15
M M entor: dr Dragoljub entor: dr Dragoljub Cvetković Cvetković S S tudent: Marina Rajič tudent: Marina Rajič

Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

  • Upload
    marina

  • View
    176

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

MMentor: dr Dragoljub Cvetkovićentor: dr Dragoljub CvetkovićSStudent: Marina Rajičtudent: Marina Rajič

Page 2: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

“PRO” – podržavaju, favorizuju “BIOTICI” – imaju ulogu u životnom ciklusu Mikroorganizmi koji su neophodni u

digestivnom traktu (Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium spp., Lactobacilus casei...)

Svojim kolonijama zajedno formiraju biofilm na zidu creva – simbioza sa čovekom

Pored digestije, imaju ulogu i u imunom sistemu, proizvodnji B komplexa, vitamina K...

Za bolje dejstvo koriste se zajedno sa prebioticima

Page 3: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

Vlakna sačinjena od ugljenih hidrata (oligosaharidi); brojni su u povrću

Stimulišu rast probiotičkih bakterija, ali ne i patogena kao što je Candida albicans.

Prebiotički proizvodi moraju ispunjavati sledeće uslove:

ne smeju se apsorbovati ni razlagati u GIT-u

selektivni su za određen broj korisnih bakterija

menjaju floru tako što daju prednost probioticima

Page 4: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

PROBIOTICIBifidobacterium pod

elektronskim mikroskopom

PREBIOTICIŠematski prikaz lanca inulina

Page 5: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

Narušavanje biofilma u crevima može nastati usled uzimanja antibiotika, unošenja toxina, poremećene ishrane...

Za ponovno uspostavljanje ravnoteže najviše se koriste fermentisani mlečni proizvodi.

Da bi se ispoljilo povoljno delovanje bakterija nakon unošenja u organizam neophodna je minimalna koncentracija od 106 cfu/g

Page 6: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

Imaju najvažniju ulogu pri proizvodnji jogurta i sira, fermentacijom prevode laktozu u mlečnu kiselinu. To su Streptococcus thermophilus,

Lactobacillus lactis i dr.

Ove bakterije oslobađaju odgovarajuće lipolitičke i proteolitičke enzime koji utiču na krajnji izgled, aromu i gustinu proizvoda. L. lactis

Page 7: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

U praksi se uglavnom za razlikovanje vrsta bakterija koriste razlike u makromorfologiji kolonija, kao i mikroskopske razlike.

To nije uvek najpogodniji način za identifikaciju i kvantifikaciju probiotičkih bakterija.

Page 8: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

Da li probiotičke bakterije mogu da prežive procese proizvodnje i skladištenje proizvoda u kojima se deklarišu kao prisutne?

Ako mogu, da li to utiče na njihov životni ciklus, i da li možemo pratiti biohemijske promene koje su izazvane?

Da li postoje dovoljno selektivne podloge kojima možemo tačno razlikovati probiotičke bakterije od starter kultura u proizvodnji jogurta i sireva?

Page 9: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

Ispitati da li u deklarisanim probiotkim proizvodima ima dovoljno aktivnih probiotskih bakterija

Proveriti selektivnost preporučenih podloga za određene rodove probiotskih bakterija

Praćenje varijacija u broju bakterija jednog proizvoda u zavisnosti od datuma proizvodnje (šarže)

Page 10: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

U cilju ispitivanja viabilnosti ćelija mlečnih bakterija u komercijalnim proizvodima jogurta i kapsulama sa liofilizovnim

bakterijama koristile su se selektivne hranljive podloge.

Zasejavanje je vršeno metodom poseva. Inkubacija se odvijala na temperaturi od 37oC tokom 72h.

Page 11: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

MPA – mesopeptonski agar, ukupan broj mezofilnih aerobnih i anaerobnih bakterija

MRS – dupli sloj, izolovanje laktobacila (de Man Rogosa and Sharp), aerobno

ENT – Chromocult Enterococci agar, detekcija enterobakterija fekalnog porekla, aerobno

COLIFORM (+/-) – Chromocult Coliform agar, (saplament = antibiotik sa selektivnim G+ delovanjem), aerobno

WILKINS-CHALGREN (+/-) – preporučna selektivna podloga za bifidobakterije, dodaci: pirocin, sojin pepton, glacijalna sirćetna kiselina, anaerobno (Rada i sar., 2009)

M17 – poldloga za selektivnu detakciju streptokoka, aerobno

Page 12: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

kapsule sa liofilizovanim kulturama bakterija, deklaracija – Lb. acidophilus, Bifidobacterium infantis, St. faecium

uzorak 1: jogurt, deklaracija – Lb. bulgaricus; St. thermophilus

uzorak 2 : jogurt, deklaracija – Lb. casei; Bifidobacterium

uzorak 3 : jogurt, deklaracija – Lb. acidophilus, Bifidobaterium lactis; St. thermophilus

Page 13: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

kapsule MPA MRS M17

I [cfu/g] 69‧106 103‧106 76‧106

II [cfu/g]

41‧106 118‧106 50‧109

MPA an

MRS an

WCH+ an

WCH- an

97‧106 159‧106 251‧105 249‧106

118‧106

203‧106 63‧105 238‧106

kapsule

I [cfu/g]

II [cfu/g]

Page 14: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima
Page 15: Vijabilnost ćelija bakterija mlečne kiseline u probiotičkim proizvodima

Odabir podloge zavisi od matrixa, ciljane grupe i prateće populacije bakterija

Nešto veću selektivnost su pokazale selektivne podloge u poređenju sa podlogom za određivanje ukupnog broja bakterija.

U svim ispitivanim uzorcima je ukupan broj ćelija bio veći od 106 cfu/g

Ipak, kvantifikacija probiotičkih bakterija se ne može izvršiti na osnovu jednog medijuma. Neophodna je dodatna verifikacija biohemijskim testovima.