Wanda Aziizah Rahayu

7/25/2019 Wanda Aziizah Rahayu

1/28

i

LAPORAN AKHIR

JURNAL PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

DISUSUN OLEH :

NAMA

WANDA AZIIZAH RAHAYU

NIM

1511015052

KELOMPOK 1A

NAMA

Bayu Rosandy

Gefanni Emilla Alya

Nuraenun Ayu LestariNur Jannah

Wanda Aziizah Rahayu

Wirda Alawiah

Wulandari

NIM

1511015018

1511015042

15110150451511015045

1511015083

1511015052

1511015043

1511015079

JURUSAN KESEHATAN MASYARAKAT

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN GENETIKA MOLEKULER

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM2015


2/28

ii

LEMBAR PENGESAHAN

LAPORAN AKHIR JURNAL PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

Disusun Oleh:NAMA NIM

Wanda Aziizah Rahayu 1511015045

Kelompok/ kelas

1A

NAMA NIM

Bayu rosandy 1511015018

Geafanni Emilla Alya 1511015042

Nur Aenun Ayu Lestari 1511015045

Nur Jannah 1511015083

Wanda Aziizah Rahayu 1511015052

Wirda Alawiah 1511015043

Wulandari 1511015079

Laporan akhir praktikum Mikrobiologi Dasar ini telah di serahkan di Samarinda pada tanggal

21 bulan Desember 2015 dan telah memenuhi syarat.

Menyetujui,

Asisten I Asisten II Asisten III

Cep Hikmat Maulana Yusuf

NIM. 1307025037

Ersaliany Nurul Pratiwi Qodrie

NIM. 1307025018

Nur Maulida Aulia

NIM. 1307025011

Asisten IV Asisten V Asisten VI

Riska Prihatiningsih

NIM. 1307025081

Tunik khoiriyah

NIM.1307025027

Yusnaini

NIM.1307025010

Mengetahui

Kepala Laboraturium Mikrobiologi Dasar

Dr. rer. Nat. Boedhi Dharma. M. Si.

NIP. 19710726 200012 1 002

Dosen

Ir. SamsuriantoNIP. 1910726 200012 1 002


3/28

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis ucapkan syukur ke hadirat Allah SWT yang telah melimpahkan

anugerah-nya, sehingga penyusunan laporan resmi dengan judul Laporan Akhir Praktikum

Mikrobilogi Dasardapat diselesaikan.

Laporan ini dibuat sebagai salah satu syarat yang diberikan kepada mahasiswa-mahasiswi dalam ujian praktikum.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan dukungan dari berbagai pihak tidak

mungkin laporan ini dapat diselesaikan. Oleh karena itu, dalam kesempatan ini penulis

meyampaikan terima kasih kepada:

1. Bapak dan ibu yang telah banyak memberikan doa, materi dan moril yang tak ternilai

serta memberikan semangat dalam penyelesaian laporan resmi ini,

2. Asisten Cep Hikmat M. Y, Ersaliany N. P. Q, Nur Maulida Aulia, RiskaPrihatiningsih,

Tunik Khoiriyah, dan Yusnaini yang telah membimbing, memberikan masukan dan

bantuan kepada punulis,

3.

Teman-teman FKM 2015 Kelas A dan B telah memberikan masukan dan bantuan

kepada penulis,

4. Teman-teman asrama putri tarakan yang telah memberikan masukan dan bantuan

kepada penulis.

Penulis menyadari masih terdapat kekurangan dalam laporan ini, Penulis beharap

semoga laporan ini dapat bermanfaat bagi teman-teman yang akan melakukan penelitian dan

dapat menyempurnakan laporan ini menjadi lebih baik.

Samarinda, 22 Desember 2015

Penyusun


4/28

iv

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................................................... i

HALAMANPENGESAHAN .................................................................................................... ii

KATA PENGANTAR ............................................................................................................... iii

DAFTAR ISI ............................................................................................................................. iv

DAFTAR TABEL ...................................................................................................................... v

PRAKTIKUMPERALATAN STERILISASI DAN MEDIA PERTUMBUHAN MIKROBA 1

PRAKTIKUMISOLASI DAN IDENTIFIKASI MORFOLOGI KOLONI MIKROBA .......... 6

PRAKTIKUMPEMBUATAN BIAKAN MURNI .................................................................... 9

PRAKTIKUMPEWARNAAN BAKTERI ............................................................................. 12

PRAKTIKUMPENGAMATAN JAMUR MIKROSKOPIS ................................................... 16

PRAKTIKUMPENGONTROLAN MIKROORGANISME ................................................... 18

PRAKTIKUMANALISIS MIKROORGANISME PADA JAMU ......................................... 22


5/28

v

DAFTAR TABEL

Tabel 1.1 Perkenalan Alat ......................................................................................................... 2

Tabel 1.2 Pembuatan Media ....................................................................................................... 4

Tabel 2.1 Isolasi Morfologi Koloni Mikroba ............................................................................. 7

Tabel 3.1 Pembiakan Murni ..................................................................................................... 10

Tabel 4.1 Pewarnaan Bakteri .................................................................................................... 14Tabel 5.1 Pengamatan Jamur Mikroskopis .............................................................................. 17

Tabel 6.1 Pengontrolan Mikroorganisme ................................................................................. 19

Tabel 7.1 Analisis Mikroorganisme Pada Jamu Pegal Linu ..................................................... 23


6/28

Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar 1

Laboraturium Mikrobiologi dan Genetika Molekuler, Biologi, FMIPA Unmul

Peralatan, Sterilisasi dan Media Pertumbuhan Mikroba

Wanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.

Kelompok 1A Praktikum Mikrobiologi DasarFakultas Kesehatan Masyarakat

Abstrak

Dalam prakteknya sterilisasi alat medium dapat dilakukan secara pemanasan, penyinaran, danpenyaringan. Adapun media pertumbuhan mikroba yang digunakan adalah media hidup, media buatan,

dan lain - lain. Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui cara mensterilkan dan fungsi dariperalatan yang akan digunakan dalam praktikum dan melakukan pembuatan medium dasar. Bahan

yang digunakan yaitu medium PDA yaitu ekstrak kentang 250 ml, dextrose2,5 gram, dan agar 3,75gram. Medium NA ekstrak daging 250 ml, agar 3,75 gram, dan pepton 1,25 gram. Hasil yang didapatpada praktikum ini ialah untuk membuat medium kita harus teliti sehingga hasil akhirnya menjadisempurna dengan cara mensterilkan alat-alat praktikum dengan metode uap bertekanan atau autoclave.

Kata Kunci:Sterilisasi/ Potato Dextrose Agar/ Nutrient AgarTanggal Praktikum : 23 November 2015; Diserahkan tanggal 27 November 2015

PendahuluanMikrobiologi adalah ilmu yang mempelajaritentang mikroorganisme yang tidak dapatdilihat dengan mata telanjang untuk menelitiapa saja yang terkandung di dalammikroorganisme. Dalam menelitimikroorganisme diperlukan teknik dan cara-cara khusus [4].

Didalam pekerjaan mikrobiologi seringkalikita tidak terlepas dari Tentang fungsi dansifat-sifat dari alat yang digunakan. Peralatanyang digunakan pada laboratorium

mikrobiologi yaitu berupa alat-alat gelas antaralain: tabung reaksi, cawan petri, pipet ukur danpipet volumetrik, labu ukur, labu erlenmeyer,gelas piala, pH meter, gelas arloji, termometer,botol tetes, pembakar spiritus, kaki tiga dengankawat alat-alat yang berada dalamlaboratorium. Untuk itu diperlukanpemahaman [4].

Untuk mempelajari serta untuk meneliti

mikroorganisme baik sifat maupunkarakteristiknya, tentu diperlukan adanyapengenalan alat yang akan digunakan serta

mengetahui cara penggunaan alatalat yangberhubungan dengan penelitian yang akan

dilakukan [4].Alat-alat yang digunakan dalam praktikum

mikrobiologi juga harus dalam keadaan sterilatau bebas dari kuman serta bakteri, virus danjamur. Dan untuk mensterilkannya diperlukan

pula pengetahuan

Asisten pendamping: 1.Tunik Khoiriyah 2.Yusnaini

3.Ersaniany 4.Nurul PratiwiQodrie, 4.Cep Hikmat Maulan Yusuf

5. 6.Riska Prihatiningsih

Penanggung jawab:Koordiantor mata Kuliah Mikrobiologi

Dasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika

Molekuler Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si, FMIPA Unmul

tentang cara- cara/ teknik sterilisasi. Hal inidilakukan karena alat- alat yang digunakanpada laboratorium mikrobiologi memilikiteknik sterilisasi yang berbeda. Sterilisasimerupakan Metode praktis yang dirancanguntuk membersihkan dari mikroorganisme. [4]

Pada tahun 1832 William Henry, seorangDokter Manchester, mempelajari efek panaspada penularan dengan menempatkan bahanyang terkontaminasi, yaitu pakaian yangdikenakan oleh penderita dari tifus dandemam, di udara dipanaskan oleh air kemudian

dalam bejana yang ditekan. Dia menyadaribahwa dia bisa mencapai suhu lebih tinggi dari100 C dengan menggunakan bejana tertutupdilengkapi dengan katup pengaman yang tepat.Ia menemukan bahwa pakaian diperlakukanbisa dikenakan dengan impunitas oleh oranglain, yang tidak kontrak penyakit. LouisPasteur juga menggunakan bejana tekanandengan katup pengaman untuk sterilisasi [1].

Komposisi media tumbuh bervariasitergantung pada jenis mikroorganisme yangakan ditumbuhkan, namum semua

mikroorganisme mempunyai kebutuhan dasaryang sama dalam media tumbuhnya, yaitu air,

karbon, energi, mineral dan faktortumbuh.Derajat keasaman (pH) media sangat

menentukan pertumbuhan mikroorganisme,pada ummnya mikroorganisme hidup padakisarah pH netral (7), tetapi mikroorganisme

patogen biasanya hdup pada pH basa. Padapraktikum ini kita menggunakan media NA

dan PDA.Praktikum ini bertujuan untuk sterilisasi

terhadap peralatan yang akan digunakan dalampembuatan media. Manfaat dari praktikum iniadalah agar praktikan mengetahui bagaimana

cara mensterilisasikan peralatan yang akan


7/28



digunakan sebelum dipakai untuk melakukanpembuatan medium dan lai-lain.

Metode

Waktu dan Tempat

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Senin,23 Novemeber 2015 pada pukul 13.00-15.30

WITA. Bertempat di LaboratoriumMikrobiologi dan Genetika Molekuler Gedung,Fakultas Matematika dan Ilmu Pengatahuan

Alam, Universitas Mulawaraman, Samarinda.

Alat dan BahanAlat

Alat yang digunakan yaitu gelaserlenmeyer, neraca analitik, ose melengkung,ose lup, lampu Bunsen, hot plate, stirer,autoclave, cawan petri, spatula, karet gelang,kertas, air, kapas, alumunium foil, aquades,

kertas label, mikropipet, blue tip, yellow tip,magnetic stirrer, batang mahnetik, vortex,incubator, pinset, kuvet, gelas ukur, shaker,dan refigator.

Bahan

Bahan yang digunakan yaitu untukpembuatan PDA digunakan ekstrak kentang250 ml, agar 5 gr, dan dextrose 5 gr. Untukpembuatan NA digunakan Ekstrak Daging 250ml, agar 3,75 gr dan peptone 2,25 gr.

Cara kerjaSterilisasi Alat

Cara sterilisasi cawan petri yaitu dengandibungkus dengan kertas, disisi kanan dan kiri

dilipat membentuk segitiga, lalu dilipat kebawah membentuk kotak.

Media PDADimasukkan dextrose kedalam mangkuk

kecil sebanyak 2,5 gram dan ditimbangmenggunakan neraca analitik. Dimasukkan

dextrose yang telah diukur kedalam

Erlenmeyer. Dimasukkan agar kedalammangkuk kecil sebanyak 3,75 gr dan ditimbangmenggunakan neraca analitik. Dimasukkanagar yang telah dikur kedalam Erlenmeyer.

Kemudian dimasukkan ekstrak kentang yangdiukur menggunakam tabung ukur sebanyak250 ml dan dimasukkan kedalam Erlenmeyer.Setelah itu dihomogenkan bahan yang telahdicampur. Ditutup mulut erlemeyer denganmenggunakan kasa yang ditumpukmenggunakan kapas sampai mulut benar-benar

tertutup rapat lalu dipanaskan bahan yang telahdihomogenkan dengan hot platesampai bahan-

bahan yang terdapat di Erlenmeyer benar-benar homogen dengan sempurna.

Media NADimasukkan pepton kedalam mangkuk

kecil sebanyak 1,25 gram dan ditimbangmenggunakan neraca analitik. Dimasukkan

peptone yang telah diukur kedalamErlenmeyer, dimasukkan agar kedalammangkuk kecil sebanyak 3,75 gr. Dimasukkan

agar yang sudah ditimbang tadi kedalam gelasErlenmeyer. Dimasukkan ekstrak daging yangsudah diukur sebanyak 250 ml dan diletakkankedalam gelas Erlenmeyer. Dihomogenkanbahan yang telah dicampur. Kemudian ditutupmulut erlenmeyer dengan menggunakan kasayang ditumpuk dengan kapas sampai mulutnyabener-benar tertutup. Dipanasakan bahan yangtelah dihomegenkan dengan hot plate sampai

bahan-bahan yang terdapat di Erlenmeyerbenar-benar homogen dengan sempurnaSetelah dipanaskan dengan hot plate,dimasukkan Erlenmeyer kedalam autoklavedengan suhu 1210C selama 20 menit.

Hasil dan Pembahasan

1.1 Perkenalan Alat

No Nama Alat Keterangan

1 Autoclave Fungsinya untukmensterilkan bahandan alat alatdengan uap air panasbertekanan tinggi

2 Batangpengaduk

Fungsinya untukmengaduk bahan

3 Blue tip Fungsinya untukmemindahkan cairan

yang bervolume1000 l.

4 Cawan petri Fungsinya sebagaiwadah penyimpanan

dan pembuatanmedia.

5 Corong Fungsinya untuk

memudahkan suatularutan masuk

kedalam suatu wadah


8/28



6 Evavorator Fungsinya untukmenguapkan bahan

7 Gelas ukur Fungsinya untuk

mengukur larutan

8 Hockey stick Fungsinya untk

meratakan mediadalam cawan petri

9 Hot plate Fungsinya untukmemanaskan bahan

10 Inkubator Fungsinya untukmenginkubatorkanbahan

12 Kuvet Fungsinya untukmengukur

pertumbuhan bakteri

13 LampuBunsen/Spiritus

Fungsinya untukmensterilkan jarumose atau bahan

bahan yang terbuatdari platina ataukhorm dengan carapemijaran

14 Magneticstirrer

Magnetic stirreradalah perangkatlaboratorium yangmenggunakan medanmagnet berputardidalam cairan.

14 Mikropipet Fungsinya untukmemindahkan mediacair pada tempatyang satu ke tempatyang lain

15 Neracaanalitik

Fungsinya untukmengukur bahan

yang akan digunakan

16 Ose lup Fungsinya untukmengisolasi bakteri

17 Ose

melengkung

Fungsinya untuk

mengambiljamur/fungi yangberfilamen

18 Pinset Fungsinya untukmemndahkan ataumengambil bahanmedium

19 Pipet Fungsinya untukmengambil bahan-bahan yang bersifatcair

20 Shaker Fungsinya untukmengaduk denganotomatis

21 Inkubator Menginkubasi media

22 Spektrofoto

meter

Fungsinya untuk

menghitung bakteripada kuvet

23 TabungErlenmeyer

Fungsinya sebagaiwadah untuk mediacair


9/28



24 Vortex Fungsinya untukmenghomogen bahan

25 Oven Menginkubasi media

26 Yellow tip

Fungsinya untuk

memindahkan cairanyang bervolume 100l.

Pada tabel diatas dapat kita lihat berbagaimacam alat dan pembuatan media. Masing-masing alat mempunyai fungsi berbeda-beda.Setiap alt tersebut harus disterilkan terlebihdahulu sebelum digunakan.

Cara sterilisasi yang tepat tergantung padajenis dan sifat bahan yang disterilkan. Padapraktikum ini digunakan sterilisasi uapbertekanan, sterilisasi uap bertekananmenggunakan autoklaf. Autoklaf adalahsterilisasi untuk alat dan medium kulturjaringan. Alat-alat yang berupa gelaserlenmeyer dan cawan petri sebelumdigunakan harus disterilkan dahulu. Denganpemanasan di dalam autoklaf maka bakteridan mikrobia dapat mati akibat suhu yang

tinggi (121C) dan tekanan uap air yang besar

selama 20 menit.Autoklaf adalah alat steril yang

memanfaatkan uap air panas bertekanan tinggibiasanya digunakan untuk mensterilkanperalatan yang tahan panas dan tidak rusakoleh panas. Sterilisasi menggunakan autoklaf

merupakan cara yang paling baik karena uapair panas dengan tekanan tinggi menyebabkan

penetrisi uap air panas kedalam sel-sel mikrobamenjadi optimal sehingga langsung mematikanmikroba [3].

Autoklaf mempunyai cara kerja yanghampir sama dengan alat masak pressure

cooker , sebab alat ini merupakan sebuahbejana yang diisi air dan ditutup rapat-rapat.

Autoklaf ada yang model listrik tetapi ada pulayang harus diletakkan diatas kompor gas. Jika

alat ini dipanaskan, maka akan terjadi uap airyang tidak dapat keluar karena bejana tertutup

rapat, sehingga tekanan di dalam autoklaf naiksampai melebihi tekanan normal [2].

Medium yang disterilkan ditempatkan didalam autoclave selama 15-20 menit. Isitempat air hingga batas angsang didalam

bejana. Bungkus terlebih dahulu alat yang akandisterilkan. Setelah pintu autoclave ditutuprapat, barulah kran pada pipa uap dibuka dantemperatur akan terus-menerus naik sampai1210C dengan tekanan 2 atm. Setelah sterilisasiselasai jangan langsung membuka penutupautoklaf, tetapi tunggu sebentar hinggatermometer turun hingga angka nol.

Tabel 1.2 Pembuatan MediaNo Media Keterangan

1

Ekstrak kentang

KomposisiEkstrakkentang :250 mlAgar :3,75gramDextrose :2,5 gram

2 Ektrak dagingsapi

Komposisi :Ekstrakdaging sapi :250 mlAgar : 3,75gramPepton : 1,25gram

Pada praktikum pembuatan media NA danPDA. Medium PDA atau disebut juga PotatoDextrose Agarmerupakan media yang berasal

dari ekstrak kentang, dextron, agar danaquades, yang biasa digunakan untukmenumbuhkan jamur dan merupakan salahsatu media cair. Media NA atau disebut jugadengan Nutrien Agar merupakan media yang

terbuat dari agar, peptonedan aquades. Media

ini digunakan untuk pertumbuhan bakteri.Salah satu media yang baik digunakanuntuk membiakkan suatu organisme (bakteri


10/28



atau mikroba) adalah Potato Dextrose Agar(PDA).

Macam-macam media pertumbuhan1.Medium berdasarkan sifat fisik

Medium padat, yaitu media yangmengandung agar 1-1,5% sehingga

setelah dingin media menjadi padat.Medium setengah padat, yaitu mediayang mengandung agar 0,3-0,4%

sehingga menjadi sedikit kenyal, tidakpadat, tidak begitu cair. Media semisolid dibuat dengan tujuan supayapertumbuhan mikroba menyebar keseluruh media tetapi tidak mengalamipencampuran sempurna jika tergoyang.Medium cair yaitu media yang tidakmengandung agar, contohnya adalah NB(nutrient broth),LB (lactose broth) [5].

2.

Medium berdasarkan komposisiMedium sintesis yaitu media yang

komposisi zat kimianya diketahui jenisdan takarannya secara pasti, misalnyaglukosa agar, mac conkey agar. Mediasemi sintesis yaitu media yang sebagiankomposisinya diketahui secara pasti.Misalnya PDA (potato dextrose agar)yang mengandung agar, dekstrosa danekstrak kentang. Untuk bahan ekstrakkentang, kita tidak dapat mengetahuisecara detail tentang komposisi senyawa

penyusunnya. Medium non sistesis yaitumedia yang dibuat dengan komposisiyang tidak dapat diketahui secara pastidan biasanya langsung diekstrak dari

bahan dasarnya, misalnya tomato juiceagar, brain heart infusion agar,pancreatic extract [5].

3.Medium berdasarkan tujuanMedia untuk isolasi. Media ini

mengandung semua senyawa esensialuntuk pertumbuhan mikroba, misalnya

nutrient broth, blood agar. Mediaselektif/penghambat. Media yang selainmengandung nutrisi juga ditambah suatuzat tertentu sehingga media tersebutdapat menekan pertumbuhan mikroba

lain dan merangsang pertumbuhanmikroba yang diinginkan.[5]

Media diperkaya (enrichment). Media yangmengandung komponen dasar untukpertumbuhan mikroba dan ditambah komponen

kompleks seperti darah, serum, kuning telur.Media diperkaya juga bersifat selektif untuk

mikroba tertentu. Bakteri yang tumbuh padamedia ini tidak hanya membutuhkan nutrisi

sederhana untuk berkembangbiak, tetapimembutuhkan komponen kompleks: blood

tellurite agar, bile agar, serum agar .Media untuk peremajaan kultur. Media

umum atau spesifik yang digunakan untuk

peremajaan kultur. Media untuk menentukankebutuhan nutrisi spesifik. Media inidigunakan untuk mendiagnosis ataumenganalisis metabolisme suatu mikroba.Media untuk karakterisasi bakteri. Media yangdigunakan untuk mengetahui kemampuanspesifik suatu mikroba. Kadang-kadangindikator ditambahkan untuk menunjukkanadanya perubahan kimia. Media differsial.

Media ini bertujuan untuk mengidentifikasimikroba dari campurannya berdasakankarakter spesifik yang ditunjukkan pada mediadiffentia [5].

Kesimpulan

Kesimpulan untuk membuat medium kitaharus teliti sehingga hasil akhirnya menjadisempurna dengan cara mensterilkan alat-alatpraktikum dengan metode uap bertekanan atauautoclave.

Referensi

[1]Ayliffes, Hugo, dan Rusell. 2004.

Principles and practice of disinfection,

preservation and sterilization. Hong

kong: blackwellpublishing.Halaman 5

[2]Hendrayono, D.P dan Wijayani, A.

Teknik Kultur Jaringan Yogjakarta:

Kanisius 2012. Halaman 55

[3]Sumasih, Sri. 2010. Untung Besar UsahaBibit Jamur Tiram. Jakarta: PT NiagaSwadaya. Halaman 30

[4]

Suriantika, Cipto DKK. 2013. LaporanKelompok Praktikum Mikrobiologi-Virologi Sterilisasi Dan PengenalanPeralatan Mikrobiologi, Jakarta:Universitas Muhammadiyah Prof. Dr.Hamka. Halaman 4

[5] Volk dan Wheeler. 1993. MikrobiologiDasar Jilid 1 Edisi ke 5. Jakarta:

Erlangga. Halaman


11/28



Isolasi dan Identifikasi Morfologi Koloni MikrobaWanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.

Kelompok 1A Praktikum Mikrobiologi Dasar

Fakultas Kesehatan Masyarakat

AbstrakIsolasi adalah cara memindahkan medium dari lingkungan ke medium yang lain. Kemudian

diidentifikasikan yang dilihat dari form, elevation, dan marginnya. Bahan yang digunakan adalah hasilpraktikum pertama yaitu medium PDA, medium NA, alkohol, air galon, dan buah mangga busuk yangberjamur. Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui teknik dasar isolasi mikroba (Bakteri

dan Jamur) dan cara identifikasi dasar metode yang digunakan adalah pengenceran. Hasil yang didapatpada praktikum ini ialah PDA Cawan Petri 10-5, Sp 1, Form : Spindle,Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah : 19, PDA Cawan Petri 10-6Sp 1, Form : Spindel, Elevation :Flat, Margin :Entire,Jumlah :23, Sp 2, Form :Rhizoid, Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :1, PDA Cawan Petri 10-7tidak berhasil, NA Cawan Petri 10-8Sp 1, Form :Rizoid, Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :10,Sp 2, Form :Iragullar, Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :15, NA Cawan Petri 10-9Sp 1, Form:Rizoid, Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :38, Sp 2, Form :Iragullar, Elevation :Flat, Margin

:Entire, Jumlah :25, dan NA Cawan Petri 10-10 Sp 1, Form :Rizoid, Elevation :Flat, Margin :Entire,Jumlah :7, Sp 2, Form :Iragullar, Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :21

Kata kunci :isolasi/ koloni/ pengenceran/identifikasiTanggal Praktikum : 30 November 2015 dan 2 Desember 2015 Diserahkan tanggal 3 Desember 2015

PendahuluanMikroba seperti makhluk hidup lainnya

yang memerlukan nutrisi pertumbuhan.

Pengetahuan akan nutrisi pertumbuhan iniakan membantu didalam mengkultivasi,mengisolasi, dan mengidentifikasimikroba [1].

Mikroba memiliki karakteristik dan cirri-

ciri yang berbeda didalam persyaratanpertumbuhanya. Ada mikroba yang bisa hiduphanya pada media yang mengandung sulfur

dan ada pula yang tidak mampu hidupseterusnya. Karakteristik persyaratanpertumbuhan mikroba inilah yang

menyebabkan bermacam-macam mediapenunjang pertumbuhan mikroba [1].

Saat ini media agar merupakn media yangsangat umum digunakan dalam penelitian-peneltian mikrobilogi. Mediaagar inimemungkinkan untuk dilakukanya isolasibakteri dari suatu sampel, karakteristikmorfologi, sampai perhitungan bakteri yangdikenal dengan nama total plate count. Bentukkoloni bakteri dan warna-warninya mudahsekali dikelani dengan media ini dengan caramengubahh komposisi nutrient atau menambahindicator [3].

Pendamping: 1.Tunik Khoiriyah 2.Yusnaini 3.Ersaniany

4.Nurul PratiwiQodrie, 4.Cep Hikmat Maulan Yusuf 5. 6.RiskaPrihatiningsihPenanggung jawab: Koordiantor mata Kuliah MikrobiologiDasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.

Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika


Mikroorganisme tidak hanya bervariasidalam persyaratannya, tetapi juga menunjukanrespon yang berbeda-beda terhadap kondisi

fisik didalam lingkungannya. Untukkeberhasilan kultivasi berbagai tipe bakteri,dibuthkan satu kombinasi nutrient sertalingkungan fisik yang sesuai [3].

Isolasi bakteri adalah proses mengambilbakteri dari medium atau lingkungan asalnyadan menumbuhkannya di medium buatan

sehingga diperoleh biakan yang murni. Bakteridipindahkan dari satu tempat ke tempat lainnyaharus menggunakan prosedur aseptik. Aseptik

berarti bebas dari sepsis, yaitu kondisiterkontaminasi karena mikroorganisme lain.

Teknik aseptik ini sangat penting bila bekerjadengan bakteri. Beberapa alat yang digunakanuntuk menjalankan prosedur ini adalah bunsendan laminar air flow Bila tidak dijalankandengan tepat, ada kemungkinan kontaminasioleh miroorganisme lain sehingga akanmengganggu hasil yang diharapkan. Teknikaseptik juga melindungi laboran darikontaminasi bakteri [4].

Tujuan dari praktikum ini adalah untukmengetahui teknik dasar isolasi mikroba(Bakteri dan Jamur) dan cara identifikasi dasarmetode yang digunakan adalah pengenceran.

Metode

Alat dan bahanAlat


12/28



Peralatan yang digunakan yaitu, peralatangelas, jarum ose, mikropipet,yellow tip, tabung

reaksi, rak tabung reaksi, cawan petri, lampuBunsen, vortex, inkubator, danspray.

Bahan

Bahan yang digunakan adalah hasilpraktikum pertama yaitu medium PDA,medium NA, alkohol, air galon, dan buah

mangga busuk yang berjamur.

Cara kerja

Disiapakan tabung rekasi sebanyak 10 buahdan air galon. Diberi aquadest setiap tabungreaksi tersebut. Diberi keterangan

1010210310105 10padatabung reaksi dan dilakukan terlebih dahulu

pengencerean sampai 10. Lalu pada tabung

reaksi 10 diberikan 1 mikropipet air galonkedalam tabung reaksi. Pada saat pengambilansatu mikropipet didekatkan mikropipet dengannyala lampu Bunsen. Pada saat pemberian airgalon ke tabung reaksi, mikropipet harusdidekatkan dengan lampu Bunsen agar tetapstreril dan tidak terkontaminasi denganmikroba. Setelah itu dicampur denganmenggunakan vortex. Setelah dicampur di

vortex lalu air pada tabung reaksi 10

diberikan pada tabung reaksi 102dan begitu

seterusnya sampai tabung reaksi 10.

Kemudian air pada tabung reaksi

105106107 nanti dimasukan pada cawanpetri lalu dicampur dengan medium PDA yangsudah disterilkan. Tabung reaksi

10810910dimasukkan pada cawan petri

lalu dicampur dengan medium NA. Setelah itudiaduk secara merata dengan menggeserkan

petri membentuk angka delapan sebayak 26kali. Kemudian diinkubasikan pada suhu 370Cselama 48 jam.

Hasil dan pembahasanTabel 2.1 Isolasi Morfologi Koloni Mikroba

No Media Keterangan

1 PDA Cawan Petri10-5

Sp 1Form : SpindleElevation :Flat

Margin :EntireJumlah : 19

2 PDA Cawan Petri

106

Sp 1Form : Spindel

Elevation :FlatMargin :Entire

Jumlah :23

Sp 2

Form :Rhizoid


Jumlah :1

3 PDA Cawan Petri

107

Tidak berhasil

4 NA Cawan Petri

108

Sp 1Form :RizoidElevation :Flat

Margin :Entire

Jumlah :10

Sp 2

Form :IragullarElevation :Flat

Margin :EntireJumlah :15

5 NA Cawan Petri

109

Sp 1

Form :RizoidElevation :FlatMargin :EntireJumlah :38

Sp 2Form :Iragullar


Jumlah :25

6 NA Cawan Petri

10

Sp 1

Form :Rizoid

Elevation :Flat

Margin :Entire

Jumlah :7

Sp 2

Form :Iragullar

Elevation :Flat

Margin :Entire

Jumlah :21Dari tabel diatas kita dapat melihat bahwa

pada media PDA yang paling domain memilki


13/28



form berbentuk spindle. Begitu pula denganmedia NA yang paling dominan adalah form

yang berbentuk rhizoid.Beberapa teknik untuk isolasi adalah

sebagai berikut :1. Metode streak plate merupakan metode

isolasi kualitatif yang dapat dilakukandengan cepat. Perlu dilakukan teknikpengenceran dengan menggunakan ujung

jarum inokulasi bulat untuk membantumenyebarkan kultur pada permukaanmedium.

2. Teknik spread plate membutuhkancampuran mikroorganisme yangdiencerkan sebelumnya. Selama inokulasisel-sel akan terpisahkan ke seluruhpermukaan medium padat denganmenggunakan batang kaca yang berujung

L sedang cawan petri di putarmenggunakan suatu alat lazy-susan.

3. Teknik pour plate membutuhkanpengenceran seri dari kultur campurandengan menggunakan jarum inokulasiatau pipet. Inokulum yang telahdiencerkan kemudian ditambahkan kedalam medium agar yang telah dicairkanke dalam cawan petri, ocok kemudianbiarkan membeku.

Dengan Pengenceran Cara ini pertama-tamadilakukan oleh Lister dalam tahun 1865. Ia

berhasil memiara murni Streptococcus lactisyang diisolasikannya dari susu yang sudahmasam. Suatu sampel dari suatu suspensi yangberupa campuran bermacam-macam spesies

diencerkan dalam suatu tabung tersendiri. Darienceran ini kemudian diambil 1 ml untukdiencerkan lagi. Dan dari pengenceran yangkedua ini diambil 1 ml untuk diencerkan lebihlanjut. Jika dari pengenceran yang ketiga ini

diambil 0,1 ml untuk disebarkan pada suatumedium padat, kemungkinan besar kita akan

mendapatkan beberapa koloni tumbuh dalammedium tersebut, tetapi mungkin juga kitahanya memperoleh satu koloni saja. Dalam halyang demikian ini kita memperoleh satu koloni

murni, dan selanjutnya spesies ini dapat kitajadikan biakan murni. Kalau kita belum yakin,

bahwa koloni tunggal yang kita peroleh itumurni, kita dapat mengulang pengenceran

dengan menggunakan koloni ini sebagaisampel [5].

Kesimpulan

Kesimpulan dari praktikum adalah PDA

Cawan Petri 10-5, Sp 1, Form : Spindle,Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah : 19,PDA Cawan Petri 10-6Sp 1, Form : Spindel,Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :23,Sp 2, Form :Rhizoid, Elevation :Flat, Margin:Entire, Jumlah :1, PDA Cawan Petri 10-7tidak berhasil, NA Cawan Petri 10-8Sp 1,Form :Rizoid, Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :10, Sp 2, Form :Iragullar,

Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :15,NA Cawan Petri 10-9Sp 1, Form :Rizoid,Elevation :Flat, Margin :Entire, Jumlah :38,Sp 2, Form :Iragullar, Elevation :Flat,Margin :Entire, Jumlah :25, dan NA CawanPetri 10-10 Sp 1, Form :Rizoid, Elevation :Flat,Margin :Entire, Jumlah :7, Sp 2, Form :Iragullar, Elevation :Flat, Margin :Entire,Jumlah :21

Referensi

[1] Hajoeningtijas, Oetami Dwi. 2012.

Mikrobilogi pertanian. Yogyakarta: GrahaIlmu. Halaman 61.

[2] Pelczar, M.J.Jr, and E. Chan.1988.

Dasar-dasar Mikrobiologi. Penerbit

UI Press. Jakarta. p:23-24.[3] Sastryawibowo, Muhammad Wahyu.

2011. Teknik isolasi bakteri. Lampung:Universitas lampung. Halaman 2.

[4] Seiler, J. P. 2000. Good Laboratory

Practice. Swiss. Springer-Verlag

Berlin Heidelberg Media. Halaman 61.

[5]

Waluyo, L. 2007. MikrobiologiUmum. UMM Press. Malang,

Halaman: 61-67.


14/28



Pembuatan Biakan murni

Wanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.



AbstrakBiakan murni adalah suatu biakan yang hanya mengandung satu spesies mikroorganisme. Metode

yang dipakai adalah metode cawan tuang, cawan sebar, totol dan cawan gores. Tujuan dari praktikumini adalah untuk mengetahui macam-macam bakteri dan jamur yang tumbuh pada cawan petri dengan

menggunakan metodestreakdan totol. Bahan yang digunakan yaitu bakteri bacillus cereus, mediumPDA, medium NA, alkohol, dan buah mangga yang berjamur. Untuk medium PDA dengan mikrobabakteri menggunakan metode totol. Untuk menggunakan medium NA dengan mikroba jamur maka

metode yang digunakan adalah metode gores. Kesimpulan dari praktikum adalah metodestreakdantotol.

Kata kunci:Metode Streak/Metode Totol/Pembiakan murniTanggal Praktikum : 30 November 2015 dan 2 Desember 2015 Diserahkan tanggal 3 Desember 2015

Pendahuluan

Mikrobiologi ialah telaah mengenaiorganisme hidup yang berukuran mikrokopis.Dunia mikroorganisme terdiri dari limakelompok organisme: bakteri, protozoa, virus,serta algae dan cendawan mikroskopis [3].

Dalam kelompok mikroba juga terdapatjamur. Jamur merupakan protista tidakfotosistetik yang tumbuh sebagai suatu massafilament yang bercabang-cabang dan salingmenjalin dan dikenal dengan miselium [1].

Mikroba yang ditemukan disuatulingkungan ditemukan dalam populasicampuran, sangat jarang sekali yang ditemukansebagai satu spesies tunggal. Penelitianmengenai mikroorganisme biasanya

memerlukan teknik untuk memisahkanpopulasi campuran menjadi spesies yangberbeda-beda sebagai biakan murni [4].

Populasi mikroba merupakan populasicampuran dari berbagai mikroorganisme yangdisebut sebagai bikan murni. Teknik biakan

murni digunakan untuk memisahkan berbagaimacam bakteri. Teknik yang digunakan untukmemperoleh biakan murni yaitu metode tuangdan metode gores [4].

Untuk menumbuhkan kultur jamur tirammurni ada beberapa jenis media yang bisadigunakan, seperti MA, PDA, dan taugedextrose agar. Media yang umumnya

digunakan adalah PDA dan MA [5].Tidak ada bakteri yang hidup tersendiri danAsisten pendamping: 1.Tunik Khoiriyah 2.Yusnaini



Penanggung jawab: Koordiantor mata Kuliah MikrobiologiDasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.

Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan GenetikaMolekuler Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si, FMIPA Unmul

terlepas dari spesiesnya. Kerap kali bakteripatogen kedapatan bersama-sama bekterisaprobe. Untuk menyendirikan suatu spesiesada dikenal dengan beberapa cara yaitu,pengenceran dan penuangan. MetodePengenceran, cara ini pertama-tama dilakukanoleh Lister dalam tahun 1865. Ia berhasilmemiara biakan murni Streptococcus lactisyang diisolasikannya dari susu yang sudahmasam.

Suatu sampel dari suatu suspense yang

berupa campuran bermacam-macam spesiesdiencerkan dalam suatu tabung tersendiri. Darienceran ini kemudian diambil barang 1 mluntuk diencerkan lagi. Kalau perlu, darienceran yang kedua ini diambil 1 ml untuk

diencerkan lebih lanjut. Jika dari pengenceranyang ketiga ini diambil 0,1 ml untukdisebarkan pada suatu medium padat,kemungkinan besar kira akan mendapatkanbeberapa koloni tumbuh dalam mediumtersebut, tetapi mungkin juga kita hanya

memperoleh suatu koloni saja. Dalam hal yangdemikian ini kita memperoleh satu kolonimurni, dan selanjutnya spesies ini dapat kitajadikan piaraan murni. Kalau kita belum yakin,bahwa koloni tunggal yang kita peroleh itumurni, kita dapat mengulang pengencerandengan menggunakan koloni ini sebagaisampel [4].

Metode penuangan mempunyai metodeyang lain, yaitu dengan mengambil sedikitsampel campuran bakteri yang sudahdiencerkan, dan sampel ini kemudian

disebarkan di dalam suatu medium dari kaldudan gelatin encer. Dengan demikiandiperolehnyalah suatu piaraan adukan. Setelah


15/28



medium itu mengental, maka selang beberapajam kemudian nampaklah koloni koloni yang

masing-masing dapat dianggap murni. Denganmengulang pekerjaan seperti diatas ini, maka

akhirnya akan diperoleh piaraan murni yanglebih terjamin.

Dalam melakukan metode ini ada dua orangpembantu Koch yang sangat berjasa, yaituPetri yang menciptakan cawan dengan tutup

yang sekarang terkenal sebagai caawan petri(petridish). Pembantu yang kedua ialah Hasseyang menemukan agar-agar untukmenggantikan gelatin. Memang agar-agarternyata lebih baik daripada gelatin untukbahan pengental suatu medium. Agar-agartidak lekas mencair, titik cairnya 95oC [4].

Suatu jenis mikroba yang terpisah darikoloni campurannya akan lebih mudah untuk

diamati. Selain itu teknik untuk memisahkandan mendapatkan kooloni tunggal sertapemeliharannya terapat beberapa jenis.Teknik-teknik tersebut memiliki kelebihan dankelemahan. Beberapa cara dapat dilakukanuntuk menetukan jumlah bakteri yang terdapatpada bahan pemeriksaan. Cara yang palingsering digunakan adalah cara penghitungankoloni pada lempeng pembiakan juga dapatdilakukan penghitungan secara mikroskopis[4].

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk

mengetahui macam-macam bakteri dan jamuryang tumbuh pada cawan petri denganmenggunakan metodestreakdan totol.

Metode

Waktu dan Tempat

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Senin,30 Novemeber 2015 pada pukul 13.00-15.30WITA dan dilanjutkan pada hari Rabu, 2

November 2015 pada pukul 14.00-WITA.Bertempat di Laboratorium Mikrobiologi dan

Genetika Molekuler, Fakultas Matematika danIlmu Pengatahuan Alam, UniversitasMulawaraman, Samarinda.

Alat dan Bahan

Alat

Alat yang digunakan adalah jarum ose,

mikropipet, cawan petri, lampu Bunsen, tabungrekasi, rak tabung reaksi, danyellow tip.

Bahan

Bahan yang digunakan yaitu bakteribacillus cereus, alkohol, buah mangga yang

berjamur, aquadest, medium PDA, danmedium NA.

Cara kerja

Teknik penggoresan (streak)

Sebelum praktikum bersihkan mejapraktikumdengan alkohol, kemudian fiksasi

diatas nyala lampu bunsen. Siapakan cawanpetri yang sudah distrelikan pada praktikum

sebelumnya. Kemudian pada cawan petriberikan air tabung reaksi 102 sebanyak 1mikropipet, lalu campurkan medium NAkedalam cawan petri tersebut. Setelah ituhomogenkan cawan petri sebanyak 26 kalidengan membentuk angka delapan. Setalahdihomogrnkan tunggu cawan petri tersebuthingga memadat. Setelah memadat sentuh

permukaan koloni yang telah ditentukandengan jarum ose kemudian goreskan padapermukaan media sebanyak tiga kali goresan.Untuk goresan pertama rapat, goresan kedua

agak renggang, dan goresam terakhir sangatrenggang. Setelah digoreskan inkubasikansecara terbalik pada suhu 370C selama 48 jam

atau dua hari. Setelah itu amati pertumbuhankoloninya.

Teknik totolSebelum praktikum bersihkan meja

praktikum dengan alkohol, kemudian fiksasidiatas nyala lampu bunsen. Siapakan cawanpetri yang sudah distrelikan pada praktikumsebelumnya. Setelah itu berikan air dari tabung

reaksi 10sebanyak 1 mikropipet kedalam

cawan petri lalu tuang medium PDA kedalamcawan petri. Setelah dituang homogenkansebanyak 26 kali dengan membentuk angka

delapan. Tunggu sampai memadat. Setelahmemadat ambil jamur yang ada pada buah

mangga yang sudah busuk secara perlahan-lahan lalu totolkan pada cawan petri sebanyaktiga kali membentuk sudut segitiga. Setelahditotokan inkubasikan secara terbalik padasuhu 370C selama 48 jam atau dua hari. Setelah

itu amati pertumbuhan koloninya.

Hasil dan pembahasan

Dari hasil praktikum dapat diperoleh hasilsebagai berikut :Tabel 3.1 Pembiakan Murni

No Media Keterangan

1

NA dengan metodestreak

1. Sreak 12. Streak 23. Koloni


16/28



2 PDA denganmetode totol

1. Koloni

Dari tabel diatas dapat kita lihat bahwaadanya bakteri dan jamur yang tumbuh setelahmasa inkubasi dilakukan. Yaitu pada media 1yaitu medium PDA yang diberikan jamur padabuah mangga. Pada media kedua terdapat 1koloni jamur yang tumbuh didalam cawan

petri.Sebagai substrat untuk menumbuhkan

biakan murni maka dibuat media agar-agarcawan. Langkah awal untuk membuat media

agar-agar cawan dengan mencairkan mediabiakan yang sudah steril. Lalu sipakan ruanganyang bersih. Menyeka meja dengandisinfektan, misalnya alkohol 70% [2].

Cawan-cawan petri steril diletakkan dimeja. Didekat cawan tersebut disipakan

pembakar spritus atau nyala lampu Bunsen.Saat penuangan media dapat dilakukan secara

aseptik [2].Membiakan jamur pada suatu media juga

memerlukan teknik aseptik. Pekerjaan inisebaiknya dilakukan di tempat yang bersih dantidak banyak angin sehingga tujuan

mendapatkan biakan jamur yang murni sepertiyang diingikan dapat tercapai. Pekerjaan ini

biasanya dilakukan di dalam kotak inokulasiatau aparat alira udara berlapis. Jika dalammembiakan jamur yang tumbuh bukan hanyajamur yang diinginkan, tetapi jugakontaminannya maka permuniaan harus

dilakukan. Pemurnian dapt dilakukan denganmengambil sekelumit hifa jamur yang

tubuhnya terpisah dari kontaminannya.Sekelumit hifa tersebut kemudian dipindahkan

keagar-agar cawan yang telah disediakan [2].Goresan dalam caawan petri adalah

alat penting dalam mikrobiologi. merekamemungkinkan bakteri dan jamur untuk

tumbuh pada permukaan semi-padat untukmenghasilkan koloni terpisah. koloni ini dapatdigunakan untuk membantu mengidentifikasi

organisme, memurnikannya sehingga bebasdari kontaminan, dan menghasilkan klongenetik murni [5].

Kesimpulan

Kesimpulan dari praktikum adalah kitadapat mengetahui macam-macam bakteri danjamur yang tumbuh pada cawan petri. Denganmetode pengenceran dan dan penuangan.

Referensi

[1] Brooks Geo. F, Janet S. Butel, L.Nicholas Ornston. 1996. MikrobiologiKedokteran. Jakarta: EGC. Halaman 6.

[2] Gunawan, Agutin wydia. 2011. Usahapembibitan jamur. Jakarta: PenebarSwadaya. Halaman 53, 54, dan 56.

[3] Hajoeningtijas, Oetami Dwi. 2012.Mikrobiologi pertanian. Yogyakarta:Graha Ilmu. Halaman 2.

[4] Muslimin. 2014. Laporan praktikum

mikrobiologi dasarteknik biakan murni.Universitas Hulu Oleo. Halaman 2, 3,dan6.

[5] Piryadi, Triono Untung. 2013. Bisnis

jamur tiram. Jakarta: AgroMedia.Halaman 54.

[6] Thiel, Teresa.1999. streaking microbialcultures on agar plates.Department ofbiology: University of Missouri-St. Louis.

Halaman 1.


17/28



Pewarnaan bakteriWanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.



Abstrak

Pengamatan tanpa pewarnaan ini lebih sukar dan tidak dipakai untuk melihat bagian-bagian seldengan teliti, karena sel bakteri atau mikroba lainnya transparan atau semi transparan. Beberapa cara

pewarnaan yang penting ialah pewarnaan negatif, pewarnaan sederhana, pewarnaan gram, dan

pewarnaan spora. Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui identifikasi morfologi dan

bentuk mikroba. Bahan yang digunakan adalah biakan dari satu jenis bakteri (misal: Bacillus sp), zat

warna crystal violet, zat warna nigrosin, lugol, aquadest, alkohol, dan safranin. Hasil dari pengamtan

praktikum ialah dapat diketahui bahwa pada pewarnaan sederhanan bakteri berbentuk basil dengan

berwarna ungu, pada pewarnaan gram bakteri berbentuk skepto basil (batang bergerombol) bakteri

yang didapatkan ialah bakteri gram positif karena berwarna ungu, pada pewarnaan negative

didapatkan hasil bakteri tidak berwarna atau bening dengan latar belakang putih dan terdapat spora

berbentuk coccus.

Kata Kunci:bacillus sp /pewarnaan /mikroskop

Tanggal Praktikum : 3 Desember 2015; Diserahkan tanggal 11 Desember 2015

PendahuluanPengenalan bentuk mikroba, kecuali untuk

kelompok mikroalge, harus dilakukan melaluipewarnaan terlebih dahulu. Karena tanpamelalui pewarnaan, maka bentuk tersebut tidakakan dapat diamati secar jelas [3].

Observasi awal yang palingmikroorganisme yang dibuat dengan persiapanpatri. pewarnaan berarti mewarnaimikroorganisme dengan pewarna yangmenekankan struktur tertentu. Sebelummikroorganisme dapat bernoda, namun merekaharus tetap (terlampir) ke mikroskop [5].Bakteri bersifat tidak berwarna atau transparanbukan saja karena ukurannya sangat kecil jugakarena warna selnya transparan sehinggaapabila berada pada medium berair sangat sulitdilihat, apalagi dalam kondisi hidup. Untuk

mengamati bakteri yang kecil dan sulit dilihatpada kondisi aslinya, maka dilakukan upayauntuk mewarnai atau memasukkan zat warna

yang dapat mengotori (staining) ataumengubah penampakan dari keadaantransparan menjadi berwarna kontras. Metodepewarnaan dengan warna biologi menjadiprosedur yang penting dalam


3.Ersaniany 4.Nurul PratiwiQodrie, 4.Cep Hikmat Maulan Yusuf5. 6.Riska Prihatiningsih

Penanggung jawab: Koordiantor mata Kuliah Mikrobiologi

Dasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika


hubungannya dengan pengamatan

mikrobiologi dengan mikroskop cahaya [2].Mikroorganisme yang tidak diwarnai

umumnya tampak transparan (tembuspandang) bila diamati dengan mikroskopcahaya biasa. Hal ini karena sitoplasma selmikroba memiliki indeks bias yang hampirsama dengan indeks bias lingkungannya yangbersifat cair dan mikroba tidak mengadsorbsiatau membiaskan cahaya. Kontraks antara seldan latar belakangnya (medium) dapatdiperjelas dengan cara mewarnai sel-selmikroba tersebut dengan zat-zat warna [6].

Zat warna pada umumnya dapat dibagimenjadi dua golongan yakni pewarna yangbersifat basa atau asam. Pada zat warna basa,merupakan bagian yang berperan dalammemberikan warna yang dinamakan

kromatofor dan mempunyai muatan positiif.Sebaliknya, pada zat warna asam bagian yangberperan memberikan zat warna mempunyai

muatan negative. Zat warna basa lebih banyakdigunakan karena muatan negatif banyakditemukan pada dinding sel, membran sel, dansitoplasma sewaktu proses pewarnaan. Muatanpositif pada zat warna basa akan berikatan

dengan muatan negative dalam sel, sehinggamikroorganisme terlihat jelas [6].

Zat warna atau cat biologi adalahpersenyawaan organik yang mempunyai

gugusan kromatofor daan gugusan auxokromyang terikat dalam suatu cincin benzena.Gugusan kromatofor merupakan gugusan yang


18/28



dapat memberikan warna pada molekul cat,sedangkan auxokrom adalah zat yang dapat

memberikan disosiasi elektrolit-elektrolit padamolekul cat sehingga cat bersifat lebih mudah

bereaksi [6].Pewarnaan yang digunakan untuk melihat

salah satu struktur sel dinamakan pewarnaankhusus, sedangkan pewarnaan yang digunakanuntuk memilihkan mikroorganisme dinamakan

pewarnaan diferensial. Pewarnaan grammerupakan contoh pewarnaan diferensial yangmemilahkan bakteri menjadi kelompok grampositif dan gram negatif. Pewarnaandiferensial yang lain adalah pewarnaan Ziehl-Neelsen yang memilahkan bakteri menjadikelompok tahan asam dan kelompok tidaktahan asam [6].

Beberapa cara pewarnaan mikroba yaitu,

pewarnaan sederhana atau pewarnaan tunggaladalah salh satu cara pewarnaan yang hanyamenggunakan satu macam zat warna. Tujuanpewarnaan ini yakni untuk meningkatkankontras antara mikoorganisme dengansekellingnya. Zat warna yang biasa digunakanadalah metilen blue, crystal violet, karbolfuksin, safranin [6].

Pewarnaan negatif yaitu untuk mewarnaibeberapa mikroorganisme sulit diwarnai. Olehkarena itu, perlu ada metode khusus untukmaksud tersebut. Pewarnaan ini bukan untuk

mewarnai bakteri, tetapi mewarnai latarbelakangnya menjadi gelap. Caranya secaraumum dengan mencampur mikroba dalamsetetes tinta lalu menyebarkannya diatas kaca

obyek yang bersih [6].Pewarnaan gram merupakan salah satu

prosedur yang penting dan paling banyakdigunakan dalam laboratorium mikorbiologi.Pewarnaan gram juga merupakan tahap

penting dalam identifikasi bakteri, termasukpewarnaan diferensial [6].

Melihat dan mengamati bakteri dalamkeadaan hidup sangat sulit, kerena selainbakteri itu tidak berwarna juga transparan dansangat kecil. Untuk mengatasi hal tersebutmaka dikembangkan suatu teknik pewarnaan

sel bekteri, sehingga sel dapat terlihat jelas danmudah diamati. Olek karena itu teknik

pewarnaan sel bakteri ini merupakan salahsatucara yang paling utama dalam penelitian-penelitian mikrobiologi [1].

Tujuan dari praktikum ini adalah untukmengetahui identifikasi morfologi dan bentuk

mikroba.

Metode

Waktu dan tempat

Praktikum dilakukan pada hari Senin, 8Desember 2015, pukul 13.00-15.30 WITA.

Bertempat di Laboratorium Mikrobiologi danGenetika Molekuler, Fakultas Matematika dan

Ilmu Pengetahuan Alam, UniversitasMulawarwan, Samarinda.

Alat dan bahan

Alat

Peralatan yang digunakan adalah cawanpetri, objek glass, jarum ose, mikroskop, danpreparat ulas.

Bahan

Bahan yang digunakan adalah biakan darisatu jenis bakteri (misal: Bacillus sp), zat

warna crystal violet, zat warna nigrosin, lugol,aquadest, alkohol, dan safranin.

Cara kerja

Pewarnaan sederhanaDibersihkan preparat ulas dan meja dengan

alkohol sampai bebas lemak, kemudiandifiksasi diatas nyala lampu spiritus. Kemudiandiambil secara aseptik satu ose suspensi bakteridan diratakan diatas preparat ulas. Laludikeringkan anginkan preparat hinggamembentuk noda. Setelah kering difiksasi

dengan cara dipanaskan diatas nyala lampuspiritus. Lalu diteteskan crystal violet.Kemudian diamkan selama satu menit. Laludicuci dengan air mengalir sampai sisa-sisa zat

warna tercuci seluruhnya. Selanjutnya preparatdikering anginkan. Lalu diamati dibawahmikroskop, sel-sel bakteri akan tampakberwarna merah (ungu).

Pewarnaan gramDibersihkan preparat ulas dan meja dengan

alkohol sampai bebas lemak, kemudiandifiksasi diatas nyala lampu spiritus. Kemudiandiambil secara aseptik satu ose suspensi bakteridan diratakan diatas preparat ulas. Laludikeringkan anginkan preparat hingga lapisan

tipis sekali. Setelah kering difiksasi dengancara dipanaskan diatas nyala lampu spiritus.

Lalu diteteskan zat warna crystal violet.Kemudian didiamkan selama satu menit. Laludicuci dengan air mengalir sampai sisa-sisa zatwarna dicuci seluruhnya. Lalu teteskan lagi zatwarna lugol dan dibiarkan selam satu menit.

dicuci dan diangikan lalu diberi alkohol 95%selama 30 detik. Setelah itu dicuci dandianginkan. Kamudian diberikan lagi zat warna


19/28



berupa safranin dan dibiarkan dua menit.Setelah itu dicuci dan dikering anginkan. Lalu

diamati dibawah mikroskop dengan perbesaranyang kuat.

Pewarnaan negatif

Dibersihkan preparat ulas dan meja denganalkohol sampai bebas lemak, kemudiandifiksasi diatas nyala lampu spiritus. Kemudian

diambil secara aseptik satu ose suspensi bakteridan diratakan diatas preparat ulas. Laludikeringkan anginkan preparat hingga lapisantipis sekali. Setelah dikering difiksasi dengancara dipanaskan diatas nyala lampu spiritus.Kemudian diambil sedikit zat warna nigrosindan dicampurkan dengan suspense bakteriyang telah diletakan diatas preparat dandibiarkan selama satu menit. Selanjutnya

preparat dikering anginkan. Lalu diamatidengan mikroskop dengan kuat, sel-sel bakteriakan tampak transparan dengan latar belakanghitam.

Hasil dan pembahasan

Tabel 4.1 Pewarnaan bakteri

No Pewarnaan Hasil

1. Pewarnaan Sederhana

Pembesaran 10 x 10

Bakteriberbentuk

basildenganberwarnaungu

2. Pewarnaan Gram

Pembesaran 40 x 10

Bakteriberbentukskepto basil

(batangbergerombol) bakteriyangdidapatkanialahbakteri

gram positif

karena

berwarnaungu

3. Pewarnaan Negatif

Pembesaran 10 x 10

Didapatkanhasil bakteri

tidakberwarnaatau bening

dengan latarbelakang

merah danterdapatsporaberbentukcoccus.

Dari hasil praktikum dapat diketahui bahwa

pada pewarnaan sederhanan bakteri berbentuk

basil dengan berwarna ungu, pada pewarnaan

gram bakteri berbentuk skepto basil (batang

bergerombol) bakteri yang didapatkan ialah

bakteri gram positif karena berwarna ungu,

pada pewarnaan negative didapatkan hasil

bakteri tidak berwarna atau bening dengan

latar belakang putih dan terdapat spora

berbentuk coccus.

Pewarnaan sederhanaPewarnaan sederhana yaitu pewarnaan

dengan menggunkan satu macam zat warnadengan tujuan hanya untuk melihat bentuk selbakteri dan untuk mengetahui morfologi dan

susunan selnya. Pewarnaan ini dapatmenggunakan pewarnaan ini dapatmenggunakan pewarnaan basa pada umunya

antara lain Kristal violet, methylen blue,karbol, fucshsin, dan safranin [1].

Pewarnaan sederhana merupakan teknikpewarnaan yang paling banyak digunakan.

Disebut sederhana karena hanya menggunakansatu jenis zat warna untuk mewarnai organismetersebut. Kebanyakan bakteri mudah bereaksidengan pewarnaan-pewarnaan sederhanakarena sitoplasmanya bersifat basofilik (suka

dengan basa). Zat-zat warna yang digunakanuntuk pewarnaan sederhana umumnya bersifat

alkolin. Dengan pewarnaan sederhana dapat

mengetahui bentuk dan rangkaian sel-selbakteri. Pewarna basa yang biasa digunakan

untuk pewarnaan sederhana sederhana ini


20/28



dibagi lagi menjadi dua jenis pewarnaan.Tujuan pengecetan sederhana ini adalah untuk

melihat bentuk sel [1].

Pewarnaan negatifPewarnaan negatif menyebabkan mikroba

kelihatan trasnparan dan tampak jelas pisahdiantara medan yang gelap karena pewarnaanyang diberikan tidak menembus sel mikroba.

Teknik pewarnaan ini berguna untukmenetukan morfologi dan ukuran sel. Berbedadengan metode pewarnaa yang lain, padapewarnaan negatif olesan tidak mengalamipemanasan atau perlakuan lain dengan bahan

kimia. Metode ini sering digunakan terhadapterutama spirokerta yang sukar diwarnai [6].

Tinta yang dipakai dalam pewarnaannegatif adalah negrosin. Berhasil tidaknya

metode ini tergantung: a) kaca obyek harusbetul-betul bersih, b) jumlah negrosin yangdigunakan menetukan keberhasilan pewarnaan, dan c) campuran mikroorganisme harusdigesekkan diatas kaca obyek, bukan sekedardidorong [6].

Pewarnaan gramPewarnaan gram bertingkat adlah suatu cara

kerja pewarnaan yang paling berguna yangdilakukan dalam bakteriologi. Denganmenggunkan cara kerja ini maka bakteri dapat

digolongkan menjadi dua golongan yaitubakteri gram positif dan bakteri gram negative

[4].Pewarnaan gram mula-mula dikembangkan

oleh ahli histology bernama Christian gram(1884) dan kemudian disempurnakan oleh ahliahli lainnya. Perbedaan dalam pewarnaan ini

disebabkan oleh adanya variasi dalam lapisanpermukaan atau dinding dari kedua jenis sel.

Pada umumnya, organisme gram-positif

memberikan reaksi berbeda dari organismegram-negatif dengan senyawa-senyawa kiimia

[4].

Kesimpulan

Kesimpulan dari praktikum ini adalah

praktikum ialah dapat diketahui bahwa padapewarnaan sederhanan bakteri berbentuk basildengan berwarna ungu, pada pewarnaan gram

bakteri berbentuk skepto basil (batangbergerombol) bakteri yang didapatkan ialahbakteri gram positif karena berwarna ungu,pada pewarnaan negative didapatkan hasilbakteri tidak berwarna atau bening dengan

latar belakang putih dan terdapat sporaberbentuk coccus.

Referensi

[1]

Lestari, Rina. 2012. Makalah PewarnaanSederhana, Negative, Kapsul, dan Gram.Yogyakarta: Sekolah Tinggi IlmuKesehatan Yogyakarta. Halaman 2

[2] Subandi, H.M. 2014. Mikrobiologi.Bandung: PT Remaja Rosdakarya.Halaman 181

[3] Surianiria, Unus. 2005. MikrobiologiDasar. Jakarta: Papas Sinar Sinanti.

Halaman 38[4] Sutedjo, Mul Mulyani, A.G.

Kartasapoetra, dan RD. S Sastroatmodjo.

1991. Mikrobiologi Tanah. Jakarta: PTRineka Cipta. Halaman 308

[5] Tortora, Gerarad J, Berdell R. Funke, danChiritine L. Case. 2013. Microbiology An

Introduction. United states of America :Pearson Education. Halaman 67

[6] Waluyo, Lud. 2010. Teknik dan MetodeDasar dalam Mikrobiologi. Malang:UMM Press. Halaman 90


21/28



Pengamatan Jamur MikroskopisWanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.



Abstrak

Dalam perkembangan setiap jenis memiliki ciri koloni sendiri. Yang perlu diperhatikan dari kolonifungi adalah bentuk koloni, diameter, tepi koloni, permukaannya, konsistensi, warna, pembentukanpigmen dalam media dan apakah koloni tumbuh pada permukaan atau didalam media. Untukmengetahui setiap jenis mold selain ciri koloni juga perlu dilihat susunannya dibawah mikroskop.

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengidentifikasi jamur dari mangga busuk. Bahan yangdigunakan adalah jamur yang sudah disoslasi pada praktikum sebelumnya, Medium PDA, dan alkohol.

Metode yang digunakan adalah squre block. Hasil pengamatan pada praktikum ini adalah adanyajamur yang tumbuh pada medium PDA yaitu jamur Aspergillus flavus yang ditunjukkan dengan ciri-

ciri kepala konindia khas berbentuk bulat kemudian merekah menjadi beberapa koloni.

Kata Kunci:fungi/square block/Aspergilus flavus


PendahuluanDiantara tumbuhan-tumbuhan rendah

(bercahaya), maka golongan ganggang algadan golongan jamur merupakan kelanjutandaripada golongan bakteri. Apakah golonganganging itu langsung menjadi golongan bakteriataukah jamur yang menjadi kelanjutanlangsung dari bakteri. Hal ini sangat sukarditentukan. Peninjauan secara morfologi danfisiologi menentukan suatu golongan bakteri,yaitu ordo chalamydobacterialos, yang dapat

dipandang sebagai pangkal pertumbuhangolongan ganggang, hal mana dapat diketahui

dari sifat-sifatnya mengenai adanya laisanlender yang mengelubungi tubuh organismtersebut, akan tetapi pembiakannya denganmenggunakan konidia itu lebihmenggenangkan kepada sifat jamur [2].

Selanjutnya golongan jamur itu demikianluasnya sehingga penguasa dibidang ilmu

pengetahuan memerlukan keahlian tersendiri.Hanya jamur-jamur tingkat rendah masuk

dalam bidang mikrobiologi [2].Mikologi studi tentang jamur munculsebagai cabang botani. Seperti yang

ditunjukkan sebelumnya, jamur dianggapanggota kerajaan tanaman, struktur, siklus

hidup dan penyebaran telah menerima banyakperhatian dari ilmuwan awalnya dilatih sebagaiahli botani [1].


3.Ersaniany 4.Nurul PratiwiQodrie, 4.Cep Hikmat Maulan Yusuf5. 6.Riska Prihatiningsih


Dasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.

Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan GenetikaMolekuler Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si, FMIPAUnmul

Jamur benang atau biasa disebut jamurmerupakan organisme anggota kingdomfungi). Pertumbuhan jamur di permukaanbahan makanan mudah dikenali karenaseringkali membentuk koloni berserabutseperti kapas. Tubuh jamur berupa benangyang disebut hifa, sekumpulan hifa disebutmiselium. Miselium dapat mengandungpigmen dengan warna-warna merah, ungu,kuning, coklat, abu-abu dsb. Jamur jugamembentuk spora berwarna hijau, biru-hijau,

kuning, jingga, merah muda dsb. Warna-warnatersebut dapat menjadi ciri khas spesies jamur

[3].Jamur dapat tumbuh di hasil-hasil pertanian

sebelum dipanen, hasil panen yang sedangdisimpan maupun bahan makanan yang telahdiolah. Bahan makanan yang mengalami

dekomposisi oleh jamur dapat menjadi barbaubusuk dan bernoda dengan warna tertentu [3].

Aflatoksi merupakan nama sekelompoksenyawa yang termasuk mitoksin, bersifat

sangat toksik dan di produksi oleh jamuraspergillus flavus dan aspergillusprasiticus(wrather dan sweet, 2006) [3].

Tujuan praktikum ini adalahmengidentifikasi jamur dari mangga busuk.

MetodeWaktu dan Tempat

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Senin,14 Desember 2015 pada pukul 13.00-15.30

WITA. Bertempat di LaboratoriumMikrobiologi dan Genetika Molekuler,

Fakultas Matematika dan Ilmu PengatahuanAlam, Universitas Mulawaraman, Samarinda.


22/28



Alat dan BahanAlat

Peralatan yang digunakan adalah cawanpetri, alumunium foil, cover glass, objek glass,

silet, jarum ose dan mikroskop.

BahanBahan yang digunakan adalah jamur yang

pada praktikum sebelumnya, Medium PDA,

alumunium foil, kertas label dan alkohol.

Cara kerja

Disiapkan cawan petri, objek danalumunium foil yang digulung dan dibentukmenjadi bentuk huruf U. Disiapkan sampeljamur dari mangga busuk, lalu disipakan mediaPDA yang telah diisi, kemudian potong mediaPDA dengan menggunakan pisau/ silet, lalu

dipanaskan jarum ose, diambil suspense darimangga busuk, setelah itu diinokulasikandengan metode digoreskan pada keempat sisipinggiran agar, diambil cover glass denganpinset yang telah disterilkan dengan lampuBunsen, dicelupkan ke dalam larutan alkoholkemudian difiksasi diatas lampu Bunsen,diletakkan cover glass diatas media PDA yangtelah diinokulasikan suspense jamur, diamatikarakteristik dan koloni yang terbentuk.


Berdasarkan praktikum yang telahdilakukan, didapatkan hasil sebagai berikut:

Tabel 5.1 Pengamatan Jamur Mikroskopis

No. Nama Keterangan1

Aspergillus flavusPerbesaran 10x10

1. Konidiofor

2. Kondia

3. Strigma

Dari hasil pengamatan diketahui bahwajamur yang tumbuh yaitu aspergilus flavusditunujkkan dengan ciri-ciri Kepala konindiakhas berbentuk bulat, kemudian merekahmenjadi beberapa koloni

Aspergillus flavus yaitu koloni padamedium Czapeks dox mencapai diameter 3-5

cm dalam waktu 7 hari, dan berwarna hijaukekuningan karena lebatnya konidiofor yang

terbentuk. Kepala konindia khas berbentukbulat, kemudia merekah menjadi beberapa

koloni, dan berwarna hijau kekuningan hinggahijau tua kekuningan. Konindiofor berwarna

hialin kasar, dan dapat mencapai panjang 1,0mm [4].

Habitat sepsis ini umum ditemukan padakacang-kacang, rempah-rempah, biji yang

mengandung minyak, serelia, dan kadang-kadang pada buah-buahan yang dikeringkan[4].

Racun fungi yang umum dikenal dengannama mitoksin, dihasilkan oleh banyakjenisjamur, umumnya termasuk ke dalam jenisAspergillus, Penicillium dan Fusarium.Kelebihan sifat mitoksin ialah sifatkarsinogenik, yaitu sifat dapat merangsangterjadinya gejala atau proses kanker [5].

Aspergillus flavus dan aspergillusparasiticus merupakan jamur yang sering

didaptkan pada setiap daerah. Pada umunyaaflatoksin dapat dihasilkan oleh aspergillusflavus pada berbagai macam substrat yangberbantuk bahan makanan [5].

Kesimpulan

Kesimpulan dari praktikum ini adalahadanya jamur yang tumbuh pada medium PDAyaitu jamur aspergillus flavus link.

Referensi

[1]

Carlile, Michael J, Sarah C. Watkinson,dan Graham W. Gooday. 2001. The fungi.California: Aharcount science andtechnology company. Halaman 7

[2] Dwidjoseputro, D. 2005. Dasar-dasarmikrobiologi. Jakarta: Djambatan.

[3] Handajani, Noor Soesanti dan RatnaSetyaningsih. 2006. BiodiversitasIdentifikasi jamur dan deteksi aflatoksi B1

terhadap petis udang komersial.Journalof biological diversity. Vol 7. Jurusan

biologi FMIPA Universitas Sebelas maret

Surakarta, Puslitbang bioteknologi danbiodiversitas universitas sebelas maretSurakarta. Halaman 212-215

[4] Indrawati Gandjar. 2000. Pengenalan

kapang tropic umum. Jakarta: YayasanObor Indonesia. Halaman 22

[5] Suriawiria, Unus. 2005. MikrobiologiDasar. Jakarta: Papas Sinar Sinarti.Halaman 124-127.

1

2

3


23/28



Pengontrolan MikroorganismeWanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.



AbstrakDisinfektan berarti mematikan atau menyingkirkan organism yang dapat menybabakan infeksi.

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui seberapa bagusnya zat desinfektan untuk

membunuh kuman. Bahan yang digunakan adalah jamur yang pada praktikum sebelumnya, alkohol,

Medium PDA, rinso, lifebuoy, bayclindan cloramfenikol. Hasil pengamatan pada praktikum ini adalah

rata-rata daya hambat untuk disinfektan cloramfenikol sebesar 8,6 mm, kebesaran disinfektan rinso

tidak dapat dihitung, disinfektan bayclin sebesar 12,25 mm, dan disinfektan lifebuoy sebesar 9,4 mm.

Dari empat disinfektan yang telah diuji dapat kita ketahui bahwa disinfektan yang bagus yaitu rinso

karena zona hambatnya yang tidak bisa dihitung.

Kata Kunci:rinso/ cloramfenikol/ lifebuoy/ bayclin/ zona hambat.


Pendahuluan

Desinfektan yang digunakan oleh Joseph

Lister, tahun 1917 mengadung persenyawaan

fenol untuk mendisinfektasi peralatan

bedanhnya. Senyawa ini berupa asam karbol.

Sampai sekarang senyawa fenol masih

digunakan sebagai larutan baku penentu

keampuhan disinfektan [5].

Meskipun ada banyak definisi dari

desinfeksi , defenisi umum dari disifektan

adalah penghapusan dari bahaya kontaminasi

atau infeksi . Karena , tujuan pengujian

disinfektan adalah untuk memeriksa apakah

produk ini memenuhi tujuan mereka atau ,

lebih biasanya , untuk menentukan apakah

mikroorganisme dibunuh atau dihilangkan oleh

aksi disinfektan [1].

Untuk menguji kekuatan disinfektan dalam

menghambat pertumbuhan mikroba dapat

digunakan cakram kertas. Pada kertas cakram

ini dibasahi dengan disinfektan, kemudian

diletakkan pada lempengan agar yang telah

diinokulasi mikroba cara pengerjaan ini sama

dengan teknik pengujian antibiotika [5].




Penanggung jawab: Koordiantor mata Kuliah MikrobiologiDasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.

Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika


Lempengan agar kemudian diinkubasi

selama 48 jam. Bila disinfektan menghambat

pertumbuhan mikroba, maka akan terlihat zona

jernih disekeliling cakram kertas atau juga

dinamakan zona hambat. Luas daerah terang

inimenjadi ukuran kekuatan daya kerja

disinfektan [5].

Penggunaan efektif dari disinfektan dan

prosedur sterilisasi yang tepat merupakan

faktor yang penting dalam mencegah

terjadinya infeksi nosokomial. Pencucian dan

disinfeksi atau sterilisasi merupakan aktivitas

dasar dalam proses dekontaminasi alat

kesehatan dan lingkungan rumah sakit.

Pencucian berarti menghilangkan kotoran,

bahan organik, residu atau sisa bahan kimia

dan lain-lain. Bahan organik yang tertinggal di

alat kesehatan atau lingkungan rumah sakit

mungkin melindungi mikroorganisme dari

bahan antimikroba, mungkin juga mengikat

dan menginaktivasi aktivitas kimia bahan

antimikroba [4].

Tujuan praktikum ini adalah untuk

mengetahui seberapa bagusnya zat desinfektan

untuk membunuh kuman.

Metode

Waktu dan Tempat

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Senin,

14 Desember 2015 pada pukul 13.00-15.30Wita. Bertempat di Laboratorium Mikrobiologi

dan Genetika Molekuler, Fakultas Matematika


24/28



dan Ilmu Pengatahuan Alam, Universitas

Mulawaraman, Samarinda.

Alat dan Bahan

Alat

Peralatan yang digunakan adalah cawan

petri, cover glass, pinset, objek glass, kertas

cakram, cotton bath, mikroskop.

Bahan

Bahan yang digunakan adalah jamur yang

sudah diisolasi pada praktikum sebelumnya,

alkohol, Medium PDA, rinso, lifebuoy, bayclin

dan Cloramfenikol.

Cara kerja

Disediakan cawan petri yang sudah ada

medium PDAnya lalu dioleskan permukaan

medium PDA menggunakan cotton bath

Diambil kertas cakram dibasahi dengan

disinfektan kemudian diletakkan pada

lempengan agar yang telah diinokulasi

mikroba. Diletakkan kertas cakram tersebut

pada permukaan medium PDA dibagian tengah

masing-masing kuadran (tekan sedikit kertas

cakram untuk meletakkan dengan media,

diinkubasikan selama 24-48 jam. Diamati dandiukur zona hambat (daerah jernih disekeliling

kertas cakram).


Tabel 6.1 Pengontrolan Mikroorganisme

No Desinfektan Keterangan

1. Cloramfenikol Perhitungan rata-rata diameter yaitu:U1= 39 mmU1= 33 mm

U2 = 4,1 cmU2= 35 mm

U3= 35 mm

U1 = : 4

= 33 : 4= 8,25 mm

U2 = : 4= 35 : 4

= 8,75 mm

U3 = : 4

= 35 : 4

= 8,75 mm

Rataratakeseluruhan= (U1 +U2 +U3)

: 3= (8,25 + 8,75+8,75) : 3= 25,75

: 3= 8,6 mmJadi, daya hambatkeseluruhan

menggunakandisinfektancloramfenikoladalah sebesar 8,6

mm.

2. Bayclin Perhitunganrata-rata diameteryaitu:U1 =D1+D2+D3+D4

= 1,87 +1,7 + 1,9+ 1,7

= 7,1 cm= 71 mm

6 mmU1 = 65 mm

U2 =D1+D2+D3+D4

= 1,5 + 1,5+ 1,4+ 1,4

= 5,8 cm= 58 mm

6 mmU2 = 52 mm

U3 =D1+D2+D3+D4

= 1 + 0,9 +0,8+ 0,9

= 3,6 cm= 36 mm

6 mmU3 = 30 mm

U1 = : 4= 65 : 4= 16,25

mm

U2 = : 4


25/28



= 52 : 4

= 13 mm

U3 = : 4= 30 : 4= 7,5 mm

Rataratakeseluruhan= (U1 +U2 +U3)

: 3= (16,25 + 13+ 7,5)

: 3= 36,75

: 3= 12,25 mmJadi, daya hambatkeseluruhan

menggunakandisinfektan bayclinadalah sebesar12,25 mm.

3. Rinso Tidak berhasil

4. Lifeboy Perhitunganrata-rata diameteryaitu:U1 =D1+D2+D3+D4

= 0,6 + 0,6+ 0,5+ 0,7

= 2,3 cm= 23 mm

6 mmU1 = 17 mm

U2 =D1+D2+D3+D4

= 0,5 + 0,4+ 0,4+ 0,4

= 1,7 cm= 17 mm

6 mm

U2 = 11 mm

U3 =D

1+D

2+D

3+D

4

= 1,2 + 2,2+ 1,5+ 1

= 5,9 cm

= 59 mm 6 mmU3 = 53 mm

U1 = : 4

= 17 : 4= 4,25 mm

U2 = : 4= 11 : 4

= 0,75 mm

U3 = : 4= 53 : 4= 13,25

mm

Rata ratakeseluruhan= (U1 +U2 +U3)

: 3= (4,25 + 0,75+

13,25) : 3= 9,4 mm

Hasil pengamatan pada praktikum ini

adalah rata-rata daya hambat untuk disinfektan

cloramfenikol sebesar 8,6 mm, kebesaran

disinfektan rinso tidak dapat dihitung,disinfektan bayclin sebesar 12,25 mm, dan

disinfektan lifebuoy sebesar 9,4 mm. Dari

empat disinfektan yang telah diuji dapat kita

ketahui bahwa disinfektan yang bagus yaitu

rinso karena zona hambatnya yang tidak bisa

dihitung.

Disinfektan adalah bahan yang digunakan

untuk melaksanakan disinfeksi. Seringkali

sebagai sinonim digunakan istilah antiseptik,

tetapi pengertian disinfeksi dan disinfektanbiasanya ditujukan terhadap benda-benda mati,

seperti lantai, piring, pakaian [2].

Antibiotik adalah suatu substansi (zat-zat)

kimia yang diperoleh dari atau dibentuk dan

dihasilkan oleh mikroorganisme, dan zat-zat

itu dalam jumlah yang sedikit pun mempunyai

daya penghambat kegiatan mikroorganisme

yang lain. Antibiotika terbesar di alam, dan

memegang peranan penting dalam mengatur

populasi mikroba dalam tanah, air, limbah, dan

kompos. Antibiotika yang kini banyak


26/28



digunakan, kebanyakan dari genus bacillus,

penicillum, danstreptomyces [5].

Antibiotik yang pertama dikenal adalah

penisilin, suatu zat yang dihasilkan oleh jamur

penicillium. Penisilin ditemukan oleh A.

Fleming pada tahun 1929, namun baru tahun

1943 antibiotik ini banyak digunakan sebagai

pembunuh bakteri. Selama perang dunia kedua

dan sesudahnya bermacam-macam antibiotik

ditemukan, dan sekarang jumlahnya ratusan

[5].

Mikroba juga dihancurkan oleh prosedur

desinfeksi, meskipun organisme lebih tahan

dapat bertahan hidup . sayangnya, istilah

desinfeksi dan strelisasi kadang memilki arti

yang.

Kesimpulan

Kesimpulan pada praktikum ini adalah rata-

rata daya hambat untuk disinfektan

cloramfenikol sebesar 8,6 mm, kebesaran

disinfektan rinso tidak dapat dihitung,

disinfektan bayclin sebesar 12,25 mm, dan

disinfektan lifebuoy sebesar 9,4 mm. Dari

empat disinfektan yang telah diuji dapat kita

ketahui bahwa disinfektan yang bagus yaitu

rinso karena zona hambatnya tidak bisa

dihitung.

Referensi

[1] Ayliffes, Hugo, dan Rusell. 2004.Principles and practice of disinfection,

preservation and sterilization. Hongkong: blackwellpublishing. Halaman 220

[2] Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologimenguak dunia mikroorganisme.Bandung: CV. Yrama Widya. Halaman75-76

[3] Murray, Patrick R. 2013. MedicalMicrobiology. Halaman 10-11

[4] Susilo, Livia Novianto. 2010. Pengaruh

Penambahan Produk Enzim Pada

Disinfektan Terhadap Penurunan JumlahMikroba Pada Kateter Intravena Di CssdRsud Dr. Soetomo Surabaya. Surabaya:Universitas Katolik Widya Mandala

Surabaya. Halaman 4[5] Waluyo, Lud. 2010. Teknik dan metode

dasar dalam Mikrobiologi. Malang:Universitas muhammadiyah malang.Halaman 193-196


27/28



Analisis Mikroorganisme pada JamuWanda Aziizah Rahayu, Bayu Resandy, Geafanni Emilia Alya, Nur Jannah, Nuraenun Ayu L, Wirda Alawiah, dan Wulandari.



AbstrakObat bahan alam merupakan obat yang menggunakan bahan baku berasal dari alam. Tujuan dari

praktikum ini adalah untuk mengetahui pertumbuhan jamu yang ada pada jamu. Bahan yang

digunakan adalah Medium PDA, alkohol dan jamu pegal linu. Kesimpulan dari praktikum ini adalah

adanya 3 spesies yang terdapat pada cawan petri. Spesies 1 ciri-cirinya form: rhizoid, margin:

filamentous, elevation: flat, jumlah: 24. Spesies 2 form: puntiform, margin: entire, elevation: flat,

jumlah: 6. Spesies 3 form: circular, margin: entire, elevation: umbote, jumlah 7.

Kata Kunci:jamu pegal linu/ indetifikasi/ analisis mikroorganismeTanggal Praktikum : 19 Desember 2015; Diserahkan tanggal 21 Desember 2015

PendahuluanJamu pegal linu merupakan salah satu obat

tradisional yang banyak dikonsumsi masyarakt

indonesiaberdasarkan peraturan mentri

kesehatan RI No.246/menkes/per/v/1990 BAB

V pasal 23 bahwa segala jenis obat tradisional

dilarang mengdung bahan kimia hasil isolasi

atau sintetik yang berkhasit obat [1].

Obat tradisional merupakan salah satu

warisan budaya bangsa Indonesia yang telah

berabad-abad, untuk pemeliharaan danpeningkatan kesehatan serta pencegahan dan

pengobatan penyakit. Produksi dan

penggunaan oabt tradisional di Indonesia

memperlihatkan kecendrungan terus

meningkat, baik jenis maupun volumenya.

Semakin maraknya penggunaan obat

tradisional berdasarkan khasiat yang turun

temurun, semakin memperluas kesempatan

terjadinya pemalsuan simplisia, bahkan ada

beberapa jamu yang mengadung BKO (bahan

kimia obat) yang telah jelas dilarang

penambahannya, baik sengaja maupun tidak

sengaja ke dalam produk obat tradisional [1].

Obat bahan alam merupakan obat yang

menggunakan bahan baku berasal dari alam

(tumbuhan dan hewan) [3].Asisten pendamping: 1.Tunik Khoiriyah 2.Yusnaini




Dasar: Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si dan Eko Kusumawati S.

Si, M. P Serta Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan GenetikaMolekuler Dr. rer. nat. Bodhi Dharma M.Si, FMIPA Unmul

Obat bahan alam dapat dikelompokkanmenjadi 3 jenis, yaitu jamu, obat herbal

terstandar danfitofarmaka[1].

Sedangkan mikroorganime lainnya

memerlukan suatu medium yang sangat

kompleks, yaitu berupa medium ditambahkan

darah atau bahan-bahan kompleks lainnya[5].

Meskipun telah dijabarkan berbagai

macam jenis dari medium, perlu diiingat

bahwa tidak ada satupun perangkat kondisi

yang memuaskan bagi kultivasi untuk semuabakteri di laboratorium. Bertahannya

kehidupan bakteri bergantung pada bahan

makanan kondisi lingkungan [2].

Praktikum ini bertujuan untuk menganalisis

mikroorganisme yang terdapat pada sampel

jamu serta mengetahui kualitas sampel jamu.

Metode

Waktu dan Tempat

Praktikum dilakukan pada hari sabtu, 19

Desember 2015, pukul 08.00-10.00 WITA.

Bertempat di Laboratorium Mikrobiologi dan

Genetika Molekuler, Fakultas Matematika dan

Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas

Mulawarwan, Samarinda.

Alat dan Bahan

Alat

Peralatan yang digunakan adalah cawan

petri,tabung reaksi, spatula, vortex, rak tabung

reaksi, tabung Erlenmeyer, Bunsen,mikropipet, blue tip.


28/28


Bahan

Bahan yang digunakan adalah Medium

PDA dan jamu pegal linu. Cara kerja diambil

jamu.

Cara kerja

Diambil jamu dengan spatula. Dimasukkan

kedalam tabung reaksi. Dilakukan

pengenceran. Dimulai dari 10-1 sampai pada

pengenceran 10-5. Setelah pengenceran 10-1

lalu divortex dan pada pengenceran 10-2

diambil satu mikropipet dari pengenceran

pertama. Dimasukkan kedalam pengenceran

kedua dan dilakukan begitu seterusnya sampai

pada pengenceran 10-5. Pada pengeceran 10-5.

Dimasukkan satu mikropipet kedalam cawan

petri dan dicampur dengan media PDA.

Dihomogen. Ditunggu sampai padat.

Dimasukkan kedalam inkubator. Diinkubasi

selama 24 jam. Kemudia diamati.


7.1 Analisis Mikroorganisme Jamu Pada Jamu

Pegal Linu

No Nama Keterangan

1. 1. Sp 1

Form : rhizoidMargin :filamentaousElevation : flatJumlah : 24

2. Sp2Form : puntiformMargin: entireElevation: flatJumlah : 6

3.

Sp 3Form : circularMargin : entireElevation: umboteJumlah: 7

Dari hasil praktikum terdapat 3 spesies

yang pada cawan petri. Spesies 1 ciri-cirinya

form: rhizoid, margin: filamentous, elevation:

flat, jumlah: 24. Spesies 2 form: puntiform,

margin: entire, elevation: flat, jumlah: 6.

Spesies 3 form: circular, margin: entire,

elevation: umbote, jumlah 7.

Dalam praktikum ini, cara yang digunakan

untuk menganalisa mikroorganisme adalah

cara kuantitatif. Kuantitatif yaitu cara yang

digunakan dengan menghitung jumlah

mikroorganisme yang terdapat pada jamu [4].

Kesimpulan

Kesimpulan dari praktikum ini adalah

adanya 3 spesies yang terdapat pada cawan

petri. Spesies 1 ciri-cirinya form: rhizoid,

margin: filamentous, elevation: flat, jumlah:

24. Spesies 2 form: puntiform, margin: entire,

elevation: flat, jumlah: 6. Spesies 3 form:

circular, margin: entire, elevation: umbote,

jumlah 7.

Referensi

[1] Ernie H. Purwaningsih. 2013.Jamu, ObatTradisional Asli Indonesia Pasang SurutPemanfaatannya di Indonesia. JurnalKesehatan Indonesia. Vol. 1(2). Hal. 88 :

Universitas Indonesia.[2] Kartika. 2013. Pemantuan kualitas jamu

pegal linu yang beredar di kota cimahi.Universitas Jendral Ahmad Yani: Jurusan

Farmasi.[3] Murray, P. R., Ken S. R. dan Michael A.

P. 2013. Medical Microbiology. China.

Saunders.[4] Rivera, J. O., Loya, A. M. dan Ceballos.

2013. Use of Herbal Medicines andImplications for Conventional DrugTherapy Medical Sciences. Alternative

and Integrative Medicine Journal. Vol.2(6). Hal. 1 : University of Texas at ElPaso College of Health Sciences, El Paso,Texas, USA.

[5]

Volk dan Wheeler. 1993. Dasar-DasarMikrobiologi. Jakarta. Erlangga.

Documents

Wanda Aziizah Rahayu