管系細菌室

島 田 俊 雄

日本大学生物資源科学部獣医公衆衛生学研究室

勝部 泰次

(平成9年5月19日 受付)

(平成9年7月8日 受理)

Key words : Vibrio cholerae non-O1 non-O139, serogroup,

cholera toxin, NAG-ST

要 旨

1994～1996年 の3年 間 に,世 界各 地 か ら収 集 したVibrio cholerae non-O1 non-O139に つ いて,そ の分

布 を把握 す るた め にそれ らの血 清型 別 を行 い,さ らに それ らの菌株 の コ レラ毒素(CT)遺 伝 子(ctx)お

よびNAG-ST遺 伝 子 の保有 状況 を検 査 し,ctx陽 性 株 につ いて は さ らにCT産 生 性 を調 べた.ま た,型

別不 明株 を用 いて新血 清型 の追 加 を試 みた.

供 試 したV.cholerae non-O1 non-O139菌 株1,898株 は,R型 の50株 お よび型別 不明 の74株 を除 き128

血清 型 に分 け られた が,そ の血 清 型分布 には地域 お よび 由来 に よる明 らか な相 違 は認 め られ なか った.

型 別 不明株 の中 に38の 新 しい血 清型(O156-O193)を 認 め,抗 原構造 表 に追加 した.

V.choleraeの 免疫 血清 中 に はR抗 体 が か な り含 まれ,実 際 の検 査 に用 い る診 断用抗 血清 はR菌 株 で

吸収 した もの を使 用 しな ければ な らない.

白糖 非分 解性,VP反 応 陰性 菌株 の 中 に,ル ミネセ ンスを産生 した ものが見 られ たが,DNA相 同性 試

験 か ら何 れ もV.choleraeと 同定 された.こ れ までVibrio mimicusと 同定 され た菌株 中 に,ル ミネセ ン

ス産 生 性V.choleraeが 紛 れ込 んで いた可 能性 が あ り,両 菌種 の同定 にお いて は必 ず発光性 を確認 しな

けれ ぼな らない.

供 試 した1,898株 中,CT遺 伝子 を保 有 し,CTを 産 生 した ものはわ ずか37株(約2%)で あった.し

か しなが ら,特 に血 清型O141菌 株 はCT産 生株 の割 合 が,16株 中10株(約63%が 陽性)と 極 めて高 か っ

た.今 後,CT産 生性 のO141菌 群 に よるコ レラ様 下痢 症 の動 向 に注 目 した い.

序 文

コレラ流行地では,コ レラ菌に類似 した性状 を

保有しているが,コ レラ菌の抗血清に凝集 しない

菌群が以前か ら知 られ,NAG (Non agglutinable)

ビブ リオ と通 称 され て い た.そ の後,こ の 菌 群 は

コ レ ラ菌 本 来 の 学 名 で あ っ たV.choleraeに 統 合

さ れ,従 来 の コ レ ラ菌 は01,そ の 他 の もの はnon-

O1と 総 称 され る様 に な っ た.

コ レ ラ の激 しい 下 痢 は コ レ ラ菌 の産 生 す る コ レ

ラ 毒 素(CT)に 起 因 す る が,non-O1菌 株 でCTを

産 生 す る もの は極 め て少 な く,し か もCT産 生 菌

別刷 請求 先:(〒241)神 奈川 県横 浜市 中尾 町1-1-1

神奈川県衛生研究所 山井 志朗

平成9年10月20日

1038 山井 志朗 他

で さ え も過 去 に大 き な コ レ ラ 流 行 を起 こ した こ と

は ほ とん どな く,わ ず か に1971年 に ス ー ダ ンで 局

地 的小 流 行 が 見 られ た の み で あ った.

1992年10月,突 如 イ ン ドでCT産 生 株 のnon-O1

に よ る激 症 コ レ ラの 大 流 行 が 発 生 し,翌 年 に はバ

ン グ ラ デ シ ュ に侵 入 し,多 数 の 犠 牲 者 を見 た.そ

の後,こ の流 行 はパ キ ス タ ン,ミ ャ ンマ ー,マ レ ー

シ ア,タ イ,中 国 へ と拡 大 して 行 った1).当 時,V.

choleraeはO1-O138の 血 清 群 に 型 別 さ れ て い た

が,こ の 大 流 行 で 分 離 さ れ た 菌 株 は,こ れ らの い

ず れ の0群 に も該 当 しな か っ た.し か しな が ら,

全 株 と も同 一 の 新 し い0群 に 含 まれ る菌 群 で あ

る こ とを確 認 し,新 血 清 型0139と して抗 原 表 に追

加 し,"Bengal"と い う通 称 名 を与 えた2).WHOで

は該 菌 に よ る下 痢 症 患 者 お よび 死 亡 事 例 をい ち早

く コ レ ラ と した が,我 が 国 で はV.cholerae O139

は所 謂NAGビ ブ リオ の 範 疇 に入 り,本 菌 に起 因

す る下 痢 症 は食 中 毒 と して処 理 され,コ レ ラ と し

て は計 上 して い な い.

今 回,1994～1996年 の3年 間 に,世 界 各 地 か ら

収 集 したV.cholerae non-O1 non-O139 1, 898株

に つ い て,そ の分 布 を把 握 す るた め に そ れ ら の血

清 型 別 を行 っ た.さ らに型 別 不 明 菌 株 に関 して は,

新 血 清 型 の 追 加 を試 み,V.cholerae抗 原 構 造 表 の

更 な る充 実 を図 っ た.ま た,血 清 型 別 に供 した 菌

株 に つ い て コ レ ラ毒 素(CT)遺 伝 子(ctx)お よ び

NAG-ST遺 伝 子 の保 有 状 況 を検 討 し,さ らにctx

陽 性 菌 株 につ い て はCT産 生 性 を調 べ た.

材 料 お よ び 方 法

供 試 菌:1994～1996年 まで の3年 間 に収 集 した

V.cholerae non-O1 non-O139菌 株1,898株 の 由

来 お よ び 菌 株 数 はTable 1に 示 した.ヒ ト由 来

1,110株 の う ち1,067株 は下 痢 症 由来 で,残 りの43

株 は血 液,耳 漏 お よ び化 膿 創 か ら分 離 され た もの

で あ る.63株 は冷 凍 エ ビ な どの 食 品,725株 は河 川

水 また は沿 岸 海 水 由来 で あ る.な お,日 本 の ヒ ト

由 来 株 の大 部 分 は海 外 渡 航 者 か ら分 離 され た もの

で あ る.ま た,V.choleraeのO参 考 菌 株(O1-

O155),R参 考 菌 株(CA385),基 準 株

(ATCC14035)お よ びV.mimicusの 基 準 株

(ATCC33653)も 併 せ て用 い た.

Table 1 Source of 1,898 strains of Vibrio cholerae

non-O1 non-O139

生 理 ・生 化 学 的 性 状 テ ス ト:Sakazaki &

Shimadaの 方 法3)に よ って 検 査 した.ま た,発 光 性

(ル ミネ セ ン ス)は ト リプ トソー ヤ 寒 天 培 地(日 水)

で,22℃ で1夜 培 養 した 後,暗 室 で 観 察 した.

DNA相 同性 テ ス ト:供 試 菌 を ハ ー トイ ン フ ユ

ジ ョン プ ロ ス で1夜 培 養 後,DNAの 抽 出 を従 来

の 方 法 で行 った4).標 識DNAは フ ォ トビオ チ ン ・

ラベ リン グ ・シス テ ム(GibcoBRL)を 使 用 した.

マ ニ ュ ア ル に従 っ て,供 試 菌 株,V.choleraeお よ

びV.mimicusの 基 準 株 を ラベ リン グ した.DNA

相 同 値 は江 崎 の 方 法5)に よ っ て,マ イ ク ロ プ レー

トを使 用 し,40℃ で6時 間 反 応 後,蛍 光 分 光 光 度

計(Titertek Fluoroscan II)で 蛍 光 を測 定 す る こ

と に よ り求 め た.

抗 血 清 の作 製,凝 集 テ ス トお よ び凝 集 素 吸 収 テ

ス ト:Shimadaら6)7)の 方 法 に 準 拠 した.診 断 用抗

血 清 は全 てR抗 体 を吸 収 した もの を,ま た 凝 集 テ

ス ト用0抗 原 に は加 熱(100℃,1時 間)後,遠 心

洗 浄 した 菌 を使 用 した.

CT遺 伝 子(ctx)お よびNAG-ST遺 伝 子 の 検

出:ctxの 検 出 は 東 洋 紡 製CT用DNAプ ロ ー

ブ8)を,ま たNAG-ST遺 伝 子 の 検 出 はTakeda

ら9)のNAG-ST検 出 用DNAプ ロー ブ を用 い,ハ

イ ブ リダ イ ゼ ー シ ョ ン法 で 行 った.

CT産 生 性 テ ス ト:デ ン カ 生 研 のVET-RPLA

感染症学雑誌 第71巻 第10号

Vibrio cholerae non-O1 non-O139の 血 清 型 1039

Table 2 O-serogroup of 1,898 strains of Vibrio cholerae non-O1 non-O139 isolated from various sources

平成9年10月20日

1040 山井 志朗 他

感染症学雑誌 第71巻 第10号

Vibrio cholerae non-O1 non-O139の 血 清 型 1041

(N)キ ッ トを用 い た.毒 素 産 生 用 培 地 に は酵 母 エ

キ ス ブ イ ヨ ン(酵 母 エ キ ス5g,バ ク トペ プ トン10

g,食 塩5g,精 製 水IL,pH7.4)を 用 い,30℃,

18時 間 震 盟 培 養 液 を15,000rpm15分 遠 心 後,上 清

を ろ過 滅 菌 した もの を粗 毒 素 と して 供 試 した.

成 績

収 集 し た 分 離 菌1,898株 は,殆 ど 全 て がV.

choleraeの 定 義3)に 一 致 す る性 状 を 示 した が,白

糖 非 分 解 菌 が8株 み られ,う ち4株 はVP反 応 陰

性 で ル ミ ネ セ ン ス 産 生 性 で あ り,残 りの4株 は

VP反 応 陽 性 で ル ミネ セ ンス を産 生 しな か った.

これ ら の 白糖 非 発 酵 菌8株 はV.choleraeお よ

びV.mimiczasと のDNA相 同 性 試 験 に よ る鑑 別

を した.そ の結 果,こ れ らの8株 は,い ず れ もV.

choleraeの 基 準 株 と高 い相 同性(79～82%)を 示

し,V.mimiczasと は低 い(40～45%)相 関 しか 認

め られ な か っ た こ とか ら,V.choleraeと 同 定 し

た.

供 試 したV.choleraenon-O1non-O1391,898

株 は,R型 の50菌 株(2.6%)除 き,1,774株 が129

の0群 に型 別 され た.し か しな が ら,残 りの74株

(3.9%)は 既 知 の153の 血 清 型(O2-O138お よ び

O140-O155)の 何 れ の0お よ びR抗 血 清 に も反 応

し な か っ た.

それ らの 内 訳 を 由 来 別 にTable2に 示 した.比

較 的 多 いO群 は,O10(7.9%),O14(7.3%),

O8(3.8%),O6(5.5%),O5(5.3%),O2(3.6%),

O12(3.2%),O39(3.2%),O41(2.6%),

O34(2.3%),O37(2.1%)で あ った.ま た,由

来 別 の血 清 型 分 布 で も同 様 の傾 向 が 見 られ た.

下 痢 症 由 来 以 外 の菌 株 は43株 あ り,血 液 由 来 は

32株 で そ の0群 は05-5株,O2お よ び034一 そ

れ ぞ れ4株,O24-3株,O10,O14,O17お よび

O40― そ れ ぞ れ2株,O6,O19,O26,O56,O59,

O81,O95,O137― そ れ ぞ れ1株;耳 漏 由来 は9株

で そ のO群 はO26―3株,O7,O8,O10,O23,

O28,O46― そ れ ぞ れ1株;化 膿 由 来 は2株 でO6

お よびO40― そ れ ぞ れ1株 で あ っ た.

一 方,1994年 ペ ル ー の リ マ で 発 生 し たV.

choleraenon-01non-0139に よ る激 症 下 痢 症 の集

団事 例 で は,患 者 か ら分 離 され た 菌 株 の 血 清 型 の

殆 どが012で あった13).

0140群 が3株 含 まれていたが,該 菌群は以前血

清群Hakataと 仮称 されていた ものである.血 清

型140菌 株 は,コ レラ菌のC(稲 葉型)抗 原因子を

保有することか ら,コ レラ菌(O1)血 清に凝集を

示すので,コ レラ菌の同定の際にはこのことに留

意 しなければならない.ま た,こ れ まで該菌は魚

介類,沿 岸海水や河川水からのみ分離されていた

Table 3 Reference strains for new O-serogroup of

Vibrio cholerae

*CT positive strain

平成9年10月20日

1042 山井 志朗 他

Table 4 O-serogroups of CT gene positive and CT

producing strains of Vibrio cholerae non-O1 non-

O139

が,今 回初めて ヒトの下痢症か ら検出された.

型別不明の74株 は,新 しい血清群で構成されて

いることが予測され,代 表菌株 を用いて免疫血清

を作製 し,交 差凝集テス トおよび凝集素吸収テス

トを行った.そ の結果,型 別不明74株 は38のO

群に分 けられ,こ れ らの0群 は新血清型(Ol56-

O193)と してV.choleraeの 抗原構造表に追加し

た(Table3).

なお,新 血清型Ol56か らO193の 参考菌株で免

疫 した抗血清の凝集素価は,640～1,280倍 の範囲

にあった が,そ れ らの中 にはか な りのR抗 体

(18～160倍)が 含 まれていた.

新血清型の参考菌株 と既知の血清型 との抗原関

係を調べた ところ,0156と0137と の間にa,b-a,

c型 の交差抗原関係が認 められた.

供試した1,898株 中,CT遺 伝子 を保有 し,CTを

産生 した菌が37株(約2%)認 められ(Table4),

またそれ らのCT産 生量は1ng/mlか ら100ng/ml

の範囲に分布 した.

特 に血清型Ol41菌 株 は,16株 中の約63%(10株)

がCTを 産生 し,極 めて高い陽性率を示 した.こ

れ らのCT産 生菌10株 は,米 国の環境由来の2株

を除いて,す べて散発下痢症事例由来で,5株 は

米国,残 りの3株 はスペイン,イ ン ド,台 湾でそ

れぞれ分離された菌株である.

一 方,NAG-ST遺 伝子 の保 有状況 を調 べ た

1,898株 中,2.8%(53株)が 陽性であり(Table5),

Table 5 O-serogroups of NAG-ST gene positive

strains of Vibrio cholerae non-O1 non-O139

また 供 試 した 菌 株 が10株 以 上 の 血 清 群 で は,014

群 の 菌 株 のNAG-ST遺 伝 子 の 保 有 率 が20%と

比 較 的 高 率 で あ った.

考 察

今 回収 集 した 菌 株 の 中 に,白 糖 非 分 解 性 でVP

反 応 陰 性 のV.choleraenon-O1が4株 認 め られ た

が,全 て ル ミネ セ ンス を産 生 し,O群 はO28で あ っ

た.こ れ らの菌 株 は1,994年 琵 琶 湖 で 発 生 した ス ジ

ェ ビ の伝 染 性 光 り病,所 謂 ホ タ ル エ ビか ら分 離 さ

れ た もの で,ス ジエ ビ を用 い た実 験 で エ ビに対 す

る病 原 性 お よび 発 光 性 が 再 現 さ れ た10).魚 介 類 の

敗 血 症(所 謂 ビブ リオ 病)は 主 にV.anguillarum

に起 因 し,V.choleraeが 淡 水 魚 の敗 血 症 の 原 因 と

報 告 さ れ た 事 例 は少 な い が,今 迄 に報 告 さ れ た 事

例 は い ず れ も夏 期 に発 生 し,猛 暑 に よ る川 の 水 温

の 異 常 上 昇 や,水 不 足 等 が 疾 病 の 発 生 に強 く影 響

し て い た.こ れ か ら も,V.choleraeに よ る魚 介 類

の 症 状 に も 目 を む け る必 要 が あ ろ う.

一 般 にV .mimicusとV.choleraeと は 白糖 分

解 性 お よ びVP反 応 で 鑑 別 さ れ,白 糖 非 分 解 で

VP陽 性 菌 株 はV.choleraeと,ま たVP陰 性 株 は

V.mimicusと 同定 され,両 者 の 区 別 に発 光 性 テ

ス トを 実施 す る こ と は まず な か った.し か し なが

ら,VP陰 性 菌 の 中 で,ル ミネ セ ンス を産 生 す る も

の はV.choleraeで あ る こ とが 示 さ れ て い る11).

感染症学雑誌 第71巻 第10号

Vibrio cholerae non-O1 non-O139の 血 清 型 1043

従 って,こ れまでに 私V.nunucusと 同定 された菌

株中にル ミネセンス産生性のV.choleraeが 紛れ

込んでいた可能性は否定できない.今 後,両 者の

同定 においては必ず発光性 を確認 しなければなら

ない.

V.choleraeに は多数の0抗 原が認 められてい

るが,R抗 原は全ての血清型で同一である12).V.

choleraeの 参考菌株で免疫 したすべての抗血清中

にはかな りのR抗 体が含 まれて,こ のままの血清

を希釈 したのみで,実 際のスライ ド凝集テス トを

行 った場合 には,血 清中に含 まれるR抗 体 による

類属反応が強 く現れ,正 確な血清型別は行 うこと

が不可能である.従 って,実 際の血清型別に用い

る診断用抗血清は,血 清中に含 まれる全てのR抗

体 をV.choleraeのR菌 株の参考菌株であるCA

385株 で吸収す る必要がある.

また,交 差反応を示す血清群の型別 には,そ れ

ぞれの特異吸収血清を準備 しなければならない.

血清型別に際して,大 部分の菌株 は生菌で当該

の抗血清に凝集 を示 したが,あ る菌株では生菌で

は非凝集性であ り,100℃,1時 間の加熱菌で初め

て凝集 した ものが見られた.恐 らくこれは0凝 集

を阻止する表在性物質 に起 因す るもの と思われ

る.従 って,V.choleraeのO凝 集テス トは加熱抗

原を用いて行っている.

V.choleraeの 抗原構造表に追加された新血清

型(O156-O193)の 参考菌株をTable3に 示す.

ここで拡大 されたV.choleraeの 抗原構造表 は,

散発事例および集団発生事例やそれ らに係わ りを

持つ食品や飲料水から分離された菌株 との因果関

係 を調査する疫学マーカー として,ま た生態学的

研究 または病因究明の手段 として も有用であろ

う.

新血清型O156はOl37群 とa,b-a,c型 の交差抗

原関係が認められ,こ れら両血清型菌株の正確な

同定 には,交 差吸収 した特異因子血清を用意する

必要がある.

今回血清型別 に供 した1,898株 の血清型は,Rお

よび型別不明株 を除き128に も及び,そ の分布の多

様性が示された.ま た,そ の血清型の分布 には地

域や由来による明 らかな相違 は認 められなかっ

た.し か しな が ら,今 回報 告 したペ ル ー で の集 団

事 例 由 来 菌 株 の 殆 どの血 清 型 が 同 一 で あ り13),ま

た1971年 の ス ー ダ ン の コ レ ラ様 下 痢 症 に お け る流

行 株 の ほ とん どの もの が037群 で あ っ た こ とや,

さ らに 過 去 に見 られ た 集 団食 中 毒 事 例 もそ れ ぞ れ

の分 離 菌 株 の血 清 型 が 均 一 で あ った こ とか ら,V.

choleraeの 血 清 型 は病 原 性 とは相 関性 が 無 い に し

て も,疫 学 マ ー カ ー と し て は有 用 で あ る.

V.choleraeの 重 要 な病 原 因 子 と して はCTが

あ り,下 痢 症 か ら 分 離 さ れ る コ レ ラ 菌 や γ

choleraeO139菌 株 の 殆 どす べ て がCTを 産 生 す

る.一 方,こ れ まで の報 告 で はV.choleraenon-O1

non-O139でCTを 産 生 す る も の は 極 め て 少 な

く14),ま た,今 回 の 我 々 の調 査 にお い て も供 試 した

1,898株 中 約2%にCT遺 伝 子 保 有 株 が 認 め ら れ

た にす ぎ な か っ た.し か しな が ら,O141菌 株 はV.

choleraenon-O1 non-O139を 除 い た 他 の血 清 型 に

比 較 してCT産 生 菌 株 の割 合 が 極 め て高 く,今 後

CT産 生 性 のO141菌 群 に よ る コ レ ラ様 下 痢 症 の

動 向 に 注 目 し た い.

本 来V.choleraeは 熱 帯,亜 熱 帯 の 常 在 菌 で

あ っ た が,現 在 で は我 が 国 や 欧 米 諸 国 の河 川 や 汽

水 域 に定 着 し て お り,ま た コ レラ 菌 で さ え も,患

者 の発 生 と は無 関係 に これ らの 国 々 の 河 川,下 水,

沿 岸 海 水,沿 岸 に棲 息 す る渡 り鳥 の 糞 便 な どか ら

し ば しば分 離 され て い る15).こ の よ う な近 年 の 著

し い環 境 汚 染 は,必 然 的 に魚 介 類 の 汚 染 に 繋 が り,

輸 入 魚 介 類,特 にエ ビはV.choleraenon-O1 non-

O139に 高 度 に汚 染 され て い る16).

我 が 国 に お け るV.choleraenon-O1に よ る下 痢

症 事 例 は,コ レ ラ と同様 に か つ て は東 南 ア ジ ア や

イ ン ド亜 大 陸 か ら の帰 国者 に限 られ て い た が,最

近 で は国 内発 生 と思 わ れ る事 例 が しば し ば あ り,

そ の殆 どは散 発 例 で あ る が,集 団 事 例 の報 告 も見

られ て い る17).

こ こ数 年,海 外 渡 航 者 と無 関 係 に突 発 す る コ レ

ラ の散 発 事 例 の増 加 が 目立 っ て い る18).恐 ら く こ

れ は コ レ ラ流 行 地 か ら輸 入 した 魚 介 類 を介 して,

検 疫 の 眼 を潜 り抜 けた コ レ ラ菌 の 持 ち込 み に起 因

す る疑 い が 最 も濃 厚 で あ り,V.choleraenon-O1

non-O139下 痢 症 で も コ レ ラ の 場 合 と同 様 な こ と

平成9年10月20日

1044 山井 志朗 他

が 起 こっ て い る こ とが推 察 さ れ る.

エ ル トー ル コ レ ラ史 上 最 大 の流 行 とな っ た南 米

大 陸 の コ レ ラや,誰 し もが 予 想 だ に しな か ったV.

cholerae O139"Bengal"に よ る新 型 コ レ ラ の 突 発

な ど,こ れ か ら もVcholeraeは 新 興 ・再 興 感 染 症

と して,様 々 に姿 を変 え,我 々 に脅 威 を与 え続 け

る こ とで あ ろ う.

本研究 は平成9年 度国際医療協力研究(腸 管感染症の発

症,診 断,治 療 および予防の研究)委 託費の補助 を受 けて

行 った ものであ る.

文 献

1) 島田俊雄, 荒川 英二, 竹 田美文: 新型 コレラ菌

Vibrio cholerae O139 Bengalに よるコレラの流

行二. 日細誌1995; 50: 1005-1017.

2) Shimada T, Nair GB, Deb BC, Albert MJ, Sack

RB, Takeda Y : Outbreak of Vibrio cholerae

non-O1 in India and Bangladesh. Lancet 1993;

341 : 137.

3) Sakazaki R, Shimada T : Vibrio species as

causative agents of food-borne infection. In:

Robinson RK, ed. Developments in food micro-

biology. Elsevier Applied Science Publishers,

1986 ; 123-151.

4) Kosako Y, Sakazaki R, Yoshizaki E : Yo-

kenella regensburgei gen. nov, sp. nov. A new

genus and species in the family Enterobacter-

iaceae. Jpn J Med Sci Biol 1984 ; 37 : 117-124.

5) 江 崎孝 行: DNA相 同性 試 験; マ イ ク ロ プ レ ー ト

ハ イ ブ リダイ ゼ ー シ ョ ン法.日 本放 線 菌 学 会編,

放線 菌 学 技術 叢 書2, 東京, 1992.

6) Shimada T, Arakawa E, Itoh K et al.:

Extended serotyping scheme for Vibrio choler-

ae. Curr Microbiol 1994 ; 28 : 175-178.

7) Shimada T, Arakawa E, Itoh K et al. : Two

strains of Vibrio cholerae non-O1 possessing

somatic (O) antigen factors in common with V.

cholerae serogroup O139 synonym "Bengal".

Curr Microbiol 1994 ; 29 : 331-333.

8) Miyagi K, Mastumoto Y, Hayashi K et al.:Cholera diagnosed in clinical laboratory byDNA hybridisation. Lancet 1992 ; 339 : 988-989.

9) Takeda T, Yuan P, Ogawa A et al. : Detec-tion of heat-stable enterotoxin in a choleratoxin gene-positive strain of Vibrio cholerae

O1 . FEMS Microbiol Lett1991; 80: 23-28.

10) 島 田 俊雄, 荒 川 英二, 伊 藤健 一 郎, 他: 所 謂"ホ

タル エ ビ"の 原 因 はル ミネ セ ン ス産 生性 のVibrio

cholerae non-O1で あ る. 日細 誌1995; 50: 863-

870.

11) Desmarchelier RM, Reichelt JL : A

phenotypic and genetic study of sucrose nonfer-menting strains of Vibrio mimicus and Vibriocholerae. Curr Microbiol 1984 ; 10 : 41-48.

12) Shimada T, Sakazaki R : R antigen of Vibriocholerae. Jpn J Med Biol 1973 ; 26 : 155-160.

13) Dalsgaard A, Albert MJ, Taylor DN et al.:Characterization of Vibrio cholerae non-01sero-groups obtained from an outbreak of diar-rhea in Lima, Peru. J Clin Microbiol 1994 ; 33:2715-2722.

14) 堤 英 明, 甫 立 八 洲, 大 高 道 也, 島 田俊雄: 入 国

下 痢 患 者 由 来 のVibrio cholerae non-O1に っ い

て. 感 染症 誌1995; 69: 637-641.

15) 山井 志 朗, 沖 津 忠 行, 勝 部 泰 次: 河 川 水 にお け る

Vibrio choleraeの 検 出状 況. 感 染症 誌1996; 70:

1234-1241.

16) 白石 祥 吾, 武 田浩 二, 多賀 賢 一郎, 平 田堅 司, 林

和, 本 田武 司: 輸 入 冷 凍 魚 貝 類 にお け るVibrio

choleraeの 汚 染状 況 と毒 性産 生 性 につ い て. 感 染

症 誌1996; 70: 175-1179.

17) 島 田俊 雄: ナ グ ビ ブ リオ. 総 合食 品安 全 事典 編 集

委員 会 編, 総 合 食 品安 全 事 典, 産 業 調 査 会事 典 出

版 セ ン ター, 東 京, 1994; 1009-1012.

18) 島 田俊 雄: 最近 注 目 され る感 染症, コ レ ラ. 臨床

科学1997; 33(9): (印刷 中).

感染症学雑誌 第71巻 第10号

Vibrio cholerae non-O1 non-O139の 血 清 型 1045

Distribution of Serogroups of Vibrio cholerae non-O1 non-O139 with

Specific Reference to Their Ability to Produce Cholera Toxin, and

Addition of Novel Serogroups

Shiro YAMAI1), Tadayuki OKITSU1), Toshio SHIMADA2) & Yasuji KATSUBE3)1)

Department of Bacteriology and Pathology, Kanagawa Prefectural Public

Health Laboratory2)Department of Enteric Infection 1, National Institute of Infectious Disease3) Laboratory of Veterinary Public Health, College of Bioresouce Sciences,

University of Nihon

A total of 1898 strains of Vibrio cholerae non-O1 non-O139, which had been collected

worldwide for the past 3 year period of 1994-1996, were serogrouped. The strains were also

examined for presence of cholera toxin (CT) gene (ctx) and NAG-ST gene, and strains whichcarried the ctx were further analyzed for their ability to produce CT. In addition, attempts were

made to establish novel serogroups for those serologically untypable strains.

Of those examined, 1,774 strains of V. cholerae non-O1 non-O139 was classified into 128

known serogroups while 50 strains were found to belong to R type, and the rest of the 74 strains

could not be serotyped. Distribution of the serogroups did not seem to correspond to either the

strains' geographic distribution or sources of isolation.Of those serologically untypable strains, 38 novel serogroups (O156-O193) were established

and added to our reference of V. cholerae antigenic schema. It was also found that antisera raisedagainst many V. cholerae strains included R antibodies. This indicates that any V. cholerae

antisera for diagnostic purpose should be absorbed with the reference R strains, CA385, before

use.

There were luminescence producing strains among those sucrose and VP reaction negativestrains. Subsequent DNA/DNA homology analysis revealed that they were identified as V.

cholerae. This points to a possibility that strains tentatively identified as Vibrio mimicus by

conventional biochemical tests may have included luminescent strains of V. cholerae. It is thus

highly recommended that strains in question should be tested for the luminescence production inorder to differentiate V. cholerae from V. mimicus.

Of those 1989 strains examined, 37 strains (ca. 2%) were found to produce CT. Interestingly,

CT producing strains were prevalent in serogroup O141 ; 10 strains out of 16 strains (63%) were

positive for CT. The evidence calls for a caution to possible occurrence of cholera-like diarrheacaused by V. cholerae O141 in the future.

平成9年10月20日