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M o U 可 酬 柑 博 問 調 鴻 藷 細 細
Confidential Page2
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO 25401リパスチゲミン
目次 H目次helliphellip H H H H H H H H H H H H H helliphellip H 一helliphellip hellip H -hellip H -helliphellip H -hellip 2
H略号一覧 H H H H H H H H H H H H H H -hellip H hellip H helliphellip H -hellip hellip H 3
2671 H毒性試験一覧表helliphellip H -hellip 4
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要 H H H 8
2673 トキシコキネティクスデータの概要 H H H H H H H H hellip H hellip H 9
267 4 毒性試験における原薬不純物 hellip -hellip hellip 13H H H H H H H H
2675 単回投与毒性試験 H H H H H H H H H -hellip H -helliphelliphelliphellip H -hellip H hellip H -hellip H H -helliphellip 15
H H H H H H 17 HhellipH-hellipH-hellip 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)2676
2677 HA 反復投与毒性試験helliphellip H H H H H H H H H H-hellip H hellip 19
2677 HB 反復投与毒性試験 H H H H H H H H H Hhellip H -helliphelliphelliphelliphellip H 23
2677 HC 反復投与毒性試験 H H H H 26
2677 H HD 反復投与毒性試験hellip H -hellip H H H H H H H H H hellip H -hellip H -hellip H -hellip H -hellip H hellip 29
2677 HE 反復投与毒性試験 H H -hellip 33
2677F 反復投与毒性試験helliphellip H helliphellip -hellipーhellip H helliphellip hellip -hellip 36H H H H H H H
2677 HG 反復投与毒性試験 H H H H H H H H H H- H H -helliphellip H -hellip H -helliphellip H -hellip 41
2677H 反復投与毒性試験 H hellip H -hellip H -hellip 47H H H H H H H H H H H
2677 H1 反復投与毒性試験日 H H H H H H H H H Hhelliphellip H -hellip helliphellip H 51
2677 H HJ 反復投与毒性試験日 H -hellip H H helliphellip 58
2677K 反復投与毒性試験 H -helliphelliphellip -一hellip H -hellip H hellip H hellip 60H H H H H H H H H
2678 HA In viか o遺伝毒性試験hellip H H H H H H H H -helliphellip H helliphelliphellip H -hellip hellip H hellip 63
2678 HB In viか o遺伝毒性試験hellip H H H H H H H H H H -hellip hellip H H H hellip 66
2678 HC In vitro遺伝毒性試験hellip H hellip 70
2678D In vitro遺伝毒性試験 -hellip H H H
Confidential Page 3
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
AUCO-2h
CO
Clh
Cmax
CMC
DNA
DMSO
GLP
MEM
NZW
S9
SD
TK
覧一品
隅一附一山
省略していない表現(英)
area under the金ugplasma (blood) concentration-time
curve (time 0 to 24h)
紅白 underthe drug plasma (blood) concentration-time C町 ve(time 0ω2h)
drug plasma (blood) concentration (tim巴0)
drug plasma (blood) concen仕組on(time lh)
maximal drug plasma (serumlblood) concentration
carboxymethylcel1ulose
deoxyribonucleic acid
dimethyl sulゐxid巳
Good Laboratory Practice
Minimum essential medium
New Zealand White
Sprague-Dawley
toxicokinetics
省略していない表現(日)
血紫(血液)中薬物濃度開時間曲線下面積
(0~24 時間)
血衆(血液)中薬物濃度時間曲線下面積
(0~2 時間)
血衆(血液)中薬物濃度 (0時間)
血紫(血液)中薬物濃度(1時間)
最高血衆(血液)中薬物濃度
カルボキシメチルセルロース
デオキシリボ核震を
ジメチルスルホキシド
医薬品の安全性に関する非臨床試験の実
施の基準
最小必須培地
ニュージーランドホワイト種
肝ミクロゾーム画分
Sprague-Dawley系
トキシコキネティクス
Confidential Page4 cγ0267毒性試験概要表 ENA71300NO25401リパスチグミン
2671 毒性試験一覧表
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 C1Dにおけ処理濃度 用 る記載箇所
単回投与毒性試験
マウス (CD1) 静脈内 単回 (雄)125313375 mgkg(雌)313375 適 サンド薬品日 [Tl] 423751 500 mgkg 本
イヌ(ピーグノレ) 経口 単回 031350 m gkg 適 日 [SBL 03幽 4231幽 2
本 32]
イヌ(ピーグル) 静脈内 単回 0150515 mgkg 適 Sandoz CH [27AIT厄] 42311
反復投与毒性試験
ラット (CD(SD)) 4週間 O(無処置) 0(溶媒u(雌) 15 (雄) j薗 -圃 開 84] 4232l
rz
50 mgkg日 日本E
猷
制
適
適
適
適
SandozUS [T2530] 4232-2ラット (CD(SD)) 4週間 o(溶媒)立並 1536 m gkgl日
SandozUS [T2679] 42323ラット (CD(SD)) 26週間 O(溶媒)生払 044 l45 mgkgl日
SandozUS
CH- [T2739] 42ふ2圃 4ラット (CD(SD)) 52週間 O(溶媒) 01往生11 18mglkg目
[341245] 42325日mglkgl52(溶媒)色~ラット (Wistar) 17日間42326
WJE
i
i J
口
口
口
耐
皮
付
皮
付
皮
付
口
経
経
経
矧
経
貼
経
貼
経
鮎
経
適
適
適
適
適
イヌ(ビグノレ)
イヌ(ビーグル)
イヌ(ビーグノレ)
イヌ(ビーグノレ)
ミニブPタ
(Gottingen)
ミニプタ (Go仙 1gen)
4週間 O(ラクトース) 011018025 mgkgl目
(ラクトース) 011ι坐 153 mglkg日
SandozUS [T-2604] 42327
SandozUS [T2641] 4232-8
SandozUS [T2723] 42329
SandozCH [405D] 4232-10
26週間
52週間 O(ラクトース) 0ムιι l5rarrl3mglkg目
2週間 (溶媒)生旦 075 mgkg日上肘
4週間 (プラセボ) 36108担金 mg日 d SandozCH [442P] 423211
[445P] 4232-124週間 O(プラセボ) 183672 (6箇所ローテーシ 適
ヨン) 72 (2箇所ロテーション群)mg日 4
S姐 doz
i
BミェブPタ 4週間 O(溶媒)062060 mg匂日 適 [645985] 4232-14
(Go仕ingen)
hellip -
CH
ミニブタ 26週間 O(プラセボ) 18並 (12箇所ロテーショ 適
ン群) J亘(6箇所ローテーション群)mgl日d
[17727] 423213 lsquo
(Gottingen) F
Confidential Page5
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
遺伝毒性試験
ネズミチフス菌 In vit70 3125~31250μgplate 適 CH 423311 Sandoz 仰at耐
チャイニーズハム In vitro 625~62500 開ImL 適 SandozCH [肝 2] 42331耐 2
スターV79細胞
ラット初代培養肝 In vitro 032~5000μgmL 適 SandozCH AIEE5 42331幽 3CfIJDS 細胞
チャイニーズハム In vitro 3125~3125 阿mL 適 SandozCH [Z17] 42331-4
スターV79細胞
ヒトリンパ球 In vitro 1593~2503μgmL 適 [146312 423315 1052]
マウス (CD-l) 経口 単回 3125 mgkg 適 S岨 dozCH [MK3 423321
がん原性試験
マウス (CD1) 経皮 日週間 o(無処置) 0(溶媒) 016生組 081 適 4目23411SPM06- (塗布) 161rarr121 mglkg日 b
マウス (CD1) 9899週間 050 kgl日 Franω [15151 423412適g075m 025)(溶媒0無処置)O(経皮
(塗布) TCS]
マウス (CD-l) 経口 8週間 g日61mgk304251 0840)(溶媒o 適 SandozUS [T2738] 423413
マウス (CD1) 経口 104週間 o(溶媒) 0(溶媒) 0250616m gkgl日 適 SandozUS [T2741] 42341-4
ラット (SD) 経口 gm11 401(溶媒)0(溶媒)o週間104 0 kg日 適 SandozUS [T2740] 423415
CTD267毒性試験概要衰
Confidential page 6
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量
処理濃度
GLP適
用
試験施設 c 試験番号 CTDにおけ
る記載笛所
生殖発生毒性試験
ラット (CD (SD)) 経口 雄交配 10
週間前~剖
検まで
雌交配前 2
O(溶媒) 01205511mgkg日 適 SandozUS [T2676] 423511
週間~妊娠
期間又は授
乳期間中
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 7~17
日
o(i容媒) 025081250 m gkg日 適
日本
[91150] 423521
ウサギ(NZW) 経口 妊娠 7~19
日
O(溶媒) 036109218 mgkg日 適 SandozUS [T幽 2620] 423522
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 17日~
分娩後 21日
O(溶媒) 019063188 mgkg日 適
日本
[91152] 42353-1
局所刺激性試験
皮膚刺激性 ウサギ(NZW)
ウサギ(NZW)
経皮
(貼付)
経皮
(貼付)
単回
28日間
O(プラセボ) 18時 (10 cm2パッチ)
O(無処置) 0(プラセボ) 18 mg日(10 cm2パ
ッチ)
適
適 -0061] Scotland
CH [643285]
4236-1
42362
その他の毒性試験
依存性 サル(アカゲ) 静脈内 自己投与試
験5週間
325ム10μgkg泊負lsion 適 SandozCH [PKF-
ZNSAA2] 423741
身体依存性
試験8週間
56 (2週間) 10 (2週間) 18 (4週間)
μgkginfusion
代謝物単
回投与毒性
マウス (CD聞 1) 静脈内 単回 NAP226-90
(雄)406080(雌)20406080 mgkg 適 サンド薬品
日本
[Tl] 423751
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page2
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO 25401リパスチゲミン
目次 H目次helliphellip H H H H H H H H H H H H H helliphellip H 一helliphellip hellip H -hellip H -helliphellip H -hellip 2
H略号一覧 H H H H H H H H H H H H H H -hellip H hellip H helliphellip H -hellip hellip H 3
2671 H毒性試験一覧表helliphellip H -hellip 4
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要 H H H 8
2673 トキシコキネティクスデータの概要 H H H H H H H H hellip H hellip H 9
267 4 毒性試験における原薬不純物 hellip -hellip hellip 13H H H H H H H H
2675 単回投与毒性試験 H H H H H H H H H -hellip H -helliphelliphelliphellip H -hellip H hellip H -hellip H H -helliphellip 15
H H H H H H 17 HhellipH-hellipH-hellip 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)2676
2677 HA 反復投与毒性試験helliphellip H H H H H H H H H H-hellip H hellip 19
2677 HB 反復投与毒性試験 H H H H H H H H H Hhellip H -helliphelliphelliphelliphellip H 23
2677 HC 反復投与毒性試験 H H H H 26
2677 H HD 反復投与毒性試験hellip H -hellip H H H H H H H H H hellip H -hellip H -hellip H -hellip H -hellip H hellip 29
2677 HE 反復投与毒性試験 H H -hellip 33
2677F 反復投与毒性試験helliphellip H helliphellip -hellipーhellip H helliphellip hellip -hellip 36H H H H H H H
2677 HG 反復投与毒性試験 H H H H H H H H H H- H H -helliphellip H -hellip H -helliphellip H -hellip 41
2677H 反復投与毒性試験 H hellip H -hellip H -hellip 47H H H H H H H H H H H
2677 H1 反復投与毒性試験日 H H H H H H H H H Hhelliphellip H -hellip helliphellip H 51
2677 H HJ 反復投与毒性試験日 H -hellip H H helliphellip 58
2677K 反復投与毒性試験 H -helliphelliphellip -一hellip H -hellip H hellip H hellip 60H H H H H H H H H
2678 HA In viか o遺伝毒性試験hellip H H H H H H H H -helliphellip H helliphelliphellip H -hellip hellip H hellip 63
2678 HB In viか o遺伝毒性試験hellip H H H H H H H H H H -hellip hellip H H H hellip 66
2678 HC In vitro遺伝毒性試験hellip H hellip 70
2678D In vitro遺伝毒性試験 -hellip H H H
Confidential Page 3
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
AUCO-2h
CO
Clh
Cmax
CMC
DNA
DMSO
GLP
MEM
NZW
S9
SD
TK
覧一品
隅一附一山
省略していない表現(英)
area under the金ugplasma (blood) concentration-time
curve (time 0 to 24h)
紅白 underthe drug plasma (blood) concentration-time C町 ve(time 0ω2h)
drug plasma (blood) concentration (tim巴0)
drug plasma (blood) concen仕組on(time lh)
maximal drug plasma (serumlblood) concentration
carboxymethylcel1ulose
deoxyribonucleic acid
dimethyl sulゐxid巳
Good Laboratory Practice
Minimum essential medium
New Zealand White
Sprague-Dawley
toxicokinetics
省略していない表現(日)
血紫(血液)中薬物濃度開時間曲線下面積
(0~24 時間)
血衆(血液)中薬物濃度時間曲線下面積
(0~2 時間)
血衆(血液)中薬物濃度 (0時間)
血紫(血液)中薬物濃度(1時間)
最高血衆(血液)中薬物濃度
カルボキシメチルセルロース
デオキシリボ核震を
ジメチルスルホキシド
医薬品の安全性に関する非臨床試験の実
施の基準
最小必須培地
ニュージーランドホワイト種
肝ミクロゾーム画分
Sprague-Dawley系
トキシコキネティクス
Confidential Page4 cγ0267毒性試験概要表 ENA71300NO25401リパスチグミン
2671 毒性試験一覧表
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 C1Dにおけ処理濃度 用 る記載箇所
単回投与毒性試験
マウス (CD1) 静脈内 単回 (雄)125313375 mgkg(雌)313375 適 サンド薬品日 [Tl] 423751 500 mgkg 本
イヌ(ピーグノレ) 経口 単回 031350 m gkg 適 日 [SBL 03幽 4231幽 2
本 32]
イヌ(ピーグル) 静脈内 単回 0150515 mgkg 適 Sandoz CH [27AIT厄] 42311
反復投与毒性試験
ラット (CD(SD)) 4週間 O(無処置) 0(溶媒u(雌) 15 (雄) j薗 -圃 開 84] 4232l
rz
50 mgkg日 日本E
猷
制
適
適
適
適
SandozUS [T2530] 4232-2ラット (CD(SD)) 4週間 o(溶媒)立並 1536 m gkgl日
SandozUS [T2679] 42323ラット (CD(SD)) 26週間 O(溶媒)生払 044 l45 mgkgl日
SandozUS
CH- [T2739] 42ふ2圃 4ラット (CD(SD)) 52週間 O(溶媒) 01往生11 18mglkg目
[341245] 42325日mglkgl52(溶媒)色~ラット (Wistar) 17日間42326
WJE
i
i J
口
口
口
耐
皮
付
皮
付
皮
付
口
経
経
経
矧
経
貼
経
貼
経
鮎
経
適
適
適
適
適
イヌ(ビグノレ)
イヌ(ビーグル)
イヌ(ビーグノレ)
イヌ(ビーグノレ)
ミニブPタ
(Gottingen)
ミニプタ (Go仙 1gen)
4週間 O(ラクトース) 011018025 mgkgl目
(ラクトース) 011ι坐 153 mglkg日
SandozUS [T-2604] 42327
SandozUS [T2641] 4232-8
SandozUS [T2723] 42329
SandozCH [405D] 4232-10
26週間
52週間 O(ラクトース) 0ムιι l5rarrl3mglkg目
2週間 (溶媒)生旦 075 mgkg日上肘
4週間 (プラセボ) 36108担金 mg日 d SandozCH [442P] 423211
[445P] 4232-124週間 O(プラセボ) 183672 (6箇所ローテーシ 適
ヨン) 72 (2箇所ロテーション群)mg日 4
S姐 doz
i
BミェブPタ 4週間 O(溶媒)062060 mg匂日 適 [645985] 4232-14
(Go仕ingen)
hellip -
CH
ミニブタ 26週間 O(プラセボ) 18並 (12箇所ロテーショ 適
ン群) J亘(6箇所ローテーション群)mgl日d
[17727] 423213 lsquo
(Gottingen) F
Confidential Page5
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
遺伝毒性試験
ネズミチフス菌 In vit70 3125~31250μgplate 適 CH 423311 Sandoz 仰at耐
チャイニーズハム In vitro 625~62500 開ImL 適 SandozCH [肝 2] 42331耐 2
スターV79細胞
ラット初代培養肝 In vitro 032~5000μgmL 適 SandozCH AIEE5 42331幽 3CfIJDS 細胞
チャイニーズハム In vitro 3125~3125 阿mL 適 SandozCH [Z17] 42331-4
スターV79細胞
ヒトリンパ球 In vitro 1593~2503μgmL 適 [146312 423315 1052]
マウス (CD-l) 経口 単回 3125 mgkg 適 S岨 dozCH [MK3 423321
がん原性試験
マウス (CD1) 経皮 日週間 o(無処置) 0(溶媒) 016生組 081 適 4目23411SPM06- (塗布) 161rarr121 mglkg日 b
マウス (CD1) 9899週間 050 kgl日 Franω [15151 423412適g075m 025)(溶媒0無処置)O(経皮
(塗布) TCS]
マウス (CD-l) 経口 8週間 g日61mgk304251 0840)(溶媒o 適 SandozUS [T2738] 423413
マウス (CD1) 経口 104週間 o(溶媒) 0(溶媒) 0250616m gkgl日 適 SandozUS [T2741] 42341-4
ラット (SD) 経口 gm11 401(溶媒)0(溶媒)o週間104 0 kg日 適 SandozUS [T2740] 423415
CTD267毒性試験概要衰
Confidential page 6
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量
処理濃度
GLP適
用
試験施設 c 試験番号 CTDにおけ
る記載笛所
生殖発生毒性試験
ラット (CD (SD)) 経口 雄交配 10
週間前~剖
検まで
雌交配前 2
O(溶媒) 01205511mgkg日 適 SandozUS [T2676] 423511
週間~妊娠
期間又は授
乳期間中
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 7~17
日
o(i容媒) 025081250 m gkg日 適
日本
[91150] 423521
ウサギ(NZW) 経口 妊娠 7~19
日
O(溶媒) 036109218 mgkg日 適 SandozUS [T幽 2620] 423522
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 17日~
分娩後 21日
O(溶媒) 019063188 mgkg日 適
日本
[91152] 42353-1
局所刺激性試験
皮膚刺激性 ウサギ(NZW)
ウサギ(NZW)
経皮
(貼付)
経皮
(貼付)
単回
28日間
O(プラセボ) 18時 (10 cm2パッチ)
O(無処置) 0(プラセボ) 18 mg日(10 cm2パ
ッチ)
適
適 -0061] Scotland
CH [643285]
4236-1
42362
その他の毒性試験
依存性 サル(アカゲ) 静脈内 自己投与試
験5週間
325ム10μgkg泊負lsion 適 SandozCH [PKF-
ZNSAA2] 423741
身体依存性
試験8週間
56 (2週間) 10 (2週間) 18 (4週間)
μgkginfusion
代謝物単
回投与毒性
マウス (CD聞 1) 静脈内 単回 NAP226-90
(雄)406080(雌)20406080 mgkg 適 サンド薬品
日本
[Tl] 423751
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 3
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
AUCO-2h
CO
Clh
Cmax
CMC
DNA
DMSO
GLP
MEM
NZW
S9
SD
TK
覧一品
隅一附一山
省略していない表現(英)
area under the金ugplasma (blood) concentration-time
curve (time 0 to 24h)
紅白 underthe drug plasma (blood) concentration-time C町 ve(time 0ω2h)
drug plasma (blood) concentration (tim巴0)
drug plasma (blood) concen仕組on(time lh)
maximal drug plasma (serumlblood) concentration
carboxymethylcel1ulose
deoxyribonucleic acid
dimethyl sulゐxid巳
Good Laboratory Practice
Minimum essential medium
New Zealand White
Sprague-Dawley
toxicokinetics
省略していない表現(日)
血紫(血液)中薬物濃度開時間曲線下面積
(0~24 時間)
血衆(血液)中薬物濃度時間曲線下面積
(0~2 時間)
血衆(血液)中薬物濃度 (0時間)
血紫(血液)中薬物濃度(1時間)
最高血衆(血液)中薬物濃度
カルボキシメチルセルロース
デオキシリボ核震を
ジメチルスルホキシド
医薬品の安全性に関する非臨床試験の実
施の基準
最小必須培地
ニュージーランドホワイト種
肝ミクロゾーム画分
Sprague-Dawley系
トキシコキネティクス
Confidential Page4 cγ0267毒性試験概要表 ENA71300NO25401リパスチグミン
2671 毒性試験一覧表
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 C1Dにおけ処理濃度 用 る記載箇所
単回投与毒性試験
マウス (CD1) 静脈内 単回 (雄)125313375 mgkg(雌)313375 適 サンド薬品日 [Tl] 423751 500 mgkg 本
イヌ(ピーグノレ) 経口 単回 031350 m gkg 適 日 [SBL 03幽 4231幽 2
本 32]
イヌ(ピーグル) 静脈内 単回 0150515 mgkg 適 Sandoz CH [27AIT厄] 42311
反復投与毒性試験
ラット (CD(SD)) 4週間 O(無処置) 0(溶媒u(雌) 15 (雄) j薗 -圃 開 84] 4232l
rz
50 mgkg日 日本E
猷
制
適
適
適
適
SandozUS [T2530] 4232-2ラット (CD(SD)) 4週間 o(溶媒)立並 1536 m gkgl日
SandozUS [T2679] 42323ラット (CD(SD)) 26週間 O(溶媒)生払 044 l45 mgkgl日
SandozUS
CH- [T2739] 42ふ2圃 4ラット (CD(SD)) 52週間 O(溶媒) 01往生11 18mglkg目
[341245] 42325日mglkgl52(溶媒)色~ラット (Wistar) 17日間42326
WJE
i
i J
口
口
口
耐
皮
付
皮
付
皮
付
口
経
経
経
矧
経
貼
経
貼
経
鮎
経
適
適
適
適
適
イヌ(ビグノレ)
イヌ(ビーグル)
イヌ(ビーグノレ)
イヌ(ビーグノレ)
ミニブPタ
(Gottingen)
ミニプタ (Go仙 1gen)
4週間 O(ラクトース) 011018025 mgkgl目
(ラクトース) 011ι坐 153 mglkg日
SandozUS [T-2604] 42327
SandozUS [T2641] 4232-8
SandozUS [T2723] 42329
SandozCH [405D] 4232-10
26週間
52週間 O(ラクトース) 0ムιι l5rarrl3mglkg目
2週間 (溶媒)生旦 075 mgkg日上肘
4週間 (プラセボ) 36108担金 mg日 d SandozCH [442P] 423211
[445P] 4232-124週間 O(プラセボ) 183672 (6箇所ローテーシ 適
ヨン) 72 (2箇所ロテーション群)mg日 4
S姐 doz
i
BミェブPタ 4週間 O(溶媒)062060 mg匂日 適 [645985] 4232-14
(Go仕ingen)
hellip -
CH
ミニブタ 26週間 O(プラセボ) 18並 (12箇所ロテーショ 適
ン群) J亘(6箇所ローテーション群)mgl日d
[17727] 423213 lsquo
(Gottingen) F
Confidential Page5
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
遺伝毒性試験
ネズミチフス菌 In vit70 3125~31250μgplate 適 CH 423311 Sandoz 仰at耐
チャイニーズハム In vitro 625~62500 開ImL 適 SandozCH [肝 2] 42331耐 2
スターV79細胞
ラット初代培養肝 In vitro 032~5000μgmL 適 SandozCH AIEE5 42331幽 3CfIJDS 細胞
チャイニーズハム In vitro 3125~3125 阿mL 適 SandozCH [Z17] 42331-4
スターV79細胞
ヒトリンパ球 In vitro 1593~2503μgmL 適 [146312 423315 1052]
マウス (CD-l) 経口 単回 3125 mgkg 適 S岨 dozCH [MK3 423321
がん原性試験
マウス (CD1) 経皮 日週間 o(無処置) 0(溶媒) 016生組 081 適 4目23411SPM06- (塗布) 161rarr121 mglkg日 b
マウス (CD1) 9899週間 050 kgl日 Franω [15151 423412適g075m 025)(溶媒0無処置)O(経皮
(塗布) TCS]
マウス (CD-l) 経口 8週間 g日61mgk304251 0840)(溶媒o 適 SandozUS [T2738] 423413
マウス (CD1) 経口 104週間 o(溶媒) 0(溶媒) 0250616m gkgl日 適 SandozUS [T2741] 42341-4
ラット (SD) 経口 gm11 401(溶媒)0(溶媒)o週間104 0 kg日 適 SandozUS [T2740] 423415
CTD267毒性試験概要衰
Confidential page 6
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量
処理濃度
GLP適
用
試験施設 c 試験番号 CTDにおけ
る記載笛所
生殖発生毒性試験
ラット (CD (SD)) 経口 雄交配 10
週間前~剖
検まで
雌交配前 2
O(溶媒) 01205511mgkg日 適 SandozUS [T2676] 423511
週間~妊娠
期間又は授
乳期間中
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 7~17
日
o(i容媒) 025081250 m gkg日 適
日本
[91150] 423521
ウサギ(NZW) 経口 妊娠 7~19
日
O(溶媒) 036109218 mgkg日 適 SandozUS [T幽 2620] 423522
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 17日~
分娩後 21日
O(溶媒) 019063188 mgkg日 適
日本
[91152] 42353-1
局所刺激性試験
皮膚刺激性 ウサギ(NZW)
ウサギ(NZW)
経皮
(貼付)
経皮
(貼付)
単回
28日間
O(プラセボ) 18時 (10 cm2パッチ)
O(無処置) 0(プラセボ) 18 mg日(10 cm2パ
ッチ)
適
適 -0061] Scotland
CH [643285]
4236-1
42362
その他の毒性試験
依存性 サル(アカゲ) 静脈内 自己投与試
験5週間
325ム10μgkg泊負lsion 適 SandozCH [PKF-
ZNSAA2] 423741
身体依存性
試験8週間
56 (2週間) 10 (2週間) 18 (4週間)
μgkginfusion
代謝物単
回投与毒性
マウス (CD聞 1) 静脈内 単回 NAP226-90
(雄)406080(雌)20406080 mgkg 適 サンド薬品
日本
[Tl] 423751
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page4 cγ0267毒性試験概要表 ENA71300NO25401リパスチグミン
2671 毒性試験一覧表
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 C1Dにおけ処理濃度 用 る記載箇所
単回投与毒性試験
マウス (CD1) 静脈内 単回 (雄)125313375 mgkg(雌)313375 適 サンド薬品日 [Tl] 423751 500 mgkg 本
イヌ(ピーグノレ) 経口 単回 031350 m gkg 適 日 [SBL 03幽 4231幽 2
本 32]
イヌ(ピーグル) 静脈内 単回 0150515 mgkg 適 Sandoz CH [27AIT厄] 42311
反復投与毒性試験
ラット (CD(SD)) 4週間 O(無処置) 0(溶媒u(雌) 15 (雄) j薗 -圃 開 84] 4232l
rz
50 mgkg日 日本E
猷
制
適
適
適
適
SandozUS [T2530] 4232-2ラット (CD(SD)) 4週間 o(溶媒)立並 1536 m gkgl日
SandozUS [T2679] 42323ラット (CD(SD)) 26週間 O(溶媒)生払 044 l45 mgkgl日
SandozUS
CH- [T2739] 42ふ2圃 4ラット (CD(SD)) 52週間 O(溶媒) 01往生11 18mglkg目
[341245] 42325日mglkgl52(溶媒)色~ラット (Wistar) 17日間42326
WJE
i
i J
口
口
口
耐
皮
付
皮
付
皮
付
口
経
経
経
矧
経
貼
経
貼
経
鮎
経
適
適
適
適
適
イヌ(ビグノレ)
イヌ(ビーグル)
イヌ(ビーグノレ)
イヌ(ビーグノレ)
ミニブPタ
(Gottingen)
ミニプタ (Go仙 1gen)
4週間 O(ラクトース) 011018025 mgkgl目
(ラクトース) 011ι坐 153 mglkg日
SandozUS [T-2604] 42327
SandozUS [T2641] 4232-8
SandozUS [T2723] 42329
SandozCH [405D] 4232-10
26週間
52週間 O(ラクトース) 0ムιι l5rarrl3mglkg目
2週間 (溶媒)生旦 075 mgkg日上肘
4週間 (プラセボ) 36108担金 mg日 d SandozCH [442P] 423211
[445P] 4232-124週間 O(プラセボ) 183672 (6箇所ローテーシ 適
ヨン) 72 (2箇所ロテーション群)mg日 4
S姐 doz
i
BミェブPタ 4週間 O(溶媒)062060 mg匂日 適 [645985] 4232-14
(Go仕ingen)
hellip -
CH
ミニブタ 26週間 O(プラセボ) 18並 (12箇所ロテーショ 適
ン群) J亘(6箇所ローテーション群)mgl日d
[17727] 423213 lsquo
(Gottingen) F
Confidential Page5
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
遺伝毒性試験
ネズミチフス菌 In vit70 3125~31250μgplate 適 CH 423311 Sandoz 仰at耐
チャイニーズハム In vitro 625~62500 開ImL 適 SandozCH [肝 2] 42331耐 2
スターV79細胞
ラット初代培養肝 In vitro 032~5000μgmL 適 SandozCH AIEE5 42331幽 3CfIJDS 細胞
チャイニーズハム In vitro 3125~3125 阿mL 適 SandozCH [Z17] 42331-4
スターV79細胞
ヒトリンパ球 In vitro 1593~2503μgmL 適 [146312 423315 1052]
マウス (CD-l) 経口 単回 3125 mgkg 適 S岨 dozCH [MK3 423321
がん原性試験
マウス (CD1) 経皮 日週間 o(無処置) 0(溶媒) 016生組 081 適 4目23411SPM06- (塗布) 161rarr121 mglkg日 b
マウス (CD1) 9899週間 050 kgl日 Franω [15151 423412適g075m 025)(溶媒0無処置)O(経皮
(塗布) TCS]
マウス (CD-l) 経口 8週間 g日61mgk304251 0840)(溶媒o 適 SandozUS [T2738] 423413
マウス (CD1) 経口 104週間 o(溶媒) 0(溶媒) 0250616m gkgl日 適 SandozUS [T2741] 42341-4
ラット (SD) 経口 gm11 401(溶媒)0(溶媒)o週間104 0 kg日 適 SandozUS [T2740] 423415
CTD267毒性試験概要衰
Confidential page 6
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量
処理濃度
GLP適
用
試験施設 c 試験番号 CTDにおけ
る記載笛所
生殖発生毒性試験
ラット (CD (SD)) 経口 雄交配 10
週間前~剖
検まで
雌交配前 2
O(溶媒) 01205511mgkg日 適 SandozUS [T2676] 423511
週間~妊娠
期間又は授
乳期間中
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 7~17
日
o(i容媒) 025081250 m gkg日 適
日本
[91150] 423521
ウサギ(NZW) 経口 妊娠 7~19
日
O(溶媒) 036109218 mgkg日 適 SandozUS [T幽 2620] 423522
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 17日~
分娩後 21日
O(溶媒) 019063188 mgkg日 適
日本
[91152] 42353-1
局所刺激性試験
皮膚刺激性 ウサギ(NZW)
ウサギ(NZW)
経皮
(貼付)
経皮
(貼付)
単回
28日間
O(プラセボ) 18時 (10 cm2パッチ)
O(無処置) 0(プラセボ) 18 mg日(10 cm2パ
ッチ)
適
適 -0061] Scotland
CH [643285]
4236-1
42362
その他の毒性試験
依存性 サル(アカゲ) 静脈内 自己投与試
験5週間
325ム10μgkg泊負lsion 適 SandozCH [PKF-
ZNSAA2] 423741
身体依存性
試験8週間
56 (2週間) 10 (2週間) 18 (4週間)
μgkginfusion
代謝物単
回投与毒性
マウス (CD聞 1) 静脈内 単回 NAP226-90
(雄)406080(雌)20406080 mgkg 適 サンド薬品
日本
[Tl] 423751
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page5
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
遺伝毒性試験
ネズミチフス菌 In vit70 3125~31250μgplate 適 CH 423311 Sandoz 仰at耐
チャイニーズハム In vitro 625~62500 開ImL 適 SandozCH [肝 2] 42331耐 2
スターV79細胞
ラット初代培養肝 In vitro 032~5000μgmL 適 SandozCH AIEE5 42331幽 3CfIJDS 細胞
チャイニーズハム In vitro 3125~3125 阿mL 適 SandozCH [Z17] 42331-4
スターV79細胞
ヒトリンパ球 In vitro 1593~2503μgmL 適 [146312 423315 1052]
マウス (CD-l) 経口 単回 3125 mgkg 適 S岨 dozCH [MK3 423321
がん原性試験
マウス (CD1) 経皮 日週間 o(無処置) 0(溶媒) 016生組 081 適 4目23411SPM06- (塗布) 161rarr121 mglkg日 b
マウス (CD1) 9899週間 050 kgl日 Franω [15151 423412適g075m 025)(溶媒0無処置)O(経皮
(塗布) TCS]
マウス (CD-l) 経口 8週間 g日61mgk304251 0840)(溶媒o 適 SandozUS [T2738] 423413
マウス (CD1) 経口 104週間 o(溶媒) 0(溶媒) 0250616m gkgl日 適 SandozUS [T2741] 42341-4
ラット (SD) 経口 gm11 401(溶媒)0(溶媒)o週間104 0 kg日 適 SandozUS [T2740] 423415
CTD267毒性試験概要衰
Confidential page 6
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量
処理濃度
GLP適
用
試験施設 c 試験番号 CTDにおけ
る記載笛所
生殖発生毒性試験
ラット (CD (SD)) 経口 雄交配 10
週間前~剖
検まで
雌交配前 2
O(溶媒) 01205511mgkg日 適 SandozUS [T2676] 423511
週間~妊娠
期間又は授
乳期間中
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 7~17
日
o(i容媒) 025081250 m gkg日 適
日本
[91150] 423521
ウサギ(NZW) 経口 妊娠 7~19
日
O(溶媒) 036109218 mgkg日 適 SandozUS [T幽 2620] 423522
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 17日~
分娩後 21日
O(溶媒) 019063188 mgkg日 適
日本
[91152] 42353-1
局所刺激性試験
皮膚刺激性 ウサギ(NZW)
ウサギ(NZW)
経皮
(貼付)
経皮
(貼付)
単回
28日間
O(プラセボ) 18時 (10 cm2パッチ)
O(無処置) 0(プラセボ) 18 mg日(10 cm2パ
ッチ)
適
適 -0061] Scotland
CH [643285]
4236-1
42362
その他の毒性試験
依存性 サル(アカゲ) 静脈内 自己投与試
験5週間
325ム10μgkg泊負lsion 適 SandozCH [PKF-
ZNSAA2] 423741
身体依存性
試験8週間
56 (2週間) 10 (2週間) 18 (4週間)
μgkginfusion
代謝物単
回投与毒性
マウス (CD聞 1) 静脈内 単回 NAP226-90
(雄)406080(雌)20406080 mgkg 適 サンド薬品
日本
[Tl] 423751
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
CTD267毒性試験概要衰
Confidential page 6
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量
処理濃度
GLP適
用
試験施設 c 試験番号 CTDにおけ
る記載笛所
生殖発生毒性試験
ラット (CD (SD)) 経口 雄交配 10
週間前~剖
検まで
雌交配前 2
O(溶媒) 01205511mgkg日 適 SandozUS [T2676] 423511
週間~妊娠
期間又は授
乳期間中
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 7~17
日
o(i容媒) 025081250 m gkg日 適
日本
[91150] 423521
ウサギ(NZW) 経口 妊娠 7~19
日
O(溶媒) 036109218 mgkg日 適 SandozUS [T幽 2620] 423522
ラット (CD (SD)) 経口 妊娠 17日~
分娩後 21日
O(溶媒) 019063188 mgkg日 適
日本
[91152] 42353-1
局所刺激性試験
皮膚刺激性 ウサギ(NZW)
ウサギ(NZW)
経皮
(貼付)
経皮
(貼付)
単回
28日間
O(プラセボ) 18時 (10 cm2パッチ)
O(無処置) 0(プラセボ) 18 mg日(10 cm2パ
ッチ)
適
適 -0061] Scotland
CH [643285]
4236-1
42362
その他の毒性試験
依存性 サル(アカゲ) 静脈内 自己投与試
験5週間
325ム10μgkg泊負lsion 適 SandozCH [PKF-
ZNSAA2] 423741
身体依存性
試験8週間
56 (2週間) 10 (2週間) 18 (4週間)
μgkginfusion
代謝物単
回投与毒性
マウス (CD聞 1) 静脈内 単回 NAP226-90
(雄)406080(雌)20406080 mgkg 適 サンド薬品
日本
[Tl] 423751
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 7
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO薗 25401リパスチゲミン
試験の種類 動物種試験系 投与方法 投与期間 投与量 a GLP 適 試験施設 c 試験番号 CTDにおけ処理濃度 用 る記載箇所
その他の毒性試験(続き)
代謝物復 ネズミチフス菌 In vih NAP226-90 250~25000μgplate 適 Sandoz [M世 4237780 CH
帰突然変異
代謝物染 ヒトリンパ球 In vitro NAP226-90 300~2000 附此 適 _UK 0378] 423779色体異常
皮膚感作性 モルモット 経皮 感作 3日 O(プラセボ) 9珂 (5cm2パッチ) 適 一 0009] 423771
(目前ller法) (Dunkin Hartley) (貼付) 惹起回 Netherland
光毒性 モルモット 経皮 単回 O(プラセボ) 18 mg (10 cm2パッチ) 適 SPM08 423772 (DunkinH副 ley) (貼付) (30分) 11368]
措抗作用 イヌ(ビーグル) 経口 単回 リパスチグミン094 1 88 m gkg 非 SandozCH [19 VIID] 42377-3
(アトロピ アトロビン01 mgkg (参考資料)
ンは皮下あ
るいは静脈
内)
新添加物の安全性評価
単回投与 ラット 経皮 単回 |添加物1|100mgkg 適 CH [029711] 42377-4 (Wis加) (塗布)
皮膚刺激性 ウサギ 経皮 単回 |添加物1|505mL 適 CH [032130] 42377幽 5 (NZW) (貼付) (4時間)
光感作性 モルモット 経皮 感作2~31添加物11 感作 5000101 mL 適 CH [625015] 42377-6bmGOHl) (塗布) 日間隔で 5 惹起101525500010025 mLcm2
回
遺伝毒性 In silico 非 NovartisCH 9359] 42377-7
特に明記しない限り反復投与毒性試験の下線は無毒性量を示す
日に換算mgkgとして31ggmL日)の濃度で投与したため動物の体重を075mから4BmL日(投与0mg及び10502510を50μL個体あたり
ンド薬品=現ノパルティスファーマ US=United StatesCH=Swi包erlandUK=United Kingdom
d全身に対する無毒性量を示す
E新薬承認情報提供時に置き換え』
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
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品
園
山
qUEa守一
lsquo四
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3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 8 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2672 トキシコキネティクストキシコキネティクス試験の概要試験の種類 試験系 投与方法 投与量 GLP適用 試験番号 CTDにおける記載箆所
4週間反復投与毒性試験 ラット 経皮(塗布) 51550 mgkg日 適 ~84] 42321
4週間反復投与毒性試験 ラット 経口 0361536 mgkg日 適 [T-2530] 42322
26週間反復投与毒性試験 ラット 経口 011044145 mgkg日 適 [T2679] 42323
52週間反復投与毒性試験 ラット 経口 010 8 mgkg日4 11 1 適 [T2739] 4232-4
17日間反復投与毒性試験 ラット 静脈内 0525m gkg日 適 [341245] 4232542326
4週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011018025 m gkg日 適 [T2604] 42327
26週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 011044153 m gkg日 適 [T2641] 4232-8
52週間反復投与毒性試験 イヌ 経口 020目415rarr13mgkg日 適 [T2723] 42329
2週間反復投与毒性試験 イヌ 静脈内 015075 mgkg日 適 [405D] 4232幽 10
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 36108216 mg日 適 [442P] 423211
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 183672(6箇所ローテーション) 72 適 [445P] 42目3212
(2箇所ローテーション)mg日
26逓問反復投与毒性試験 ミニブタ 経皮(貼付) 1836 (12箇所ローテーション) 36 (6 適 [17727] 423213
箇所日ローテーション)mg日
4週間反復投与毒性試験 ミニブタ 経口 062060 mgkg日 適 [645985] 4232-14
9899週間反復投与がん原性試験 マウス 経皮(塗布) 025050075 m gkg13 適 [15151 TCS] 42341-2
104週間反復投与がん原性試験 マウス 経口 0250616 mg均日 適 [T2741] 42341-4
104週間反復投与がん原性試験 ラット 経口 0 g日gkm11 401 適 [T2740] 42341-5 自
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
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ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
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ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
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CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
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ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
025
CTD267毒性試験概要表
Confidential Page 9
ENA713DONO-2540リパスチグミン
2673 トキシコキネティクスデータの概要
最終投与時の AUCO-24(nghmL)
投与量
(mgl均 f日)
011
015
018
02
雄
マウス
雌 雄
ラット
雌
イヌ
雄 雌
167145 d 257I 30 d
401 f 333 f
747 1 487 1
139
雄
ミニブタ
雌
ヒト
a 315 106 a 8431 3301
03 1533 k
04 257
044 206 d 179 d
05 365 a 25目 6 a 838 c 700 c
075 562 a 426 a 3183f 1945 f
13 1271
153 1022 d 650 d
18 69 h 71 h
2 20 28J 15 45J
25 5559 c 6038 c
36 202 g177 h 233 g168 h
4 4840 43 60
5 784b 997 b
6 692 J 244J
72 322 h624 h 430 h646 h
108 932 g 762 g
15 332 b 410 b
216 2033 g 2244 g
50 1380 b 1380 b
Confidential Page10
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
岨ミニブタの経皮投与における投与量は [423211-442円及び[42ふ212445PJは体重 10kg[4232-1317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで四
換算した [4232-6醐 341245]は AUCO2hの値で示した
a [42341215151 TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験 b[4232 I ~84]ラット 4週間反復経皮投与毒性試験
c [4232-6 日間反復静脈内投与毒性試験17ラット341245] d[4232-8T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(τKIま投与 23週に実施)
bull [4232-9-T2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
f[42 週間反復静脈内投与毒性試験2イヌ-405D]1O2-3
g [423211-442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験 h[423212-445P]ミニブPタ4週間反復経皮投与毒性試験
1[42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験 J [423214645985]ミニブFタ4週間経口投与毒性試験
k[53311国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ 1[4232-7下2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
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ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
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ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
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CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
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CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
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ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 11
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
最終投与時の Cmax(ngmL)
投与量ホ マウス ラット イヌ ミニブタ ヒト
(mglkgl日) 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌
01 025 m
011 160125d 303124d
015 545 f 541 f
018 6031 403 1
02 68
025 203 a 117 bull 5371 3631
03 827 k
047 m04 123 bull
044 121 d 148 d
05 618 a 352 bull 1681 c 1385 c
06 06J 05J
075 597 a 516 a 358目 8f 2458 f
m11 094
13 380 e
153 560 d
18 191 m 34 h 37 h
2 15 19J 1228J
C25 10476 c 11577
36 11 g96 h 12 g87 h
4 2924 29 34
5 76 b 158 b
6 278J 144J
72 164h413h 237 h391 h
55 g 43 g
15 547 b 947 b
108
216 117 g 137 g
50 226 b 287 b
d336
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
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ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page12
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
ミニブタの経皮投与における投与量は [4232-11-442P]及び[423212445P]は体重 10kg[42321317727]は体重 9kgで換算しヒトに対する投与量は体重 60kgで
換算した [4232-6341245]はCOの値で [4232-4T2739]はClhの値で示した
a [42341215151TCS]マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
c [4232-6-341245]ラット 17日間反復静脈内投与毒性試験
e [4232-9-下2723]イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 50週に実施)
g [423211442P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
[ [42321317727]ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
k[5331-1-国内 1101試験]ヒト薬物動態パラメータ
m [4232-4-T-2739]ラット 52週間反復経口投与毒性試験
(置は投与 51週に実施)
b[42 3 2-1~84]ラット 4 週間反復倣投与毒性試験
d[42ふ28T2641]イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 23週に実施)
f[4ユ321O-405D]イヌ 2週間反復静脈内投与毒性試験
h[4232-12-445P]ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
J[423214645985]ミニブタ 4週間経口投与毒性試験
1[42327T2604]イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
(TKは投与 3週に実施)
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential
CTD267毒性試験概要表
2674 毒性試験における原薬不純物
原薬 パッチ剤 純度() 試験の種類
パッチ番号 パッチ番号
規格 9801020
88902 998~999 ラット 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 26週間反復経口投与毒性試験
イヌ 4週間反復経口投与毒性試験
イヌ 26週間反復経口投与毒性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた染色体異常試験
ラット初代培養肝細胞を用いた不定期 DNA合成試験
ラット受胎能及び二世代生殖毒性試験
ウサギ匪胎児発生に関する経口投与試験
88903 998 ネズミチフス菌を用いた変異原性試験
チャイニーズハムスターV79細胞を用いた遺伝子突然変異試験
マウス骨髄細胞を用いた経口投与小核試験
90904 997~1003 イヌ単回経口投与毒性試験
ラット 52週間反復経口投与毒性試験
イヌ 52週間反復経口投与毒性試験
マウス 8週間反復経口投与用量設定試験
マウス 104週間反復経口投与がん原性試験
ラット 104退問反復経口投与がん原性試験
ラット腔胎児発生に関する経口投与試験
ラット出生前及び出生後の発生に関する経口投与試験
サル依存性試験
マウス代謝物単回静脈内投与試験
94702 1011 マウス 13週間反復経皮投与用量設定試験
Page 13
ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
試験番号 CTDにおける
記載箇所
[T2530] 4232-2
[T2679] 42323
[T2604] 42327
[T2641] 4232圃 8
[Z17] 423314
[田CIUDSA5 42331-3
[T同 2676] 42351-1
[T2620] 42352剛 2
[MutB北t15 423311
[HV2] 423312
[MK3 42332-1
[SBL 0332] 42312
[T2739] 42324
[T2723] 42329
[T2738] 42341帽 3
[T2741] 423414
[T2740] 423415
[91150] 423521
[91152] 42353-1
[pKF ZNSAA2] 423741
[Tl] 423751欄
SPM0690337] 42341-1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
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号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
CTD267毒性試験概要表
原薬 パッチ剤
パッチ番号 パッチ番号
規格
95703
X135 0595 821094055
X087 0496 821100046
X0080196
96603
96912
82206302
822061102
純度()
980102ρ
1011
1005
1023
1009
99目7
999
1022
991
Confidential
試験の種類
ヒトリンパ球を用いた染色体異常試験
ミニブタ 4週間反復経皮投与毒性試験
ミニブPタ4週間反復経皮投与忍容性試験
モルモット光毒性試験
ウサギ 28日間反復経皮投与皮膚刺激性試験
ミニブタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブFタ 26週間反復経皮投与毒性試験
ミニブタ 4週間反復経口投与毒性試験
ラット 4週間経皮投与毒性試験
マウス 9899週間反復経皮投与がん原性試験
ウサギ単回経皮投与皮膚刺激性試験
モルモット皮膚感作性試験
Page 14
ENA713DONO2540リバスチゲ長ミン
試験番号 C1Dにおける
記載衝所
[1463121052] 423315
[442P] 4232-11
[445P] 423212
SPM08111368] 4237721
[643285] 42362
[17727] 423213
4232-1
[17727] 4232-13
[645985] 423 2-14
m 84] [15151 TCS] 423412
0061] 4236-1
0009] 4237711
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
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CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 15
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
市一種一統
ーリ一物系
忠一動
弓4-
-口二訂一与法
当一投方
験一試一性一毒一投一与一投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 C1Dにお
動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載(mgkg) 群 (mgkg) (mgkg) 箇所
125 雄 5 125 313 雄375m肉全例が死亡呼吸困難横臥位挙尾振戦 適 [Tl] 42375-1マウス 静脈
CD-l 内 313 雌 5 (雄) 313 (雄) 375
375 (雌) (雌)(雄) 3目 13 375 500
(雌)
間代性痘筆流涙
313 mgIkg群で 2例が死亡呼吸困難呼吸音異常挙尾振
戦間代性痘撃流誕流j戻眼険下垂眼球退色
125 m gkg以上の群で不規則呼吸自発運動低下腹臥位
雌ラ 00mglkg群で全例が死亡横臥位間代性痘鐘立毛
375 mgkg群で 1例が死亡立毛眼険下垂
313 m gkg以上の群で不規則呼吸呼吸困難自発運動低下腹
臥位挙尾振戦流誕流涙
313 mgkgで限験下垂
体重全群で一過t生に減少
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 16
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401 リ I~スチグミン
2675 単回投与毒性試験(続き)
動物種 投与 投与量 性及び 最大 概略の 特記すべき所見 GLP 試験 CTDにお
系統 方法 動物数 非致死量 致死量 適用 番号 ける記載 (mglkg) 群 (mgkg) (mgkg) 鏑所
イヌ 経口 03 雄 2 13 50 死亡 5目mgkg群の 1例が投与後 1時間に他の 1例が投与翌日 適 [SBL03 42312
ビーグ 13 に死亡 32]
ノレ 50 一般状態03 mgkg群の 1例で流誕他の 1例で幅l吐
13mglkg群で粘液便又は下痢
13mgkg以上の群で曜吐自発運動低下振戦口腔粘膜蒼白
流i延尿失禁光に対する瞳孔反射の遅れ横臥位又は腹臥位
紅門周囲の汚れ
50 mgkgで流涙頻呼吸あえぎ呼吸縮瞳又は散瞳起立不
能鎮静昏睡チアノーゼ間代性痘撃血便
摂餌量13mgkg群で投与日のみ減少 50 mgkg群で投与日に
摂餌量なし
摂水量50mglkg群で投与日の摂水なし
体重観察期間の前半 13mglkgで体重は低めに推移
剖検生存例では変化なし投与翌日の死亡例で血液凝固不全
左心室心内膜下出血左肺前葉に暗赤色斑点結腸及び直腸粘膜
に暗赤色化投与当日の死亡例で牌臓の退色肝臓の腫大及び陪
赤色化十二指腸粘膜赤色化
病理組織学的検査投与翌Rの死亡例で左心室心内膜下及び心筋
の出血肺のうっ血肺胞の出血及び水腫結腸粘膜の出血投
与当日の死亡例で牌臓の細胞充実性の減少及び褐色色素沈着肝
臓でうつ血及び肝細胞の微細空胞化十二指腸粘膜のうっ血
イヌ 静脈 015 雄各 1 15 gt15 死亡なし 適 [27AITID] 42311
ピグ
11ノ
内 05
15
(015 05)
雌 l
(15)
一般状態05 mglkg以上の群で頻呼吸振戦
15 mgkg群で000吐流誕赤色鼻汁下痢皮膚赤色化運動失
調筋振戦鎮静チアノーゼ努力呼吸横臥位体勢異常
心拍数増加へそグロビンヘマトクリット赤血球増加
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
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CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page17
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2676 反復投与毒性試験(重要な試験以外の試験)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形 物数群 適用 記載箇所
態)
マウス 経皮(塗布) 13週間 O(無処置 (無処置 040 mgkg 経皮投与がん原性試験の用量設定試験 適 SPMO 423411
CD1 溶媒) 016 溶媒) 081 日 死亡なし 040 mgkg日群の雄 1例 161rarr
690337]
040081 161rarr 121 mgkg日群の雄 l例及び雌2例を切迫殺処161rarr 121 mgkg 分121 m gkg 日雄 16日a 雌 16 一般状態1 61 mgkg日群で重度な振戦及び自
発運動低下 016
040 mgkg 日雄 10
雌 10
マウス 経口 8週間 o(溶媒) 04 雄 5雌 5 30 mgkg
CD-l 081524 日30 61 m gkg日
1a=O
61rarr121 mgkg日群自発運動低下立0 118
毛腹臥位円背位過剰なあくび
体重摂餌量血液生化学的検査血液学的検
査尿検査臓器重量剖検病理組織学的検
査にリパスチグミン投与の影響なし
経口投与がん原性試験の用量設定試験 適 [T2738J 42341-3
死亡対照群(雄川堆 0)04 mgkg日(雄 0雌
1)08 mgkg日(雄 1雌 0)24mg勾日(雄 0雌
2)30 mgkg日(雄 0雌 1)61mg同日(雄 3雌 4)
一般状態08 mgkg日以上で泌尿器周囲の汚
れ振戦痘撃自発運動低下
15mgkg日以上で流誕努力呼吸頻呼吸腹
臥位円背位運動失調
24mgkg日以上で流涙異常歩特
30及び 61mgkg日で下痢及び冷触感
24mgkg日以上で体重増加抑制及び摂餌量減少
試験終了時の体重剖検臓器重量病理組織
学的検査に影響なし
02505及び10(初回投与後に 075mgmLに減量)mgmL日で個体あたり 50μLを塗布したことからマウスの体重を 31gとして mgkg日に換算した
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 18
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン圃
26胴 76 反復投与毒性試験(重要な試験以外の訴験続き)
動物種 投与方法(溶 投与期間 投与量 性別及び動 無毒性量 特記すべき所見 GLP 試験番号 CTDにおける
系統 媒投与形態) 物数群 適用 記載箇所
ラット 静脈内 17日間 O(溶媒) 雄 5雌 5 05 mgkg 一般状態25 mgkg日群で鎮静痘筆振 適 [341245] 42325
Crl Wist 05 日 戦腹臥位運動失調立毛流誕 4232-6 2日5m gkg
25 mgkg日投与群で軽度の体重増加抑制及び
摂餌量の減少
病理車出哉学的検査対照群及び 25mgkg日投
与群で尾の投与部位の皮下に血管周囲血管の
炎症コラーゲンの変性繊維増殖血管炎
血管壊死被毛皮膚における小肉芽腫血
栓肺における血管周囲血管炎
イヌ(ビ 静脈内 2週間 (溶媒) 雄 2雌 2 015 mgkg 一般状態075 m gkg日群で流誕日匝吐筋披 適 [405D] 4232-10
ーグノレ) 015 S 戦繊維東撃縮下痢運動失調あるいは075 m gkg 鎮静固縮直腸からの出血異常体位横臥日 位(雌)
075 m gkg臼群で体重減少
剖検対照群を含むすべての群で投与部位の皮
下に出血
075 mgkg日群の雌 1例の結腸媛膜に赤色の硬
結
病理組織学的検査075 m gkg日群の雄 1例の
肝臓でリポフスチンを含む黄褐色の沈着物雌
1例の結腸の筋層で多巣性の変性及び線維血管
性の肉芽組織他の雌 1例で結腸において剖検
所見と関連した線維血管性の肉芽紙織及び出血
を伴う多巣uarr生の小さな衆膜下結節筋層周囲に
おける炎症綿胞及び線維芽細胞の浸潤を伴う軽
度の変性
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page19
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号 84][m2677A 反復投与毒性試験報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験
動物種系統ラットCD(SD)
投与開始週齢 8週齢
噌月日(J唯)1初回投与日 噌月日(雄)1投与期間 4週間 CTDにおける記載箇所 4ユ321
休薬期間 2週間 GLP適用適
投与方法経皮(塗布) 溶媒投与形態50エタノール
特記事項無処置対照群の動物は剃毛のみ実施した
無毒性量雄15 mgkg日雌5 mgkg日
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
トキシコキネティクス用動 4 4 4 4 4 4
物数
リパスチグミン
AUCO24h (nghmL)
投与 1 B NC NC NC NC 510士 168 649士256 206土665 375土127 911土132 1350土226
投与 28日 NC NC NC NC 784土142 997土328 332土784 410土139 1380土226 1380土155
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 647土218 140士696 230土110 611土260 114土255 240土617
投与 28日 NC NC NC NC 763土173 158土895 547土230 947土445 226士 832 287土587
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1日 NC NC NC NC 233土 628 459土990 860土220 224士623 446土123 838土229
投与 28日 NC NC NC NC 259士421 645土157 175土257 325土503 563士 138 940土195
NC=実施せず平均値土標準偏差で示す
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 20
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号[~841
投与量 (mglkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
NAP226-90
Cmax (ngmL)
投与 1日 NC NC NC NC 227土 085 800土292 793 176 265土 100 384土 827 838土 317
投与 28日 NC NC NC NC 210士034 638土 081 204土 421 417士 125 530士 171 101土 268
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O
darr体重() 投与4日 +5目5 310 g -48
幽darr摂餌最 a() 投与 1~4 日 +131 199 g 111料
一般状態 筋主差縮 11 16
振戦 4
流誕 6
流涙 O O 2
眼科学的検査
血液学的検査
uarr血小板数(104μL) 1053 1051 1204ホ
血液生化学的検査
darrアルブミン (gdL) 249 242 227
尿検査
darr尿量 (mν16h) 175 89 124 122 107 73榊
ょ特記すべき所見なし NC=実施せず=投与期間終了時溶媒対照群は群平均値を示す投与群は溶媒対照群との差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKru skalWallis + Dnnnett test pく005叩く001(溶媒対照との比較)
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 21
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および2週間回復試験 試 験 番 号 凹84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 維10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
臓器重量 a()
uarr唾液腺 44 0429g 287
暫検
肝臓 尾状葉乳頭突起黄褐色硬化 O O 尾状葉乳頭突起赤褐色化 O
尾状葉乳頭突小型化 O 2 左葉黄褐色化 分葉異常 O
尾状葉乳頭突起暗褐色結節 O
尾状葉乳頭突起暗赤色塊
胸腔 横隔膜ヘルニア
皮膚
頚部湿潤 投与部位痴皮形成 2
精巣 両側性軟化 NA NA NA NA NA
--特記すべき所見なし NA司直用せず==投与期間終了時溶媒対照群は群の平均値を示す数値は絶対重量の差をで示す統計学的有意差は実測値に基づく(差のではない)一元配置分散分析あるいはKruskalWallis +Dunnett test 料pく001 (溶媒対照との比較)
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 22
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677A 反復投与毒性試験(続き)
報告書表題SDZ ENA 713 BASEのラットにおける 4週間反復経皮投与毒性試験および 2週間回復試験 試験番号 m84]
投与量 (mgkg日) 無処置対照 溶媒対照 5 15 50
動物数 雄16 雌16 雄16 雌16 雄 10 雌 10 雄16 雌16 雄16 雌16
特記すべき所見
剖検
腎臓
右腎臓黄褐色塊 左あるいは右腎皮質嚢胞
病理組織学的検査
顎下腺
腺房細胞空胞化 3 +++ 2+μ十 5 +++ 7 2+
+1
O
++++++
腺房細胞肥大 3++ 2++ 6 +++++
uarr線状部好酸性頼粒 1+十 1++ 4++ 回復性試験における評価動物数 6 6 6 6 6 6 6 6
病理組織学的検査
顎下腺 腺房細胞空胞化 1+ 1+ NA NA NC NC 1++
-=特記すべき所見なし NA=適用せず NC=50 mgkg日投与群で回復性がみられらたため病理組織学的検査は実施せず +=ごく軽微 ++=軽度件+=中等度
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 23
CTD267毒性試験概要衰 ENA713DONO2540リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity study in th巳 raton 212713(ENA 713) 試験番号LT2530]
動物種系統ラットCD(SD) 間 CTDにおける記載箇所4232-2
投与開始週齢雄約 6週雌約 7週
投与期間 4週
休薬期間なし
投与開始日 1年日 投与方法経口 溶媒投与形態ICMC02 Tween 80+ラクトース
GLP適用適
特記事項一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用の動物も含めて評価した
(被験物質の 10倍量)
無毒性量036 mgkg日
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雄10 (6) 雄10 雌10 雄10 (15 b) 雌10 (6)
トキシコキネティクス
評価動物数 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6 雄 0 雌 0 雄 6 雌 6
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 I週 NC 023 l043 NC 030 l042
投与 3週 NC 021士 033 NC 527土 499
NAP226-90
血中濃度 (ngmL)
投与 I選 NC 1559土346 NC 5872土1607
投与3週 NC 1521士182 NC 12313土4135
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 (投与過誤)
岨 開darr体重 a仇) 407 g 238 g -128 29 -101 76 -177 -109
一一特記すべき所見なし血中濃度は雌雄の平均値土標準誤差で示す NC=実施せず=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群はその平均値との警を()で
示す b=トキシコキネティクスに用いた 6例以外の動物は薬物動態試験に転用した
1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 24
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity蜘 dyin the rat on 212-713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 036 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
特記すべき所見
darr摂餌量 b() 181 g 125 g ー188 -168事
一般状態
自発運動低下 十 + + + + +
運動失調 十 + 十 + + +
正向反射の消失 + + + +
振戦 + + + +
腹臥位 + +
眼球突出 + +
流誕 + + + +
紅涙 + +
舌なめずり + +
努力呼吸 + +
あえぎ呼吸 + +
被毛の汚れ + 十
泌尿器周囲の被毛黄色湿潤 + +
血管収縮 + +
下痢 + +
軟便 + +
眼科学的検査
ー=特記すべき所見なし +=発現あり b=投与期間終了時対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではなし) Duncans new multiple range加 t叩く005
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
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ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 25 CTD267毒性試験概要褒 ENA713DONO2540リパスチグミン
26778 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four week oral toxicity s仰のinthe rat on 212個 713 (ENA 713) 試験番号[T2530]
投与量 (mgkgl日 O(対照一 1群) O 36 (2群) 15 (3群) 36 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄10 (0) 雌10 (0) 雄10 (6) 雌10 (6) 雄 10 雌10 雄10 (15) 雌10 (6)
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgldL) 96 45 49
darr血紫コリンエステラーゼ(lUL) 1435 1010
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 2127 1554
(μmoν minlρ uarr筋肉アセチルコリンエステラーゼ 0644 0865 0880ホ
moVm(μ 泊Jg)
尿検査
darrpH 78 69
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
ι newmultiple range test p組Dunc特記すべき所見なし 005く
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 26
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン開
26圃 77C 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間26週間 CTDにおける記載箇所4232-3
投与開始日
投与開始週齢約 5~6 週 休薬期間なし
投与方法経口1年月日
GLP適用適
溶媒投与形態1CMC02 Tween 80 +ラクトー
ス(被験物質の 10倍量)
特記事項トキシコキネティクス用に 011及び145mgkg日群で雌雄各 6例を用いた一般状態体重及び摂餌量はトキシコキネティクス用動物も含めて評価した
無毒性量雄 011mgkg日雌 011mgkg日未満
投与量 (mgkg日) (対照 1群) 011σ群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ngmL)
投与 1週 NC NC ND ND NC NC ND ND
投与 3週 NC NC ND ND NC NC ND 167 (1)
投与 7週 NC NC ND ND NC NC ND 051 1 55
191 (3) bull
投与 17週 NC NC ND ND NC NC ND 064 1 04
114149
152 (5) bull
投与 25週 NC NC ND ND NC NC ND 034095
244 (3) bull
ND=検出限界未満 NC=実施せず=数値は検出可能であった動物の個別値を括弧内は検出可能であった動物数を示す
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page27
CTD267毒性試験概要義 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T聞 2679]
投与量 (mgkgl日) O(対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
NAP22690
血中濃度 (ngmL)
投与 l週 NC NC 197士051 264士093 NC NC 264土 580 333土 103
投与3週 NC NC 29ヲ士 099 348土074 NC NC 390土300 323士 880
投与 7週 NC NC 432土196 590土320 NC NC 372土114 538土141
投与 17週 NC NC 417土078 488土040 NC NC 577土156 609土101
投与25週 NC NC 367士087 445土173 NC NC 475土110 600士229
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数b O (1) 2 (1) 2
darr体墓 C() 710 g 431 g -102 -102 -152 -271
darr摂餌量 C() 146 g -123
一般状態 d
渡臥位 19 18 運動失調 8 21 21 筋筆縮 3 15 21 21 振戦 3 8 21 21 接触性過敏 3 10 11 12 接触性聴覚性過敏 6 12 頭部振戦 19 19紅涙 2 l 5 13
山特記すべき所見なし NC=実施せず血中濃度は平均値土標準偏差で示す b=括弧内の数値はサテライト群の死亡数 C=投与期間終了時対照群は平均値を示す
投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) ~サテライト群動物を含tp Duncans new multiple range test 叩く00ラ
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CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 28
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン
2677C 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study in the rat on ENA 713 (212713) 試験番号[T2679]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 145 (4群)
動物数(トキシコキネティクス用) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6) 雄15 (0) 雌15 (0) 雄15 (6) 雌15 (6)
自発運動低下 10 8 21 21自発運動尤進 O 5 5 15 14 15 19 自発運動低下克進(混合) 3 13 15 16 過剰な身づくろい 5 6 15 15 20 20 指岐み 2 12 15 21 20 舌なめずり 2 9 15 15 21 21 そしゃく行動 6 15 15 21 21 流誕 5 2 21 19 蒼白 7 12 21
眼科学的検査
血液学的検査
血液生化学的検査
小脳アセチルコリンエステラゼ 26916 26389 30699 29391 30735 30138本
(μmoνminlg)
darr肝臓アセチルコリンエステラーゼ 0940 2552 2092 0799 1774申
(μmoνminlg)
uarr筋肉アセチルコリンヱステラーゼ 0552 0526 0707 0762
(μmoνminlg)
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
--特記すべき所見なし Duncan習newmultiple range test ヤく005
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 29
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 One year oral (gavage) toxicity study in the rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
動物種系統ラットCD(SD) 投与期間52週
投与開始週齢約 7週 休薬期間 8週間
間 CTDにおける記載箇所42324
溶媒投与形態ICMC
特記事項なし
無毒性量04mgkg S
投与開始日 1年日 投与方法経口
GLP適用適
投与量 (mgkg日) (対照) 01リ 04 11 18
動物数
トキシコキネティクス
リパスチグミン
血中濃度 (ng四L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
NAP22后90
血中濃度 (ng細L)
投与 1週
投与 12週
投与 25週
投与 38週
投与 51週
雄25 雌25
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
NC
雄25 l雄25
013士032
059士018
006土 013
035土 077
025土 050
508土 085
924土189
943土 219
8目09土 228
771土163
雄25 雌25
019土042
054士024
041土 064
021士032
047土 063
1376土 361
2589士750
2131士336
1508士448
2348土 495
雄25 雌25
029 019
128土061
081土 035
121土 052
094土099
3148土 783
4640土 590
4592土 1127
6425土 866
5055土 1114
雄25 雌25
050土 029
264土137
117土 049
518土 398
191土107
4290土 1102
7350土2118
6310士1301
10127士2877
6885土 1881
NC日実施せず血中濃度は投与 1時間後の値をl峰雄の合計の平均値士標準偏差で示す
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 30
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase 試験番号[T2739]
投与量 (mgkg日) (対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 a 9 (1) 4 3 3 5 3 (1) 2 4
darruarr体重 b ()
投与 17週 618 g 348 g +66 -58 -80 -118 -147
投与 35週 742 g 402g +112 -82キ -97 -166 -189
投与 51適 816 g 448 g +132 ー100 -123lsquo -196 -230
投与党週 802 g 451 g + 122 -94ホ -144 -19 1 -253
darruarr摂餌量 b ()
投与 17週 205 g 131 g + 153 -88 -08
投与 35週 225 g 155 g +103 ー156 -103
投与 51週 247 g 159 g +113 明 279 -132
投与党週 205 g 149 g -13 -166 -87
一般状態
白発運動克進 1 6 3 3 9 6 10 3 4
自発運動低下 2 3 4 2 l 3 21 24 25 25
自発運動低下允進 O 3 3 3 4 5
(混合)
運動失調 5 11 20
振戦 4 2 7 24 25 25 25
筋雄縮震え 4 2 2 6 10 18 24 25
--特記すべき所見なし a=全死亡例数(休薬期間中の死亡例数) b=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づ
く(ではない) Duncans new multipyene range test うく005
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential
CTD267毒性訴験概要表
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phase
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
眼球突出 3 2 3
過剰な身づくろい 2 2
腹臥位 流挺 2 4 2 2 そしゃく行動 1 2 10 21
指暁み 2 4
跳躍 3 5
舌なめずり 2 5 8
流j戻 努力呼吸 2 2 呼吸促迫 2
被毛粗剛 被毛湿潤 1 1
泌尿器周囲の被毛の汚れ 3 2
軟使 2
根科学的検査
四=特記すべき所見なし
Page 31
ENA713DONO25401リパスチグミン
試験番号[T2739]
11 18
雄25 雌25 雄25 雌25
11 3 20
3 11 6 8
3 5 17 15
10 16 24 2ラ
25 25 25 25
9 15 14 15
1 2
20 23 25 25
2
2 8 2
2 4 12 7 2 2 3
10 7 20 9 7 13 7
5 10
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 32
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
26770 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral (gavage) toxicity study inthe rat on ENA 713 with recovery phas巴 試験番号[T欄 2739]
投与量 (mgkg日) O(対照) 01 04 11 18
動物数 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25 雄25 雌25
血液学的検査
血液生化学的検査
darrトリグリセリド (mgdL)
投与4週 84 82 80 68 99 63
投与 8週 101 113 94 62 91 66
投与 13週 157 171 138 97事 132 99
投与 26週 194 180 201 189 137 147
投与 39週 204 199 190 138 137 109
投与党週 223 309 197 107 128 135
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
回復性の評価評価動物数 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5
体重 a()投与 60週 748 g 513 g +187ホ +26 -242 1
摂餌量 a() 投与 59週 220 g 181 g
トリグリセリド (mgdL) 352 435
投与 60週
--特記すべき所見なし a=対照群は平均値を示す投与群は対照群との差を()で示す統計学的有意差は実測値に基づく(ではない) Duncan s new multiple renge test 叩く005
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 33
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験報告書の表題Four week oral toxicity s旬 dyin the dog on 212幽 713(ENA 713) 試験番号LT2604]
動物種系統イヌピーグル 投与期間 4週間 C1Dにおける記載箇所4232-7
GLP適用適投与開始月齢約 7~9 ヵ月 休薬期間なし
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)投与開始日 1年月日
特記事項なし
無毒性量025 mダkg日
投与量 (mgkg日) (対照 l群) 011 (2群) 018 (3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(ngh叫)
投与 1週 ND ND 183 1015 243土127 907士204 513士196 963士218 527土 055
投与 3週 ND ND 167 1038 257土133 747土 435 487土155 843土 201 330 1192
Cmax (ngmL)
投与 l週 ND ND 217 1050 220 1125 713土163 400土148 637土186 617士040
投与 3週 ND ND 160士046 303土167 603土 232 403土 247 537 1349 363 1274
NAP226-90
AUCO24h(nghmL)
投与 1週 ND ND 1687土119 1710士583 3683土371 3003士263 4870土215 4467土394
投与 3週 ND ND 1880士142 2067土560 4367士623 3407土348 5183土750 4653土569
Cmax (ng岨L)
投与 1過 ND ND 740土122 700 1316 1180士269 1010 1475 1463土580 1757士150
投与 3週 ND ND 713土093 870土182 1260士370 863士470 1263土512 1437士427
平均値土標準偏差で示す ND=検出限界来満
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 34
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リ1yenスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Fourwe味 oral句xicitystudy in the dog on 212713 (ENA 713) 試験番号ー [T2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群 011(2群) 018(3群) 025 (4群)
動物数 雄 3 雌3 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数 O 体重
摂餌量
一般状態(雌雄合計)
流j延投与 1週
投与 2週
投与 3週
投与 4週
身体検査
眼科学的検査
心電図
6
6
4
3
2
2特記すべき所見なし身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射置き直し反射突伸反射
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 35
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO2540リパスチグミン
2677E 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Four明暗oraltoxicity蜘 dyin the dog on 212713(ENA 713) 試験番号[下2604]
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群)bullbull 雄3
一025 (4群)
雄 3 i雄 3 雄3 雌3動物数 雌3
血液学的検査
血液生化学的検査
尿検査
臓器重量
剖検所見
病理組織学的検査
=特記すべき所見なし
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 36
CTD267毒性試験概要表 ENA713DIONO25401リパスチグミン
2677F 反復投与毒性試験報告書の表題Twenty-six week oral toxicity s旬dy inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T剛 2641]
動物種系統イヌビーグル
投与開始月齢約 10ヵ月
投与開始日 1年月日
投与期間26週間 C1Dにおける記載箇所4232-8
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
特記事項なし
無毒性量 044mgkgl日
投与量 (mglkgl日) (対照一 l群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄目 3 雌 3 雄3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh1mL)
投与 1遡 ND ND 427土150 494士427 1730土112 1773土 1230 12696 l4514 9840土3440
投与 3週 ND ND 277士105 368土 238 2123士 1072 1769土 1035 14689 l3419 9326士 2628
投与 7週 ND ND 479土443 351士 293 2270土 778 1433土 533 11136土 1121 6198士 1446
投与 16週 ND ND 再 1021土 398 1205土113 4918土 1670 4402土2215
投与 23週 ND ND 447 l258 297士 202 2059土116 1791土 693 10220土 4440 6496土4823
Cmax (ngmL)
投与 1週 ND ND 382土191 422土 315 764 l069 1525土 1028 10083士 6617 7860 l3736
投与 3週 ND ND 321土127 264土146 1465土 1580 1674土 1287 13997土 4392 6117 l5003
投与 7週 ND ND 368土 352 319土 203 1497土456 1193土 086 6317土 1217 3337士2276
投与 16適 ND ND 370土161 1144土 284 2790士 295 2953 l433
投与 23週 ND ND 253土 051 243土202 1210土 720 1476土462 5597士 6057 3630士 3052
平均値土標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 37
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題 Tw官nty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkgl日 O(対照 -1群 011ο群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄3 雌 3 雄 3 雌3 雄3 雌3 雄3 雌 3
NAP226-90
AUCO24h (nghmL)
投与 1週 ND ND 1609土149 2280土 433 8256 1193 602 10753 42523土 8930 47131土 9798
投与 3週 ND ND 1501土 063 1858土 360 8306土 2847 9137土 305 33817士8418 29454士6010
投与 7週 ND ND 1392土 680 1558土104 8911士 1097 8842 706 25745士 1473 21506土 1822
投与 16週 岸 5312士2106 6512士 1699 14595土 1230 14081土 6201
投与 23週 ND ND 1557土 671 1806士750 7656土 1204 7456土 1111 24830土 3803 20789土 4938
Cmax(ngl叫)
投与 1週 トID ND 825士154 753土121 1910土 516 3593士645 11103土 6589 14100土 5632
投与 3週 ND ND 743土193 674土 056 2390土 1273 3190土 606 10713土 2980 8873土 4327
投与 7週 ND ND 430土121 618土 027 2847土 586 3013土 090 7157士774 5357 1383
投与 16週 1151士857 2747土 1145 3723土 873 4090土 1352
投与 23週 ND ND 552土 335 654士265 2043士587 2923土 391 5707土 3141 5687ま 2288
平均値plusmn標準偏差 分析中に測定サンプルを損失 ND=検出限界未満
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
----
Confidential Page 38
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO圃 2540リパスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week ora1toxicity study inthe dog on 212-713 (ENA 713) 町一一一拍
試 I--雌
11
一
品
園
山
qUEa守一
lsquo四
T酬
3一
ll圃
3-
号-一 3
K0aT
---A-2av-
~IF
s Hn-
lsquo崎
J
投与量 (mgkg日 O(対照一 1群) 011 (2群) 044σ群)
動物数 雄目 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雌3
特記すべき所見
死亡又は切迫殺処分動物数
体重体g)
投与前
darr投与 1週
投与 8週
投与 26週
体重増加量 (kg)投与前~投与 26週
摂餌最 (g)
投与前
darr投与 1週
投与 3週
投与 26週
110
111
121
133
23
339
329
335
298
O
89 98 81
90 96 7目6
94 101 85
92 99 87
03 01 06
327 340 327
304 246 195
333 332 314
327 344 334
一般状態(雌雄合計)
運動失調
振戦
流涙 a
自発運動低下
自発運動尤進
3 (343)
0 4 6
5 6
5 (370) 5 (253) 6 (756)
0 4 6
0 2
0 5後肢起立岡難 0痩せ 3
=特記すべき所見なしら発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 39
CTD267毒性訴験概要表 ENA713DONO2540リパスチゲミン幽
2677F 反復投与毒性誌験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713(ENA 713) 試験番号[T2641]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
動物数 雄 3 雌 3 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 3 雌 3
空幅吐 4
H匝吐 a 5 (20) 6 (28) 5 (39) 6 (349)
流誕 1 6 6
粘膜充血 き 6 粘膜蒼白赤色化 4 努力呼吸 6呼吸数増加 I 4 6 呼吸時の胸部不規則音 5
ラッセル音 2被毛の汚れ 1 6
軟便 a 6 (36) 5 (78)
下痢
6 (218) 6 (195)
a 3 (6) 4 (20) 5 (134) 6 (587)
受け皿上の粘液物質 3 2 4
身体検査
眼科学的検査
心電図
--特記すべき所見なし開発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)身体検査心拍数呼吸数直腸温膝蓋反射立ち直り反射痛覚反射瞳孔反射霞き直し反射突伸反射
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 40
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチゲミン
2677F 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題Twenty-six week oral toxicity study inthe dog on 212713 (ENA 713) 試験番号 [T2641]
投与量 (mgkg日)
動物数
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血柴中コリンエステラーゼ但JIL)
投与 5週
投与 9週
投与 13週
投与 18週
投与 26週
darr肝臓コリンヱステラーゼ (μmolming)
尿検査
臓器重量
剖検所見
小腸媛膜に多巣性の円盤状の紫斑
大腸紫膜に多巣性の円盤状の紫斑
病理組織学的検査
小腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
大腸多巣性の出血を伴った肉芽組織
(対照一1群) 011 (2群) 044 (3群) 153 (4群)
雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄3 雌3 雄 3 雄 3
1531 1566 1123 1016 882 1021
1510 1586 1091本 994 836 1024キ
1783 1897 1301 1457 956 1163
1483 1462 1073 1013 815 1025ホ
1600 1597 1146 1079 915 1111
10452 10433 7475 6144 745ヲ
1 (++)
O 1 (++)
--特記すべき所見なし ++=中等度 Duncans new multiple range test pく005
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 41 CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677G 反復投与毒性試験報告書の表題One year ora1toxicity s旬dy inthe dog on ENA 713 試験番号[T2723]
動物種系統イヌビーグル 投与期間52週間 CTDにおける記載箇所4232-9
投与開始月齢 12~13 ヵ月 休薬期間なし GLP適用適
投与開始日1~年日 投与方法経口 溶媒投与形態ラクトース(ゼラチンカプセル)
無毒性量04mglkg日
投与量 (mgkg日) (対照一 I群) 02 (2群) 04 (3群) 1ヲrarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h (ngh加 L) 投与 1週 114土 337 ()
投与 24週 1087土 353
投与 50週 1271土 507
Cm田 (ng叫) 投与 1週 605土 327的
投与 24週 5409土 3028
投与 50適 3803土 2288
NAP226-90
AUCO-24h (ngh此) 投与 1週 4520 1800 (め
投与 24週 ND 545土 146 1085士 495 3085士 915
投与 50週 ND 579土80 1687土854 4438土1785
ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値土標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値 =1 5 m gkg日投与の雄 2例で死亡及び切迫殺例がみられ投与 4日以降13
mg同日に減量した死亡切迫殺例で下痢努力呼吸小腸重積肺出血肺炎腸管の筋変性などがみられた雄 2例を追加し 13mgkg日で 51週投与した
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity s旬dyin the dog on ENA 713
投与量 (mgkgj日) 0(対照 1群)
動物数 雄 4 雌 4
NAP226-90
Cmax(ng叫) 投与 1週 mmm
投与 24週
投与 50週
特記すべき所見 死亡及び切迫殺処分動物数
体主義 (kg)
投与前 128 90
darr投与 1週 127 89
darr投与 2週 126 90
投与 3週 128 89
投与 26週 134 98
投与 52週 137 106
摂餌量(g)
投与前 346 338
darr投与 l週 322 330
投与 2週 332 331
投与 3週 331 3 l3
投与 26週 346 328
投与 52週 319 322
Confideniial Page 42
ENA713DONO-2540 リ I~スチゲミン
試験番号[T2723]
02(2群) 04(3群) 15rarr13(4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌町 4 雄 4 雌 4
1696士 1115 2580土 612 9930土 5520(め
1130土 389 3593士1533 7166土 1829
1380土 493 5040 3940 6583土2812
0
119 109
105 99
111 94
112 96
122 109
126 119
323 313 329 237
299 268 251 96
326 321 337 243
347 267
剛 欄 350 335 343 316
347 301 342 326
ょ特記すべき所見なし ND=検出限界未満雌雄をあわせた平均値士標準偏差 =15mgkg日を投与した時の値包13mgkg日に減量したときの死亡及び切迫殺処
分動物数を示す Duncan s new multiple range test pく005
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 43
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO醐 25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号LT2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 1群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
一般状態
運動失調 4 4
振戦 2 2 4 4 4 4
流j戻 3 3 4 3 4 4
自発運動低下 4 4 4 自発運動充進 4 3 4 4 2 4
H匝吐 a 4 (70) 4 (24) 4 (85) 4 (90) 4 (63) 4 (81) 4 (244) 4 (291) 空岨吐 3 4 日匝気 O 4 4 流誕 3 2 4 4 4 4 舌なめずり 2 2 4 4 4
強模充血 1 4 4 4 3 4 4 口内粘膜充血 2 3 4 努力呼吸 2 2 呼吸数増加 1 2 2 4 4 咳 2 4 4 ラッセル音 2 O 4 4 暢鳴 1 3 2
皮膚発赤 a 3 (52) 4 (1045) 4 (891) 3 (1020) 4 (1562) 3 (463) 4 (1510) 4 (1020)
軟便 a 3 (54) 3 (25) 4 (55) 4 (125) 4 (218) 4 (44) 4 (200) 4 (125)
a=発現例数(投与期間中にみられた全動物の発現回数)
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 44
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照一 l群) 02 (2群) 04 (3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 t雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雄 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
下痢 a 4 (19) 2 (6) 3 (13) 4 (51) 4 (191) 4 (84) 4 (620) 4 (527) 粘液性下痢 4 4 血便 3 目安臥位 3 異常姿勢 3 1 立ち直り反射障害 1 2 方向感覚の消失 O 2 第三眼険露出 3 2 温触感 2 被毛の汚れ 3 4 被毛湿潤 3 3
身体検査
darr反射 + +
darruarr痛覚反射 + +
直腸温(華氏度)
投与前 1007 1007 1006 1012 1013 1007
uarr投与 27週 1006 1005 1018 1021 1024事 1028
uarr投与 50週 1001 1003 1016事 1013 1020 1023
眼科学的検査
心電図
ー=特記すべき所見なし a=発現例数(按与期間中にみられた全動物の発現回数) +=軽度 Duncan s new multiple range test 叩く005
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 45
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチゲミン
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713 試験番号[T2723]
投与量 (mgkg日) O(対照 1群) 02ο群) 04(3群) 15rarr13(4群)
動物数 雄 4 gl准 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
特記すべき所見
血液学的検査
血液生化学的検査
darr血紫中コリンエステラーゼ(lUIL)
投与 4週 2388 1720 1274 1556 1128 1349 1047 964
投与 8週 1984 1801 1258 1972 1137 1357 1029 990
投与 12週 2073 1560 1254 1554 1147 1573 986 1029
投与 19週 1920 1851 1404 1448 1102 1371 976 861
投与 26遜 2061 1666 1262 1472 1134キ 1479 1013 898
投与 38週 2004 1906 1218 1569 1050 1363 999 964
投与 52週 2062 1656 1213 1399 1066キ 1504 1009 951
尿検査
臓器重量
剖検所見
大腸
硬結 2
病理組織学的検査
結腸 出血 2 肉芽組織 2
-=特記すべき所見なし Duncans new multiple range加 tpく005
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
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ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential
02 (2群)
雄 4 雌 4
Page 46
ENA713DIONO25401 スチグミン)1yen
試験番号 [T2723]
04(3群) 15rarr13 (4群)
雄 4 雌 4 雄 4 雌 4
CTD267毒性試験概要表
2677G 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題One year oral toxicity study in the dog on ENA 713
投与量 (mgkg日)
動物数
死亡例の検査
剖検所見
心臓
出血
大腸
衆膜出血
病理組織学的検査
心臓
出血(+)
大腸
疑膜出血(+)
肉芽形成(士)
牌臓
リンパ球枯渇(朴+)
胸腺皮質
退縮(++)
胸腺
出血(+)
リンパ節
リンパ球枯渇(+)
出血(++)
(対照一l群)
雄 4 雌 4
O
0-特記すべき所見なし土=ごく軽度 +=軽度 +=中等度 +++=重度
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
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10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
Confidential Page 47
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO-25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212幽 713) A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号[442円
動物種系統ミニブタG側泊genSPF
投与開始週齢15~21 週齢
初回投与年月日 1年月日
投与期間 4週間 cτDにおける記載箇所423211
休薬期間なし GLP適用適
投与方法経皮 溶媒投与形態パッチ剤
無毒性量216 mg日(全身に対する無毒性量投与局所に対する無毒性量は設定できず)
投与量 (mg日) O(対照一l群) 36 (2群)
動物数 雄5 雌5 雄 3 雌 3
トキシコキネティクス
リパスチグミン
AUCO24h(nghfmL)
投与 1日 ND ND 22士28 40土15
投与 25日 ND ND 202土43 233 l75
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 13土14 28士03
投与 25日 ND ND 11士3 12土5
NAP226-90
AUCO24h(nghf此)
投与 1日 ND ND 32土27 42土17
投与 25日 ND ND 225l11 179士 87
Cmax (ngmL)
投与 1日 ND ND 25土11 34土 08
投与 25日 ND ND 12土2 9士5
ND=検出限界未満値は平均値土標準偏差で示す
108 (3群)
雄 3 峰 3
194土91 71土32
932土114 762土226
10土5 4士2
55l9 43土14
170土72 64土38
801土37 705土44
10土3 5士2
48 l5 41土4
216 (4群)
雄5 雌5
328土147 272士 255
2033土589 2244土709
18土7 15土13
117土40 137土49
335土170 243土189
2826士 1356 2471土909
18土8 15土9
169土76 155土61
Confidential Page 48
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
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CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212713)A4weekdermal toxicity study in minipigs 試験番号町 [442P]
投与量 (mg日) O(対照一 1群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌3 雄 3 雌 3 雄 5 雌 5
特記すべき所見
死亡及び切迫殺処分動物数 2 体重
摂餌量
一般状態
眼科学的検査
心電図
血液学的検査
血液生化学的検査
darrブチリルコリンエステラーゼ (IUL) 558 At 579At 357 413 341 352
(投与 25日 2時間)
darrプチリノレコリンエステラーゼ (IUIL) 522At 568 At 394 312 431 292仲 324 (投与 25日 6時間)
darrブチリノレコリンエステラーゼ(lUIL) 533 At 558At 400 328 456 332本 338 (投与 26日 24時間)
darr赤血球コリンエステラーゼ(lUIL) 4418 Dn 4644 Dn 3600 4246 3402 3657
(投与討日)
臓器重量
剖検所見皮膚反応紅斑
グレドO 4 グレード 1 2 3 2 2 2 2
グレード 2 2 2
ょ特記すべき所見なし A七=Anova+ t-test plt005料 pく001Dn=Kruskal Wallis + Dunn test ホpく005皮膚反応のグレード0=変化なし 1=軽微 2=軽度
Confidential Page 49
CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
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CTD267毒性試験概要表 ENA713DONO25401リ1yenスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212-713) A 4weekd巴rmaltoxicity study in minipigs 試験番号[442P]
投与量 (mg日) O(対照一 l群) 36 (2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄 5 雌 5 雄 3 雌 3 雄3 雌 3 雄 5 雌5
特記すべき所見
剖検所見皮膚反応紅斑
グレード 3 グレード4
病理組織学的検査
皮膚対照域 不全角化限局性 3 2 2 3 海綿状変化限局性 2 2 I
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 2 2 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 1(111) a
不全角化限局性 4 5 1 2 4 4 海綿状変化限局性 2 1 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
表皮肥厚限局性 4 4 2 1 2 2 4 出血真皮 真皮乳頭伸長 2
貼付部位 2b 不全角化限局性 3 O 2 2
=背部皮膚を尾側と頭側の 2筒所(それぞれ貼付部位 1及び 2)に分けた時の貼付部位 1における最も左尾側の貼付部位 b=貼付部位 2における最町も左尾側の貼付部
位皮膚反応のグレード3=中等度 4=重度
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
ial1Confiden Page 50
CTD267毒性誌験概要表 ENA713DONO-2540リパスチグミン
2677H 反復投与毒性試験(続き)
報告書の表題SDZ ENA 713 (SDZ 212欄 713)A4weekdermal toxicity study inminipig買 試験番号[442P]
投与量 (mgl日 O(対照一 1群 36(2群) 108 (3群) 216 (4群)
動物数 雄5 雌 5 雄3 雌3 雄3 雌 3 雄5 雌 5
特記すべき所見
貼付部位 2a 0 2 1海綿状変化限局性 今 ヲム勾
ldquo
L
Z
J
-
貼付部位 1(10)b
4 4不全角化限局性
海綿状変化限局性
2 2 2
2 2
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 5 5
3 2表皮肥厚限局性
真皮乳頭伸長
34
2 1
1
3
2
その他の検査内分泌検査
」背部皮膚を尾側と頭側の 2箇所(それぞれ貼付部位 1及び 2) に分けた時の貼付部位 2における最も左尾側の貼付部位 b=プラセボあるいはリパスチグミンパッチ
剤を貼付した部分以外の皮膚特記すべき所見なし
特記事項皮膚病理組織学的所見では表中の変化に加え表皮好中球経表皮炎症性細胞浸潤及び真皮浅層血管周囲浸潤水緩及び出血がみられ皮膚炎と診断され
た
ldquo
守
血管周囲浸潤 5 5 3 3 3 3 ξ
J
A表皮肥厚限局性 2 3 2 2 2
q 真皮乳頭伸長 2 1
