مقاله پژوهشي

459

ارمغان دانش، مجله علمي پژوهشي دانشگاه علوم پزشكي ياسوج

(123)شماره پي در پي1396مهر و آبان ، 4، شماره22دوره

يانوباکترينانوذرات نقره با کمک عصاره س يستيسنتز ز

و ضد يضد سرطان يت هايفعال يابيا و ارزيالتورياس

آن ييايباکتر 2زيد عطا اله سادات شانديس ،*1صالح زاده يعل ،1پور يمترانه قاس

تهران،، يدانشگاه آزاد اسالم ،يتهران مرکزواحد ،يست شناسيزگروه 2، رشت، ايراناسالمي، آزاد دانشگاه رشت، واحد ،يست شناسيگروه ز 1

ايران

6/7/1396 رش:يخ پذيتار 6/3/1396 خ وصول:يتار

دهيچک

يستيز يها رود. امروزه، روش يمبه شمار يپزشک يها قيدوارکننده تحقيام يها از حوزه يکي يظهور نانوتکنولوژ نه و هدف:يزم

ت ضد يفعال يابيارز مطالعه نياهدف از .ها مورد توجه قرار گرفته است يمارياز ب ياريدر جهت مبارزه با بس نانو ذرات سنتز

.بودا يالتورياس يانوباکتريسنتز شده با عصاره سويب نانوذرات نقره ييايضد باکتر و يسرطان

يانوباکتريعصاره س کمکبا هاي نقره وسنتز نانو ذرات نقره با استفاده از احياي يونيب يدر اين مطالعه تجرب :يبررس روش

د نانوذرات نقره مورد ييو گذاره جهت تا يروبش يکروسکوپ الکترونيم، کسيتفرق اشعه ا مانند ييها کيتکن ا انجام گرفت.يالتورياس

لوشن يکرودايآزمون م ياليسر يساز نانونقره سنتز شده از روش رقت ييايباکتر ضد تيفعال يبررس قرار گرفت. به منظور يابيارز

يسرطان يرده سلول يور نانوذرات نقره بر يت سلولياستفاده شد. اثرات سم( MIC)ين حداقل غلظت بازدارندگييتع ياث برابر

يتومتريد و دستگاه فلوسيودايوم يديپروپ 5/0ن يت انکسين کيچن قرار گرفت. هم يابيمورد ارز MTT يبا روش رنگ سنج T47Dپستان

قرار گرفت. يابيز مورد ارزيمار شده با نانوذرات نقره نيت يسرطان يها و نکروز در سلول زان درصد آپوپتوزيم يبه منظور بررس

يخت شناسينانومتر با ر 30متوسط اندازه يداران نانوذرات ياوسنتز شده نشان داد که ينانو ذرات نقره ب يابيمشخصه :ها افتهي

يآنها برا يوسنتز شده نشان داد که حداقل غلظت مهارکنندگينانوذرات ب ييايضد باکتر يژگيو يابيبودند. ارز يغالب کرو

يج کشندگيتر بود. نتايل يليکروگرم بر ميم 5/12و 50، 25ب برابر يلوکوک اورئوس به ترتيو استاف يبومان نتوباکترياس، ياکليشياشر

ج يعالوه، نتاه بدارد. يسرطان يها سلول يبررو نقرهنانوذرات ماريو زمان ت به غلظت ينانوذرات نشان داد که اثر آن بستگ يسلول

.شدنشان T47D يدرصد در رده سلول 35از نوع آپوپتوز را يزان مرگ سلوليم يتومتريافلوس

در جهتتواند يمباشد و يم ييايو ضد باکتر يضدسرطان يها تيفعال يدارا يستيوسنتز شده به روش زينانوذرات ب :يريگ جهينت

رند.يقرار گ يشتريپاتوژن مورد مطالعه ب يها ياز باکتر يناش يها فونتدرمان سرطان پستان و ع

يياي، ضد باکتر ايالتورياس ، سيآپوپتوز، يسرطانضد :يديکل يها هواژ

زيست شناسي گروه ،رشت واحد، اسالمي آزاد دانشگاه، رشت، علي صالح زادهنويسنده مسئول: *

Email: salehzadeh@iaurasht.ac.ir

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

پور و همکاران ترانه قاسمي

(123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره 460

دمهمق

يکردهـا يرواز يکي ياستفاده از نانوذرات فلز

شتر مورد توجه قـرار يب بوده که يمدر جامعه عل رياخ

نقـره و مـس در از طال،تاکنون (.1ـ4)شده استگرفته

اسـتفاده يکروبـ يت ضـد م يـ ساخت نانو ذرات بـا فعال

، يان محصوالت مهم نـانوتکنولوژ يدر م .(5)شده است

کمتـر از بـا انـدازه (AgNPs)هنانوذرات نقـر يريکارگه ب

در جهــت يثرؤمــ ياديــکاندبــه عنــوان نــانومتر 100

ا يــبــزرگ يهــا ومولکــوليباز ياريرســاندن بســ

.(6و 7)انـد بـه کـار گرفتـه شـده يـي دارو يهـا مولکول

بـا يسـت يزمشخص يها يژگيو يدارا نانوذرات نقره

ــا ــوع يکاربردهـ ــان متنـ ــا در درمـ ــدقارچ يهـ ،يضـ

ــ11)يو ضدســرطان يوســريضدو ،ييايضــدباکتر (8ـ

ضــد کــردم عملســيمکان کــه هنــوز يدر حــال .هســتند

افتني. نشده است مشخص يقطعآن به طور ييايباکتر

ثر آنؤت مـ يمنجر به اهمذرات نقره نانو ت ين خاصيا

13)شده اسـت يست فناوريزو نانو يشناس ستيدر ز

يکاربردهــا يدارا ين نقــره در پزشــکيچنــ هــم .(12و

، پانسـمان يخـارج يها درمان عفونت چون هم يمختلف

ل يوســا ييو گنــدزدا يکيســ ت يهــا، کــاربرد آنتــ زخــم

ــک ــاخ دارد. يپزش ــا روش رًاي ــنتزيب يه ــه از يوس ک

ا از يـ هـا و يباکترقـار هـا، مثـل ييها سميکروارگانيم

بـه عنـوان روش ،کننـد يماهان استفاده يگ يها عصاره

يکـ يزيف ن سنتز يگزيار ساده و قابل قبول جايبس يها

انـد. از نانوسـاختارها شـده يده برخـ يچيپ ييايميشو

به دانش سـنتز نانوسـاختارها بـا يابين، دست يبنابرا

ــتفاده از روش ــا اس ســت و يط زيدوســتدار محــ يه

.(14)باشـد يمـ ار مهم يبس يستيز يها اصطالحا روش

ــوســنتزها مزايب ــاز قب ياريبســ ياي ــر، يهز ؛لي ــه کمت ن

د آسـان در يـ ان تولسـت و امکـ يط زيبا محـ يسازگار

ن در يچنــ هــم .(15)باشــند يمــاس بــاال را دارا يــمق

به استفاده از دما و فشـار يازين يوسنتزيب يها روش

، سـت ين يمسـ ييايميشـ يهـا بيـ ن ترکيچنـ باال و هـم

و يک روش اقتصـاد يـ کرد به عنـوان ين روين ايبنابرا

در يذرات فلـز انود نـ يـ تواند در جهت تول يمارزشمند

يها در روش. رديمورد استفاده قرار گ ياس صنعتيمق

عصاره موجودات زنـده ممکـن اسـت هـم بـه ،يستيز

اء کننــده و هــم بــه عنــوان عوامــل يــعنــوان عوامــل اح

از تجمـ نـانوذرات در يريپوشش دهنده جهت جلـوگ

ــانوذرات نقــره عمــل ک ــ. کــاهش ننــدســنتز ن Ag +وني

جـود مو يستيز يها ب مولکوليترک به وسيلهتواند يم

يادهي، اسـ هـا نيهـا، پـروتئ مين عصاره مانند آنزيا در

ط يمحـ يهـا کـه بـرا نيتـام يدها، و ويساکار ي، پلنهيآم

ان ين ميدر ا .(16ـ22)، انجام شودخطر است يست بيز

يها منبعـ يانوباکتريسمشخص شده است که عصاره

يدهايهـا، اسـ ديـ با ارزش ماننـد کارتنوئ يها بيترکاز

يهـا بيـ ر ترکيدها و ساي وپ تيدها، ليساکاريچرب، پل

در ييهـا بيـ ترکباعث سـنتز باشند که يمفعال ست يز

ل مـورد توجـه يـ ن دليهم بهلذا شوند. يمکشت طيمح

ه يـ ثانو يهـا تيـ متابول. (23)اندپژوهشگران قرار گرفته

( و پـس از درصـد 49ال )يالتورياسـ يدر اعضا عمدتًا

16)(، کروکوکـال درصـد 26نوسـتوکال) به وسـيله آن

4گونماتال)ي( و اســتدرصــد 6(، پلوروکاپســال)درصــد

يکاربردهــــا( وجــــود دارنــــد. از جملــــه درصــــد

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

آنسنتز زيستي نانوذرات نقره و ارزيابي فعاليت هاي ضد سرطاني

461 (123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره

در تـوان يمـ يو پزشک يداروسازها در يانوباکتريس

ضـد مختلـ يهـا بـه عنـوان داروهـا آن يريبه کارگ

ن، مهار يتوتوکسياضد سرطان، ضد قار ، سروس، يو

کـه يينجـا . از آ(24و 25)ره اشـاره نمـود يو غ يميآنز

ــترک يا دارايالتورياســ جــنس يســتيفعــال ز يهــا بي

يايـ اح ييکه توانـا رسد يمبه نظر ،باشد يم ي شتريب

ــابرا .باشــد يمــ مــک نقــره را داران يريکــارگه ن بــيبن

ت يـ از اهم ينـانوذرات فلـز وسنتز يبجهت هاآنعصاره

ن در مطالعـه يبنـابرا .(27و 28)برخوردار اسـت ييباال

ــر ب ــان يحاض ــنتز ن ــره وس ــک و ذرات نق ــا کم روش ب

عصـاره به وسيلههاي نقره رسوبگذاري با احياي يون

در قدم بعد،ا انجام شده است. يالتورياس يانوباکتريس

هيـ علذرات نقره سنتز شده نانو ييايباکترت ضد يفعال

.انجـام گرفـت يگـرم مثبـت و منفـ يها يباکتر يبرخ

ز و زان درصـد آپوپتـو يـ م يابيارزمنظور بهن، يچن هم

T47D پسـتان يسـرطان يهـا القا شده در سلولنکروز

دسـتگاه بـا سلول ها نينقره، ا اتنانوذر باشده ماريت

.قرار گرفتند يابيارز مورد يتومتريفلوسا

يروش بررس

ا يالتورياسـ يانوباکتريسـ استوک ه يپس از ته

الن، يدانشگاه گـ ياهيگ يولوژيزيشگاه بخش فياز آزما

آلمان( کشت داده گما،ي)سيمنف لندريط کشت زايدر مح

ط کشت يمح تر ازيک ليبه ها يانوباکتريشد. س س س

کرومـول يم 60شـدت نـور ط يدر شـرا و شدند حيتلق

سـاعت 12)نـوري دوره با هيثان بر برمترمرب فوتون

200 يهـواده بـه همـراه يکيسـاعت تـار 12 و نـور

درجــه 26اتاقــک يدر دمــا )قــهيدق در تــريل يلــيم

ط کشـت ين مدت، محـ يپس از ا .ندگرفت رقراوس يسلس

واتمن با قطر منفـذ ياز کاغذ صاف يانوباکتريس يحاو

کرومتر عبور داده شد و مخلوط صـاف شـده يم 45/0

، يانوباکتريه عصاره سـ يد. به منظور تهيزه گرديليوفيل

تـر اتـانول يل يليم 200گرم پودر خشک شده آن با 6

بانه روزک شـ ي يطدر ط همزدن يتحت شرادرصد 50

يمحلول مورد نظـر از کاغـذ صـاف س س مخلوط شد.

تـا خـالء در ريـ تقط دستگاه به وسيلهعبور داده شد و

.شد نييتع آن غلظت و طيتغل يخشک حد

ســــــنتز نــــــانو ذرات نقــــــره از روش ويب

بـه وســيله هــاي نقـره گـذاري بــا احيـاي يـون رسـوب

به منظـور شد. ا انجاميالتورياس يانوباکتريسعصاره

از يسـ يسـ 2بـا افـزودن سنتز نـانو ذرات نقـره، ويب

)مرک، آلمـان( ترات نقرهيبه ن انوباکتريسحجم عصاره

زدن و ط هـم يمـوالر تحـت شـرا يلـ يم 01/0با غلظـت

ک سـاعت از زمـان يـ در مدت زمـان شگاهيآزما يدما

يايـ احن مـدت، يـ پس از گذشـت ا . انجام گرفتواکنش

گ واکـنش ر رنـ ييـ بـه همـراه تغ Ag0بـه +Ag يون هـا ي

يو شستشـو يسـاز مشاهده شد. بـه منظـور خـالص

در سـه بـار بـا آب مقطـر نانوذرات، مخلـوط حاصـل

وژ يفيسـانتر قـه يدق 20بـه مـدت قهيدور بر دق 13000

ر رنـگ واکـنش ييـ وسنتز نانوذرات نقره بـا تغ يبشدند.

ســاعت از زمــان واکــنش مشــاهده شــد. 1مــدت يطــ

آن منجر بـه ثرهؤبا کمک ماده م يانوباکتريعصاره س

ذرات نقـره شـد. ترات نقره به نانويکامل نمک ن ياياح

ر رنــگ محلــول مشــخص کننــده ييــنــد، تغيآن فريــدر ا

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

پور و همکاران ترانه قاسمي

(123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره 462

ل نـانوذرات نقـره در يترات نقره و تشـک ينمک ن ياياح

ــواکــنش ــاح باشــد. يم ــکامــل ياي ــه +Ag يهــا وني ب

قـرار يابيارزط مورد ير رنگ محيينانوذرات نقره با تغ

يسـتالوگراف يشناخت نوع ساختار کر ربه منظوگرفت.

بـه (1)(XRD)کـس يپـراش اشـعه ا نانوذرات نقره آزمـون

کشـور ساخت ,PERT PRO Panalitical, Xدستگاهوسيله

0در دامنه (θ)تتا 2ه يزاوو CuKaبا تشعش المپ هلند

ــا ــمــورد تجزدرجــه 110ت ــه و تحلي ــرار گرفــتي .ل ق

نـانوذرات، و شـکل يشناس ختيرافتن ين جهت يچن هم

KV)مـدل (2)(TEM)گذاره يالکترون يکروسکوپيمز يآنال

100Zeiss) قـرار اسـتفاده مـورد ، ساخت کشـور آلمـان

ک يـ ،يلم کربنيد فيگر يبر رو ن منظور،يا يبرا. گرفت

ذرات قرار داده شـد نانو يونيقطره از نمونه سوس انس

کمـک شگاه با يآزما يو پس از خشک شدن آن در دما

گذاره بـا ولتـاژ شـتاب يکروسکوپ الکترونيدستگاه م

شد. يبردار عکسلوولت يک 120دهنده

نقـره اتضدميكروبي نـانوذر تيخاص يبررس

انجـام شـد. (MIC)روش حداقل غلظت مهاري به وسيله

كـه يهـاي به كمترين غلظت از تركيب MICمقدار غلظت

شـود. نمايد، گفته مـي رشد ميكروارگانيسم را مهار مي

ــد ــ نيبـ ــاکتر ور،منظـ ــدا بـ ــا يابتـ ــاريب يهـ يزا يمـ

ــآ ــان نتوباکتريس ــتاف ،يبوم ــوس و لوکوکوسياس اورئ

بـه يکشـت مـا طيدر محـ (CFU/mL 106~)يکلاياشرشـ

انکوبـه گراد يدرجه سانت 37 يساعت در دما 12مدت

يهـا وني. به منظور به دسـت آوردن سوس انسـ شدند

اسـتاندارد يار کـدورت سـنج يکنواخت و همگن از معي

هـاي متـوالي از س س رقتم مک فارلند استفاده شد. ين

، 50، 100، 200از نقــره در محــدوده غلظــت اتنــانوذر

تر بـر يکروليم 78/0، 56/1، 125/3، 25/6، 5/12، 25

يا خانـه 96هـاي پس از آن پليـت د.يه گرديته تريل يليم

از محـيط مولرهينتـون تـر يکروليم 95كمـ توزيـ به

تـر يکروليم100 از تلقيح ميكروبي و تريکروليم 5براث،

مختل مـورد اسـتفاده يها نقره با غلظت اتاز نانوذر

عنـــوان ه ت بـــيـــپل ييچاهـــک انتهـــاقـــرار گرفتنـــد.

محيط مولر هينتون براث بـا تريکروليم 95شاملشاهد)

بـدون نـانوذرات( منتخـب يها ياز باکتر تريکروليم 5

1دت م محتويات هر چاه روي شيكر بهاستفاده شد.

مخلوط گرديد و س س در قه يدور بر دق 100 در قهيدق

سـاعت انكوبـه 24مدت بهگراد يدرجه سانت 37دماي

هـا بـا چاهـک يمکـدورت تمـا مـدت، نيـ شد. پـس از ا

620زا در طـول مـوج ياستفاده از دستگاه قرائت گر اال

کـه کـدورت آن بـه علـت يچاهک نانومتر خوانش شد.

MIC بود، بـه عنـوان مقـدار تر شفاف يعدم رشد باکتر

. نانوذرات نقره گزارش شد.

ــم ــميــــ ــانويزان ســــ ذرات از روش ت نــــ

ــگ ــنج رن -MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5 يس

Diphenyltetrazolium Bromide) ــارز ــد. يابيـ رده شـ

تويانسـت يسلول بانک از (T47D)پستان يسرطان يسلول

کشـت طيمحـ در ها شد. سلول يردايخر رانيا پاستور

RPMI1640 ين گـاو يسـرم جنـ درصـد 10 با شده مکمل

(FBS)(1) رطوبـت ، د کربنياکس يد درصد 5 طيشرادر

1-X-Ray Diffraction 2-Transmission Electron Microscopy 3-Fetal Bovine Serum

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

آنسنتز زيستي نانوذرات نقره و ارزيابي فعاليت هاي ضد سرطاني

463 (123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره

در فالسـک گـراد يدرجـه سـانت 37 يو دما درصد 95

هـا از فالسـک سـلول .شـدند داده کشـت کشت سـلول

. پـس از ندشـد يآور و جمـ يجداسـاز يکشت سلول

بـه هـر يون سـلول يسوس انسـ ، ط کشـت يافزودن مح

تـر از يل يلـ يم 100بـا حجـم يا خانـه 96ت يـ خانه از پل

منتقل شد و به مـدت 105 زانيم يون سلوليسوس انس

پس از گذشـت ط کشت انکوبه شد.يساعت در شرا 24

نـانوذرات و شـد ه يـ ط کشـت تخل يمحـ ،زمانن مدت يا

100و 50و 25، 5/12، 25/6، 12/3 هـاي با غلظـت نقره

96 تيــپل چاهــک ازتــر بــه هــر يل يلــيبــر م روگــرمکيم

مـار يت يها سلول يحاو يها چاهکاضافه شد. يا خانه

کنترل در نظر گرفته نشده با نانوذرات به عنوان گروه

تـر يکروليم 10، مقـدار ونيان انکوباسـ يـ پس از پا شد.

بـه هـر تـر يليلـ يگـرم بـر م يليم 5با غلظت MTTرنگ

ون يسـاعت انکوباسـ 4شـد و بـه مـدت اضافهچاهک

بـنفش يها ستاليکرحل نمودن به منظورانجام گرفت.

زنـده( هـاي سـلول يمولکـول رمازان )شاخصوفرنگ

ل يـ مت يدميكروليتـر 100 چاهـک د شـده بـه هـر يتول

يجـذب نـور س س شد.اضافه (1)(DMSO)ديسولفوکسا

570و در طـول مـوج زايگر اال دستگاه قرائت به وسيله

درصـــد 50زان دوز يـــ م. ديـــ گرد ثبـــت نـــانومتر

ج برحسـب درصـد ينتـا محاسـبه شـد. (2)(IC50)يکشندگ

مـار يت يسلول ها مار شده نسبت بهيزنده ت يها سلول

ي)جذب نور100؛ شدمحاسبه ريز يرابطه ، از نشده

مـار يت يهـا سـلول ي/جذب نـور مار نشدهيت يها سلول

زنده يسلول ها درصد(= نانوذراتبا شده

زان درصـد آپوپتـوز و يـ م يابيـ ارزمنظـور به

مـار يت T47D يسـرطان يهـا القا شده در سـلول نکروز

بـا هـا سـلول نيـ نقـره، ا اتنـانوذر IC50شده با غلظت

ه يفاز اول يدر ط مطالعه شدند. يتومتريدستگاه فلوسا

ييجـا ه ب شده آپوپتوز، براساس جا يزير مرگ برنامه

ــ از (3)(PS)نيل ســريديفســفات يدهاي يفســفول ــم الين ه ي

يغشـاء سـلول يه خارجيم اليبه ن يغشاء سلول يداخل

PIن معـرف يچنـ رند. هميگ يمرنگ 5ن يبا معرف انکس

ــن( 4) ــآم باعــث رنــگ يز در زمــان نکــروز ســلولي يزي

يالقـا درصـد يابيـ ارز .شـود. يمـ سـلول يهـا هسـته

مـار يت T47D يسرطان يسلول رده درو نکروز آپوپتوز

Annexin از روش نقـره بـا اسـتفاده ات شده با نـانوذر

V/propidium iodide (PI) تيـ کاساس دسـتورالعمل برو

ــخ ــام Apoptosis (Roch, Germany) صيتش ــت انج . گرف

IC50سـلول/چاهک( بـا غلظـت 1×105) T47Dيهـا لسلو

مـار يت يا خانـه 6ت يدر پل ساعت 24به مدت ات نانوذر

بافر با ها وژ، سلوليو سانترف يآور از جم ند. پسشد

PBS (5) تـر از يکروليم 20حجم با شسته شدند و س س

قـه يدق 15بـه مـدت د يديدوم يديو پروپ 5ن يرنگ انکس

ــاريدر شــرا ــه شــدند. يکيط ت ــدر اانکوب ــه، ي ن مطالع

ــلول ــا س ــاريت يه ــده م ــانوذرات نش ــا ن ــوان ب ــه عن ب

زانيـ م تيـ در نها .کنترل مورد اسـتفاده قـرار گرفتنـد

بــه وســيلهنکروز شــده وز/آپوپتــ يهــا ســلولدرصــد

1- Dimethyl Sulfoxide 2-Half Maximal Inhibitory Concentration

3- Phosphatidylserine 4-Propidium Iodide

5-Phosphate Buffered Saline

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

پور و همکاران ترانه قاسمي

(123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره 464

مورد مطالعه قـرار (Cyflow, UK) يتومتريدستگاه فلوس

گرفتند.

از اســتفاده بــا شــده يآور جمــ يهــا داده

ک يـ انس يز واريآنال يو آزمون آمار SPSSافزار نرم

نيچنـ هـم تجزيه و تحليـل شـدند. يتوکتست و طرفه

براسـاس پـژوهش ن يـ دست آمـده در ا ه ج بينتا يمتما

ن يانگياقل سه بار تکرار استوار است که با گرفتن محد

شد. يابيارزرات ييزان تغيار ميو محاسبه انحراف مع

ها افتهي

اشـعه تفـرق يـ از ط حاصـل يها کيپ يالگو

د ييـ أتنقـره را در نمونـه يهـا سـتال يل کريتشک، کسيا

(θ) تتـا 2 يايـ زوا درمجـزا يهـا کيـ پ (.1ريتصونمود)

ب يکه به ترت شود يم مشاهدهرجه د 77و 64 ،44، 38

( نقره 311)و (220)، (200)، (111) يستاليبا سطوح کر

.دارد يخوان هم

نانوذراتTEM يکروسکوپ الکترونير ميوتص

2 ريتصودر ا يالتوريعصاره اس باوسنتز شده يبنقره

کروگـراف يمج ينتـا با توجه بـه نشان داده شده است.

در يا کـه انـدازه شدمشخص نانوذرات نقره يالکترون

يشکل کـرو به و غالبًا دارندنانومتر 30تا 5محدوده

.شوند يمده يد

ياليسـر يريـ گ ز آزمـون رقـت ج حاصـل ا ينتا

نـانوذرات .محاسبه شـد ها يه باکترينقره عل نانوذرات

گـرم يهـا يه بـاکتر يعل يخوبت ينقره سنتز شده فعال

. بـه نشـان داد ن مطالعـه از خـود يـ در ا يو منفـ مثبت

و يبومــان نتوباکترياســ ،ياکليشــياشر کــه يطــور

5/12و 50و 25 يهـا در غلظتلوکوک اورئوس ياستاف

ب مهار شدند.يتر به ترتيل يليکروگرم بر ميم

نقـره اتنـانوذر ير سـلول يـ ن مهـار تکث يشتريب

کروگــرم در يم 100و 50 يهــا در غلظــت يوســنتزيب

دار يمعنـ يمـار آکـه از لحـا محاسبه شـد تر يل يليم

زمـان يط در IC50يمقدار عدد(. >001/0pبوده است)

تـر يل يلـ يکروگـرم در م يم 66/29ساعت در غلظت 24

هــا ســلول يحاصــل از بقــا جينتــا محاســبه شــد.

نشــان داده 3 ريتصــو درســاعت 24در مــدت زمــان

شده است.

يتومتريفلوسـا يحاصـل از بررسـ يافته هاي

کـه يطـور همـان .شان داده شده استن 4 ريتصودر

مربـ سـمت چـپ پـايين، درصـد ،دهد يمنشان جينتا

هاي زنده، و مرب سـمت راسـت پـايين، درصـد سلول

يهـا ن مرب يچن دهد. هم يمنكروز را نشان يها سلول

ــه ترت ــاال بـ ــت بـ ــمت راسـ ــپ و سـ ــمت چـ ــسـ ب يـ

دهنـد. يمي را نشان خيرأاوليه و ت يدرصد آپوپتوزها

هـا ، سـلول نـانوذرات نقـره هاي تحت تيمار با در نمونه

درصـد 35 زانيبه م از نوع آپوپتوز يوارد مرگ سلول

.شدند

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

آنسنتز زيستي نانوذرات نقره و ارزيابي فعاليت هاي ضد سرطاني

465 (123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره

اسيالتوريا سنتز شده با استفاده از عصارهبيو دست آمده از نانوذرات نقره ه : الگو پراش اشعه ايکس ب1 تصوير

( از نانوذرات نقرهTEMگذاره ) ميکروگراف الکتروني :2تصوير

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

پور و همکاران ترانه قاسمي

(123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره 466

به صورت درصد جينتا .ساعت 24نقره در مدت زمان اتمختل نانوذر يها غلظت تيمار شده با T47D يسلولرده ي زنده مانيدرصد :3 تصوير

(.05/0P ،**:01/0P ،*** :001/0P:*دار درنظر گرفته شده است ) معني >05/0pو کنترل گزارش شده است يها با نمونه سهيبقا در مقا

: نتايج آناليز فلوسايتومتري تاثير نانوذرات بر روي رده سلولي سرطان پستان. )ال ( نمونه كنترل تيمار نشده )ب( نمونه تحت تيمار با 4تصوير

Q4تا Q1منحني دو بعدي به چهار ناحيه افزار دستگاه و تقسيم نقاط ثبت شده در ها با استفاده از نرم تجزيه و تحليل دادهنانوذرات بيوسنتزي.

نمايانگر سلولهاي آپوپتوز شده ديررس يا Q2، ناحيه +PIو -Annexin-Vنمايانگر سلولهاي نکروزي با ويژگي Q1به نحوي که ناحيه . صورت گرفت

هاي آپوپتوز شده نمايانگر سلول Q4 ناحيهو -PI و -Annexin-V هاي سالم با ويژگي نمايانگر سلول Q3ناحيه،+PIو +Annexin-Vنکروزي با ويژگي

کانال در که بود Annexin-V کنژوگه با (FITC)فلوئوروکرومهاي مورداستفاده، فلوئورسين ايزوتيوسيانات. باشد يم -PIو+ Annexin-Vجوان با ويژگي

FL1فيکواريترين و(PE) با کنژوگه PI کانال در که بود FL3 قرارگرفت ارزيابي مورد.

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

آنسنتز زيستي نانوذرات نقره و ارزيابي فعاليت هاي ضد سرطاني

467 (123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره

بحث

وسنتز نانوذرات نقـره بـا يب در پژوهش حاضر،

ا انجام گرفـت. يالتورياس يانوباکتريپوشش عصاره س

دار کننـده و يـ به عنـوان عامـل پا يانوباکتريعصاره س

نشـان داده شـد. يپوشش دهنده نانوذرات نقره به خوب

يرده سـرطان يهـا سـلول يبـررو MTTج آزمـون ينتـا

اد که نـانوذرات ساعت نشان د 24 يدر ط (T47D)پستان

وابسته به زمان و غلظـت يکشندگ ييتوانا ينقره سنتز

يابيـ ن مطالعـه، ارز يـ گر اين در بخش ديچن را دارند. هم

دستگاه به وسيله يوسنتزينانوذرات ب ينوع مرگ سلول

امروزه نانوذرات نقـره بـه انجام گرفت. يتومتريفلوسا

در کـانون يکروبيعنوان عامـل ضـد سـرطان و ضـدم

از .ا قرار گرفتـه اسـت ير دندر سراس ها محققت توجها

ســنتز يهــا در روش يکــه مشــکالت عمــده ا ييآنجــا

از بـه يوجود دارد، ن ينانوذرات فلز ييايميو ش يکيزيف

يريمن، مقرون به صرفه و بدون به کـارگ يا ييها روش

رسد. در يمبه نظر يمضر ضرور ييايميش يها بيترک

يبــه عنــوان روشــ يســتيکــرد ســنتز زيان، رويــن ميــا

سـت و مقـرون بـه صـرفه يط زيآسان، سازگار با محـ

ــاره ــتفاده از عصـ ــا اسـ ــانوذرات بـ ــنتز نـ ــت سـ جهـ

ها پژوهش يط .(28)ها مطرح شده است سميکروارگانيم

يمتعـدد يکيولـوژ يهـاي ب و مقاالت گذشته، احياءكننده

در شـده اسـت. گـزارش يجهـت سـنتز نـانوذرات فلـز

ــژوهش ــاران Devi پ ــد، من و همک ــر ش ــبز تش ــنتز س س

Ulva Lactuca جلبـک يق عصـاره ينانوذرات نقره از طر

تـا 20با ابعاد ينانوذرات ،آنهاق يدر تحق. نشان داده شد

يآن بر رو يو اثرات ضد سرطان سنتز شدنانومتر 56

، MCF-7، پسـتان HepG-2کبـد يسـرطان يسلول يرده ها

. (29)ده شـ نشـان داد Vero و سلول نرمـال HT29کولون

بـه نـانوذرات نقـره يسـت يسنتز زو همکاران يبر آباد

را سـوژنوم يوم کرايليسيگونه استاندارد قار پن وسيله

ها نيپروتئ ه شدمطرح نمودند. در مطالعه آنها نشان داد

يايت احين قار قابليا به وسيلهآزاد شده يها ميو آنز

نانوذرات نقره يد برون سلولينقره و تول يفلز يها وني

يسرطان ضدوارکننده ديام اثراتن يچن هم .(30)ارندا در

يهـا جلبـک عصـاره کمـک نقـره بـا اتنانوذروسنتز يب

Laurencia aldingensis و Laurencia sp ــعل ــرطان يـ ه سـ

و همکـاران رايـ و به وسيله (MES-SA) رحم يسارکوما

يزيـ ر القاء مـرگ برنامـه يبه طور کل .(34)شدگزارش

جـذاب در يکردهـا ياز رو يکـ ي ا آپوپتوزي يشده سلول

از ياريدر بســ رود. يمـ بـه شـمار هـا درمـان سـرطان

نـانوذرات نقـره گذشته مشـخص شـد کـه يها گزارش

يو القـاء مـرگ سـلول يريـ ، ضـد تکث ييضدرگزااثرات

ــه ــر برنام ــلول يزي ــده)آپوپتوز( س ــتندش . را دارا هس

يها ميآنز يها ان ژنيش بيافزاالقاء آپوپتوز با نيچن هم

ژن در يآزاد اکســ يهــا کــاليراد يو آزادســاز ســ ازکا

ن يـ در ا .(35)ده استيبه اثبات رس يشگاهيط آزمايشرا

ــتحق ــ قي ــرف انکس ــرا 5ن ياز مع ــارز يب درصــد يابي

بـه د يـ دايوم يپروب معرف آپوپتوز شده و از يها سلول

نکـروز شـده اسـتفاده يها سلول تعداد يابيارز منظور

ــشــد. در تحق ــوني ــا يق کن ــ يتومترياج فلوســينت ر يثأت

القاء مرگ ييتوانا وسنتز شده نشان داد کهينانوذرات ب

سرطان يآپوپتوز نسبت به نکروز در رده سلول يسلول

زان يـ ن ميا يقبل يها را دارد که در گزارش T47D پستان

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

پور و همکاران ترانه قاسمي

(123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره 468

القاء آپوپتوز ييتوانان يبنابرا انجام نگرفته بود.سه يمقا

ق يـ ن تحقيـ ا دروسنتز شـده ينانوذرات نقره ب به وسيله

هـا بـه شـمار ثر در جهت درمان سـرطان ؤم يکرديرو

ييايـ باکتر ضـد تيـ فعال مختل يها هدر مطالع رود. يم

ــه روش ــره ســنتز شــده ب ــانوذرات نق ــعل يســتيز ن ه ي

در شـده اسـت. و مثبت مشخص يمنف گرم يها يباکتر

يکروبـ يت ضـد م يـ فعال واستاوا و همکارانيمطالعه شر

وابسته به غلظت بوده شد که نشان داده نقره نانوذرات

نسبت به يگرم منف يها يباکتر يبررو يثرترؤاثر مو

است که نانو ذرات ين در حاليا .(31)داشتندگرم مثبت

در مطالعـه حاضـر بـا يستيد شده به روش زينقره تول

.نمـود گـرم مثبـت را مهـار يهـا يبـاکتر يغلظت کمتر

وذراتن عملکـرد نـان يبهتـر در مطالعه حاضـر ن يچن هم

مربــوط بــه ايالتورياســعصــاره بــانقــره ســنتز شــده

گـرم يهـا يبـاکتر .لوکوک اورئوس بودياستاف يباکتر

تـر نسـبت بـه گـرم واره نـازک يـ ل داشتن ديبه دل يمنف

ن يـ ا يديسـاکار يپل ـو يه ليالبودن بار يمنفو ها، مثبت

بـار يدارا ن نـانوذرات يها، باعث بر همکـنش بـ يباکتر

ن در يـ شـوند و ا يمـ يگرم منف يکتر با بايمثبت ضع

بـه درون و ورود نـانوذرات منافـذ جـاد يباعـث ا تينها

ن اختالف بـار يبنابرا .(33)شود يمسلول و مرگ سلول

هـا در برابـر نـانوذرات نقـره بـه سـاختار ين بـاکتر يب

در مطالعه حاضر، نانوذرات گردد. يمبر يواره سلوليد

لوکوک اورئوس يفگرم مثبت استا ياکترنقره نسبت به ب

ن مطالعه يا يقبل يها هبا مطالع يخوان عدم هم. بودثر ؤم

اء کننـده يبار، اندازه، نوع عصاره احبتوان به را احتمااًل

داد. نسبتوسنتز شده يو شکل نانوذرات نقره ب

يريگ جهينت

تـوان گفـت کـه يمـ قيتحقن يا جينتابا توجه به

جهـت يثرؤمـ ييتوانـا ايالتوريانوباکتر اسيسعصاره

ــاح ــره ياي ــره .باشــد يمــرا دارا نمــک نق ــانوذرات نق ن

ــا ســنتز شــدهويب ــکب ــا ايالتورياســ انوباکتريســ کم ب

و ينانومتر و غالبا کـرو 30تا 5در محدوده يا اندازه

قابل ييايو ضدباکتر يضد سرطان يها تيفعال يداراو

توانـد در جهـت درمـان سـرطان يمـ و انـد بـوده يقبول

پاتوژن مورد يها ياز باکتر يناش يها نتپستان و عفو

رند.يقرار گ يشتريمطالعه ب

تشکر ر و يتقد

ان يـ پا يمقاله حاضر اسـتنتاج شـده از داده هـا

يممصـوب دانشـگاه آزاد اسـال ارشـد يکارشناسنامه

باشد. يمواحد رشت

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

آنسنتز زيستي نانوذرات نقره و ارزيابي فعاليت هاي ضد سرطاني

469 (123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره

REFERENCES 1.Ghanbar F, Mirzaie A, Ashrafi F, Noorbazargan H, Dalirsaber Jalali M, Salehi S, et al. Antioxidant, antibacterial and anti-cancer properties of phyto-synthesized Artemisia quttensis Podlech extract mediated silver nanoparticles. IET Nanobiotechnol 2017; 11: 485-92. 2.Saxena A, Tripathi RM, Zafar F, Singh P. Green synthesis of silver nanoparticles using aqueous solution of Ficus benghalensis leaf extract and characterization of their antibacterial activity. Mater Lett 2012; 67: 91–4. 3.Baharara J, Namvar F, Ramezani T, Mousavi M, Mohamad R. Silver nanoparticles biosynthesized using achillea biebersteinii flower extract: apoptosis induction in mcf-7 cells via caspase activation and regulation of bax and bcl-2 gene expression. Molecules 2015; 20: 2693-706. 4.Honary S, Barabadi H, Gharaei-Fathabad E, Naghibi F. Green synthesis of copper oxide nanoparticles using Penicillium aurantiogriseum, Penicillium citrinum and Penicillium waksmanii. Dig J Nanomater Bios 2012; 7: 999-1005. 5.Bollella P, Schulz C, Favero G, Mazzei F, Ludwig R, Gorton L, et al. Green synthesis and characterization of gold and silver nanoparticles and their application for development of a third generation lactose biosensor. Electroanalysis 2017; 29(1): 77-86. 6. Malhotra S P K, TK Mandal, Biomedical applications of Zinc Oxide nanomaterials in cancer treatment: a review, SCIREA J Chem 2016;1(2): 67-89. 7.Rai M, Yadav A, Gade A. Silver nanoparticles as a new generation of antimicrobials. Biotechnol Adv 2009; 27(1): 76-83. 8.Gurunathan S, Jegadeesh R, Sri NAM, Priscilla AJ, Sabaratnam V. Green synthesis of silver nanoparticles using Ganoderma neo-japonicum Imazeki: a potential cytotoxic agent against breast cancer cells. Int J Nanomed 2013; 8: 4399–413. 9.Netala VR, Satyanarayana M, Pushpalatha B, Baki VB, Aishwarya S, Rao JV, et al. Biogenesis of silver nanoparticles using endophytic fungus Pestalotiopsis microspore and evalution of their antioxidant and anticancer activities. Int J Nanomed 2016; 11: 5683-96. 10.Panyala NR, Pena-Mendez EM, Havel J. Silver or silver nanoparticles: a hazardous threat to the environment and human health. J Appl Biomed 2008; 6:117–29. 11.Verma DK, Hasan SH, Banik RM. Photo-catalyzed and phyto-mediated rapid green synthesis of silver nanoparticles using herbal extract of Salvinia molesta and its antimicrobial efficacy. J Photochem & Photobiol B Biol 2016; 155: 51–9. 12.Marambio-Jones C, Hoek EM. A review of the antibacterial effects of silver nanomaterials and potential implications for human health and the environment. J Nanopart Res 2010; 12(5): 1531-51. 13.Kundu JR, Bellare BA. Rapid efficient synthesis and characterization of silver, gold, and bimetallic nanoparticles from the medicinal plant Plumbago zeylanica and their application in biofilm control. Int J Nanomed 2014; 9: 2635–53. 14.Jha AK, Prasad K. Green synthesis of silver nanoparticles using Cycas leaf. Int J Green Nanotechnol: Physics and Chemistry 2010; 1(2): P110-P7. 15.Ahmad N, Sharma S, Alam MK, Singh V, Shamsi S, Mehta B, et al. Rapid synthesis of silver nanoparticles using dried medicinal plant of basil. Colloids Surf B 2010; 81(1): 81-6. 16.Saxena A, Tripathi RM, Zafar F, Singh P. Green synthesis of silver nanoparticles using aqueous solution of Ficus benghalensis leaf extract and characterization of their antibacterial activity. Mater Lett 2012; 67: 91–4. 17.Sulaiman GM, Mohammed WH, Marzoog TR, Al-Amiery AAA, Kadhum AAH, Mohamad AB. Green synthesis, antimicrobial and cytotoxic effects of silver nanoparticles using Eucalyptus chapmaniana leaves extract. Asian Pac J Trop Biomed 2013; 3(1): 58-63. 18.Krishnaraj C, Jagan E, Rajasekar S, Selvakumar P, Kalaichelvan P, Mohan N. Synthesis of silver nanoparticles using Acalypha indica leaf extracts and its antibacterial activity against water borne pathogens. Colloids Surf B 2010; 76(1): 50-6. 19.Dhayalan M, Denison MIJ, Krishnan K. In vitro antioxidant, antimicrobial, cytotoxic potential of gold and silver nanoparticles prepared using Embelia ribes. Nat Prod Res 2017; 31(4): 465-8. 20.Ghanbar F, Mirzaie A, Ashrafi F, Noorbazargan H, Dalirsaber Jalali M, Salehi S, et al. Antioxidant, antibacterial and anti-cancer properties of phyto-synthesized Artemisia quttensis Podlech extract mediated silver nanoparticles. IET. Nanobiotechnol 2017; 11(4): 485-92.

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

پور و همکاران ترانه قاسمي

(123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره 470

21.Rashidipour M, Heydari R. Biosynthesis of silver nanoparticles using extract of olive leaf: synthesis and in vitro cytotoxic effect on MCF-7 cells. J Nanostruct Chem 2014; 4(3): 1-6. 22.Begum NA, Mondal S, Basu S, Laskar RA, Mandal D. Biogenic synthesis of Au and Ag nanoparticles using aqueous solutions of Black Tea leaf extracts. Colloids Surf, B 2009; 71(1): 113-8. 23.Victory KJ. Isolation and characterization of antimicrobial compounds synthesized by Microcystis SP. Phd Thesis, School of Chemical Engineering, Faculty of Engineering. Computer and Mathematica Sciences 2008; 36: 3881-90. 24.Oftedal L, Skjærven KH, Coyne RT, Edvardsen B, Rohrlack T, Skulberg OM, et al. The apoptosis-inducing activity towards leukemia and lymphoma cells in a cyanobacterial culture collection is not associated with mouse bioassay toxicity. J Ind Microbiol Biotechnol 2011; 38: 489–501. 25.Nair S, Bhimba BV. Bioactive potency of cyanobacteria oscillatoria SPP. International J Pharm Pharma Sci 2013; 5(2): 611-2. 26.Li S, Shen Y, Xie A, Yu X, Qiu L, Zhang L, et al. Green synthesis of silver nanoparticles using Capsicum annuum L. extract. Green Chem 2007; 9(8): 852-8. 27.Shahnazi M, Azadmehr A, Hajiaghaee R, Mosalla S, Latifi R. Effects of artemisia absinthium L. Extract on the maturation and function of dendritic Cells. Jundishapur J Nat Pharm Prod 2015; 10(2): 10.17795/jjnpp-20163. 28.Mohasseli T. Green synthesis and characterization of silver nanoparticles using aqueous extract of Sesamum indicum seeds. Modares Semiannual Biol Sci 2015; 6(1): 10-20. 29.Saraniya Devi J, Valentin Bhimba B. Anticancer activity of silver nanoparticles synthesized by the seaweed ulva lactuca in vitro. Scintific Reports 2012; 1(4): http://dx.doi.org/10.4172/scientificreports.242 30.Barabadi H, Honary S. Biological synthesis of silver nanoparticles using standard fungus of Penicillium chrysogenum. Razi J Med Sci 2014; 21(122): 20-8. 31.Shrivastava S, Bera T, Roy A, Singh G, Ramachandrarao P, Dash D. Characterization of enhanced antibacterial effects of novel silver nanoparticles. Nanotechnol 2007; 18(22): 225103-9. 32.Mittal AK, Bhaumik J, Kumar S, Banerjee UC. Biosynthesis of silver nanoparticles: elucidation of prospective mechanism and therapeutic potential. J Colloid Interface Sci 2014; 415: 39-47. 33.Kim JS, Kuk E, Yu KN, Kim J-H, Park SJ, Lee HJ, et al. Antimicrobial effects of silver nanoparticles. Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 2007; 3(1): 95-101. 34.Vieira AP, Stein EM, Andreguetti DX, Colepicolo P, Ferreira AMC. Preparation of silver nanoparticles using aqueous extracts of the red algae Laurencia oldingensis and Laurenciella sp and their cytotoxic activities. J Appl Phycol 2016; 28(4): 2615-2622. 35.Vaidyanathan R, Kalishwaralal K, Gopalram S, Gurunathan S. Nanosilver-the burgeoning therapeutic molecule and its green synthesis. Biotechnol Adv 2009; 27(6): 924-37.

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0

آنسنتز زيستي نانوذرات نقره و ارزيابي فعاليت هاي ضد سرطاني

471 (123)شماره پي در پي1396ـ مهر و آبان4شماره ـ22مجله ارمغان دانش ـ دوره

Armaghane-danesh, Yasuj University of Original Article Medical Sciences Journal (YUMSJ)

Biosynthesis of Silver Nanoparticles Using

Oscillatoria Extract and Evaluation the

Anticancer and Antibacterial Activities

Ghasemipour T1, Salehzadeh A

1*, S adat Shandiz SA

2

1Department of Biology, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran,

2Department of Biology, Central

Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran.

Received: 27 Apr 2017 Accepted: 28 Sep 2017

Abstract

Background and aim: The emergence of nanotechnology is one of the most promising areas for medical

research. Today, biological methods of synthesizing nanoparticles have been considered in the fight against many diseases. The purpose of this study was to evaluate the anti-cancer and anti-bacterial activity of silver nanoparticles, biosynthesized with cyanobacteria acetate extract. Methods: In the present experimental study, the silver nanoparticles biosynthesis was performed using silver

ions regeneration with cyanobacteria acetate extracts. Techniques such as X-ray diffraction, scanning electron microscopy and transient evaluation of silver nanoparticles were evaluated. In order to investigate the antibacterial activity of synthesized nanosilver, serial dilution method was used for broth microdilution test to determine minimum inhibitory concentration (MIC). The effects of silver nanoparticle toxicity on T47D breast cancer cell line were evaluated using MTT colorimetric method. Also, the proximal anxine 0.5 propidoid yodide kit and flow cytometry system were evaluated to evaluate the percentage of apoptosis and necrosis in cancer cells treated with silver nanoparticles. Results: Characterization of biosynthetic silver nanoparticles indicated that these nanoparticles had a mean

size of 30 nm with dominant spherical morphology. The evaluation of the antibacterial properties of biosynthetic nanoparticles showed that the minimum inhibitory concentration for Escherichia coli, Acinetobacter Bumanni and Staphylococcus aureus was 25, 50 and 12.5 μg / ml, respectively. The results of cell proliferation of nanoparticles showed that its effect depends on the concentration and time of treatment of silver nanoparticles on cancerous cells. In addition, flow cytometric results showed an apoptotic cell death rate of 35% in the T47D cell line. Conclusion: Biosynthesis nanoparticles have anticancer and antibacterial activity and can be studied further

in the treatment of breast cancer and infections caused by pathogenic bacteria. Key words: Anticancer, Apoptosis, Osituria, Antibacterial *Corresponding author: Salehzadeh A, Department of Biology, Rasht Branch, Islamic Azad University,

Rasht, Iran Email: salehzadeh@iaurasht.ac.ir

Please cite this article as follows:

Ghasemipour T, Salehzadeh A, Sadat Shandiz SA. Biosynthesis of Silver Nanoparticles Using Oscillatoria

Extract and Evaluation the Anticancer and Antibacterial Activities. Armaghane-danesh 2017; 22 (4): 459-

471.

471

Dow

nloa

ded

from

arm

agha

nj.y

ums.

ac.ir

at 1

6:50

+03

30 o

n F

riday

Oct

ober

9th

202

0